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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL MESTRADO EM CIEcircNCIA ANIMAL
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO
HEMATOLOacuteGICO DE Ara ararauna E Amazona aestiva EM
CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS SILVESTRES
EM CAMPO GRANDEMS
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva
in wild animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Tatiana Mieko Ono
CAMPO GRANDE MATO GROSSO DO SUL ndash BRASIL
MARCcedilO 2009
Livros Graacutetis
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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL
MESTRADO EM CIEcircNCIA ANIMAL
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO
HEMATOLOacuteGICO DE Ara ararauna E Amazona aestiva EM
CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS SILVESTRES
EM CAMPO GRANDEMS
Tatiana Mieko Ono
Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo
Dissertaccedilatildeo apresentada agrave Universidade Federal de Mato Grosso do Sul como requisito
agrave obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Ciecircncia Animal
Aacuterea de concentraccedilatildeo Sauacutede Animal
CAMPO GRANDE MATO GROSSO DO SUL ndash BRASIL
MARCcedilO 2009
Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo na Publicaccedilatildeo (CIP) (Coordenadoria de Biblioteca Central ndash UFMS Campo Grande MS Brasil)
Ono Tatiana Mieko O58p Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e
Amazona aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo Grande MS Tatiana Mieko Ono -- Campo Grande MS 2009 53 f 30 cm
Orientador Alfredo Sampaio Carrijo Co-orientador Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo
Dissertaccedilatildeo (mestrado) - Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia
1 Chlamydophila 2 Arara - Doenccedilas 3 Papagaio (Ave) - Doenccedilas 4 Hematologia veterinaacuteria I Carrijo Alfredo Sampaio II Arauacutejo Flaacutebio Ribeiro III Tiacutetulo
CDD (22) ndash 6360896959
AGRADECIMENTOS
Agrave FUNDECT pela bolsa de mestrado
Ao Fabio Pellegrini pelo auxiacutelio e parceria em todos os projetos em execuccedilatildeo
Ao Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo pela aceitaccedilatildeo como sua orientada pela amizade e paciecircncia
Ao Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo pela coorientaccedilatildeo no projeto e pelos ensinamentos
Profissional que aprendi a admirar
Agrave Dra Faacutetima Soares Motta Noronha por conceder DNA de Chlamydophila sp utilizado
como controle positivo
Ao Carlos Ramos e Daniel Guedes pela dedicaccedilatildeo tempo e paciecircncia atrasando por vezes
seus projetos para me auxiliarem Ao teacutecnico Renato Marccedilal pela presteza pelo ensinamento
e tambeacutem pela preparaccedilatildeo da Soluccedilatildeo de Natt e Herrick extremamente essencial para as
anaacutelises hematoloacutegicas
Ao Dr Luiz Eduardo Tavares que orientou brilhantemente nas anaacutelises estatiacutesticas
Ao teacutecnico Sandro do Laboratoacuterio de Patologia Cliacutenica da UFMS pela iniciaccedilatildeo em
hematologia Ao Dr Prof Pachaly pelo conhecimento passado e por sempre responder aos
emails prontamente
Agrave Msc Anahiacute Souto Vieira pela amizade e auxiacutelio em todos os aspectos vividos
Agraves meacutedicas veterinaacuterias Cristina Carrijo e Juliana Marcondes Rezende por permitirem o
uso dos Laboratoacuterios de Anaacutelises Cliacutenicas para as anaacutelises hematoloacutegicas
Aos teacutecnicos do CRAS Aacutelvaro Cavalcanti e Vinicius Lopes por ceder os animais
auxiliar nas coletas e abrir as portas do Centro Aos teacutecnicos Joatildeo Genivaldo e Vandir que
sempre auxiliaram com muita sabedoria e presteza
Aos amigos da Embrapa
Ao Felipe Pellegrini pelo auxiacutelio com a traduccedilatildeo
Agrave secretaacuteria Marilete que sempre nos atendeu com muito carinho e atenccedilatildeo
Ao Antocircnio Joseacute Sabino por transmitir sua experiecircncia na hematologia aviaacuteria
Ao Dr Aramis Pinto pelos artigos enviados e pela disponibilidade e presteza em auxiliar
Agrave Dra Tacircnia Raso pelas informaccedilotildees fornecidas
SUMAacuteRIO
RESUMO 8
ABSTRACT 9
1 INTRODUCcedilAtildeO 10
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 11
21 Centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres 11
22 Psitaciacutedeos 13
23 Clamidiose 15
231 Aspectos Epidemioloacutegicos 15
232 Patogecircnese 17
233 Aspectos Cliacutenicos 19
234 Diagnoacutestico 20
24 Hematologia em aves 21
241 Hematologia e Clamidiose 24
3 REFEREcircNCIAS 26
4 ARTIGO 34
Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e Amazona
aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo GrandeMS
Resumo 35
Abstract
35
Introduccedilatildeo 36
Material e Meacutetodos 37
Hematologia 38
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes 38
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
40
Anaacutelise estatiacutestica 40
Resultados e Discussatildeo 41
Conclusatildeo 46
Referecircncias 47
APEcircNDICE 49
LISTA DE ABREVIATURAS
microL -
Microlitros
CE -
Corpuacutesculo elementar
cm -
Centiacutemetros
CRASMS -
Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres em Campo Grande Mato Grosso do Sul
DNA -
Aacutecido desoxirribonucleacuteico
EDTA -
Aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico
fL -
Fentolitros
g -
Gramas
IBAMA -
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
LCL -
Levinthal-Colles-Lillie
pb -
Pares de base
PCR -
Reaccedilatildeo em cadeia de polimerase
PP -
Proteiacutena plasmaacutetica
PPT -
Proteiacutena plasmaacutetica total
RENCTAS
-
Rede Nacional de Combate ao Traacutefico de Animais Silvestres
VCM -
Volume corpuscular meacutedio
VG -
Volume globular
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL
MESTRADO EM CIEcircNCIA ANIMAL
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO
HEMATOLOacuteGICO DE Ara ararauna E Amazona aestiva EM
CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS SILVESTRES
EM CAMPO GRANDEMS
Tatiana Mieko Ono
Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo
Dissertaccedilatildeo apresentada agrave Universidade Federal de Mato Grosso do Sul como requisito
agrave obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Ciecircncia Animal
Aacuterea de concentraccedilatildeo Sauacutede Animal
CAMPO GRANDE MATO GROSSO DO SUL ndash BRASIL
MARCcedilO 2009
Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo na Publicaccedilatildeo (CIP) (Coordenadoria de Biblioteca Central ndash UFMS Campo Grande MS Brasil)
Ono Tatiana Mieko O58p Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e
Amazona aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo Grande MS Tatiana Mieko Ono -- Campo Grande MS 2009 53 f 30 cm
Orientador Alfredo Sampaio Carrijo Co-orientador Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo
Dissertaccedilatildeo (mestrado) - Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia
1 Chlamydophila 2 Arara - Doenccedilas 3 Papagaio (Ave) - Doenccedilas 4 Hematologia veterinaacuteria I Carrijo Alfredo Sampaio II Arauacutejo Flaacutebio Ribeiro III Tiacutetulo
CDD (22) ndash 6360896959
AGRADECIMENTOS
Agrave FUNDECT pela bolsa de mestrado
Ao Fabio Pellegrini pelo auxiacutelio e parceria em todos os projetos em execuccedilatildeo
Ao Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo pela aceitaccedilatildeo como sua orientada pela amizade e paciecircncia
Ao Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo pela coorientaccedilatildeo no projeto e pelos ensinamentos
Profissional que aprendi a admirar
Agrave Dra Faacutetima Soares Motta Noronha por conceder DNA de Chlamydophila sp utilizado
como controle positivo
Ao Carlos Ramos e Daniel Guedes pela dedicaccedilatildeo tempo e paciecircncia atrasando por vezes
seus projetos para me auxiliarem Ao teacutecnico Renato Marccedilal pela presteza pelo ensinamento
e tambeacutem pela preparaccedilatildeo da Soluccedilatildeo de Natt e Herrick extremamente essencial para as
anaacutelises hematoloacutegicas
Ao Dr Luiz Eduardo Tavares que orientou brilhantemente nas anaacutelises estatiacutesticas
Ao teacutecnico Sandro do Laboratoacuterio de Patologia Cliacutenica da UFMS pela iniciaccedilatildeo em
hematologia Ao Dr Prof Pachaly pelo conhecimento passado e por sempre responder aos
emails prontamente
Agrave Msc Anahiacute Souto Vieira pela amizade e auxiacutelio em todos os aspectos vividos
Agraves meacutedicas veterinaacuterias Cristina Carrijo e Juliana Marcondes Rezende por permitirem o
uso dos Laboratoacuterios de Anaacutelises Cliacutenicas para as anaacutelises hematoloacutegicas
Aos teacutecnicos do CRAS Aacutelvaro Cavalcanti e Vinicius Lopes por ceder os animais
auxiliar nas coletas e abrir as portas do Centro Aos teacutecnicos Joatildeo Genivaldo e Vandir que
sempre auxiliaram com muita sabedoria e presteza
Aos amigos da Embrapa
Ao Felipe Pellegrini pelo auxiacutelio com a traduccedilatildeo
Agrave secretaacuteria Marilete que sempre nos atendeu com muito carinho e atenccedilatildeo
Ao Antocircnio Joseacute Sabino por transmitir sua experiecircncia na hematologia aviaacuteria
Ao Dr Aramis Pinto pelos artigos enviados e pela disponibilidade e presteza em auxiliar
Agrave Dra Tacircnia Raso pelas informaccedilotildees fornecidas
SUMAacuteRIO
RESUMO 8
ABSTRACT 9
1 INTRODUCcedilAtildeO 10
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 11
21 Centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres 11
22 Psitaciacutedeos 13
23 Clamidiose 15
231 Aspectos Epidemioloacutegicos 15
232 Patogecircnese 17
233 Aspectos Cliacutenicos 19
234 Diagnoacutestico 20
24 Hematologia em aves 21
241 Hematologia e Clamidiose 24
3 REFEREcircNCIAS 26
4 ARTIGO 34
Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e Amazona
aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo GrandeMS
Resumo 35
Abstract
35
Introduccedilatildeo 36
Material e Meacutetodos 37
Hematologia 38
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes 38
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
40
Anaacutelise estatiacutestica 40
Resultados e Discussatildeo 41
Conclusatildeo 46
Referecircncias 47
APEcircNDICE 49
LISTA DE ABREVIATURAS
microL -
Microlitros
CE -
Corpuacutesculo elementar
cm -
Centiacutemetros
CRASMS -
Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres em Campo Grande Mato Grosso do Sul
DNA -
Aacutecido desoxirribonucleacuteico
EDTA -
Aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico
fL -
Fentolitros
g -
Gramas
IBAMA -
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
LCL -
Levinthal-Colles-Lillie
pb -
Pares de base
PCR -
Reaccedilatildeo em cadeia de polimerase
PP -
Proteiacutena plasmaacutetica
PPT -
Proteiacutena plasmaacutetica total
RENCTAS
-
Rede Nacional de Combate ao Traacutefico de Animais Silvestres
VCM -
Volume corpuscular meacutedio
VG -
Volume globular
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL
MESTRADO EM CIEcircNCIA ANIMAL
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO
HEMATOLOacuteGICO DE Ara ararauna E Amazona aestiva EM
CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS SILVESTRES
EM CAMPO GRANDEMS
Tatiana Mieko Ono
Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo
Dissertaccedilatildeo apresentada agrave Universidade Federal de Mato Grosso do Sul como requisito
agrave obtenccedilatildeo do tiacutetulo de Mestre em Ciecircncia Animal
Aacuterea de concentraccedilatildeo Sauacutede Animal
CAMPO GRANDE MATO GROSSO DO SUL ndash BRASIL
MARCcedilO 2009
Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo na Publicaccedilatildeo (CIP) (Coordenadoria de Biblioteca Central ndash UFMS Campo Grande MS Brasil)
Ono Tatiana Mieko O58p Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e
Amazona aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo Grande MS Tatiana Mieko Ono -- Campo Grande MS 2009 53 f 30 cm
Orientador Alfredo Sampaio Carrijo Co-orientador Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo
Dissertaccedilatildeo (mestrado) - Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia
1 Chlamydophila 2 Arara - Doenccedilas 3 Papagaio (Ave) - Doenccedilas 4 Hematologia veterinaacuteria I Carrijo Alfredo Sampaio II Arauacutejo Flaacutebio Ribeiro III Tiacutetulo
CDD (22) ndash 6360896959
AGRADECIMENTOS
Agrave FUNDECT pela bolsa de mestrado
Ao Fabio Pellegrini pelo auxiacutelio e parceria em todos os projetos em execuccedilatildeo
Ao Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo pela aceitaccedilatildeo como sua orientada pela amizade e paciecircncia
Ao Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo pela coorientaccedilatildeo no projeto e pelos ensinamentos
Profissional que aprendi a admirar
Agrave Dra Faacutetima Soares Motta Noronha por conceder DNA de Chlamydophila sp utilizado
como controle positivo
Ao Carlos Ramos e Daniel Guedes pela dedicaccedilatildeo tempo e paciecircncia atrasando por vezes
seus projetos para me auxiliarem Ao teacutecnico Renato Marccedilal pela presteza pelo ensinamento
e tambeacutem pela preparaccedilatildeo da Soluccedilatildeo de Natt e Herrick extremamente essencial para as
anaacutelises hematoloacutegicas
Ao Dr Luiz Eduardo Tavares que orientou brilhantemente nas anaacutelises estatiacutesticas
Ao teacutecnico Sandro do Laboratoacuterio de Patologia Cliacutenica da UFMS pela iniciaccedilatildeo em
hematologia Ao Dr Prof Pachaly pelo conhecimento passado e por sempre responder aos
emails prontamente
Agrave Msc Anahiacute Souto Vieira pela amizade e auxiacutelio em todos os aspectos vividos
Agraves meacutedicas veterinaacuterias Cristina Carrijo e Juliana Marcondes Rezende por permitirem o
uso dos Laboratoacuterios de Anaacutelises Cliacutenicas para as anaacutelises hematoloacutegicas
Aos teacutecnicos do CRAS Aacutelvaro Cavalcanti e Vinicius Lopes por ceder os animais
auxiliar nas coletas e abrir as portas do Centro Aos teacutecnicos Joatildeo Genivaldo e Vandir que
sempre auxiliaram com muita sabedoria e presteza
Aos amigos da Embrapa
Ao Felipe Pellegrini pelo auxiacutelio com a traduccedilatildeo
Agrave secretaacuteria Marilete que sempre nos atendeu com muito carinho e atenccedilatildeo
Ao Antocircnio Joseacute Sabino por transmitir sua experiecircncia na hematologia aviaacuteria
Ao Dr Aramis Pinto pelos artigos enviados e pela disponibilidade e presteza em auxiliar
Agrave Dra Tacircnia Raso pelas informaccedilotildees fornecidas
SUMAacuteRIO
RESUMO 8
ABSTRACT 9
1 INTRODUCcedilAtildeO 10
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 11
21 Centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres 11
22 Psitaciacutedeos 13
23 Clamidiose 15
231 Aspectos Epidemioloacutegicos 15
232 Patogecircnese 17
233 Aspectos Cliacutenicos 19
234 Diagnoacutestico 20
24 Hematologia em aves 21
241 Hematologia e Clamidiose 24
3 REFEREcircNCIAS 26
4 ARTIGO 34
Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e Amazona
aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo GrandeMS
Resumo 35
Abstract
35
Introduccedilatildeo 36
Material e Meacutetodos 37
Hematologia 38
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes 38
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
40
Anaacutelise estatiacutestica 40
Resultados e Discussatildeo 41
Conclusatildeo 46
Referecircncias 47
APEcircNDICE 49
LISTA DE ABREVIATURAS
microL -
Microlitros
CE -
Corpuacutesculo elementar
cm -
Centiacutemetros
CRASMS -
Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres em Campo Grande Mato Grosso do Sul
DNA -
Aacutecido desoxirribonucleacuteico
EDTA -
Aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico
fL -
Fentolitros
g -
Gramas
IBAMA -
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
LCL -
Levinthal-Colles-Lillie
pb -
Pares de base
PCR -
Reaccedilatildeo em cadeia de polimerase
PP -
Proteiacutena plasmaacutetica
PPT -
Proteiacutena plasmaacutetica total
RENCTAS
-
Rede Nacional de Combate ao Traacutefico de Animais Silvestres
VCM -
Volume corpuscular meacutedio
VG -
Volume globular
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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Dados Internacionais de Catalogaccedilatildeo na Publicaccedilatildeo (CIP) (Coordenadoria de Biblioteca Central ndash UFMS Campo Grande MS Brasil)
Ono Tatiana Mieko O58p Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e
Amazona aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo Grande MS Tatiana Mieko Ono -- Campo Grande MS 2009 53 f 30 cm
Orientador Alfredo Sampaio Carrijo Co-orientador Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo
Dissertaccedilatildeo (mestrado) - Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Faculdade de Medicina Veterinaacuteria e Zootecnia
1 Chlamydophila 2 Arara - Doenccedilas 3 Papagaio (Ave) - Doenccedilas 4 Hematologia veterinaacuteria I Carrijo Alfredo Sampaio II Arauacutejo Flaacutebio Ribeiro III Tiacutetulo
CDD (22) ndash 6360896959
AGRADECIMENTOS
Agrave FUNDECT pela bolsa de mestrado
Ao Fabio Pellegrini pelo auxiacutelio e parceria em todos os projetos em execuccedilatildeo
Ao Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo pela aceitaccedilatildeo como sua orientada pela amizade e paciecircncia
Ao Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo pela coorientaccedilatildeo no projeto e pelos ensinamentos
Profissional que aprendi a admirar
Agrave Dra Faacutetima Soares Motta Noronha por conceder DNA de Chlamydophila sp utilizado
como controle positivo
Ao Carlos Ramos e Daniel Guedes pela dedicaccedilatildeo tempo e paciecircncia atrasando por vezes
seus projetos para me auxiliarem Ao teacutecnico Renato Marccedilal pela presteza pelo ensinamento
e tambeacutem pela preparaccedilatildeo da Soluccedilatildeo de Natt e Herrick extremamente essencial para as
anaacutelises hematoloacutegicas
Ao Dr Luiz Eduardo Tavares que orientou brilhantemente nas anaacutelises estatiacutesticas
Ao teacutecnico Sandro do Laboratoacuterio de Patologia Cliacutenica da UFMS pela iniciaccedilatildeo em
hematologia Ao Dr Prof Pachaly pelo conhecimento passado e por sempre responder aos
emails prontamente
Agrave Msc Anahiacute Souto Vieira pela amizade e auxiacutelio em todos os aspectos vividos
Agraves meacutedicas veterinaacuterias Cristina Carrijo e Juliana Marcondes Rezende por permitirem o
uso dos Laboratoacuterios de Anaacutelises Cliacutenicas para as anaacutelises hematoloacutegicas
Aos teacutecnicos do CRAS Aacutelvaro Cavalcanti e Vinicius Lopes por ceder os animais
auxiliar nas coletas e abrir as portas do Centro Aos teacutecnicos Joatildeo Genivaldo e Vandir que
sempre auxiliaram com muita sabedoria e presteza
Aos amigos da Embrapa
Ao Felipe Pellegrini pelo auxiacutelio com a traduccedilatildeo
Agrave secretaacuteria Marilete que sempre nos atendeu com muito carinho e atenccedilatildeo
Ao Antocircnio Joseacute Sabino por transmitir sua experiecircncia na hematologia aviaacuteria
Ao Dr Aramis Pinto pelos artigos enviados e pela disponibilidade e presteza em auxiliar
Agrave Dra Tacircnia Raso pelas informaccedilotildees fornecidas
SUMAacuteRIO
RESUMO 8
ABSTRACT 9
1 INTRODUCcedilAtildeO 10
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 11
21 Centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres 11
22 Psitaciacutedeos 13
23 Clamidiose 15
231 Aspectos Epidemioloacutegicos 15
232 Patogecircnese 17
233 Aspectos Cliacutenicos 19
234 Diagnoacutestico 20
24 Hematologia em aves 21
241 Hematologia e Clamidiose 24
3 REFEREcircNCIAS 26
4 ARTIGO 34
Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e Amazona
aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo GrandeMS
Resumo 35
Abstract
35
Introduccedilatildeo 36
Material e Meacutetodos 37
Hematologia 38
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes 38
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
40
Anaacutelise estatiacutestica 40
Resultados e Discussatildeo 41
Conclusatildeo 46
Referecircncias 47
APEcircNDICE 49
LISTA DE ABREVIATURAS
microL -
Microlitros
CE -
Corpuacutesculo elementar
cm -
Centiacutemetros
CRASMS -
Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres em Campo Grande Mato Grosso do Sul
DNA -
Aacutecido desoxirribonucleacuteico
EDTA -
Aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico
fL -
Fentolitros
g -
Gramas
IBAMA -
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
LCL -
Levinthal-Colles-Lillie
pb -
Pares de base
PCR -
Reaccedilatildeo em cadeia de polimerase
PP -
Proteiacutena plasmaacutetica
PPT -
Proteiacutena plasmaacutetica total
RENCTAS
-
Rede Nacional de Combate ao Traacutefico de Animais Silvestres
VCM -
Volume corpuscular meacutedio
VG -
Volume globular
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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AGRADECIMENTOS
Agrave FUNDECT pela bolsa de mestrado
Ao Fabio Pellegrini pelo auxiacutelio e parceria em todos os projetos em execuccedilatildeo
Ao Prof Dr Alfredo Sampaio Carrijo pela aceitaccedilatildeo como sua orientada pela amizade e paciecircncia
Ao Dr Flaacutebio Ribeiro de Arauacutejo pela coorientaccedilatildeo no projeto e pelos ensinamentos
Profissional que aprendi a admirar
Agrave Dra Faacutetima Soares Motta Noronha por conceder DNA de Chlamydophila sp utilizado
como controle positivo
Ao Carlos Ramos e Daniel Guedes pela dedicaccedilatildeo tempo e paciecircncia atrasando por vezes
seus projetos para me auxiliarem Ao teacutecnico Renato Marccedilal pela presteza pelo ensinamento
e tambeacutem pela preparaccedilatildeo da Soluccedilatildeo de Natt e Herrick extremamente essencial para as
anaacutelises hematoloacutegicas
Ao Dr Luiz Eduardo Tavares que orientou brilhantemente nas anaacutelises estatiacutesticas
Ao teacutecnico Sandro do Laboratoacuterio de Patologia Cliacutenica da UFMS pela iniciaccedilatildeo em
hematologia Ao Dr Prof Pachaly pelo conhecimento passado e por sempre responder aos
emails prontamente
Agrave Msc Anahiacute Souto Vieira pela amizade e auxiacutelio em todos os aspectos vividos
Agraves meacutedicas veterinaacuterias Cristina Carrijo e Juliana Marcondes Rezende por permitirem o
uso dos Laboratoacuterios de Anaacutelises Cliacutenicas para as anaacutelises hematoloacutegicas
Aos teacutecnicos do CRAS Aacutelvaro Cavalcanti e Vinicius Lopes por ceder os animais
auxiliar nas coletas e abrir as portas do Centro Aos teacutecnicos Joatildeo Genivaldo e Vandir que
sempre auxiliaram com muita sabedoria e presteza
Aos amigos da Embrapa
Ao Felipe Pellegrini pelo auxiacutelio com a traduccedilatildeo
Agrave secretaacuteria Marilete que sempre nos atendeu com muito carinho e atenccedilatildeo
Ao Antocircnio Joseacute Sabino por transmitir sua experiecircncia na hematologia aviaacuteria
Ao Dr Aramis Pinto pelos artigos enviados e pela disponibilidade e presteza em auxiliar
Agrave Dra Tacircnia Raso pelas informaccedilotildees fornecidas
SUMAacuteRIO
RESUMO 8
ABSTRACT 9
1 INTRODUCcedilAtildeO 10
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 11
21 Centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres 11
22 Psitaciacutedeos 13
23 Clamidiose 15
231 Aspectos Epidemioloacutegicos 15
232 Patogecircnese 17
233 Aspectos Cliacutenicos 19
234 Diagnoacutestico 20
24 Hematologia em aves 21
241 Hematologia e Clamidiose 24
3 REFEREcircNCIAS 26
4 ARTIGO 34
Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e Amazona
aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo GrandeMS
Resumo 35
Abstract
35
Introduccedilatildeo 36
Material e Meacutetodos 37
Hematologia 38
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes 38
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
40
Anaacutelise estatiacutestica 40
Resultados e Discussatildeo 41
Conclusatildeo 46
Referecircncias 47
APEcircNDICE 49
LISTA DE ABREVIATURAS
microL -
Microlitros
CE -
Corpuacutesculo elementar
cm -
Centiacutemetros
CRASMS -
Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres em Campo Grande Mato Grosso do Sul
DNA -
Aacutecido desoxirribonucleacuteico
EDTA -
Aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico
fL -
Fentolitros
g -
Gramas
IBAMA -
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
LCL -
Levinthal-Colles-Lillie
pb -
Pares de base
PCR -
Reaccedilatildeo em cadeia de polimerase
PP -
Proteiacutena plasmaacutetica
PPT -
Proteiacutena plasmaacutetica total
RENCTAS
-
Rede Nacional de Combate ao Traacutefico de Animais Silvestres
VCM -
Volume corpuscular meacutedio
VG -
Volume globular
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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SUMAacuteRIO
RESUMO 8
ABSTRACT 9
1 INTRODUCcedilAtildeO 10
2 REVISAtildeO DE LITERATURA 11
21 Centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres 11
22 Psitaciacutedeos 13
23 Clamidiose 15
231 Aspectos Epidemioloacutegicos 15
232 Patogecircnese 17
233 Aspectos Cliacutenicos 19
234 Diagnoacutestico 20
24 Hematologia em aves 21
241 Hematologia e Clamidiose 24
3 REFEREcircNCIAS 26
4 ARTIGO 34
Prevalecircncia de Chlamydophila sp e quadro hematoloacutegico de Ara ararauna e Amazona
aestiva em centro de reabilitaccedilatildeo de animais silvestres em Campo GrandeMS
Resumo 35
Abstract
35
Introduccedilatildeo 36
Material e Meacutetodos 37
Hematologia 38
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes 38
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
40
Anaacutelise estatiacutestica 40
Resultados e Discussatildeo 41
Conclusatildeo 46
Referecircncias 47
APEcircNDICE 49
LISTA DE ABREVIATURAS
microL -
Microlitros
CE -
Corpuacutesculo elementar
cm -
Centiacutemetros
CRASMS -
Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres em Campo Grande Mato Grosso do Sul
DNA -
Aacutecido desoxirribonucleacuteico
EDTA -
Aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico
fL -
Fentolitros
g -
Gramas
IBAMA -
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
LCL -
Levinthal-Colles-Lillie
pb -
Pares de base
PCR -
Reaccedilatildeo em cadeia de polimerase
PP -
Proteiacutena plasmaacutetica
PPT -
Proteiacutena plasmaacutetica total
RENCTAS
-
Rede Nacional de Combate ao Traacutefico de Animais Silvestres
VCM -
Volume corpuscular meacutedio
VG -
Volume globular
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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LISTA DE ABREVIATURAS
microL -
Microlitros
CE -
Corpuacutesculo elementar
cm -
Centiacutemetros
CRASMS -
Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres em Campo Grande Mato Grosso do Sul
DNA -
Aacutecido desoxirribonucleacuteico
EDTA -
Aacutecido etilenodiaminotetraceacutetico
fL -
Fentolitros
g -
Gramas
IBAMA -
Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
LCL -
Levinthal-Colles-Lillie
pb -
Pares de base
PCR -
Reaccedilatildeo em cadeia de polimerase
PP -
Proteiacutena plasmaacutetica
PPT -
Proteiacutena plasmaacutetica total
RENCTAS
-
Rede Nacional de Combate ao Traacutefico de Animais Silvestres
VCM -
Volume corpuscular meacutedio
VG -
Volume globular
LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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LISTA DE TABELAS
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose 25
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de
Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn 43
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e
Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila
sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
44
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda
reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb
41
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp
submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de
2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do
municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
42
RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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RESUMO
As araras e papagaios pertencentes agrave famiacutelia Psittacidae e satildeo as aves que mais sofrem com o
traacutefico de animais silvestres Em Mato Grosso do Sul o Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) recebe os animais apreendidos do traacutefico desenvolvendo um importante
papel para a conservaccedilatildeo da fauna A clamidiose aviaacuteria enfermidade causada por Chlamydophila
psittaci eacute frequentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos em todo o mundo Por ser uma grave
zoonose um diagnoacutestico preciso eacute requerido para que accedilotildees preventivas relativas agrave sauacutede puacuteblica
sejam tomadas O hemograma eacute um exame amplamente utilizado na cliacutenica meacutedico-ciruacutergica dos
animais atuando com uma importante ferramenta nos diagnoacutesticos entretanto na cliacutenica de aves
natildeo satildeo comumente realizados Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de
clamidiose nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva em reabilitaccedilatildeo no CRASMS no
municiacutepio de Campo Grande Brasil e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade Foram amostradas 75 aves (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizando-se
os seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais Os animais foram divididos em dois grupos positivos e negativos
para clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada A
prevalecircncia de clamidiose foi de 5556 para A ararauna e 3542 para A aestiva esta
enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A
ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas entre os animais positivos e
negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Foi observado hemoparasitose por
Haemoproteus sp em uma arara-canindeacute pertencente ao grupo dos paacutessaros negativos A presenccedila
de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de
portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia arara-canindeacute papagaio-verdadeiro
ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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ABSTRACT
The macaws and parrots belong to family Psittacidae which are the avian that most suffer with
the trafficking of wild animals In the state of Mato Grosso do Sul the Centro de Reabilitaccedilatildeo de
Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) receives animals seized from
smugglers thus being an important center to the conservation of the animals The aviand
chlamydiosis disease caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in
psittacines worldwide Itrsquos a serious zoonosis and a specific diagnosis is required to prevent actions to
the public health from being realized The hemogram is frequently utilized in the animals clinic as an
important tool in the diagnosis however in the birds clinic arenrsquot commonly realized The objectives
in this work were to verify the prevalence of the chlamydiosis in Ara ararauna and Amazona aestiva
species in rehabilitation at the CRASMS in the city of Campo Grande in the state of Mato Grosso do
Sul Brazil and point out the possible hematologycal disorder associated with the disease Seventy-
five birds were sampled (A ararauna n=27 A aestiva n=48) realizing the following procedures
clinical examination blood collection cloacal swabs and weight analyses The diagnosis of psittacosis
was obtained by polimerase chain reaction The animals were divided in two groups positives and
negatives by chamydiosis calculating the average and standard derivation to each variable studied
The prevalence of chlamydiosis was 5556 to A ararauna and 3542 to A aestiva This disease
was associated with reduction of the packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva there were no differences observed between the positive and negative birds to chlamydiosis in
the studied conditions A single case of blood parasites by Haemoproteus sp in blue-and-yellow
macaw was detected in a bird that was negative to chlamydiosis The presence of the Chlamydophila
sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the existence of asymptomatic and
symptomatic birds at the CRASMS
Key-words chlamydiosis hematology blue-and-yellow macaws blue-fronted-parrot
1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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1 INTRODUCcedilAtildeO
A clamidiose aviaacuteria eacute causada por Chlamydophila psittaci (C psittaci) bacteacuteria gram
negativa obrigatoriamente intracelular A doenccedila em paacutessaros eacute na maioria das vezes
sistecircmica e ocasionalmente fatal (VAN LOOCK et al 2005) Em 1893 Morange descreveu
um agente infeccioso transmitido por papagaios que causava em humanos infecccedilatildeo no trato
respiratoacuterio semelhante agrave gripe e a denominou de psitacose da palavra grega ldquopsittacusrdquo
papagaio (MOSCHIONI et al 2001)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (VAN LOOCK et al 2005)
Sabe-se que os psitaciacutedeos satildeo hospedeiros de C psittaci e quase sempre estatildeo
envolvidos nos surtos eou na transmissatildeo desta doenccedila O Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais
Silvestres (CRASMS) em Campo Grande Mato Grosso do Sul recebe um grande nuacutemero de
araras e papagaios provenientes de apreensotildees de traacutefico de animais selvagens Estas aves
recebem atendimento veterinaacuterio e zooteacutecnico sendo posteriormente reabilitadas e soltas na
natureza
Segundo o Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
(IBAMA) para evitar a introduccedilatildeo de doenccedilas no meio ambiente normas especiacuteficas devem
ser seguidas para a reintroduccedilatildeo das aves na natureza Dentre tais normas se preconiza o
diagnoacutestico da clamidiose assim como hemograma completo com pesquisa de hemoparasitos
para aves cujo peso esteja acima de 120g (IBAMA 2007)
A pesquisa de clamidiose jaacute eacute realizada no CRASMS ulilizando coleta de fezes dos
recintos coletivos Os materiais satildeo enviados para laboratoacuterio privado e como meacutetodo
diagnoacutestico utiliza-se a reaccedilatildeo em cadeia da polimerase (PCR) Quando um recinto apresenta
resultado positivo para a clamidiose todos os paacutessaros do viveiro recebem tratamento com
doxiciclina Utilizando-se antibioticoterapia em todos os indiviacuteduos fica impossibilitada de
ser determinada a prevalecircncia da clamidiose nas aves em reabilitaccedilatildeo
A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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A hematologia de aves eacute um meacutetodo raacutepido de baixo custo mas pouco utilizado na
rotina do CRASMS Segundo Schmidt et al (2007) as provas laboratoriais do sangue podem
servir como ferramentas importantes para auxiliar no monitoramento da sauacutede das aves no
diagnoacutestico de doenccedilas na avaliaccedilatildeo preacute-operatoacuteria e na eficaacutecia do tratamento Os estudos
dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir com o progresso
da medicina aviaacuteria A realizaccedilatildeo de estudos que permitam a interpretaccedilatildeo adequada das
respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos pode tornar possiacutevel a adoccedilatildeo
de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
Existem poucos relatos na literatura que indiquem alteraccedilotildees hematoloacutegicas de
animais positivos para clamidiose A partir do conhecimento desta hematologia pode ser
possiacutevel estimar um perfil sanguumliacuteneo de aves positivas para Chlamydophila spp devendo o
hemograma ser utilizado como exame de rotina no manejo sanitaacuterio do CRASMS
O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciformes
em reabilitaccedilatildeo no CRASMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a
esta enfermidade nestas aves
2 REVISAtildeO DE LITERATURA
21 Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres
A captura de animais da natureza para abastecer o mercado de aves de estimaccedilatildeo
somado agrave destruiccedilatildeo ambiental eacute um importante fator responsaacutevel pelo decliacutenio das
populaccedilotildees e pelo processo de extinccedilatildeo em que algumas espeacutecies se encontram (SNYDER et
al 2004)
O traacutefico de animais eacute considerado o terceiro maior comeacutercio ilegal do mundo
perdendo apenas para a comercializaccedilatildeo de drogas e armas No Brasil estima-se que esta
atividade ilegal seja responsaacutevel pela retirada anual de pelo menos 12 milhotildees de animais
silvestres das matas brasileiras (RENCTAS 2003)
Devido ao traacutefico e a maacute utilizaccedilatildeo da fauna brasileira foram criados os Centros de
Reabilitaccedilatildeo e Refuacutegios de Animais Silvestres que recebem animais apreendidos no traacutefico
fornecendo um manejo adequado para cada espeacutecie O CRASMS localiza-se no municiacutepio de
Campo Grande e desde 1988 presta atendimento agrave fauna silvestre realizando a recepccedilatildeo
triagem e destinaccedilatildeo dos animais provenientes do comeacutercio ilegal viacutetimas de atropelamentos
ou entregues pela comunidade
Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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Entre os animais recepcionados no CRASMS 40 proveacutem do traacutefico e destes 23
destes animais satildeo papagaios da espeacutecie Amazona aestiva Desde a sua criaccedilatildeo jaacute foram
recebidos por este centro mais de trecircs mil papagaios apreendidos pelos oacutergatildeos de fiscalizaccedilatildeo
Por ser a espeacutecie mais procurada como ave de estimaccedilatildeo a reintroduccedilatildeo em seu habitat
natural apoacutes a sua recuperaccedilatildeo torna-se essencial pois a captura desenfreada destes animais
para o abastecimento do comeacutercio ilegal pode levaacute-los agrave extinccedilatildeo (SEIXAS e FIRMINO
2002)
A maioria dos papagaios que chega ao CRASMS satildeo filhotes devido agrave facilidade de
captura pelos traficantes A taxa de mortalidade desses animais eacute altiacutessima durante as
primeiras semanas de tratamento Isso eacute explicado pela peacutessima alimentaccedilatildeo fornecida pelos
traficantes associados aos maus tratos e ao jejum que por vezes ocorre devido ao longo
transporte antes da chegada ao centro de reabilitaccedilatildeo O papagaio-verdadeiro foi a uacutenica
espeacutecie monitorada apoacutes a soltura pelo CRASMS sendo que de 1988 a 1998 foram
destinadas para repovoamento 47 dos papagaios recebidos No acompanhamento destas
aves na natureza verificou-se que aproximadamente 60 delas sobreviveram pelo menos 13
meses apoacutes a soltura (SEIXAS e MOURAtildeO 2000)
As araras chegam em menor nuacutemero e recebem os mesmos cuidados e alimentaccedilatildeo
que os papagaios sendo colocadas em recintos adequados para esta espeacutecie Segundo o
Relatoacuterio sobre o Traacutefico de Animais Silvestres no Pantanal Sul a arara e o papagaio
aparecem como o segundo animal mais criado como mascotes pelos moradores de quatro
comunidades de sub-regiotildees pantaneiras precedido apenas pelo paacutessaro-preto (SEIXAS e
FIRMINO 2002)
Uma importante consequumlecircncia do traacutefico diz respeito ao aspecto sanitaacuterio pois na
comercializaccedilatildeo ilegal de animais silvestres natildeo eacute realizado nenhum controle sanitaacuterio
podendo ser transmitidas doenccedilas graves e desconhecidas para o homem No traacutefico dos
psitaciacutedeos a zoonose que representa maiores riscos eacute a clamidiose Moschioni et al (2001)
destaca que nos humanos o diagnoacutestico precoce de clamidiose eacute fundamental devido agrave
excelente resposta terapecircutica entretanto o diagnoacutestico tardio pode levar a um curso grave e
fatal da doenccedila
22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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22 Psitaciacutedeos
Psittacidae refere-se aos papagaios e agraves araras (257 espeacutecies) Os Psitaciacutedeos estatildeo
distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees tropicais Algumas espeacutecies se
estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se estendem ateacute regiotildees temperadas do
norte (LAMBERSKI 2003)
Os psitaciacutedeos podem ser divididos em quatro subfamiacutelias baseados na distribuiccedilatildeo
geograacutefica sendo que espeacutecies do novo mundo podem ser encontradas na Ameacuterica Central e
na Ameacuterica do Sul enquanto que espeacutecies do velho mundo podem ser encontradas na
Austraacutelia Aacutefrica e Aacutesia (LAMBERSKI 2003) O Brasil com 70 espeacutecies eacute o primeiro paiacutes
em nuacutemero de psitaciformes (FORSHAW 1978)
A espeacutecie A aestiva popularmente conhecida como papagaio-verdadeiro apresenta
comprimento meacutedio de 37 cm Na regiatildeo Centro-Oeste a subespeacutecie mais encontrada eacute A
aestiva aestiva a qual pesa em meacutedia 400 g e apresenta coloraccedilatildeo predominantemente verde
com o encontro da asa de coloraccedilatildeo vermelha O bico possui coloraccedilatildeo preta a fronte possui
penas azuis e amarelas ao redor dos olhos e pescoccedilo (BATES e BUSENBARK 1978
FORSHAW 1978 SICK 1997) Eacute uma das aves mais apreciadas em cativeiro no Brasil
sendo considerada a melhor ldquofaladorardquo entre os psitaciacutedeos nacionais (SICK 1985)
No Brasil satildeo encontradas as maiores representantes dos psitaciacutedeos as araras Dentre
as espeacutecies nativas podemos citar as araras-azuis Anodorhynchus hyacinthinus
Anodorhynchus leari e Anodorhynchus glaucus (extinta no iniacutecio do seacuteculo passado) as
araras-vermelhas Ara macao e Ara chloroptera e a arara-canindeacute Ara ararauna
(FORSHAW 1978 SICK 1985)
As araras embora apresentem uma grande variaccedilatildeo de tamanho coloraccedilatildeo e peso
possuem caracteriacutesticas muito marcantes que facilitam seu reconhecimento imediato como
bico curto alto recurvado de base larga maxila bem moacutevel articulada ao cracircnio com
movimentos de extensatildeo que aumentam a potecircncia do bico usado para partir sementes duras
A coloraccedilatildeo predominante das araras-canindeacutes eacute amarela e azul (SICK 1985 COLLAR e
JUNIPER 1992)
Na natureza os psitaciformes alimentam os filhotes regurgitando-lhes comida que
pode ser quase liacutequida a mandiacutebula do ninhego eacute como uma concha muito larga na base
facilitando a recepccedilatildeo do ldquomingaurdquo e durante a incubaccedilatildeo dos ovos o macho regurgita
comida para a fecircmea (SICK 1997)
Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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Os psitaciacutedeos satildeo ldquoadoradosrdquo pelo seu companheirismo temperamento coloraccedilatildeo e
em particular pela sua habilidade de imitar a voz humana e satildeo ldquoodiadosrdquo pelos impactos que
causam sobre a agricultura Entre estes dois extremos eles satildeo apanhados na natureza para
suprir a demanda de aves de estimaccedilatildeo simplesmente como uma mercadoria ou ainda
exterminados como pragas nas regiotildees agriacutecolas que avanccedilam sobre seus habitats naturais
(COLLAR e JUNIPER 1992)
Estas espeacutecies sempre foram uma presenccedila comum nos lares do Brasil especialmente
nas pequenas cidades do interior como animais de companhia a despeito da legislaccedilatildeo de
fauna vigente que desde 1967 (lei ndeg 5197 de 3 de janeiro de 1967) proiacutebe a captura de
animais para comeacutercio (GOULART 2006)
Segundo a Uniatildeo Internacional para Conservaccedilatildeo da Natureza e Recursos Naturais
(IUCN) as espeacutecies A aestiva e A ararauna possuem amplo territoacuterio e satildeo espeacutecies de
baixo risco de extinccedilatildeo na lista de animais ameaccedilados entretanto haacute evidecircncias do decliacutenio
populacional o que denota sua vulnerabilidade devido ao traacutefico ilegal Estas aves foram
classificadas no anexo II do CITES (Convenccedilatildeo Internacional para o Tratado contra o Traacutefico
de Animais Silvestres) natildeo sendo portanto espeacutecies consideradas criticamente ameaccediladas
(IUCN 2008)
Embora a destruiccedilatildeo do habitat possa contribuir para a reduccedilatildeo das populaccedilotildees de
papagaios neotropicais a caccedila aos ninhos tem sido a causa principal de seu decliacutenio O
comeacutercio de papagaios tornou-se uma atividade econocircmica que ocorre devido a demanda do
comeacutercio ilegal de animais de estimaccedilatildeo Relatou-se preccedilo meacutedio de US$ 71100 para esta
espeacutecie quando comercializada nos Estados Unidos O papagaio-verdadeiro foi a espeacutecie mais
frequumlentemente negociada estimando-se que entre 1982 e 1986 aproximadamente 51000
espeacutecimes foram enviados para Argentina (BEISSINGER e BUCHER 1992)
A destruiccedilatildeo do habitat devido agrave agricultura e expansatildeo humana tem sido uma ameaccedila
ao papagaio-verdadeiro reduzindo as cavidades naturais para a nidificaccedilatildeo e disponibilidade
de alimento (COLLAR e JUNIPER 1992) No Pantanal as modificaccedilotildees no habitat satildeo em
grande parte devido ao cultivo de pasto para o gado enquanto em outras aacutereas esta destruiccedilatildeo
ocorre por causa da pressatildeo populacional da colonizaccedilatildeo e do desmatamento (GUEDES e
HARPER 1995)
Esta espeacutecie de papagaio eacute a mais capturada no mundo (BEISSINGER e BUCHER
1992) apesar disso somente alguns relatos sobre a biologia e a ecologia do A aestiva estatildeo
disponiacuteveis e satildeo restritos a poucos estudos realizados na Argentina e no Pantanal brasileiro
23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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23 Clamidiose
Chlamydiaceae eacute uma famiacutelia de microrganismos intracelulares encontrados em
humanos e animais (BRANLEY et al 2008) A sistemaacutetica da Chlamydiaceae foi revista em
1999 com base nos dados da variaccedilatildeo do gene ribossomal em espeacutecies da ordem
Chlamydiales A famiacutelia Chlamydiaceae que anteriormente incluiacutea somente um gecircnero
Chlamydia foi dividida em dois gecircneros Chlamydia e Chlamydophila na nova classificaccedilatildeo
O gecircnero Chlamydophila inclui as espeacutecies Chlamydophila psittaci (anteriormente Chlamydia
psittaci) C pneumoniae (anteriormente Chlamydia pneumoniae) e C pecorum
(anteriormente Chlamydia pecorum) juntamente com C abortus C caviae e C felis que foi
separada da espeacutecie Chlamydia psittaci (YATSENTYUK e OBUKHOV 2007)
As bacteacuterias da famiacutelia Chlamydiaceae satildeo Gram negativas possuem forma cocoacuteide
com ciclo de vida que se alterna entre formas infectantes (corpuacutesculos elementares) e
vegetativas (corpuacutesculos reticulados) (CORSARO e GREUB 2006)
Chlamydophila psittaci pode infectar 465 espeacutecies de aves em 30 ordens sendo no
miacutenimo 153 espeacutecies da ordem Psittaciformes (VANROMPAY et al 2007) Esta bacteacuteria
pode tambeacutem infectar ovinos caprinos e bovinos causando infecccedilatildeo crocircnica no sistema
reprodutor insuficiecircncia placentaacuteria e aborto nesses animais mas a infecccedilatildeo humana pela
ingestatildeo da carne infectada eacute rara (MOSCHIONI et al 2001)
231 Aspectos Epidemioloacutegicos
No periacuteodo de 1988 a 2003 935 casos de psitacose em humanos foram relatados no
centro de controle e prevenccedilatildeo de doenccedilas dos EUA (United State Centers for Disease
Control and Prevention) sendo que a maioria dos casos relatou o contato com aves
psitaciformes (VANROMPAY et al 2007) Yung e Grayson (1988) afirmaram que 85 dos
casos em humanos estatildeo associados ao contato com paacutessaros
Sabe-se que pombos assim como outras aves podem ser hospedeiros de C psittaci
Nos paacutessaros a bacteacuteria pode ser isolada das fezes cloaca secreccedilotildees respiratoacuterias e
conjuntivais Heddema et al (2006) demonstraram que 5 a 10 das amostras de fezes de
pombos de Amsterdan na Holanda apresentavam C psittaci A clamidiose estaacute
constantemente presente nos paacutessaros da Eslovecircnia (DOVC et al 2007)
No passado vaacuterios surtos de clamidiose em perus nos Estados Unidos foram
alarmantes envolvendo uma ou mais granjas Provavelmente a situaccedilatildeo eacute comparaacutevel com a
da Europa onde atualmente C psittaci eacute praticamente endecircmica nas criaccedilotildees de perus da
Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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Beacutelgica Alemanha e provavelmente Franccedila Surtos com altas taxas de mortalidade ocorrem
ocasionalmente enquanto os surtos mais comuns satildeo em sua maioria caracterizados por
sintomas respiratoacuterios sem mortalidade (VAN LOOCK et al 2005)
Chlamydophila psittaci causa importantes perdas como patoacutegeno primaacuterio e tambeacutem
como infecccedilatildeo concomitante com outros patoacutegenos respiratoacuterios como o pneumoviacuterus aviaacuterio
e o Ornithobacterium rhinotracheale Aleacutem das perdas econocircmicas as infecccedilotildees humanas satildeo
rotineiramente causadas pelo manejo ou processamento de patos ou perus infectados (VAN
LOOCK et al 2005)
A incidecircncia nas aves de estimaccedilatildeo eacute alta e encontra-se descrita em 15 a 30 das aves
testadas (OGLESBEE 1998) Aves jovens dos gecircneros Amazona e Ara satildeo altamente
susceptiacuteveis agrave clamidiose aguda Existem poucos estudos sobre clamidiose no Brasil
entretanto alta soroprevalecircncia de C psittaci entre papagaios de cativeiro foi demonstrada em
trecircs criatoacuterios de aves com 60 875 e 100 dos paacutessaros soropositivos Eacute possiacutevel que
muitos casos natildeo sejam diagnosticados ou relatados (RASO et al 2002)
Raso et al (2004) descreveram um surto de psitacose em filhotes de papagaios-
verdadeiros em um centro de reabilitaccedilatildeo de animais selvagens no Estado de Satildeo Paulo
Brasil onde a taxa de mortalidade foi de 965
Gilardi et al (1995) diagnosticaram psitacose em vaacuterias espeacutecies de papagaios-
australianos selvagens Haacute muitos relatos de animais de vida livre positivos sorologicamente
para a clamidiose mas existem poucos registros sobre a mortalidade destes paacutessaros
(FRANSON e PEARSON 1995) Esses animais satildeo importantes reservatoacuterios do
microrganismo na natureza Raso et al (2006) relataram araras-azuis (Anodorhynchus
hyacinthinus) e papagaios-verdadeiros (A aestiva) de vida livre positivos na pesquisa de
clamidiose atraveacutes da detecccedilatildeo de C psittaci em swabs cloacais pelo meacutetodo de fixaccedilatildeo de
complemento e pela PCR encontrando 63 e 267 de animais positivos respectivamente
Segundo Dovc et al (2007) paacutessaros jovens satildeo mais susceptiacuteveis agrave infecccedilatildeo do que
os mais velhos e algumas espeacutecies parecem ser mais susceptiacuteveis do que outras Muitos dos
paacutessaros jovens com a doenccedila podem apresentar-se caqueacuteticos e alguns com sinusite O
periacuteodo entre a exposiccedilatildeo agrave C psittaci e o aparecimento de animais doentes pode variar de
trecircs dias a semanas entretanto a doenccedila ativa pode surgir sem exposiccedilatildeo identificaacutevel
Fatores como a espeacutecie de ave a virulecircncia e sorovare do patoacutegeno estresse idade extensatildeo
do tratamento ou profilaxia podem indicar se um paacutessaro teraacute a doenccedila aguda crocircnica ou se
viraacute a oacutebito (DOVC et al 2007)
Existem ateacute o momento oito sorovares de C psittaci e os genoacutetipos correspondentes
foram identificados (GEENS et al 2005) acarretando em importantes dados para a
epidemiologia da doenccedila nos humanos e animais Nas zoonoses foram descritos os sorovares
A C D e E sendo que o sorovare A eacute endecircmico entre os psitaciacutedeos enquanto que o
sorovare E estaacute associado com pneumonites em humanos (ANDERSEN et al 1998
EVERETT et al 1999 GEENS et al 2005)
A transmissatildeo de C psittaci entre humanos eacute rara mas o contato com paacutessaros pode
resultar em uma alta taxa de infectividade O contaacutegio ocorre atraveacutes da inalaccedilatildeo de secreccedilotildees
e fezes de aves ou atraveacutes do contato com um paacutessaro infectado A probabilidade de infecccedilatildeo
eacute presumidamente relatada devido agrave exposiccedilatildeo a uma grande quantidade de organismos mas
o sorotipo da clamidiose tambeacutem pode ser um fator importante (BRANLEY et al 2008)
Natildeo eacute conhecido se os psitaciformes satildeo mais suscetiacuteveis agrave clamidiose do que outras
espeacutecies de paacutessaros Sabe-se que a doenccedila eacute diagnosticada mais frequumlentemente nos
psitaciformes devido aos graves sinais cliacutenicos No entanto quando comparados dados de
clamidiose nesta aves e nos pombos a prevalecircncia parece ser semelhante entre 16 a 81 e 23
a 85 respectivamente (HARKINEZHAD et al 2007)
Os pombos em sua maioria satildeo infectados pelo sorovare B e menos frequumlentemente
pelo sorovare E e a clamidiose apresenta-se menos severa nestes paacutessaros ocorrendo
mortalidade devido agraves infecccedilotildees secundaacuterias como salmonelose e tricomoniacutease De fato o
quadro cliacutenico geral em uma dada espeacutecie eacute o resultado da virulecircncia do microrganismo e da
imunogeneacutetica do hospedeiro (HARKINEZHAD et al 2007)
Existe pouco conhecimento sobre a imunogeneacutetica dos psitaciformes mas C psittaci
sorovare A eacute frequumlentemente isolado nestas aves e este sorovare eacute altamente virulento
excretado intensivamente e responsaacutevel por alta mortalidade Estas questotildees podem ser
provavelmente resolvidas quando a imunogeneacutetica do hospedeiro for mais conhecida bem
como as interaccedilotildees bacteacuteria-hospedeiro e fatores de virulecircncia bacteriana (HARKINEZHAD
et al 2007)
232 Patogecircnese
Os corpos elementares extracelulares infecciosos satildeo eliminados nas secreccedilotildees orais
eou nasais e nas fezes podendo sobreviver no ambiente um mecircs ou mais (OGLESBEE
1998) Raso et al (2006) demonstraram que filhotes de araras-azuis e papagaios-verdadeiros
de vida livre eliminam C psittaci pelas vias traqueais e cloacais no entanto o microrganismo
foi mais encontrado nas amostras cloacais
As fezes secreccedilotildees e poeira das penas satildeo frequumlentes fontes de transmissatildeo podendo
se dispersar atraveacutes do ar quando estatildeo secas Outros paacutessaros podem se infectar pela inalaccedilatildeo
ou ingestatildeo dessas fontes de infecccedilatildeo (SAREYYUPOGLU et al 2007) Os corpos
elementares satildeo inalados ou ingeridos e entram nas ceacutelulas hospedeiras onde sofrem um
rearranjo celular para formar corpos reticulados (a forma replicante do microrganismo) Apoacutes
a replicaccedilatildeo os corpos iniciais se reorganizam para formar corpos elementares infecciosos
que satildeo liberados com a ruptura da ceacutelula hospedeira Os corpos estranhos podem entatildeo se
disseminar para as ceacutelulas hepaacuteticas esplecircnicas pulmonares intestinais renais gonadais e do
sistema nervoso central (OGLESBEE 1998)
A psitacose pode persistir como uma infecccedilatildeo subcliacutenica por longo periacuteodo Haacute
evidecircncias que periacuteodos de verdadeira latecircncia (isto eacute sem multiplicaccedilatildeo) tambeacutem possam
ocorrer Muitos paacutessaros especialmente os psittaculas lovebirds periquitos-australianos e
calopsitas permanecem infectados sem sintomatologia Essas aves reservatoacuterios
aparentemente sadias podem eliminar grande quantidade de patoacutegeno durante periacuteodos de
estresse (SAREYYUPOGLU et al 2007) como fome superlotaccedilatildeo transporte e maus tratos
(MOSCHIONI et al 2001)
Deste modo paacutessaros receacutem-adquiridos satildeo importantes hospedeiros da infecccedilatildeo pois
a enfermidade nessas aves pode ser induzida por estas situaccedilotildees Se natildeo tratadas 10 das
aves infectadas tornam-se portadoras assintomaacuteticas (MOSCHIONI et al 2001) Muitos
fatores como a espeacutecie idade estresse e resistecircncia das aves ao hospedeiro podem contribuir
para converter a forma latente da clamidiose para a septicecircmica (SUWA et al 1990)
O controle da clamidiose eacute um desafio para os hospedeiros devido agrave infecccedilatildeo
extracelular distinta e as fases de desenvolvimento intracelular vegetativa (SPRAGUE et al
2008) Infecccedilotildees em psitaciacutedeos e aves domesticadas que podem causar consideraacuteveis danos
econocircmicos representam um importante reservatoacuterio na transmissatildeo para humanos O
patoacutegeno eacute transmitido tanto por animais com sintomatologia cliacutenica como por animais
assintomaacuteticos (GAEDE et al 2008) A transmissatildeo entre humanos eacute extremamente rara e
tende a ser mais grave (MOSCHIONI et al 2001)
A transmissatildeo de C Psittaci para os ovos tem sido demonstrada em frangos patos
gaivotas e tambeacutem em psitaciacutedeos A presenccedila de C psittaci na mucosa do oviduto e saco
viteliacutenico de embriotildees de periquitos-australianos jaacute foi confirmada e a morte embrionaacuteria foi
demonstrada em 679 dos ovos (DOVC et al 2007)
233 Aspectos Cliacutenicos
Os sinais cliacutenicos variam muito e dependem do sorovare de C psittaci da espeacutecie e
idade da ave A clamidiose aviaacuteria pode produzir letargia hipertermia excreccedilotildees anormais
descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo Segundo Van Loock et al (2005) as taxas
de mortalidade podem chegar a 30 Harkinezhad et al (2007) relataram os seguintes sinais
cliacutenicos de clamidiose em papagaios-cinzento-africanos depressatildeo penas ericcediladas baixo
peso e leve dispneacuteia Osglebee (1998) descreve como sinais especiacuteficos ericcedilamento das
penas perda de peso e depressatildeo
Em um surto no Estado de Satildeo Paulo (Brasil) as aves apresentaram sintomas
semelhantes aos encontrados por Harkinezhad et al (2007) seguido apoacutes alguns dias de
conjuntivite e blefarite bilateral mucopurulenta ou secreccedilatildeo nasal A taxa de letalidade foi de
965 na espeacutecie A aestiva (RASO et al 2004)
Muitos dos paacutessaros carregam a infecccedilatildeo crocircnica e natildeo apresentam sinais cliacutenicos ateacute
passarem por algum tipo de estresse Estas aves frequumlentemente eliminam C psittaci
intermitentemente servindo como fonte de infecccedilatildeo aos humanos e outros paacutessaros
(HARKINEZHAD et al 2007) Na forma crocircnica os sinais especiacuteficos (como emaciaccedilatildeo
muscular e alteraccedilotildees em empenamento) podem ser os uacutenicos observados Ocasionalmente
podem-se observar sinais respiratoacuterios gastrointestinais ou do sistema nervoso como por
exemplo torcicolo ataques convulsivos e paralisia do membro posterior (OGLESBEE
1998)
Segundo Suwa et al (1990) na infecccedilatildeo aparente os paacutessaros apresentam inatividade
inapetecircncia e emaciaccedilatildeo aleacutem dos sinais cliacutenicos jaacute citados Em alguns casos pode aparecer
serosite abdominal hepatomegalia esplenomegalia e pneumonia mas estes natildeo satildeo sinais
cliacutenicos especiacuteficos para a confirmaccedilatildeo do diagnoacutestico (SUWA et al 1990)
Num surto de psitacose em periquitos-australianos Dovc et al (2007) relataram as
mesmas alteraccedilotildees seguidas de enterite catarral a hemorraacutegica e sinusite serohemorraacutegica
observando mais alteraccedilotildees nas aves jovens do que nas adultas Esplenomegalia eacute
frequumlentemente relatada como um achado comum na doenccedila entretanto aerosaculite
fibrinosa eacute mais indicativa da enfermidade em psitaciformes e pombas (GERLACH 1994)
Histologicamente satildeo observadas lesotildees de pneumonia aerosaculite traqueiacutete
hepatite miocardite esplenite nefrite orquite enterite ceratoconjutivite e encefalite Estas
lesotildees satildeo associadas com os corpuacutesculos elementares (CE) (SUWA et al 1990) Entretanto
achados histopatoloacutegicos satildeo geralmente inespeciacuteficos exceto pela presenccedila de corpuacutesculos
LCL (Levinthal-Colles-Lillie) que satildeo patognomocircnicos Estes corpuacutesculos satildeo muacuteltiplas
micro-colocircnias de Chlamydophila spp sendo esfeacutericos e medindo de 02 a 04 microm de
diacircmetro Os LCLs podem ocorrer em vaacuterios oacutergatildeos mas satildeo especialmente comuns em
membranas serosas Infecccedilotildees secundaacuterias bacterianas fuacutengicas ou virais podem alterar as
lesotildees e confundir o diagnoacutestico (GERLACH 1994)
A psitacose nos seres humanos eacute considerada uma doenccedila rara mas extremamente
grave caracterizada por sintomas semelhantes aos causados por influenzas nos estaacutegios
iniciais tais como dor de cabeccedila febre e anorexia Tosse seca e os outros sintomas de
pneumonia atiacutepica tornam-se aparentes apoacutes a primeira semana de aparecimento da doenccedila
Com a progressatildeo da infecccedilatildeo podem ocorrer alteraccedilotildees cardiovasculares Na ausecircncia de
antibioticoterapia a infecccedilatildeo pode se tornar fatal Pessoas que manipulam paacutessaros devido agrave
atividade profissional ou por lazer fazem parte do grupo de risco devido principalmente agrave
inalaccedilatildeo de aerossoacuteis contendo o patoacutegeno (GAEDE et al 2008)
234 Diagnoacutestico
O diagnoacutestico de clamidiose ainda representa um desafio sendo baseado no
isolamento do microrganismo na pesquisa de antiacutegenos na sorologia ou na detecccedilatildeo de
aacutecidos nucleacuteicos clamidiais (KALTENBOECK et al 1991 SPRAGUE et al 2008)
Esfregaccedilos de secreccedilotildees nasais ou oculares podem ser corados pela coloraccedilatildeo de Stam
Giemsa Gimenez Macchiavellorsquos ou Castantildeeda ideais para evidenciar a presenccedila de
corpuacutesculos LCL patognomocircnicos para a doenccedila O exame histopatoloacutegico revela
principalmente no baccedilo e no fiacutegado a presenccedila destes corpuacutesculos Quando haacute lesatildeo no
sistema nervoso central o exame histopatoloacutegico revela meningite O exame radiograacutefico
mostrando esplenomegalia ou hepatomegalia pode ser sugestivo de psitacose em paacutessaros
(GERLACH 1994)
Os testes imunoenzimaacuteticos (ELISA) satildeo uacuteteiscomo exame de triagem ou apoacutes a
doenccedila declarada Evidecircncias conclusivas da presenccedila de clamidiose satildeo requeridas para
diagnoacutesticos inequiacutevocos devido agrave preponderacircncia da infecccedilatildeo persistente e clinicamente
inaparente O isolamento em cultura celular eacute difiacutecil e depende da presenccedila de quantidade
suficiente de corpuacutesculos elementares viaacuteveis Portanto meacutetodos sensiacuteveis para a detecccedilatildeo de
clamidiose que natildeo sejam fundamentados na infectividade satildeo necessaacuterios para identificar C
psittaci especialmente em infecccedilotildees persistentes (KALTENBOECK et al 1991)
Em humanos o meacutetodo de fixaccedilatildeo de complemento eacute o mais aplicado pois os
anticorpos podem ser detectados de 7 a 10 dias apoacutes a infecccedilatildeo inicial Entretanto este teste
natildeo consegue distinguir anticorpos especiacuteficos contra C psittaci de outras clamiacutedias
patoacutegenas como C pneumoniae e Chlamydia trachomatis Por isso o exame de fixaccedilatildeo de
complemento estaacute sendo frequumlentemente substituiacutedo pelo teste de imunofluorescecircncia
(GEENS et al 2005)
Em contraste agrave cultura celular e aos outros meacutetodos soroloacutegicos a imunofluorescecircncia
e a PCR provecircm como diagnoacutesticos alternativos mais raacutepidos especiacuteficos e sensiacuteveis para
identificaccedilatildeo da infecccedilatildeo por C psittaci (VAN LOOCK et al 2005)
O teste de imunofluorescecircncia distingue todas as espeacutecies de clamidias e mede os
tiacutetulos de IgG e IgM permitindo a detecccedilatildeo de infecccedilotildees recentes Contudo a
antibioticoterapia pode interferir na produccedilatildeo de anticorpos e em alguns pacientes a resposta
humoral pode ser mais lenta Foram desenvolvidos vaacuterios meacutetodos comerciais de detecccedilatildeo de
antiacutegenos para ambos aves e humanos mas eles satildeo menos sensiacuteveis ou menos especiacuteficos
Devido a estas falhas meacutetodos de amplificaccedilatildeo de aacutecidos nucleacuteicos tecircm sido desenvolvidos
(GEENS et al 2005)
A PCR tem sido documentada como um meacutetodo altamente sensiacutevel para a detecccedilatildeo de
C psittaci A teacutecnica oferece vantagens sobre outros testes eacute mais raacutepida e natildeo requer
organismos presentes em grande nuacutemero ou organismos viaacuteveis (SAREYYUPOGLU et al
2007) Para um diagnoacutestico preciso Harkinezhad et al (2007) tambeacutem recomendam o teste de
amplificaccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos em animais e humanos que detecta especificamente C
psittaci com alta sensibilidade e permite a caracterizaccedilatildeo molecular
24 Hematologia em Aves
Os sinais cliacutenicos apresentados pelas aves satildeo frequumlentemente inespeciacuteficos e as
informaccedilotildees obtidas pelo exame fiacutesico satildeo limitadas (LUMEIJ 1997) Os exames
laboratoriais por sua vez auxiliam no diagnoacutestico acompanhamento e prognoacutestico das
patologias existentes (SCHMIDT et al 2007)
O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo entretanto nas aves sua realizaccedilatildeo
fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave variaccedilatildeo da morfologia celular (SCHMIDT et al
2007) Segundo VALLE et al (2008) esta escassez de dados cliacutenicos epidemioloacutegicos e
exames complementares limita o diagnoacutestico de doenccedilas metaboacutelicas eou nutricionais em
espeacutecies em cativeiro
O volume total do sangue das aves corresponde a 10 do peso corpoacutereo A quantidade
maacutexima de sangue que se pode coletar das aves corresponde a 10 do seu volume sanguiacuteneo
total Portanto em um papagaio com peso de 400 gramas podem ser coletados no maacuteximo
quatro mililitros de sangue (PHILIPS 1999) Os principais locais de coleta de sangue satildeo
veia jugular veia ulnar veia metataacutersica medial seio venoso occipital e punccedilatildeo cardiacuteaca
(SCHMIDT et al 2007)
As aves possuem algumas particularidades que alteram o exame de sangue em relaccedilatildeo
aos padrotildees dos mamiacuteferos As ceacutelulas sanguumliacuteneas das aves satildeo 1) gloacutebulos vermelhos
eritroacutecitos 2) gloacutebulos brancos heteroacutefilos basoacutefilos eosinoacutefilos linfoacutecitos e monoacutecitos 3)
tromboacutecitos (BENEZ 2004)
Os eritroacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas e biconvexas com formato variando de oval a
oblongo (BENEZ 2004) O tamanho dos eritroacutecitos varia muito conforme a espeacutecie estudada
Em um grupo de psitaciacutedeos adultos e saudaacuteveis os valores do volume corpuscular meacutedio
(VCM) variavam de 116 a 219 fL (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os heteroacutefilos representam nas aves as ceacutelulas equivalentes aos neutroacutefilos dos
mamiacuteferos Em muitas espeacutecies como nos papagaios os heteroacutefilos satildeo o tipo predominante
de leucoacutecito (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Essas ceacutelulas realizam fagocitose
e aparecem no iniacutecio do processo inflamatoacuterio (BENEZ 2004) Apesar disso Mitchell e
Johns (2008) afirmam que algumas espeacutecies de aves satildeo normalmente linfociacuteticas com os
linfoacutecitos representando mais de 70 dos leucoacutecitos Exemplos de espeacutecies linfociacuteticas
incluem os papagaios do novo mundo e os canaacuterios (MITCHELL e JOHNS 2008)
Os eosinoacutefilos satildeo diferenciados dos heteroacutefilos principalmente em funccedilatildeo da forma
de seus gracircnulos que satildeo esfeacutericos (GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994) Benez
(2004) relata que haacute eosinofilia em infestaccedilotildees por parasitas e processos aleacutergicos
Contrariamente Philips (1999) afirma que ainda natildeo se conhece com clareza a funccedilatildeo dos
eosinoacutefilos nos psitaciacutedeos natildeo ocorrendo aumento destas ceacutelulas devido agrave presenccedila de
parasitas como eacute encontrado nos mamiacuteferos Esse tipo celular eacute raramente visto no sangue
perifeacuterico de psitaciacutedeos entretanto podem ser comuns em outros paacutessaros (PHILIPS 1999)
Os basoacutefilos satildeo semelhantes aos dos mamiacuteferos e nos papagaios apresentam gracircnulos
grandes que recobrem parte do nuacutecleo (BENEZ 2004) Natildeo satildeo ceacutelulas comumente
visualizadas em esfregaccedilos sanguumliacuteneos de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999)
Os linfoacutecitos em algumas espeacutecies de psitaciacutedeos (Amazona eclectus por exemplo)
satildeo os leucoacutecitos mais abundantes na circulaccedilatildeo perifeacuterica Essas ceacutelulas podem estar
presentes em trecircs diferentes grupos de acordo com o tamanho pequenos meacutedios e grandes
linfoacutecitos Os monoacutecitos satildeo ceacutelulas mononucleares sendo menos visualizadas do que os
linfoacutecitos em sangue de psitaciacutedeos (PHILIPS 1999) Normalmente satildeo maiores do que os
linfoacutecitos e apresentam citoplasma mais volumoso que se cora em azul-claro (GARCIA-
NAVARRO e PACHALY 1994)
Os tromboacutecitos satildeo ceacutelulas nucleadas homoacutelogas agraves plaquetas dos mamiacuteferos que
participam do mecanismo de coagulaccedilatildeo sanguiacutenea e apresentam atividade fagocitaacuteria Sua
forma tiacutepica eacute oval com um nuacutecleo redondo central circundado por citoplasma claro
(GARCIA-NAVARRO e PACHALY 1994)
O volume globular (VG) pode ser facilmente obtido atraveacutes da centrifugaccedilatildeo de tubos
capilares preenchidos de sangue As contagens de hemaacutecias e leucoacutecitos satildeo realizadas
utilizando a soluccedilatildeo de Natt e Herrick (NATT e HERRICK 1952)
A concentraccedilatildeo de proteiacutenas plasmaacuteticas totais (PPT) reflete um equiliacutebrio entre as
concentraccedilotildees extra e intravascular de proteiacutenas As funccedilotildees fisioloacutegicas da PPT incluem
fonte de aminoaacutecidos aos tecidos manutenccedilatildeo da pressatildeo oncoacutetica regulaccedilatildeo do equiliacutebrio-
aacutecido-baacutesico transporte de moleacuteculas hemostasia resposta inflamatoacuteria e resistecircncia agraves
infecccedilotildees (THOMAS 2000) As avaliaccedilotildees dos teores de PPT e de suas fraccedilotildees propiciam
subsiacutedios para adequada interpretaccedilatildeo do estado de hidrataccedilatildeo bem como de inflamaccedilatildeo
infecccedilatildeo doenccedila imunomediada e alteraccedilatildeo na siacutentese proteacuteica (SANTANA et al 2008)
A desidrataccedilatildeo pode causar hiperproteinemia relativa enquanto hemorragia externa
pode causar hipoproteinemia absoluta Os distuacuterbios inflamatoacuterios tecircm significante efeito
sobre os niacuteveis de PPT As proteiacutenas plasmaacuteticas satildeo um importante constituinte
complementar no diagnoacutestico de doenccedilas hepaacuteticas gastrintestinais renais eou doenccedilas
infecciosas A determinaccedilatildeo das proteiacutenas plasmaacuteticas raramente conduz a um diagnoacutestico
especiacutefico mas auxilia o cliacutenico na avaliaccedilatildeo da natureza severidade e progressatildeo da doenccedila
(LUMEIJ 1997)
Em relaccedilatildeo ao meacutetodo de dosagem das proteiacutenas plasmaacuteticas haacute discordacircncia na
literatura Para alguns autores o meacutetodo do biureto eacute o ideal (CAMPBEL 2004) no entanto
estudos realizados em frangos perus e patos revelaram uma boa correlaccedilatildeo entre o meacutetodo do
refratocircmetro e do biureto (ANDERSON 1989)
Os eritroacutecitos das aves possuem meia-vida curta em comparaccedilatildeo aos de muitos
mamiacuteferos aproximadamente entre 25 a 45 dias em vaacuterias espeacutecies Devido agrave troca dos
eritroacutecitos ser mais raacutepida os paacutessaros tendem a apresentar mais policromatofilia em animais
saudaacuteveis do que os mamiacuteferos (MITCHELL e JOHNS 2008)
Parasitos sanguiacuteneos satildeo encontrados esporadicamente em paacutessaros Usualmente seu
significado cliacutenico eacute mais acadecircmico do que danoso Sob algumas circunstacircncias entretanto
as aves desenvolvem uma moderada agrave severa anemia e podem exarcebar uma condiccedilatildeo
patoloacutegica de etiologia diferente Alguns gecircneros como Plasmodium e Haemoproteus satildeo
relativamente faacuteceis de serem identificados outros como Babesia Aegyptianella e Rickettsia-
like satildeo facilmente confundidos com inclusotildees de origem diferente (PENDL 2006)
O Trypanosoma avium tambeacutem tem sido descrito desde 1885 quando Danielwsky
registrou a primeira ocorrecircncia deste parasito em aves na Europa (PIERCE 1989) Apesar de
outros membros do gecircnero serem conhecidos como causadores de patologias no homem e
animais ainda existem poucas evidecircncias sobre a patogenicidade destes parasitos em aves
(BAKER 1976)
Os principais insetos relacionados com o ciclo das hemoparasitoses satildeo os diacutepteros
ornitofiacutelicos Destes destacam-se a famiacutelia Simuliidae os Ceratopogonidae em especial o
gecircnero Culicoides relacionados com os parasitos Haemoproteidae a famiacutelia Hippoboscidae
com destaque para a mosca Pseudolynchia canariensis tambeacutem relacionados aos parasitos
Haemoproteidae a famiacutelia Culicidae no qual os gecircneros Anopheles Culex e Aedes se
destacam na transmissatildeo dos parasitos Plasmodiidae (GARNHAM 1966 RESENDE et al
2001)
No Brasil estes levantamentos de parasitos sanguumliacuteneos satildeo escassos Existem alguns
estudos sobre a avifauna selvagem da mata atlacircntica em populaccedilotildees de aves urbanas como a
pomba-domeacutestica (Columba livia domestica) e alguns relatos isolados de caso (RESENDE et
al 2001) Natildeo existe no Brasil estudo amplo estimando a prevalecircncia das hemoparasitemias
por bioacutetopos e biomas e portanto ainda natildeo eacute possiacutevel tecer um perfil do estado
hemoparasitaacuterio das aves brasileiras (GOULART 2006)
241 Hematologia e clamidiose
Embora a utilizaccedilatildeo de exames laboratoriais para complementar o diagnoacutestico
apresente uma limitada aplicabilidade para aves individuais (OGLESBEE 1998) o
conhecimento das alteraccedilotildees hematoloacutegicas e bioquiacutemicas de aves em cativeiro pode servir
como modelo para o estudo das respostas dos animais na natureza frente a um determinado
desafio bem como facilitar o diagnoacutestico de enfermidades Na maioria das vezes as doenccedilas
de animais cativos satildeo comparaacuteveis agravequelas observadas em vida livre e portanto
determinados programas de conservaccedilatildeo ambiental podem ser beneficiados com esses dados
(MUNSON amp COOK 1993 POLO et al 1998)
A anaacutelise hematoloacutegica de paacutessaros com psitacose segundo Benez (2004) pode
apresentar alteraccedilotildees como basofilia Apesar disso Lamberski (2003) descreve que estes
animais podem apresentar leucocitose caracterizada por heterofilia e linfocitose jaacute Oglesbee
(1998) relata que a leucocitose pode ser maior do que 40 x 109L ocorrendo tambeacutem
heterofilia com desvio agrave esquerda heteroacutefilos toacutexicos e frequumlentemente monocitose relativa
Nos casos subcliacutenicos a contagem leucociacutetica pode permanecer normal (OGLESBEE 1998)
Mitchell e Johns (2008) tambeacutem relatam que a infecccedilatildeo por C psittaci pode levar agrave
heterofilia sendo que outros agentes infecciosos que podem acarretar na mesma alteraccedilatildeo satildeo
Mycobacterium spp e Aspergillus spp Geralmente a heterofilia associada a estas infecccedilotildees eacute
acompanhada pela monocitose (MITCHELL e JOHNS 2008)
Heterofilia com granulaccedilotildees toacutexicas pode ser indicativa de doenccedila severa sistecircmica
como septicemias clamidiose infecccedilatildeo fuacutengica ou viremia O desenvolvimento de toxicidade
em heteroacutefilos pode indicar descontrole de um processo infeccioso e frequumlentemente leva a
um mau prognoacutestico Paacutessaros com clamidiose frequumlentemente desenvolvem monocitose
devido agrave produccedilatildeo de agentes quimiotaacuteticos que atraem os monoacutecitos mas esta alteraccedilatildeo
tambeacutem eacute frequumlentemente vista em outras doenccedilas inflamatoacuterias ou infecciosas especialmente
nas doenccedilas granulomatosas como aspergilose ou micobacteriose (MITCHELL e JOHNS
2008)
As modificaccedilotildees hematoloacutegicas tiacutepicas relacionadas com a febre do papagaio
sintomaacutetica estatildeo descritas por Gerlach (1994) na Tabela 1 Um hematoacutecrito baixo eacute comum
tanto na doenccedila aguda quanto na crocircnica A proteiacutena seacuterica geralmente eleva-se como
resultado de estiacutemulo inflamatoacuterio crocircnico (GERLACH 1994)
Tabela 1 Achados cliacutenico-patoloacutegicos associados com Clamidiose Paracircmetros Alteraccedilotildees Leucograma total Elevado (2 ndash 3 vezes o valor normal) Volume Globular Diminuiacutedo (20 ndash 30) Heteroacutefilos Normal Linfoacutecitos Diminuiacutedo agrave normal Monoacutecitos Normal Eosinoacutefilos Normal Basoacutefilos Normal Proteiacutena total Leve aumento Fonte Gerlach (1994) modificado
REFEREcircNCIAS
ANDERSEN A A GRIMES J E SHIVAPRASAD H L Serotyping of Chlamydia
psittaci isolates from ratites Journal of Veterinary Diagnostic Investigacion v 10 n 2 p
186-188 1998
ANDERSON C B Determination of chicken and turkey plasma and serum protein
concentrations using refractometry and the biuret method Avian Diseases v 33 p 93-
96 1989
BAKER J R Biology of the trypanosomes of birds In Biology of the Kinetoplastida
LUMSDEN W H R EVANS D A Academic Press New York p 131-174 1976
BATES H J BUSENBARK R I Parrots and related birds Third Edition ndash edites and
expanded by Dr Matthew M Vriends Neptune New Jersey p 543 1978
BEISSINGER S R BUCHER E H Sustainable harvesting of parrots for conservation In
BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New World parrots in Crisis Solutions
from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington D C p 73-115
1992
BENEZ S M Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332 2004
BRANLEY J M ROY B DWYER D E SORRELL T C Real-time PCR detection
and quantitation of Chlamydophila psittaci in human and avian specimens from a
veterinary clinic cluster European Journal of Clinical Microbiology e Infection Diseases v
27 p 269ndash273 2008
COLLAR N J JUNIPER A T Dimensions and Causes of the Parrot Conservation
Crisis In BEISSINGER S R SNYDER N F R (Ed) New world parrots in crisis
solutions from conservation biology Smithsonian Institution Press Washington p 1-24
1992
CORSARO D GREUB G Pathogenic potential of novel Chlamydiae and diagnostic
approaches to infections due to these obligate intracellular bacteria Clinical
Microbiology Reviews v 19 n 2 p 283ndash297 2006
DOVC A SLAVEC B LINDTNER-KNIFIC R ZORMAN-ROJS O RACNIK J
GOLJA J VLAHOVICAND K Study of Chlamydophila psittaci outbreak in
budgerigars Bulletin of the Veterinary Institute in Pulawy v 51 p 343-346 2007
EVERETT K D BUSH R M ANDERSEN A A Emende description of the order
Chlamydiales proposal of Parachlamydiaceae fam nov and Simkaniaceae fam nov
each containing one monotypic genus and five new species and standards for the
identification of organisms International Journal of Systematic Bacteriology v 49 p 415-
440 1999
FRANSON J C PEARSON JE Probable epizootic chlamydiosis in wild california
(Larus californicus) and ring-billed (Larus delawarensis) gulls in north Dakota Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 3 p 424-427 1995
FORSHAW J M Parrots of the World Published by TFH publications INC Neptune
New Jersey p 584 1978
GAEDE W RECKLING K F DRESENKAMP B KENKLIES S SCHUBERT
NOACK E IRMSCHER H M LUDWIG C HOTZEL H SACHSE K Chlamydophila
psittaci infections in humans during an outbreak of psittacosis from poultry in Germany
Journal of Zoonoses Public Health p 184ndash188 2008
GARCIA-NAVARRO C E K PACHALY J R Manual de hematologia veterinaacuteria
1ed Satildeo Paulo Livraria Varela Ltda p 169 1994
GARNHAM P C C Malaria parasites and other haemosporidia Oxford Blackwell
Science Publisher p 1114 1966
GEENS T DEWITTE A BOON N VANROMPAY D Development of a
Chlamydophila psittaci species specific and genotype-specific real-time PCR Journal of
Veterinary Research v 36 p 787ndash797 2005
GERLACH H Chlamydia In RITCHIE B W HARRISON GJ HARRISON L R
(Ed) Avian medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p
984ndash96 1994
GILARDI K V K LOWENSTINE L J GILARDI J D MUNN C A A survey for
selected viral chlamydial and parasitic diseases in wild dusky-headed parakeets
(Aratinga weddelli) and tui parakeets (Brotogeris sanctithomae) in Peru Journal of
Wildlife Diseases v 31 n 4 p 523-528 1995
GOULART C E S Valores de referecircncia para papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva
- Psittacidae) mantidos em cativeiro Belo Horizonte 80p Dissertaccedilatildeo (Mestrado em
Medicina Veterinaacuteria) Escola de Veterinaacuteria Universidade Federal de Minas Gerais 2006
GUEDES N M R HARPER L H Hyacinth Macaws In ABRAMSON J SPEER B L
THONSEN J B (Ed) The large macaws their care breeding and conservation
Raintree California p 394ndash421 1995
HARKINEZHAD T VERMINNEN K VAN DROOGENBROECK C VANROMPAY
D Chlamydophila psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to
humans Journal Medical Microbiology v 56 p 1097ndash1100 2007
HEDDEMA E R SLUIS S T BUYS J A VANDENBROUCKE-GRAULS C M J E
VAN WIJNEN J H VISSER C E Prevalence of Chlamydophila psittaci in fecal
droppings from feral pigeons in Amsterdam The Netherlands Applied and
Environmental Microbiology v 72 n 6 p 4423ndash4425 2006
IBAMA Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e Recursos Hiacutedricos Diretrizes e
Procedimentos para a Destinaccedilatildeo de Fauna ApreendidaRecolhida quando a opccedilatildeo for
Retorno agrave Natureza Disponiacutevel em
lthttpwwwibamagovbrconsultafaunaanexosanexoI_destinacaopdfgt Acesso em 14
fev 2007
IUCN 2008 2008 IUCN Red List of Threatened Species Disponiacutevel em
lthttpwwwiucnredlistorggt Acesso em 03 fev 2009
KALTENBOECK B KOUSOULAS K G STORZ J Detection and strain
differentiation of Chlamydia psittaci mediated by a two-step polymerase chain reaction
Journal of Clinical Microbiology v 29 n 9 p 1969-1975 1991
LAMBERSKI N Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In FOWLER M E MILLER
R E Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210 2003
LUMEIJ J T Avian Clinical Biochemistry In KANEKO J J HARVEY J W BRUSS
M L Clinical biochemistry of domestic animals 5 ed San Diego Academic Press p
857-883 1997
MITCHELL E B JOHNS J Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522 2008
MOSCHIONI C FARIA H P REIS M A S SILVA E U Pneumonia grave por
ldquoChlamydia psittacirdquo Jornal de Pneumologia v 27 n 4 jul-ago 2001
MUNSON L COOK R A Monitoring investigation and surveillance of diseases in captive
wildlife Journal of Zoo and Wildlife Medicine v 24 p 281-289 1993
NATT MP HERRICK GA A new blood diluent for counting erythrocytes and
leucocytes of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738 1952
OGLESBEE B L Distuacuterbios dos animais de estimaccedilatildeo aviaacuterios e exoacuteticos In BIRCHARD
S J SHERDING R G Manual Saunders cliacutenica de pequenos animais Satildeo Paulo Roca p
1397-1407 1998
PENDL H Morphological changes in red blood cells of birds and reptiles and their
interpretation Journal of Israel Veterinary Medicine v 61 n 61 2006
PHILIPS KM Psittacine blood collection and hematology bascis for the veterinary
practtioner In Proceedings of International Virtual Conferences in Veterinary Medicine
Diseases of Exotic Animals and Wildlife 1999 Georgia AnaisGeorgia The University of
Georgia 1999 Disponiacutevel em lthttpwwwvetugaeduvppivcvm1999phillipsindexphpgt
Acesso em 16 jul 2008
PIERCE M A The significance of avian haematozoa in conservation strategies In Disease
and threatened birds COOPER J E ICBP Tecnical Publication p 69-76 1989
POLO F J Hematologic and plasma chemistry values in captive psittacine birds Avian
Disease v 42 p 523-535 1998
RASO T F BERCHIERI A JR A A PINTO Evidence of Chlamydophila psittaci
infection in captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p
118ndash121 2002
RASO T F GODOY S N MILANELO L SOUZA C A I MATUSCHIMA E R
ARAUJO Jr J P A PINTO A A An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted
Amazon parrots (Amazona aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n
1 p 94ndash96 2004
RASO T F SEIXAS G H F GUEDES N M R PINTO A A Chlamydophila psittaci
in free-living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws
(Anodorhynchus hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of
Veterinary Microbiology v 117 p 235ndash241 2006
RENCTAS Animais Silvestres vida agrave venda Brasiacutelia Dupligraacutefica 260 p 2003
RESENDE JS MARTINS NRS JORGE MA An outbreak of malaria by
Haemoproteus columbae in pigeons Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria e
Zootecnia v 53 n 3 p 361 2001
SANTANA A M CAMPIONI J M SCHMIDT E M S PAULILLO A C Silva PC
FAGLIARI J J Proteinograma seacuterico de gansos da China (Anser cygnoides Linnaeus
1758 Anseriformes Anatidae) sadios de sete dias de idade criados em cativeiro obtidos
pela teacutecnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) In 35ordm Congresso
Brasileiro de Medicina Veterinaacuteria 2008 Gramado Anais 35 CONBRAVET Gramado
Sovergs Conbravet 2008 v 1 p 1240-1245
SAREYYUPOGLU B CANTEKIN Z BAS B Chlamydophila psittaci DNA detection in
the faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242 2007
SCHMIDT E M S LOCATELLI-DITTRICH R SAITO M E PASSERINO A S M
LANGE RR Hematological parameters and total plasma protein of parrots (Amazona
spp) - Preliminary results Archives of Veterinary Science v 4 1999
SCHMIDT E M S LOCATELI -DITRICH R SANTIN E PAULILO A C Patologia
cliacutenica em aves de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash
Revisatildeo Archives of Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20 2007
SEIXAS G H F FIRMINO A M S Caracterizaccedilatildeo do traacutefico de animais silvestres no
Pantanal de MS ndash Medidas para o gerenciamento do comeacutercio de animais vivos no
Pantanal Campo Grande MS IMAP 2002
SEIXAS G H F MOURAtildeO G Assessment of restocking blue fronted amazon
(Amazona aestiva) in the Pantanal of Brazil Ararajuba v 8 n 2 p 73-78 2000
SICK H Ornitologia brasileira uma introduccedilatildeo Brasiacutelia Editora Universidade de
Brasiacutelia v 1 1985
SICK H Ornitologia brasileira Ediccedilatildeo revista e ampliada por J F PACHECO Rio de
janeiro Editora Nova Fronteira 1997
SNYDER N MCGOWAN P GILARDI J GRAJAL A Status survey and
conservation action plan 2000- 2004 Parrots IUCN Cambrige Uk 2004
SPRAGUE L D SCHUBERT E HOTZEL H SCHARF S SACHSE K The detection
of Chlamydophila psittaci genotype C infection in dogs The Veterinary Journal
doi101016jtvjl200804002 2008
SUWA T TOUCHI A HIRAI K ITAKURA C Pathological studies on chlamydiosis
in parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 19 n 2 p 355-369
1990
THOMAS JS Overview of Plasma Proteins In FELDMAN BF ZINKL IG JAIN NC
(ed) Schalmrsquos ndash Veterinary Hematology 5 ed Philadelphia Lippincott Willians p 891-
898 2000
VALLE S F ALLGAYER M C PEREIRA R A BARCELLOS L J G HLAVAC N
R C FRANCcedilA R T LOCATELLI M L Paracircmetros de bioquiacutemica seacuterica de machos
fecircmeas e filhotes de Araras canindeacute (Ara ararauna) saudaacuteveis mantidas em cativeiro
comercial Revista Ciecircncia Rural v 38 n 3 mai-jun p 711-716 2008
VAN LOOCK M VERMINNEN K MESSMER T O VOLCKAERT G GODDEERIS
B M VANROMPAY D Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an interna
control to detect Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
2005
VANROMPAY D HARKINEZHAD T VAN DE WALLE M V BEECKMAN D
VAN DROOGENBROECK C V VERMINNEN K LETEN R MARTEAN
CAUWERTS K Chlamydophila psittaci transmission by pet birds Journal of Emerging
Infectious Diseases v 13 n 7 2007
YATSENTYUK S P OBUKHOV I L Molecular Genetic Characterization of Avian
Chlamydophila psittaci Isolates Russian Journal of Genetics v 43 n 11 p 1215ndash1220
2007
YUNG A P GRAYSON M L Psittacosis a review of 135 cases The Medical Journal of
Australia v 148 p 228-233 1988
ARTIGO
PREVALEcircNCIA DE Chlamydophila sp E QUADRO HEMATOLOacuteGICO DE Ara
ararauna E Amazona aestiva EM CENTRO DE REABILITACcedilAtildeO DE ANIMAIS
SILVESTRES EM CAMPO GRANDEMS
Ono TM Carrijo AS Arauacutejo FR Ramos CA Cavalcanti AR Tavares LE
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci tem sido frequumlentemente
diagnosticada nos psitaciacutedeos sendo uma enfermidade relatada em vaacuterios paiacuteses em animais
domeacutesticos e silvestres naturalmente infectados Os objetivos deste trabalho foram verificar a
prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
GrandeMS e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade Foram
avaliadas 75 aves das espeacutecies Ara ararauna (n=27) e Amazona aestiva (n=48) sendo realizados os
seguintes procedimentos exame cliacutenico coleta de sangue e swabs cloacais e afericcedilatildeo do peso
corpoacutereo O diagnoacutestico de clamidiose foi obtido atraveacutes da reaccedilatildeo em cadeia da polimerase
analisando os swabs cloacais As aves foram divididas em dois grupos positivos e negativos para
clamidiose calculando-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada variaacutevel estudada Chlamydophila sp foi
encontrada nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS sendo que a prevalecircncia em A ararauna
foi de 5556 e em A aestiva 3542 Esta enfermidade foi associada agrave reduccedilatildeo das taxas de volume
globular e peso corpoacutereo na espeacutecie A ararauna Na espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas
diferenccedilas entre os animais positivos e negativos para clamidiose nas condiccedilotildees estudadas Nos
psitaciacutedeos com clamidiose podem-se observar os seguintes sinais cliacutenicos diarreacuteia apatia anorexia
musculatura peitoral diminuiacuteda e problemas no empenamento A presenccedila de Chlamydophila sp nas
espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e
sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo
Grande Mato Grosso do Sul
Palavras-chave clamidiose hematologia papagaio-verdadeiro arara-canindeacute
Prevalence of Chlamydophila sp and hematology of Ara ararauna and Amazona aestiva in wild
animals rehabilitation center in Campo GrandeMS
Abstract
Bird chlamydiosis caused by Chlamydophila psittaci is frequently diagnosed in psittacines being a
disease related in several countries in household and wild animals naturally infected The objectives
of this work were to verify the prevalence of chlamydiosis in psittacines in rehabilitation at the Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres - CRASMS (Wild Animals Rehabilitation Center) in the city
of Campo Grande state of Mato Grosso do Sul Brazil and point out the possible hematologycal
disorders associated with this disease A number of 75 birds of the Ara ararauna (n=27) and of the
Amazona aestiva species (n=48) were evaluated The following procedures were made in these birds
clinical exanination blood collection and cloacal swabs and weight analysis The diagnosis of
psittacosis was obtained by polymerase chain reaction analising the cloacal swabs The animals were
divided in two groups positives and negatives by chlamydiosis calculating the average and standard
derivation to each variable studied Chlamydophila sp was find in the two species of psittacines of
CRASMS being that the prevalence in A ararauna was of 55 56 and in A aestiva This disease
was associated with the reduction of packed cell volume and body weight in the A ararauna In the A
aestiva specie there were no differences observed between the positive and negative birds
to chlamydiosis in the studied conditions In the psittacines with chlamydiosis the following clinical
signs were observed diarrhea weakness anorexia chest muscle decrease and alterations in plumage
The presence of the Chlamydophila sp in the Ara ararauna and Amazona aestiva species indicate the
existence of asymptomatic and symptomatic birds at the CRASMS
Keywords chlamydiosis hematology blue-fronted-parrot blue-and-yellow macaws
Introduccedilatildeo
A ordem Psittaciforme inclui trecircs famiacutelias de paacutessaros Loridae Cacatuidae e
Psittacidae Os psitaciacutedeos estatildeo distribuiacutedos por todo o mundo principalmente em regiotildees
tropicais Algumas espeacutecies se estendem ateacute regiotildees temperadas do sul mas poucas se
estendem ateacute regiotildees temperadas do norte (Lamberski 2003)
A clamidiose aviaacuteria causada pela bacteacuteria Chlamydophila psittaci (C psittaci)
anteriormente conhecida como Chlamydia psittaci tem sido uma importante doenccedila
frequumlentemente diagnosticada nos psitaciacutedeos Trata-se de uma bacteacuteria obrigatoriamente
intracelular transmitida das aves para os humanos (Dovc et al 2007)
A psitacose tambeacutem conhecida como ornitose clamidiose ou febre do papagaio tem
sido um problema agrave sauacutede puacuteblica como zoonose e precauccedilotildees devem ser tomadas quando
houver o manuseio de paacutessaros infectados ou material contaminado Esta doenccedila ocorre em
todo o mundo com sua incidecircncia e distribuiccedilatildeo variando amplamente dependendo da espeacutecie
de paacutessaro e do sorotipo do organismo clamidial (Van Loock et al 2005)
Aves jovens dos gecircneros Ara e Amazona satildeo altamente susceptiacuteveis agrave clamidiose
aguda (Raso et al 2004) Os sinais cliacutenicos da clamidiose aviaacuteria variam muito e dependem da
espeacutecie idade da ave e do sorovare de C psittaci A enfermidade pode produzir letargia
hipertermia excreccedilotildees anormais descarga nasal e ocular e diminuiccedilatildeo da reproduccedilatildeo (Van
Loock et al 2005)
Os estudos dos paracircmetros hematoloacutegicos e bioquiacutemicos satildeo essenciais para contribuir
com o progresso da medicina aviaacuteria Com a realizaccedilatildeo de levantamentos que permitam a
interpretaccedilatildeo adequada das respostas do organismo e do acompanhamento de casos cliacutenicos
possiacuteveis adoccedilotildees de medidas visando uma melhora no diagnoacutestico e na produccedilatildeo industrial
podem ser aplicadas O hemograma eacute um exame raacutepido e de baixo custo poreacutem em se
tratando de aves sua realizaccedilatildeo fica limitada agrave escassa literatura existente e agrave grande variaccedilatildeo
da morfologia celular (Schmidt et al 2007)
Os objetivos deste trabalho foram verificar a prevalecircncia de clamidiose nos psitaciacutedeos
em reabilitaccedilatildeo no Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres (CRASMS) no municiacutepio de
Campo Grande Estado de Mato Grosso do Sul e apontar as possiacuteveis alteraccedilotildees
hematoloacutegicas associadas a esta enfermidade
Material e Meacutetodos
Foram utilizadas 75 aves adultas das espeacutecies A ararauna (n=27) e A aestiva (n=48)
mantidas no CRASMS Brasil O CRASMS localiza-se dentro da Unidade de
Conservaccedilatildeo Parque Estadual do Prosa que dispotildee de 137 hectares e abriga mais de 200
espeacutecies de animais da fauna nativa e introduzida O manuseio dos animais foi autorizado
pelo IBAMA pelo Instituto de Meio Ambiente do Mato Grosso do Sul atraveacutes das licenccedilas
de nuacutemeros 13499-1 e 022008 respectivamente (Anexo 1 e 2)
O manejo alimentar consistiu de triturado composto de cenoura beterraba raccedilatildeo
canina e gratildeo de milho com adiccedilatildeo de frutas como maccedilatilde banana laranja goiaba mamatildeo e
melatildeo e sementes de oleaginosas tais como amendoim e girassol fornecidos duas vezes ao
dia
Os psitaciacutedeos foram manejados durante o periacuteodo de maio a setembro de 2008 sendo
contidos com puccedilaacute e posteriormente manipulados apenas por contenccedilatildeo manual Os olhos
foram vedados para reduzir o estresse da manipulaccedilatildeo As aves possuiacuteam anilhas com
numeraccedilatildeo individual no peacute direito e os dados de cada ave foram anotados em fichas cliacutenicas
individuais (Anexo 3) O swab cloacal de cada animal foi obtido com swabs esteacutereis que
tiveram parte da haste cortada para acondicionamento em tubos de polipropileno esteacutereis de 2
mL Por uacuteltimo procedeu-se a afericcedilatildeo do peso
Foi coletado 10 mL de sangue atraveacutes da veia ulnar ou jugular apoacutes anti-sepsia com
etanol 70ordmGL utilizando-se seringa de 3 mL e agulha 20 x 55 descartaacuteveis com adiccedilatildeo
preacutevia de EDTA 10 (lavagem interna da seringa) para evitar a coagulaccedilatildeo imediata O
sangue foi acondicionado em tubos para microcentrifugaccedilatildeo contendo 20 microL de EDTA
soacutedico a 10 homogeneizado e refrigerado (4 C) ateacute o momento de seu processamento
laboratorial que variou de 2 a 4 horas Foi realizada compressatildeo com algodatildeo no local de
venipunccedilatildeo ateacute a completa coagulaccedilatildeo sanguiacutenea administrando-se polissulfato de
mucopolissacariacutedeo por via toacutepica para evitar a formaccedilatildeo de hematomas
Hematologia
Dois esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram realizados em ateacute duas horas da coleta de sangue e
posteriormente corados utilizando um conjunto de reativo panoacutetico raacutepido comercial1 Depois
de lavada e seca em temperatura ambiente os esfregaccedilos sanguumliacuteneos foram examinados sob
microscopia oacuteptica convencional (imersatildeo 1000x) sendo contadas 100 ceacutelulas seguindo a
teacutecnica de ziguezague de Shilling
A determinaccedilatildeo do volume globular (VG) foi realizada pelo meacutetodo do
microhematoacutecrito Para a contagem de eritroacutecitos e leucoacutecitos utilizou-se a mesma teacutecnica de
contagem manual descrita para mamiacuteferos (pipeta de Thomas) poreacutem substituindo-se o
liacutequido de Gower pela soluccedilatildeo de Natt e Herrick utilizando-se diluiccedilotildees de 1200 e 120
respectivamente (Natt e Herrick 1952 Jain 1993 Benez 2004)
As contagens globulares foram realizadas em cacircmara de Neubauer Paras as hemaacutecias
somaram-se as ceacutelulas de cinco quadrados da aacuterea central (quadrados meacutedios) sendo o valor
total de hemaacutecias multiplicado por 10000 Contaram-se os leucoacutecitos de quatro quadrados
grandes localizados nos extremos da cacircmara multiplicando-se o valor total por 50 Os
caacutelculos do Volume Corpuscular Meacutedio (VCM) foram realizados conforme o meacutetodo de
Wintrobe A determinaccedilatildeo da Proteiacutena Plasmaacutetica Total (PPT) foi realizada pelo meacutetodo
refratomeacutetrico utilizando-se refratocircmetro manual (ATAGO Japan) previamente calibrado
(Garcia-Navarro e Pachaly 1994 Benez 2004)
Extraccedilatildeo de DNA genocircmico e amplificaccedilatildeo dos fragmentos de genes
Para a extraccedilatildeo do DNA genocircmico as amostras de swabs cloacais foram mantidas
congeladas ateacute o seu processamento (7 a 90 dias) Para extraccedilatildeo de DNA total presente nos
swabs cloacais utilizou-se a teacutecnica de Abratildeo et al (2005) Aos tubos de polipropileno foram
adicionados 200 microL de TES (Tris HCl 10mM pH 76 EDTA 1mM SDS 06) e 5microL de
proteinase K (10mgml) e incubados por 2h a 42degC Apoacutes a incubaccedilatildeo retirou-se o swab e
adicionou-se 42microL de NaCl saturado (6 M) agitando manualmente com vigor Centrifugou-se
1 Instant-Prov Marca NewProv Pinhais-PR
por 1 minuto a 15000 x g O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e adicionou-se 2
vezes o volume de etanol absoluto
Os tubos foram agitados e centrifugados por 1 minuto a 15000 x g O etanol absoluto
foi descartado e foi adicionado 1 mL de etanol 70ordmGL invertendo-se os tubos diversas vezes
para lavar o sedimento Os tubos foram centrifugados por 1 minuto a 15000 x g e o
sobrenadante desprezado Repetiu-se a lavagem com etanol 70ordmGL mais uma vez e apoacutes
desprezar o sobrenadante os tubos permaneceram abertos para evaporaccedilatildeo do etanol residual
Ao final da extraccedilatildeo o DNA foi resuspendido em 40 microL de TE (Tris HCl 10mM EDTA
01mM) O DNA extraiacutedo foi avaliado por eletroforese em gel de agarose a 1 em TAE
(Tris-Acetato EDTA) corado com Syber Gold (Invitrogen) e visualizado com transiluminador
sob luz ultravioleta
Realizou-se a semi-nested PCR empregando-se os oligonucleotiacutedeos descritos abaixo
em termociclador Bio-Rad Mycycler (Bio-Rad USA) Foram utilizados os oligonucleotiacutedeos
iniciadores para o gene da proteiacutena principal da membrana externa clamidial (ompA) segundo
Raso et al (2006) Para a primeira reaccedilatildeo utilizou-se os oligonucleotiacutedeos A
(5rsquoCAGGATATCTTGTCTGGCTTTAA3rsquo) e B (5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo)
amplificando um produto estimado em 260 pares de base (pb) Na segunda reaccedilatildeo utilizou-se
os oligonucleotiacutedeos C (5rsquoTTAGAGGTGAGTATGAAAAAACTC3rsquo) e B
(5rsquoGCAAGGATCGCAAGGATC3rsquo) amplificando um fragmento estimado em 165 pb que
compreende um segmento da regiatildeo 5acute natildeo traduzida e parte da regiatildeo codificante do gene
ompA
A primeira reaccedilatildeo foi realizada em volume de 50 microL contendo 100 mM Tris-HCL pH
85 500 mM KCL 15 mM de MgCl2 250 microM de dNTP 25 U de Taq DNA polimerase
(Cenbiot) 100 ng do oligonucleotiacutedeo A e B 2 microL de DNA molde e aacutegua Milli-Q esteacuteril A
segunda reaccedilatildeo foi similar agrave primeira utilizando como DNA molde 05 microL da primeira
amplificaccedilatildeo As condiccedilotildees das reaccedilotildees foram 1 ciclo a 94degC 30 ciclos a 94degC por 30
segundos 64degC por 30 segundos e 72degC por 20 segundos e uma extensatildeo final a 72degC por 7
minutos
Como controles positivo e negativo da PCR utilizou-se DNA de cultura de
Chlamydophila spp e aacutegua Milli-Q esteacuteril substituindo o DNA molde respectivamente Os
produtos da amplificaccedilatildeo foram analisados por eletroforese em gel de agarose a 2 em TAE
corados com Syber Gold (Invitrogen) e visualizados com transiluminador sob luz ultravioleta
As amostras que apresentaram produto de aproximadamente 165 pb na segunda reaccedilatildeo da
semi-nested PCR foram consideradas positivas
A prevalecircncia foi calculada segundo Bush et al (1997) em que o resultado eacute obtido
calculando-se o nuacutemero de animais positivos sobre o nuacutemero total de animais examinados
sendo o valor expresso em porcentagem
Clonagem e sequumlenciamento dos fragmentos de genes
Realizou-se clonagem e posteriormente o sequumlenciamento para confirmar se o
resultado da amplificaccedilatildeo na PCR era devido agrave existecircncia de material geneacutetico de
Chlamydophila spp nas aves estudadas
Os fragmentos gecircnicos amplificados por PCR de trecircs psitaciacutedeos sendo duas araras-
canindeacutes e um papagaio-verdadeiro foram clonados em plasmiacutedeo pGEM-T Easy (Promega)
segundo as recomendaccedilotildees do fabricante Como ceacutelula hospedeira utilizou-se Escherichia
coli cepa TOP10 A seleccedilatildeo dos clones contendo inserto de interesse foi feita por PCR de
colocircnia usando-se os oligonucleotiacutedeos B e C
Apoacutes purificaccedilatildeo dos plasmiacutedeos recombinantes usando kit Wizard Minipreps
(Promega) realizou-se sequumlenciamento dos fragmentos clonados em ambas as direccedilotildees As
amostras de DNA molde (30 a 45 ng) foram marcadas com 32 pmol dos oligonucleotiacutedeos
T7 ou M13 reverso e 2 microL de reagente BigDye Terminator v31 Cycle Sequencing RR-100
(Applied Biosystems) em um volume final de 10 microL
As reaccedilotildees foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 (Applied
Biosystems) As amostras foram precipitadas com isopropanol e desnaturadas com formamida
Hi-di (Applied Biosystems) A eletroforese capilar foi realizada em sequumlenciador automaacutetico
ABI 3700 (Applied Biosystems) Os dados das sequumlecircncias foram coletados com programa
Data Collection v 101 (Applied Biosystems) A qualidade das sequumlecircncias foi avaliada pelo
programa Sequencer Scanner 10 (Applied Biosystems)
As sequumlecircncias consensos passaram por alinhamento e os intervalos dos fragmentos
que alinharam foram submetidas ao Blastn (para sequumlecircncias de nucleotiacutedeos) efetuando-se agrave
busca por homologia dos genes (httpwwwncbinlmnihgovblastBlastcgi)
Anaacutelise estatiacutestica
Para a anaacutelise estatiacutestica os animais foram divididos em dois grupos positivos e
negativos para clamidiose Para cada grupo calculou-se a meacutedia e o desvio padratildeo de cada
variaacutevel estudada As variaacuteveis foram submetidas ao teste de normalidade de Shapiro-Wilk
recomendado para 2 lt n lt 51 Quando as variaacuteveis apresentaram distribuiccedilatildeo normal
comparou-se as meacutedias atraveacutes do teste t de Student Para as variaacuteveis que natildeo apresentaram
distribuiccedilatildeo normal utilizou-se o teste de aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-
pb
2652
800
350
50
Whitney Niacutevel de significacircncia adotado p lt 005 Executou-se as anaacutelises estatiacutesticas no
programa Bioestat (Zar 1999 Ayres et al 2005)
Resultados e Discussatildeo
Os animais considerados positivos para Chlamydophila sp apresentaram produto
estimado de 165 pb no gel de agarose da segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR observado na
Figura 1 A prevalecircncia de clamidiose diagnosticada pela teacutecnica de PCR em araras da
espeacutecie A ararauna mantidas em cativeiro no CRASMS foi de 5556 (1527) no periacuteodo
estudado (Figura 2) Prevalecircncias maiores estatildeo descritas na literatura para animais do mesmo
gecircnero no entanto provas soroloacutegicas foram utilizadas como teste diagnoacutestico para obtenccedilatildeo
de tais dados (Harkinezhad et al 2007) Ainda utilizando-se de provas soroloacutegicas Herrera et
al (2001) encontraram prevalecircncia de 1239 para a espeacutecie de A macao mantida em
cativeiro na Costa Rica
Sabe-se que provas soroloacutegicas podem ter baixa especificidade e falsos negativos
podem ocorrer em aves com infecccedilatildeo aguda quando a coleta de amostras ocorre antes da
soroconversatildeo (Nasphv 2004) entretanto natildeo estatildeo disponiacuteveis na literatura pesquisas para
clamidiose em A ararauna que utilizassem nos diagnoacutesticos meacutetodos moleculares
dificultando assim a comparaccedilatildeo dos dados
Figura 1 Gel de agarose a 2 corado com Syber Gold demonstrando a segunda reaccedilatildeo da semi-nested PCR para Chlamydophila sp com 165 pb Colunas M marcador de pares de base (50pb DNA Ladder Invitrogen) C- controle negativo C+ controle positivo 1 Ara anilha 006 2 Ara anilha 221 3 Ara anilha 335 4 Ara anilha 376 5 Ara anilha 379 6 Amazona anilha 003 7 Amazona anilha 004 8 Amazona anilha 468 9 Amazona anilha 1653 10 Amazona anilha 2002
165 pb
Em um estudo de Raso et al (2006) relataram 267 de prevalecircncia de clamidiose em
araras da espeacutecie Anodorhynchus hyacinthinus (arara-azul-grande) tambeacutem se utilizando da
teacutecnica de PCR No entanto neste estudo aleacutem da utilizaccedilatildeo de animais de outra espeacutecie os
animais avaliados eram filhotes de vida-livre
A prevalecircncia de clamidiose para a espeacutecie A aestiva a partir da teacutecnica de PCR foi
de 3542 (1748) na espeacutecie A aestiva da presente populaccedilatildeo amostral (Figura 2) Raso et
al (2002) evidenciaram a eliminaccedilatildeo de C psittaci em 358 dos swabs cloacais de
papagaios-verdadeiros de cativeiro a partir da imunofluorescecircncia direta Foram relatadas
63 de prevalecircncia de psitacose em filhotes de papagaios-verdadeiros de vida livre nos testes
moleculares (Raso et al 2006) e Harkinezhad et al (2007) descreveram 25 em papagaios-
africano-cinzentos de cativeiro
Apesar dos diferentes meacutetodos diagnoacutesticos o que dificulta a comparaccedilatildeo os
resultados obtidos satildeo similares aos de Raso et al (2002) Entretanto ao comparar ao uacutenico
dado de literatura que utiliza a mesma metodologia (mesma espeacutecie meacutetodo diagnoacutestico e
regiatildeo geograacutefica) a prevalecircncia encontrada foi maior
5556
4444
3542
6458
000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
positivos negativos positivos negativos
Ara ararauna Amazona aestiva
Figura 2 Percentual de psitaciacutedeos positivos e negativos para Chlamydophila sp submetidos agrave pesquisa molecular no periacuteodo de maio a setembro de 2008 oriundos do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Sareyyupoglu et al (2007) descreveram que as aves que atuam como portadoras de
psitacose podem ter periacuteodos de latecircncia e que em situaccedilotildees de estresse podem eliminar
grande quantidade do patoacutegeno Houve relatos de que menor prevalecircncia eacute encontrada em
animais de vida livre (Raso et al 2004) pois nestes casos fatores prejudiciais agrave sauacutede das aves
(como estresse de cativeiro alta densidade populacional nos recintos por exemplo) natildeo
estariam presentes Este desequiliacutebrio que o cativeiro impotildee pode ser a explicaccedilatildeo para as
diferentes prevalecircncias
Os resultados do sequumlenciamento estatildeo descritos na tabela 2 Pode-se afirmar que os
fragmentos visualizados na PCR provinham da amplificaccedilatildeo do gene ompA de
Chlamydophila sp realizada a partir das amostras de swabs cloacais dos psitaciacutedeos em
reabilitaccedilatildeo O tamanho reduzido do fragmento somado agrave alta homologia no gene ompA entre
C felis e C psittaci foram fatores determinantes para natildeo se objetivar a caracterizaccedilatildeo
molecular das amostras clonadas
Tabela 2 Avaliaccedilatildeo das sequumlecircncias de DNA dos fragmentos gecircnicos de ompA de Chlamydophila sp submetidos aos algoritmos Blastn
Animal Nordm acesso Genbank (best hits)
Espeacutecie Escore (bits)
e-value Identidade
() Gaps
AB4689561 Ara ararauna 006 EU8560371
C psittaci 194 (214) 7x10-47 98 0112
AB4689561 Amazona aestiva 1653 EU8560371
C psittaci 176 (194) 2x10-41 94 0112
Amazona aestiva 1806
AP0068611 AF2692581
C felis 178 (196) 5x10-42 95 0111
Durante o exame cliacutenico e coleta de amostras nenhum dos psitaciacutedeos apresentou
alteraccedilotildees respiratoacuterias ou oculares (secreccedilotildees anormais) que indicassem a presenccedila de
clamidiose jaacute que estes sintomas satildeo os mais relatados por outros pesquisadores (Suwa et al
1990 Raso et al 2004 Van Loock et al 2005)
Ao exame cliacutenico 2222 (627) das araras apresentavam diarreacuteia esbranquiccedilada
apatia anorexia alteraccedilatildeo no empenamento (com queda de penas) e musculatura peitoral
reduzida (Anexo 4) destes animais cinco (1852) morreram de um a seis dias apoacutes a coleta
de amostras Todas as araras observadas com as alteraccedilotildees descritas acima foram positivas
para Chlamydophila sp
A maioria dos papagaios no exame cliacutenico (9375) apresentou bom estado sanitaacuterio
(4548) caracterizando-se por condiccedilotildees normais da musculatura peitoral do empenamento e
das mucosas Dois animais possuiacuteam problemas no empenamento sendo que um destes foi
positivo para clamidiose Um papagaio estava obeso sendo tambeacutem positivo entretanto
apresentava-se ativo com bom empenamento e coloraccedilatildeo normal das mucosas
As variaacuteveis estudadas e os resultados estatiacutesticos nas aves amostradas estatildeo
apresentados na Tabela 3 Avaliando o peso corporal das A ararauna observou-se diferenccedila
estatiacutestica entre as meacutedias (p lt 001) no qual o grupo dos animais positivos (88177 14080)
apresentou meacutedia menor do que o grupo dos animais negativos (105138 plusmn 12176) Este fato
pode ser explicado pela diarreacuteia desidrataccedilatildeo e anorexia que a doenccedila pode ocasionar
Entretanto para A aestiva as meacutedias do peso corpoacutereo entre os animais positivos (40184 plusmn
6242) e negativos (38447 plusmn 5381) natildeo foram diferentes estatisticamente natildeo sendo
portanto detectado menor peso em papagaios com psitacose
Tabela 3 Valores meacutedios das variaacuteveis estudadas nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva submetidas agrave pesquisa molecular para Chlamydophila sp oriundas do Centro de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
Ara ararauna Amazona aestiva Variaacuteveis Estudadas Positivos
(n=15) Negativos
(n=12) Valor t ou Z
Positivos (n=17)
Negativos (n=31)
Valor t ou Z
Eritroacutecitos (x1012L)
171 plusmn 119 165 plusmn 074 027 159 plusmn 071 171 plusmn 069 058
Volume Globular (LL)
040 plusmn 007 048 plusmn 007 330 040 plusmn 010 040 plusmn 009 008
VCM (fL) 30293 plusmn 13801 34942 plusmn 14950 084 29055 plusmn 12720 27661 plusmn 14764 033
PPT (gL) 499 plusmn 069 517 plusmn 051 073 586 plusmn 046 583 plusmn 056 -017
PP (gL) 474 plusmn 068 472 plusmn 065 -009 535 plusmn 050 534 plusmn 056 -011
Leucoacutecitos totais (x109L)
646 plusmn 204 809 plusmn 418 083 422 plusmn 166 450 plusmn 206 003
Heteroacutefilos (x109L)
513 plusmn 183 621 plusmn 455 015 275 plusmn 114 296 plusmn 150 018
Eosinoacutefilos (x109L)
006 plusmn 007 005 plusmn 011 088 005 plusmn 008 004 plusmn 006 005
Basoacutefilos (x109L)
003 plusmn 005 002 plusmn 006 039
005 plusmn 005 004 plusmn 004 091
Monoacutecitos (x109L)
029 plusmn 023 049 plusmn 057 061
045 plusmn 032 048 plusmn 051 019
Linfoacutecitos (x109L)
095 plusmn 040 132 plusmn 075 152 092 plusmn 057 098 plusmn 058 046
Peso corpoacutereo (g)
88177 plusmn 14080 105138 plusmn
12176 285 40184 plusmn 6242 38447 plusmn 5381 -101
Valores apresentados como meacutedia plusmn desvio-padratildeo n = nuacutemero total de indiviacuteduos em cada grupo Comparaccedilatildeo realizada atraveacutes do teste t de Student e da aproximaccedilatildeo normal Z do teste U de Mann-Whitney Valor significativo em p lt 005
A meacutedia de peso destas aves estaacute de acordo com os dados de Deem et al (2005) para
aves em cativeiro da Boliacutevia (4226 plusmn 5468 g) Em um surto no Brasil Raso et al (2004)
descreveram anorexia diarreacuteia verde-amarelada e baixo peso em papagaios-verdadeiros
Suwa et al (1990) relataram que os paacutessaros podem apresentar inapetecircncia emaciaccedilatildeo e
diarreacuteia esverdeada Portanto baixo peso em aves com clamidiose eacute uma alteraccedilatildeo
frequumlentemente encontrada e na espeacutecie A araruana esta alteraccedilatildeo estatisticamente evidente
Na comparaccedilatildeo das meacutedias dos valores de VG entre o grupo das araras positivas (040
007) e negativas (048
007) para clamidiose (Tabela 3) houve diferenccedila estatisticamente
relevante entre os resultados Gerlach (1994) relata diminuiccedilatildeo do VG em ateacute 30 nas aves
com psitacose O resultado obtido neste estudo foi menor do que 30
Devido agrave diarreacuteia que algumas araras apresentaram esperava-se um possiacutevel aumento
do VG ocasionado pela desidrataccedilatildeo entretanto ocorreu uma diminuiccedilatildeo deste paracircmetro que
pode estar associado ao sequumlestro das hemaacutecias pelo baccedilo Uma outra possibilidade pode estar
correlacionada com provaacutevel aplasia medular decorrente de enfermidade crocircnica Com uma
amostra populacional de 27 araras-canindeacutes natildeo se pode comprovar outras alteraccedilotildees
sanguumliacuteneas estatisticamente significativas que pudessem ser ocasionadas pela doenccedila Talvez
com um nuacutemero amostral superior as meacutedias possam apresentar uma acentuada diferenccedila
para um iacutendice de confianccedila de 95
Foram encontrados poucos dados de literatura sobre hematologia em animais com
clamidiose tornando-se difiacutecil a comparaccedilatildeo dos paracircmetros Alguns autores relataram que a
psitacose pode acarretar heterofilia (Mitchell e Johns 2008) ou basofilia (Benez 2004) Nos
resultados obtidos natildeo foi possiacutevel comprovar estas alteraccedilotildees
O uacutenico hemoparasito encontrado no esfregaccedilo sanguumliacuteneo foi Haemoproteus sp em
uma arara que foi negativa para a psitacose No presente trabalho ao se comparar os valores
da contagem total de leucoacutecitos entre os grupos de animais positivos (660 plusmn 26) e negativos
(823 plusmn 453) natildeo houve diferenccedila estatiacutestica
Para a espeacutecie A aestiva natildeo foram observadas diferenccedilas na anaacutelise estatiacutestica entre
as meacutedias das variaacuteveis estudadas entre os grupos de animais positivos (n=17) e negativos
(n=31) para Chlamydophila sp (Tabela 3) Apesar dos recintos das araras e papagaios serem
proacuteximos (aproximadamente 15 metros) e com livre acesso para insetos (recintos telados) natildeo
foram observados hemoparasitos nos esfregaccedilos sanguumliacuteneos da espeacutecie A aestiva
Mitchell e Johns (2008) afirmaram que espeacutecies de papagaios do novo mundo e
canaacuterios apresentam normalmente grande nuacutemeros de linfoacutecitos podendo chegar a 70 dos
leucoacutecitos Os resultados deste estudo e natildeo confirmaram esta afirmaccedilatildeo apresentando o
heteroacutefilo como o leucoacutecito mais predominante
Analisando a alta prevalecircncia de clamidiose na espeacutecie A ararauna e os achados
cliacutenicos poderia haver a possibilidade de que as araras apresentavam a doenccedila aguda
sintomaacutetica com maior prevalecircncia e tambeacutem maiores alteraccedilotildees cliacutenico-laboratoriais durante
o periacuteodo do estudo
Os papagaios apresentaram menor prevalecircncia quando comparados agraves araras mas a
doenccedila permaneceu assintomaacutetica com a relaccedilatildeo parasito-hospedeiro em aparente equiliacutebrio
natildeo demonstrando alteraccedilotildees hematoloacutegicas relevantes
Confirmou-se a enfermidade nas duas espeacutecies de psitaciacutedeos do CRASMS mas
provavelmente no periacuteodo da amostragem as araras apresentaram a doenccedila sintomaacutetica e os
papagaios permaneceram eliminando a bacteacuteria atraveacutes da cloaca entretanto sem demonstrar
sinais cliacutenicos ou hematoloacutegicos da mesma supostamente revelando-se portadores
assintomaacuteticos Apesar disso mais estudos com um nuacutemero amostral maior e com repeticcedilotildees
deveriam ser realizados para a confirmaccedilatildeo dessa possibilidade
Natildeo haacute dados suficientes para afirmar se esta prevalecircncia de clamidiose nos
psitaciacutedeos sofre uma influecircncia sazonal dependendo do ciclo reprodutivo do clima da
densidade populacional dos recintos ou outras variaacuteveis Isto talvez pudesse ser comprovado
se as coletas de amostras bioloacutegicas fossem realizadas em diferentes periacuteodos do ano
Na presente amostra de 75 psitaciacutedeos foi observada alteraccedilatildeo em apenas um
paracircmetro hematoloacutegico A realizaccedilatildeo de levantamentos em uma amostra maior de aves se faz
necessaacuteria para concluir se a resposta sanguumliacutenea agrave enfermidade eacute ou natildeo observaacutevel no
hemograma
Conclusatildeo
A presenccedila de Chlamydophila sp nas espeacutecies Ara ararauna e Amazona aestiva
indicam a existecircncia de portadores assintomaacuteticos e sintomaacuteticos para a clamidiose no Centro
de Reabilitaccedilatildeo de Animais Silvestres de Campo Grande Mato Grosso do Sul
REFEREcircNCIAS
Abratildeo MG Billerbeck AEC Nishi MY Marui S Mendonccedila BB 2005 Padronizaccedilatildeo da
teacutecnica de extraccedilatildeo de DNA de ceacutelulas de mucosa oral com NaCl Aplicaccedilatildeo no estudo do
gene PROP1 Arquivo Brasileiro de Endocrinologia e Metabologia v 49 n 6 dez
Ayres M Ayres Junior M Ayres DL Santos AAS 2004 BioEstat aplicaccedilotildees estatiacutesticas
nas aacutereas das Ciecircncias Biomeacutedicas 4ordm ed Imprensa Oficial do Estado do Paraacute Sociedade
Civil Mamirauaacute Beleacutem 324p
Benez SM 2004 Hematologia e bioquiacutemica sanguiacutenea das aves In Aves criaccedilatildeo cliacutenica
teoria praacutetica silvestres ornamentais avinhados 4 ed Ribeiratildeo Preto Tecmedd p 323-
332
Bush AO Lafferty KD Lotz JM Shostak AW 1997 Parasitology meets ecology on its
own terms Margolis et al 1997 Journal of Parasitology v 83 p575-583
Deem SL Noss AJ Cueacutellar RL Karesh WB 2005 Health evaluation of free-ranging and
captive blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) in the Gran Chaco Boliacutevia Journal
Zoo and Wildlife Medicine v 36 n 4 p 598ndash605
Dovc A Slavec B Lindtner-knific R Zorman-rojs O Racnik J Golja J Vlahovicand K
2007 Study of Chlamydophila psittaci outbreak in budgerigars Bulletin of the Veterinary
Institute in Pulawy v 51 p 343-346
Garcia-Navarro CE K Pachaly JR 1994 Manual de hematologia veterinaacuteria 1ed Satildeo
Paulo Livraria Varela Ltda p 169
Gerlach H 1994 Chlamydia In Ritchie BW Harrison GJ Harrison LR (Ed) Avian
medicine principles and application Lake Worth FL Wingers Publishing p 984ndash96 1994
Harkinezhad T Verminnen K Van Droogenbroeck C Vanrompay D 2007 Chlamydophila
psittaci genotype EB transmission from african grey parrots to humans Journal Medical
Microbiology v 56 p 1097ndash1100
Herrera I Khan MSR Kaleta EF Ller HM Dolz G Neumann U 2001 Serological
status for Chlamydophila psittaci newcastle disease virus avian polyoma virus and pacheco
disease virus in scarlet macaws (a) kept in captivity in Costa Rica Journal of Veterinary
Medicine B 48 721-726
Jain NC 1993 Essentials of veterinary hematology Philadelphia Lea e Febiger
Lamberski N 2003 Psittaciformes (Parrots Macaws Lories) In Fowler ME Miller RE
Zoo and Wild Animal Medicine 5 ed Missouri Saunders cap 22 p 187-210
Mitchell EB Johns J 2008 Avian hematology and related disorders Veterinary Clinics
Exotic Animal Practice v 11 p 501ndash522
Nasphv 2004 National Association of State Public Health Veterinarians Compendium of
measures to control Chlamydophila psittaci (formerly Chlamydia psittaci) infection among
humans (psittacosis) and pet birds AVMA Online Disponiacutevel em lthttpwwwavmaorggt
Acesso em 05 dez 2008
Natt MP Herrick GA 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leucocytes
of the chicken Poultry Science v 31 p 735-738
Raso TF Berchieri AJr Pinto AA 2002 Evidence of Chlamydophila psittaci infection in
captive amazon parrots in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 33 p 118ndash121
Raso TF Godoy SN Milanelo L Souza CAI Matuschima ER Araujo Jr JPA Pinto
AA 2004 An outbreak of chlamydiosis in captive blue-fronted Amazon parrots (Amazona
aestiva) in Brazil Journal Zoo and Wildlife Medicine v 35 n 1 p 94ndash96
Raso TF Seixas GHF Guedes NMR Pinto AA 2006 Chlamydophila psittaci in free-
living blue-fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and hyacinth macaws (Anodorhynchus
hyacinthinus) in the Pantanal of Mato Grosso do Sul Brazil Journal of Veterinary
Microbiology v 117 p 235ndash241
Sareyyupoglu B Cantekin Z Bas B 2007 Chlamydophila psittaci DNA detection in the
faeces of cage birds Journal of Zoonoses Public Health v 54 p 237ndash242
Schmidt EMS Locateli-Ditrich R Santin E Paulilo AC 2007 Patologia cliacutenica em aves
de produccedilatildeo ndash Uma ferramenta para monitorar a sanidade aviacutecola ndash Revisatildeo Archives of
Veterinary Science v 12 n 3 p 9-20
Suwa T Touchi A Hirai K Itakura C 1990 Pathological studies on chlamydiosis in
parakeets (Psittacula krameri manillensis) Avian Pathology v 192 p 355-369
Van Loock M Verminnen K Messmer TO Volckaert G Goddeeris BM Vanrompay D
2005 Use of a nested PCR-enzyme immunoassay with an internal control to detect
Chlamydophila psittaci in turkeys BMC Infectious Diseases v 5 n 76
Zar J H 1999 Bioestatistical analysis 4 ed Prentice-Hall Upper Saddle River New Jersey
p 663
APEcircNDICE
Anexo 1 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renovaacuteveis
Anexo 2 Licenccedila ambiental cedida pelo Instituto de Meio Ambiente de Mato Grosso do Sul
Anexo 3 Planilha de contenccedilatildeo e avaliaccedilatildeo cliacutenica dos psitaciacutedeos
Planilha de Contenccedilatildeo Psitaciacutedeos Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta ______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Recinto ___________________________ Ndeg de animais no mesmo recinto _____________ Data_________ Hora ____ Espeacutecie ______________________________________ Anilha________________________________ Peso__________ Idade ( )F ( )J ( )A Coleta de sangue ( )S ( )N Coleta swab cloacal ( )S ( )N Coleta de fezes ( )S ( )N Coleta de ectoparasitas ( )S ( )N Local da coleta _______________________ Recaptura ( )S ( )N Estado Cliacutenico Geral ( ) Ruim ( ) Regular ( ) Bom Particularidades ____________________________________________________________________________ Observaccedilotildees _______________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Anexo 4 Arara-canindeacute positiva para clamidiose proveniente do CRASMS do municiacutepio de Campo Grande Mato Grosso do Sul
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