20
UREA INDOLE 63713 63714 MEDIUM FOR THE IDENTIFICATION OF ENTEROBACTERIACEAE 1- INTENDED USE Urea Indole medium allows demonstration of urease, tryptophan deaminase and indole production (the medium contributes to the demonstration of identification characteristics of Enterobacteriaceae). 2- PRINCIPLE Bacteria possessing a urease transform urea into ammonium carbonate ,inducing alkalinisation which turns the medium a violaceous red colour in the presence of phenol red (pH indicator). Indole production is demonstrated by the addition of Kovacs reagent (code 55313) which reacts with indole to form a red colour in the upper part of the medium in the case of a positive reaction. The presence of tryptophan deaminase (TDA) is demonstrated by addition of ferric chloride (code 53913) which induces a red brown colour of the medium in the case of a positive reaction. 3- HOW SUPPLIED Ready to use medium: - Box of 50 x 1 ml ampoules code 63713 - Box of 10 x 10 ml ampoules code 63714 4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water) L-Tryptophan 3 KH2PO4 1 K2HPO4 1 Sodium chloride 5 Urea 20 95% ethanol 10 ml Phenol red 0.05 Preparation of the medium: Under sterile conditions, dispense 0.25 to 0.50 ml of Urea-Indole medium into haemolysis tubes, which are each used to study various strains and/or to perform various tests: For a given strain, a first tube can be used to demonstrate urease and indole production. A second tube is then used to test for TDA on this same strain. 5- STORAGE Ready to use medium: at +2-8°C. The expiry date and batch number are indicated on the packaging. 6- INSTRUCTIONS Material: Material provided: Urea Indole medium. Specific material not provided: - Haemolysis tubes - Kovacs Reagent (code 55313) - Ferric Chloride Solution (code 53913) Inoculation: Inoculate each tube abundantly with a pure, fresh culture grown on an isolation medium. Incubation: Incubate for 24 hours at 37°C. Reading: 1. Presence of urease: the medium turns violaceous red: - in 5 to 10 minutes for Proteus morganii and Yersinia enterocolitica - in 2 to 4 hours for other strains of Proteus - in 12 to 18 hours for Klebsiella and several strains of Citrobacter. In the absence of urease, the colour of the medium remains unchanged. 2. Test for indole production: after 24 hours of incubation, add 4 to 5 drops of Kovacs reagent (code 55313) to the tube of inoculated Urea Indole medium: the presence of indole is revealed by the development of a red colour on the surface of the medium. 3. Test for TDA: after 24 hours of incubation, add 1 to 2 drops of Ferric Chloride Solution (code 53913) to the tube of Urea Indole medium: - red-brown colour: TDA (+) - orange-yellow colour: TDA (-)

MEDIUM FOR THE IDENTIFICATION OF ENTEROBACTERIACEAE diagnostics... · MEDIO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE ENTEROBACTERIACEAE 1- USO PREVISTO El medio Urea Indol permite la demostración

Embed Size (px)

Citation preview

UREA INDOLE 6371363714

MEDIUM FOR THE IDENTIFICATION OF ENTEROBACTERIACEAE

1- INTENDED USEUrea Indole medium allows demonstration of urease, tryptophan deaminase and indole production (the medium contributes tothe demonstration of identification characteristics of Enterobacteriaceae).

2- PRINCIPLEBacteria possessing a urease transform urea into ammonium carbonate ,inducing alkalinisation which turns the medium aviolaceous red colour in the presence of phenol red (pH indicator). Indole production is demonstrated by the addition of Kovacsreagent (code 55313) which reacts with indole to form a red colour in the upper part of the medium in the case of a positivereaction. The presence of tryptophan deaminase (TDA) is demonstrated by addition of ferric chloride (code 53913) whichinduces a red brown colour of the medium in the case of a positive reaction.

3- HOW SUPPLIED• Ready to use medium:

- Box of 50 x 1 ml ampoules code 63713- Box of 10 x 10 ml ampoules code 63714

4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water)L-Tryptophan 3KH2PO4 1K2HPO4 1Sodium chloride 5Urea 2095% ethanol 10 mlPhenol red 0.05

Preparation of the medium:Under sterile conditions, dispense 0.25 to 0.50 ml of Urea-Indole medium into haemolysis tubes, which are each used to studyvarious strains and/or to perform various tests:• For a given strain, a first tube can be used to demonstrate urease and indole production.• A second tube is then used to test for TDA on this same strain.

5- STORAGE• Ready to use medium: at +2-8°C.The expiry date and batch number are indicated on the packaging.

6- INSTRUCTIONSMaterial:• Material provided: Urea Indole medium.• Specific material not provided:

- Haemolysis tubes- Kovacs Reagent (code 55313)- Ferric Chloride Solution (code 53913)

Inoculation:Inoculate each tube abundantly with a pure, fresh culture grown on an isolation medium.

Incubation:Incubate for 24 hours at 37°C.

Reading:1. Presence of urease: the medium turns violaceous red:

- in 5 to 10 minutes for Proteus morganii and Yersinia enterocolitica- in 2 to 4 hours for other strains of Proteus- in 12 to 18 hours for Klebsiella and several strains of Citrobacter.In the absence of urease, the colour of the medium remains unchanged.

2. Test for indole production: after 24 hours of incubation, add 4 to 5 drops of Kovacs reagent (code 55313) to the tube ofinoculated Urea Indole medium: the presence of indole is revealed by the development of a red colour on the surface of themedium.

3. Test for TDA: after 24 hours of incubation, add 1 to 2 drops of Ferric Chloride Solution (code 53913) to the tube of UreaIndole medium:- red-brown colour: TDA (+)- orange-yellow colour: TDA (-)

Enterobacteriaceae Urease TDA IndoleSalmonella SE I in general - - -S. typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - dS. boydii, flexneri - - dS. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y. enterocolitica + - dY. pseudotuberculosis + - -K. pneumonia + slow - -K. oxytoca + slow - +E. aerogenes - - -K. ozaenae d - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens and liquefaciens - - -Vibrionaceae Urease TDA IndoleAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (culture at 22°C) - - -Plesiomonas shigelloides - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- PERFORMANCE/QUALITY CONTROL OF THE TEST• Appearance of the ready to use medium: clear orange broth.• The growth performances of Urea Indole medium are verified with the following strains:

STRAINS CULTURE RESULT AFTER 24 hours at 37°CUrease Indole TDA

Escherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

8- QUALITY CONTROL OF THE MANUFACTURERAll manufactured reagents are prepared according to our Quality System, starting from reception of raw material to the finalcommercialization of the product. Each lot is submitted to quality control assessments and is only released to the market, afterconforming to pre-defined acceptance criteria. The records relating to production and control of each single lot are kept withinBio-Rad.

9- LIMITS OF USE• After prolonged incubation, alkalinisation of the medium can be induced by protein hydrolysis and not by the presence of

urease. Only rapid alkalinisation of the medium, in a maximum of 24 hours, is characteristic of bacterial urease activity.• Do not heat or reheat the medium, as this can cause decomposition of urea.• In the case of doubtful results, compare the suspicious tube with a non-inoculated control tube.

1

UREA INDOLE 6371363714

MILIEU D’IDENTIFICATION DES ENTÉROBACTÉRIES

1- APPLICATION

Le milieu Urea Indole permet la mise en évidence de l'uréase, de la tryptophane désaminase et de la production d'indole (le milieucontribue à la mise en évidence des caractères d'identification des Entérobactéries).

2- PRINCIPE

Les bactéries possédant une uréase transforment l'urée en carbonate d'ammonium entraînant une alcalinisation qui provoque unecoloration rouge violacé du milieu en présence de rouge de phénol (indicateur de pH). La production d'indole est mise en évidencepar l'addition de réactif de Kovacs (code 55313) qui agit avec l'indole en donnant une coloration rouge dans la partie supérieuredu milieu en cas de réaction positive. La présence de tryptophane désaminase (TDA) est mise en évidence par addition deperchlorure de fer (code 53913) qui provoque une coloration brun rouge du milieu en cas de réaction positive.

3- PRÉSENTATION

• Milieu prêt à l’emploi- Coffret de 50 ampoules de 1 ml code 63713- Coffret de 10 ampoules de 10 ml code 63714

4- COMPOSITION (en g/l d’eau distillée)

L – Tryptophane 3 KH2PO4 1K2HPO4 1Chlorure de sodium 5Urée 20Alcool à 95° 10 mlRouge de phénol 0,05pH final : 6,8 ± 0,2

Préparation du milieu :Distribuer stérilement de 0,25 à 0,50 ml de milieu Urea Indole dans des tubes à hémolyse, chacun devant servir à l'étude desouches différentes et/ou à la réalisation de différents tests :• Un premier tube peut, pour une souche donnée, être utilisé pour la mise en évidence de l'uréase et pour la production d'indole.• Un second tube est, pour cette même souche, réservé à la recherche de la T.D.A.

5- CONSERVATION

• Milieu prêt à l'emploi : à + 2 - 8°C.La date de péremption et le numéro de lot sont indiqués sur le conditionnement.

6- UTILISATION

Matériel :• Matériel fourni : milieu Urea Indole• Matériel spécifique non fourni :

- Tubes à hémolyse- Réactif Kovacs (code 55313)- Ferric Chloride Solution (code 53913)

IVD

2

Ensemencement :Ensemencer chaque tube abondamment à partir d'une culture pure et fraîche prélevée sur un milieu d'isolement.

Incubation :Incuber 24 heures à 37°C.

Lecture : 1.Présence d'une uréase : le milieu vire au rouge violacé :

- en 5 à 10 minutes pour Proteus morganii et Yersinia enterocolitica- en 2 à 4 heures pour les autres Proteus- en 12 à 18 heures pour les Klebsiella et quelques Citrobacter.En absence d'uréase, la coloration du milieu reste inchangée.

2.Recherche de la production d'indole : après 24 heures d'incubation, verser 4 à 5 gouttes de réactif Kovacs (code 55313) dans letube de milieu Urea Indole ensemencé : la présence d'indole est révélée par l'apparition d'une coloration rouge à la surface dumilieu.

3.Recherche de la T.D.A. : : après 24 heures d'incubation, verser dans le tube du milieu Urea Indole 1 à 2 gouttes de FerricChloride Solution (code 53913) :- coloration brun rouge : T.D.A. (+)- coloration jaune orangée : T.D.A. (-)

Enterobacteriaceae Uréase T.D.A. Indole

Salmonella SE I in général - - -S. typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - dS. boydii, flexneri - - dS. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y. enterocolitica + - dY. pseudotuberculosis + - -K. pneumonia + lent - -K. oxytoca + lent - +E. aerogenes - - -K. ozaenae d - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens et liquefaciens - - -Vibrionaceae Uréase T.D.A. IndoleAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (culture à 22° C) - - -Plesiomonas shigelloïdes - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- PERFORMANCES / CONTRÔLE QUALITÉ DU TEST

• Aspect du milieu prêt à l’emploi : bouillon limpide orange.• Les performances culturales du milieu Urea Indole sont contrôlées à l’aide des souches suivantes :

8- CONTRÔLE QUALITÉ DU FABRICANT

Tous les produits fabriqués et commercialisés par la société Bio-Rad sont placés sous un système d'assurance qualité de la réceptiondes matières premières jusqu'à la commercialisation des produits finis. Chaque lot de produit fini fait l'objet d'un contrôle de qualitéet n'est commercialisé que s'il est conforme aux critères d'acceptation. La documentation relative à la production et au contrôle dechaque lot est conservée par le fabricant.

9- LIMITES D'UTILISATION

• Après une incubation prolongée, l'alcalinisation du milieu peut être provoquée par une hydrolyse des protéines et non par laprésence d'une uréase. Seule l'alcalinisation rapide du milieu en 24h maximum est caractéristique de l'activité uréasique desbactéries.

• Ne pas chauffer ou réchauffer le milieu car cela entraînerait une décomposition de l'urée.• En cas de doute sur le résultat, il est conseillé de comparer le tube suspect avec un tube témoin non inoculé.

3

SOUCHES RÉSULTAT DE LA CULTURE EN 24 H à 37°C

Uréase Indole T.D.A.

Escherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

Bio-Rad3, boulevard Raymond Poincaré92430 Marnes-la-Coquette FranceTel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 07/2003Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 code: 18061 - A4

UREA INDOLE 6371363714

MEDIO PARA LA IDENTIFICACIÓN DE ENTEROBACTERIACEAE

1- USO PREVISTOEl medio Urea Indol permite la demostración de ureasa, triptófano desaminasa y producción de indol (el medio contribuye a lademostración de las características de identificación de Enterobacteriaceae).

2- PRINCIPIOLas bacterias que poseen una ureasa transforman la urea en carbonato de amonio, induciendo la alcalinización que vuelve almedio de color rojo violáceo en presencia de rojo fenol (indicador de pH). La producción de indol se demuestra por la adiciónde reactivo de Kovacs (código 55313) que reacciona con el indol para formar un color rojo en la parte superior del medio encaso de una reacción positiva. La presencia de triptófano desaminasa (TDA) se demuestra por la adición de cloruro férrico(código 53913) que induce un color rojo marrón del medio en caso de una reacción positiva.

3- CÓMO SE SUMINISTRA• Medio listo para usar:

- Caja de 50 ampollas de 1 ml código 63713- Caja de 10 ampollas de 10 ml código 63714

4- COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada)L-triptófano 3KH2PO4 1K2HPO4 1Cloruro sódico 5Urea 20Etanol al 95% 10 mlRojo fenol 0,05

Preparación del medio:En condiciones estériles, dispense 0,25 a 0,50 ml de medio urea-indol en tubos de hemólisis, que se usan cada uno paraestudiar diversas cepas y/o para realizar diversas pruebas:• Para una cepa determinada, puede usarse un primer tubo para demostrar la ureasa y la producción de indol.• Se usa entonces un segundo tubo para estudiar la TDA en esta misma cepa.

5- CONSERVACIÓN• Medio listo para usar: a +2-8°CLa fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado.

6- INSTRUCCIONESMaterial:• Material suministrado: Medio urea indol.• Material específico no suministrado:

- Tubos de hemólisis- Reactivo Kovacs (código 55313)- Solución de cloruro férrico (código 53913)

Inoculación:Inocule cada tubo abundantemente con un cultivo puro, fresco, cultivado en un medio de aislamiento.

Incubación:Incube durante 24 horas a 37°C.

Lectura:1. Presencia de ureasa: el medio se vuelve rojo violáceo:

- en 5 a 10 minutos para Proteus morganii y Yersinia enterocolitica- en 2 a 4 horas para otras cepas de Proteus- en 12 a 18 horas para Klebsiella y varias cepas de Citrobacter.En ausencia de ureasa, el color del medio permanece inalterado.

2. Prueba para la producción de indol: después de 24 horas de incubación, añada 4 a 5 gotas de reactivo Kovacs (código55313) al tubo del medio Urea indol inoculado: la presencia de indol se revela por el desarrollo de un color rojo sobre lasuperficie del medio.

3. Prueba de la TDA: después de 24 horas de incubación, añada 1 a 2 gotas de solución de cloruro férrico (código 53913) altubo del medio Urea indol:- color rojo-marrón: TDA (+)- color naranja-amarillo: TDA (-)

Enterobacteriaceae Ureasa TDA IndolSalmonella SE I en general - - -S. typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - dS. boydii, flexneri - - dS. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y. enterocolitica + - dY. pseudotuberculosis + - -K. pneumonia + lento - -K. oxytoca + lento - +E. aerogenes - - -K. ozaenae D - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens y liquefaciens - - -Vibrionaceae Ureasa TDA IndolAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (cultivo a 22°C) - - -Plesiomonas shigelloides - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA• Aspecto del medio listo para usar: caldo transparente naranja.• Los rendimientos de crecimiento del medio urea indol se verifican con las siguientes cepas:

CEPAS RESULTADO DEL CULTIVO DESPUÉS DE 24horas a 37 °C

Ureasa Indol TDAEscherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTETodos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materiasprimas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercadosólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control decada lote se conservan en Bio-Rad.

9- LÍMITES DE USO• Después de una incubación prolongada, puede inducirse la alcalinización del medio mediante hidrólisis de proteínas y no

por la presencia de ureasa. Sólo la alcalinización rápida del medio, en un máximo de 24 horas, es característica deactividad de ureasa bacteriana.

• No caliente ni recaliente el medio, puesto que esto puede producir descomposición de la urea.• En caso de resultados dudosos, compare el tubo sospechoso con un tubo control no inoculado.

UREA INDOLE 6371363714

MEDIUM FÜR DIE IDENTIFIZIERUNG VON ENTEROBACTERIACEAE

1- VERWENDUNGSZWECKUrea-Indol-Medium ermöglicht den Nachweis der Urease-, Tryptophan-Desaminase- und Indolproduktion (das Medium trägtzum Nachweis der Identifikationsmerkmale von Enterobacteriaceae bei).

2- PRINZIPBakterien, die Urease aufweisen, wandeln Harnstoff in Ammoniumkarbonat um und leiten eine Alkalisierung ein, die dasMedium in Anwesenheit von Phenolrot (pH-Indikator) violett-rot verfärbt. Die Indolproduktion weist auf die Zugabe des Kovacs-Reagenzes (Kat.-Nr. 55313) hin, das mit Indol reagiert und bei einer positiven Reaktion im oberen Bereich des Mediums zueiner roten Färbung führt. Das Vorliegen von Tryptophan-Desaminase (TDA) wird durch Zugabe von Eisenchlorid (Kat.-Nr.53913) nachgewiesen, welches das Medium bei einer positiven Reaktion rot-braun verfärbt.

3- DARREICHUNGSFORM• Gebrauchsfertiges Medium:

- Packung mit 50 x 1 ml-Ampullen Art.-Nr. 63713- Packung mit 10 x 10 ml-Ampullen Art.-Nr. 63714

4- THEORETISCHE ZUSAMMENSETZUNG (g/l destilliertes Wasser)L-Tryptophan 3KH2PO4 1K2HPO4 1Natriumchlorid 5Harnstoff 2095% Ethanol 10 mlPhenolrot 0,05

Vorbereitung des Mediums:Unter sterilen Bedingungen 0,25 bis 0,50 ml Urea-Indol-Medium in Hämolyseröhrchen pipettieren, die für die Untersuchung vonverschiedenen Stämmen bzw. zur Durchführung verschiedener Tests verwendet werden:• Für einen bestimmten Stamm kann ein erstes Röhrchen zum Nachweis der Urease- und Indolproduktion verwendet

werden.• Ein zweites Röhrchen kann für den TDA-Test mit dem gleichen Stamm verwendet werden.

5- LAGERUNG• Gebrauchsfertiges Medium: bei +2 - 8°C.Das Verfallsdatum und die Chargennummer sind auf der Verpackung angegeben.

6- GEBRAUCHSANWEISUNGMaterial:• Geliefertes Material: Urea-Indol-Medium.• Zusätzlich benötigtes Material:

- Hämolyse-Röhrchen- Kovacs-Reagenz (Kat.-Nr. 55313)- Eisenchloridlösung (Kat.- Nr. 53913)

Beimpfung:Jedes Röhrchen mit reichlich frischer, auf Isolationsmedium gewachsener Reinkultur beimpfen.

Inkubation:Bei 37°C 24 Stunden lang inkubieren.

Ablesen der Ergebnisse:1. Vorliegen von Urease: Das Medium wird violett-rot:

- in 5 bis 10 Minuten für Proteus morganii und Yersinia enterocolitica- in 2 bis 4 Stunden für andere Proteus-Stämme- in 12 bis 18 Stunden für Klebsiella und andere Citrobacter-StämmeIn Abwesenheit von Urease bleibt die Farbe des Mediums unverändert.

2. Test auf Indolproduktion: Nach 24stündiger Inkubation 4 bis 5 Tropfen Kovacs-Reagenz (Kat.-Nr. 55313) in dasRöhrchen mit Urea-Indol-Medium geben: Das Vorliegen von Indol wird durch die Entwicklung einer roten Färbung an derOberfläche des Mediums nachgewiesen.

3. TDA-Test: Nach 24stündiger Inkubation 1 bis 2 Tropfen Eisenchloridlösung (Kat.-Nr. 53913) in das Röhrchen mit Urea-Indol-Medium geben:- rot-braune Färbung: TDA (+)- orange-gelbe Färbung: TDA (-)

Enterobacteriaceae Urease TDA IndolSalmonella SE I im Allg. - - -S. typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - dS. boydii, flexneri - - dS. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y. enterocolitica + - dY. pseudotuberculosis + - -K. pneumonia + langsam - -K. oxytoca + langsam - +E. aerogenes - - -K. ozaenae d - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens und liquefaciens - - -Vibrionaceae Urease TDA IndolAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (Kultur bei 22°C) - - -Plesiomonas shigelloides - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- LEISTUNG/QUALITÄTSKONTROLLE DES TESTS• Erscheinung des gebrauchsfertigen Mediums: helle orangefarbene Bouillon.• Die Leistungsmerkmale des Wachstums auf Urea-Indol-Medium werden mit folgenden Stämmen überprüft:

STÄMME KULTURERGEBNIS NACH 24 Stunden bei 37°CUrease Indol TDA

Escherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

8- QUALITÄTSKONTROLLE DES HERSTELLERSAlle von der Firma Bio-Rad hergestellten Reagenzien unterliegen einem Qualitätssicherungssystem vom Rohstoffeingang biszur Vermarktung der Fertigprodukte. Jede Fertigproduktcharge wird einer Qualitätskontrolle unterzogen und nur dann verkauft,wenn sie den Freigabekriterien entspricht. Die Unterlagen bezüglich Herstellung und Kontrolle der einzelnen Chargen werdenbei Bio-Rad aufbewahrt.

9- GRENZEN DES TESTS• Nach einer längeren Inkubation kann die Alkalisierung des Mediums durch Proteinhydrolyse, jedoch nicht durch das

Vorliegen von Urease eingeleitet werden. Lediglich eine schnelle Alkalisierung des Mediums in maximal 24 Stunden ist füreine bakterielle Urease-Aktivität charakteristisch.

• Das Medium nicht erhitzen oder wieder erhitzen, da dies zum Zerfall von Harnstoff führt.• Bei zweifelhaften Ergebnissen das verdächtige Röhrchen mit einem nicht beimpften Kontrollröhrchen vergleichen.

UREA INDOLE 6371363714

MEZZO PER LA DIFFERENZIAZIONE DI ENTEROBACTERIACEAE

1- USO PREVISTOIl mezzo Urea Indolo consente la dimostrazione della produzione di ureasi, triptofano, e indolo (il mezzo contribuisce alladimostrazione delle caratteristiche di identificazione di Enterobacteriaceae).

2- PRINCIPIOI batteri che presentano un’ureasi trasformano urea in carbonato di ammonio, inducendo alcalinizzazione che produce un colorerosso violaceo del mezzo in presenza di rosso di fenolo (indicatore di pH). La produzione di indolo è dimostrata dall’aggiuntadi reagente Kovacs (codice 55313) che reagisce con indolo per formare un colore rosso nella parte superiore del mezzo nelcaso di una reazione positiva. La presenza di triptofano deaminasi (TDA) è dimostrata dall’aggiunta di cloruro ferrino(codice 53913) che induce un colore rosso marrone del mezzo nel caso di una reazione positiva.

3- PRESENTAZIONE• Mezzo pronto all’uso:

- Scatola da 50 ampolle da 1 ml codice 63713- Scatola da 10 ampolle da 10 ml codice 63714

4- 4 - COMPOSIZIONE TEORICA (G/L DI ACQUA DISTILLATA)L-Triptofano 3 - KH2PO4 1 K2HPO4 1 Cloruro di Sodio 5 Urea 20 etanolo al 95% 10 mlRosso di fenolo 0,05

Preparazione del mezzoIn condizioni sterili, erogare 0,25 –0,50 ml di mezzo Urea-Indolo in tubi di emolisi che sono usati tutti per studiare vari ceppi e/oper effettuare vari test.• Per un dato ceppo, un primo tubo può essere usato per dimostrare la produzione di ureasi e indolo.• Un secondo tubo è poi usato per testare TDA su questo stesso ceppo.

5- CONSERVAZIONE• Mezzo pronto all’uso: a +2-8°CLa data di scadenza e il numero di lotto sono indicati sulla confezione.

6- ISTRUZIONIMateriale:• Materiale fornito: Mezzo Urea Indolo• Materiale specifico non fornito:

- Tubi per emolisi- Reagente di Kovacs (codice 55313).- Soluzione di Cloruro Ferrino (codice 53913)

Inoculazione:Inoculare ciascun tubo abbondantemente con una nuova coltura pura cresciuta su un mezzo di isolamento.

Incubazione:Incubare per 24 ore a 37°C

Lettura:1. Presenza di ureasi: Il mezzo diventa rosso violaceo

- in 5 - 10 minuti per Proteus morganii e Yersinia enterocolitica- in 2 - 4 ore per altri ceppi di Proteus- in 12 - 18 ore per Klebsiella e diversi ceppi di Citrobacter.

In assenza di ureasi, il colore del mezzo rimane invariato.2. Test per produzione di indolo Dopo 24 ore di incubazione, aggiungere-4-5 gocce di reagente Kovacs (codice 55313) al

tubo del mezzo Urea Indolo inoculato. la presenza di indolo è rivelata dallo sviluppo di un colore rosso sulla superficie delmezzo.

3. Test per TDA: Dopo 24 ore di incubazione, aggiungere-1-2 gocce di Soluzione di Cloruro Ferrico (codice 53913) al tubodel mezzo Urea Indolo.

- colore rosso-marrone TDA (+)- colore arancio-giallo TDA (-)

Enterobacteriaceae Ureasi TDA IndoloSalmonella SE I in generale - - -S. Typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - dS. boydii flexneri - - dS. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y enterocolitca + - dY. pseudotuberculosis + - -K. pneumoniae + lento - -K. oxytoca + lento - +E. aerogenes - - -K. ozaenae d - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens e liquefaciens - - -Vibrionaceae Ureasi TDA IndoloAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (coltura a 22°C) - - -Plesiomonas shigelloides - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- PERFORMANCE / CONTROLLO DI QUALITÀ DEL TEST• Aspetto del mezzo pronto all’uso: brodo limpido arancio.• Le prestazioni di crescita del mezzo Urea Indolo sono verificate sui ceppi seguenti:

CEPPI RISULTATO DELLA COLTURA DOPO 24 orea 37°C

Ureasi Indolo TDAEscherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

8- CONTROLLO DI QUALITÀ DEL PRODUTTORETutti i reagenti realizzati sono preparati in base al nostro Sistema di Assicurazione di Qualità dal ricevimento delle materieprime, alla commercializzazione finale del prodotto. Ciascun lotto di prodotto finito è sottoposto a un controllo di qualità e vienemesso in commercio soltanto se risulta conforme ai criteri di approvazione predefiniti. La documentazione relativa allaproduzione e al controllo di ciascun singolo lotto è conservata presso Bio-Rad.

9- LIMITI DI UTILIZZO• Dopo incubazione prolungata, l’alcalinizzazione del mezzo può essere indotta da idrolisi proteica e non dalla presenza di

ureasi. Solo rapida alcalinizzazione del mezzo in un massimo di 24 ore, è caratteristica di attività di ureasi batterica.• Non scaldare o riscaldare il mezzo, poiché questo può causare decomposizione di urea.• In caso di risultati incerti, confrontare il tubo sospetto con un tubo controllo non inoculato.

UREA INDOLE 6371363714

MEIO PARA IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS

1- UTILIZAÇÃO PRETENDIDAO meio Ureia Indol permite demonstrar a presença de urease, triptofano desaminase e produção de indol (o meio contribui para ademonstração das características de identificação das Enterobactérias).

2- PRINCÍPIOAs bactérias que possuem uma urease transformam a ureia em carbonato de amónio, induzindo uma alcalinização do meio queadquire uma coloração vermelha violácea na presença de vermelho de fenol (indicador de pH). A produção de indol édemonstrada pela adição do reagente de Kovacs (código 55313), o qual reage com o indol dando origem à formação de umacoloração vermelha na parte superior do meio no caso de uma reacção positiva. A presença de triptofano desaminase (TDA) édemonstrada pela adição de cloreto férrico (código 53913), o qual induz uma coloração vermelha acastanhada do meio no casode uma reacção positiva.

3- APRESENTAÇÃO• Meio pronto a usar:

- Embalagem com 50 ampolas x 1 ml código 63713- Embalagem com 10 ampolas x 10 ml código 63714

4- COMPOSIÇÃO TEÓRICA (g/l de água destilada)L-Triptofano 3KH2PO4 1K2HPO4 1Cloreto de sódio 5Ureia 20Etanol a 95% 10 mlVermelho de fenol 0,05

Preparação do meio:Em condições estéreis, coloque 0,25 a 0,50 ml do meio de Ureia-Indol em tubos de hemólise, cada um dos quais a ser utilizado noestudo de várias estirpes e/ou na realização de vários ensaios:• Para uma dada estirpe, um primeiro tubo pode ser utilizado para demonstração da presença de urease e produção de indol.• Um segundo tubo é então utilizado para a pesquisa de TDA nesta mesma estirpe.

5- CONSERVAÇÃO• Meio pronto a usar: a +2-8°C.O prazo de validade e o número do lote estão indicados na embalagem.

6- INSTRUÇÕESMaterial:• Material fornecido: meio de Ureia Indol.• Material específico não fornecido:

- Tubos de hemólise- Reagente de Kovacs (código 55313)- Solução de Cloreto Férrico (código 53913)

Inoculação:Inocule cada tubo abundantemente com uma cultura pura e recente desenvolvida num meio de isolamento.

Incubação:Incube durante 24 horas a 37°C.

Leitura:1. Presença de urease: o meio torna-se vermelho violáceo:

- em 5 a 10 minutos para Proteus morganii e Yersinia enterocolítica- em 2 a 4 horas para outras estirpes de Proteus- em 12 a 18 horas para Klebsiella e várias estirpes de Citrobacter.

Na ausência de urease, a coloração do meio permanece inalterada.2. Ensaio para detecção da produção de indol: após 24 horas de incubação, adicione 4 a 5 gotas do reagente de Kovacs

(código 55313) ao tubo contendo o meio de Ureia Indol inoculado: a presença de indol é revelada pelo desenvolvimento deuma coloração vermelha à superfície do meio.

3. Ensaio para TDA: após 24 horas de incubação, adicione 1 a 2 gotas de Solução de Cloreto Férrico (código 53913) ao tubocontendo o meio Ureia Indol:- coloração vermelha-acastanhada: TDA (+)- coloração laranja-amarelada: TDA (-)

Enterobactérias Urease TDA IndolSalmonella SE I em geral - - -S. typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - dS. boydii, flexneri - - dS. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y. enterocolitica + - dY. pseudotuberculosis + - -K. pneumonia + lenta - -K. oxytoca + lenta - +E. aerogenes - - -K. ozaenae d - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens e liquefaciens - - -Vibrionaceae Urease TDA IndolAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (cultura a 22°C) - - -Plesiomonas shigelloides - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- DESEMPENHO/CONTROLO DE QUALIDADE DO ENSAIO• Aspecto do meio pronto a usar: meio líquido transparente cor de laranja.• As taxas de crescimento do meio Ureia Indol são verificadas com as seguintes estirpes:

ESTIRPES RESULTADO DA CULTURA APÓS 24 horas a 37°CUrease Indol TDA

Escherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

8- CONTROLO DE QUALIDADE DO FABRICANTETodos os reagentes fabricados são preparados de acordo com o nosso Sistema de Qualidade, desde a recepção das matériasprimas até à comercialização final do produto. Cada lote é submetido a avaliações de controlo de qualidade, sendo apenascolocado no mercado se estiver em conformidade com os critérios de aceitação pré-definidas. Os registos relativos à produção econtrolo de cada lote são conservados pela Bio-Rad.

9- LIMITES PARA A SUA UTILIZAÇÃO• Após incubação prolongada, poderá ser induzida uma alcalinização do meio devido à hidrólise das proteínas e não à

presença de urease. Apenas uma rápida alcalinização do meio, no máximo em 24 horas, é característica da actividade daurease bacteriana.

• Não aqueça ou re-aqueça o meio, pois tal poderá provocar a decomposição da ureia.• Em caso de resultados duvidosos, compare o tubo duvidoso com um tubo de controlo não inoculado.

UREA INDOLE 6371363714

MEDIUM FÖR IDENTIFIERING AV ENTEROBACTERIACEAE

1- ANVÄNDNINGSOMRÅDEUrea-indol-medium gör det möjligt att påvisa ureas-, tryptofandeaminas- och indolproduktion (mediet underlättar påvisande avidentifieringsegenskaper för Enterobacteriaceae).

2- PRINCIPBakterier med ureas omvandlar urea till ammoniumkarbonat, vilket framkallar alkalisering och ger mediet en violaktigt röd färg inärvaro av fenolrött (pH-indikator). Indolproduktion påvisas genom tillsats av Kovacs-reagens (kod 55313) som reagerar medindol och bildar en röd färg i mediets övre del vid en positiv reaktion. Närvaron av tryptofandeaminas (TDA) påvisas genomtillsats av ferriklorid (kod 53913) som framkallar en rödbrun färg på mediet vid en positiv reaktion.

3- INNEHÅLL• Medium färdigt att använda:

- Ask med 50 x 1 ml ampuller kod 63713- Ask med 10 x 10 ml ampuller kod 63714

4- TEORETISK SAMMANSÄTTNING (i g/l destillerat vatten)L-tryptofan 3KH2PO4 1K2HPO4 1Natriumklorid 5Urea 2095 % etanol 10 mlFenolrött 0,05

Beredning av mediet:Dispensera under sterila förhållanden 0,25 till 0,50 ml urea-indol-medium i hemolysrör, som vart och ett används för attundersöka olika stammar och/eller utföra olika tester:• För en viss stam kan ett första rör användas för att påvisa ureas- och indolproduktion.• Ett andra rör används då för test av TDA på samma stam.

5- FÖRVARING• Medium färdigt att använda: i +2–8 °C.Utgångsdatum och partinummer står på förpackningen.

6- INSTRUKTIONERMaterial:• Material som medföljer: Urea-indol-medium.• Särskilt material som inte medföljer:

- Hemolysrör- Kovacs-reagens (kod 55313)- Ferrikloridlösning (kod 53913)

Inokulering:Inokulera varje rör rikligt med en ren, färsk odling som tillväxt på ett isoleringsmedium.

Inkubering:Inkubera i 24 timmar i 37°C.

Avläsning:1. Närvaro av ureas: mediet blir violaktigt rött:

- inom 5 till 10 minuter för Proteus morganii och Yersinia enterocolitica- inom 2 till 4 timmar för övriga stammar av Proteus- inom 12 till 18 timmar för Klebsiella och flera stammar av Citrobacter.

I frånvaro av ureas är mediets färg oförändrad.2. Test för indolproduktion: efter 24 timmars inkubering tillsätts 4 till 5 droppar Kovacs-reagens (kod 55313) till röret med

inokulerat urea-indol-medium: om indol förekommer, utvecklas en röd färg på mediets yta.3. Test för TDA: efter 24 timmars inkubering tillsätts 1 till 2 droppar ferrikloridlösning (kod 53913) till röret med inokulerat

urea-indol-medium:- rödbrun färg: TDA (+)- orange-gul färg: TDA (-)

Enterobacteriaceae Ureas TDA IndolSalmonella SE I i allmänhet - - -S. typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - dS. boydii, flexneri - - dS. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y. enterocolitica + - dY. pseudotuberculosis + - -K. pneumonia + långsamt - -K. oxytoca + långsamt - +E. aerogenes - - -K. ozaenae d - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens och liquefaciens - - -Vibrionaceae Ureas TDA IndolAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (odling i 22 °C) - - -Plesiomonas shigelloides - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- TESTRESULTAT/KVALITETSKONTROLL AV TESTET• Mediets utseende (färdigt att använda): klar orange buljong.• Tillväxtresultatet för urea-indol-medium verifieras med följande stammar:

STAMMAR ODLINGSRESULTAT EFTER 24 timmari 37°C

Ureas Indol TDAEscherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

8- TILLVERKARENS KVALITETSKONTROLLAlla reagenser tillverkas och bereds i enlighet med vårt kvalitetssystem, från mottagandet av råmaterial till den slutligamarknadsföringen av produkten. Varje parti genomgår en kvalitetskontroll och släpps endast ut på marknaden om detöverensstämmer med fördefinierade acceptanskriterier. Handlingar som beskriver produktion och kontroll av varje enskilt partisparas hos Bio-Rad.

9- ANVÄNDNINGENS BEGRÄNSNINGAR• Efter förlängd inkubering kan alkalisering av mediet framkallas genom proteinhydrolys i stället för genom närvaro av ureas.

Endast snabb alkalisering av mediet (max. 24 timmar) är karakteristiskt för bakteriell ureasaktivitet.• Mediet får inte värmas eller återuppvärmas, eftersom det kan orsaka nedbrytning av urea.• Vid tveksamma resultat ska det misstänkta röret jämföras med ett kontrollrör som inte inokulerats.

UREA INDOLE 6371363714

MEDIUM TIL IDENTIFIKATION AF ENTEROBAKTERIER

1- FORMÅLUrea Indole-medium muliggør påvisning af urease, tryptophan deaminase og indoleproduktion (mediet er medvirkende tilpåvisningen af identifikationskarakteristika for Enterobakterier).

2- PRINCIPBakterier med en urease omdanner urea til ammoniumcarbonat og forårsager alkalisering, hvilket gør mediet rødlig-violet, nårphenolrød (pH-indikator) er til stede. Indole-produktion påvises ved tilsætning af Kovacs-reagens (kode 55313), som reagerermed indol og giver en rød farve i den øverste del af mediet, hvis der er en positiv reaktion. Tilstedeværelsen aftryptophandeaminase (TDA) påvises ved tilsætning af ferrichlorid (kode 53913), hvilket frembringer en rødbrun farve i mediet,hvis der er en positiv reaktion.

3- PRODUKTETS INDHOLD• Brugsklart medium:

- Æske med 50 x 1 ml ampuller kode 63713- Æske med 10 x 10 ml ampuller kode 63714

4- TEORETISK SAMMENSÆTNING (G/L DESTILLERET VAND)L-Tryptophan 3KH2PO4 1K2HPO4 1Natriumchlorid 5Urea 2095% ethanol 10 mlFenolrødt 0,05

Fremstilling af mediet:Under sterile forhold dispenseres 0,25 til 0,50 ml af Urea-Indol-mediet i hæmolyseglas, som anvendes til at studere forskelligestammer og/eller udføre forskellige test.• For en given stamme kan et første glas anvendes til påvisning af urease og indolproduktion.• Et andet rør kan anvendes til at teste for TDA på samme stamme.

5- OPBEVARING• Brugsklart medium: ved +2-8°C.Udløbsdatoen og partinummeret er angivet på emballagen.

6- BRUGSVEJLEDNINGMaterialer:• Materialer, der medfølger: Urea Indol-medium.• Specifikt materiale, der ikke medfølger:

- Hæmolyseglas- Kovacsreagens (kode 55313)- Ferrichloridopløsning (kode 53913)

Inokulation:Inokuler hvert rør med rigelige mængder ren, frisk kultur dyrket på et isoleringsmedium.

Inkubation:Inkuber i 24 timer ved 37°C.

Aflæsning:1. Forekomst af urease: Mediet bliver rødlig-violet:

- i 5 til 10 minutter for Proteus morganii og Yersinia enterocolitica- i 2 til 4 timer for andre stammer af Proteus- i 12 til 18 timer for Klebsiella og flere stammer af Citrobacter.

Hvis urease ikke er til stede, ændres farven på mediet ikke.2. Test til indolproduktion: Efter 24 timers inkubation tilsættes 4 til 5 dråber Kovacs reagens (kode 55313) til røret med det

inokulerede Urea Indol-medium: Tilstedeværelsen af indol vises ved udviklingen af en rød farve på mediets overflade.3. Test for TDA: Efter 24 timers inkubation tilsættes 1 til 2 dråber Ferrichloridopløsning (kode 53913) til røret med Urea Indol-

mediet.- rødbrun farve: TDA-positiv- gulorange farve: TDA-negativ

Enterobacteriaceae Urease TDA IndolSalmonella SE I generelt - - -S. typhi - - -S. paratyphi A - - -S. arizonae - - -Citrobacter - - -Edwardsiella - - +Escherichia coli - - +Alkalescens dispar - - +S. dysenteriae - - d.S. boydii, flexneri - - d.S. sonnei - - -Proteus vulgaris + + +Proteus mirabilis + + -Proteus rettgeri + + +Proteus morganii + + +Providencia - + +Levinea - - +Y. enterocolitica. + - d.Y. pseudotuberculosis + - -K. pneumonia + langsom - -K. oxytoca + langsom - +E. aerogenes - - -K. ozaenae d. - -K. rhinoscleromatis - - -E. cloacae - - -E. agglomerans - - -Hafnia alvei - - -Serratia marcescens and liquefaciens - - -Vibrionaceae Urease TDA IndolAeromonas hydrophila - - +A. sobria - - +A. salmonicida (culture at 22°C) - - -Plesiomonas shigelloides - - +Vibrio cholerae 01 - - +Vibrio NAG - - +V. parahaemolyticus - - +V. alginolyticus - - +V. anguillarum - - +

7- KAPACITETS/KVALITETSKONTROL AF TESTEN• Brugsklart mediums præsentation: klar, orange suppe.• Urea Indol-mediets vækstkapacitet kontrolleres med følgende stammer:

STAMMER DYRKNINGSRESULTAT EFTER 24 timerved 37°C

Urease Indol TDAEscherichia coli ATCC 25922 - + -Salmonella Typhimurium ATCC 14028 - - -Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 + - -Proteus vulgaris ATCC 13315 + + +Proteus mirabilis ATCC 25933 + - +

8- PRODUCENTENS KVALITETSKONTROLAlle producerede reagenser fremstilles ifølge vores kvalitetssikringssystem, lige fra modtagelsen af råmaterialerne tilmarkedsføringen af slutproduktet. Hvert parti af slutproduktet gennemgår kvalitetskontrol og markedsføres kun, hvis det opfylderde foruddefinerede kvalitetskriterier. Dokumentation vedrørende produktion og kontrol af hvert parti opbevares inden forvirksomheden.

9- BEGRÆNSNINGER FOR BRUG• Efter en længere inkubation kan alkalisering af mediet fremkaldes ved proteinhydrolyse og ikke ved tilstedeværelse af

urease. Kun hurtig alkalisering af mediet, på maks. 24 timer, er karakteristisk for bakteriel ureaseaktivitet.• Mediet må ikke opvarmes eller genopvarmes, da det kan forårsage nedbrydning af urea.• I tilfælde af tvivlsomme resultater sammenlignes det mistænkelige glas med et ikke-inokuleret glas.

UREA-INDOL 63713 63714 KÖZEG ENTEROBAKTÉRIUMOK IDENTIFIKÁLÁSÁHOZ

1- FELHASZNÁLÁS Az urea-indol közeggel kimutatható az ureáz, a triptofán-dezamináz és az indoltermelés (a közeg segítséget nyújt az enterobaktériumok azonosításra alkalmas tulajdonságainak kimutatásában).

2- ALAPELV Az ureázzal rendelkező baktériumok ammónium-karbonáttá alakítják a karbamidot, s ezzel lúgossá teszik a közeget. Ennek hatására fenolvörös (pH-indikátor) jelenlétében ibolyavörös színt ölt a közeg. Az indoltermelést Kovács reagens (kódszáma 55313) hozzáadásával mutathatjuk ki, amely az indollal reagálva piros színt fejleszt a közeg felszínén, ha pozitív a reakció. A triptofán-dezamináz (TDA) jelenlétét vas(III)-klorid (kódszáma 53913) hozzáadásával mutatjuk ki , amely pozitív reakció esetén vörösesbarnára színezi a közeget.

3- CSOMAGOLÁS • Felhasználásra kész közeg:

- 50 db 1 ml-es ampullát tartalmazó doboz kódszám 63713 - 10 db 10 ml-es ampullát tartalmazó doboz kódszám 63714

4- ELVI ÖSSZETÉTEL (g/l desztillált víz) L-triptofán 3 KH2PO4 1 K2HPO4 1 Nátrium-klorid 5 Karbamid 20 95%-os etanol 10 ml Fenolvörös 0,05 Végső pH-érték: 6,8 ± 0,2. A táptalaj elkészítése: Steril körülmények között mérjünk be 0,25—0,50 ml urea-indol közeget hemolízis csövekbe, amelyek mindegyikét más és más törzs vizsgálatára, vagy különböző próbák elvégzésére szánunk: • Ha adott törzsre vizsgálunk, akkor az első csövet használhatjuk az ureáz és az indoltermelés

kimutatására. • A második csövet ekkor ugyanezen törzs TDA termelésének vizsgálatára használjuk.

5- TÁROLÁS • A felhasználásra kész közeget +2-8°C között tároljuk. A szavatossági idő és a gyártási sorozat száma a csomagoláson olvasható.

6- HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ Anyag: • A forgalmazó által szállított Urea-indol közeg. • Szükséges, de nem szállított anyagok és eszközök:

- Hemolízis csövek - Kovács reagens (kódszám 55313) - Vas(III)-klorid oldat (kódszám 53913).

Beoltás: Mindegyik csőbe oltsunk le bőségesen izoláló közegen tenyésztett tiszta, friss kultúrából. Inkubálás: Inkubáljunk 24 órán át, 37°C-on.

Leolvasás: 1. Ureáz jelenléte: a közeg ibolyapiros színt ölt:

- 5—10 percen belül a Proteus morganii-nál és a Yersinia enterocolitica-nál, - 2—4 órán belül egyéb Proteus törzseknél, - 12—18 órán belül Klebsiella-nál és több Citrobacter törzsnél.

Ha nincs jelen ureáz, akkor a közeg színe nem változik. 2. Indoltermelés: 24-órás inkubálás után adjunk 4—5 cseppnyi Kovács reagenst (kódszám 55313) az urea-indol közeges, beoltott csőbe: ha van benne indol, akkor piros szín fejlődik a közeg felszínén. 3. TDA-próba: 24-órás inkubálás után, adjunk 1—2 cseppnyi vas(III)-klorid oldatot (kódszám 53913) az urea-indol közeges csőbe:

- vörösesbarna szín: TDA (+) - narancssárga-sárga szín: TDA (-)

Enterobacteriaceae Ureáz TDA Indol Salmonella SE I általában - - - S. typhi - - - S. paratyphi A - - - S. arizonae - - - Citrobacter - - - Edwardsiella - - + Escherichia coli - - + Alkalescens dispar - - + S. dysenteriae - - d S. boydii, flexneri - - d S. sonnei - - - Proteus vulgaris + + + Proteus mirabilis + + - Proteus rettgeri + + + Proteus morganii + + + Providencia - + + Levinea - - + Y. enterocolitica + - d Y. pseudotuberculosis + - - K. pneumonia + lassú - - K. oxytoca + lassú - + E. aerogenes - - - K. ozeanae d - - K. rhinoscleromatis - - - E. cloacae - - - E. agglomerans - - - Hafnia alvei - - - Serratia marcescens és liquefaciens

- - -

Vibrionaceae Ureáz TDA Indol Aeromonas hydrophila - - + A. sobria - - + A. salmonicida (22°C-os tenyésztés)

- - -

Plesiomonas shigelloides - - + Vibrio cholerae 01 - - + Vibrio NAG - - + V. parahaemolyticus - - + V. alginolyticus - - + V. anguillarum - - +

7- MINŐSÉG/A KÖZEG MINŐSÉGÉNEK ELLENŐRZÉSE • A felhasználásra kész közeg megjelenése: víztiszta, narancssárga bouillon. • Az Urea-indol közeg szaporítóképességét az alábbi törzsekkel ellenőrizzük:

TÖRZSEK EREDMÉNYEK 24-órás, 37°C-os TENYÉSZTÉS UTÁN

Ureáz Indol TDA

Escherichia coli ATCC 25922 - + - Salmonella Typhimurium ATCC 14028

- - -

Providencia alcalifaciens ATCC 27970

- + +

Proteus vulgaris ATCC 13315 + + + Shigella sonnei ATCC 25931 - - - Yersinia enterocolitica ATCC 23715

+ + -

8- A GYÁRTÓNÁL FOLYÓ MINŐSÉGELLENŐRZÉS Az összes termékünk a saját minőségellenőrző rendszerünk szerint készült, a nyersanyag átvételétől kezdve a termék forgalmazásáig. Minden egyes gyártási sorozat minőségét ellenőrizzük, és csak akkor hozzuk forgalomba, ha az megfelel az előre felállított kritériumoknak. Minden sorozat gyártási és minőségellenőrzési jegyzőkönyve megtalálható a Bio-Radnál.

9- AZ ALKALMAZÁS KORLÁTAI • Hosszabb inkubálás után nemcsak az ureáz jelenléte, hanem a fehérjék hidrolizise miatt is lúgossá válhat

a közeg. Kizárólag a hamar, legfeljebb 24 órán belül bekövetkező lúgosodás jellemző a bakteriális ureázra.

• Ne melegítsük a közeget, mert attól lebomolhat a karbamid. • Kétes eredmény esetén hasonlítsuk össze a gyanúsnak talált csövet egy beoltatlan kontrollcsővel.