COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Diagnoacutestico

COVID-19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Lauer SA et al The Incubation Period of Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) From Publicly Reported Confirmed Cases Estimation and Application [published online ahead of print 2020 Mar 10] Ann Intern Med 2020107326M20-0504 Biopanda Reagents UK COVID-19 Rapid Test [Internet] Biopanda Reagents Ltd [Consutado 20032020] SARS-COV-2 DIAGNOSTIC PIPELINE

Pruebas diagnoacutesticas

microbioloacutegicas COVID 19

Deteccioacuten virus

Deteccioacuten respuesta inmune

RNA viral

Antiacutegeno viral

Anticuerpos virales

especiacuteficos

Nasoorofaringe esputo aspirado endotraqueal o

lavado broncoalveolar

Sangre (diacutegitovenopuncioacuten)

RT-PCR

Prueba Antigeacutenica raacutepida

Prueba seroloacutegica raacutepida (AcT IgMIgG)

Prueba seroloacutegica por inmunoensayo (IgM IgG)

httpsthreadreaderappcomthread1263537661320531968html

Pruebas de punto de atencioacuten

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Lauer SA et al The Incubation Period of Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) From Publicly Reported Confirmed Cases Estimation and Application [published online ahead of print 2020 Mar 10] Ann Intern Med 2020107326M20-0504 Biopanda Reagents UK COVID-19 Rapid Test [Internet] Biopanda Reagents Ltd [Consutado 20032020] SARS-COV-2 DIAGNOSTIC PIPELINE

Pruebas diagnoacutesticas

microbioloacutegicas COVID 19

Deteccioacuten virus

Deteccioacuten respuesta inmune

RNA viral

Antiacutegeno viral

Anticuerpos virales

especiacuteficos

Nasoorofaringe esputo aspirado endotraqueal o

lavado broncoalveolar

Sangre (diacutegitovenopuncioacuten)

RT-PCR

Prueba Antigeacutenica raacutepida

Prueba seroloacutegica raacutepida (AcT IgMIgG)

Prueba seroloacutegica por inmunoensayo (IgM IgG)

httpsthreadreaderappcomthread1263537661320531968html

Pruebas de punto de atencioacuten

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Yan R Zhang Y Li Y Xia L Guo Y Zhou Q Structural basis for the recognition of SARS-CoV-2 by full-length human ACE2 Science 2020367(6485)1444-1448 doi101126scienceabb2762

Glicoproteiacutena espicular [S]

Hemaglutinina esterasa [HE]

Proteiacutena de la nucleocaacutepside

[N]

Proteiacutena de membrana

[M]

Proteiacutena de envoltura

pequentildea [E]

RNA

Prueba Antigeacutenica raacutepida

RT-PCR

Estructura del virus

SARS-CoV2

Deteccioacuten de anticuerpos Proteiacutena S nucleoproteiacutena N

o dominio de unioacuten al receptor de la proteiacutena

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Prueba de deteccioacuten del SARS-CoV-2 mediante amplificacioacuten de aacutecido

nucleico por reaccioacuten en cadena de la polimerasa

en tiempo real (RT-PCR)

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Corman VM Landt O Kaiser M et al Detection of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) by real-time RT-PCR Euro Surveill 202025(3)2000045 doi1028071560-7917ES20202532000045

WHO Laboratory testing for coronavirus disease (COVID-19) in suspected human cases interim guidance Interim guidance 19 March 2020 [Internet] WHO 2020

ldquoDianasrdquo de ampliacioacuten para deteccioacuten del genoma del SARS-CoV-2 (OMS) bull RdRp transcriptasa dependiente de ARN (enzima copia RNAViral) bull Gen de proteiacutena de envoltura E bull Gen de proteiacutena nucleocaacutepside N bull Gen de proteiacutena espiga S bull Marco de lectura abierto Orf1a

RT-PCR Envoltura (E) Nucleocaacutepside (N)

Espiacuteculas (S) Membrana (M)

Los tres valores por encima del umbral

+RdRp

La RT-PCR no puede distinguir el virus replicable viable o simplemente el ARN residual

Genoma COVID19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Corman VM Landt O Kaiser M et al Detection of 2019 novel coronavirus (2019-nCoV) by real-time RT-PCR Euro Surveill 202025(3)2000045 doi1028071560-7917ES20202532000045

WHO Laboratory testing for coronavirus disease (COVID-19) in suspected human cases interim guidance Interim guidance 19 March 2020 [Internet] WHO 2020

ldquoDianasrdquo de ampliacioacuten para deteccioacuten del genoma del SARS-CoV-2 (OMS) bull RdRp transcriptasa dependiente de ARN (enzima copia RNAViral) bull Gen de proteiacutena de envoltura E bull Gen de proteiacutena nucleocaacutepside N bull Gen de proteiacutena espiga S bull Marco de lectura abierto Orf1a

RT-PCR Envoltura (E) Nucleocaacutepside (N)

Espiacuteculas (S) Membrana (M)

Los tres valores por encima del umbral

+RdRp

La RT-PCR no puede distinguir el virus replicable viable o simplemente el ARN residual

Genoma COVID19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Factores que determinan el rendimiento RT-PCR

Muestra Tipo de toma

Teacutecnica Transporte

Etapa de la infeccioacuten Carga viral Evolucioacuten cliacutenica

Calidad y la consistencia de los ensayos de PCR

Toma inadecuada de muestra Incorrecta conservacioacuten yo

transporte (lt4 ordmC hasta 24 horas) Escasa eliminacioacuten de virus

(estadio cliacutenico gravedad ) Razones teacutecnicas inherentes a la

prueba (mutacioacuten inhibicioacuten PCR)

Padhi A Kumar S Gupta E Saxena SK Laboratory Diagnosis of Novel Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) Infection Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) 2020 95ndash107 WHO Laboratory testing for coronavirus disease (COVID-19) in suspected human cases interim guidance Interim guidance 19 March 2020 [Internet] WHO 2020 Disponible tlyansP

Factores relacionados con falsos negativos de RT-PCR

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

iquestQueacute muestra tomar

Nasofariacutengeo Orofariacutengeo Cornete nasal medio Fosa nasal anterior

Diagnoacutestico inicial exudado de viacuteas

respiratorias superiores

Documento teacutecnico Toma y transporte de muestras para diagnoacutestico por PCR de SARS-CoV-2 CCAESDGSPCI 2020 CEBM Comparative accuracy of oropharyngeal and nasopharyngeal swabs for diagnosis of COVID-19 Oxford University March 26 2020 Interim Guidelines for Collecting Handling and Testing Clinical Specimens from Persons for Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) CDC 2020

Pacientes con neumoniacutea o

enfermedad respiratoria grave

Muestras de tracto respiratorio inferior esputo o aspirado endotraqueal lavado

broncoalveolar o broncoaspirado

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

n=94 pacientes con COVID-19 Edad media 47 antildeos

Mayor carga viral en los hisopos de

garganta al momento del inicio de los

siacutentomas

He X Lau EHY Wu P et al Temporal dynamics in viral shedding and transmissibility of COVID-19 Nat Med (2020) httpsdoiorg101038s41591-020-0869-5

Enfermedad moderada con neumoniacutea

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Zheng Shufa Fan Jian Yu Fei Feng Baihuan Lou Bin Zou Qianda et al Viral load dynamics and disease severity in patients infected with SARS-CoV-2 in Zhejiang province China January-March 2020 retrospective cohort study BMJ 2020 369 m1443

Tipos de muestra

Despueacutes de ingreso

Semanas desde el inicio de los siacutentomas Valores de P1 2 3 4

Todos bull Respiratorio 96) 4244 (95) 7490 (82) 6489 (72) 3157 (54) lt0001bull Heces 5593 (59) 923 (39) 2859 (47) 3271 (45) 2057 (35) 054bull Suero 3995 (41) 536 (14) 2085 (23) 1985 (22) 555 (9) 012bull Orina 167 (1) 015 (0) 153 (2) 021 (0) 019 (0) NC

Enfermedad levebull Respiratorio 22 1112 (92) 1521 (71) 919 (47) 49 (44) 004

Enfermedad severabull Respiratorio 74 3132 (97) 5969 (86) 5570 (79) 2748 (56) lt0001

iquestCuaacutendo tomar la muestra

1ordf semana

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Kucirka LM et al Variation in False-Negative Rate of Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction-Based SARS-CoV-2 Tests by Time Since Exposure Ann Intern Med 2020M20-1495 doi107326M20-1495

Probabilidad RT-PCR falso [-] en un infectado por COVID-19

Probabilidad (post-test) de

estar infectado despueacutes de una

RT-PCR [-]

Inicio siacutentomas

203dIncubacioacuten

66

38

Diacuteas desde la exposicioacuten

7 diacuteas de inicio siacutentomas14 diacuteas de inicio siacutentomas

7 estudios n = 1330

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Kucirka LM et al Variation in False-Negative Rate of Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction-Based SARS-CoV-2 Tests by Time Since Exposure Ann Intern Med 2020M20-1495 doi107326M20-1495

Tomar muestras adicionales

Si RT-PCT [-] y existe un alto iacutendice de sospecha de infeccioacuten por

SARS-CoV-2 particularmente si solo se tomaron

muestras del tracto respiratorio superior

Probabilidad posterior a la prueba de infeccioacuten por SARS-CoV-2 despueacutes de un resultado negativo de RT-PCR por probabilidad previa de infeccioacuten

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

SEIMC interpretacioacuten de las pruebas diagnoacutesticas frente a SARS-CoV-2 Versioacuten 2 Actualizado el 24 de abril de 2020 [Internet] SEIMC

Mayor rentabilidad diagnoacutestica de RT-PCR

bull Casos Leves 1ordf semana desde inicio de siacutentomas bull Casos graves 2ordf-3ordf semana desde inicio de los siacutentomas

La sensibilidad global del resultado de una prueba de RT-PCR inicial 89 (IC del 95 81 a 94)

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

IA Infeccioacuten aguda en curso con alta probabilidad de transmisioacuten IR infeccioacuten aguda resuelta o en resolucioacuten con baja probabilidad de transmisioacuten IP infeccioacuten pasada (siempre y cuando se haya resuelto la cliacutenica) con muy baja probabilidad de transmisioacuten La consideracioacuten de IA en este grupo se mantendraacute durante un plazo de 7 diacuteas luego se consideraraacute IR otros 7 diacuteas y despueacutes IP

Interpretacioacuten del resultado positivo de la prueba de PCR (yo antiacutegeno) en ausencia de otras pruebas

SEIMC interpretacioacuten de las pruebas diagnoacutesticas frente a SARS-CoV-2 Versioacuten 2 Actualizado el 24 de abril de 2020 [Internet] SEIMC

Diacuteas desde inicio de siacutentomas

AsintomaacuteticosDiacuteas tras

exposicioacutenExposicioacuten

Desconocidalt 12 diacuteas IA IA

12-19 diacuteas IR IA

20-55 diacuteas IP IAgt 55 diacuteas IP IR

Diacuteas desde inicio de siacutentomas

Sintomaacuteticos

Leves Graves Criacuteticos

lt 7 diacuteas IA IA IA

7-14 diacuteas IR IA IA

15-50 diacuteas IP IA IA

gt 50 diacuteas IP IR IA

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Persistencia de PCR [+] gt 3 semanas (simsim9-19) Cargas virales bajas sin implicaciones cliacutenico-epidemioloacutegicas

Desarrolla respuesta inmunitaria (Ac) PCR [+] refleja solo la deteccioacuten de ARN viral y no necesariamente indica la presencia

de virus viable Relacioacuten con dinaacutemica de eliminacioacuten del RNA viral a lo largo de la enfermedad

RT-PCR [+] ldquofuera del curso cliacutenicordquo

Wajnberg A et al Humoral immune response and prolonged PCR positivity in a cohort of 1343 SARS-CoV 2 patients in the New York City regioacuten medRxiv 2020043020085613 Ye G et al Cliacutenica characteristics of SARS-CoV-2 reactivacioacuten J Infect 202080(5)e14-e17 Centro Cochrane Iberoamericano iquestCuaacutel es el riesgo de reinfeccioacuten por coronavirus SARSndashCoVndash2 17 marzo 2020 Cochrane iberoamericana KCDC Findings from investigation and analysis of re-positive cases Update2020-05-21 [Internet] KCDC

PCR [+] tras prueba de PCR negativa y curacioacuten cliacutenica (PCR re-detectadardquo) No se ha comprobado reinfeccioacuten

En ninguacuten caso el resultado positivo se ha asociado empeoramiento cliacutenico ni al contagio de personas en contacto ni mala evolucioacuten cliacutenica

Error de prueba (falso [-]) reactivacioacuten dinaacutemica eliminacioacuten del RNA viral

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Indicaciones de la RT-PCR SARS-CoV-2

Identificacioacuten de infecciones por COVID-19 (diagnoacutestico cliacutenico) bull Casos sospechosos bull iquestContactos estrecho asintomaacuteticos

Identificacioacuten en el triaje e investigacioacuten de grupos

Confirmacioacuten de la eliminacioacuten del virus despueacutes de la recuperacioacuten

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Test antigeacutenicos raacutepidos

Teacutecnica inmunocromatograacutefica Antiacutegeno en la glicoproteiacutena S (espiacutecula) Sensibilidad general baja (50-60) Aumenta al 85 en muestras con alta carga viral Especificidad general 995 Precisioacuten 826 Valor predictivo positivo elevado Posibles usos cliacutenicos

Diagnoacutestico complementario a RT-PCR clasificacioacuten epideacutemica de pacientes sintomaacuteticosldquo

Confirmacioacuten de caso sospechoso durante el pico de la pandemia especialmente a la entrada en el servicio de urgencias cuando los pacientes presentan una alta carga viral

Mertens P De Vos N Martiny D Jassoy C Mirazimi A Cuypers L et al Development and potential usefulness of the COVID-19 Ag Respi-Strip diagnostic assay in a pandemic context medRxiv 2020042420077776

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Pruebas seroloacutegicas

COVID19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

iquestCuaacutentos pacientes genera una respuesta de anticuerpos

iquestEn cuaacutento tiempo se empiezan a producirse anticuerpos

iquestCuaacutento tiempo se prolonga la deteccioacuten de IgM

iquestCuaacutendo es el momento maacutes adecuado para realizar la prueba seroloacutegica

iquestHay alguna diferencia significativa entre pacientes con infeccioacuten graves y no grave

iquestCuaacuteles son las sensibilidades de la deteccioacuten de anticuerpos para pacientes en diferentes etapas de enfermedad

iquestSon fiables los test raacutepidos

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Dinaacutemica de aparicioacuten de anticuerpos neutralizantes

Wu F Wang A Liu M Wang Q Chen J Xia S et al Neutralizing antibody responses to SARSCoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications medRxiv 2020033020047365

Deteccioacuten de Ac neutralizantes desde el diacutea 10-15 despueacutes del inicio de la enfermedad y se mantuvieron

Niveles significativamente maacutes altos en pacientes de edad avanzada y de mediana edad con el aumento del valor de la proteiacutena C reactiva y con descenso de nordm de linfocitos

N =175 pacientes recuperados con siacutentomas leves

Niveles desarrollados Muy bajos 30Medio-Bajos 17Medio-altos 39Altos 14

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Test antigeacutenicos raacutepidos

Teacutecnica inmunocromatograacutefica Antiacutegeno en la glicoproteiacutena S (espiacutecula) Sensibilidad general baja (50-60) Aumenta al 85 en muestras con alta carga viral Especificidad general 995 Precisioacuten 826 Valor predictivo positivo elevado Posibles usos cliacutenicos

Diagnoacutestico complementario a RT-PCR clasificacioacuten epideacutemica de pacientes sintomaacuteticosldquo

Confirmacioacuten de caso sospechoso durante el pico de la pandemia especialmente a la entrada en el servicio de urgencias cuando los pacientes presentan una alta carga viral

Mertens P De Vos N Martiny D Jassoy C Mirazimi A Cuypers L et al Development and potential usefulness of the COVID-19 Ag Respi-Strip diagnostic assay in a pandemic context medRxiv 2020042420077776

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Pruebas seroloacutegicas

COVID19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

iquestCuaacutentos pacientes genera una respuesta de anticuerpos

iquestEn cuaacutento tiempo se empiezan a producirse anticuerpos

iquestCuaacutento tiempo se prolonga la deteccioacuten de IgM

iquestCuaacutendo es el momento maacutes adecuado para realizar la prueba seroloacutegica

iquestHay alguna diferencia significativa entre pacientes con infeccioacuten graves y no grave

iquestCuaacuteles son las sensibilidades de la deteccioacuten de anticuerpos para pacientes en diferentes etapas de enfermedad

iquestSon fiables los test raacutepidos

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Dinaacutemica de aparicioacuten de anticuerpos neutralizantes

Wu F Wang A Liu M Wang Q Chen J Xia S et al Neutralizing antibody responses to SARSCoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications medRxiv 2020033020047365

Deteccioacuten de Ac neutralizantes desde el diacutea 10-15 despueacutes del inicio de la enfermedad y se mantuvieron

Niveles significativamente maacutes altos en pacientes de edad avanzada y de mediana edad con el aumento del valor de la proteiacutena C reactiva y con descenso de nordm de linfocitos

N =175 pacientes recuperados con siacutentomas leves

Niveles desarrollados Muy bajos 30Medio-Bajos 17Medio-altos 39Altos 14

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Pruebas seroloacutegicas

COVID19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

iquestCuaacutentos pacientes genera una respuesta de anticuerpos

iquestEn cuaacutento tiempo se empiezan a producirse anticuerpos

iquestCuaacutento tiempo se prolonga la deteccioacuten de IgM

iquestCuaacutendo es el momento maacutes adecuado para realizar la prueba seroloacutegica

iquestHay alguna diferencia significativa entre pacientes con infeccioacuten graves y no grave

iquestCuaacuteles son las sensibilidades de la deteccioacuten de anticuerpos para pacientes en diferentes etapas de enfermedad

iquestSon fiables los test raacutepidos

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Dinaacutemica de aparicioacuten de anticuerpos neutralizantes

Wu F Wang A Liu M Wang Q Chen J Xia S et al Neutralizing antibody responses to SARSCoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications medRxiv 2020033020047365

Deteccioacuten de Ac neutralizantes desde el diacutea 10-15 despueacutes del inicio de la enfermedad y se mantuvieron

Niveles significativamente maacutes altos en pacientes de edad avanzada y de mediana edad con el aumento del valor de la proteiacutena C reactiva y con descenso de nordm de linfocitos

N =175 pacientes recuperados con siacutentomas leves

Niveles desarrollados Muy bajos 30Medio-Bajos 17Medio-altos 39Altos 14

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

iquestCuaacutentos pacientes genera una respuesta de anticuerpos

iquestEn cuaacutento tiempo se empiezan a producirse anticuerpos

iquestCuaacutento tiempo se prolonga la deteccioacuten de IgM

iquestCuaacutendo es el momento maacutes adecuado para realizar la prueba seroloacutegica

iquestHay alguna diferencia significativa entre pacientes con infeccioacuten graves y no grave

iquestCuaacuteles son las sensibilidades de la deteccioacuten de anticuerpos para pacientes en diferentes etapas de enfermedad

iquestSon fiables los test raacutepidos

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Dinaacutemica de aparicioacuten de anticuerpos neutralizantes

Wu F Wang A Liu M Wang Q Chen J Xia S et al Neutralizing antibody responses to SARSCoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications medRxiv 2020033020047365

Deteccioacuten de Ac neutralizantes desde el diacutea 10-15 despueacutes del inicio de la enfermedad y se mantuvieron

Niveles significativamente maacutes altos en pacientes de edad avanzada y de mediana edad con el aumento del valor de la proteiacutena C reactiva y con descenso de nordm de linfocitos

N =175 pacientes recuperados con siacutentomas leves

Niveles desarrollados Muy bajos 30Medio-Bajos 17Medio-altos 39Altos 14

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Dinaacutemica de aparicioacuten de anticuerpos neutralizantes

Wu F Wang A Liu M Wang Q Chen J Xia S et al Neutralizing antibody responses to SARSCoV-2 in a COVID-19 recovered patient cohort and their implications medRxiv 2020033020047365

Deteccioacuten de Ac neutralizantes desde el diacutea 10-15 despueacutes del inicio de la enfermedad y se mantuvieron

Niveles significativamente maacutes altos en pacientes de edad avanzada y de mediana edad con el aumento del valor de la proteiacutena C reactiva y con descenso de nordm de linfocitos

N =175 pacientes recuperados con siacutentomas leves

Niveles desarrollados Muy bajos 30Medio-Bajos 17Medio-altos 39Altos 14

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Guo L Ren L Yang S et al Profiling Early Humoral Response to Diagnose Novel Coronavirus Disease (COVID-19) Clin Infect Dis 2020ciaa310

iquestCuaacutendo se empiezan a producir IgA IgM IgG frente a SARSA-CoV-2

N= 208 muestras de plasma de 2 cohortes

65 casos leves a moderados

Mediana 5 diacuteas (IC95 3-6)

Mediana 14 diacuteas (IC95 10-18)

ELISA

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Xiao AT Gao C Zhang S Profile of specific antibodies to SARS-CoV-2 The first report [published online ahead of print 2020 Mar 21] J Infect 2020S0163-4453(20)30138-9

Todos los pacientes incluidos tuvieron pruebas de IgM e IgG

despueacutes de 2 semanas desde el inicio de los siacutentomas

N= 34 pacientes hospitalizados Meacutetodo ELISA

iquestCuaacutento tiempo tarde en desaparecer la IgM

6-8 semanas

Semanas desde inicio de lo siacutentomas

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Zeng Z Chen L Pan Y et al Re Profile of specific antibodies to SARS-CoV-2 The first report [published online ahead of print 2020 Apr 10] J Infect 2020S0163-4453(20)30180-8 doi101016jjinf202003052

Los casos graves bull Respuesta IgM maacutes temprana bull Niveles maacutes altos de IgM e IgG

n= 27 COVID-19 hospitalizados (17 casos graves) Mediana de edad 62 antildeos

IgM IgG

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Kontou PI Braliou GG Dimou NL et al Antibody tests in detecting SARS-CoV-2 infection a meta-anaacutelisis medRxiv 2020042220074914

Pruebas de seroloacutegicas en la infeccioacuten por SARS-CoV-2bull Antiacutegenos nucleoproteiacutena N proteiacutena S o el dominio de unioacuten al receptor (RDB-S) bull Ac Totales marcador maacutes sensible y temprano (deteccioacuten maacutes rentable a partir 2ordf

semana de inicio siacutentomas) bull IgM e IgG - Tiempo de seroconversioacuten (tras inicio de siacutentomas) IgM [5 a 10 diacuteas] IgG [13-15 diacuteas ] - Niveles oacuteptimos para deteccioacuten 2ordf y 3ordf semana de la enfermedad bull Sensibilidad - Creciente con el curso de la infeccioacuten gt90 a partir 2ordf semana - Mayor con kits de inmunoensayo ELISA (Enzima-Inmunoensayo) CLIA (Quimio-luminiscencia) 90-94 bull Alta especificidad (todos) ELISA asymp 99

Nuacutemero limitado de estudios sobre pruebas seroloacutegicas fuera del entorno hospitalario

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Dinaacutemica de aparicioacuten de Ac totales (Ab) IgM e IgG

Lou B Li T-D Zheng S-F et al Serology characteristics of SARSCoV-2 infection since exposure and post symptom onset Eur Respir J 2020 in press (httpsdoiorg1011831399300300763-2020)

N=80 Ab IgM IgG

Tasas de seroconversioacuten 988 938 938

Tiempo medio de seroconversioacutenDiacuteas tras la exposicioacuten al

COVID-19 15 18 20

Diacuteas despueacutes del inicio de siacutentomas 9 10 12

Sensibilidad desde inicio de los siacutentomas1-7 diacuteas 641 333 333

gt 2 semanas 100 967 933

80 pacientes COVID-19 durante sus periacuteodos de

hospitalizacioacuten

Medidos mediante teacutecnica de ELISA

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Zhao J Yuan Q Wang H et al Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients of novel coronavirus disease 2019 [published online ahead of print 2020 Mar 28] Clin Infect Dis 2020ciaa344 doi101093cidciaa344

Sensibilidad deteccioacuten RNA y Ac en diferentes diacuteas desde inicio siacutentomas [SARS-CoV-2]

Diacuteas desde inicio

n RNA [PCR] Ac Totales IgM IgG

Total 173 671 (594-741)

931 (882-964)

827 (762-88)

647 (571-718)

1-7 94 667 (557-764)

383 (285-489)

287 (199-390)

191 (118-286)

8-14 135 54 (448-630)

896 (832-942)

733 (650-806)

541 (453-627)

15-39 90 455 (320- 595)

100 (960-1000)

943 (872-981)

798 (699-876)

Meacutetodo ELISAMomento adecuado de la prueba de anticuerpos (deteccioacuten del pico )

bull Ac totales a partir 2ordf semana desde inicio de los siacutentomas bull IgM 3 ordf semana desde inicio de los siacutentomas bull IgG 3ordf semana desde inicio de los siacutentomas

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Tests seroloacutegicos raacutepidos

Actualmente existen gt 60 kits con marcado ldquoCErdquo La mayoriacutea se basan en la inmunocromatografiacutea (lateral-flow) Deteccioacuten cualitativa de anticuerpos (Totales IgM o IgG) Comparacioacuten de test de inmunoensayo

Menor sensibilidad (~70 a 886 ) y especificidad (~906) que ELISACLIA

Concordancia 757-948 de concordancia (ELISA y LFA) Maacutes vulnerables a falsas negativos y positivos

Precisan validaciones escenario cliacutenico de uso habitual Mayor variabilidad en la deteccioacuten de IgM maacutes variable que la IgG El rendimiento disminuyen con con cargas virales bajas (infeccioacuten leve) Poca utilidad en fase maacutes aguda la seropositividad alcanza el maacuteximo gt 20 diacuteas despueacutes

del inicio de los siacutentomas

Documento de posicionamiento de la SEIMC sobre el diagnoacutestico microbioacutelogo de COVID-19 27042020 (Internet) SEIMC Recomendaciones Institucionales 2020

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Kontou PI Braliou GG Dimou NL et al Antibody tests in detecting SARS-CoV-2 infection a meta-anaacutelisis medRxiv 2020042220074914

Raacutepidas LFIA

IgM

Ig

G

IgM

IgG

ELISA

~ 93 ~ 90

~ 80

IgM

Ig

G

IgM

IgG

N= 38 estudios (7848 individuos)

Inmunoensayo de flujo lateral en el punto de

atencioacuten (LFIA)

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Kontou PI Braliou GG Dimou NL et al Antibody tests in detecting SARS-CoV-2 infection a meta-anaacutelisis medRxiv 2020042220074914

IgM

Ig

G

IgM

IgG

Raacutepidas LFIA

IgM

Ig

G

IgM

IgG

ELISA

99 95-98 99

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Whitman JD Hiatt J Mowery CT Shy BR Yu R Yamamoto TN Rathore U et al Test performance evaluation of SARS-CoV-2 serological assays medRxiv 2020042520074856

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Grado de concordancia de test antigeacutenicos raacutepidos

856

941

849

Whitman JD Hiatt J Mowery CT Shy BR Yu R Yamamoto TN Rathore U et al Test performance evaluation of SARS-CoV-2 serological assays medRxiv 2020042520074856

10 Test de flujo lateral (LFA) vs 2 prueba de serologiacutea plasmaacuteticas (ELISA) 128 muestras de plasma o suero de 79 individuos RT-PCR [+] 108 controles negativos pre-COVID-19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Aplicaciones de las pruebas seroloacutegicas de inmunoensayos de deteccioacuten de anticuerpos COVID-19

Encuestas de seroprevalencia Diagnoacutestico de infeccioacuten por COVID-19 retrospectivo

PCR [-] con un fuerte viacutenculo epidemioloacutegico con la infeccioacuten por COVID-19

Muestras de suero en la fase aguda y convaleciente Diagnoacutestico es un diagnoacutestico retrospectivo y demasiado tarde para afectar el aislamiento

Aplicaciones potenciales Evaluacioacuten del estado inmune del personal de atencioacuten meacutedica Guiar las estrategias de levantamiento de medidas de bloqueo

Documento de posicionamiento de la SEIMC sobre el diagnoacutestico microbioacutelogo de COVID-19 27042020 (Internet) SEIMC Recomendaciones Institucionales 2020

La OMS los desaconseja con el objetivo de considerar a aquellos con anticuerpos como protegidos contra la reinfeccioacuten (pasaporte de inmunidad certificado libre de riesgosldquo) No se recomiendan para la deteccioacuten de casos agudos o activos

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Sethuraman N Jeremiah SS Ryo A Interpreting Diagnostic Tests for SARS-CoV-2 [published online ahead of print 2020 May 6] JAMA 2020101001jama20208259 doi101001jama20208259

Ac T IgM IgG

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Zhao J Yuan Q Wang H et al Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients of novel coronavirus disease 2019 [published online ahead of print 2020 Mar 28] Clin Infect Dis 2020ciaa344 doi101093cidciaa344

Sensibilidad deteccioacuten RNA y Ac en diferentes diacuteas desde inicio siacutentomas [SARS-CoV-2]

Diacuteas desde inicio n RNA [PCR] Ac Totales IgM IgG RNA+Ac totales

Total 173 671 (594-741)

931 (882-964)

827 (762-88)

647 (571-718)

994 (968-1000)

1-7 94 667 (557-764)

383 (285-489)

287 (199-390)

191 (118-286)

787 (691-865)

8-14 135 54 (448-630)

896 (832-942)

733 (650-806)

541 (453-627)

97 (926-992)

15-39 90 455 (320- 595)

100 (960-1000)

943 (872-981)

798 (699-876)

100 (960-1000)

Serologia + PCR mejoran significativamente la sensibilidad del diagnoacutestico de COVID-19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Caso sospechoso de infeccioacuten por SARS-CoV2

RT-PCR

+Caso COVID-19

confirmado

-iquestAlta sospecha

cliacutenica de COVID-19

Caso descartado

NO SI

RT-PCR (2ordf)

+ -SEROLOGIacuteA

(Ig M)

+() gt 10 diacuteas

Caso descartado

-

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Situacioacuten cliacutenica PCR IgM IgG Ac totales

Periodo ventana + - - -

Infeccioacuten activa

Temprana (lt14 diacuteas) + + - +Temprana falso [-] PCR - + - +Convalecencia (gt14 d) - + + +

Tardiacutea (gt 1 mes) - + + +Infeccioacuten pasada y curada (gt2meses) - - + +

Diagnoacutestico de la infeccioacuten COVID mediante pruebas microbioloacutegicas

PCR Diagnostica infeccioacuten (fase aguda)

Ac Fase convalecencia tardiacutea y asintomaacuteticos

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Gracias

COVID-19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Situacioacuten cliacutenica PCR IgM IgG Ac totales

Periodo ventana + - - -

Infeccioacuten activa

Temprana (lt14 diacuteas) + + - +Temprana falso [-] PCR - + - +Convalecencia (gt14 d) - + + +

Tardiacutea (gt 1 mes) - + + +Infeccioacuten pasada y curada (gt2meses) - - + +

Diagnoacutestico de la infeccioacuten COVID mediante pruebas microbioloacutegicas

PCR Diagnostica infeccioacuten (fase aguda)

Ac Fase convalecencia tardiacutea y asintomaacuteticos

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Gracias

COVID-19

COVID-19 | SARS-CoV-2 | GdTmdashsemFYC en Enfermedades Infecciosas | Actualizado 2020MAYO28

Gracias

COVID-19