DIAGNÓSTICOS

«BRILLANTES»USO DE LA

PARA

EL DIAGNÓSTICO

CLÍNICO

Mª Antonia Rodríguez Ríos, 3ºA

ÍNDICE

FLUORESCENCIA: ¿qué es?

¿QUÉ SUSTANCIA FLUORESCENTE SE UTILIZA?

DIFERENTES APLICACIONES:

- Visualización de cromosomas

- En química y medicina

-Estudio y detección de cáncer

-Detección de bacterias

BIBLIOGRAFÍA

FLUORESCENCIA

Propiedad de algunas sustancias

absorber energía

(radiación

electromagnética)

onda corta (no visible)

emitir parte de esaenergía

radiación de onda más larga (visible)

SUSTANCIAS QUÍMICAS QUE FLUORECEN AL SER EXCITADAS CON UNA LUZ DE BAJA LONGITUD DE ONDA POR EJ. LUZ ULTRAVIOLETA

¿Qué son?

fluoresceína rodamina

EJEMPLOS

APLICACIONES

FLUOROCROMOS o FLUORÓFOROS

Visualización detección de de ciertos cromosomas y bacterias

biomoléculas

EN LA VISUALIZACIÓN DE CIERTOS CROMOSOMAS

Técnica citogenética de marcaje de cromosomas

(campo de la genética que comprende

el estudio los cromosomas)

El ADN es tintado o marcado con la sustancia

fluorescente(FLUORÓFOROS)

Éstos pueden unirse a un

cromosoma específico este segmento

(propio del paciente) se llama SONDA

• ¿CÓMO Y PARA QUÉ SE UTILIZAN?

1º La muestra (IN VITRO) se incuba hasta alcanzar la tª de fusión del ácido nucléico.

2º Gracias a la tª, la sonda de interes(marcada con el fluorocromo), se une a la secuencia escogida.

3º Pasado el tiempo de hibridación, las láminas son lavadas 2 veces con agua destilada y secadas al medio ambiente. Así se remueve la sonda que no se unió.

4º Para evitar la pérdidade fluorescencia, se añade unos compuestos «antifading», que evita que esto suceda.

5º Detección de la sonda marcada con un microscopio de epifluorescencia con diferentes filtros para los diversos espectros de color.

PROCESO

• FUNCIONAMIENTO

MICROSCÓPIO DE EPIFLUORESCENCIA

¿QUÉ ENFERMEDADES SE PUEDEN DIAGNOSTICAR CON ÉSTE MÉTODO?

13- Sindrome de Patau

Los que 18- Síndrome de Edwars

usualmente 21- Síndrome de Down

sufren X- Síndrome de Turner

anomalías Y- Síndrome de Superhombre

son

EN BIOQUÍMICA Y MEDICINA

MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA

Se marcan con sustancias fluorescentes (fluorocromos)

permitiendo que encuentren su antígeno correspondiente (presente

en la muestra), pudiendo detectar de forma precisa su situación y cantidad.

Por ejemplo…Si se maracan con

diferentes fluorocrómos

(Visualizar mediante un microscopio de fluorescencia)

DETECCIÓN DE BIOMOLÉCULAS(propias del indiv.,

in vitro)

Tejidos

Células

Estructurassubcelulares

FLUORESCENCIA INTRINSECAEN NUESTRO ORGANISMO

sin necesidad de FLUORÓFOROS CAMBIA CUANDO LA MOLÉCULA SE

ENCUENTRA EN UN AMBIENTE ESPECÍFICO

LA BILIRRUBINA

LA PROTOPORFIRINA ZINC

(en las células sanguíneas)

CUANDO LA PRODUCCIÓN DEL GRUPO HEMO ES INHIBIDO POR LA

EXISTENCIA DE PLOMO O LA

AUSENCIA DE HIERRO EN LA SANGRE tiene una fuerte

fluorescencia

PUDIÉNDOSE DECTECTAR LAHIPERBILIRRUBINEMIA o ictericia

altamente fluorescente cuando se une a la

ALBÚMINA SÉRICA (en un sitio específico)

Se observa mediante un microscopio de fluorescencia

ESTUDIO Y DETECCIÓN DE CÁNCER

Debido a un cambio del PH ácido

se convierten enfluorescentes

por medio de

SONDAS

CÉLULASTUMORALES

VIVAS

se asocian a un anticuerpo

anticancerígenodistinguiendo

después de entrar en

Propio de los lisosomas(orgánulo celular)

IMÁGENES

muy precisas

células cancerígenas vivas destacan sobre las

sanas

SU VISIÓN

• Se emplea un microscopio

• fluorescente, como el de

la imagen. El cirujano lo

emplea para diferenciar

el tumor de las demás

células y extirparlo de

manera precisa.

DETECCIÓN DE BACTERIASGracias a un sencillo test, gérmenes y bacterias se iluminan, y comienzan a

fluorescer en un tiempo muy corto.

ADNzimas

Moléculas artificiales que sólo reacciona aun tipo específico de bacterias (en este caso E.

coli)

segrega un gran número desustancias en su entorno

GERMEN PATÓGENO SE MULTIPLICA

(Experimentos realizados con la bacteria E. coli)

Se unen

colorante fluorescente

comienza a brillar.

COLORANTE

¿Cómo se pueden ver?

A través de luz

ultravioleta podremos

distinguir en la

muestra las bacterias,

ya que éstas se

iluminarán.

USOSCONTROLES DE SANIDAD EN EMPRESAS

ALIMENTARIA O DE LIMPIEZA

Gracias a este invento ya no son necesarios equipos sofisticados ni tiempos prolongados para detectar bacterias o microorganismos.

BIBLIOGRAFÍA

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