Enterobacterias Lab Clinico

ENTEROBACTERIAS

ENTEROBACTERIAS

40 géneros.150 especies.20 especies responsables de patología humana.Distribuidas en suelo, agua, alimentos.Flora normal del intestino de humanos y animales.

TABLE 206–1 The Tribes and Genera of the Family Enterobacteriaceae That Are Associated with Human Disease

Tribe Genera

Escherichieae Escherichia

Shigella

Edwardsielleae Edwardsiella

Salmonelleae Salmonella

Citrobactereae Citrobacter

Klebsielleae Klebsiella

Enterobacter

Hafnia

Serratia

Protease Proteus

Morganella

Providencia

Yersinieae Yersinia

Erwinieae Erwinia

Miscellaneous genera (not yet assigned to a tribe) Buttiauxella

Cedecea

Ewingella

Kluyvera

Tatumella

Rahnella

Various “enteric groups” (not yet assigned to a genus)

TABLE 206–2 Names and Synonyms of Recovered Isolates of Enterobacteriaceae (Excluding Yersinia, Shigella, and Salmonella)

Current Name Synonym

Cedecea davisae Enteric group 15

Cedecea lapagei Cedecea sp. 4

Cedecea neteri

Citrobacter amalonaticus

Citrobacter diversus Citrobacter koseri

Citrobacter freundii Colobactrum freundii

Edwardsiella tarda

Enterobacter aerogenes Aerobacter aerogenes

Enterobacter amnigenus

Enterobacter asburiae Enteric group 17

Enterobacter hormaechi Enteric group 75

Enterobacter sakazakii

Enterobacter taylorae Enteric group 19

Escherichia fergusonii Enteric group 10

Escherichia hermannii

Escherichia vulneris

Ewingella americana

Hafnia alvei

Klebsiella ornithinolytica Klebsiella oxytoca ornithine positive

Klebsiella oxytoca

Klebsiella ozaenae

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella rhinoscleromatis

Kluyvera ascorbata

Moellerella wisconsinsis Enteric group 46

Morganella morganii subsp. morganii Proteus morganii

Proteus mirabilis Proteus vulgaris indole negative

Proteus penneri

Proteus vulgaris Proteus inconstans

Providencia alcalifaciens

Providencia rettgeri Proteus rettgeri

Providencia stuartii Proteus inconstans

Serratia liquefaciens Enterobacter liquefaciens

Serratia marcescens Centers for Disease Control and Prevention group E9

Serratia plymuthica

Serratia proteamaculans subsp. quinovora

Serratia rubidaea

Tatumella ptyseos

Trabulsiella guamensis Enteric group 90

Yokenella regensburgei Koserella trabulsii enteric group 45

ENTEROBACTERIAS

• MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES Bacilos cortos gram negativos, no esporulados, mótiles (flagelos

perítricos) o no, capsulados o no, pilis.

• BIOQUÍMICASAnaerobios facultativos, catalasa positiva, oxidasa negativa, fermentan la glucosa, reducen nitratros a nitritos, y pruebas IMViC

ENTEROBACTERIAS

• CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

MEDIOS DE CULTIVO

1. Medios no selectivos: agar sangre

2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB, ENDO

McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).

Agar EMB: colonias grises(fermentan lactosa) y colonias transparentes (no fermentan lactosa).

3. Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entérico.

ENTEROBACTERIAS

• CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN

1. Pruebas bioquímicas

2. Pruebas serológicas

3. Pruebas de biología molecular

ENTEROBACTERIAS• CULTIVO E IDENTIFICACIÓN

PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS

Prueba TSI (triple azúcar hierro)

Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.

Resultados: Superficie inclinada/fondo: - alcalina/alcalina: BGNF (Pseudomonas).

- ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, etc

- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+), Shigella (H2S -), Yersinia.

TSI

TSI

ENTEROBACTERIAS

OTRAS PRUEBAS BIOQUÍMICASProducción de ureasaProducción de indolUtilización del citratoMotilidadDescarboxilación de lisina, arginina, ornitinaProducción de fenilalanina desaminasaProducción de H2SPrueba VP

Prueba Rojo de metilo

PB determinacion de fenilalanina para identificar Proteus

PB Citrato de Simmons

PB Indol que se revela con reactivo de Kovacs

ENTEROBACTERIAS

• Enterobacterias Enteropatógenas

• Enterobacterias No Enteropatógenas

ENTEROBACTERIAS

ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

Antígeno O: LipopolisácaridoAntígeno K: Cápsula

Antígeno H: Flagelina

Enterobacterias no enteropatógenas

Klebsiella pneumoniaeProteus mirabilisProteus vulgarisEnterobacter cloacaeCitrobacter freundiiSerratia marcescensMorganella morganiiProvidencia

Enterobacterias enteropatógenas

E. coliSalmonellaShigellaYersinia enterocoliticaYersinia pseudotuberculosis

ENTEROBACTERIASNO ENTEROPATÓGENAS

Enterobacterias no enteropatógenas

Factores de patogenicidad generales• Endotoxina• Cápsula• Variación antigénica de fase (ag K y ag H)• Sideróforos• Pilis de adherencia o fimbrias

Enterobacterias no enteropatógenas

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenasPatologías

Infección urinariaMeningitisNeumonía Abscesos intraabdominalesAbscesos cerebralesSepticemia

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

Pilis: adherencia a epitelios respiratorio y urinarioCápsula antifagocítica

PatologíasK. pneumoniae y K. oxytoca: infecciones urinarias, neumonía y otras infecciones nosocomialesK. rhinocleromatis: rinoescleromaK. ozaenae: ozena

KlebsiellaKlebsiella

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella pneumoniaeCápsula

Klebsiella pneumoniae

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

PilisUreasa

PatologíasInfecciones urinarias, bacteremia, neumonía: En pacientes debilitados.

ProteusProteus

Proteus

Proteus

Proteus swarming

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

Pilis

PatologíasInfecciones urinarias, septicemia.

EnterobacterEnterobacter

Enterobacter

Enterobacter

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

PilisS. marcescens: pigmentos rojos

PatologíasInfecciones urinarias, bacteremia, neumonía. En pacientes debilitados.

SerratiaSerratia

Serratia

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenasDiagnóstico

- Muestras- Frotis- Cultivo e identificación: Cultivo: ASH, MacConkey o agar EMB (Lactosa positiva) Identificación: Prueba TSI: ácida/ácida Otras pruebas bioquímicas: Urea, citrato, indol, motilidad, descarboxilación de lisina, arginina, ornitina, VP.

ENTEROBACTERIAS

Enterobacterias no enteropatógenas

Tratamiento

Antibiótico según antibiogramaResistencia a antibióticos: cromosómica oplasmidial.

ENTEROBACTERIAS ENTEROPATÓGENAS

E. coli

E. coli

ENTEROBACTERIAS

Patologías Infecciones urinariasMeningitis en RNSepticemiaNeumoníaInfección de heridasInfecciones intraabdominales

E. coliE. coli

E. Coli en agar Sangre

E. Coli en agar ENDO

E. Coli en agar Mc Conkey

Enterobacterias enteropatógenasEscherichia coli

Clasificación de las cepas productoras de diarreaE. coli enterotoxigénicaE. coli enteropatógenaE. coli enterohemorrágicaE. coli enteroinvasivaE. coli enteroagregante

Enterobacterias enteropatógenas

Escherichia coliAntígenos O: 150 diferentesAntígenos KAntígenos HEj: E. coli O111:K76:H7

ENTEROBACTERIAS

Factores de patogenicidad específicos

Pilis 1: manosaPilis P: gal-gal (uroepitelio)Pilis de adherencia agregativa (AAF) (uroepitelio e intestinal)Pilis AFC (factor de colonización) (epitelio intestinal)Pilis formadores de poros o haces (BFP) (epitelio intestinal)Polisacárido capsular K1 (Ácido siálico): antifagocíticoHemolisina alfa: formadora de poros

E. coliE. coli

E. COLI ENTEROTOXIGÉNICAEpidemiología:Diarrea infantil en países subdesarrolladosDiarrea del viajeroTransmisión oral-fecalSerotipos O: 6, 8, 25, 78,115, 128Patogénesis:Colonización del intestino delgado (pilis AFC)Enterotoxina LT y enterotoxina ETAumento del AMPc y GMPcSalida de agua y electrolitosDiarrea acuosa

E. COLI ENTEROTOXIGÉNICAInmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración

Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralMuchas veces no requiere antibióticos

E. COLI ENTEROPATÓGENA

Epidemiología:Diarrea infantil en países subdesarrolladosDiarrea en menores de 1 año (20 %)Transmisión oral-fecalSerotipos O: 26, 111, 55, 119, 128

Patogénesis:Colonización del intestino delgado Lesión de fijación/borramiento: pilis BFP, proteína intimina, proteínasde secreción.Modificaciones del citoesqueleto: destrucción de actina de las microvellosidades. Alteración de la absorciónDiarrea acuosa

E. COLI ENTEROPATÓGENAInmunidad: Anticuerpos IgA de corta duración

Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralAntibióticos

E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Epidemiología:Diarrea en países desarrolladosAsociado al consumo de carne bovinaE. coli O:157 H:7Dosis infectante baja: 100 a 200 microorganismos

E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Patogénesis:Colonización del intestino grueso Pilis AFCLesión de fijación y borramientoProducción de citotoxina tipo Shiga o VerotoxinaLesiones hemorrágicasDiarrea con sangreFijación de citotoxina al glomérulo renal y las plaquetas de la microcirculación.Síndrome Urémico-Hemolítico

E. COLI ENTEROHEMORRÁGICA

Tratamiento:Hidratación Oral o ParenteralSíndrome urémico-hemolítico: hospitalizaciónNo dar antibióticos

E. COLI ENTEROINVASORA

EpidemiologíaDiarrea con moco y sangre en niños menores de 5 añosRelacionada con las ShigellasTransmisión oral-fecalÚnico reservorio el hombreSerotipos O: 28, 29, 112, 143, 164

Patogénesis:Colonización de la mucosa del intestino gruesoProteínas Ipa: capacidad de invadir y producir úlceras en la mucosa colónicaDosis infectante altaDiarrea con moco y sangre (Síndrome disentérico)

Tratamiento: Hidratación

E. COLI ENTEROAGREGANTE

Epidemiología:Diarrea con mocoDiarrea crónica + 14 díasTransmisión oral-fecalNiños y lactantes

Patogénesis:Colonización del intestino delgado (pilis adherencia agregativa o AAF)Formación de bio-película mucosaDiarrea con moco

Diagnóstico de E. coli productoras de diarrea

Pruebas de identificación

- Aglutinación en lámina con antisueros (Todas)- ELISA y sondas de ADN para detección de toxinas (ECET)- McConkey sorbitol: sorbitol negativa (ECEH)- Prueba de potencial enteroinvasivo en cultivos celulares (ECEI).- Sondas de ADN, patrones de adherencia agregativa en cultivos celulares (ECEAg)

TratamientoQuinolonas Trimetropin sulfaAmpicilina

PrevenciónHervir el aguaCocinar los alimentosEliminar insectos como moscas, cucarachasQuimioprofilaxis

Enterobacterias enteropatógenasShigella

S. dysenteriaeS. flexneriS. sonneiS. boydii

Shigella

Shigella

Epidemiología:Sólo infecta al hombreDosis infectante de 200 microorganismosNiños de países subdesarrolladosHacinamiento, moscas y cucarachasTransmisión oral-fecalS. dysenteriae es toxigénica (Toxina de Shiga)La especie más frecuente es S. flexneriLa especie más virulenta es S. dysenteriae

Shigella

Patogenia:Acido resistenciaInvasión de las células M de las placas de Peyer del colonAntígenos de invasión IpaA, IpaB, IpaC, IpaD (plasmidos)Ondulaciones en la membrana celular – englobamiento de las bacterias - ruptura de la vacuola endocítica – multiplicación en el citoplasmaPolimerización de la actinaInvasión de los enterocitos adyacentesInducción de apoptosis – liberación de IL-1B (atrae PMN)Formación de las úlceras y microabscesosToxina de Shiga: enterotóxica, citotóxica y neurotóxicaSíndrome disentérico: diarrea con moco, sangre y pus

Shigella

ENTEROBACTERIAS

ShigellaDiagnóstico

MuestraFrotisCultivo: MacConkey: lactosa negativo Agar SS: Salmonella-shigella agar Agar XLD: Xilosa-lisina-dexosicolatoIdentificación: TSI: alcalina/ácida, H2S negativo Serología: aglutinación en lámina con antisueros específicos.

Crecimiento de Shigella en medio MacConkey

Colonias de Shigella

Crecimiento de Shigella en SS

Shigella

TratamientoAntibióticosAmpicilina, Trimetropin-sulfa, Quinolonas, Cef de 3° gNo usar antiespasmódicos ni antidiarreicos

PrevenciónSaneamiento ambientalControl de insectosCocción de los alimentos

Enterobacterias enteropatógenasSalmonellaClasificación

S. enterica, subespecie entericaSerotiposS. enteritidisS. typhimuriumS. typhiS. paratyphi AS. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)

Salmonella

Salmonella

Epidemiología:Todas los serotipos, excepto S. typhi y S. paratyphi, infectan al hombre y animales como mamíferos, aves y anfibiosDosis infectantes 1000 microorganismosProductos aviarios: huevos crudosSociedades industrializadasMás frecuente en época de calorEl uso de antiácidos aumenta la incidenciaNiños menores de 5 años y mayores de 70 años.Producen diarrea o fiebre entérica

Salmonella

Salmonella enteritidis

Patogénesis de la gastroenteritis:Invade células M del intestino delgado y grueso La adherencia (fimbrias específicas para cada especie) produce ondulaciones en la superficie celularSistema de invasión PAI (invA, invB, spaP, spaQ)Formación de una vacuola endociticaTranscitosisPaso a la submucosaEnglobadas por los macrófagos intestinales – sobreviven a la fagocitocis gracias a la apoptosis de los macrófagosInflamación y ulceración de la mucosa y submucosa intestinalInvasión del torrente linfático y luego circulatorio

Salmonella typhiPatogénesis de la Fiebre Tifoidea Factor de virulencia Vi (cápsula) inhibe la fagocitosis por los PMNInvade células M del intestino delgadoTranscitosis Fagocitosis por los macrófagos intestinalesMultiplicación dentro del macrófagoInvasión del torrente linfático: Colonización de los órganos del SER (ganglios mesentéricos, bazo, hígado y medula ósea), invade torrente circulatorio y siembra a distanciaLiberación de endotoxinasCircuito enterohepático

Epidemiología :El reservorio es el HombreSe trasmite únicamente Hombre-Hombre, vía oral-fecalPortador crónico en la vesícula biliarManipuladores de alimentosDosis infectante moderada 105 a 106

Salmonella

Patologías:GastroenteritisBacteriemia e infección a distanciaFiebre tifoidea o paratifoidea

Salmonella

Fiebre tifoidea

Salmonella enteritidisDiagnóstico

Muestra: hecesFrotis y GramCultivo:

Agar MacConkey: lactosa negativoSSAgar XLD

Identificación: TSI: alcalina/ácida y H2S +

Serología

Salmonella typhi

Diagnóstico- Cultivos: Primera semana: hemocultivo Segunda semana: coprocultivo Tercera semana: urocultivo Cuarta semana: mielocultivo- Prueba de Widal

SALMONELLA agar SS

Salmonella XLD

Salmonella

TratamientoSíndrome diarreico: uso discutido de antibióticosFiebre tifoidea: cloranfenicol, cefalosporinas, quinolonas

SalmonellaPrevención

Higiene ambientalHigiene personalCocción de los alimentosVacuna de bacterias inactivadasVacuna de bacterias vivas atenuadasEliminación de los portadores sanos de S. typhi

Enterobacterias enteropatógenasYersinia enterocolítica y Yersinia

pseudotuberculosis

Epidemiología:Las infecciones por Yersinia son zoonóticas.Alimentos o aguas contaminadas.Frecuente causa de enterocolitis en países Escandinavos y Europeos.Tasa baja de aislamiento.

Yersinia enterocolitica

Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosis

Patogenia:Invaden las células M de la placas de PeyerProteína invasina se fija a las integrinasProteínas de la membrana exterior de Yersinia (pmeY): Efectos citotóxicos: alteración de procesos bioquímicos como desfosforilización, cinasa de la serina, alt de funciones sensoras y del citoesqueleto de actinaGenes PAI: sideróforosMultiplicación en las células del SERGanglios mesentéricos Formación de microabscesosDiseminación

Yersinia enterocolítica y Yersinia pseudotuberculosisPatologías

Linfaadenitis mesentéricaEnterocolitisFiebre intestinalSíndrome poliartríticoIleitis terminal

TratamientoAmpicilina, tetraciclina, cloranfenicolY. enterocolitica resistente a penicilina y cefalosporina (betalactamasas)