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 Revista Mexicana de  I ngeniería Química Vol. 13, No. 3 (2014) 823-839 CARACTER ´ ISTICAS DE LA HIDRODIN ´ AMICA DE UN BIORREACTOR INDUSTRIAL TIPO TANQUE AGITADO HYDRODYNAMIC CHARACTERISTICS OF THE INDUSTRIAL STIRRED TANK BIOREACTOR J. Raff o-Dur´ an 1,  A. Figueredo-Cardero 1 y J.C. Dustet-Mendoza 2 1 Centro de Inmunolog´ ıa Molecular . Calle 216 esq 15a, Reparto Atabey , Playa, CP 11600. La Habana, Cuba 2  Instituto Superior Polit´ ecnico “Jos´ e Ant onio Echeverr´ ıa”, CUJAE, Facultad d e In genier´ ıa Qımica. Calle 114  No. 11901 entre Ci clov´ ıa y Rotonda, Marianao, CP 19390. La Habana, Cuba. Recibido 12 de Diciembre de 2013; Aceptado 28 de Junio de 2014 Resumen Este trabajo se propone el uso de la Din´ amica de Fluidos por ıa Comput acional (DFC) y la experi mentaci´ on para sati sfa cer las nece sidades del cono cimiento sobre los patr ones de uj os y de otras mag nitu des rel acio nada s con los mismos en un biorreactor industrial tipo tanque agitado para el cultivo de c ´ elulas animales, obteni´ endose informaci ´ on sobre la hidrodin´ amica mediante la manipulaci´ on de los par ´ ametros de operaci ´ on ujo de aire y velocidad de agitaci ´ on. Se propone un modelo matem´ atico, usando la herramienta de DFC, obteni ´ endose con el mismo los campos de velocidades comparables con los informados en la literatura para un biorreactor con la misma geometr´ ıa que el estudiado. Por la v´ ıa experimental fueron determinados el tiempo de mezclado y la distribuci´ on de tiempos de residencia (DTR) en la condici´ on de operaci ´ on del biorreactor (sin usar aireaci´ on), obteni ´ endose un patr ´ on de ujo de mezcla perfecta para la fase l ´ ıquida. Adem´ as se determin ´ o el tiempo de mezclado mediante la DFC alcanz´ andose una buena aproximaci´ on con el obtenido experimentalmente. Se caracteriz´ o la operaci´ on del biorreac tor usando aire mediante un dise˜ no experimental factorial 3 2 y se obtuvo que el coecie nte volum´ etrico de transferencia de ox´ ıgeno (k  La ) depende de las variab les velocidad de agitaci´ on (N) y ujo de aire (Qa). Haciend o uso de correlaciones publ icadas en la literatura se concluy´ o que en la condici´ on de operaci ´ on ocurre el fen´ omeno de inundaci ´ on del impelente. Palabras clave: biorreactor, tanque agitado, DFC, transferenci a de masa gas-l´ ıquido, inundaci ´ on del impelen te, dispersi´ on gas-liquido. Abstract This paper proposes the use of Computational Fluid Dynamics (CFD) to gain insight into the on ow patterns and other variab les related to them in the industrial bioreact or for animal cell culture, and experimentat ion and to obtain information on the hydrod ynamic s by handlin g of the air ow and agitation operating parameter s. We propose a mathematical model using the CFD tool, with which velocity elds comparabl e to those reported in the literatu re for a bioreactor with the same geometr y as the one studied were obtained. By experime ntation the time of mixing and the residen ce time distribut ion (RTD) were determined in the operating condition of the bioreactor (without aeration), and a ow pattern of perfect mix for the liquid phase was obtained. Also the mixing time was determin ed by CFD reaching a good approxi mation to that obtained experi mentall y. The operation of the bioreac tor with air was characterized using a factori al experimenta l design 3 2 and the results obtained showed that the coecient of volumetric oxygen transfer (k  La ) depends on the variables stirring speed (N) and air ow rate ( Qa).Using published correlations in the literature it was concluded that the phenomenon of ooding of the impelle r occurs in the operating condition . Keywords : bioreactor, stirred tank, CFD, gas-liquid mass transfer, ooding of the impeller, gas-liquid dispersing.  Autor para la correspondencia. E-mail :  [email protected] Tel.  +53-53-83-56-36, Fax 00-00-00-00 Publicado por la Academia Mexicana de Investigaci´ on y Doc enc ia en Ing eni er ´ ıa Qu´ ımi ca A.C. 823

RMIQ Bioreactor Industrial Tipo Tanque Agitado

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Este trabajo se propone el uso de la Dinamica de Fluidos por v ´ ´ıa Computacional (DFC) y la experimentacion para ´satisfacer las necesidades del conocimiento sobre los patrones de flujos y de otras magnitudes relacionadas con losmismos en un biorreactor industrial tipo tanque agitado para el cultivo de celulas animales, obteni ´ endose informaci ´ on´sobre la hidrodinamica mediante la manipulaci ´ on de los par ´ ametros de operaci ´ on flujo de aire y velocidad de agitaci ´ on

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  • Revista Mexicana de Ingeniera Qumica

    CONTENIDO

    Volumen 8, nmero 3, 2009 / Volume 8, number 3, 2009

    213 Derivation and application of the Stefan-Maxwell equations

    (Desarrollo y aplicacin de las ecuaciones de Stefan-Maxwell)

    Stephen Whitaker

    Biotecnologa / Biotechnology

    245 Modelado de la biodegradacin en biorreactores de lodos de hidrocarburos totales del petrleo

    intemperizados en suelos y sedimentos

    (Biodegradation modeling of sludge bioreactors of total petroleum hydrocarbons weathering in soil

    and sediments)

    S.A. Medina-Moreno, S. Huerta-Ochoa, C.A. Lucho-Constantino, L. Aguilera-Vzquez, A. Jimnez-

    Gonzlez y M. Gutirrez-Rojas

    259 Crecimiento, sobrevivencia y adaptacin de Bifidobacterium infantis a condiciones cidas

    (Growth, survival and adaptation of Bifidobacterium infantis to acidic conditions)

    L. Mayorga-Reyes, P. Bustamante-Camilo, A. Gutirrez-Nava, E. Barranco-Florido y A. Azaola-

    Espinosa

    265 Statistical approach to optimization of ethanol fermentation by Saccharomyces cerevisiae in the

    presence of Valfor zeolite NaA

    (Optimizacin estadstica de la fermentacin etanlica de Saccharomyces cerevisiae en presencia de

    zeolita Valfor zeolite NaA)

    G. Inei-Shizukawa, H. A. Velasco-Bedrn, G. F. Gutirrez-Lpez and H. Hernndez-Snchez

    Ingeniera de procesos / Process engineering

    271 Localizacin de una planta industrial: Revisin crtica y adecuacin de los criterios empleados en

    esta decisin

    (Plant site selection: Critical review and adequation criteria used in this decision)

    J.R. Medina, R.L. Romero y G.A. Prez

    Vol. 13, No. 3 (2014) 823-839

    CARACTERISTICAS DE LA HIDRODINAMICA DE UN BIORREACTORINDUSTRIAL TIPO TANQUE AGITADO

    HYDRODYNAMIC CHARACTERISTICS OF THE INDUSTRIAL STIRRED TANKBIOREACTOR

    J. Raffo-Duran1, A. Figueredo-Cardero1 y J.C. Dustet-Mendoza2

    1Centro de Inmunologa Molecular. Calle 216 esq 15a, Reparto Atabey, Playa, CP 11600. La Habana, Cuba2Instituto Superior Politecnico Jose Antonio Echeverra, CUJAE, Facultad de Ingeniera Qumica. Calle 114

    No. 11901 entre Ciclova y Rotonda, Marianao, CP 19390. La Habana, Cuba.

    Recibido 12 de Diciembre de 2013; Aceptado 28 de Junio de 2014

    ResumenEste trabajo se propone el uso de la Dinamica de Fluidos por va Computacional (DFC) y la experimentacion parasatisfacer las necesidades del conocimiento sobre los patrones de flujos y de otras magnitudes relacionadas con losmismos en un biorreactor industrial tipo tanque agitado para el cultivo de celulas animales, obteniendose informacionsobre la hidrodinamica mediante la manipulacion de los parametros de operacion flujo de aire y velocidad de agitacion.Se propone un modelo matematico, usando la herramienta de DFC, obteniendose con el mismo los campos de velocidadescomparables con los informados en la literatura para un biorreactor con la misma geometra que el estudiado. Por la vaexperimental fueron determinados el tiempo de mezclado y la distribucion de tiempos de residencia (DTR) en la condicionde operacion del biorreactor (sin usar aireacion), obteniendose un patron de flujo de mezcla perfecta para la fase lquida.Ademas se determino el tiempo de mezclado mediante la DFC alcanzandose una buena aproximacion con el obtenidoexperimentalmente. Se caracterizo la operacion del biorreactor usando aire mediante un diseno experimental factorial 32 yse obtuvo que el coeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno (kLa) depende de las variables velocidad de agitacion(N) y flujo de aire (Qa). Haciendo uso de correlaciones publicadas en la literatura se concluyo que en la condicion deoperacion ocurre el fenomeno de inundacion del impelente.

    Palabras clave: biorreactor, tanque agitado, DFC, transferencia de masa gas-lquido, inundacion del impelente, dispersiongas-liquido.

    AbstractThis paper proposes the use of Computational Fluid Dynamics (CFD) to gain insight into the on flow patterns and othervariables related to them in the industrial bioreactor for animal cell culture, and experimentation and to obtain informationon the hydrodynamics by handling of the air flow and agitation operating parameters. We propose a mathematical modelusing the CFD tool, with which velocity fields comparable to those reported in the literature for a bioreactor with the samegeometry as the one studied were obtained. By experimentation the time of mixing and the residence time distribution(RTD) were determined in the operating condition of the bioreactor (without aeration), and a flow pattern of perfect mixfor the liquid phase was obtained. Also the mixing time was determined by CFD reaching a good approximation to thatobtained experimentally. The operation of the bioreactor with air was characterized using a factorial experimental design32 and the results obtained showed that the coefficient of volumetric oxygen transfer (kLa) depends on the variables stirringspeed (N) and air flow rate (Qa).Using published correlations in the literature it was concluded that the phenomenon offlooding of the impeller occurs in the operating condition.

    Keywords: bioreactor, stirred tank, CFD, gas-liquid mass transfer, flooding of the impeller, gas-liquid dispersing.

    Autor para la correspondencia. E-mail: [email protected]. +53-53-83-56-36, Fax 00-00-00-00

    Publicado por la Academia Mexicana de Investigacion y Docencia en Ingeniera Qumica A.C. 823

  • Raffo-Duran y col./ Revista Mexicana de Ingeniera Qumica Vol. 13, No. 3 (2014) 823-839

    1 Introduccion

    En la biotecnologa de celulas animales losbiorreactores tipo tanque agitado (BTA) son los masempleados y se operan a escala industrial en modocontinuo, por lote alimentado o cultivo en perfusion.En este ultimo modo de operacion se alcanzanlas mas altas concentraciones celulares comparadascon los demas y generalmente se logra una mayorproductividad. En la produccion de biofarmacosse utilizan biorreactores tipo tanque agitado conuna capacidad de produccion de varios kilogramosal ano de protenas recombinantes. Los BTA sonfundamentales para los procesos biotecnologicos ypor tanto es necesario conocer su funcionamientointerno para mejorar su eficiencia y obtener una mayorproductividad. El incremento de la productividad, quees un indicador directo de la economa del proceso,en dichos equipos, depende mucho de las condicionesde operacion y del uso de criterios de escalamientoapropiados.

    La dinamica de fluidos en los reactores detanques con agitacion es compleja y provoco queen el pasado; el establecimiento de variables deoperacion, de escalamiento y los criterios de diseno seapoyasen casi totalmente en correlaciones empricas.Para obtener las correlaciones deban ser realizadosun gran numero de experimentos y ademas elintervalo de validez de las mismas era solo aquelcubierto por los experimentos. Desafortunadamentelas ecuaciones disponibles en la literatura han sidoobtenidas para condiciones de agitacion mas rigurosasque las usadas en biorreactores para cultivar celulasanimales (Calderbank 1958; vant Riet and Smith1973; Middleton 1992; Doran 1995; Nienow 1998;Garcia Ochoa and Gomez 2004).

    La dinamica de fluidos computacional (DFC) esuna herramienta que permite la solucion numerica delas ecuaciones de transporte por va computacional.Con ella se resuelven las ecuaciones de transporte decantidad de movimiento, masa, calor y determinanotras magnitudes fsicas relacionadas. UsandoDFC puede generarse una enorme cantidad deinformacion que en la practica no podra ser obtenidaexperimentalmente (Versteeg and Malalasekera 2007).Para muchos tipos de flujo, la DFC ha demostradoofrecer resultados confiables lo cual permite que decierta forma complemente los experimentos reales. Alos resultados obtenidos por simulacion se les llamaexperimentos in silico.

    Combinando metodos experimentales avanzadoscomo la Velocimetra por efecto Doppler Laser

    (VDL), la Anemometra Termica y la Velocimetrapor Seguimiento de Partculas (VSP) con la DFC sepueden obtener un gran numero de datos suficientespara conseguir ajustar determinados modelos ocorrelaciones adimensionales. Incluso la DFC permiteresolver estructuras que seran muy difciles dedemostrar experimentalmente o peor aun, resultantotalmente inaccesibles por la va experimental.

    Las celulas de mamferos son muy sensibles alestres mecanico que existe en un biorreactor comoconsecuencia de la agitacion y la aireacion. Portal motivo en los biorreactores para el cultivo decelulas de mamferos se acostumbra a trabajar conbajas velocidades de agitacion y relativamente altosvalores de flujo de aire. Para estas condicionesoperacionales es comun encontrarse la inundacion delimpelente, fenomeno no deseado asociado tambiencon un patron de flujo no ideal. El fenomeno deinundacion del impelente ocurre cuando el flujo de airees demasiado alto y a velocidades de agitacion bajas,la corriente de aire domina el flujo del sistema y elaire es dispersado debilmente (Nienow 1990; Doran1995). Este fenomeno hace ineficiente la dispersiondel gas disminuyendo bruscamente la velocidad detransferencia de masa gas-lquido y la retencion delgas en el volumen del lquido, lo cual es una condicionindeseable y debe ser evitada en operaciones demezclado gas-lquido (Hsuan 1986; Doran 1995).

    En los biorreactores industriales no se conocen losvalores del coeficiente volumetrico de transferencia deoxgeno y el tiempo de mezclado en las condicionesde operacion. Tampoco se conoce si ocurre o noel fenomeno de inundacion del impelente. Todo loanterior esta relacionado con la hidrodinamica y a suvez con el patron de flujo en el biorreactor.

    Debido a la necesidad de aumentar elconocimiento sobre los patrones de flujo y de otrasmagnitudes en los biorreactores usados en el cultivo decelulas animales, este trabajo se propone el uso de laDFC para la prediccion de los campos de velocidad delquido y gases en un biorreactor industrial. Por otraparte la DFC como herramienta no ha sido aplicadaen su totalidad para caracterizar la operacion de losbiorreactores industriales.

    2 Materiales y metodos

    2.1 Equipamiento y condiciones experimentales

    El biorreactor estudiado, cuyo volumen de trabajoes 1100 L (Bioengineering AG; Suiza) cuenta

    824 www.rmiq.org

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    Figura 1. Vista lateral del biorreactor industrial de volumen total 1500L.

    Tabla 1. Matriz del diseo factorial empleado en las determinaciones del kLa.

    Velocidad de Agitacin (N) Flujo de Aire (Qa) Valor

    Absoluto (min-1)

    Valor Normalizado

    Valor Absoluto (Lmin-1)

    Valor Normalizado

    50 1 30 0 30 -1 30 0 30 -1 40 1 40 0 30 0 40 0 20 -1 40 0 40 1 50 1 40 1 30 -1 20 -1 50 1 20 -1

    Sensor de DO

    Fig. 1. Vista lateral del biorreactor industrial devolumen total 1500L.

    con dos impelentes acoplados al mismo eje.Una representacion esquematica del mismo puedeapreciarse en la Figura 1. El impelente inferiores una turbina Rushton de 6 paletas para impulsarel fluido radialmente. Mientras que el impelentesuperior presenta una propela marina con 3 aspasorientadas para impulsar el fluido axialmente haciaabajo. Ambos impelentes presentan un diametro de0.3 m y estan separados entre s a 0.512 m, la distanciadel impelente inferior con respecto al fondo es de 0.23m. El diametro del tanque es de 0.98 m y presenta4 deflectores, la altura del lquido es de 1.54 m. Laaireacion se realiza mediante un burbujeador tipo tuboperforado.

    2.2 Determinacion experimental del tiempode mezclado y la distribucion detiempos de residencia

    El tiempo de mezclado esta definido como el tiemporequerido para alcanzar el 95 % de la homogeneidaden un tanque agitado una vez anadido un trazador(Xing, Kenty et al. 2009). Para los biorreactores queson usados en la produccion comercial no es posibleintroducir compuestos extranos como trazadores(material radioactivo o colorantes fluorescentes)

    debido a las regulaciones GMP (Good ManufacturingPractice por sus siglas en ingles). Por esta razon esventajoso emplear un material como trazador que esnormalmente utilizado en el proceso de produccion,como por ejemplo el hidroxido de sodio (NaOH). Eneste estudio fue empleado un pulso de NaOH (ac)a la concentracion de 1 mol/L como trazador. Eltrazador fue adicionado en la superficie del lquido.La conductividad fue medida con un electrodo (InPro7200 METTLER TOLEDO; Suiza) y monitoreadacon una interfaz computarizada. El electrodo deconductividad fue calibrado empleando una solucionpatron de KCl (ac) 0.1 mol/L. La temperatura delvaso fue mantenida constante en 35C, manteniendouna agitacion de 30 min1. El volumen de trazadoranadido fue menor que el 0.5 % del volumen dellquido (agua) en el biorreactor, de este modo el efectodel volumen del trazador adicionado sobre el tiempode mezclado es despreciable (Xing, Kenty et al. 2009).La adicion del trazador fue subita, monitoreandose laconductividad hasta alcanzar el estado estacionario.

    Los datos de conductividad obtenidos fueronnormalizados de acuerdo a la siguiente ecuacion:

    H(t) =

    (t)i f i (1)

    Donde: H(t): es el ndice de homogeneidad en eltiempo t, (t) es la conductividad en el tiempo t,i es la conductividad inicial (t = 0 s) y f es laconductividad final (t =).

    En el estudio de la distribucion de tiempos deresidencia (DTR) se empleo la condicion de agitacionde 30 min1 sin aireacion a 35C y se mantuvo unflujo volumetrico de agua de 20 Lh1. Para graficarla curva de DTR se emplearon mediciones de laconductividad en el tiempo a la salida del reactor, paraello fue usada la siguiente expresion (Levenspiel andBarreiro 2002):

    C =(t)0(t)dt

    t (2)

    Donde: C es el parametro para graficar la curva C, tes el tiempo medio de residencia.

    Para determinar el tiempo adimensional se utilizola ecuacion:

    =tt

    (3)

    Donde: t es el tiempo de experimental.

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    Tabla 1. Matriz del diseno factorial empleado en las determinaciones del kLa.

    Velocidad de Agitacion (N) Flujo de Aire (Qa)

    Valor Absoluto(min1)

    ValorNormalizado

    Valor Absoluto(Lmin1)

    ValorNormalizado

    50 1 30 030 -1 30 030 -1 40 140 0 30 040 0 20 -140 0 40 150 1 40 130 -1 20 -150 1 20 -1

    Para un recipiente cerrado y de densidad constante,entendiendo como recipiente cerrado aquel en que elfluido entra y sale solamente por flujo piston, es decir,que tiene perfil plano de velocidad, se tiene que:

    t = =VLv0

    (4)

    Donde: es el tiempo espacial, VL es el volumen deagua en el vaso del reactor y 0 es el flujo volumetricode agua a la entrada del vaso.

    2.3 Determinacion experimental delcoeficiente volumetrico de transferenciade oxgeno (kLa)

    La evaluacion de la transferencia de oxgeno se realizobajo condiciones de agitacion y aireacion controladasa temperatura constante de 35C a un volumen de1100 L con medio de cultivo. Fue aplicado un disenofactorial completo 32 sin replicas y aleatorio, parainvestigar el efecto de las variables independientesvelocidad de agitacion y aireacion sobre el kLa. Lamatriz de planeamiento puede ser observada en laTabla 1. Los valores empleados en la simulacionpara las variables independientes se muestran en formacodificada (normalizada).

    Se determino como variable respuesta elcoeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno.Ademas se evaluo la trasferencia de oxgeno enagua pura con el objetivo de validar el modelo DFCgenerado. Para lograr esto se utilizaron las siguientescondiciones: agitacion 30 min1 y flujo de aire 1, 10 y20 L/min a la temperatura constante de 35C.

    La ecuacion de trabajo parte del balance de

    oxgeno en fase lquida.

    dCdt

    = OTR = kLa (C CL) (5)

    Donde: OTR representa la velocidad de transferenciade oxgeno, dC/dt es el termino acumulativo de laecuacion de balance de oxgeno (mmolh1L1), CLes la concentracion de oxgeno en la fase lquida(mmolL1), C* es la concentracion de oxgeno enla fase lquida en el equilibrio (mmolL1) y kLa esel coeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno(h1).

    El porcentaje de saturacion del oxgeno empleandoaire se representa por la siguiente formula (Doran1995):

    DO =(CLC

    ) 100 (6)

    Para determinar experimentalmente el coeficientevolumetrico de transferencia de oxgeno (kLa) seempleo el metodo estatico de barrido con nitrogenoy reoxigenacion. De la ecuacion (5) tras integrar yreagrupar se obtiene que:

    ln(

    C(C CL)

    )= kLa t (7)

    Como el sensor de oxgeno lo que mide es % DO,esta ecuacion se puede poner en funcion de dichoparametro teniendo en cuenta la ecuacion (6) y quedade la siguiente manera:

    ln

    1(1 DO100 )

    y

    = kLam

    tx

    (8)

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    Tabla 2. Condiciones geometricas empleadas en las correlaciones publicadaspara la deteccion de la inundacion.

    Autor Correlacion Regimende flujo

    T (m) D/T c/T Tipo deburbujeador

    (Zlokarnik 1973) FlF = 0.19Fr075F 0.01 Fr 2 0.2-0.45 0.2 -0.45 1/3 Tubo perforado(Henzler 1982) FlF =

    0.21Fr2.1(D/T )F(T/D2.04)1.3 + Re > 110

    4, Esc. Ind. 0.3 -0.4 - Anillo perforado0.14Fr7.54(D/T )F(T/D2.25)1.5 Fr 5 Tubo perforado

    (Nienow 1990) FlF = 30(D/T )3.5FrF FrF 0.85 0.29-1.2 0.33 -0.5 0.25 -0.4 Anillo perforado

    Luego, se puede obtener el kLa a partir dela pendiente ajustando una recta a los datos de

    ln(1 DO100

    )1vs t. Las mediciones fueron realizadas

    hasta alcanzar un 80% de la concentracion deequilibrio en la fase lquida.

    2.4 Determinacion de las condiciones deinundacion del impelente

    Para determinar las condiciones operacionales queprovocan el fenomeno de inundacion del impelente, secalcularon los numeros de Froude (Fr) y de aireacion(FlG) correspondientes a la condicion de inundacionsegun la bibliografa consultada (Zlokarnik 1973;Henzler 1982; Nienow 1990). En la Tabla 2 se muestraun resumen de las correlaciones empleadas (Zlokarnik1973; Henzler 1982; Nienow 1990) para el calculode la transicion a la inundacion del impelente que seaproximan a la geometra en estudio.

    Las condiciones operacionales a evaluar estandeterminadas partiendo de experiencias previas detrabajo y considerando los criterios informados en laliteratura (Varley and Birch 1999; Nienow 2006) paracultivos de celulas de animales tales como la velocidaden la punta del impelente (Utip = piND 1.5 ms1)y el flujo de aire de (Qa/VL 0.01 vvm). Lascondiciones de operacion a evaluar se muestran en laTabla 3.

    En la Tabla 3 se muestran ademas las condicioneshipoteticas de operacion del biorreactor con elobjetivo de obtener diferentes regmenes de flujos.Empleando las correlaciones mostradas en la Tabla2, se determinaron las condiciones de agitacion yaireacion segun el criterio de inundacion del impelentey se compararon con las condiciones operacionales dela Tabla 3.

    Tabla 3. Condiciones de operacion a evaluar.

    Velocidad de Agitacion(N) (min1)

    Flujo de Aire (Qa)(Lmin1)

    30* 1*30 1030 2030 3030 40

    40* 1*40 1040 2040 3040 40

    50* 1*50 1050 2050 3050 40

    *Condiciones hipoteticas.

    2.5 Calculos usando Fluido DinamicaComputacional

    Las simulaciones fueron llevadas a cabo usandoel paquete computacional Ansys Workbench 12.0(ANSYS Inc.; USA). La geometra a simular fueconstruida usando el paquete Design Modeler 12.0(ANSYS Inc.; USA) con las principales dimensionesgeometricas descritas anteriormente. Fue necesariala division de la geometra original en dos cuerposgeometricos, considerando que el sistema a simular,tiene un elemento giratorio (impelentes). As, fuerongenerados dos cuerpos con forma cilndrica (unoformando la estructura del vaso y el otro envolviendoal impelente), para poder hacer la configuracion de los

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    mismos como dominios independientes. Las mallascomputacionales fueron generadas usando el paqueteCFX-Mesh 12.0 (ANSYS Inc.; USA). Estas fueronde tipo no estructurada compuesta principalmente porelementos tetraedricos (383 442 elementos y 78 617nodos), incrementando su densidad en zonas de mayorgradiente de velocidad (impelentes). En la Figura2, pueden apreciarse la geometra construida y lasmallas generadas de los dominios de computo. En laDFC, todos los terminos en cada ecuacion a resolverson discretizados en espacio y tiempo despues deseleccionar el modelo matematico. El metodo dediscretizacion empleado fue el de volumen finito.

    La configuracion comun usada para todas lassimulaciones fue la siguiente:

    Simulacion bifasica: agua a 35C como lquidoy aire como fase dispersa gaseosa

    Diametro de burbuja 3 mm a la salida delburbujaedor.

    Densidad del lquido 994 kg m3 y densidaddel aire variable con la altura del lquidoconsiderando comportamiento gas ideal(Presion Fondo/Presion superficie > 1).

    Se aplico una presion manometrica en lasuperficie del lquido de 2104 Pa (0.2 bar)

    Viscosidad del lquido 8.0 104 Pas

    Modelos de interaccion (transferencia demovimiento entre fases: flotacion y arrastre).El coeficiente de arrastre calculado tomando encuenta la fraccion volumetrica.

    Se empleo el modelo de grupos de multiplestamanos (MUSIG) para modelar la ruptura ycoalescencia de las burbujas.

    Simulaciones llevadas a cabo en modoestacionario empleando el modelo dereferencias multiples para modelar lainteraccion entre impelentes y deflectores.

    Simulaciones llevadas a cabo en modotransiente empleando el modelo de malladeslizante para modelar la interaccion entreimpelentes y deflectores.

    El modelo de turbulencia empleado fue elmodelo estandar de dos ecuaciones k .

    Las condiciones de velocidad de agitacion yaireacion a simular fueron establecidas segun la Tabla3. En todas las simulaciones se empleo un criterio deconvergencia de Residuos Mnimos Cuadrados (RMS)de 104, factor por el cual, los residuos inicialesdel flujo masico disminuyen a medida que avanza lasimulacion. Las simulaciones fueron ejecutadas en unordenador Pentium P IV con 3.4 GHz de velocidad deprocesamiento y 4 GB de memoria RAM.

    Figura 2. Geometra y mallas computacionales usadas para la modelacin DFC. (A) Vista isomtrica de la geometra del biorreactor. (B) Vista isomtrica de la malla del dominio

    estacionario. (C) Vista isomtrica de la malla del dominio rotatorio.

    Figura 3A. Lneas fijadas en las geometras del biorreactor simulado para la obtencin de datos de velocidad axial ubicadas en un plano central entre los deflectores (=45). A)

    r/T=0,213; B) r/T=0,453; C) r/T=0,8. Figura 3B. Componente de la velocidad axial media normalizada vs distancia radial adimensional a 30 min-1, empleando el modelo de turbulencia

    k- y el mtodo estacionario.

    Pefil de velocidades axiales medias normalizadas vs distancia radial adimensional a =45 a distintas posiciones axiales adimensionales

    (y/T)

    -0,4

    -0,3

    -0,2

    -0,1

    0

    0,1

    0,2

    0,3

    0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6r/T

    Uy/U

    tip

    y/T= 0,213y/T = 0,453y/T = 0,8y/T = 0,213 (Joshi et al. 2011)y/T = 0,453 (Joshi et al. 2011)y/T = 0,8 (Joshi et al. 2011)

    A

    B

    Fig. 2. Geometra y mallas computacionales usadas para la modelacion DFC. (A) Vista isometrica de la geometradel biorreactor. (B) Vista isometrica de la malla del dominio estacionario. (C) Vista isometrica de la malla deldominio rotatorio.

    828 www.rmiq.org

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    Figura 2. Geometra y mallas computacionales usadas para la modelacin DFC. (A) Vista isomtrica de la geometra del biorreactor. (B) Vista isomtrica de la malla del dominio

    estacionario. (C) Vista isomtrica de la malla del dominio rotatorio.

    Figura 3A. Lneas fijadas en las geometras del biorreactor simulado para la obtencin de datos de velocidad axial ubicadas en un plano central entre los deflectores (=45). A)

    r/T=0,213; B) r/T=0,453; C) r/T=0,8. Figura 3B. Componente de la velocidad axial media normalizada vs distancia radial adimensional a 30 min-1, empleando el modelo de turbulencia

    k- y el mtodo estacionario.

    Pefil de velocidades axiales medias normalizadas vs distancia radial adimensional a =45 a distintas posiciones axiales adimensionales

    (y/T)

    -0,4

    -0,3

    -0,2

    -0,1

    0

    0,1

    0,2

    0,3

    0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6r/T

    Uy/U

    tip

    y/T= 0,213y/T = 0,453y/T = 0,8y/T = 0,213 (Joshi et al. 2011)y/T = 0,453 (Joshi et al. 2011)y/T = 0,8 (Joshi et al. 2011)

    A

    B

    Figura 3A. Lneas fijadas en las geometras del biorreactor simulado para la obtencion de datos de velocidad axialubicadas en un plano central entre los deflectores ( = 45). A) r/T=0.213; B) r/T=0.453; C) r/T=0.8. Figura 3B.Componente de la velocidad axial media normalizada vs distancia radial adimensional a 30 min1, empleando elmodelo de turbulencia k- y el metodo estacionario.

    2.5.1 Calculos adicionales

    El kLa es calculado mediante DFC como el productodel coeficiente de transferencia de oxgeno (kL) y elarea interfacial especfica (a). Basado en la teorade penetracion de Higbie (1935), el coeficiente detransferencia de oxgeno se puede plantear como:

    kL = 2

    DOLpi

    (

    )1/4(9)

    Donde: DOL es el coeficiente de difusion del oxgenoen el lquido (m2s1), la viscosidad cinematica(m2s1) y la velocidad de disipacion de la energacinetica turbulenta (m2s3).

    El area interfacial especifica (a) esta dada por larelacion de la fraccion volumetrica de la fase gaseosalocal (g) y el diametro de burbujas medio local (db):

    a =6gdb

    (10)

    El diametro de burbujas medio local (db) es predichousando ecuaciones del balance poblacional para cadagrupo o clase de burbujas mediante el modelo demultiples tamanos (MUSIG) y se determino como:

    db =

    i

    nid3ii

    nid2i(11)

    Donde: ni es la densidad del numero de burbujas declase i (m3) y di diametro de burbujas de clase i (m).

    Empleando las ecuaciones (9) y (10) y los valoresde , g y db obtenidos de las simulaciones en DFC sepuede predecir el kLa local y promedio. El coeficientede difusion del oxgeno en agua a 35C empleado fuede 3.25109 m2s1 (Perry 1999).

    La potencia consumida por la agitacion y lapotencia gaseada fueron calculadas por DFC partiendode la ecuacion:

    P = 2piMN (12)

    El torque total (M) fue calculado a partir del torqueque actua sobre todas las paletas de los impelentes.

    3 Resultados y discusion

    3.1 Estudio del campo de velocidades

    Para llevar a cabo el estudio del campo de velocidades,se modifico la geometra del dominio de losimpelentes sustrayendole la propela y aumentando ladistancia de la turbina Rushton con respecto al fondoa 0.33 m con el objetivo de estandarizar la geometray comparar el perfil de velocidades en la vecindadde la turbina con los resultados publicados (Joshi,Nere y col., 2011). Para garantizar una comparacionadecuada con los datos publicados, fue impuesta unavelocidad de giro del impelente de 30 min1 en elmodelo haciendo as que el numero de Reynolds fuesede igual orden al de los datos publicados.

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    Figura 4A. Distribucin aleatoria de los puntos en el vaso del biorreactor para mediciones del tiempo de mezclado. Figura 4B. Curvas respuestas de la concentracin normalizada del

    trazador en los puntos de monitoreo obtenidos por simulacin y experimental a una velocidad de agitacin de 30 min-1.

    Figura 5. Curva de respuesta adimensional obtenida experimentalmente en la condicin de agitacin de 30 min-1 y flujo volumtrico de agua de 20Lh-1.

    Grado de Homogeneizacin vs tiempo

    0,70

    0,75

    0,80

    0,85

    0,90

    0,95

    1,00

    1,05

    1,10

    1,15

    1,20

    0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130

    tiempo, s

    H(t

    )

    Exppunto 1punto 2punto 3punto 4punto 5punto 6punto 7punto 8punto 9punto 10

    tm = 100 s (Experimental)

    tm= 97 s (Simulado)

    A B

    Figura 4A. Distribucion aleatoria de los puntos en el vaso del biorreactor para mediciones del tiempo de mezclado.Figura 4B. Curvas respuestas de la concentracion normalizada del trazador en los puntos de monitoreo obtenidospor simulacion y experimental a una velocidad de agitacion de 30 min1.

    Esto garantizo condiciones de similitud dinamica.Tambien se comprobo la similitud entre las relacionesgeometricas. Se verificaron los resultados de lavelocidad axial media normalizada (Uy/Utip) para lasdistintas posiciones axiales (ver Figura 3A) con losresultados experimentales de Velocimetra por efectoDoppler Laser obtenidos por Joshi y col. (2011).La Figura 3B muestra las componentes axiales dela velocidad media normalizada en la coordenadaaxial normalizada vs la distancia radial adimensionala distintas posiciones axiales para la region de laturbina Rushton. Estos datos se comparan con latendencia correspondiente a los datos de la literaturaantes referenciados.

    En la Figura 3B se observa como el perfilde velocidad axial calculado sigue una tendenciasimilar al experimental. En las posiciones axialesadimensionales y/T = 0.213 y y/T = 0.453 ubicadasen la parte inferior y superior respectivamentede la turbina Rushton el comportamiento se alejaligeramente del experimental en algunas zonas de lacurva subestimando su valor. Sin embargo, en laposicion axial adimensional y/T = 0.8 ubicada enla parte superior mas alejada de la turbina Rushtonel comportamiento fue el de mayor similitud conel experimental. Estas diferencias pueden debersea la interferencia que produce la geometra delburbujeador, ademas que no esta contemplada suinfluencia en los datos experimentales obtenidos por

    los autores mencionados.

    3.2 Analisis del tiempo de mezclado y ladistribucion de tiempos de residencia

    La desviacion de la idealidad del campo de flujo enun reactor de tanque agitado se puede determinarmediante metodos experimentales como el estmulo-respuesta. El tiempo de mezclado es un importanteparametro que caracteriza la rapidez del mezclado enel equipo. Fueron simulados en DFC experimentosestimulo-respuesta. En este caso fue introducidoen la simulacion un pulso de NaOH (trazador).El tiempo de mezclado se determino como aquelpara el cual la concentracion en varios puntosfuese practicamente igual (95 %) respecto a unvalor estacionario. Fueron colocados varios puntosde monitoreo de concentracion dentro del dominiocomputacional de forma aleatoria en diferentes zonasde velocidades que pueden ser observados en la Figura4A. En la Figura 4B se muestra el comportamientotemporal del grado de homogeneizacion (H(t)) de laconcentracion del trazador, en los distintos puntosde monitoreo dentro del biorreactor. Ademas seincluyen los resultados experimentales obtenidos paraesa condicion de velocidad de agitacion.

    Se observa que el tiempo requerido para alcanzarun grado homogeneizacion de 95 % en todos lospuntos de monitoreo fue de 97 s, mientras que

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    el experimental fue de 100 s. El error relativoentre los tiempos de mezclado obtenidos mediantela simulacion y la experimentacion fue de 3 %,lo que constituye una buena aproximacion en laestimacion de esa variable. Los tiempos para alcanzarla homogeneidad en la concentracion de trazadorson mayores en los puntos ubicados en las regionescercanas a la pared y la superficie del lquido (puntos1, 7, 9 y 10). Esto es debido a las menoresvelocidades del fluido en esa region. Por lo tanto,en los puntos de monitoreo ubicados a la altura delimpelente y cercanos a este, donde existen las mayoresvelocidades, se logra alcanzar en menor tiempoel grado de homogeneizacion requerido. Tambiense observa determinado comportamiento oscilatoriosinusoidal al inicio el cual se va atenuando en eltiempo. De acuerdo con los analisis de curvas deDTR informados en la literatura (Patwardhan 2001;Levenspiel and Barreiro 2002) este comportamientopuede relacionarse con la existencia de recirculacionesinternas.

    Con la finalidad de estudiar la distribucionde tiempos de residencias se obtuvo la curva Cexperimentalmente, para la condicion de operacion de30 min1 sin aireacion y flujo volumetrico de agua atraves del vaso de 20Lh1 (Flujo masico de 5.52103kgs1). El comportamiento de la misma puede verseen la Figura 5 para un tiempo total de 250 h.

    En la Figura 5 se observa la forma tipo exponencialdescendente de la curva C tpica de una zona deflujo ideal o mezcla completa. Con el objetivo de

    verificar si existen desviaciones del flujo de mezclacompleta las Figuras 5 y 6 muestran los modelosmas usados para este fin. En la Figura 5 se observaque el intercepto del modelo ajustado con el eje delas ordenadas es ligeramente superior a 1 (1.0404)indicando la posible existencia de una zona muerta oun volumen muerto de aproximadamente 40L. Dichovolumen se puede despreciar si se compara con eltotal de 1100 L. Por otra parte segun el modeloexponencial ajustado no parece indicar la presenciade una corriente de cortocircuito. Ademas ya que eltiempo de mezclado es mucho mas pequeno que eltiempo medio de residencia (55 h) puede pensarse queocurre un buen mezclado de todos los elementos defluido antes de salir del reactor.

    En la Figura 6 se observa la correlacion lineal queexiste entre las variables experimentales E vs en lascoordenadas ln E vs , esto significa que los datosexperimentales no son descritos por otros modeloscombinados informados en la literatura de mayorcomplejidad (de dos parametros con transporte entrelas regiones activas y las estancadas), que el ajustadoen este trabajo (Levenspiel and Barreiro 2002). Apartir de los elementos anteriores se considera que elpatron de flujo en la condicion de operacion estudiadaes de mezcla completa. Es importante destacar quea pesar de existir regiones de baja velocidad (inferioren un 25% del valor de velocidad maxima) en el vasodel biorreactor (ver Figura 4A) esto no constituye unadesviacion del patron de flujo de mezcla completa.

    Figura 4A. Distribucin aleatoria de los puntos en el vaso del biorreactor para mediciones del tiempo de mezclado. Figura 4B. Curvas respuestas de la concentracin normalizada del

    trazador en los puntos de monitoreo obtenidos por simulacin y experimental a una velocidad de agitacin de 30 min-1.

    Figura 5. Curva de respuesta adimensional obtenida experimentalmente en la condicin de agitacin de 30 min-1 y flujo volumtrico de agua de 20Lh-1.

    Grado de Homogeneizacin vs tiempo

    0,70

    0,75

    0,80

    0,85

    0,90

    0,95

    1,00

    1,05

    1,10

    1,15

    1,20

    0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130

    tiempo, s

    H(t

    )

    Exppunto 1punto 2punto 3punto 4punto 5punto 6punto 7punto 8punto 9punto 10

    tm = 100 s (Experimental)

    tm= 97 s (Simulado)

    A B

    Fig. 5. Curva de respuesta adimensional obtenida experimentalmente en la condicion de agitacion de 30 min1 sinaireacion y flujo volumetrico de agua de 20Lh1.

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    Figura 6. Relacin lnE vs para los datos experimentales en la condicin de agitacin de 30

    min-1 y flujo volumtrico de agua de 20Lh-1.

    Figura 7. A-Curva de reoxigenacin. B- Curva ln(1/(1-DO/100)) vs t para determinar el kLa a

    35C en la condicin de agitacin de 40 min-1 y aireacin de 40 Lmin-1 en el medio de cultivo.

    Tabla 4. Coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno para las distintas condiciones de agitacin (N) y aireacin (Qa) segn el diseo factorial 32 en medio de cultivo.

    N (min-1) Qa (Lmin-1) kLa (h-1) 30 20 0,996 30 30 1,458 30 40 2,016 40 20 1,494 40 30 1,914 40 40 2,43 50 20 2,178 50 30 2,922 50 40 3,588

    Grfico Dinmica de Oxigenacin

    0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

    0 10 20 30 40 50 60 70 t, min

    DO, %

    0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

    Qa, L/min

    DO Flujo de aire

    A

    B

    Fig. 6. Relacion ln Etheta vs para los datos experimentales en la condicion de agitacion de 30 min1 y flujovolumetrico de agua de 20 Lh1.

    Figura 6. Relacin lnE vs para los datos experimentales en la condicin de agitacin de 30

    min-1 y flujo volumtrico de agua de 20Lh-1.

    Figura 7. A-Curva de reoxigenacin. B- Curva ln(1/(1-DO/100)) vs t para determinar el kLa a

    35C en la condicin de agitacin de 40 min-1 y aireacin de 40 Lmin-1 en el medio de cultivo.

    Tabla 4. Coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno para las distintas condiciones de agitacin (N) y aireacin (Qa) segn el diseo factorial 32 en medio de cultivo.

    N (min-1) Qa (Lmin-1) kLa (h-1) 30 20 0,996 30 30 1,458 30 40 2,016 40 20 1,494 40 30 1,914 40 40 2,43 50 20 2,178 50 30 2,922 50 40 3,588

    Grfico Dinmica de Oxigenacin

    0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

    0 10 20 30 40 50 60 70 t, min

    DO, %

    0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

    Qa, L/min

    DO Flujo de aire

    A

    B

    Fig. 7. A-Curva de reoxigenacion. B- Curva ln(1/(1-DO/100)) vs t para determinar el kLa a 35C en la condicionde agitacion de 40 min1 y aireacion de 40 Lmin1 en el medio de cultivo.

    3.3 Determinacion experimental delcoeficiente volumetrico de transferenciade oxgeno (kLa)

    Para determinar la capacidad de oxigenacion delbiorreactor es necesario determinar el coeficientevolumetrico de transferencia de oxgeno. Con estafinalidad se hicieron una serie de determinacionesusando el metodo estatico en las condicionesexperimentales de la Tabla 1. De manera ilustrativa,la Figura 7 muestra la curva de reoxigenacion (A), ylos datos transformados segun la ecuacion (8), en lacurva ln(1/(1-DO/100)) vs t (B), obtenida para una delas condiciones experimentales de la Tabla 1 (aireacionde 40 Lmin1 y velocidad de agitacion de 40 min1).

    En la Figura 7B se incluye tambien la recta resultantedel ajuste lineal a los valores junto con la expresionmatematica del modelo ajustado, el coeficiente decorrelacion (R2) y el valor de kLa.

    En la Figura 7B se observa como el coeficientede correlacion (R2) se aproxima notablemente a 1,lo que indica que existe una buena correlacion linealentre los puntos. El valor de kLa es obtenido a partirde la pendiente de la recta y es igual a 0.0405 min1(2,43 h1). El mismo procedimiento fue aplicado parael resto de las condiciones experimentales del disenofactorial y los resultados se muestran en la Tabla 4.

    Se observa que al aumentar la velocidad deagitacion para un flujo de gas constante aumenta elcoeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno.

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    Tabla 4. Coeficiente volumetrico detransferencia de oxgeno para las distintas

    condiciones de agitacion (N) y aireacion (Qa)segun el diseno factorial 32 en medio de cultivo.

    N (min1) Qa (Lmin1) kLa (h1)30 20 0.99630 30 1.45830 40 2.01640 20 1.49440 30 1.91440 40 2.4350 20 2.17850 30 2.92250 40 3.588

    Este comportamiento es logico, ya que al girar elimpelente a mayor velocidad la energa disipada esmayor y aumenta la ruptura de burbujas. Estoultimo provoca un aumento del area interfacial gas-lquido y un aumento de la fraccion de gas retenido.Tambien se observa que al aumentar el flujo degas a velocidad de agitacion constante aumenta elcoeficiente volumetrico de transferencia de oxgenodebido a un incremento de la frecuencia del numero deburbujas que se genera en el burbujeador y un aumentode la velocidad superficial. En la literatura hayinformes de valores de kLa obtenidos en el intervalode 1 a 15 h1 para cultivos de celulas animales enbiorreactores de hasta 8000 L de volumen (Varley andBirch 1999; Nienow 2006). Como se observa en laTabla 4 los valores de kLa se encuentran en el extremoinferior del intervalo publicado.

    Con el objetivo de investigar cual variable deoperacion (velocidad de agitacion o flujo de aire)tiene mayor influencia sobre el coeficiente volumetricode transferencia de oxgeno se realizo un analisisestadstico. La Figura 8 representa el diagrama dePareto y se observan los efectos significativos sobrela variable respuesta kLa.

    El diagrama de Pareto de la Figura 8 muestracada uno de los efectos estimados en ordendecreciente de magnitud. La lnea vertical indicacuales efectos son estadsticamente significativos.Puede verse que los dos efectos individuales ysus interacciones tienen un impacto positivo sobreel kLa. Cualquier barra que se extienda masalla de la lnea, corresponde a efectos que sonestadsticamente significativos. En este caso, 3 efectos

    son significativos N, Qa y la interaccion N-N (N2).

    Figura 8. Diagrama de Pareto de los efectos individuales y sus interacciones sobre la variable

    respuesta kLa.

    Figura 9. Superficie de respuesta y contornos de la superficie de respuesta estimada.

    Figura 10. Grfico de contorno para el coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno

    obtenido por la modelacin en DFC a 30 min-1 (fluido lquido agua). (A) Qa = 1 Lmin-1. (B) Qa = 10 Lmin-1. (C) Qa = 20 Lmin-1.

    Fig. 8. Diagrama de Pareto de los efectos individualesy sus interacciones sobre la variable respuesta kLa.

    El estadstico de Durbin-Watson igual a 2.28 (valor-P= 0.560 > 0.05) prueba la aleatoriedad de los residuoscon un 95.0% de nivel de confianza. De todo esteanalisis puede concluirse que la velocidad de agitaciones la variable que mas significativamente influye sobreel coeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno.Por lo tanto un incremento en la velocidad de agitaciontiene mayor impacto sobre el kLa en comparacioncon el flujo de aire. Esto es de vital importanciapara la transferencia de masa durante el cultivo decelulas ya que, un mayor coeficiente volumetrico detransferencia de oxgeno producto de un incrementoen la velocidad de agitacion posibilita una mayorvelocidad de transferencia de oxgeno al cultivo.

    La ecuacion que predice el valor del coeficientevolumetrico de transferencia de oxgeno (kLa) enfuncion de las variables independientes que resultaronsignificativas es:

    kLa = 1.4030.1273N+0.0561Qa +0.00247N2 (13)Dicha ecuacion presenta un coeficiente de correlacion(R2) de 98.6 % y un error estandar de estimacion paralos valores de kLa de 0.117. Mientras que el errormedio absoluto es de 0.074.

    Una vision en el espacio de la dependencia del kLacon respecto a N y Qa puede ser apreciado un graficotridimensional. En la Figura 9 se muestra la superficierespuesta, as como los contornos de la superficie derespuesta estimada.

    La grafica de contornos de la superficie derespuesta muestra los contornos para kLa en funcionde N y Qa. Cada lnea de contorno representacombinaciones de N y Qa las cuales determinan unvalor de kLa. Esta grafica es de gran utilidad yaque brinda la posibilidad de emplear combinacionesde los niveles de las variables velocidad de agitaciony aireacion que satisfacen un valor determinado delcoeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno.

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    Figura 8. Diagrama de Pareto de los efectos individuales y sus interacciones sobre la variable

    respuesta kLa.

    Figura 9. Superficie de respuesta y contornos de la superficie de respuesta estimada.

    Figura 10. Grfico de contorno para el coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno

    obtenido por la modelacin en DFC a 30 min-1 (fluido lquido agua). (A) Qa = 1 Lmin-1. (B) Qa = 10 Lmin-1. (C) Qa = 20 Lmin-1.

    Fig. 9. Superficie de respuesta y contornos de la superficie de respuesta estimada.

    Figura 8. Diagrama de Pareto de los efectos individuales y sus interacciones sobre la variable

    respuesta kLa.

    Figura 9. Superficie de respuesta y contornos de la superficie de respuesta estimada.

    Figura 10. Grfico de contorno para el coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno

    obtenido por la modelacin en DFC a 30 min-1 (fluido lquido agua). (A) Qa = 1 Lmin-1. (B) Qa = 10 Lmin-1. (C) Qa = 20 Lmin-1.

    Fig. 10. Grafico de contorno para el coeficiente volumetrico de transferencia de oxgeno obtenido por la modelacionen DFC a 30 min1 (fluido lquido agua). (A) Qa = 1 Lmin1. (B) Qa = 10 Lmin1. (C) Qa = 20 Lmin1.

    As, por ejemplo de ser necesario un kLa de 2 h1 sepuede escoger una velocidad de agitacion y un flujode aire de 47 min1 y 20 Lmin1 respectivamente.Es importante destacar que la correlacion de kLadeterminada solo es valida para los niveles de lasvariables N y Qa estudiados experimentalmente.

    3.4 Determinacion del coeficientevolumetrico de transferencia deoxgeno por simulacion

    En la Figura 10 se muestra un grafico de contornode la distribucion axial del coeficiente volumetrico detransferencia de oxgeno en el biorreactor modelado,

    sobre un plano longitudinal, a una velocidad deagitacion de 30 min1 y diferentes flujos de aire de1, 10 y 20 Lmin1.

    Se observa que la distribucion del coeficientevolumetrico de transferencia de oxgeno no eshomogenea en el todo el volumen del biorreactorcon variaciones locales. Las zonas de mayor kLase encuentran alrededor del impelente y en la zonade ascenso del gas desde el burbujeador hasta lasuperficie, siendo mayor su valor a mayor aireacion.Este resultado es consistente con lo informado enla literatura (Dhanasekharan, Sanyal y col., 2005;Moilanen, Laakkonen y col., 2008) por el hecho deque en dichas zonas se encuentra la mayor turbulenciay fraccion volumetrica de aire.

    834 www.rmiq.org

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    Tabla 5. Coeficientes volumetricos detransferencia de oxgeno obtenidos por

    DFC (valores promedios) y laexperimentacion en agua a 35C y avelocidad de agitacion de 30 min1.Qa DFC Exp Error

    (L/min) kLa kLa relativo(h1) (h1) (%)

    1 0.15 0.13 15.4%10 1.22 1.06 14.9%20 2.19 1.76 24.9%

    Segun la teora de penetracion de Higbie (Higbie1935) una mayor turbulencia provoca un incrementodel coeficiente de transferencia de oxgeno (kL)segun la ecuacion (9). En la parte inferior ycercana a las paredes del biorreactor la transferenciaes despreciable. Este valor bajo de kLa esdiferente en varios ordenes de magnitud del obtenidoexperimentalmente en la zona de la pared donde sesitua el sensor de oxgeno (Figura 1). Esto es debido aque la prediccion del kLa esta limitada por la precisionde la determinacion de la distribucion de densidaddel numero de burbujas la cual determina el valordel area interfacial (a) calculada por la ecuacion (10)en dicha zona. La precision puede ser aumentadapor un refinamiento de la discretizacion de lasecuaciones de balance poblacional para la distribucionde densidad del numero de burbujas, trayendo consigoun incremento del esfuerzo computacional. En laTabla 5 se muestran los valores de las diferenciasrelativas entre los kLa obtenidos por la modelacion yla experimentacion.

    Puede notarse que el error relativo del valorpromedio calculado respecto al experimentalesta alrededor del 20 %. Segun la literatura(Dhanasekharan, Sanyal et al. 2005; Moilanen,Laakkonen et al. 2008) dicho error suele ser comun yes aceptado por la comunidad cientfica.

    Se observa en la Figura 12 que la potencia delsistema gaseado disminuye a medida que aumentael flujo de aire (aumento del numero de aireacion)debido a la acumulacion de gas en la parte posteriorde las paletas de la turbina y a la disminucion de ladensidad que provoca dicho aire en el sistema. Estaobservacion es consecuente con resultados publicados(Nienow 1990; Vrabel, van der Lans et al. 2000)para reactores con turbinas Rushton. Un incrementoen el numero de aireacion por encima de un puntocrtico produce una reduccion brusca de la potencia del

    sistema gaseado. De acuerdo con Nienow (Nienow,Wisdom et al. 1978), el mnimo en la curva Pg/P vsFlG tambien corresponde con el punto de inundacion.Esto indica que por encima del numero de aireacioncrtico el impelente esta inundado. Se pudiera inferira partir de la Figura 12 que los puntos crticos (valora partir del cual se produce una reduccion brusca de laPg/P) se encuentran entre 1 L/min y 10 Lmin1 parauna velocidad de agitacion de 30 min1 (1.2101