LA MEDIC INA BIOLOGICA OTTOBRE - D ICEMBRE 2010

IL DNA TRA FISICA E BIOLOGIA– ONDE ELETTROMAGNETICHE DAL DNA E ACQUA

DNA BETWEEN PHYSICS AND BIOLOGY– DNA WAVES AND WATER

RIASSUNTO

L. Montagnier

LECTURE

ATTI DEL XXV CONGRESSO DI MEDICINA BIOLOGICA– NUOVI ORIZZONTI IN MEDICINA – Milano, 14 e 15 Maggio 2010- SESSIONE RICERCA - MESSAGES FROM WATER

Viene descritta una “nuova” proprietà delDNA: la capacità di alcune sequenze diDNA batterico in alte diluizioni acquose diprodurre onde elettromagnetiche. Sembra trattarsi di un fenomeno di riso-nanza stimolato dallo sfondo elettroma-gnetico ambientale di onde a frequenzamolto bassa. Il DNA genomico dei batteripiù patogeni contiene sequenze che sonoin grado di generare tali segnali. – Questo fenomeno apre la strada allo svi-luppo di detection system altamente sen-sibili di infezioni batteriche croniche uma-ne e animali.

DNA, SEGNALIELETTROMAGNETICI, BATTERI

SUMMARY: A novel property of DNA isdescribed: the capacity of some bacterial DNAsequences to produce electromagnetic wavesat high aqueous dilutions. It appears to be aresonance phenomenon triggered by theambient electromagnetic background of verylow frequency waves. The genomic DNA ofmost pathogenic bacteria contains sequenceswhich are able to generate such signals. – This phenomenon opens the way to thedevelopment of highly sensitive detectionsystem for chronic bacterial infections, inhuman and animal diseases.

KEY WORDS: DNA, ELECTROMAGNETICSIGNALS, BACTERIA

PAROLE CHIAVE

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Gli sviluppi delle conoscenze biolo-giche di base – così come di molte

applicazioni mediche degli ultimi 60 an-ni – devono molto alle scoperte sul DNA. Di seguito espongo l’elenco parziale deiprincipali progressi sull’argomento cheutilizzerò nella relazione. – Questo lavoro si compone di tre parti:i fatti nuovi, le teorie e le applicazionimediche.

ALCUNI FATTI IMPORTANTISULLA SCOPERTA DEL DNA

1944 Trasformazione dei batteriper mezzo del DNA (O. Avery,C. McLeod, M. McCarty)

1953 Descrizione della strutturaa doppia elica (J. Watson,F. Crick, M. Wilkins, R. Fran-klin)

1956 Scoperta della DNA poli-merasi (A. Kornberg)

1968 Enzimi di restrizione (W.Arber)

1969 Trascrizione inversa dei re-trovirus (H. Temin, D. Balti-more)

1976 Sequenza del DNA (A. Ma-xam, W. Gilbert, F. Sanger)

1986-1988 Reazione a catena dellapolimerasi (K. Mullis); Taqpolimerasi (R.K. Saiki)

2001 Sequenza del primo geno-ma umano

2004-2010 Sequenza high throughputdel DNA.

I. I FATTI NUOVI

Una nuova proprietà del DNA: produ-zione di onde elettromagnetiche in di-luizioni acquose

La storia ebbe inizio dieci anni fa men-tre stavo studiando lo strano comporta-mento di un piccolo batterio che fre-quentemente si accompagna all’HIV, ilMycoplasma pirum che, come l’HIV,ama i linfociti umani. Stavo cercando di separare il batterio– che ha dimensione di circa 300 nm –dalle particelle virali di circa 120 nm,con filtri di 100 nm e 20 nm. Partendo da colture pure del batterio sulinfociti, i filtrati erano sterili per il bat-

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terio quando coltivato su un mediumcellulare ricco, SP 4 PCR e nested PCR,o su primer derivati da un gene di M.pirum, da noi precedentemente clona-to e sequenziato, ed adesina. Quando il filtrato veniva incubato conlinfociti umani (precedentemente con-trollati perché non fossero infettati dalmicoplasma) si recuperava sempre il mi-coplasma con tutte le sue caratteristiche. Mi chiesi quali informazioni venisserotrasmesse nel filtrato acquoso (FIG. 1). – Fu l’inizio di una lunga ricerca sulleproprietà fisiche del DNA in acqua. Scoprimmo una nuova proprietà delDNA del M. pirum : l’emissione di on-de di bassa frequenza in alcune dilui-zioni acquose del filtrato, caratteristicaestesa ben presto ad altri DNA batteri-ci e virali. Forniamo una breve descrizione dellastrumentazione utilizzata per captare isegnali elettromagnetici. Essa compren-

de un solenoide che “cattura” la com-ponente magnetica delle onde prodot-te dalla soluzione di DNA posta in unaprovetta di plastica e che converte i se-gnali in corrente elettrica. Tale corrente viene poi amplificata edanalizzata con un software specifico diun PC portatile (FIG. 2).Ecco un breve cenno delle osservazio-ni, descritte più dettagliatamente nellanostra pubblicazione (1): 1) Registriamo onde elettromagnetiche

di frequenza ultra bassa (ULF 500-3000 Hz) in alcune diluizioni di fil-trati (100 nm, 20 nm) di colture dimicro-organismi (virus, batteri) o diplasma umano infettato dagli stessi. I medesimi risultati sono ottenuti dalDNA estratto da questi.

2) I segnali elettromagnetici (EMS) nonsono correlati linearmente con ilnumero iniziale di cellule batteri-che prima della loro filtrazione.

In un esperimento abbiamo dimo-strato che gli EMS erano simili inuna sospensione di cellule di E. co-li compresa tra 109 e 10. – Si tratta di un fenomeno assoluto.

3) Gli EMS sono stati rilevati solo in al-cune alte diluizioni acquose dei fil-trati. Per esempio, diluizioni com-prese tra 10-9 e 10-18 in alcune pre-parazioni di filtrati di E. coli (FIG. 3).

4) Nel caso del M. pirum, un gene iso-lato (adesina, precedentemente clo-nata e sequenziata) era in grado digenerare gli EMS. Man mano che il gene veniva clo-nato in due frammenti, ciascuno diquesti era in grado di generare EMS,portando – così – a pensare che unabreve sequenza di DNA fosse suffi-ciente a generare tali segnali. In modo del tutto analogo, più avan-ti si indicherà che una corta se-quenza di DNA virale HIV (104 paiadi basi) è sufficiente a produrre gliEMS.

5) Alcuni batteri non producono EMS:è il caso dei batteri probiotici comeil Lactobacillus e di alcune forme diE. coli utilizzate come vettore di clo-nazione.

6) Abbiamo esteso la nostra ricerca aivirus, sebbene non si sia procedutoall’esame di tutte le Famiglie virali.Siamo riusciti ad individuare EMS si-mili provenienti da alcuni Retrovi-rus esogeni (HIV, FeLV), virus dell’e-patite (HBV, HCV) e virus dell’in-fluenza A (colture in vitro). Generalmente, gli EMS sono pro-dotti da filtrati (20 nm) di sospen-sioni virali o provenienti da DNAestratto: la questione resta aperta peri virus RNA (HCV, influenza), ossiase l’RNA delle particelle virali ma-ture sia una fonte di EMS o meno. Nel caso dell’HIV, gli EMS non so-no prodotti dall’RNA o da particel-le virali, ma dal DNA provirale pre-sente nelle cellule infette.

Nel caso dei batteri, gli EMS sono pro-dotti da filtrati di 100 nm e non da quel-li di 20 nm, il che significa che la di-mensione delle strutture che generanoEMS è compresa tra 20 e 100 nm.

FIG. 1

FIG. 2

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Ciò giustifica la denominazione di “na-nostrutture”, qualsiasi sia la loro natura.

Gli studi fanno altamente supporre chele nanostrutture siano fatte d’acqua. Utilizziamo i campioni di acqua alta-mente purificata, sebbene non si possaescludere in essi la presenza di traccedi impurità. La produzione di EMS da parte delle na-nostrutture è resistente a: trattamentocon RNAasi, DNAasi (che distrugge ilDNA che genera gli EMS), proteasi (pro-teinasi K), detergente (SDS).

Inoltre, essi sono sensibili al calore(> 70°C) e al gelo (-80°C); tale sensi-bilità è ridotta quando si trattano cor-te sequenze di DNA purificato.

Un breve elenco delle condizioni tec-niche affinché si verifichi la produzio-ne degli EMS:– Filtrazione: 450/100 nm per il DNA

batterico; 450/20 nm per il DNA vi-rale

– Alta diluizione in acqua– Agitazione meccanica (Vortex) tra

ciascuna diluizione – Eccitazione per mezzo di un sotto-

fondo elettromagnetico ELF (N.d.R.:Extremely Low Frequency ), a partireda una frequenza molto bassa di 7Hz [bloccata (prevented) dall’assor-bimento del metallo mu, una lega ingrado di assorbire onde ultra basse].

• Possiamo pertanto affermare che sitratti di un fenomeno di risonanza.

La stimolazione da parte del sottofon-do elettromagnetico di frequenza mol-to bassa è essenziale. – Il sottofondo può essere prodotto sia dafonti naturali (la risonanza di Schumanninizia a 7.83 Hz) sia da attività umane [laprincipale delle quali è rappresentata dal-l’energia elettrica (50-60 Hz o 16 2/3)].

II. LE TEORIE

Per prima cosa l’organizzazione del-l’acqua può spiegare tutto. Da quando è stata scoperta la struttura

a doppia elica del DNA è risaputo chemoltissime molecole d’acqua sonostrettamente legate alla doppia elica eche contribuiscono alla sua stabilità.L’interazione delle molecole d’acqua at-traverso i legami idrogeno è diversa perciascuna base.

Secondariamente, numerosi studi di fi-sica indicano che le molecole d’acquapossono formare aggregati o polimeriattraverso legami idrogeno. Si tratta –tuttavia – di strutture piuttosto labili. Recentemente Emilio del Giudice e ilsuo Gruppo di lavoro hanno propostoche l’acqua possa essere organizzata inreti di Domini di Coerenza che coin-volgono milioni di molecole d’acquache hanno le dimensioni delle nostrenanostrutture (3).

Pertanto possiamo ipotizzare che que-ste nanostrutture possano auto-mante-nersi attraverso le onde elettromagneti-che che emettono, e che possano con-servare fedelmente l’informazione ge-netica del DNA. Ultimamente abbiamo avviato una se-rie di esperimenti per verificare questaipotesi. Abbiamo utilizzato, come fonte di DNA,un frammento di DNA di HIV seleziona-to dalla ripetizione terminale lunga (LTR).Questo frammento è stato amplificatodalla PCR (487 paia di basi) e dalla ne-sted PCR (104 paia di basi) che utiliz-zano primer specifici.Dapprima si preparano diluizioni diDNA in cui individuiamo la generazio-ne degli EMS in ambiente con sottofon-do elettromagnetico.

FIG. 3

FIG. 4

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Gli EMS provenienti da ciascuna delledue provette vengono quindi registrati: anche la provetta contenente acquaemette EMS, alle diluizioni che genera-no EMS nella provetta contenente DNA.

– Questo dimostra che, con un’eccita-zione di 7 Hz, abbiamo trasmesso al-l’acqua pura le nanostrutture inizial-mente originate dal DNA.

Le variabili seguenti sopprimono la tra-smissione degli EMS nella provetta d’ac-qua: • Tempo di esposizione delle due pro-

vette < 16-18 ore

Come mostrato in FIG. 4, si posizionauna delle diluizioni positive (ad esem-pio la 10-6) in un recipiente protetto dauno strato di metallo mu dello spessoredi 1 mm. In prossimità si colloca un’al-tra provetta contenente acqua pura. Intorno ad esse si posiziona un solenoi-de di rame, ricevente corrente di bassaintensità, oscillante intorno ai 7 Hz,prodotta da un generatore esterno. Il campo magnetico prodotto vienemantenuto per 18 ore a temperaturaambiente. Il contenuto di acqua di cia-scuna provetta viene filtrato con filtri di450 nm e di 20 nm e diluito da 10-2 a10-15.

III. Applicazioni mediche

Plasma di pazienti: su DNA (anche fluidi e tessuti) – Colibacillus – Mycoplasma (Ureaplasma) – Borrelia

Ma anche malattie note per non avere origine infettiva – Neurodegenerative: Alzheimer (18/18) – Parkinson – Sclerosi multipla – Malattia di Lyme cronica – Autismo (alcune forme) – Artrite reumatoide (50/50) – Tumori ?

L’obiettivo è chiaro: identificare il/i batterio/i coinvolto/i. Potrebbe/potrebbero avere origine intestinale.

FIG. 5

FIG. 6

– Legenda:

Elettroforesi su gel di agarosio del prodotto PCR amplificato del HIV

LTR DNA (104 paia di basi).

Alto – dalla provetta 1: diluizioni di DNA.

Basso – dalla provetta 2: diluizioni acquose.

DW (Damped Wave) = controlli negativi: acqua distillata non signalizzata.

• Assenza di bobina• Generatore di campo magnetico

spento • Frequenza di eccitazione < 7 Hz• Assenza di DNA nella provetta 1.

Abbiamo poi intrapreso la fase più cri-tica della sperimentazione: esaminarela specificità delle nanostrutture d’ac-qua prodotte ricreando, a partire da es-se, la sequenza di DNA.

A tal scopo abbiamo aggiunto alla pro-vetta contenente acqua segnalizzata tut-ti i componenti per sintetizzare il DNAattraverso la reazione a catena della po-limerasi (nucleotidi, primer, polimerasi).L’amplificazione è stata ottenuta in con-dizioni classiche (35 cicli) in un termo-ciclatore. Il DNA prodotto è stato poi sottopostoad elettroforesi su gel di agarosio.

– È stata individuata una banda di DNAdella grandezza che si riteneva avesseil frammento originario LTR (FIG. 5).

Abbiamo ulteriormente verificato chequesto DNA aveva una sequenza iden-tica o prossima alla sequenza del LTR. Tale sequenza era identica al 98% (so-lo 2 nucleotidi diversi su 104). Abbiamo verificato che questo esperi-mento è altamente riproducibile (12volte su 12); è stato anche ripetuto conun’altra sequenza di DNA provenientedal batterio Borrelia burgdorferi, agen-te eziologico della malattia di Lyme.

– Ciò mostra chiaramente che le na-nostrutture d’acqua e la loro risonan-za elettromagnetica possono ripeterefedelmente le informazioni del DNA.

� Questi elementi forniscono suppor-to ad una spiegazione provocatoria delnostro esperimento di filtrazione delMycoplasma pirum (FIG. 1): le nano-strutture prodotte dal DNA di M. pirumin acqua filtrata rappresentano differen-ti segmenti del suo DNA genomico.Ogni nanostruttura, quando entra incontatto con i linfociti umani, è retro-trascritta nel DNA corrispondente daalcune polimerasi del DNA cellulare.

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Pertanto vi è una certa probabilità (an-che molto bassa) che ciascun segmen-to di DNA si ricombini con altri all’in-terno della stessa cellula per ricostruirel’intero genoma. Dobbiamo supporreche, in presenza di cellule eucariote, lasintesi dei componenti il micoplasma(lipidi di membrana, ribosomi) possa es-sere istruita dal DNA del micoplasma. – Un’unica cellula di micoplasma è,quindi, sufficiente a scatenare l’infezio-ne totale dei linfociti. Tutte le fasi seguite nella rigenerazionedall’acqua possono essere analizzate everificate.

III. LE APPLICAZIONI MEDICHE

Siamo in grado di individuare gli stessisegnali provenienti dal plasma di pa-zienti affetti da varie infezioni e malat-tie croniche. Occorre conservare il pla-sma fresco e non congelato; quando ilplasma è congelato a -70°C, si estrae ilDNA per recuperare i segnali.È anche possibile estrarre il DNA dabiopsie tissutali.La FIG. 6 elenca le malattie in cui abbia-mo individuato gli EMS, ed indica chia-ramente che la loro presenza non è limi-tata alle malattie ad etiologia infettiva no-ta. Il fatto che alcune malattie che allo sta-to attuale delle conoscenze non si ritie-ne abbiano origine infettiva siano nell’e-lenco – come le malattie neurodegene-rative, l’autismo e l’artrite reumatoide –è piuttosto intrigante e ci spinge a ricer-care per queste fattori batterici o virali.

Il caso speciale dell’HIV

Un altro caso speciale è quello relativoall’HIV. Abbiamo sempre individuatoEMS provenienti da sequenze di DNAdell’HIV nel sangue di pazienti trattaticon terapia antiretrovirale e che rispon-dono positivamente alla terapia consparizione di copie di RNA virale nelsangue circolante. – Ciò indicherebbe che tale DNA pro-venga da un reservoir cui le cure clas-siche non accedono, e non da particel-le virali circolanti.

Riferimento bibliografico

MONTAGNIER L. – Il DNA tra fisicae biologia. Onde elettromagnetichedal DNA e acqua.La Med. Biol., 2010/4; 29-33.

L’autore

Prof. Luc Montagnier– Premio Nobel per la Medicina 2008;

World Foundation for AIDS Researchand Prevention (UNESCO)

Parigi - Francia

Il nostro obiettivo è l’eradicazione del-l’infezione da HIV: non sarà – quindi –più necessario sottoporre a vita i pa-zienti ad una combinazione di farmacitossici e costosi. Il nostro lavoro è interdisciplinare ecoinvolge biologi, fisici e medici.

Naturalmente le nostre scoperte hannosollevato molte questioni irrisolte chenecessitano di ulteriore lavoro e di in-terazioni.Il segnale del DNA è stimolato da on-de a partire da 7 Hz che esistono in na-tura, sulla Terra. – Anche le onde prodotte dal cervelloumano sono prossime ai 7 Hz.

Propongo alla vostra attenzione que-st’idea che potrebbe non essere una co-incidenza… �

Bibliografia

1. Montagnier L., Aïssa J., Ferris S., MontagnierJ.-L., Lavallee C. – Electromagnetic Signals AreProduced by Aqueous Nanostructures Derivedfrom Bacterial DNA Sequences. Interdiscip SciComput Life Sci, 2009; 1: 81-90.

2. Montagnier L., Aïssa J., Lavallee C., Mbamy M.,Varon J., Chenal H. – Electromagnetic detec-tion of HIV DNA in the blood of AIDS patientstreated by antiretroviral therapy. Interdiscip SciComput Life Sci, 2009; 1: 245-253.

3. Del Giudice E., Tedeschi A. –Water and the au-tocatalysis in living matter, 2009; Electroma-gnetic Biology and Medicine, 28, 46.

Titolo, testo, immagini (Figg. 1-6), testo del-le immagini e riassunto sono proprietà del-l’autore e coperti da copyright dell’autore.

– Testo ed immagini tratti dalla relazione “DNAbetween Physics and Biology” tenuta dall’auto-re al The 60th Meeting of Nobel Laureates (3rd In-terdisciplinary) - Lindau (D), 28 Giugno 2010.

Inoltre, non solo il plasma dei pazienti,ma anche le frazioni di globuli rossicontengono DNA emettente EMS. Ciò è di particolare interesse poiché glieritrociti non contengono DNA cellu-lare ed il virus non si lega alla mem-brana eritrocitaria. Stiamo svolgendo delle ricerche circa lapossibilità che sia coinvolto un terzoelemento. Abbiamo avanzato l’ipotesi (2) che la te-rapia antiretrovirale – che include gli ini-bitori della trascriptasi inversa – selezioniessa stessa una nuova modalità di repli-cazione del DNA virale che coinvolgeuna o più polimerasi del DNA cellulare.

� Per quanto riguarda il DNA di M. pi-rum, ipotizziamo che i frammenti diDNA di HIV e le loro nanostrutture pre-senti nel sangue non possano originareda lisi cellulare ma, piuttosto, rappre-sentino parti di dimensione definita, ca-paci di ricombinarsi con le opportunecellule riceventi (linfociti) affinché for-mino un genoma di DNA completo e– alla fine – un virus infettivo.

Qualsiasi sia l’origine di questo DNA,la sua facile individuazione come se-gnale elettromagnetico lo potrebberendere un marker biologico unicoper aggredire il reservoir virale.

Abbiamo anche confermato la sua esi-stenza nel sangue attraverso la tecnolo-gia PRC più classica (2).

Disponiamo – quindi – di un potentestrumento utile a testare nuovi tipi di cu-re per l’eradicazione dell’infezione HIV,che finora non è stato possibile ottene-re con quelle attualmente disponibili.

Questo è particolarmente importanteper i pazienti che abitano i Paesi in cuil’incidenza dell’HIV è molto alta (5-10 % in un’ampia parte dell’Africa sub-Sahariana).– Attualmente stiamo per avviare in Afri-ca occidentale e meridionale alcuni stu-di clinici per testare nuove terapie. La loro efficacia sarà monitorata da que-sto test, insieme ai parametri più clas-sici, valutando la piena ripresa del Si-stema immunitario.