ANALYSIS OF MICROBIOLOGY

SCOPE OF ANALYSIS OBJECTIVES SAMPLES METHODS

OBJECTIVES SPECIES/STRAINS IDENTIFICATION BIO-ACTIVITIES TEST VIABLE PLATE COUNT STERILITY TEST BIOBURDANT TEST POTENCY TEST DETERMINATION OF ACTIVE SUBSTANCES

SAMPLES FOODS DRUGS COSMETICS CHEMICALS OTHERS

METHODS STANDARD METHODS VALIDATED METHODS IMPROVED METHODS ACEPTABLE METHODS

STEPS OF ANALYSIS PROVIDING EQUIPMENTS MEDIA PREPARATION STERILIZATION STOCK CULTURES PREPARATION SAMPLES/STANDARD PREPARATION BIO-ASSAYS DATA ANALYSIS

ANALYSIS REQUIREMENTS

YOU HAVE TO MAKE SURE THAT YOU HAVE DONE EVERYTHING ASEPTICALLY

CONTAMINATION OF UNACCEPTABLE MICROORGANISMS SHOULD BE AVOIDED

ALWAYS USE CONTROL (POS. AND NEG.)

PLEASE BE CAREFUL, ESPECIALLY FOR PERFORMING PATHOGENIC MICROORGANISMS

PENGUJIAN MIKROBIOLOGI LAB. KLINIK (KEDOKTERAN, KESEHATAN) INDUSTRI OBAT, MAKANAN/MINUMAN (QC) INDUSTRI KOSMETIKA INDUSTRI ALAT KESEHATAN LAB. HEWAN (BALAI KARANTINA) BALAI PEMERIKSAAN OBAT DAN MAKANANDILAKUKAN OLEH:

KENDALA PENGUJIAN

STAF PENGUJI SARANA LABORATORIUM METODE ANALISIS PENGADAAN LAB. PENGEMBANGAN LAB.SOP(PROSEDUR OPERASIONAL BAKU PENGUJIAN)DISEBABKAN OLEH:HAMBATANDIATASI DENGAN:

PROSEDUR OPERASIONAL BAKU PENGUJIAN

FI EDISI III (1979) FI EDISI IV (1995) USP XXVI (2000) BP (2000) KODEKS MAKANAN INDONESIA (2000) KODEKS KOSMETIKA INDONESIA (1980) MANUAL OF FOOD QUALITY CONTROL-FAO (1979) PUSTAKA LAIN YANG MENUNJANGDISUSUN BERDASARKAN KETENTUAN :

JENIS PENGUJIAN TERGANTUNG:JENIS SAMPEL (OBAT, MAKANAN, KOSMETIKA, OBAT TRADISIONAL)TUJUAN PENGUJIAN (KONTROL KUALITAS, PENENTUAN KADAR,

REFERENSIFARMAKOPE INDONESIA ED III, 1979, DEP.KES.FARMAKOPE INDONESIA ED IV, 1995, DEP.KES.KIRSOP, B.E. AND A. DOYLE (1991), MAINTENANCE OF MICROORGANISMS AND CULTURED CELLS BATAS CEMARAN MIKROBA DAN BATAS MAKSIMUM RESIDU DALAM MAKANAN ASAL HEWAN, STANDAR NASIONAL INDONESIA (SNI) 01-6366-2000KAVANAGH,F. (1972), ANALYTICAL MICROBIOLOGYDANIEL, I.C.W. ET AL. (1979), FERMENTATION AND ENZYME TECHNOLOGYUSP 26 2003HORWITZ, W. (2000), OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF AOAC INTERNETIONAL ED. 17.

MAPING CONCEPT-SPESIFIK-NONSPESIFIK-BAKTERI-JAMURKARAKTERISASI/ IDENTIFIKASIANALISIS MIKROBIOLOGIUJI BATAS CEMARANUJI POTENSI DAN RASIO POTENSI A.BUJI EFEKTIVITASANTIMIKROBA UJI STERILITASAIR, TANAH, UDARA, ALAT, PERSONIL- TPC, AEROBIC PLATE COUNT, ALT- MPNALAT, BAHAN BAKU, MEDIA, SEDIAAN-DIFUSI AGAR-TURBIDIMETRIPOLA UJI STATISTIKJENIS, SPEKTRUMRESISTENSI DAN SENSITIVITASSUMBER KESALAHANKONSENTRASI HAMBATAN MINIMUM (KHM)OBAT, MAKANAN, BAHAN ALAM, HASIL FERMENTASIANALISIS SIFATMELAKUKAN/MEMILIHMENCARI SUMBERKUANTITASIMEMPERHATIKAN SUBSTANSI ANALISIS MEMPERHATIKAN SUBSTANSI ANALISIS MEMERLUKAN PENGERTIANMENGGUNAKAN METODEMENGHASILKAN DATA ANALISIS DATAHARUS MEMPERHATIKANMELIPUTI

KOMPONEN ANALISIS

SAMPEL/ANALIT/SPESIMENSTANDAR/BAKU/PEMBANDINGMIKROBA UJI/ INOKULUM MEDIA KULTURLARUTAN DAPARPELARUTLARUTAN PENGENCERMETODE ANALISIS YANG BAKU

BAHAN BAKU SEDIAAN OBAT MAKANAN MINUMAN SEDIAAN BIOLOGISMODERENTRADISIONAL

UNTUK PENETAPAN POTENSI ANTIBIOTIKA

ANTIBIOTIKAMIKROBA UJIATCCAMPISILINMicrococcus luteus9341GENTAMISINStaphylococcus epidermidis12228KLORTETRASIKLINStaphylococcus aureus29737KLORAMFENIKOLEscherichia coli10536NEOMISINKlebsiella pneumoniae10031DIHIDROSTREPTOMISINBacillus subtilis6633

FASILITAS UJI CLEAN ROOMS CLEAN ZONES ISOLATOR

TEKNIK ASEPTIKDITERAPKAN SELAMA: PENANGANAN SAMPEL PENYIAPAN SAMPEL PELAKSANAAN UJI

TUJUAN: MENJAGA KEMURNIAN KULTUR MENGURANGI KONTAMINASI MENJAMIN KEAMANAN PERSONEL

TAHAPAN ANALISIS

PENYIAPAN SPESIMEN UJI TEKNIK SAMPLING !PENYIAPAN STANDAR/PEMBANDINGPENYIAPAN INOKULUM/ MIKROBA UJIUJI STERILITAS MEDIA KONTROLUJI FERTILITAS KONTROL

SEBELUM UJI STERILITAS YAKINKAN BAHWA BAKTERIOSTATIK DAN FUNGISTATIK DALAM SAMPEL TIDAK MEMPENGARUHI HASIL ANALISISPROSEDUR UJI SESUAI DENGAN SAMPELGUNAKAN MEDIA ALTERNATIFTAMBAHKAN INAKTIVATOR/NEUTRALIZERLAKUKAN UJI EFEKTIVITAS ANTIMIKROBA SEBAGAI PRESERVATIF MENGGUNAKAN ENCERAN MIKROBA UJI SAMPAI DIPEROLEH JUMLAH MIKROBA < 100 CFU

UNTUK UJI STERILITAS INKUBASI DILAKUKAN MINIMAL PADA DUA MACAM SUHULAMA INKUBASI DITUNGGU SAMPAI 14 HARIGUNAKAN INDIKATOR UNTUK KONTROL STERILITAS

KEY WORDSUJIPOTENSIANTIBIOTIKAUJI POTENSI ANTIBIOTIKA

UJI

SYARAT UJISTERILITAS, TEKNIK ASEPTIK, KONTROL, PEMBANDING/BAKU/STANDAR, MIKROBAMETODE UJI DIFUSI ATAU CARA TABUNG FASILITAS UJI PENCADANG: ring, sumur, cakram ANALISIS HASILUJI BIOMETRI (FARMAKOPE IND. IV, 1995)

POTENSI

DAYA/KEMAMPUAN ANTIBIOTIKA/ANALIT MENGHAMBAT PERTUMBUHAN/MEMBUNUH MIKROBA UJI DIAMETER ZONA JERNIHINTENSITAS KEKERUHAN DINYATAKAN SEBAGAI

ANTIBIOTIKA

SUATU SENYAWA YANG DIHASILKAN OLEH MIKROORGANISME, YANG DALAM JUMLAH KECIL DAPAT MENGHAMBAT PERTUMBUHAN ATAU MEMBUNUH MIKROORGANISME LAIN

MEKENISME KERJA JENIS ANTIBIOTIKAPEKA/SENSITIF TERHADAP PERUBAHAN GRADIENT KONSENTRASI

Kurva pertumbuhan mikro-organisme

Alur fermentasi penisilin dari P. chrysogenum

Kultur persediaan B. Subtilis

MediaPertumbuhan

Pengamatan Zona Diagram alur Uji potensi antibiotika (F1 Ed IV, 1995)Inkubasi

SUMBER KESALAHAN ANALISISMIKROBA SBG. MAHLUK HIDUPPERLAKUAN PRA-ANALISISASIMETRIS SISTEM PENGUJIANVARIASI SISTEM HAYATI:KONDISI PERCOBAAN (SUHU INKUBASI, pH MEDIA)POLA PERCOBAANINOKULASI ISOLASI PEMISAHAN PEMURNIAN PENIMBANGAN PENGENCERANKOMPONEN LAINHASIL DEGRADASIPERBEDAAN NO. BATCH MEDIA, BAHAN BAKUMETODE TIDAK SESUAIVARIASI POTENSI DALAM SUATU SERI ENCERAN SAMPELKESALAHAN RAWUKESALAHAN SISTEMATIKBIAS/KESALAHAN NON-RAWUJUMLAH SAMPEL >> POLA UJI HAYATI : BIOMETRISERAGAMKAN KONDISI PERCOBAANGUNAKAN PEMBANDINGSPESIFIK, TERGANTUNG SUMBER KESALAHAN

INTERPRETASI HASIL UJI APABILA HASIL UJI STERILITAS MENUNJUKKAN TIDAK ADA PERTUMBUHAN MIKROBA, MAKA UJI STERILITAS CLEAN ROOMS DAN CLEAN ZONE PERLU DILAKUKAN.APABILA HASIL UJI STERILITAS MENUNJUKKAN ADANYA PERTUMBUHAN MIKROBA, MAKA TIDAK PERLU DILAKUKAN UJI STERILITAS CLEAN ROOMS DAN CLEAN ZONEAPABILA PERTUMBUHAN TSB. DISEBABKAN OLEH KESALAHAN TEKNIK ASEPTIK ATAU BAHAN YANG DIGUNAKAN, HASIL UJI TIDAK VALID DAN HARUS DIULANG.

INTERPRETASI HASIL UJI(LANJUTAN) JIKA PADA INTERVAL WAKTU TERTENTU ATAU AKHIR INKUBASI PERTUMBUHAN NEGATIF, MAKA BAHAN UJI DINYATAKAN MEMENUHI SYARAT

JIKA PERTUMBUHAN MIKROBA TERAMATI, MAKA PERLU DILAKUKAN PENGAMATAN TAHAP KEDUA DENGAN MENAIKKAN JUMLAH SPESIMEN MINIMUM DUA KALI TAHAP SEBELUMNYA

FAKTOR-FAKTOR YANG MENDUKUNG HASIL ANALISIS MIKROBIOLOGIPENYIAPAN ALAT-ALATPEMILIHAN DAN PREPARASI MEDIAPRINSIP TEKNIK ASEPTIKSTERILISASI (ALAT, BAHAN DAN MEDIA)PREPARASI LEMPENGKULTIVASI MIKROBA TEKNIK MENUANG MEDIATEKNIK MENGGESEKPENANAMAN BIAKAN MIKROBA PADA AGAR MIRING DAN MEDIA CAIRINKUBASI

*********************************