21
i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (Sel HeLa) DENGAN METODE MTT SECARA IN VITRO PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2014

SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

  • Upload
    letuyen

  • View
    234

  • Download
    3

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

i

SKRIPSI

ROSYIDATUL MALIHAH

SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN

BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on

Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

SERVIKS (Sel HeLa) DENGAN METODE MTT

SECARA IN VITRO

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2014

Page 2: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

ii

Lembar Pengesahan

SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN

BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites

moluccana) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (Sel

HeLa) DENGAN METODE MTT SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Dibuat Untuk Memenuhi Syarat Mencapai Gelar Sarjana Farmasi Pada

Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang

2014

Oleh:

Rosyidatul Malihah

201010410311100

Disetujui Oleh:

Pembimbing I Pembimbing II

Siti Rofida, S.Si., M. Farm., Apt. Ahmad Shobrun Jamil, S. Si., M.P.

NIP 11408040453 NIP 11309070469

Page 3: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

iii

Lembar Pengujian

SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN

BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites

moluccana) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (Sel

HeLa) DENGAN METODE MTT SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Telah diuji dan dipertahankan di depan tim penguji Pada tanggal 24 Juni 2014

Oleh:

Rosyidatul Malihah

201010410311100

Tim Penguji:

Penguji I Penguji II

Siti Rofida, S.Si., M. Farm., Apt. Ahmad Shobrun Jamil, S. Si., M.P.

NIP 11408040453 NIP 11309070469

Penguji III Penguji IV

Drs. H. Achmad Inoni, Apt. Nailis Syifa, S.Farm., M. Sc., Apt.

NIDN 0020124205 NIP 11413110522

Page 4: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Alhamdulillahirrobbil’alamin, segala puji dan syukur penulis panjatkan

kepada Allah SWT atas segala rahmat, nikmat dan pertolonganNya sehingga

penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul SITOTOKSISITAS

EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrphthoe sp. grew on

Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (SEL HeLa)

DENGAN METODE MTT SECARA IN VITRO.

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari

peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh karena itu, dengan

segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada:

1. Siti Rofida, S. Si., M.Farm., Apt. selaku dosen pembimbing I dan Ahmad

Shobrun Jamil, S. Si., MP. selaku dosen pembimbing II atas saran,

bimbingan, dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu

untuk membimbing dan mengarahkan penulis sampai terselesaikannya

skripsi ini.

2. Nailis Syifa, S. Farm., M. Sc., Apt. Dan Drs. H. Achmad Inoni, Apt.

selaku dosen penguji yang telah banyak memberikan saran dan masukan

demi kesempurnaan skripsi ini.

3. Yoyok Bekti Prasetyo, M. Kep., Sp. Kom. selaku Dekan Fakultas Ilmu

Kesehatan yang telah memberikan kesempatan penulis belajar di Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

4. Nailis Syifa, S. Farm., M. Sc., Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberi motivasi dan

kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang.

5. Sovia Aprina Basuki, S. Farm., M. Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium

di Program Studi Farmasi, yang telah memberi kesempatan kepada penulis

Page 5: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

v

supaya bisa menyelesaikan penelitian skripsi di laboratorium Farmasi

Universitas Muhammadiyah Malang.

6. Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada,

khususnya Prof.Dr.Supargiyono,DTM&H.,SU.,PhD.,Sp.ParK dan Ibu

Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat

agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik.

7. Hidajah Rachmawati, S. Farm., Apt., Sp. FRS. selaku dosen wali. Terima

kasih atas arahan ibu baik tentang akademik atau non akademik selama ini.

8. Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat. Terutama Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt., dan Ibu

Sendi Lia Yunita, S. Farm., Apt. yang telah susah payah membantu jalanya

ujian skripsi sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi dengan baik.

9. Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi.

10. Untuk Bapak (H. Saifullah Sholeh) dan Bunda (Siti Rohana) serta Ibu (Sri

Pujiati) tercinta dan tersayang yang tiada hentinya memotivasi dalam

segala hal, dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan

putrinya. Terima kasih banyak atas didikan dan kerja keras untuk membuat

putrinya bahagia serta mendapatkan ilmu yang bemanfaat.

11. Untuk semua saudara tersayang, terutama adik Rizal, adik Iva, adik Tus

dan adik Vickry yang selalu mendoakan dan memberikan semangat

kepada penulis dalam proses perampungan skripsi ini.

12. Untuk mas Bagus, terima kasih atas semangat, pengertian dan

perhatiannya selama ini untuk bisa menyelesaikan skripsi ini, semoga

Allah selalu memberikan kemudahan dan keberkahan untuk kita.

13. Teman–teman seperjuangan bahan alam : Iin, Miftah dan Ina atas

kebersamaan, bantuan, motivasi dan semangat serta kerjasamanya

sehingga skripsi ini dapat terwujud.

14. Para sahabat yang tersayang dan setia menemani saya sampai saat ini:

Anis Khn, Anis Sofi dan Pipit, terima kasih atas motivasi dan

Page 6: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

vi

kebersamaannya selama ini dan juga terima kasih atas pelajaran yang

kalian berikan yang tidak pernah saya dapat di bangku pendidikan.

15. Teman-teman Farmasi 2010 terutama Mbak Lailis, Iin, Rahayu dan Desi,

terimakasih atas kebersamaannnya selama 4 tahun terakhir ini, kalian

memberikan semangat baru dalam kehidupan ini.

16. Bapak dan Ibu kos terima kasih atas motivasi dan perhatiannya selama ini

beserta teman-teman kos Jalan Bendungan Sutami Gang 2A. No. 51 atas

kebersamaannya.

17. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan, doa yang telah kalian semua berikan.

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis

tidak mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini. Semoga penulisan skripsi ini

dapat berguna bagi penelitian berikutnya ataupun bagi semua pihak yang

membaca skripsi ini, amiin.

Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang, 24 Juni 2014

Penyusun

Rosyidatul Malihah

Page 7: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

vii

RINGKASAN

Pada dewasa ini, Penyakit kanker merupakan penyebab kematian kedua

setelah penyakit kardiovaskular (Diananda; 2007, Nafrialdi dan Gan; 2011).

Kanker serviks adalah kanker primer dari serviks. Kanker serviks merupakan jenis

kanker tersering kedua di dunia pada wanita, dengan estimasi 529.409 kasus baru

dan 274.883 kematian pada tahun 2008 (Rachmawati dkk; 2013). Menurut

Depkes RI pada tahun 2010 angka kejadian kanker serviks di negara Indonesia

mencapai angka 100/100.000 penduduk pertahun (Ocviyanti dkk; 2013). Hingga

kini pengobatan neoplastik atau kanker dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu:

pembedahan, radiasi, dan dengan pemberian obat antineoplastik atau antikanker

(Mulyadi; 1997). Namun demikian, pada pengobatan kemoterapi biasanya

menyebabkan penekanan/supresi sumsum tulang, yang akhirnya menyebabkan

keletihan, anemia, kecenderungan perdarahan, dan peningkatan resiko infeksi

(Corwin; 2008). Selain pengobatan konvensional tersebut, masyarakat banyak

mencoba kemungkinan penyembuhan dengan pengobatan alternatif menggunakan

tanaman herbal. Salah satunya yaitu dengan menggunakan tanaman benalu.

Benalu merupakan tanaman parasit yang pada awalnya dianggap tidak bermanfaat

ternyata berpotensi sebagai agen kemopreventif (Ikawati dkk; 2008).

Salah satu tanaman benalu yang dapat dimanfaatkan adalah benalu kemiri

(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana). Studi pendahuluan tentang

benalu sudah pernah dilakukan sebelumnya, namun tanaman benalu sebagai agen

antikanker masih membutuhkan eksplorasi lebih lanjut. Benalu berpeluang untuk

dikembangkan sebagai fitofarmaka (Ikawati; 2008 ), salah satunya yaitu benalu

teh dan benalu mangga yang tergolong dalam famili Loranthaceae dilaporkan

memiliki efek sebagai agen antikanker yang mempunyai nilai IC50 < 50 μg/ml dan

benalu kelor mempunyai IC50 < 33,89 μg/ml (Multiawati, 2013).

Ekstrak yang diuji yaitu ekstrak kental etanol, dimana untuk memperoleh

ekstrak kental etanol digunakan ekstraksi dengan cara maserasi. Daun benalu

kemiri diekstraksi sebanyak 3x24 jam. Ekstrak kental etanol daun benalu kemiri

diuji kromatografi lapis tipis terlebih dahulu supaya dapat diketahui kandungan

senyawa kimia yang berada di dalam benalu kemiri tersebut. Hasil dari

kromatografi lapis tipis tersebut menyatakan bahwa tanaman daun benalu kemiri

positif mempunyai kandungan senyawa kimia flavonoid, steroid dan saponin.

Hasil ekstraksi tersebut setelah diuji dengan kromatografi lapis tipis kemudian

diuji lagi dengan menggunakan metode MTT Assay untuk mengetahui

sitotoksisitas dari daun benalu kemiri ini. Sebelumnya dibuat konsentrasi ekstrak

bahan uji dengan konsentrasi 800 µg/ml, 400 µg/ml, 100 µg/ml, 50 µg/ml, 25

µg/ml, lalu dilakukan pembacaan absorbansi untuk mengetahui nilai IC50 dari

daun benalu kemiri dengan menggunakan ELISA reader dan dianalisis

menggunakan probit log, daun benalu kemiri mempunyai nilai IC50 2592 µg/ml.

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan senyawa yang

tereduksi menjadi ungu di dalam mitokondria sel hidup. Reduksi hanya terjadi

apabila terdapat enzim reduktase yang diproduksi oleh mitokondria yang aktif,

sehingga perubahan tersebut secara langsung berhubungan dengan jumlah sel

yang hidup (CCRC; 2009).

Page 8: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

viii

Berdasarkan literatur pada penelitian sebelumnya dan dengan perolehan

nilai IC50 tersebut dapat disimpulkan bahwa ekstrak benalu kemiri bersifat

sitotoksik dalam menghambat pertumbuhan sel kanker serviks (sel HeLa) dengan

menggunakan metode MTT Assay secara in vitro serta kandungan senyawa kimia

yang terdapat di dalam daun benalu kemiri adalah senyawa golongan flavonoid,

saponin dan triterpenoid.

Berdasarkan penggunaan pelarut etanol pada penelitian ini yang

penggunaannya untuk melarutkan kandungan senyawa kimia yang mempunyai

efek sitotoksik pada tanaman daun benalu kemiri, perlunya dilakukan penelitian

lebih lanjut dengan menggunakan pelarut yang lain, seperti metanol, n-heksana,

dan etil asetat serta diaplikasikan pada sel kanker yang lain dengan menggunakan

ekstrak yang sama misalnya dengan menggunakan sel kanker ovarium atau sel

kanker myeloma, serta adanya penambahan variasi konsentrasi yang banyak dari

ekstrak tersebut.

Page 9: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

ix

ABSTRACT

In this early time cancer is the second leading cause of death after

cardiovascular disease, one of which is that cervical cancer is the second most

common type of cancer in women in the world. Treatment of cancer that is often

used at present is surgery, radiation, and combine with anticancer drugs. But at the

moment many people are using herbal remedies, one of which is the use of

mistletoe (Dendrophthoe sp.) Which has benefits as cough medicine, cancer,

diuretics and pain relievers. It also occurs in Dendrophthoe sp. grew on Aleurites

moluccana leaves.

This study aims to determine the cytotoxic activity of chemical

compounds as well as knowing the content inside of ethanol extract of

Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana leaves against cervical cancer

cells (HeLa cells). Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana leaves

extracted using 96% ethanol was tested by thin layer chromatography test and to

determine cytotoxic of it, it used MTT method (Microculture Tetrazolium Salt)

Assay.

The results of the screening group of chemical compounds using TLC is

known that ethanol extract of Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana

leaves contain flavonoid compounds, steroids and saponins. Based on research

conducted by Multiawati if in a cytotoxic test compound IC50 values <33.89 mg /

ml, then the compound could be developed into an anticancer compound. Extracts

were tested, namely ethanol extract, ethanol extract which has IC50 is 2592 ug /

ml, and all of concentration against cervical cancer cells (HeLa cells)> 100 ug /

ml, so that the extract of mistletoe leaves of kemiri are cytotoxic and can inhibit

the growth of cancer cells cervical (HeLa cells).

Keywords: Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana leaves, HeLa cells,

MTT Assay.

Page 10: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

x

ABSTRAK

Pada saat ini kanker merupakan penyebab kematian kedua setelah

penyakit kardiovaskular, salah satunya yaitu kanker serviks yang merupakan jenis

kanker tersering kedua di dunia pada wanita. Pengobatan pada kanker yang sering

digunakan pada saat ini yaitu pembedahan, radiasi, dan dengan pemberian obat

antikanker. Namun pada saat ini sudah banyak masyarakat yang menggunakan

pengobatan herbal, salah satunya yaitu penggunaan tanaman daun benalu

(Dendrophthoe sp.) yang mempunyai manfaat sebagai obat batuk, kanker, diuretik

dan penghilang nyeri. Hal ini juga terjadi pada tumbuhan daun benalu kemiri

(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana).

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas sitotoksik serta

mengetahui kandungan senyawa kimia yang berada di dalam ekstrak etanol daun

benalu kemiri terhadap sel kanker serviks (sel HeLa). Daun benalu kemiri

diekstraksi dengan menggunakan etanol 96% diuji dengan kromatografi lapis tipis

uji sitotoksiknya digunakan metode MTT (Microculture Tetrazolium Salt) Assay.

Hasil skrining golongan senyawa kimia dengan menggunakan KLT

diketahui bahwa ekstrak etanol daun benalu kemiri mengandung senyawa

golongan flavonoid, steroid dan saponin. Berdasarkan penelitian yang dilakukan

oleh Multiawati jika pada suatu uji sitotoksik suatu senyawa memiliki nilai IC50

< 33,89 μg/ml, maka senyawa tersebut bisa dikembangkan menjadi senyawa

antikanker. Ekstrak yang diuji yaitu ekstrak etanol, dimana ekstrak etanol

mempunyai IC50 yaitu 2592 μg/ml, dan semua konsentrasinya terhadap sel kanker

serviks (sel HeLa) > 100 µg/ml, sehingga ekstrak daun benalu kemiri ini bersifat

sitotoksik dan dapat menghambat pertumbuhan dari sel kanker serviks (sel HeLa).

Kata kunci: Daun Benalu Kemiri, Sel HeLa, MTT Assay.

Page 11: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ............................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii

LEMBAR PENGUJIAN ................................................................................... iii

KATA PENGANTAR ...................................................................................... iv

RINGKASAN .................................................................................................. vii

ABSTRACT ....................................................................................................... ix

ABSTRAK ......................................................................................................... x

DAFTAR ISI ...................................................................................................... xi

DAFTAR TABEL ........................................................................................... xiv

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xvi

DAFTAR SINGKATAN ............................................................................... xvii

BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................. 1

1.1 Latar belakang ................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah Penelitian ............................................................ 4

1.3 Tujuan Penelitian .............................................................................. 4

1.4 Hipotesis Penelitian ........................................................................... 4

1.5 Manfaat Penelitian ............................................................................ 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 6

2.1 Tinjauan Tentang Benalu Kemiri ...................................................... 6

2.1.1 Klasifikasi................................................................................ 6

2.1.2 Sinonim ................................................................................... 6

2.1.3 Nama Daerah ........................................................................... 7

2.1.4 Deskripsi.................................................................................. 7

2.1.5 Etiologi dan Penyebaran.......................................................... 7

2.1.6 Khasiat ..................................................................................... 7

2.1.7 Kandungan .............................................................................. 8

2.2 Tinjauan tentang Kanker .................................................................. 9

2.2.1 Definisi .................................................................................... 9

Page 12: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

xii

2.2.2 Penyebab Terjadinya Kanker ................................................ 10

2.2.3 Sifat dan Karakteristik Sel Kanker ........................................ 11

2.2.4 Proses Terjadinya Karsinogenesis ......................................... 13

2.3 Tinjauan tentang Kanker Serviks .................................................... 14

2.3.1 Definisi .................................................................................. 14

2.3.2 Tanda dan Gejala Kanker Serviks .......................................... 16

2.4 Tinjauan Sel HeLa ........................................................................... 17

2.5 Tinjauan tentang Ekstraksi ............................................................. 17

2.6 Tinjauan tentang MTT Assay .......................................................... 18

2.7 Tinjauan Nilai IC50 pada Tumbuhan Benalu ...............................19

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................ 20

BAB 4 METODE PENELITIAN...................................................................... 23

4.1 Bahan Penelitian ........................................................................... 23

4.1.1 Bahan Tanaman .................................................................... 23

4.1.2 Bahan Kimia dan Bahan Lainnya ......................................... 23

4.2 Alat-alat Penelitian........................................................................ 24

4.3 Variabel Penelitian ........................................................................ 24

4.3.1 Variabel Bebas ...................................................................... 24

4.3.2 Variabel Tergantung ............................................................. 25

4.4 Metode Penelitian ......................................................................... 25

4.4.1 Rancangan Percobaan Penelitian .......................................... 25

4.4.2 Kerangka Operasional ........................................................... 26

4.4.3 Prosedur Kerja ...................................................................... 27

4.4.3.1 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji ....................................... 27

4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa kimia dengan

Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ........ 27

4.4.3.3 Pembuatan Media .......................................................... 29

4.4.3.4 Penumbuhan Sel ............................................................ 29

4.4.3.5 Penggantian Media ........................................................ 30

4.4.3.6 Panen Sel ....................................................................... 31

4.4.3.7 Perhitungan Sel .............................................................. 31

4.4.3.8 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji ................... 32

Page 13: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

xiii

4.4.3.9 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT ............ 33

4.4.3.10 Analisis Data ............................................................... 35

BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................ 36

5.1 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe

sp. grew on Aleurites moluccana) ............................................... 36

5.2 Hasil Uji KLT Bahan Uji Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri

(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) ..................... 37

5.3 Perhitungan Sel HeLa dan Volume Panenan Sel yang Ditransfer

ke Dalam Plate ............................................................................ 37

5.4 Uji Sitotoksisitas dari Ekstrak Daun Benalu Kemiri

(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) Terhadap Sel

Kanker Serviks (Sel HeLa) dengan Metode MTT ...................... 38

5.5 Analisis Data ............................................................................... 40

BAB VI PEMBAHASAN ................................................................................ 41

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 45

7.1 Kesimpulan .................................................................................. 45

7.2 Saran ............................................................................................ 45

DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 46

LAMPIRAN ..................................................................................................... 51

Page 14: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II.1 Stadium Kanker Serviks .......................................................................... 15

IV.1 Kelompok perlakuan kultur sel kanker serviks (sel HeLa) dalam tiap

percobaan ............................................................................... ................. 25

V.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew

on Aleurites moluccana) ......................................................................... 36

V.2 Data Hasil Uji MTT Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe

sp. grew on Aleurites moluccana) terhadap Sel Kanker Serviks (Sel

Hela) ....................................................................................................... 39

Page 15: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Tanaman Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites

moluccana) ............................................................................................ 6

2.2 Struktur Kuersetin .................................................................................. 9

2.3 Proses Terjadinya Karsinogenesis .......................................................... 13

2.4 Sel HeLa ................................................................................................. 17

3.1 Kerangka Konseptual ............................................................................. 20

4.1 Kerangka Operasional ............................................................................ 26

4.2 Skema Pembuatan Ekstrak Etanol 96% Daun Benalu Kemiri .............. 28

5.1 Ekstrak Kental Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew on

Aleurites moluccana) ............................................................................. 36

5.2 Hasil Identifikasi Golongan Flavonoid dengan Kromatografi Lapis

Tipis ...................................................................................................... 37

5.3 Kondisi Sel Antara Kontrol Sel dan Sel yang Sudah Diberikan Ekstrak

Etanol Daun Benalu Kemiri .................................................................. 39

5.4 Kondisi Sel Pada Kontrol dan Kelompok Uji Sesudah Pemberian MTT

Dilihat Di Bawah Mikroskop dengan Perbesaran 40 Kali .................... 40

5.5 Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri

(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) ............................. 40

Page 16: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup........................................................................... 51

2. Surat Pernyataan …………………...................................................... 52

3. Surat Determinasi Tanaman……………….......................................... 53

4. Analisis Probit Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp.

grew on Aleurites moluccana) .............................................................. 54

5. Foto Alat dan Bahan yang digunakan ……......………………............. 56

Page 17: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

xvii

DAFTAR SINGKATAN

CCRC = Cancer Chemoprevention Research Center

DMEM = Dulbecco’s Modified Eagle Medium

DMSO = Dimethyl Sulfoxide

DNA = Deoxyribose Nucleic Acid

EDTA = Ethylenediamine tetraacetic acid

ELISA = Enzyme Linked Immunosorbent Assay

ER = Endoplasma Reticulum

FBS = Fetal Bovine Serum

FIGO = International Federation of Gynecologists and Obstetricians

HCl = Hidroclhoride Acid

HIV = Human Immunodificiency Virus

HPV = Human Papiloma Virus

HTLV = Human T-lympocyte Virus

IC50 = Inhibitory Concentration 50

LAF = Laminar Air Flow

MK = Media Kultur

MTT = Microculture Tetrazolium Salt

NaOH = Natrium Hidroksida

PBS = Phospate Buffer Saline

RPMI = Rosewell Park Memorial Institute

SDS = Sodium Dedocyl Sulfate

USDA = United State Department of Agricultural

WHO = World Health Organization

Page 18: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

DAFTAR PUSTAKA

Anggraini, Polis Novita, 2008. Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara Manusia

T47D In Vitro Dengan Metode MTT, Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga.

Artanti, N., Firmansyah, T., and Darmawan, A., 2012. Bioactivities Evaluation of

Indonesian Mistletoes (Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.) Leaves Extracts.

Journal of Applied Pharmaceutical Science, Vol. 02 No. 01, p. 24-27.

Astuti, Retno Dwi., 2013. Uji Antiproliferasi Ekstrak Etil Asetat Daun Benalu

Kepel (Dendrophtoe curvata (Blume) Miq.) Terhadap Cell Line Kanker

Payudara T47D. Yogyakarta: Skripsi Universitas Islam negeri Sunan

Kalijaga.

Awik, P.D.N., Sukardiman., dan Fadjri, H. T., 2011. Uji Toksisitas dan Efek

Ekstrak Spons Laut Aaptos suberitoides Terhadap Sel Kanker Serviks

(HeLa) Secara In Vitro. ITS Undergraduated Thesis of Biology.

BPOM RI., 2010. Acuan Sedian Herbal. Volume ke-5. Edisi ke-1, Jakarta:

Direktorat Obat Asli Indonesia Debuti Bidang Pengawas Obat Tradisional,

Kosmetik dan Produk Komplementer, 129-131.

CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Prosedur Tetap.

Yogyakarta Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada.

http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/protokol/. Diakses tanggal 30

Oktober 2013.

CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Kanker Leher

Rahim (serviks). Yogyakarta : Fakultas Farmasi Universitas Gadjah

Mada. http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopedia-

kanker/kanker-serviks/. Diakses tanggal 19 September 2013.

CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Sel HeLa. Yogyakarta

: Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada.

http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopedia-

kanker/sel-hela/. Diakses tanggal 19 September 2013.

Chrestella, Jessy., 2009. Neoplasma. Departemen Patologi Anatomi. Fakultas

Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Medan.

Corwin, J. E., 2008. Buku Saku Patofisiologi. Edisi 3, Jakarta: EGC. Hal 91.

Dalimartha, S., 2003. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker.

Cetakan VI. Jakarta : Penebar Swadaya.

Davey, Patrick., 2005. At A Glance Medicine. Jakarta: Penerbit Erlangga. Hal

335.

Dewi, I. G. A. N., Sawitri, A. A. S., dan Adiputra, N., 2013. Paparan Asap Rokok

dan Higiene Diri Merupakan Faktor Risiko Lesi Prakanker Leher Rahim di

Kota Denpasar Tahun 2012. Public Health and Preventive Medicine

Archive, Vol. 1 No. 1, Hal. 85.

Page 19: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

Diananda, Rama., 2007. Seluk-Beluk Kanker. Jogjakarta: Kata Hati. Hal 17.

Dina, F., Prista, K. P., dan Iwang, Y., 2011. Efek Sitotoksik Ekstrak Etanol

Sarang Semut (Myrmecodia pendens) Pada Sel Line Kanker Serviks HeLa.

Uji Eksperimental Secara In Vitro. Jurnal Fakultas

KedokteranUniversitas Islam Sultan Agung (UNISSULA), Vol. 3 No. 2.

Hal 112-120

Dipiro, T. Joseph., Talbert, L. Robert., Yee, C. Gary., Matzke, R. Gary., Welss, G.

Barbara., Posey, Michael. L. 2008. .Pharmacotherapy A Pathophysiologic

Approach. Sevent Edition.

Direktorat Jendral PP&PL Kementrian Kesehatan RI., Apakah Anda Tahu

tentang Kanker., Panduan Memperingati Hari Kanker Sedunia Di

Indonesia Tahun 2013, Jakarta. Hal 3. Dinkes. Jatimprov.go.id. Diakses

pada tanggal 04 Oktober 2013.

Fajriah, S., Darmawan, A., Sundowa, A., dan Artanti, N., 2007. Isolasi Senyawa

Antioksidan dari Ekstrak Etil Asetat Daun Benalu Dendrophthoe

pentandra L. Miq yang Tumbuh pada Inang Lobi-Lobi. Jurnal Kimia

Indonesia., Vol. 2 (1), p. 17-20.

Farid, A. dkk., 2008. Panduan Pelayanan Medik: Model Interdisiplin

Penatalaksanaan kanker Serviks dengan Gangguan Ginjal. Jakarta.

EGC.

Fitriana, N. A., Ambarini, T. K., 2012. Jurnal Psikologi Klinis dan Kesehatan

Mental, Vol. 1 No. 02. Departemen Psikologis Klinis dan Kesehatan

Mental. Fakultas Psikologi Unversitas Airlangga.

Fried, George. H., Hademenos, George. J., 1999. Schaum’s Outline of Theory

and Problems of Biology. Second edition. The McGraw-Hill Companies.

Ghofar, Abdul., 2009. Cara Mudah Mengenal & Mengobati Kanker. Cetakan

I, Jogjakarta: Flamingo. Hal 126.

Gibney, M. J., dkk., 2008. Gizi Kesehatan Masyarakat. Hal 422.

Health Technology Assessment Indonesia., 2008. Skrining Kanker Leher

Rahim Dengan Metode Inspeksi Visual Dengan Asam Asetat (IVA). Hal

10.

Ikawati, Muthi., Wibowo, A.E., Octa, N.S., dan Adelina, Rosa., 2008.

Pemanfaatan Benalu Sebagai Agen Antikanker. Fakultas Farmasi

Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

Indiastuti, D. N., Purwaningsih, S., Setyawati, Y., dan Cholies, N., 2008. Skrining

Pendahuluan Toksisitas Beberapa Tumbuhan Benalu terhadap Larva Udang

Artemia salina Leach. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, Vol. 06, No.

02, ISSN 1693-1831.

Jong, D.W., 2004. Kanker, Apakah Itu? (Pengobatan, Harapan Hidup, dan

Dukungan Keluarga). Jakarta: Arcan. Hal 2.

Larasati, Y., 2013. MTT Assay. http://yonikalarasatijournal.wordpress.com/

author/yonikalarasatijournal/. Diakses pada tanggal 20 November 2013.

Mardiana, Lina. 2004. Kanker Pada Wanita, Pencegahan dan Pengobatan

dengan Tanaman Obat. Depok: Penebar Swadaya.

Multiawati, Nur., 2013. Uji Antikanker Ekstrak Metanol Daun Benalu Kelor

(Helixanthera sessiliflora) (Merr.) Denser) Terhadap Cell Line Kanker

Payudara T47D. Yogyakarta: Skripsi Program Sarjana.

Page 20: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

Mulyadi., 1996. Kanker, Karsinogen, Karsinogenesis dan Antikanker.

Yogyakarta: PT Tiara Wacana Yogya. Hal 94.

Nafrialdi, Gan., Sulistia., 2011. Farmakologi dan Terapi. Edisi V., Jakarta:

Badan Penerbit FKUI. Hal 732-733.

Nurwijaya, Hartati., Suheimi, H. K. A., 2010. Kanker Serviks. Surabaya: Hal 5.

Ocviyanti, D., Handoko, Y., 2013. Peran Dokter Umum Dalam Pencegahan

Kanker Serviks di Indonesia. J Indon Med Assoc, Vol. 63 No. 1, Hal. 1.

Putri, F. W., 2013. Pengetahuan dan Perilaku Mahasiswi Fakultas Farmasi

Universitas Surabaya Dalam Upaya Pencegahan Kanker Serviks. Jurnal

Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya, Vol. 2 No. 1, hal. 1-13.

Rachmawati, A, E, V., Muliartha, I, K, G., dan Kusworini. 2013. Pengaruh

Ekstrak Daun Benalu Mangga (Dendrophthoe pentandra) Terhadap

Viabilitas dan Ekspresi Caspase 3 Aktif pada Sel Kanker Serviks (Sel

HeLa). Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran

Universitas Brawijaya. Malang.

Rosida, J., 2002. Uji Saponin Dalam Lidah Buaya, Limbah Buah Mengkudu dan

Daun Mimba. Temu Teknis Fungsional Non Peneliti, Hal 1-7.

Rossaria, Nella., 2007. Kajian Antiproliferatif Ekstrak Daun Benalu Duku

(Loranthaceae dendrophthoe species) Terhadap Sel Mieloma Secara

In Vitro. Artikel Ilmiah Universitas Airlangga.

Rusmana, Djaja., 2009. Aspek Onkologi Human Papillomavirus. JKM, Vol. 1

No.9, hal. 95-101.

Sari, R. K., Syafii, W., Achmadi, S. S., Hanafi, M., dan Laksana, Y. T., 2012.

Aktivitas Antikanker dan Kandungan Kimia Ekstrak Kayu Teras Suren

(Toona sureni). Jurnal Ilmu Teknologi Kayu Tropis, Vol. 10 No. 01, Hal

1-11.

Smeltzer, C. Suzanne., Brenda, G. Bare., 2002. Buku Ajar Keperawatan

Medikal-bedah Brunner&Suddarth. Edisi 8. Vol 2, Jakarta: Penerbit

Buku Kedokteran. Hal 1559.

Sudiana, I. K., 2008. Patologi Molekuler Kanker. Jakarta: Salemba Media. Hal

27.

Sundaryono, A., 2011. Teratogenitas Senyawa Flavonoid Dalam Ekstrak Metanol

Daun Benalu (Dendrophthoe pentandra (L) Miq. ) pada Mus musculus.

Jurnal Exacta., Vol. IX No. 1, ISSN 1412-3617.

Sundaryono, A., 2011. Uji Aktivitas Senyawa Flavonoid Total Dari Gynura

segetum (Lour) Terhadap Peningkatan Eritrosit dan Penurunan Leukosit

Pada Mencit (Mus musculus). Jurnal Exacta., Vol. IX No. 2 ISSN 1412-

3617.

Suryapratama, A. S., 2012. Karakteristik Penderita Kanker Serviks di RSUP Dr.

Kariadi Semarang Tahun 2010. Semarang. Karya Tulis Ilmiah.

Syaifuddin, M., 2007. Agen Penekan Tumor p53, Kanker, dan Radiasi

Pengion. Buletin Alara. Hal 119-128.

Tjay, T. H., Rahardja, K., 2008. Obat-Obat Penting. Edisi ke enam. Cetakan I,

Jakarta: PT Elex Media Komputindo.

Page 21: SKRIPSI - core.ac.uk · i SKRIPSI ROSYIDATUL MALIHAH SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) TERHADAP SEL KANKER

USDA., 2013. Species 2000 & ITIS Catalogue of Life. Taxonomic Information

for Dendrophthoe pentandra. http://eol.org/pages/2872661/names.

Diakses pada tanggal 08 Januari 2014.

Wahyuningsih, M. S. H., Syarif, R. A., Suharmi, S., Murini, T., Saputra, F., dan

Adiguno, S. W., 2013. Selectivity of Purified Extract From the Leaves of

Tithonia diversifolia (Hemsley) a. Gray) Againts HeLa Cell. Traditional

Medicine Journal, Vol. 18 No. 01, p 22-28.

Waji, R. A., Sugrani, A., 2009. Flavonoid (Quersetin). Makassar: Makalah

Kimia Organik Bahan Alam. Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Hasanuddin.

Wardhani, Lilies Kusuma dan Sulistyani, Nanik. 2012. Uji Aktivitas Antikbakteri Ekstrak

Etil Asetat Daun Binahong (Anredera scandens (L.) Moq.) terhadap Shigella

flexneri Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Yogyakarta : Fakultas Farmasi

Universitas Ahmad Dahlan.

WHO (World Health Organization). 2013. Cancer Mortality and Morbidity.

http://www.who.int/gho/ncd/mortality_morbidity/cancer/en/index.html.

Diakses tanggal 07 Oktober 2013.

Wicaksono, M. H. B., Permana, S., 2013. Potensi Fraksi Etanol Benalu Mangga

(Dendrophthoe pentandra) sebagai Agen Anti Kanker Kolon pada

Mencit (Mus musculus Balb/c) setelah Induksi Dextran Sulvat (DSS)

danAzoxymethane (AOM). Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan

Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya Jalan Veteran Malang,

Jawa Timur, Indonesia.

Wikanta, T., Prabukusuma, A., Ratih, D., dan Januar, H., 2013. Bioaktivitas

Ekstrak Kasar Aseton, Fraksi, dan Subfraksinya dari Ulva fasciata

Terhadap Sel Lestari Tumor HeLa. Hal 1-16.

Yan, L.L., Zhang, Y.J., Gao, W.Y., Man, S.l., Wang, Y., 2009. In Vitro and In

Vivo Anticancer Activity of Steroid Saponins of Paris polyphylla Var.

yunnanensis. Experimental Oncology, Vol. 31, pp 27-32.