Entamoeba histolytica Lipid rakit terlibat dalam adhesi trophozoites host matriks ekstraselular komponen K. Mittal, campuran B.H. dan La Temesvari* Departemen biologi Sciences, Universitas Clemson, Clemson, SC 29634 USA *Penulis untuk korespondensi, Dept of Biological Sciences, 132 panjang Hall, Universitas Clemson, Clemson SC 29634, P: 864-656-6387 begin_of_the_skype_highlighting 864-6566387 end_of_the_skype_highlighting, F: 864-6560435, E: 864-656-6387 begin_of_the_skype_highlighting 864-6566387 end_of_the_skype_highlighting Penerbit versi diedit akhir artikel ini tersedia di Exp Parasitol

PubMed artikel oleh penulis ini Mittal, K. Campuran, B. Temesvari, L. PubMed artikel terkait Keterlibatan membran plasma rakit-seperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Laughlin RC, McGugan GC, Powell RR, berkubang BH, Temesvari LA.Menginfeksi Immun. 2004 Sep; 72 (9): 5349-57. [Menginfeksi Immun. 2004]

Lokalisasi untuk lipid rakit berkorelasi dengan peningkatan fungsi Gal/GalNAc lectin di protozoa parasit manusia, Entamoeba Lihat artikel lainnya di PMC itu mengutip artikel yang histolytica. diterbitkan. Berkubang BH, Goldston AM, Temesvari LA.Int J Penerbit Disclaimer Parasitol. 2011 November; 41(13-14):1409-19. Epub 2011 November 9. Sections lain Abstrak 1. PENDAHULUAN 2. BAHAN-BAHAN DAN METODE 3. HASIL 4. DISKUSI REFERENSI Abstrak Adhesi adalah fungsi penting virulensi Entamoeba histolytica, agen kausatif amoebic disentri. Lipid rakit, kaya kolesterol domain, fungsi dalam kompartementalisasi proses seluler. Di E. histolytica, [Int J Parasitol. 2011] Perubahan membran kolesterol menyebabkan Mobilisasi lipid rakit dari butiran tertentu dan Perdana neutrofil manusia untuk meningkatkan kepatuhan bergantung oksidan produksi. Solomkin JS, Robinson CT, gua CM, Ehmer B, Lentsch AB.Shock. September 2007; 28 (3): 3348. [Shock. 2007] Review Struktur dan fungsi Entamoeba histolytica Gal/GalNAc lectin. Mann BJ.Int Rev Cytol. 2002; 216:59-80.

rakit berpartisipasi dalam parasit-host sel interaksi; Namun, peran mereka dalam interaksi matriks ekstraselular (ECM) parasit-host telah dijelajahi. Gangguan rakit dengan kolesterol yang mengeluarkan agen, metil--cyclodextrin (MCD), mengakibatkan penghambatan adhesi kolagen, dan untuk tingkat yang lebih rendah, fibronectin. Penambahan kolesterol dalam diperlakukan MCD sel, menggunakan berkonsentrasi lipoprotein-kolesterol, dikembalikan adhesi ke kolagen. Mikroskop confocal mengungkapkan pengayaan rakit pada parasit-ECM antarmuka. Penduduk rakit-adhesin, lectin inhibitible galactose/N-acetylgalactosamine, Pengantara interaksi sel dengan galactose atau N-acetylgalactosamine moieties pada host glikoprotein. Dalam studi ini, galactose terhambat adhesi kolagen, namun tidak fibronectin. Bersama-sama data ini menunjukkan bahwa rakit berpartisipasi dalam E. histolytica-ECM interaksi dan yang terkait rakit Gal/GalNAc lectin mungkin berfungsi sebagai reseptor kolagen. Kata kunci:adhesi, kolesterol, kolagen, Entamoeba histolytica, matriks ekstraselular, fibronectin Sections lain Abstrak 1. PENDAHULUAN 2. BAHAN-BAHAN DAN METODE 3. HASIL 4. DISKUSI REFERENSI 1. PENDAHULUAN

[Int Rev Cytol. 2002] Review Royal Society kedokteran tropis dan kebersihan pertemuan di Manson rumah, London, 19 Februari 1998. Amoebic penyakit. Entamoeba histolytica dan E. dispar: perbandingan molekul dianggap penting untuk kerusakan jaringan host. Tannich E.Trans R Soc Trop Med Hyg. 1998 November-Desember; 92 (6): 593-6. [Trans R Soc Trop Med Hyg. 1998] Tampilkan tinjauan... | Melihat semua... Aktivitas

JelasMematikanMenghidupkan Entamoeba histolytica: Lipid rakit terlibat dalam adhesi trophozoites untuk host extrac...Entamoeba histolytica: Lipid rakit terlibat dalam adhesi trophozoites host matriks ekstraselular komponen Aktivitas browsing kosong. Aktivitas rekaman dimatikan. Mengubah rekaman kembali Link Senyawa PubMed Substansi

Entamoeba histolytica adalah patogen usus manusia Taksonomi yang mempengaruhi lebih dari 50 juta orang di seluruh dunia, menuju 100.000 kematian setiap tahun. (ditinjau Taksonomi pohon di Laughlin dan Temesvari, 2005). Dikirimkan oleh jalur kotoran-lisan, menelan bentuk kista infektif terjadi

melalui terkontaminasi makanan dan air. Dalam bentuk pre-invasive penyakit, trophozoites motil, dihasilkan dari excystation di usus atau usus besar, berinteraksi dengan lapisan mucin. Pada tahap invasif amoebiasis, E. histolytica trophozoites pelanggaran epitelium mengsekresikan lendir usus manusia dan pertemuan submucosa, yang terdiri dari jaringan ikat yang longgar, pembuluh darah dan ECM komponen, termasuk kolagen dan fibronectin. Penghancuran epitelium dan ECM yang mengelilingi sel-sel epitel memproduksi botol berbentuk ulcers [Laughlin dan Temesvari, 2005). Manifestasi dihasilkan, termasuk diare dan disentri, adalah keprihatinan besar kesehatan masyarakat dalam mengembangkan dan negara-negara terbelakang. Dalam beberapa kasus, kolon invasi dapat mengakibatkan penyebaran trophozoites extraintestinal situs seperti hati, paru-paru, dan otak melalui sistem vaskular portal (Laughlin dan Temesvari, 2005). Dengan demikian, adhesi ECM komponen dan degradasi berikutnya mereka memfasilitasi invasi, dan adalah langkah penting dalam Patogenesis of amoebiasis. Beberapa baris bukti menunjukkan bahwa adhesi E. histolytica untuk ECM dapat disamakan dengan fokus pelekatan lebih tinggi eukariota [Talamas-Rohana dan Meza, 1988; de Lourdes et al., 2001). Interaksi ini juga dipercaya untuk mengaktifkan jalur transduksi sinyal parasit dan virulensi (Talamas-Rohana dan Meza, 1988; de Lourdes et al., 2001; Cruz Vera et al., 2003; Debnath et al, 2004; Perez et al., 1996; Perez et al., 1998; FloresRobles et al., 2003; Franco et al, 2002; Talamas-Rohana dan Rios, 2000). Sebagai contoh, paparan dari E. histolytica kolagen menginduksi reorganisasi tonjolan kedua dalam trophozoites dan fosforilasi tirosina residu pada homolog E. histolytica dari pp125FAK (de Lourdes et al., 2001; Perez et al., 1996). pp125FAK adalah FAK cytosolic yang muncul untuk adhesi plak (Perez et al., 1996). Paparan dari E. histolytica kolagen juga merangsang pp125FAK asosiasi dengan paxillin dan fosforilasi p42MAPK (Perez et al., 1996), kinase peta yang mungkin menyebarkan sinyal berbasis kolagen

dari membran plasma untuk inti Src (Perez et al., 1998). Bertemu kolagen juga meningkatkan DNA mengikat tiga faktor-faktor transkripsi E. histolytica , AP-1 (Perez et al., 1998), STAT1 dan STAT3 (Cruz Vera et al., 2003), yang, pada gilirannya, dapat mengatur perubahan dalam ekspresi gen. Mendukung dari ini, kolagen eksposur mengakibatkan peningkatan ekspresi amoebapore dan sistein protease (Debnath et al, 2004), dua dikeluarkan protein yang memainkan peran dalam kerusakan jaringan host. Mengikat E. histolytica trophozoites untuk komponen ECM kedua, fibronectin, juga menginduksi tonjolan reorganisasi (TalamasRohana dan Meza, 1988; Talamas-Rohana dan Rios, 2000), fosforilasi pp125FAK (Flores-Robles et al., 2003), pp125FAK asosiasi dengan paxillin dan vinculin (FloresRobles et al., 2003), dan aktivasi protein kinase (Franco et al, 2002), enzim yang terlibat dalam g protein ditambah reseptor signaling. Karena terpapar ECM komponen tampaknya upregulate signaling peristiwa yang memodulasi virulensi, pemahaman yang lebih baik dari adhesi ECM dapat memberikan wawasan ke dalam mekanisme patogen. Bukti baru-baru ini menunjukkan bahwa sangat memerintahkan kolesterol dan Sfingolipid kaya microdomains, disebut lipid rakit, terdapat pada membran plasma E. histolytica (Laughlin et al, 2004). Pada eukariota yang lebih tinggi, rakit diperkirakan pelabuhan khusus transmembran, terhubung Internet, dan dually prekursor glukosamina protein (ditinjau di Maxfield, 2002; Simons dan Toomre, 2000). Mereka juga berpikir untuk melayani sebagai signaling platform di mana adhesi/pensinyalan molekul, seperti integrins, mengumpulkan cara bergantung pada sinyal (Maxfield, 2002; Simons dan Toomre, 2000). Dalam E. histolytica, rakit telah menunjukkan untuk memainkan peran dalam endositosis dan adhesi ke sel inang (Laughlin et al, 2004). Selain itu, protein penting kepatuhan dari E. histolytica, Gal/GalNAc lectin, diterjemahkan untuk ini membran microdomains (Laughlin et al, 2004). Gal/GalNAc lectin adalah heterotrimer yang terdiri dari cahaya, menengah, dan berat subunit, dan mengikat

untuk galactose dan N-acetylgalactosamine residu host glycoconjugates mucin, sel-sel epitel dan eritrosit (Adler et al., 1995; Ravdin dan Guerrant, 1981; Petri et al, 2002). Mengingat bahwa rakit berpartisipasi dalam sel-matrix interaksi pada sistem lain (Ramprasad et al., 2007; Gopaladrishan et al., 2000), hal ini dibayangkan bahwa lipid rakit mungkin juga memainkan peran dalam interaksi E. histolytica dengan host ECM. Selain itu, lipid adhesi penduduk rakit-molekul, seperti Gal/GalNAc lectin, mungkin menengahi fungsi rakit. Dalam studi sekarang, kita telah meneliti peran lipid rakit dalam adhesi E. histolytica trophozoites dengan elemen-elemen host ECM. Di sini, kami menunjukkan bahwa gangguan rakit menghambat adhesi ke host ECM, dan bahwa rakit terakumulasi di parasit-ECM antarmuka. Selain itu, kami menunjukkan bahwa lectin Gal/GalNAc mungkin menengahi interaksi kolagen namun tidak fibronectin. Bersama-sama data ini menunjukkan peran rakit dan protein mereka penduduk di E. histolytica interaksi dengan host ECM. Sections lain Abstrak 1. PENDAHULUAN 2. BAHAN-BAHAN DAN METODE 3. HASIL 4. DISKUSI REFERENSI 2. BAHAN-BAHAN DAN METODE 2.1 Strain dan budaya kondisi E. histolytica trophozoites, ketegangan HM-1:IMSS, yang berbudaya axenically di TYI-S-33 media dalam tabung kaca sekrup-cap pada 37 C (Diamond et al., 1978). Log fase yang dipanen trophozoites digunakan untuk semua percobaan.

2.2 Pengukuran E. histolytica adhesi Untuk menilai parasit-ECM interaksi, kami mengembangkan sebuah assay disesuaikan fluoresens yang didasarkan pada tes serupa yang digunakan untuk menilai mengikat E. histolytica trophozoites untuk sel epitel inang (Powell et al., 2006). E. histolytica trophozoites diberi label dengan calcein g/ml 5 AM (Invitrogen, Carlsbad, CA), hijau neon penting noda, pada 37 C, untuk 60 menit dalam serum-free media (TYI-33). Sel-sel ini yang kemudian unggulan ke komersial kolagen jenis saya atau fibronectin-berlapis 96-baik piring (BD Cellware, Bedford, MA). Setelah inkubasi pada 37 C, sumur lembut dicuci dua kali dengan hangat PBS untuk menghapus sel-sel nonpenganut. Fluoresens relatif (ukuran adhesivity) dinilai menggunakan fluoresens piring pembaca (Model FLX800, BioTek instrumen, Winooski, VT). Atau, jumlah sel-sel yang taat ditentukan oleh menghitung bidang 5 per baik pada pembesaran 400 X pada Olympus CK2 terbalik mikroskop cahaya. Jumlah sel unggulan ke sumur untuk percobaan selanjutnya, serta masa inkubasi, ditentukan secara empiris oleh memeriksa berbagai sel konsentrasi dan berbagai inkubasi kali. Untuk menguji peran lipid rakit, adhesi tes dilakukan dengan trophozoites yang telah diperlakukan dengan berbagai konsentrasi kolesterol semakin menipis agen, MCD (Sigma-Aldrich, St Louis, MO), selama 30 menit terakhir dari calcein AM noda. Atau, adhesi tes dilakukan dengan tidak diobati atau diperlakukan MCD sel-sel yang terkena sumber kolesterol, lipoprotein-kolesterol berkonsentrasi (LCC) (57 mg/dl kolesterol) (MP Biomedicals, Solon, OH), selama 15 menit pada 37 C. Analisis oleh vendor banyak digunakan di seluruh studi menunjukkan bahwa LCC terdiri dari kolesterol (1548 mg/dL), trigliserida (7%), protein (4,5 mg/dL), klorida (50 milliequivalent unit/L), amonia (56 M), kalsium (5 mg/dL), dan natrium (98 milliequivalent unit/L). Jika berlaku, adhesi data dikoreksi untuk sedikit kerugian dalam sinyal

fluoresens berkat MCD pengobatan. Untuk menguji jika Gal/GalNAc lectin terlibat dalam adhesi ECM, adhesi Asai dilakukan di hadapan dari berbagai konsentrasi D(+) galactose (Sigma-Aldrich) atau 100 mM manosa (control) (Sigma-Aldrich) (Adler et al., 1995; Ravdin dan Guerrant, 1981). Dalam semua kasus, adhesi data dilaporkan persen kontrol, yang sewenang-wenang ditetapkan untuk 100%. 2.3 Confocal mikroskop Trophozoites diizinkan untuk mematuhi kolagen jenis saya atau fibronectin-berlapis cover slip (BD Biosciences) di media bebas serum. Setelah inkubasi pada 37 C selama 15 menit, media disedot dan sel-sel non-penganut dihapus cuci dua kali dengan hangat PBS. Sel-sel yang ditetapkan oleh pengobatan dengan 4% (vol/vol) paraformaldehyde selama 10 menit pada suhu kamar dan kemudian diinkubasi dengan neon lipid rakit noda, DiIC16 (Nguyen dan Hildreth, 2000) (4,5 mM; Invitrogen), selama 10 menit. Slip cover kemudian dicuci dua kali dengan PBS, dipasang di PBS, dan mengamati menggunakan laser confocal LSM 510 pemindaian mikroskop (Carl Zeiss MicroImaging, Inc, Thornwood, NY). Adhesi trophozoites untuk coat kaca penutup slip digambarkan sebagai kontrol. 2.4 Statistik analisis Nilai-nilai semua diwakili sebagai rata-rata hasil dari setidaknya tiga persidangan ( standar deviasi [SD]). Analisis statistik yang dilakukan menggunakan GraphPad Instat (versi 3.05; IBM) dengan ANOVA. Pnilai kurang dari 0,05 dianggap signifikan secara statistik (*). P-nilai kurang dari 0,01 dianggap sangat secara statistik signifikan (*). Nilai-nilai50 IC dihitung dengan menggunakan baris paling cocok yang dihasilkan oleh tabel Curve2D versi 5,01 (Systat Software Inc., San Jose, CA). Sections lain

Abstrak 1. PENDAHULUAN 2. BAHAN-BAHAN DAN METODE 3. HASIL 4. DISKUSI REFERENSI 3. HASIL 3.1 Pengembangan assay adhesi throughput yang tinggi untuk kuantifikasi adhesi E. histolytica kolagen dan fibronectin Untuk menilai peran lipid rakit dalam parasit-host ECM interaksi, kami mengembangkan throughput yang tinggi assay untuk Kuantifikasi ini fungsi selular. Secara khusus, kami disesuaikan assay adhesi standar yang digunakan untuk mengukur adhesi E. histolytica sel epitel sel (Powell et al., 2006). Trophozoites bernoda dengan calcein AM, senyawa permeant membran yang mengalami oleh intraselular esterases dalam sel-sel hidup ke membran impermeant sitoplasmik celupan (Boyle, 2004). Untuk menentukan jika calcein AM noda dihambat adhesi untuk ECM, jumlah yang sama calcein AM bernoda atau tidak dicemarkan sel ditambahkan ke sumur kolagen jenis saya atau fibronectin-berlapis pencampur piring. Jumlah sel-sel yang taat ditentukan oleh menghitung 5 bidang per baik menggunakan mikroskop cahaya. Jumlah sel-sel penganut yang tidak dicemarkan ini tidak berbeda dari calcein AM bernoda taat sel (Fig. 1), menunjukkan bahwa calcein AM tidak mempengaruhi adhesi kolagen atau fibronectin. Gambar 1 Calcein AM tidak menghambat adhesi E. histolytica untuk ECM

Meningkatnya jumlah sel bernoda AM calcein kemudian ditambahkan ke sumur berturut-turut di piring dilapisi. Setelah inkubasi selama 15 menit, nonpenganut sel dihilangkan dengan lembut mencuci. Tingkat adhesi diukur dengan menilai fluoresens intensitas taat sel yang menggunakan spectrofluorometry. Intensitas relatif fluoresens meningkat secara linear dengan jumlah sel jarak konsentrasi (Fig. 2). Peningkatan ini linear, yang diamati untuk kedua berlapis ECM permukaan, menunjukkan bahwa ini assay otentik menilai adhesi E. histolytica ECM komponen. Berdasarkan pengamatan ini, jumlah sel rata-rata 2,5 104 sel per baik dipilih untuk percobaan berikutnya. Masa inkubasi 15 menit sudah terbukti optimal dan digunakan untuk semua adhesi Asai (data tidak ditampilkan). Gambar 2 Kurva standar untuk E. histolytica adhesi untuk ECM

3.2 Mengganggu rakit agen, MCD, menurun adhesi untuk ECM dalam mode bergantung pada dosis MCD adalah heptasaccharide permukaan-bertindak, siklik yang selektif ekstrak membran kolesterol oleh encapsulating di tengah hidrofobik inti (Irie et al. 1992; Pitha et al., 1988). Telah digunakan dalam banyak

sistem, termasuk E. histolytica, untuk menilai peran rakit membran dalam proses selular (Laughlin et al, 2004; Ramprasad et al., 2007; Huang et al., 2006a). Untuk menentukan jika lipid rakit yang terlibat dalam adhesi E. histolytica kolagen atau fibronectin, kita meneliti adhesi trophozoites untuk ECM berlapis piring setelah gangguan biokimia lipid rakit menggunakan MCD seperti yang dijelaskan sebelumnya (Laughlin et al, 2004). Adhesi fibronectin kolagen dan menurun dalam mode bergantung pada dosis setelah pengobatan dengan MCD (Fig. 3). Untuk sel diperlakukan MCD maupun tidak diobati, lebih dari 86% dari sel tetap layak selama percobaan, seperti yang ditentukan oleh trypan biru pengecualian (data tidak ditampilkan). Ini menunjukkan bahwa perubahan diamati dalam adhesi adalah Efek fisiologis kolesterol penipisan, dan bukan hasil dari penurunan sel kelangsungan hidup. Gambar 3 MCD-mediated penghambatan adhesi kolagen dan fibronectin

IC50 dari MCD untuk adhesi trophozoites untuk kolagen bertekad untuk menjadi 15 mM. Namun, ini konsentrasi MCD ini hanya dapat menghambat adhesi ke fibronectin sekitar 82% menunjukkan bahwa adhesi kolagen lebih sensitif terhadap raft gangguan dari adhesi ke fibronectin. Bersama-sama dengan pengamatan bahwa sel tetap layak selama pengobatan, sensitivitas diferensial ini mendukung gagasan bahwa penghambatan adhesi kolagen oleh MCD otentik dan bukan hasil spesifik efek yang merugikan pada proses selular. 3.3 Ekstraselular sumber kolesterol membalikkan MCD-induced penghambatan adhesi ke kolagen

Untuk menentukan apakah MCD-induced penghambatan adhesi ECM permanen atau reversibel, dan untuk menentukan apakah efek dari MCD adalah karena kolesterol penipisan, tidak diobati dan mengganggu rakit (MCD-diperlakukan) sel terkena sumber ekstraselular kolesterol sebagai alat untuk mengisi selular membran dengan kolesterol. Karena E. histolytica trophozoites tidak dapat menggunakan gratis kolesterol (Mata-Cardenas et al., 2000), dan cenderung menghadapi kolesterol host sebagai sebuah konjugat lipoprotein, kami menggunakan berkonsentrasi komersial lipoprotein-kolesterol, LCC, untuk memasok lipid. Perawatan kontrol sel dengan LCC secara signifikan ditingkatkan adhesi kolagen sementara perlakuan terhadap sel-sel yang terganggu rakit dengan LCC dikembalikan adhesi ke kolagen (Fig. 4A). Data ini menunjukkan bahwa efek penghambatan MCD perawatan di parasit-kolagen interaksi, memang, mungkin hasil dari hilangnya lipid. Efek pengobatan LCC trophozoites berinteraksi dengan fibronectin yang lebih bervariasi. Meskipun perubahan diamati, ini adalah tidak signifikan secara statistik, mendukung menemukan bahwa interaksi rhizaria dengan komponen ECM ini kurang sensitif terhadap perubahan kolesterol. Fig. 4 Efek pengobatan LCC pada adhesi kolagen dan fibronectin

Kami tidak mengesampingkan kemungkinan bahwa komponen lain LCC ditingkatkan adhesi trophozoites untuk kolagen melalui mekanisme rakit-independen, dan penyelamatan diamati penghambatan adhesi pada kolagen adalah aditif hasil dari mekanisme bergantung

pada rakit dan rakit-independen. Namun, hasil diferensial LCC perawatan di adhesi kolagen versus fibronectin mendukung keaslian pengamatan. Penting, menggunakan repletion kolesterol setelah gangguan rakit sebagai pendekatan yang sukses untuk menunjukkan peran tertentu lipid rafts dalam berbagai proses fisiologis (Huang et al., 2006a; Zeng dan Terada, 2001; Li et al., 2006; Qin et al., 2006). 3.4 Microdomains rakit terakumulasi di situs parasit ECM kontak Karena mengganggu rakit agen dihambat adhesi, itu dibayangkan bahwa rakit mungkin menengahi parasitECM interaksi, dengan demikian terakumulasi di situs tersebut. Untuk menentukan jika rakit microdomains diperkaya pada situs ini trophozoite-ECM kontak, kita diperbolehkan E. histolytica trophozoites untuk mematuhi coat atau ECM dilapisi cover slip dan sel-sel ini bernoda neon lipid rakit noda, DiIC16 (Laughlin et al, 2004; Nguyen dan Hildreth, 2000). Fluoresens menonjol, dan dibentuk seperti renda-pola, pada permukaan sel yang berhubungan dengan kolagen (Fig. 5A, B). Sebaliknya, DiIC16-noda minimal diperkaya pada permukaan sel kontak dengan fibronectin atau penutup coat slip (Fig. 5 C-F). Selain noda, nominal pada permukaan non-penganut sel (Fig. 5 G-L). Untuk lebih lanjut mengeksplorasi akumulasi rakit membran dekat tempat kontak ECM, kami dihasilkan rekonstruksi tiga dimensi yang menggunakan berturut-turut planar confocal gambar dan dilihat sel dalam bidang X-Z. Gambar-gambar berikutnya ini lebih lanjut menunjukkan akumulasi dramatis rakit-seperti membran pada membran sel dekat permukaan kolagen (Fig. 5 M). Selain itu, gambar-gambar ini mengungkapkan akumulasi sedikit membran rakitseperti pada sel-sel dekat fibronectin permukaan (Fig. 5N). Akumulasi ini tidak mudah terlihat dalam pesawat fokus individu (Fig. 5C, D). Akhirnya, akumulasi tidak spesifik membran rakit-seperti terlihat untuk sel pada permukaan coat (Fig. 5E, F, K, L, O). Sebaliknya, dalam sel kontrol ini, DiIC16-domain bernoda diamati

didistribusikan seragam di sepanjang membran plasma sel. Bersama-sama, pengamatan ini menyarankan bahwa rakit mengumpulkan pada parasit-kolagen antarmuka, dan perluasannya di parasit-fibronectin antarmuka. Untuk setiap permukaan, parameter optik disesuaikan untuk memeriksa kemungkinan noda di permukaan non-penganut. Jadi, perbandingan kuantitatif DiIC16-bernoda domain di antarmuka dengan fibronectin kolagen dan tidak dapat dibuat. Namun, kami percaya bahwa kita mencerminkan keterlibatan tertentu lipid rakit dalam interaksi E. histolytica sel dengan kolagen. Gambar 5 Lipid rakit diperkaya pada parasitECM antarmuka

3.5 The Gal/GalNAc lectin mungkin terlibat dalam adhesi kolagen, namun tidak fibronectin Karena lipid rakit mungkin terlibat dalam adhesi parasit untuk ECM, mungkin bahwa reseptor fibronectin kolagen dan berada dalam domain ini. Sampai saat ini, hanya satu reseptor, Gal/GalNAc lectin, telah ditunjukkan untuk tinggal di rakit (Laughlin et al, 2004). Karena kolagen dan fibronectin post-translationally galactosylated (Myllyharju, 2005; Glselam et al, 1997) Hal ini juga dibayangkan bahwa Gal/GalNAc lectin mungkin menengahi interaksi parasit dengan komponen-komponen host ini. Untuk menentukan jika Gal/GalNAc lectin diatur adhesi kolagen dan fibronectin, kita diukur trophozoite adhesi berlapis ECM piring di hadapan dari berbagai konsentrasi galactose yang akan bertindak sebagai inhibitor kompetitif mengikat Gal/GalNAc. Sebagai kontrol, adhesi juga diuji di hadapan para 100 mM manosa, yang tidak menghambat interaksi E. histolytica untuk host sel glycoconjugates (Adler et al., 1995; Ravdin dan Guerrant, 1981).

Hasil kami menunjukkan bahwa galactose secara signifikan menurun adhesi kolagen dalam mode bergantung pada dosis, sementara manosa diberikan tidak berpengaruh signifikan pada adhesi ini substrat (Fig. 6A). Ini menunjukkan bahwa lectin Gal/GalNAc mungkin diduga terkait rakit reseptor untuk kolagen. IC50 dari galactose untuk proses adhesi ini bertekad untuk menjadi 30 mM. Galactose ditemukan untuk mengerahkan pengaruh penghambatan yang minimal pada adhesi trophozoites untuk fibronectin (Fig. 6B), menyatakan bahwa reseptor selain Gal/GalNAc lectin mungkin terlibat dalam adhesi ke substrat ini. Angka 6 Galactose menghambat adhesi kolagen namun tidak fibronectin

Sections lain Abstrak 1. PENDAHULUAN 2. BAHAN-BAHAN DAN METODE 3. HASIL 4. DISKUSI REFERENSI 4. DISKUSI Dalam studi ini, kami telah meneliti peran lipid rakit dalam interaksi E. histolytica dengan unsur-unsur host ECM, kolagen fibronectin. Biokimia gangguan rakit mengakibatkan penurunan bergantung pada dosis trophozoite adhesi kolagen, dan penurunan sedikit trophozoite adhesi fibronectin. LCC perawatan habis

kolesterol sel juga mengakibatkan pembalikan hampir lengkap MCD yang disebabkan penurunan adhesi kolagen. Bersama-sama, data ini menunjukkan bahwa kolesterol kaya membran domain berpartisipasi dalam adhesi kolagen, dan untuk tingkat yang lebih rendah, fibronectin. Dalam dukungan lebih lanjut ini, mikroskopi fluoresens menunjukkan pengayaan signifikan dari lipid rafts pada antarmuka parasitkolagen dan pengayaan lebih rendah dari microdomains ini pada antarmuka fibronectin parasit. Akhirnya, Gal/GalNAc lectin, protein penduduk lipid rakit (Laughlin et al, 2004), mungkin menengahi adhesi kolagen, tetapi mungkin tidak akan terlibat dalam adhesi fibronectin. Anehnya, biokimia rakit gangguan mampu sepenuhnya menghapuskan Adhesi sel E. histolytica ECM. Sebagai contoh, pada dosis 15 mM MCD, ada ~ 50% dan ~ 18% penurunan adhesi trophozoites kolagen atau fibronectin, masing-masing (Fig. 3). Penjelasan untuk ini mungkin terletak pada model yang diusulkan untuk organisasi lipid dalam rakit (Ilangumaran dan Hoessli, 1998). Menurut model ini, sebagian kecil dari kolesterol, dalam inti Sfingolipid kaya domain, tahan terhadap ekstraksi oleh MCD. Pucadyil et al. (2004) menyelidiki isi kolesterol membran makrofaga setelah pengobatan dengan 10 mM MCD dan menemukan 40% penurunan kolesterol. Jadi, mungkin bahwa, dalam studi sekarang, kolesterol dalam rakit lipid tidak benar-benar habis oleh MCD perawatan, dan ini dapat menjelaskan adhesi sisa. Di sisi lain, lengkap penghambatan adhesi mungkin juga menyarankan bahwa tambahan rakit-independen mekanisme yang terlibat dalam adhesi ECM. Mengingat pentingnya adhesi ke E. histolyticvirulensi, itu tidak akan mengejutkan jika patogen memiliki beberapa mekanisme berinteraksi dengan host. Berbagai mekanisme differentially dapat digunakan tergantung pada komponen host, serta negara tuan rumah komponen yang bersangkutan. Sebagai contoh, galactose dapat memblokir penyerapan fagositik sel

sehat sekitar 80% (Huston et al., 2003), menunjukkan bahwa Gal/GalNAc lectin secara signifikan menyumbang untuk proses ini. Sebaliknya, galactose blok fagositik uptake of apoptotic sel inang 40% (Huston et al., 2003), menunjukkan bahwa mekanisme selain Gal/GalNac-mediated adhesi berpartisipasi dalam interaksi parasit-host. Di sini kami menunjukkan bahwa trophozoites differentially dipengaruhi oleh MCD, LCC dan galactose ketika berinteraksi dengan kolagen atau fibronectin menyarankan bahwa mekanisme yang berbeda mungkin mengatur proses ini. Perilaku diferensial trophozoites kolagen dan fibronectin, setelah perawatan dengan MCD atau LCC, atau di hadapan para galactose, juga menunjukkan bahwa kita tidak karena untuk aktivitas spesifik reagen. Dalam sebuah studi sebelumnya, ditunjukkan bahwa 15 mM MCD diblokir E. histolytica Adhesi sel epitel sekitar 25% (Laughlin et al, 2004). Dalam penelitian ini, 15 mM MCD diblokir adhesi kolagen oleh sekitar 50%. Oleh karena itu, mekanisme molekuler yang mengatur parasit Adhesi sel juga mungkin berbeda dari orangorang yang mengatur adhesi ECM. Pemahaman lengkap tentang E. histolytica-host interaksi akan memerlukan wawasan ke dalam semua mode ini interaksi. Peran lipid rakit dalam sel-ECM interaksi telah menyelidiki dalam jumlah organisme lain. Penting, semua dari studi ini menunjukkan korelasi positif antara membran kolesterol dan adhesivity untuk ECM substrat. Sebagai contoh, di fibroblasts berubah dengan polyoma virus, peningkatan membran kolesterol konten mengembalikan transformasi yang berhubungan dengan hilangnya adhesivity (Kaur et al, 2004). Selain itu, Huang et al. (2006b) menunjukkan bahwa gangguan lipid rakit di lini sel kanker manusia menghambat mereka adhesi kolagen, fibronectin, dan laminin, sehingga mempengaruhi langkah penting dalam invasi tumor dan metastasis. Dalam sistem murine, lipid rakit membran pecahan ditemukan

berhubungan dengan otak yang diturunkan tenascin glikoprotein ECM (Kappler et al, 2002). Kami menyajikan bukti-bukti yang sama menyarankan, untuk pertama kalinya, peran lipid rafts dalam adhesi E. histolytica untuk host kolagen, dan untuk tingkat yang lebih rendah, fibronectin. Oleh karena itu, peran rakit dalam sel-ECM interaksi mungkin evolusioner dilestarikan. Dalam sel mamalia mapan bahwa integrins yang berpartisipasi dalam sel-ECM interaksi (Auer dan Jacobson, 1995). Juga telah dilaporkan bahwa banyak integrins berfungsi dalam konteks lipid rakit (Leitinger dan Hogg, 2002; Decker dan ffrench-konstan, 2004). Sebagai contoh, sel t integrins, LFA-1 dan 41, dikecualikan dari rakit dalam ketiadaan rangsangan, tapi pindah ke raft kompartemen setelah aktivasi (Leitinger dan Hogg, 2002). Selain itu, bentuk yang terpotong LFA-1, mimics yang diaktifkan integrin, constitutively lokal untuk rakit (Leitinger dan Hogg, 2002). Mengandung 1 integrin dari oligodendrocytes (Decker dan ffrench-konstan, 2004) juga menunjukkan rakit-pengayaan setelah aktivasi. Clustering ini reseptor di rakit dianggap untuk memperkuat luar-dalam signaling peristiwa dan untuk memfasilitasi pembentukan adhesi fokus mamalia (Decker dan ffrench-konstan, 2004). Integrin-seperti protein dan fokus adhesi-seperti struktur juga ada di E. histolytica. Sebagai contoh, atomic force microscope telah mengungkapkan pembentukan fokus adhesi-seperti plak ketika E. histolytica trophozoites mematuhi berlapis fibronectin cover slip (Prazeres et al., 2003). Selain itu, 1 integrinseperti molekul, EhFNR, Pengantara trophozoite interaksi dengan fibronectin dan kolagen (HernandezRamirez et al., 2007) dan merakit sebuah komplek multimolecular yang mencakup FAK, paxillin, dan vinculin. (Flores-Robles et al., 2003). Hgl, subunit berat Gal/GalNAc lectin, pameran homologi untuk 2 dan 7 mamalia integrins di ujungnya C (tanaman merambat et al., 1998). Memang, banyak E. histolytica homologs

mamalia fokus adhesi protein, termasuk aktin, pp125FAK, paxillin dan vinculin, diaktifkan setelah terpapar ECM komponen (de Lourdes et al., 2001; Perez et al., 1996; Perez et al., 1998; Flores-Robles et al., 2003; Franco et al, 2002). Hasil studi sekarang menunjukkan bahwa rakit mungkin bekerja sama dengan atau membentuk platform untuk fokus struktur adhesi-seperti yang digunakan dalam interaksi dengan kolagen. Karena trophozoites mampu memanfaatkan gratis kolesterol in vitro (Mata-Cardenas et al., 2000), sangat mungkin bahwa in vivo, diperkaya kolesterol lipoprotein partikel dalam lumen kolon, jaringan dan/atau serum bertindak sebagai sumber kolesterol dalam tahap berturut-turut invasif penyakit (Bansal et al., 2005). Oleh karena itu, sangat menarik untuk mempertimbangkan kemungkinan bahwa paparan ekstraselular lipid mungkin mengubah fungsi patogen seperti adhesi ECM. Seperti perubahan yang dapat mempengaruhi kesuksesan dari invasi dan amoebic hati abses pembentukan (ALA). Data epidemiologi yang menunjukkan tingkat kolesterol total serum, LDL, dan HDL tersebut secara signifikan lebih rendah dalam kista pejalan kaki dibandingkan dengan ALA kasus (Bansal et al., 2005) mendukung pentingnya kolesterol dalam penyakit invasif. Menariknya, dalam Giardia, kolesterol kelaparan perlu dan cukup untuk menimbulkan encystation (Slavin et al, 2002). Mungkin, dengan tambahan mempengaruhi keberhasilan ALA pembentukan, host kolesterol dapat juga mempengaruhi proses sebelumnya dalam infeksi yang berkomitmen parasit untuk non-invasif atau invasif mode infeksi. Meskipun peran rakit kaya kolesterol dalam proses selular sel eukariota yang lebih tinggi mapan, lipid rakit yang hanya mulai diakui sebagai pemain penting dari fungsi sel eukariotik yang lebih rendah. Rakit telah terbukti memainkan peran dalam adhesi amoeba nonpatogenik, Dictyostelium discoideum (Harris et al., 2001a; Harris et al., 2001b). Dalam ragi, Saccharomyces

cerevisiae, polarisasi sterol kaya domain diamati dalam feromon-induced sel (Bagnat dan Simons, 2002). Membran sterol juga diperkaya di tepi terkemuka membentuk hyphae pada patogen jamur, Candida albicans (Martin dan Konopka, 2004). Meskipun hubungan yang tepat antara E. histolytica EhFNR Gal/GalNAc lectin, dan lipid rakit masih belum jelas, studi ini menawarkan bukti implicating lipid rakit dan Gal/GalNAc lectin dalam adhesi patogen untuk kolagen. Studi masa depan proteomic E. histolytica rakit dan non-rakit membran dapat menghasilkan gambar yang lebih komprehensif reseptor, baik di dalam maupun di luar rakit, yang berinteraksi dengan ECM dan membantu dalam invasi Angkatan. UCAPAN TERIMA KASIH Penulis terima Dr Michael Childress (Dept of Biological Sciences, Universitas Clemson, Clemson, SC) untuk bantuan dengan analisis statistik. Proyek yang dijelaskan ini didukung oleh Grant No. R01AI046414 dari National Institute of Allergy dan penyakit menular dan jembatan Award dari South Carolina ide jaringan penelitian biomedis keunggulan (INBRE). Bahan ini didasarkan pada pekerjaan yang didukung oleh CSREES/USDA, di bawah proyek nomor SC-1700312 (teknis kontribusi No. 5396 dari stasiun percobaan Clemson University). Isi adalah semata-mata tanggungjawab para penulis dan tidak selalu mewakili pandangan resmi National Institute of Allergy dan penyakit menular, National Institute of Health, atau USDA. Penulis terima anggota laboratorium Temesvari untuk pembacaan kritis dari naskah dan membantu diskusi. Singkatan DIC diferensial gangguan kontras 3-' 3,3-dihexadecyl-1 ', 1, 3 'tetramethylindocarbocyanineperchlorate

DiIC16

ECM FAK

matriks ekstraselular Adhesi fokus kinase

Gal/GalNAc galactose/N-acetylgalactosaminelectin inhibitable lectin IC50 LCC MCD PBS S.D. berarti penghambatan dosis lipoprotein-kolesterol berkonsentrasi metil--cyclodextrin fosfat buffered saline deviasi standar

Catatan kaki Ini adalah file PDF diedit manuskrip yang telah diterima untuk publikasi. Sebagai layanan kepada nasabah kami menyediakan versi awal naskah. Naskah akan mengalami copyediting, typesetting dan review bukti dihasilkan sebelum diterbitkan dalam bentuk akhir. Harap dicatat bahwa selama proses produksi kesalahan dapat ditemukan yang dapat mempengaruhi isi, dan semua hukum disclaimers yang berlaku untuk jurnal berhubungan. Sections lain Abstrak 1. PENDAHULUAN 2. BAHAN-BAHAN DAN METODE 3. HASIL

4. DISKUSI REFERENSI REFERENSI Adler P, kayu SJ, Lee YC, Lee RT, Petri WA, Jr., Schnaar RL. Pengikatan afinitas Entamoeba histolytica lectin untuk polyvalent N-acetylgalactosaminides. Journal of Biological Chemistry.1995;270: 51645171. [PubMed] Auer KL, Jacobson BS. Beta 1 integrins sinyal lipid kedua Rasul diperlukan selama Adhesi sel. Molecular Biology Cell.1995;6: 13051313. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Bagnat M, Simons K. sel permukaan polarisasi selama ragi perkawinan. Proceedings of the National Academy of Sciences U S A.2002;99: 1418314188. BANSAL D, Bhatti HS, Sehgal R. peran kolesterol dalam parasit infeksi. Lipid dalam kesehatan dan penyakit.2005;4: 915. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Boyle JJ. Makrofaga manusia membunuh sel-sel manusia mesangial oleh Fas-L-induced apoptosis ketika dipicu oleh antibodi melalui CD16. Klinis dan eksperimental parasitologi.2004;137: 529537. Cruz Vera J, Clara L, R Hernandez-Kelly, Alfredo MJ, Perez-Salazar E, Ortega A. kolagen-induced STAT keluarga aktivasi di Entamoeba histolytica trophozoites. FEMS mikrobiologi surat.2003;229: 203 209. [PubMed] Debnath A, Das P, Sajid M, McKerrow JH. Identifikasi genom responses to kolagen mengikat dengan trophozoites Entamoeba histolytica. Journal of penyakit menular.2004;190: 448457. [PubMed] Decker L, ffrench-konstan C. Lipid rafts dan aktivasi integrin mengatur oligodendrocyte kelangsungan hidup. Journal of Neuroscience.2004;24: 38163825. [PubMed] de Lourdes MM, Das P, Tovar R. Entamoeba histolytica

trophozoites diaktifkan oleh kolagen tipe I dan Ca(2+) memiliki sitoskeleton terstruktur selama collagenase sekresi. Cell Motility dan sitoskeleton.2001;50: 4554. Diamond LS, Harlow DR Cunnick CC. Media baru untuk axenic Entamoeba histolytica dan lain Entamoeba. Transaksi of the Royal Society kedokteran tropis dan kebersihan.1978;72: 431432. [PubMed] Flores-Robles D, Rosales C, JL Rosales-Encina, TalamasRohana P. Entamoeba histolytica: reseptor integrinseperti fibronectin beta 1 merakit sebuah komplek signaling yang mirip dengan sel mamalia. Eksperimental parasitologi.2003;103: bertelur. [PubMed] Franco E, Manning-Cela R, transduksi sinyal I. Meza dalam Entamoeba histolytica disebabkan oleh interaksi dengan fibronectin: kehadiran dan aktivasi phosphokinase a dan hubungannya mungkin invasiveness. Arsip medis penelitian.2002;33: 389397. [PubMed] Gopaladrishan P, Chaubey SK, Manogaran PS, Pande G. modulasi fungsi integrin 51 fosfolipid dan kolesterol isi membran. Journal of selular biokimia.2000;77: 517 528. [PubMed] Harris TJ, Awrey DE, Cox BJ, Ravandi A, Tsang A, Siu CH. keterlibatan sepersekian mengambang triton-tidak larut dalam adhesi sel-sel Dictyostelium . Journal of Biological Chemistry.2001a;276: 1864018648. [PubMed] Harris TJ, Ravandi A, Siu CH. perakitan glikoprotein-80 adhesi kompleks di Dictyostelium. Journal of Biological Chemistry.2001b;276: 4876448774. [PubMed] Hernandez-Ramirez VI, Rios A, Angel A, Magos MA, Perez-Castillo L, Rosales-Encina JL, Castillo-Henkel E, Talamas-Rohana P. Subcellular distribusi Entamoeba histolytica 140 kDa FN mengikat molekul selama interaksi host-parasit. Parasitologi.2007;134: 169177. [PubMed]

Huang H, Li Y, Sadaoka T, Tang H, Yamamoto T, Yamanishi K, Mori manusia Y. herpes 6 amplop kolesterol diperlukan untuk virus masuk. Journal of umum virologi.2006a;87: 277285. [PubMed] Huang Q, Shen HM, Shui G, Wenk MR, Ong CN. Emodin menghambat Adhesi sel tumor melalui gangguan dari membran lipid rakit yang terkait integrin menandakan jalur. Penelitian kanker.2006b;66: 58075815. [PubMed] Huston CD, Boettner DR, Miller-Sims V, Petri WA., Jr. Apoptotic pembunuhan dan fagositosis sel inang oleh parasit Entamoeba histolytica. Infeksi dan imunitas.2003;71: 964972. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Ilangumaran S, Hoessli DC. Efek kolesterol pemiskinan oleh cyclodextrin pada microdomains Sfingolipid membran plasma. Journal biokimia.1998;335: 433440. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Irie T, Fukunaga K, Pitha J. Hydroxypropylcyclodextrins parenteral digunakan. I: lipid pembubaran dan efek pada lipid transfer in vitro. Journal of ilmu farmasi.1992;81: 521523. [PubMed] Kappler J, Baader SL, Franken S, Pesheva P, diciptakannya K, Rauch U, Gieselmann V. Tenascins berhubungan dengan lipid rakit terisolasi dari otak tikus. Biokimia dan biofisik penelitian komunikasi.2002;294: 742747. [PubMed] Kaur T, Gopalakrishna P, Manogaran PS, Pande G. Korelasi antara tingkat kolesterol membran, Adhesi sel dan tumourigenicity polyoma virus mengubah sel. Molekuler dan seluler biokimia.2004;265: 8595. [PubMed] Laughlin RC, McGugan GC, Powell RR, berkubang BH, Temesvari LA. Keterlibatan membran plasma rakitseperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Infeksi dan imunitas.2004;72: 53495357. [Artikel gratis PMC] [PubMed]

Laughlin RC, Temesvari LA. Selular dan molekul mekanisme yang mendasari Entamoeba histolytica patogenesis: prospek intervensi. Review ahli dalam molekul Kedokteran.2005;7: 119. [PubMed] Leitinger B, Hogg N. Keterlibatan lipid rafts dalam peraturan integrin fungsi. Journal of sel ilmu pengetahuan.2002;115: 963972. [PubMed] Li YC, taman MJ, kamu SK, Kim CW, Kim YN. Kenaikan tingkat kolesterol kaya lipid rakit dalam sel-sel kanker berkorelasi dengan sensitivitas apoptosis yang disebabkan oleh agen-agen yang semakin menipis kolesterol. The American Journal of patologi.2006;168: 11071118. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Mata-Cardenas BD, Vargas-Villarreal J, GonzalezSalazar F, Martinez-Rodriguez H, Morales-Vallarta M, Said-Fernandez S. Entamoeba histolytica mampu menggunakan gratis kolesterol, fosfolipid, dan asam lemak kondisi axenic budidaya. Arsip medis penelitian.2000;31: S212S213. [PubMed] Martin SW, Konopka y.b. Lipid rakit polarisasi memberikan kontribusi untuk Candida albicanshyphal pertumbuhan. Sel eukariota.2004;3: 675684. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Maxfield FR. membran Plasma microdomains. Opini di sel biologi.2002;14: 483487. [PubMed] Myllyharju J. Intracellular post-translations dari collagens. Topik dalam kimia saat ini.2005;247: 115 147. Nguyen DH, Hildreth JEK. Bukti untuk pemula jenis Human Immunodeficiency Virus 1 selektif dari diperkaya glycolipid membran lipid rafts. Journal of virologi.2000;74: 32643272. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Perez E, Munoz ML, Ortega A. Entamoeba histolytica: keterlibatan pp125FAK dalam transduksi sinyal diinduksi kolagen. Eksperimental parasitologi.1996;82:

164170. [PubMed] Perez E, Munoz ML, Ortega A. Entamoeba histolytica: kolagen-induced AP-1 DNA mengikat aktivitas. FEMS mikrobiologi surat.1998;159: 187192. [PubMed] Petri WA, Haque R, Mann BJ. Antarmuka pahit parasit dan inang: Lectin-karbohidrat interaksi selama Invasi manusia oleh parasit Entamoeba histolytica. Tahunan Review mikrobiologi.2002;56: 3964. Pitha J, Irie T, Sklar PB, Nye JS. Obat solubilizers untuk membantu pharmacologists: cyclodextrin amorf derivatif. Life Sciences.1988;43: 493502. [PubMed] Powell RR, Welter BH Hwu R Bowersox B, Attaway C, La Temesvari Entamoeba histolytica: FYVE-jari domain, phosphatidylinositol biosensors 3-fosfat, terkait dengan phagosomes tetapi tidak fluida diisi endosomes. Eksperimental parasitologi.2006;112: 221 231. [PubMed] Prazeres GM, Batista EJ, de Souza W, Bisch PM, Weissmuller G. interaksi antara-6-kondroitin dan Entamoeba histolytica seperti yang diungkapkan oleh memaksa spektroskopi. Eksperimental parasitologi.2003;104: 4046. [PubMed] Pucadyil Madhubala TJ, Tewary P, R, Chattopadhyay A. kolesterol diperlukan untuk infeksi Leishmania donovani : implikasi di leishmaniasis. Molekuler dan biokimia parasitologi.2004;133: 145152. [PubMed] Qin C, Grosheva Nagao T I, Maxfield FR, Pieris LM. Membran plasma yang ditinggikan kolesterol konten mengubah makrofag signaling dan fungsi. Arteriosclerosis, trombosis dan vaskular biologi.2006;26: 372378. Ramprasad OG, Srinivas G, Sridhar Rao K, Joshi P, Thiery JP, Dufour S, Pande G. perubahan kadar kolesterol dalam membran plasma memodulasi transduksi sinyal selular dan mengatur Adhesi sel dan migrasi pada fibronectin. Cell Motility dan

sitoskeleton.2007;64: 199216. Ravdin JI, Guerrant RL. Peran kepatuhan di mekanisme cytopathogenic Entamoeba histolytica. Belajar dengan sel-sel mamalia kultur jaringan dan eritrosit pada manusia. Journal of penyelidikan klinis.1981;68: 1305 1313. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Simons K, Toomre D. Lipid rakit dan transduksi sinyal. Alam Reviews. Molecular Cell Biology. 2000;1: 3139. Slavin I, Saura A, Carranza PG, Touz MC, Nores MJ, Lujan HD. Dephosphorylation kista dinding protein oleh pengeluaran fosfatase asam lysosomal sangat penting untuk excystation Giardia lamblia. Molekuler dan biokimia parasitologi.2002;122: 9598. [PubMed] Talamas-Rohana P, Meza I. interaksi antara amoebas patogen dan fibronectin: substrat degradasi dan perubahan dalam sitoskeleton organisasi. Journal of sel biologi.1988;106: 17871794. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Talamas-Rohana P, serat stres Rios A. tonjolan di Entamoeba histolytica disebabkan oleh fibronectin. Arsip medis penelitian.2000;31: S131S133. [PubMed] Glselam H, Saxton J, Hemming FW. Perubahan dalam dan sekresi glikosilasi fibronectin oleh kulit manusia fibroblasts terkait dengan tuberous sclerosis. Glycoconjugate Journal.1997;14: 439447. [PubMed] Tanaman merambat RR, Ramakrishnan G, Rogers JB, Lockhart LA, Mann BJ, Petri WA., Jr. peraturan kepatuhan dan virulensi oleh Entamoeba histolytica lectin domain sitoplasmik, yang berisi motif Integrin beta 2. Molecular Biology Cell.1998;9: 20692079. [Artikel gratis PMC] [PubMed] Zeng WX, efek T. Terada metil-beta-cyclodextrin pada cryosurvival spermatozoa hutan. Journal of Andrologi.2001;22: 111118. [PubMed]

ReviewSelular dan molekul mekanisme yang mendasari Entamoeba histolytica patogenesis: prospek intervensi. Ahli Rev Mol Med. 2005 18 Juli; 7 (13): 1-19. [Ahli Rev Mol Med. 2005] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Interaksi antara amebas patogen dan fibronectin: substrat degradasi dan perubahan dalam sitoskeleton organisasi. J sel Biol. 1988 mungkin; 106 (5): 1787-94. [J sel Biol. 1988] Kolagen-induced STAT keluarga aktivasi di Entamoeba histolytica trophozoites. FEMS Microbiol Lett. 2003 12 Desember; 229 (2): 203-9. [FEMS Microbiol Lett. 2003] Identifikasi genom responses to kolagen mengikat dengan trophozoites Entamoeba histolytica. J menginfeksi Dis. 2004 1 Agustus; 190 (3): 448-57. [J menginfeksi Dis. 2004] Entamoeba histolytica: keterlibatan pp125FAK dalam transduksi sinyal diinduksi kolagen. Exp Parasitol. Maret 1996; 82 (2): 164-70. [Exp Parasitol. 1996] Entamoeba histolytica: kolagen-induced AP-1 DNA mengikat aktivitas. FEMS Microbiol Lett. 1998 15 Februari; 159 (2): 187-92. [FEMS Microbiol Lett. 1998] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Keterlibatan membran plasma rakit-seperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Menginfeksi Immun. 2004 Sep; 72 (9): 5349-57. [Menginfeksi Immun. 2004] ReviewMembran plasma microdomains.

Enyesuaian Opin sel Biol. Agustus 2002; 14 (4): 483-7. [Enyesuaian Opin sel Biol. 2002] Pengikatan afinitas Entamoeba histolytica lectin untuk polyvalent N-acetylgalactosaminides. J Biol Chem. 1995 Maret 10; 270 (10): 5164-71. [J Biol Chem. 1995] Peran kepatuhan di mekanisme cytopathogenic Entamoeba histolytica. Belajar dengan sel-sel mamalia kultur jaringan dan eritrosit pada manusia. J Clin berinvestasi. November 1981; 68 (5): 1305-13. [J Clin berinvestasi. 1981] Modulasi alpha5beta1 integrin fungsi oleh fosfolipid dan kolesterol isi dari membran sel. J sel Biochem. April 2000; 77 (4): 517-28. [J sel Biochem. 2000] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Media baru untuk axenic Entamoeba histolytica dan Entamoeba lain. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1978; 72 (4): 431-2. [Trans R Soc Trop Med Hyg. 1978] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Entamoeba histolytica: FYVE-jari domain, phosphatidylinositol biosensors 3-fosfat, terkait dengan phagosomes tetapi tidak fluida diisi endosomes. Exp Parasitol. 2006 Apr; 112 (4): 221-31. [Exp Parasitol. 2006] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Pengikatan afinitas Entamoeba histolytica lectin untuk polyvalent N-acetylgalactosaminides. J Biol Chem. 1995 Maret 10; 270 (10): 5164-71. [J Biol Chem. 1995] Peran kepatuhan di mekanisme cytopathogenic Entamoeba histolytica. Belajar dengan sel-sel mamalia kultur jaringan dan eritrosit pada manusia.

J Clin berinvestasi. November 1981; 68 (5): 1305-13. [J Clin berinvestasi. 1981] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Bukti untuk pemula jenis human immunodeficiency virus 1 selektif dari diperkaya glycolipid membran lipid rakit. J Virol. April 2000; 74 (7): 3264-72. [J Virol. 2000] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Entamoeba histolytica: FYVE-jari domain, phosphatidylinositol biosensors 3-fosfat, terkait dengan phagosomes tetapi tidak fluida diisi endosomes. Exp Parasitol. 2006 Apr; 112 (4): 221-31. [Exp Parasitol. 2006] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Hydroxypropylcyclodextrins parenteral digunakan. I: lipid pembubaran dan efek pada lipid transfer in vitro. J Pharm Sci. Juni 1992; 81 (6): 521-3. [J Pharm Sci. 1992] Obat solubilizers untuk membantu pharmacologists: cyclodextrin amorf derivatif. Hidup Sci. 1988; 43 (6): 493-502. [Kehidupan Sci. 1988] Keterlibatan membran plasma rakit-seperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Menginfeksi Immun. 2004 Sep; 72 (9): 5349-57. [Menginfeksi Immun. 2004] Virus herpes manusia 6 amplop kolesterol diperlukan untuk virus masuk. J Gen Virol. 2006 Februari; 87(PT 2):277-85. [J Gen Virol. 2006] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini

Entamoeba histolytica mampu menggunakan gratis kolesterol, fosfolipid, dan asam lemak kondisi axenic budidaya. Lengkungan Med Res. 2000 Juli-Agustus; 31(4 Suppl):S212-3. [Arch Med Res. 2000] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Virus herpes manusia 6 amplop kolesterol diperlukan untuk virus masuk. J Gen Virol. 2006 Februari; 87(PT 2):277-85. [J Gen Virol. 2006] Efek metil-beta-cyclodextrin pada cryosurvival spermatozoa hutan. J Androl. Jan-Februari 2001; 22 (1): 111-8. [J Androl. 2001] Kenaikan tingkat kolesterol kaya lipid rakit dalam sel-sel kanker berkorelasi dengan sensitivitas apoptosis yang disebabkan oleh agen-agen yang semakin menipis kolesterol. Am J Pathol. 2006 Apr; 168 (4): 1107-18; kuis 1404-5. [Am J Pathol. 2006] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Keterlibatan membran plasma rakit-seperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Menginfeksi Immun. 2004 Sep; 72 (9): 5349-57. [Menginfeksi Immun. 2004] Bukti untuk pemula jenis human immunodeficiency virus 1 selektif dari diperkaya glycolipid membran lipid rakit. J Virol. April 2000; 74 (7): 3264-72. [J Virol. 2000] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Keterlibatan membran plasma rakit-seperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Menginfeksi Immun. 2004 Sep; 72 (9): 5349-57. [Menginfeksi Immun. 2004]

Perubahan dalam dan sekresi glikosilasi fibronectin oleh kulit manusia fibroblasts terkait dengan tuberous sclerosis. Glycoconj J. Juni 1997; 14 (4): 439-47. [Glycoconj J. 1997] Pengikatan afinitas Entamoeba histolytica lectin untuk polyvalent N-acetylgalactosaminides. J Biol Chem. 1995 Maret 10; 270 (10): 5164-71. [J Biol Chem. 1995] Peran kepatuhan di mekanisme cytopathogenic Entamoeba histolytica. Belajar dengan sel-sel mamalia kultur jaringan dan eritrosit pada manusia. J Clin berinvestasi. November 1981; 68 (5): 1305-13. [J Clin berinvestasi. 1981] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Keterlibatan membran plasma rakit-seperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Menginfeksi Immun. 2004 Sep; 72 (9): 5349-57. [Menginfeksi Immun. 2004] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Efek kolesterol pemiskinan oleh cyclodextrin pada microdomains Sfingolipid membran plasma. Biochem J. 1998 15 Oktober; 335 (-) (Pt 2): 433-40. [Biochem J. 1998] Kolesterol diperlukan untuk Leishmania donovani infeksi: implikasi di leishmaniasis. Mol Biochem Parasitol. Februari 2004; 133 (2): 145-52. [Mol Biochem Parasitol. 2004] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Apoptotic pembunuhan dan fagositosis sel oleh parasit Entamoeba histolytica. Menginfeksi Immun. Februari 2003; 71 (2): 964-72. [Menginfeksi Immun. 2003]

Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Keterlibatan membran plasma rakit-seperti domain Entamoeba histolytica pinositosis dan adhesi. Menginfeksi Immun. 2004 Sep; 72 (9): 5349-57. [Menginfeksi Immun. 2004] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Korelasi antara tingkat kolesterol membran, Adhesi sel dan tumourigenicity polyoma virus mengubah sel. Mol sel Biochem. Oktober 2004; 265(1-2):85-95. [Mol sel Biochem. 2004] Emodin menghambat Adhesi sel tumor melalui gangguan dari membran lipid rakit yang terkait integrin menandakan jalur. Kanker Res. 2006 1 Juni; 66 (11): 5807-15. [Kanker Res. 2006] Tenascins berhubungan dengan lipid rakit terisolasi dari otak tikus. Biochem Biophys Res Commun. 2002 14 Juni; 294 (3): 742-7. [Biochem Biophys Res Commun. 2002] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Beta 1 integrins sinyal lipid kedua Rasul diperlukan selama Adhesi sel. Mol Biol seluler. Oktober 1995; 6 (10): 1305-13. [Mol Biol sel. 1995] Keterlibatan lipid rafts dalam peraturan integrin fungsi. J sel Sci. 2002 Mar 1; 115(PT 5):963-72. [J sel Sci. 2002] Lipid rakit dan aktivasi integrin mengatur oligodendrocyte kelangsungan hidup. J Biobehav. April 14, 2004 24 (15): 3816-25. [J Biobehav. 2004]

Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Interaksi antara-6-kondroitin dan Entamoeba histolytica seperti yang diungkapkan oleh kekuatan spektroskopi. Exp Parasitol. 2003 Mei-Juni; 104(1-2):40-6. [Exp Parasitol. 2003] Subcellular distribusi Entamoeba histolytica 140 kDa FN mengikat molekul selama interaksi host-parasit. Parasitologi. Februari 2007; 134(PT 2):169-77. [Parasitologi. 2007] Entamoeba histolytica: reseptor integrin-seperti fibronectin beta 1 merakit sebuah komplek signaling yang mirip dengan sel mamalia. Exp Parasitol. Jan-Februari 2003; 103(1-2):8-15. [Exp Parasitol. 2003] Peraturan kepatuhan dan virulensi oleh Entamoeba histolytica lectin sitoplasmik domain, yang berisi beta2 integrin motif. Mol Biol seluler. Agustus 1998; 9 (8): 2069-79. [Mol Biol sel. 1998] Entamoeba histolytica: keterlibatan pp125FAK dalam transduksi sinyal diinduksi kolagen. Exp Parasitol. Maret 1996; 82 (2): 164-70. [Exp Parasitol. 1996] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Entamoeba histolytica mampu menggunakan gratis kolesterol, fosfolipid, dan asam lemak kondisi axenic budidaya. Lengkungan Med Res. 2000 Juli-Agustus; 31(4 Suppl):S212-3. [Arch Med Res. 2000] ReviewPotensial reseptor selular yang terlibat dalam hepatitis c virus masuk ke dalam sel. Lipid kesehatan Dis. 2005 tanggal 19 April; (4): 9. [Lipid kesehatan Dis. 2005]

Dephosphorylation kista dinding protein oleh pengeluaran fosfatase asam lysosomal sangat penting untuk excystation Giardia lamblia. Mol Biochem Parasitol. Juni 2002; 122 (1): 95-8. [Mol Biochem Parasitol. 2002] Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini Keterlibatan sepersekian mengambang triton-tidak larut dalam adhesi sel-sel Dictyostelium. J Biol Chem. 2001 mungkin 25; 276 (21): 18640-8. [J Biol Chem. 2001] Majelis glikoprotein-80 adhesi kompleks di Dictyostelium. Reseptor kompartementalisasi dan oligomerization di membran rakit. J Biol Chem. 2001 Dec 28; 276 (52): 48764-74. [J Biol Chem. 2001] Lipid rakit polarisasi memberikan kontribusi untuk Candida albicans hyphal pertumbuhan. Sel Eukaryot. Juni 2004; 3 (3): 675-84. [Eukaryot sel. 2004 Melihat lebih banyak artikel yang disebutkan dalam ayat ini You are here: NCBI > sastra > PubMed tengah Menulis ke Help Desk Sederhana NCBI direktori Persiapan Pendidikan NCBI NCBI bantuan Manual NCBI Handbook Pelatihan & tutorial Sumber daya Bahan kimia & Bioassays

Data & Software DNA & RNA Domain & struktur Gen & Expression Genetika & pengobatan Genom & peta Homologi Sastra Protein Analisis sekuen Taksonomi Pelatihan & tutorial Variasi Populer PubMed Nukleotida LEDAKAN PubMed tengah Gen Rak buku Protein OMIM Genom SNP Struktur

Feature GenBank Referensi urutan Peta pengunjung Proyek Genom Genom manusia Mouse genom Influenza Virus Primer-BLAST Urutan baca Arsip NCBI informasi Tentang NCBI Penelitian di NCBI NCBI Newsletter Situs FTP NCBI NCBI di Facebook NCBI on Twitter NCBI di YouTube NLM NIH DHHS USA.gov Copyright | Disclaimer | Privasi | Aksesibilitas | Kontak Pusat Nasional untuk bioteknologi, U.S. National Library of Medicine 8600 Rockville Pike, Bethesda , MD, 20894 USA