JOURNAL READING

Moxifloxacin and Cholesterol Combined

Treatment of Pneumococcal Keratitis

diajukan oleh

Irfani Kurniawan

01.208.5683

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS ISLAM SULTAN AGUNG

SEMARANG

2012

Pengobatan Kombinasi Moksifloksasin dan Kolesterol Pada

Keratitis Pneumokokus

Melissa E. Sanders, Nathan A. Tullos, Sidney D. Taylor, Erin W. Norcross, Lauren B. Raja,

Yesaya Tolo, dan Mary E. MARQUART

Departemen Mikrobiologi, University of Mississippi Medical Center, Jackson, Mississippi,

Amerika Serikat

ABSTRAK

Tujuan: Membandingkan efektivitas pengobatan keratitis pneumokokus menggunakan

kolesterol, moksifloksasin, atau campuran dari keduanya (moksifloksasin / kolesterol).

Bahan dan Metode: Kelinci Putih New Zealand diinjeksi intrastromal dengan 106

colonyforming unit (CFU) strain keratitis klinis dari Streptococcus pneumoniae. Mata

diperiksa sebelum dan sesudah pengobatan topikal tetes setiap 2 jam dari jam ke 25 sampai

47 jam pasca-infeksi (PI). Kornea diambil untuk menghitung jumlah CFU bakteri, dan

aktivitas myeloperoxidase (MPO) diukur setelah 48 jam PI. Mata diekstraksi untuk melihat

gambaran histologi. Ditentukan Minimal inhibitory concentrations (MICs)nya untuk masing-

masing senyawa.

Hasil: Mata yang diobati dengan moksifloksasin / kolesterol memiliki nilai Slit lamp

examination ( SLE ) yang signifikan dengan rata – rata lebih rendah daripada mata yang

diobati dengan phosfat-buffered saline (PBS), moksifloksasin saja, atau kolesterol saja (P ≤

0,02). Log10 CFU ditemukan secara signifikan lebih rendah pada kornea dengan

moksifloksasin / kolesterol dan moksifloksasin saja dibandingkan dengan kornea mata yang

diobati dengan PBS atau kolesterol saja (P <0,01). Pada 48 jam PI, secara signifikan aktivitas

MPO secara kuantitatif terlihat lebih rendah pada mata yang diobati dengan moksifloksasin /

kolesterol dibandingkan dengan mata yang diobati dengan kolesterol atau moksifloksasin saja

(P ≤ 0,046). Mata yang diobati dengan moksifloksasin / kolesterol memiliki lebih sedikit sel-

sel imun dan kerusakan pada korneanya daripada mata dari semua kelompok perlakuan

lainnya. MIC untuk pengobatan dengan menggunakan moksifloksasin saja adalah 0,125 mg /

mL dan pengobatan dengan kolesterol saja tidak mampu menghambat pertumbuhan di salah

satu konsentrasi yang diujikan. MIC untuk moksifloksasin yang dikombinasikan dengan

kolesterol 1% adalah 0,0625 mg / mL.

Kesimpulan: Pengobatan dengan kombinasi moksifloksasin dan kolesterol secara signifikan

menurunkan keparahan infeksi yang disebabkan oleh keratitis pneumokokus dibandingkan

dengan pengobatan dengan moksifloksasin saja, kolesterol saja, atau PBS. Kemampuan

pengobatan campuran ini dalam membunuh bakteri di kornea tidak seperti pengobatan

dengan PBS atau kolesterol saja. Menggunakan kolesterol dengan moksifloksasin sebagai

pengobatan untuk keratitis bakteri dapat membantu menurunkan keparahan klinis dari

infeksi.

Kata Kunci: Kolesterol, Keratitis, Moksifloksasin, Streptococcus pneumoniae

PENDAHULUAN

Bakteri coccus Gram-positif bertanggung jawab untuk sekitar 67% dari kasus keratitis

bakteri pada pemakaian lensa kontak.1 Streptococcus pneumoniae merupakan salah satu

bakteri grampositive yang biasa diisolasi dari kornea pada infeksi keratitis bakteri.2-6

Pengobatan dari keratitis bakteri adalah penting untuk hasil penglihatan. Monoterapi dengan

fluoroquinolone, seperti moksifloksasin, umumnya digunakan untuk mengobati bakteri

keratitis.7 Bakteri gram positif dan gram-negatif keduanya telah terbukti secara konsisten

memiliki resistensi yang lebih rendah untuk moksifloksasin daripada kebanyakan obat

lainnya.8

Pneumolysin, sebuah hemolisin diproduksi oleh S. pneumoniae, merupakan faktor

virulensi utama di antara infeksi okular dan non-okular infeksi. Johnson et al.9 mengamati

bahwa mutan pneumolysin-deficient dari S. Pneumoniae menyebabkan infeksi keratitis yang

kurang parah daripada strain induk. Racun ini termasuk golongan kolesterol-dependent

cytolysins (CDC) yang membentuk pori-pori di membran sel inang.10 Telah lama diketahui

bahwa pengobatan dari pneumolysin dengan kolesterol eksogen menghambat aktivitas racun

ini.11 Sebuah studi sebelumnya dilaporkan bahwa pengobatan menggunakan kolesterol pada

keratitis yang disebabkan oleh WU2, tipe 3 strain S. pneumoniae awalnya diperoleh dari

bagian dari manusia yang di isolasi pada tikus,12 mengakibatkan keparahan infeksi yang lebih

rendah dibandingkan dengan pengobatan dengan fosfat-buffered saline (PBS) .13 Pengobatan

dengan kolesterol menurun jumlah bakteri in vivo (Infeksi kornea) dan in vitro (uji Minimal

inhibitory concentrations [MIC]). Laporan sebelumnya tentang kemampuan kolesterol

eksogen untuk menghambat pneumolysin terutama dilakukan secara in vitro, seperti di

monosit14 dan limfosit manusia, sel neuroblastoma 15, 16,17 fibroblast, dan astrocytes.17 Satu

studi in vivo dari catatan meneliti kemampuan berbagai CDC yang dimurnikan untuk

membunuh tikus.18 Para penulis menunjukkan bahwa pneumolysin dan CDC yang lainnya

diuji mampu membunuh tikus dan kematian itu berbanding lurus dengan aktivitas hemolitik

setiap toksin. Penambahan kolesterol eksogen ke salah satu CDC (listeriolysin O) sepenuhnya

merubah kemampuan racun untuk membunuh tikus. Meskipun pneumolysin tidak secara

khusus diuji dalam percobaan penghambatan, hasil menunjukkan bahwa sejenis

penghambatan oleh kolesterol akan diamati untuk setiap CDCs.18 Sampai saat ini, belum ada

penelitian yang melaporkan khasiat kombinasi antibiotik / kolesterol dalam pengobatan

keratitis pneumokokus disebabkan oleh strain okular klinis. Oleh karena itu, percobaan yang

dijelaskan di sini bertujuan untuk menentukan apakah campuran moksifloksasin dan

kolesterol (moksifloksasin / kolesterol) akan lebih efektif dalam pengobatan keratitis

pneumokokus dibandingkan dengan pengobatan menggunakan kolesterol atau moksifloksasin

saja.

METODE

Pertumbuhan Bakteri

S. pneumoniae K1263, strain keratitis klinis jenis 35f, yang disediakan oleh Regis Kowalski

(Charles T. Campbell Eye Mikrobiologi Lab, Pittsburgh, Pennsylvania, USA). Koloni bakteri

diisolasi pada agar-agar darah domba 5% dan diinkubasi selama satu malam di 37 ° C dan

5% CO2. Todd Hewitt broth yang mengandung 0,5% ekstrak ragi (THY) diinokulasi dengan

satu koloni dan diinkubasi pada 37 ° C dalam CO2 5% selama satu malam. Selama satu

malam kultur diinokulasikan ke THY segar pada 1:100 pengenceran. Bakteri yang

berkembang menjadi optical density (OD) pada A600 yang berhubungan dengan sekitar 108

unit pembentuk koloni (CFU) per ml. Akurasi CFU bakteri diverifikasi oleh jumlah koloni

dari pengenceran.

Infeksi

Kelinci putih new zealand (Harlan Sprague Dawley, Inc, Oxford, Michigan, USA) yang

digunakan dalam studi ini dan dipelihara oleh Association for Research in Vision and

Ophthalmology Statement untuk Penggunaan Hewan di Ophthalmic and Vision Research.

Setiap kelinci dibius melalui injeksi intramuskular campuran hidroklorida ketamin (100 mg /

ml, Butler Company, Columbus, Ohio, USA) dan xylazine (100 mg / ml, Butler Company).

Hidroklorida Proparacaine tetes diberikan untuk masing-masing mata sebelum injeksi. Kultur

bakteri diencerkan sehingga setiap kornea terinfeksi dengan sekitar 106 CFU dalam volume

10 ml. Jarum 30-gauge yang digunakan untuk menyuntik bakteri ke dalam stroma masing-

masing mata. Penggunaan hewan dalam penelitian ini memenuhi pedoman dan telah disetujui

oleh Institutional Animal Care and Use Committee of the University of Mississippi Medical

Center.

Slit Lamp Examiation (SLE)

SLE dilakukan sebelum dan setelah pengobatan. Tujuh Parameter yang digunakan untuk

menentukan tingkat keparahan Infeksi: injeksi, chemosis, iritis, fibrin, hypopyon, Infiltrat

kornea, dan inflamasi kornea.9 Setiap parameter diberi nilai dari 0 (tidak ada patogenesis)

sampai dengan 4 (patogenesis maksimal), menghasilkan skor total dengan nilai maksimum

sebesar 28. Setiap mata dinilai oleh dua pemeriksa yang tidak mengetahui sama sekali

tentang kelompok pengobatan dan dari dua nilai tersebut diambil nilai rata-rata.

Cara Pengobatan

Pengobatan dimulai pada 25 jam pasca-infeksi (PI). Kelinci dibagi secara acak menjadi

empat kelompok perlakuan oleh peneliti yang tidak terlibat dalam pemeriksaan dan penilaian.

Kelompok perlakuan steril PBS dicampur dengan PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1

Volume: Volume, "PBS"), PBS dicampur dengan 1% larut kolesterol (Sigma-Aldrich, St

Louis, Missouri, USA) dalam PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1; "kolesterol"),

moksifloksasin (Vigamox ®, 5 mg / ml, Alcon, Fort Worth, Texas, USA) dicampur dengan

PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1; "moksifloksasin"), dan moksifloksasin dicampur

dengan 1% kolesterol larut dalam PBS yang mengandung gliserol 20% (1:1; "Moksifloksasin

/ kolesterol"). Dua tetes diteteskan pada setiap mata setiap 2 jam untuk total 12 dosis (n = 16

mata untuk masing-masing kelompok perlakuan, Tabel 1).

Perhitungan CFU

Kelinci di eutanasia dengan overdosis intravena dari pentobarbital natrium (100 mg / kg,

Sigma-Aldrich) pada 24 jam PI (untuk kuantisasi baseline CFU per kornea) atau 48 jam PI

(setelah perlakuan dan pemeriksaan akhir). Kornea yang diambil, dihomogenkan, berurutan

diencerkan dalam PBS steril, dan ditaruh pada tiga plate agar darah. Plate diinkubasi selama

semalam pada suhu 37 ° C, dan kemudian jumlah koloni dihitung.

Myeloperoxidase (MPO) Activity Assay

Aktivitas MPO sel polimorfonuklear (PMN) di kornea yang terinfeksi ditentukan dengan

menggunakan uji kolorimetri seperti yang dijelaskan sebelumya.19 MPO murni (Sigma-

Aldrich) digunakan sebagai kontrol positif. Aktivitas MPO ini dinyatakan sebagai unit MPO.

Pengujian Minimal Inhibitory Concentration (MIC)

MICs kolesterol dalam PBS yang mengandung gliserol 20%, moksifloksasin, dan campuran

dari kolesterol 1% di dalam 20% PBS dengan moksifloksasin berurutan diencerkan terhadap

K1263 yang ditentukan menggunakan Metode macrodilution broth berdasarkan Clinical and

Laboratory Standards Institute.20 Setiap pengenceran di tempatkan dalam tiga plate,

diinkubasi, dan dihitung karena pengamatan kekeruhan sebelumnya tidak menentukan jumlah

kolesterol ketika digunakan dalam uji.13 MIC untuk setiap tes ditentukan untuk menjadi

konsentrasi yang terendah di mana tidak ada CFUs yang diamati, mempertimbangkan

pengenceran dua kali lipat akhir dari masing-masing antibiotik ketika suspensi bakteri

ditambahkan. Dua uji independen dilakukan dan menghasilkan hasil yang sama.

Histopatologi

Seluruh mata diambil pada 48 jam PI dan histopatologi dilakukan oleh Excalibur Patologi,

Inc (Moore, Oklahoma, USA) menggunakan hematoxylin dan pewarnaan eosin.

Statistika

Data dianalisis dengan menggunakan program Statistik Analisis System (SAS) untuk

komputer (Cary, North Carolina, USA). Skor SLE secara klinik dianalisis menggunakan non-

parametrik one-way analysis of variance. CFU bakteri dianalisis menggunakan General

Linear Models Procedure of Least Squares Means. Semua percobaan dilakukan dua kali,

menghasilkan hasil yang sejenis dan data dari dua percobaan tersebut digabungkan. Analisis

statistik dari data MPO dilakukan dengan menggunakan Student t-test. P <0,05 dianggap

signifikan.

HASIL

Kelinci Yang Terinfeksi Keratitis

Mata diperiksa sebelum perlakuan/pengobata untuk menunjukkan bahwa keparahan klinis

semua kelompok adalah sama. Dua puluh empat jam PI (pre-treatment), skor SLE sama

besarnya untuk kelompok pengobatan kolesterol, PBS, moksifloksasin dan moksifloksasin /

kolesterol (P ≥ 0,43, Tabel 2). Empat puluh delapan jam PI (post-treatment), mata diobati

dengan moksifloksasin / kolesterol memiliki skor signifikan lebih rendah dibandingkan rata-

rata SLE mata yang diobati dengan PBS, kolesterol, atau moksifloksasin saja (P ≤ 0.016).

Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam keparahan klinis antara salah satu kelompok

perlakuan lainnya (P ≥ 0,12, Tabel 2, Gambar 1).

Perhitungan CFU kornea

Mean log10 CFU ± standard error of the mean (SEM) dari S. pneumoniae ditemukan dari

kornea pada 24 jam PI (pra-perelakuan) adalah 6,64 ± 0,49 (Tabel 3). Empat puluh delapan

jam PI (pasca perelkuan), mata dengan perlakuan yang di beri moksifloksasin dan

moksifloksasin / kolesterol secara signifikan ditemukan nilai log10 CFU lebih rendah daripada

kornea yang diobati dengan PBS atau kolesterol saja (P <0,0001). Moksifloksasin dan

moksifloksasin / kolesterol sama-sama efisien dalam sterilisasi kornea (P = 1.00).

MPO Assay

Rata-rata unit MPO yang menunjukkan aktivitas PMN ditentukan dari pra- dan pasca-

pengobatan. Pengobatan Moksifloksasin / kolesterol efektif dalam mengurangi baseline MPO

unit (P = 0,006). Selain itu, kornea yang diobati dengan moksifloksasin / kolesterol secara

signifikan memiliki aktivitas MPO lebih rendah dibandingkan kornea diobati dengan

kolesterol saja atau moksifloksasin saja (P ≤ 0,046). Tidak ada perbedaan yang signifikan

yang diamati antara salah satu kelompok perlakuan dengan kelompok lainnya (P ≥ 0,35;

Tabel 4).

MICs

MIC untuk moksifloksasin saja adalah 0,125 mg / mL dan kolesterol saja tidak dapat

menghambat pertumbuhan di salah satu konsentrasi yang diuji. MIC untuk moksifloksasin

bila dikombinasikan dengan kolesterol 1% adalah 0,0625 mg / mL.

Histopatologi

Semua mata dikeluarkan secara keseluruhan, dibelah, dan diwarnai dengan hematoxylin dan

eosin. Lebih banyak didapatkan sel imun pada kornea mata yang diobati dengan PBS,

kolesterol saja, atau moksifloksasin saja dibandingkan dengan mata yang diobati dengan

campuran moksifloksasin / kolesterol (Gambar 2). Lokasi Injeksi telah diamati pada semua

perlakuan kelompok (Gambar 2, panah hitam).

PEMBAHASAN

Temuan saat ini menunjukkan bahwa terapi kombinasi dengan moksifloksasin dan

kolesterol larut memberikan efek yang berarti tidak hanya membunuh S. pneumoniae di

kornea, tetapi juga mengurangi keparahan klinis pneumokokus keratitis. Sebuah studi yang

diterbitkan sebelumnya oleh laboratorium ini menunjukkan bahwa pengobatan pneumokokus

keratitis yang disebabkan oleh WU2 (strain non-okular) dengan kolesterol saja secara

signifikan dapat menurunkan keparahan infeksi pneumokokus keratitis serta jumlah bakteri.13

Temuan dari penelitian ini berbeda dari penelitian sebelumnya yang mendapatkan hasil

pengobatan kolesterol saja sudah dapat meningkatkan nilai klinis atau secara signifikan

mengurangi jumlah bakteri. Beberapa kemungkinan bisa menjadi alasan untuk menjelaskan

perbedaan hasil yang didapat. Strain yang berbeda digunakan dalam dua studi tersebut, satu

dari strain non-okular dan studi yang lain menggunakan strain okular. Strain okular yang

digunakan dalam studi bisa lebih resisten terhadap pengobatan dengan kolesterol, yang

menekankan pentingnya menggunakan terapi kombinasi dengan antibiotik yang efektif.

Alasan lain untuk perbedaan dalam temuan antara penelitian sebelumnya dan penelitian ini

adalah perbedaan dalam dosis inokulum. Penelitian sebelumnya menggunakan inokulum

sebesar 105 CFU, sedangkan penelitian ini menggunakan inokulum sebesar 106 CFU.

Inokulum yang dimaksudkan untuk penelitian ini adalah 105 CFU dan kultur bakteri pada

densitas optik (OD) yang diperkirakan mengandung 105 CFU per 10 ml, namun kuantitas

inokulum dengan pengenceran menunjukkan bahwa inokulum yang sebenarnya adalah 106

CFU. Yang mendukung gagasan ini adalah bahwa bakteri sekitar 1 log10 unit adalah lebih

banyak bakteri yang ditemukan pada kornea yang diobati kolesterol 48 jam PI di penelitian

ini (3,77 ± 0,44) dibandingkan studi sebelumnya(2.64 ± 0.50).13 Temuan ini juga mendukung

pentingnya menggunakan terapi kombinasi dengan antibiotik (moksifloksasin) sehingga

bakteri dapat sepenuhnya dibunuh bukan hanya berkurang. Juga, pengobatan dengan

moksifloksasin / kolesterol secara signifikan menurunkan aktivitas MPO dibandingkan

dengan mata yang diobati dengan moksifloksasin atau kolesterol saja (Tabel 4) yang sesuai

dengan sedikit PMN terdeteksi oleh histologi (Gambar 2) dan secara signifikan lebih sedikit

log10 CFU yang ditemukan pada kornea, dibandingkan dengan mata yang diobati dengan PBS

atau kolesterol. MIC terhadap bakteri juga mendukung data. Secara in vitro bakteri tidak

rentan terhadap kolesterol, begitu juga pada pengamatan in vivo. Bakteri rentan pada

moksifloksasin dan moksifloksasin / kolesterol dalam vivo dan in vitro. Meskipun kolesterol

saja tidak menghambat pertumbuhan bakteri, kolesterol tampaknya memiliki efek sinergis

bila dicampur dengan moksifloksasin ditunjukkan dengan hasil MIC lebih rendah bila

dibandingkan dengan moksifloksasin sendiri. Untuk kolesterol, studi sebelumnya sendiri

memiliki MIC dari 1% dan menurunkan keparahan klinis keratitis yang disebabkan oleh

strain WU2.13 Untuk penelitian saat ini, kolesterol sendiri tidak memiliki MIC dan tidak lebih

rendah keparahan klinis dari isolat klinis yang digunakan untuk infeksi keratitis. Perbedaan

antara hasil dari dua studi mungkin karena perbedaan dalam dua strain yang digunakan.

Ketiga, jumlah aktivitas pneumolysin bisa kemungkinan besar terlibat dalam perbedaan

antara strain, seperti pneumolysin telah terbukti menjadi virulensi utama faktor dalam

keratitis9 pneumokokus dan kolesterol adalah substrat inang untuk pneumolysin.10 Uji

Hemolisis A dilakukan dalam penelitian ini menggunakan WU2 seperti telah dijelaskan

sebelumnya,21 dan ditentukan bahwa Aktivitas pneumolysin dari WU2 sedikit lebih rendah

(83% hemolisis) dibandingkan dengan strain klinis keratitis digunakan untuk penelitian ini

(89% hemolisis). Sebuah laporan baru-baru ini menunjukkan bahwa pneumolysin adalah

membran-terikat toksin, dan tergantung pada serotipe, pneumolysin dapat ditemukan

terutama di fraksi dinding sel atau protoplas fraksi S. pneumonia.22 Mungkin WU2 (strain 3

jenis) mengandung jumlah pneumolysin yang lebih tinggi dalam dinding sel dari K1263 (a

type 35f strain), yang akan memungkinkan pneumolysin menjadi lebih mudah diakses oleh

agen luar seperti eksogen menambahkan kolesterol.

Moksifloksasin umumnya digunakan untuk mengobati keratitis bakteri karena berbagai

macam kerentanan bakteri.7,8 Namun itu tidak menurunkan keparahan klinis yang disebabkan

oleh keratitis pneumokokus. Studi ini menunjukkan bahwa pengobatan keratitis pneumoniae

S. dengan campuran kolesterol dan moksifloksasin baik mensterilkan kornea dan secara

signifikan menurunkan tingkat keparahan infeksi dibandingkan dengan pengobatan dengan

PBS, kolesterol saja, atau moksifloksasin saja. Terapi kombinasi ini tampaknya memberikan

manfaat ganda dalam ke efektifan antibiotik membunuh bakteri, dan kolesterol menghambat

efek toksik dari pneumolysin, yang meliputi lisis sel inang dan / atau aktivasi komplemen

yang menginduksi merusak dan merusak respon kekebalan inang pada mata. Pengobatan

dengan campuran ini bisa mengurangi keparahan dari hasil yag tampak yang disebabkan oleh

Infeksi pneumokokus pada manusia.

PERNYATAAN

Penulis mengakui bahwa adanya dukungan pendanaan dari National Eye Institute, National

Institutes of Health (Public Health Services Grant R01EY016195).

Declaration of interest : Penulis melaporkan tidak ada konflik kepentingan. Penulis sendiri

yang bertanggung jawab atas konten dan penulisan penelitian ini.

REFERENSI

[1] Bourcier T, Thomas F, Borderie V, et al. Bacterial keratitis: Predisposing factors, clinical and microbiological review of 300 cases. Br J Ophthalmol. 2003;87:834–838.

[2] Wong T, Ormonde S, Gamble G, et al. Severe infective keratitis leading to hospital admission in New Zealand. Br J Ophthalmol. 2003;87:1103–1108.

[3] Bharathi M, Ramakrishnan R, Vasu S, et al. In-vitro efficacy of antibacterials against bacterial isolates from corneal ulcers. Indian J Ophthalmol. 2002;50:109–114.

[4] Donnenfeld E, O’Brien T, Solomon R, et al. Infectious keratitis after photorefractive keratectomy. Ophthalmology. 2003;110:743–747.

[5] Parmar P, Salman A, Kalavathy C, et al. Pneumococcal keratitis: A clinical profile. Clin Experiment Ophthalmol. 2003;31:44–47.

[6] Varaprasathan G, Miller K, Lietman T, et al. Trends in the etiology of infectious corneal ulcers at the F. I. Proctor Foundation. Cornea. 2004;23:360–364.

[7] Allan BD, Dart JK. Strategies for the management of microbial keratitis. Br J Ophthalmol. 1995;79:777–786.

[8] Sueke H, Kaye S, Neal T, et al. Minimum inhibitory concentrations of standard and novel antimicrobials for isolates from bacterial keratitis. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010;51:2519–2524.

[9] Johnson M, Hobden J, Hagenah M, et al. The role of pneumolysin in ocular infections with Streptococcus pneumoniae. Curr Eye Res. 1990;9:1107–1114.

[10] Tweten RK. Cholesterol-dependent cytolysins, a family of versatile pore-forming toxins. Infect Immun. 2005;73:6199–6209.

[11] Shumway CN, Klebanoff SJ. Purification of pneumolysin. Infect Immun. 1971;4:388–392.

[12] Briles DE, Nahm M, Schroer K, et al. Antiphosphocholine antibodies found in normal mouse serum are protective against intravenous infection with type 3 Streptococcus pneumoniae. J Exp Med. 1981;153:694–705.

[13] Marquart ME, Monds KS, McCormick CC, et al. Cholesterolas treatment for pneumococcal keratitis: Cholesterol-specific inhibition of pneumolysin in the cornea. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2007;48:2661–2666.

[14] Nandoskar M, Ferrante A, Bates E, et al. Inhibition of human monocyte respiratory burst, degranulation, phospholipid methylation and bactericidal activity by pneumolysin. Immunology. 1986;59:515–520.

[15] Ferrante A, Rowan-Kelly B, Paton JC. Inhibition of in vitro human lymphocyte response by the pneumococcal toxin pneumolysin. Infect Immun. 1984;46:585–589.

[16] Iliev AI, Djannatian JR, Nau R, et al. Cholesterol-dependent actin remodeling via RhoA and Rac1 activation by the Streptococcus pneumoniae toxin pneumolysin. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104:2897–2902.

[17] Iliev A, Djannatian J, Opazo F, et al. Rapid microtubule bundling and stabilization by the Streptococcus pneumoniae neurotoxin pneumolysin in a cholesterol-dependent, nonlytic and Src-kinase dependent manner inhibits intracellular trafficking. Mol Microbiol. 2009;71:461–477.

[18] Watanabe I, Nomura T, Tominaga T, et al. Dependence of the lethal effect of pore-forming haemolysins of Grampositive bacteria on cytolytic activity. J Med Microbiol. 2006;55:505–510.

[19] Hobden JA, Hill JM, Engel LS, et al. Age and therapeutic outcome of experimental Pseudomonas aeruginosa keratitis treated with ciprofloxacin, prednisolone, and flurbiprofen. Antimicrob Agents Chemother. 1993;37:1856–1859.

[20] Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically; approved standard, seventh edition. Clinical and Laboratory Standards Institute document M7-A7. Wayne, Pennsylvania: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2006.

[21] Sanders M, Norcross E, Moore Q, et al. A comparison of pneumolysin activity and concentration in vitro and in vivo in a rabbit endophthalmitis model. Clin Ophthalmol. 2008;2:793–800.

[22] Price KE, Camilli A. Pneumolysin localizes to the cell wall of Streptococcus pneumoniae. J Bacteriol. 2009;191:2163–2168.

Hak Cipta Eye Research saat ini adalah milik Taylor & Francis Ltd dan isinya tidak boleh disalin ataudiemail ke beberapa situs atau diposting ke listserv tanpa izin pemegang hak cipta tertulis.Namun, pengguna dapat mencetak, men-download, atau email artikel untuk penggunaan individu.