Progetto cofinanziato dai programmi “FESR Competitività regionale 2007/2013” e “FSE Occupazione 2007/2013”

UNITÀ DI RICERCA

“Nutraceutici in Valle d’Aosta”

“A nutraceutical is a food or part of a food such as a dietary supplement that has a medical or health benefit including the prevention and treatment of disease.”

Dott. Stephen De Felice, 1989

“Fa che il cibo sia la tua medicina e che la medicina sia il tuo cibo.”

Ippocrate, V sec. a.C. circa

“Nutraceutici in Valle d’Aosta”

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

“Nutraceutici in Valle d’Aosta”

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

Attività antiossidante che contrasta l’azione dei radicali liberi

… prevengono l’insorgenza di patologie cronico-degenerative come diabete, aterosclerosi, tumori e patologie cardiovascolari.

“Nutraceutici in Valle d’Aosta”

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

Caratterizzazione Chimica: prodotti e loro trasformati Validazione biologica: estratti e trasformati

VALORIZZAZIONE

OBBIETTIVI

“Nutraceutici in Valle d’Aosta”

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

RILIEVI IN FRUTTETO Leggero posticipo (circa 10 gg) della fioritura rispetto all’anno precedente, soprattutto a

causa delle continue precipitazioni associate a temperature piuttosto basse. Tale posticipo si è

comunque attenuato con il procedere della stagione vegetativa.

CAMPIONAMENTI

3 step 3 frutteti

14 Campioni (30 mele ognuno)

Indici di maturazione: zuccheri

(°BRIX), acidità totale, amido, durezza.

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

“Longevità in un sorso di mela”

Moncenis

Renetta Canada

Jonagold

Golden Delicious

Ravèntze

St Christophe St Marcel - Seissogne

Corretto momento di raccolta

Ravèntze

Renetta Canada

Jonagold

Golden Delicious

DRIED POWDERED PEEL

DRIED POWDERED FLESH

+ MetOH 100%

ULTRASONIC BATH

3X15 min

CENTRIFUGE

15 min, 3000xg

SUPERNATANT

VACUUM CENTRIFUGE

Dried and reconstituted in H2SO4 1N

or in the initial LC solvent

SOLID PHASE EXTRACTION

FILTER 0,22 μm

FOLIN-CIOCALTEU ASSAY SPECTROPHOTOMETER

Abs 750 nm

HPLC-MS/MS

PHENOLIC COMPOUNDS

Total polyphenol content

FRESH APPLE

PEEL + FLESH

+ CH3COCH3 70%

EXTRACTION

BLENDER

Sample purification

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

CARATTERIZZAZIONE CHIMICA

“Longevità in un sorso di mela”

PROVE SPERIMENTALI: bianco-macerato Fermo-spumante

Ravèntze Renetta Jonagold Golden Deliciuos

Studio del processo di trasformazione

SOLID PHASE EXTRACTION

Sample purification

FOLIN-CIOCALTEU ASSAY

Total polyphenol content

Filter 0.22 μm

LINEA COMMERCIALE

GC-MS (quali-quantitativa)

HPLC-MS (quali-quantitativa)

mosto

sidro

CHIMICHE DI BASE: pH, acidità totale, densità, alcool, sostanza secca, acidità volatile, acido malico, acido lattico, zuccheri residui; solo sui macerati alcool metilico.

sidro mosto CHIMICHE DI BASE: pH, acidità totale, densità,

gradi Babo, gradi Brix

SPECTROPHOTOMETER

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

Totale 48 campioni

“Longevità in un sorso di mela”

SPME

RILIEVI FENOLOGICI Tutti i vigneti sono stati vendemmiati in

perfette condizioni sanitarie., tranne un vigneto di Petit rouge che presentava un attacco oidico,

esteso all'intera superficie, di eccezionale gravità, al punto che non è stato possibile

ottenere un campione completamente sano.

CAMPIONAMENTI

3 step 3 vigneti

13 CAMPIONI (300 acini ognuno)

“LA VITE PER LA VITA”

Petit Rouge

Premetta

Fumin

Curve di maturazione: analisi tecnologiche e fenoliche per individuare il periodo migliore di vendemmia.

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

Aymavilles

Aosta

St Christophe

Giusto momento di vendemmia

MAGNETIC

STIRRER

19 h,

room temperature

CENTRIFUGE

10 min,

6000xg SUPERNATANT

VACUUM

CENTRIFUGE

Dried and reconstituted

in H2SO4 1N

or in the initial LC

solvent

SOLID PHASE

EXTRACTION

FILTER 0,22 μm

FOLIN-CIOCALTEU

ASSAY

SPECTROPHOTOMETER

Abs 750 nm

HPLC-

MS/MS

PHENOLIC

COMPOUNDS

Total polyphenol

content

Petit

Rouge

Premetta Fumin

DRIED POWDERED

SKINS

DRIED POWDERED

SEEDS

+

MetOH

100%

“LA VITE PER LA VITA”

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

CARATTERIZZAZIONE CHIMICA

ULTRASONIC BATH

3X15 min

HTPE

3h , 150°C

“LA VITE PER LA VITA”

Prove Sperimentali

SOLID PHASE EXTRACTION

Sample purification

FOLIN-CIOCALTEU ASSAY

Total polyphenol content

Filter 0.22 μm

Linea Commerciale

HPLC-MS (quali-quantitativa)

Premetta

Analisi chimiche di base: pH, acidità totale, solforosa libera e totale, alcool, acido malico.

Analisi chimiche di base: zuccheri (°Brix), densità, pH, acidità totale.

Mosto Vino

SPECTROPHOTOMETER

(quantitativa)

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

Petit Rouge Fumin

Vino

Antociani, Acidi Cinnamici, Tannini.

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

SYSTEMS BIOLOGY

CONVERSIONE DEI PROCESSI IN FORMATO NETWORK

TEXT MINING PER IDENTIFICARE NUTRACEUTICI

IDENTIFICAZIONE DI POTENZIALI TARGET

1

2

3

4

IDENTIFICAZIONE PROCESSI INFIAMMATORI

+

estratti

+

cellule endoteliali da vena ombelicale EAhy 926

fattore di necrosi tumorale

TNFα

• vitalità e proliferazione cellulare • dosaggio proteico • western blot (markers infiammatori e di danno endoteliale: eNOS, ICAM-1, ACE, AT1) • saggio immunoenzimatico (citochine infiammatorie IL-6, IL-10) • zimogramma (metalloproteasi MMP-2, MMP-9)

TEST CELLULARI

POTERE ANTIRADICALICO

estratti

Vino mosto sidro

VALIDAZIONE BIOLOGICA

“Nutraceutici in Valle d’Aosta”

VALORIZZAZIONE

“Nutraceutici in Valle d’Aosta”

Ivan Barrel

Morgan Diemoz Lale Demoz Provino

Antonella Sado Donato Stevenin

Laura Thedy

Daniele Domeneghetti

Laurent Cuneaz Fabio Gorraz

Antonella Sado Laura Thedy

Odoardo Zecca

Marcello Freguglia

BORSISTI FSE

Institut Agricole Régional, 13 marzo 2015 – Sabina Valentini

Andrea Barmaz Direttore

Sperimentazione