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26/02/2012 1 Universidad de El Salvador • Géneros: Haemophilus: influenzae, ducreyi y Bordetella pertussis. Dr. Antonio Vásquez Hidalgo Dr. Antonio Vásquez Hidalgo Dr. Antonio Vásquez Hidalgo Dr. Antonio Vásquez Hidalgo Mèdico Microbiólogo /Salubrista Depto de Microbiología Facultad de Medicina http://www.investigacionvasquez.webs.com

Genero haemophilus

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Universidad de El Salvador

• Géneros: Haemophilus: influenzae, ducreyi

y Bordetella pertussis.

Dr. Antonio Vásquez HidalgoDr. Antonio Vásquez HidalgoDr. Antonio Vásquez HidalgoDr. Antonio Vásquez HidalgoMèdico Microbiólogo /Salubrista

Depto de Microbiología Facultad de Medicina

http://www.investigacionvasquez.webs.com

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Características entre Haemophilus y Bordetella

Especie Tipo Crecimiento Capsula Factores

de

adheren

cia

Toxinas Aspectos

epidemioló

gicos

enfermeda

d

Haemophilus

H. Influenzae A-f X V Polisacárid

o

Pili - Flora

normal

Meningitiis

artiritis

Sepsis

Otitis media

H. ducreyi - X V - pili Toxina Contacto

sexual

Chancroide

Otras especies - X V - - - Fllora

normal

Bronquitis

Bordetella

B. pertussis - Nicotinamida - Pertactin

a

Adenilciclasa Patogeno

estricto

Tosferina

B. parapertussis - Nicotinamida - - Semejante a

pertussis

Rinitis

B broquiseptica - Nicotinamida - - Perros

conejos

Rinitis,tos

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GENERALIDADES

• Pleomórficos

• Aislamiento medio enriquecido, sangre o derivados.

• 9 especies patógenas en humanos y 5 en animales

• H. influenzae – tipo b, patógeno más importante para el

ser humano

• H. ducreyi – vía sexual y causa chancroide

• Otros Haemophilus están en membranas mucosas, flora

normal

Familia Pasteurellaceae

3 Géneros mas importantes de la familia

Pasteurellaceae, son:

1.Haemophilus

2.Actinobacillus

3.Pasteurella

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1. Haemophilus influenzae

FAMILIA: PASTEURELLACEAE.

GENERO: HAEMOPHILUS

ESPECIES:

Haemophilus influenzae

Haemophilus parainfluenzae

Haemophilus haemoliticus

Haemophilus parahemoliticus

Haemophilus aphrophilus

Haemophilus paraphrophilus

Haemophilus segnis

Haemophilus ducreyi

Haemophilus aegyptus

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Morfología e identificación

� Cocobacilo corto de 0,2 a 0,3 x 1 a 2 µm. no esporulados inmóviles.

� Gramnegativo� Extremos incurvados

� Son las mas pequeñas.

� Tiene 6 serotipos. A hasta la f� Tiene 8 Biotipos de desde I

hasta VIII

� Tiene 1 Biogrupos : aegypticus� Cocobacilo en pares o cadenas

cortas

H. influenzae

Serotipos Biotipos

Serogrupos

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Fisiología

� Del griego HaemaHaema: sangre : sangre

y y philosphilos: amor o deseo: amor o deseo .Amante de la sangre

� H.aemophilusinfluenzae crece en:

� factores presentes en sangre � Factor X =hemina� Factor V=NAD

(nucleotico de nicotinamida y adenina)

� Crece en Agar chocolate• Oxidasa positiva

� Requiere 5-10% CO2

H. influenzae

Características y requerimientos para el desarrollo

de algunas especies de Haemophilus.

IDENTIFICACION DE ESPECIES

Especies Requerimientos Hemólisis

X V

H.Influenzae + + -

H. parainfluenzae - + -

H. ducreyi + - -

H. haemolyticus + + +

H. parahaemolyticus - + +

H. aphrophilus - - -

H. influenzae

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Patogénesis

1. Polisacárido capsular tipo bprincipal factor de virulencia

Contiene ribosa,ribitol y fosfato.

1. Cápsula:*Resistente a Fagocitosis

2. Cepas sin cápsula:1. Menos invasivas

2. Capaces de generar respuesta inflamatoria que causa enfermedad

H. influenzae

Sin capsulaCon capsula

Patogenia

• Hábitat: Tracto respiratorio

superior.

• Niños 85 por ciento.

• Invasión por inflamación y

edema.

• No produce exotoxina.

• Se difunde en tejidos

profundos. Ej Celulitis,

Meningitis y otras.

• No produce exotoxina pero

fabrica proteasa IgA que

favorece la colonización.

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Estructura antigénica.El Haemophilus influenzae posee en sus

envolturas 3 factores antigénicos

importantes ellos son:

El polisacárido capsular

El LPS (endotoxina)

La proteína de la membrana externa

(proteasas de Ig A humanas)

Los componentes más importantes son: el

polisacárido capsular y la endotoxina.

Estos seria responsables de la virulencia,

adherencia y resistencia a la fagocitosis.

se fija a las mucosas mediado por Ig A.

Factores antigénicos

H. influenzae

Inmunidad

• Se producen Acscontra los siguientes antigenos de la a a la f.

• La composición química

de la capsula de

Haemophilus influenzae .

Fosfato de polirribitol

(PRF) Ribosa, ribitol y

fosfato.

H. influenzae

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1. Meningitis Aguda.2.Epiglotitis

� Obstrucción de vías aéreas en niños de 2-4 años

3. Celulitis,

4. Osteomielitis, e infecciones articulares

5. Otitis media y sinusutis

6. Bronquitis, bacteremia, neumonía,

7. conjuntivitis.

Enfermedades clínicas

H. influenzae

H. influenzae

Epidemiología.

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Epidemiología

1. Flora nasofaringea normal 20 – 80 %.

Frecuente en niños menores de dos años.

1. MECANISMO DE TRANSMISIÓN: Es por vía inhalatoria .

2. penetran a los tejidos por vías respiratorias superiores.

3. Enfermedad invasora a otros tejidos.

H. influenzae

MECANISMO DE TRANSMISION

Epidemiología

• FUENTE DE INFECCIÓN: Es humano. La incidencia del estado de portador es del alrededor del 70% en niños pequeños y del 35% en adultos

• Epoca del año.

• DISTRIBUCIÓN GEOGRAFICA: Las infecciones por este microorganismo ocurren en todo el mundo sobre todo en zonas de bajos recursos económicos.

• Enfermedad sexual a nivel mundial.

• Coloniza principalmente mucosasdel tracto respiratorio.

• Frecuente mas en hombres. Pobres y mala higiene.

H. influenzae

70 %

35%

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Cultivo

• Agar chocolate es el más

utilizado.

• Se añade sangre y se

calienta. Calor libera

factores X y V.

• Colonias traslucidas,

mucoides luego rugosas.

H. influenzae

Satelitismo: crecimiento de Staphylococcus

aureus alrededor de las colonias en agar

sangre no calentado.

Exámenes de laboratorio clínico de

Indicación Médica. Análisis e

interpretación. 1. Gram: R/ se observan cocos

bacilos gramnegativos.

2. Cultivos.( Hemocultivo. 50

– 90 %) R/ se aisla Haemophilus influenzae .

(barrera hematoencefalica.)

3. Punción lumbar R/

análisis e interpretación del LCR

Parámetro Normal Meningitis

Presión 70-200 mmhg aumentada

Aspecto Agua de roca Turbio o

purulento

Células 0-10 mayor de 500

Tipo de células Mononucleares PMN

Proteínas 15-45 mg/100

ml

Aumentados

Glucosa 50-90 mg/100

ml

Muy baja o

ausente

Lactato 0,97 mg/100 ml aumentado

pH 7.34- 7.4 Bajo

Sensible Intermedio Resistent

e

Vancomicina +

Rifampicina +

Gentamicina +

Oxacilina +

Lincomicina +

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2. Haemophilus ducreyi

• Bacilos o cocobacilos pleomorficos

• Gram negativo, Inmovilespequeños.

• Anaerobios facultativos

• Catalasa positivos. Crece en Agar chocolate.

• Causante del chancroide o

Chancro blando ETS

H. ducreyi

Recolección y transporte de la muestra

Muestra de úlceras

• El raspado de la úlcera o pus.

• Se puede colocar directamente el portaobjetos en la ulcera.

1.- Limpie la úlcera con un hisopo o gasa estéril y humedecida con solución salina.

2.- Con un hisopo de algodón o Dacron estéril y seco, frote la úlcera.

3.- Introduzca el hisopo en el tubo con el medio de transporte.

4.- Enviar muestra a laboratorio .

H. ducreyi

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Exámen Médico a indicar para

laboratorio.

• Tinción de Gram: Hallazgo de pequeños grupos o cadenas de bacilos gram negativos.

• Cultivo: Requerimientos especiales de crecimiento, el aislamiento es difícil.

• El H.ducreyi se desarrolla en Agar chocolate con vancomicina, y

• Agar Sangre + inhibidores en un ambiente de 10% CO2.

• Un cultivo positivo confirma el diagnóstico clínico.

H. ducreyi

H. ducreyi en agar chocolate

con vancomicina.

Tincion Gram de H. ducreyi

H. ducreyi

Frotis teñidos con Gram.positivos

Son pleomorficos

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Enfermedad clínica: Chancroide

H. ducreyi

Papula dolorosa a la palpación ,eritematosa que se

transforma en una ulcera dolorosa con linfadenopatia

asociada.

Epidemiologia

• Se trasmite por contacto sexual

• No hay datos estadísticos en El

Salvador reportados por MISPAS.

H. ducreyi

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3. Bordetella pertussis

• Especies del genero Bordetella: pertussis,

parapertussis y bronchisepica.

B. pertussis

Morfología:

• Son pequeños

• Cocobacilos gramnegativos

• Aerobios estricto

• No móviles

• Miden de 0,2 a 0,3 micras x

0.5 a 1 micra.

• Se presentan solas, en

pares o racimos.

B. pertussis

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Fisiologìa

• Son muy contagiosos

• Se multiplica en los cilios de las

celulas epiteliales.

• Hombre es único hospedero de

pertussis y parapertussis, la

bronchiseptica es de animales.

• Son aerobios estrictos con

metabolismo respiratorio.

• .

B. pertussis

Adherencia mediada por

Fha,pili,pertactina y subunidades de

la toxina tosferina.

Exámenes de laboratorio por indicación Médica.

• Gram: bacilos o cocobacilos gramnegativos.

• Cultivo: zona de hemolisis

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Cultivo • Las colonias son en punta de

alfiler, lisas, convexas, brillantes,

casi transparentes de aspecto

perlado.

• Las tres especies presentan zona

de hemolisis.• Crecimiento lento

B. pertussis

Factores de patogenia

B. pertussis

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Epidemiología

• Enfermedad en el humano: Tosferina

• Se caracteriza por: catarral, paroxistica y

convalescencia.

• Se redujo por la vacunación.

• Es endemica

• Mundial

• Afecta 60 millones de personas/año

• Frecuente en niños menores de 1 año.

B. pertussis

Enfermedades clínicas

• Fase catarral: catarro común

• Fase paroxística: Tos

• Fase convalecencia. Tosferina.

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….. gracias

BIBLIOGRAFIA REFERENCIA:

Murray , Microbiología Médica. 6ª edición.2009

Sherris. Microbiología Médica. 4ª edic 2004

Basualdo, Microbiología Biomédica.1ª edic 2008

Brooks, Microbiología Médica de Jawetz.18

ed.2005

Zinsser . Microbiología. 2ª edic. 1997

Y otros de consulta…………………………….