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TECNICAS PARA EL ESTUDIO DE LOS PROTOZOARIOS PARASITOS
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
EAP 10.3: Microbiología y Parasitología
PRÁCTICA N º 3:
¨TÉCNICAS PARA EL ESTUDIO DE LOS PROTOZOARIOS PARÁSITOS ¨
PROFESORA: Mg. Rosa Martínez Rojas
INTEGRANTES: CÓDIGO:
Purca Segura, Noel Ángel. 11100086
FECHA-PRACTICA: 15/09/2011
FECHA-ENTREGA: 22/10/2011
GRUPO: ¨1¨
TURNO: VIERNES 14:00 – 18:00 hrs.
Ciudad universitaria, abril 2013
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TECNICAS PARA EL ESTUDIO DE LOS PROTOZOARIOS PARASITOS
IMPORTANCIA
Diagnosticar patologías propiciando su prevención y/o detección precoz
(enteroparasitosis).
Promover el diagnóstico diferencial entre posibles patologías, dando
oportunidad de tratamiento específico (infecciones: parasitarias, micóticas,
bacterianas).
Evaluación de una enfermedad ya instalada contribuyendo a escoger la
mejor conducta terapéutica (hidatodisis).
Estimar actividad o recurrencia de una patología e aprender los diferentes
métodos empleados para un buen diagnóstico parasitológico.
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MÉTODO DIRECTO:
Son los que permiten visualizar directamente parásitos u hongos en un material
patológico, o aislarlos del mismo.
Los parásitos y hongos pueden ser vistos estudiando el material “en fresco” o
mediante coloraciones u otros artificios.
Los materiales pueden ser tratados previamente, para concentrar y/o mejorar la
visualización de parásitos y hongos en ellos.
Elementos normales en las heces
PROCEDIMIENTO:
Muestra: Ciego de Cerdo y heces de perro.
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TECNICAS PARA EL ESTUDIO DE LOS PROTOZOARIOS PARASITOS
En una lámina portaobjeto se colocó una gota de lugol cerca de un extremo y una
gota de suero fisiológico en el otro extremo.
Con un palito de chupete se cogió un poco de muestra y se procedió a diseminar
en los extremos de lugol y suero fisiológico.
Luego se procedió a colocar una laminilla respectivamente.
Después se observó en el microscopio de menor a mayor aumento.
RESULTADOS:
La muestra de Ciego de Cerdo resultó ser NEGATIVA (-), utilizando el método
directo.
La muestra de Heces de perro resultó ser NEGATIVA (-), utilizando el método
directo.
la muestra de ciego de ratón resultó ser POSITIVO (+) para hymenolepis nana y
syphacia sp utilizando el método directo.
Solo se reconoció los elementos normales como granos de almidón, pelo vegetal,
pared celular, gotas de grasa, células vegetales, fibra de algodón, fosfato cálcico
neutro, leucina, ácidos grasos.
MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACION
Esta técnica hace una buena concentración de quistes, huevos y larvas; es la técnica
preferida por la generalidad de los laboratorios. Las formas parasitarias son encontradas
con facilidad pues las preparaciones no utilizan muchos artefactos. Los elementos
parasitarios son recuperados de la capa superficial y los residuos se mantienen en el
fondo del tubo. Con estas técnicas los preparados son más limpios que los obtenidos por
sedimentación.
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Sheater:
Muestra biológica: Heces de perro
PROCEDIMIENTO:
Se agregó un pequeño concentrado de la muestra biológica de heces de perro a un
tubo de plástico.
Luego se añadió solución sheather hasta la mitad del tubo y luego con una bagueta
para homogeneizar la solución con la muestra.
Después se vuelve a añadir la misma solución sheather hasta que llegue al tope
creando una pequeña elevación al final.
Luego se coloca en la parte superior y con la elevación hecha una laminilla y se deja
por unos 15 minutos para que los quistes puedan llegar a la superficie.
Luego de haber esperado los 15 minutos se retira con cuidado al laminilla y se coloca
en una lámina en la cual ya tiene una gota de lugol y observar al microscopio a 10 x.
RESULTADOS:
En los primeros 15 minutos se puso una laminilla en al cual se verifico que el método
si era eficiente ya que se encontraron restos celulares, restos de almidón, pelo vegetal
pero ningún quiste.
Se volvió a agregar una segunda laminilla por unos 15 minutos más, en la cual se
verifico que la muestra era positiva ya que se encontraron quistes de guiardia.
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TECNICAS PARA EL ESTUDIO DE LOS PROTOZOARIOS PARASITOS
Quistes de guardia a 10x
WILLIS- MOLLOY
Muestra biológica: Heces de perro
PROCEDIMIENTO:
Se agregó un pequeño concentrado de la muestra biológica de heces de perro a un
tubo de plástico.
Luego se añadió el cloruro de sodio hasta la mitad del tubo y luego con una bagueta
para homogeneizar la solución con la muestra.
Después se vuelve a añadir la misma solución de cloruro de sodio hasta que llegue al
tope creando una pequeña elevación al final.
Luego se coloca en la parte superior y con la elevación hecha una laminilla y se deja
por unos 15 minutos para que los quistes puedan llegar a la superficie.
Luego de haber esperado los 15 minutos se retira con cuidado al laminilla y se coloca
en una lámina en la cual ya tiene una gota de lugol y observar al microscopio 10x.
RESULTADOS:
En los primeros 15 minutos se puso una laminilla en al cual se verifico que el método
si era eficiente ya que se encontraron restos celulares, restos de almidón, pelo vegetal
pero ningún quiste.
Se volvió a agregar una segunda laminilla por unos 15 minutos más, en la cual se
verifico que la muestra era positiva ya que se encontraron quistes de guardia.
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TECNICAS PARA EL ESTUDIO DE LOS PROTOZOARIOS PARASITOS
Tubo con solución
Quiste de guiardia a 4x
TÉCNICA POR SEDIMENTACIÓN ESPONTÁNEA EN TUBO
Muestra de heces: Perro
En un tubo cónico de centrífuga de 50 ml de capacidad se colocó con un palito de
chupete 3 g. aproximadamente de heces de perro con 20 ml de agua destilada.
Luego se procedió a homogenizar la mezcla con la ayuda del palito de chupete.
Después se vertió la mezcla en otro tubo cónico de centrifuga de 50 ml de
capacidad, filtrándola a través de gasa (2 capas).
Se agito 30 segundos y se dejó reposar 40 minutos.
Después en una lámina portaobjeto se colocó una gota de lugol cerca de un
extremo y una gota de suero fisiológico en el otro extremo.
Con la ayuda de una pipeta Pasteur se extrajo un poco de muestra y se colocó
una gota en cada extremo.
Luego se procedió a colocar una laminilla respectivamente.
Después se observó en el microscopio de menor a mayor aumento.
RESULTADOS:
La muestra de Heces de perro resultó ser NEGATIVA (-), utilizando, técnica por
sedimentación espontánea en tubo.
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Pool de Parásitos fijados
RESULTADO: POSITIVO PARA PARASITOS
Parásitos encontrados:
Diphyllobothrium sp. Balantidium coli
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Hymenolepis nana Tenia sp.
Hymenolepis diminuta
CUESTIONARIO
Mencione el los métodos que se deben utilizar en un laboratorio para un
buen diagnóstico
Método directo.
Método de Concentración.
Método de gradiente de sucrosa.
Método de sedimentación.
Métodos mixtos.
Métodos especiales.
¿Qué métodos resultaría más práctico para concentrar el mayor número de
quistes?
El mejor mostrado en el laboratorio empíricamente para concentrar mayor número
de quistes es el método por concentración por flotación ya sea por Willis –Molloy o
Sheather.
Menciones las diferencias entre el método de Baerman y Sedimentación en
copa.
El método de baerman es comúnmente utilizado para el diagnóstico de larvas de
Strongyloides. Este método es utilizado para el diagnóstico de aquellas muestras
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de heces fecales sospechosas de contener huevos de Fasciola hepática; el
método ha demostrado ser bondadoso para otro tipo de huevos de helmintos e
incluso para quistes de protozoario.
Otra diferencia es que en el método de baerman se coloca la muestra de heces
cuando ya el agua cubre la superficie del tubo con la gasa encima en ves en el
método de sedimentación en copa ya antes de disuelve la muestra de heces con
agua y se le añade más agua hasta la superficie del tubo.
BIBLIOGRAFIA
ARTICULOS CIENTIFICOS:
TERASHIMA, Angélica, MARCOS, Luis, MACO, Vicente et
al. Técnica de sedimentación en tubo de alta sensibilidad
para el diagnóstico de parásitos intestinales. Rev.
gastroenterol. Perú, oct./dic. 2009, vol.29, no.4, p.305-310. ISSN
1022-5129.
Pajuelo Camacho Giovann iRodolfo, Luján Roca Daniel
Angel, Paredes Pérez Bertha,Tello Casanova Raúl. Aplicación de la
técnica de sedimentación espontánea en tubo en el diagnóstico de
parásitos intestinales Rev Biomed 2006; 17(2): 96-101.
WEB:
http://sharon-parasitologia.blogspot.com/2011/09/metodo-de concentracion-
flotacion-de.html
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