Valeur sémiologique des auto-anticorps · Cas clinique • 2011: F 28 ans, polyarthralgie d’horaire inflammatoire ... -Infection: VIH, VHC, Tuberculose, paludisme -Cancers solides,

Valeur sémiologique des auto-anticorps

H Rakotoharivelo, F Andrianjafison, T Raonivelo, S Ralandison

Soirée Rhumato, Session février 2013

Introduction

• Auto-anticorps

o Anticorps ciblant un constituant normal de l’organisme (ou auto-antigène) implication dans la

pathogenèse des maladies dites « auto-immunes »

• Processus auto-immun: rupture des mécanismes du maintien de la tolérance vis-à-vis des auto-antigènes

sélection et maintien des lymphocytes B et T auto-

réactifs

Introduction

Introduction

Objectifs

• Déterminer l’importance de la connaissance des techniques

de détection des auto-anticorps

• Savoir la spécificité et la sensibilité d’un « auto-anticorps »

Plan

• Introduction

• Cas clinique

• Techniques de détection des auto anticorps

• Exemples d’auto-anticorps et maladie correspondante

• Conclusion

Cas clinique

• 2011: F 28 ans, polyarthralgie d’horaire inflammatoire

• Pas de signes accompagnateurs

• FR (+), AAN positif avec aspect de la fluorescence homogène

et mouchetée

• Diagnostiqué comme PR traitement PR.

• Bonne amélioration clinique sur le plan articulaire

Cas clinique • Perdue de vue

• Janvier 2013: Lésions cutanées érythémato-squameuses au

niveau de la face palmaire des mains, du visage, rétro-

auriculaire avec alopécie.

• Anti DNA natif: positif à 754 UI/L au test de FARR

Diagnostic : Lupus érythémato-disséminé

Piège diagnostique !!!

Plan

• Introduction

• Cas clinique



• Conclusion

Immunofluorescence indirecte

Technique Immuno-enzymatique

Immunoprécipitation

Immunoprécipitation de l’ADN

radiomarqué (test de Farr)

Immunodiffusion Insolubilité des complexes

Ag-Ac dans un gel d’agarose

Plan

• Introduction

• Cas clinique



• Conclusion

Anticorps anti-nucléaire (AAN)

Méthode : IFI

Seuil de positivité:

dilution au 1/160


Limites et intérêts

- Recherche sur cellules Hep-2 plus sensible

- Importance connaissance du clinicien du substrat cellulaire utilisé en IFI

- AAN de spécificité Antigénique différente peuvent coexister au sein d’un même sérum visible sur l’aspect de la fluorescence (ex homogène et

mouchetée)

- Test ne pouvant pas déterminer Ag nucléaire reconnu par les auto-anticorps Connaissance de l’aspect de la fluorescence pourrait

orienter vers de très nombreux Ag nucléaire

- Opérateur dépendant +++ aspect fluorescence +++


Aspect de la Fluorescence

Anticorps supposés

Homogène Anti-DNA natif ou dénaturé Anti-histones Anti-nucléosome

Homogène à renforce ment périphérique

Anti-membrane nucléaire (lamine)

Moucheté Anti-antigènes nucléaires solubles (=anti-ENA*): anti-Sm, anti-RNP, anti SSA ou anti SSB, anti Scl70, anticentromère, anti-PCNA, anti-JO1

Nucléolaire

Anti- PmScl


Anticorps anti-DNA natifs - Cible Ac: nucléosome

Méthode: Test de Farr

(haute spécificité et faible sensibilité)


Anticorps anti-DNA natifs

Intérêt clinique

o Test de Farr: détection Anti-ADNn hautement spécifique du LED

o Corrélation entre élévation anti-ADN natif (par test de Farr) et

l’activité du lupus

o ELISA: détection de taux faible d’anti ADNn dans d’autres

maladies auto-immunes systémiques (PR, Sclérodermie)

Anticorps anti-phospholipides

Méthode de détection - ELISA

- TPHA négatif- VDRL positif

- Anticoagulant circulant lupique

Anticorps anti-cardiolipides - Sensibilité : 80-90% dans les

syndromes des anti-phospholipides - Isotype IgG : meilleure sensibilité et

spécificité que les isotypes A et M.

Anticorps anti-β2GPI (IgG et IgM) meilleure spécificité que

les Ac anti-cardiolipides

Anticorps anti-phospholipides

• Intérêt clinique

o Ac antiphospholipides: identification de certaines maladies

thrombophiliques: SAPL

o Non significatif si pas d’évènement clinique associé (thrombose+++)

o Détection très importante, urgence curable

- Famille patient ayant un SAPL - MAI: Lupus, Sclérodermie, Gougerot,

PR Horton, SPA, IRCT, Artériosclérose précoce

- Médicaments inducteurs: procainamidebétabloquants, ..

- Infection: VIH, VHC, Tuberculose, paludisme

- Cancers solides, hémopathies

ANCA (anti-neutrophile anti

cytoplasmique antibodies) Ag reconnu: Enzyme au niveau granule

azurophile des PNN: - Myéloperoxydase (MPO)

- PR3 (sérine Protéase) - Autres protéases antigénique: Elastase,

cathepsine G ou Lactoferrine


cytoplasmique antibodies) • Intérêt clinique

o Au cours Vascularite: seule la mise en évidence ANCA PR3 ou MPO est

utile à la prise en charge du patient

o Interprétation du biologiste doit trancher entre la présence ou l’absence

d’ANCA PR3 ou MPO

o Connaissance interférence +++


cytoplasmique antibodies)


cytoplasmique antibodies) • Intérêt clinique

o Corrélation avec l’évolution de la maladie?

Facteurs Rhumatoïdes

Méthode de détection

Test au Latex ou réaction de Waaler

Rose

Hémagglutination en présence de FR

Facteurs Rhumatoïdes

• Intérêt clinique

o Présence facteurs rhumatoides susceptibles de réagir avec

d’autres auto-Ag mais aussi avec des Ag microbiens.

o Non spécifiques de la PR , pouvant être rencontrées dans

d’autres pathologies

o FR précèdent souvent les signes cliniques de la PR

(présents dans 70% des PR évoluant depuis 1 an)

ACPA (anticorps anti-peptides citrullinés)

Méthode de détection: - Immuno-empreinte

avec filaggrine - Elisa avec la

filaggrine purifié de rat

- Elisa avec un mélange de peptides cycliques citrullinés ( CCP)

ACPA (anticorps anti-peptides citrullinés) • Intérêt clinique

o Très spécifique de la polyarthrite rhumatoïdes: 95 %

o Présents dans le rhumatisme psoriasique dans 1 à 5%

o Bon marqueur pronostique (lié à la destruction

articulaire)

o A un intérêt dans les polyarthrite rhumatoïdes sans FR

ACPA (anticorps anti-peptides citrullinés)

Plan

• Introduction

• Cas clinique



• Conclusion

Conclusion - La clinique est toujours reine

- Une bonne connaissance des techniques de détection des

auto anticorps permet de mieux interpréter les résultats

- Une collaboration entre clinicien et biologiste est nécessaire

(renseignements cliniques précis, résultat des examens précis..)

- La connaissance de la spécificité et de la sensibilité d’un auto anticorps donné est essentielle pour la prise en charge

Attention aux faux positifs, surtout si la clinique est peu

évocatrice

MERCI DE VOTRE AIMABLE ATTENTION

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