Colorações e Meios de Cultura

Curso de Farmácia

Disciplina Microbiologia e Virologia Clínicas

Antibiograma

ANTIMICROBIANOS

(a) Bacteriostáticos…Inhibem o crescimento do microorganismo

(b) Bactericidas…Matam os microorganismos sem necessidade de

destrui-los ou lisa-los

(c) Bacteriolíticos…Matam os microorganismos por lise

“Substancia ou Agente capaz de atuar sobre os microorganismos, inibindo seu crescimento ou

causando sua morte”

Generalidades sobre antimicrobianos…

Métodos para realizar Antibiogramas Métodos para realizar Antibiogramas

•Difusão em Agar (Bauer-Kirby)

•Difusão em Caldo (Concentração Inhibitoria Mínima CIM)

•Difusão em caldo a 2 concentrações (Break-point)

•Gradiente de difusão (E-Test)

E-TestE-Test

METODO DE BAUER KIRBY

Passos críticos do AntibiogramaPassos críticos do Antibiograma

• MeioMeio de cultivo de cultivo

•InóculoInóculo

•AntimicrobianoAntimicrobiano

•Ambiente Ambiente

•TempoTempo

•LeituraLeitura

•InformeInforme

Vantagens e Desvantagens

Método de difusão em Agar (Kirby-Bauer)

V:•Simples de realizar e muito reprodutivel •barato •Não requer equipamento especial •Provê o tipo de resultado que o clínico necessita conhecer.•É flexivel no uso dos antimicrobianos.

D:O espectro de organismos que não se adaptam bem.Gera resultados qualitativos

Agar Mueller - Hinton

• Lote a lote tem demonstrado ter reprodutibilidade.

•Tem baixas concentrações de inhibidores de sulfonamidas, trimetoprim e tetraciclinas.

•Mantem o crescimento adequado de bacterias não fastidiosas.

•Tem superado a prova do tempo.

pH 7.2 – 7.4

Cuidados com Discos Antibióticos

•Temperatura de armazenagem

•Temperatura de uso.

•Guardar em refrigeração com umidade controlada.

Colocação dos discos

•Colocar não mais de 6 em placas de 100 mm.Colocar não mais de 6 em placas de 100 mm.

•Colocar não mais de 12 em placas de 150 mm.Colocar não mais de 12 em placas de 150 mm.

•A distancia entre discos deve ser pelo menos 24 mm.A distancia entre discos deve ser pelo menos 24 mm.

•Incubar durante os seguintes 15 minutosIncubar durante os seguintes 15 minutos

Método de Antibiogramas Kirby (difusión con disco)

• Leitura.Deepois de 16-18 horas de

incubação se examina a placa.Se medem los diámetros das zonas

de inibição completa (ocularmente), incluindo o diâmetro do disco.

As zonas se medem até o milímetro completo mais próximo, utilizando uma regua ou uma planilha preparada para este propósito, colocada sobre a superficie de placa Petri invertida.

Resistente(Não há halo de

inhibição)

Análise de varios antibióticos em

um mesmo ensaio

Sensible(Presença de halos de

inhibição)

Antibiograma por difusão…

“(Técnica de Kirby-Bauer)”

Cepas controle para um Antibiograma

Cepa ATCC USO

E. COLI 25922 Comprovar halos de P. AERUGINOSA 27853 inhibiçãoS. AUREUS 25923

Informe de resultados de um antibiograma

• S = Sensível

• I = Intermediário

• R = Resistente