ÍNDICE
FLUORESCENCIA: ¿qué es?
¿QUÉ SUSTANCIA FLUORESCENTE SE UTILIZA?
DIFERENTES APLICACIONES:
- Visualización de cromosomas
- En química y medicina
-Estudio y detección de cáncer
-Detección de bacterias
BIBLIOGRAFÍA
FLUORESCENCIA
Propiedad de algunas sustancias
absorber energía
(radiación
electromagnética)
onda corta (no visible)
emitir parte de esaenergía
radiación de onda más larga (visible)
SUSTANCIAS QUÍMICAS QUE FLUORECEN AL SER EXCITADAS CON UNA LUZ DE BAJA LONGITUD DE ONDA POR EJ. LUZ ULTRAVIOLETA
¿Qué son?
fluoresceína rodamina
EJEMPLOS
APLICACIONES
FLUOROCROMOS o FLUORÓFOROS
Visualización detección de de ciertos cromosomas y bacterias
biomoléculas
EN LA VISUALIZACIÓN DE CIERTOS CROMOSOMAS
Técnica citogenética de marcaje de cromosomas
(campo de la genética que comprende
el estudio los cromosomas)
El ADN es tintado o marcado con la sustancia
fluorescente(FLUORÓFOROS)
Éstos pueden unirse a un
cromosoma específico este segmento
(propio del paciente) se llama SONDA
• ¿CÓMO Y PARA QUÉ SE UTILIZAN?
1º La muestra (IN VITRO) se incuba hasta alcanzar la tª de fusión del ácido nucléico.
2º Gracias a la tª, la sonda de interes(marcada con el fluorocromo), se une a la secuencia escogida.
3º Pasado el tiempo de hibridación, las láminas son lavadas 2 veces con agua destilada y secadas al medio ambiente. Así se remueve la sonda que no se unió.
4º Para evitar la pérdidade fluorescencia, se añade unos compuestos «antifading», que evita que esto suceda.
5º Detección de la sonda marcada con un microscopio de epifluorescencia con diferentes filtros para los diversos espectros de color.
PROCESO
¿QUÉ ENFERMEDADES SE PUEDEN DIAGNOSTICAR CON ÉSTE MÉTODO?
13- Sindrome de Patau
Los que 18- Síndrome de Edwars
usualmente 21- Síndrome de Down
sufren X- Síndrome de Turner
anomalías Y- Síndrome de Superhombre
son
EN BIOQUÍMICA Y MEDICINA
MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA
Se marcan con sustancias fluorescentes (fluorocromos)
permitiendo que encuentren su antígeno correspondiente (presente
en la muestra), pudiendo detectar de forma precisa su situación y cantidad.
Por ejemplo…Si se maracan con
diferentes fluorocrómos
(Visualizar mediante un microscopio de fluorescencia)
DETECCIÓN DE BIOMOLÉCULAS(propias del indiv.,
in vitro)
Tejidos
Células
Estructurassubcelulares
FLUORESCENCIA INTRINSECAEN NUESTRO ORGANISMO
sin necesidad de FLUORÓFOROS CAMBIA CUANDO LA MOLÉCULA SE
ENCUENTRA EN UN AMBIENTE ESPECÍFICO
LA BILIRRUBINA
LA PROTOPORFIRINA ZINC
(en las células sanguíneas)
CUANDO LA PRODUCCIÓN DEL GRUPO HEMO ES INHIBIDO POR LA
EXISTENCIA DE PLOMO O LA
AUSENCIA DE HIERRO EN LA SANGRE tiene una fuerte
fluorescencia
PUDIÉNDOSE DECTECTAR LAHIPERBILIRRUBINEMIA o ictericia
altamente fluorescente cuando se une a la
ALBÚMINA SÉRICA (en un sitio específico)
Se observa mediante un microscopio de fluorescencia
ESTUDIO Y DETECCIÓN DE CÁNCER
Debido a un cambio del PH ácido
se convierten enfluorescentes
por medio de
SONDAS
CÉLULASTUMORALES
VIVAS
se asocian a un anticuerpo
anticancerígenodistinguiendo
después de entrar en
Propio de los lisosomas(orgánulo celular)
IMÁGENES
muy precisas
células cancerígenas vivas destacan sobre las
sanas
SU VISIÓN
• Se emplea un microscopio
• fluorescente, como el de
la imagen. El cirujano lo
emplea para diferenciar
el tumor de las demás
células y extirparlo de
manera precisa.
DETECCIÓN DE BACTERIASGracias a un sencillo test, gérmenes y bacterias se iluminan, y comienzan a
fluorescer en un tiempo muy corto.
ADNzimas
Moléculas artificiales que sólo reacciona aun tipo específico de bacterias (en este caso E.
coli)
segrega un gran número desustancias en su entorno
GERMEN PATÓGENO SE MULTIPLICA
(Experimentos realizados con la bacteria E. coli)
Se unen
colorante fluorescente
comienza a brillar.
COLORANTE
¿Cómo se pueden ver?
A través de luz
ultravioleta podremos
distinguir en la
muestra las bacterias,
ya que éstas se
iluminarán.
USOSCONTROLES DE SANIDAD EN EMPRESAS
ALIMENTARIA O DE LIMPIEZA
Gracias a este invento ya no son necesarios equipos sofisticados ni tiempos prolongados para detectar bacterias o microorganismos.
BIBLIOGRAFÍA
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