Innovación en La Detección de Patógenos en Alimentos Por Amplificación Isotérmica y Bioluminiscencia 19

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Innovación en la detección de Patógenos en Alimentos por Amplificación Isotérmica y Bioluminiscencia.

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Seguridad de los alimentos – Un problema mundial

� Cada año, los patógenostransmitidos por los alimentosresultan en un estimado de:

� 2 billones de casos de enfermedades.

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enfermedades.

� 1.8 millones de muertesinnecesarias.

� Pérdidas económicas entre

USD 10-83 billones.

~WHO, 1999

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Tendencias Globales & Preocupación crecienteCambio de dietas de consumoLegislación mejorada al rededor del mundo

Globalización del comercio alimentario

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Mayor sensibilización del públicoCreciente consumo de lácteos y

Cárnicos en economías en desarrollo

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ProducciónProducción

SalidasSalidas

ClienteCliente

Producción

Salidas

Cliente

Proteger su Salud,

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ProveedorProveedor

EntradasEntradas

Proveedor

Entradas Proteger su Salud, su Marca e Incrementar su Productividad

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Que es lo que el mercado necesita en un sistema de patógenos?

� Facilidad para usar

� Menor transferencias (pasos de pipeteo)

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� Resultados más rápidos

� Menos Falso positivos

� Métodos aprobados

� Software intuitivo

� Hardware robusto

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Una mejor Tecnología

AmplificaciónIsotérmica de ADN

Detección porBioluminiscencia

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Desarrollado por una innovadora combinación de tecnologías únicas para dar la precisión a nivel molecular que desean los clientes

sin sacrificar la productividad.

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Iniciadores múltiples reconocen distintas regiones del genoma y la polimerasa del ADN proporcionar una amplificación eficiente, rápida y

continua de ADN buscado

Amplificación Isotérmica de AND

¿Cómo funciona?

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Detección por Bioluminscencia

Luciferasa termoestable utiliza Adenosintrifosfato (ATP) para generar luz que se detecta, indicando el ADN buscado

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Detección en Tiempo Real

Caída de Bioluminiscencia


Amplificación exponencial de plantilla

Amplificación exponencial de plantilla

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Produce salidas de luz que dan tanto un rápido aumento y disminución de la luz cuando una secuencia objetivo se amplifica

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Sistema 3M™ de Detección Molecular

Salmonella Listeria E.coli O157

Sensibilidad (%) > 99 100 100

Especificidad (%) 100 100 100

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•Precisión molecular con excelente especificidad y sensibilidad.•Flujo de trabajo desarrollado para incrementar la eficiencia en el laboratorio y la productividad de los técnicos.•Resultados en tiempo real que ayudan a tomar decisiones críticas más rápidamente.•Instrumento robusto con requerimientos mínimos de mantenimiento y menor consumo de tiempo en el laboratorio.


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Introducing – 3M™ Molecular Detection System

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Dimensiones del instrumento

Alto 9.6 cm(3.8 in)Frente 21.3 cm (8.4 in)Fondo 29.2 cm (11.5 in)

Peso 4.3 Kg (9.5 lb)

Método de DetecciónAmplificación isotérmica de


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Método de DetecciónAmplificación isotérmica de DNA + Bioluminiscencia

Sensibilidad ~ 103-104 UFC/mL

No. De Transferencias 2

Tiempo total de prueba 10 – 26 h

Tiempo de manipulación por el operador 0.5 h

Capacidad del equipo (pruebas) 96

Tiempo de corrida en el equipo 75 min

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Equipo 3M de Detección Molecular

Equipo Robusto

•Portable, sin necesidad de re-calibración

•Diagnóstico automático al iniciar el equipo

•Sin piezas móviles o ventiladores de

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•Sin piezas móviles o ventiladores de enfriamiento

•Sin componentes costosos (termociclador, detectores de fluorescencia o filtros)

•Calentador removible para fácil limpieza y descontaminación

•Mantenimiento mínimo requerido


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Software 3M de Detección Molecular

Programa Poderoso

•Corre tareas múltiples dentro de laaplicación mientras las pruebas seencuentran en progreso.

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encuentran en progreso.

•Opera hasta cuatro instrumentos demanera simultánea

•Interpretación automática de resultados

•Sistema de seguridad con protección porpassword y registro de auditoría

Amplificación Exponencialdel ADN


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Ensayos 3M de Detección Molecular•Flexibilidad para correr de 1 a 96 pruebas a la vez

•Capacidad de probar varios organismos en una corrida

•Solo dos pasos de transferencia después de un solo enriquecimiento

•Tubos de prueba con código de color por organismo

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•Tubos de prueba con código de color por organismo•Reactivos listos para usar

•Sistema de tubo cerrado que reduce el riesgo de contaminación por amplicón

•Proceso simultáneo de amplificación y detección de 75 min

•Diseñado para trabajar con medios de enriquecimiento 3M


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Programa 3M de Detección Molecular

• Fácil de usar / Intuitivo - Interfase de usuario por pestañas -Íconos de ensayo por color que coinciden con los tubos de reacción

• Capacidad de correr tareas múltiples dentro de la

aplicación -Permite ingresar a otras funciones del programa mientras se corre la prueba-- Opera hasta 4 instrumentos simultáneamente

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-- Opera hasta 4 instrumentos simultáneamente • Resultados en tiempo real

- Pueden obtenerse resultados positivos desde los 15 minutos de la corrida

• Generación de reportes

- Exporta a PDF, Microsoft® Excel and Word • Compatibilidad con LIMS

-Importa y exporta datos usando formatos comunes •Sistema de seguridad

- Protección por password- Registro de auditoría para rastrear eventos y cambios


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Sistema 3M de Detección Molecular – Flujo de Trabajo

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Encender el equipo y la computadora, inicializar

Identificar la corrida en el software

Preparar las muestras

320 uL

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computadora, inicializar el software

el software muestras

Clic en el botón Inicio de software

Monitorear los resultados y ver el

informe

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Colocar la bandeja de carga rápida en el instrumento y cerrar la tapa para empezar la corrida

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Simplificado para Incrementar la ProductividadMétodo 3M

para Salmonella

Enriquecimiento de la muestraIncubación (18-24 hr)

Método 3M para E.coli O157

(incluyendo H7)


Método 3M para

Listeria


Transferir 20 µL de muestra enriquecida al tubo de lisis .

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Un Protocolo Para Todos

LosPatógenos

Calentar 15 min - 100°C ±1°C. Enfriar 10 min en el bloque de enfriamientoDejar reposar 5 min

Transferir 20 µL del lisado a los tubos de reacción con los reactivos liofilizados

Colocar los tubos en el instrumentoIniciar la corridaAmplificación en 75 minResultados automatizados en tiempo real y con código de color

TTR: 10-26 hr © 3M 2011 All Rights Reserved

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3M Innovación – Tubos de Reactivos de Colores

Salmonella: VerdeListeria: AzulE. coli O157 (incluye H7): RojoControl de Matriz: Incoloro

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Característica única permitida por la química de 3M Facilita montaje


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Medios de Enriquecimiento 3M™

3M™ Caldo de Agua Peptonada Tamponada (ISO)• Salmonella (37°C ±1 °C) • E.coli O157 (41.5°C ±1 °C)

Medios de enriquecimiento diseñados para mejorar el crecimiento y la recuperación de los organismos con sólo un paso de enriquecimiento. 3M™ Caldo de Agua Peptonada Tamponada (ISO) y 3M™ Caldo Modificado para recuperación de Listeria están optimizados para su uso con el Sistema 3M™ de Detección Molecular

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3M™ Suplemento y Caldo Modificado para

recuperación de Listeria• Listeria spp. (37°C ±1 °C)• Listeria monocytogenes (37°C ±1 °C)


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Especificaciones del equipo

� Capacidad: 96 pruebas

� Temperatura de Reacción: 60 °C

� Tiempo de Calentamiento: <20 min.

� Tiempo de Resultados: 75 min.

� Interfaz del equipo: USB 2.0

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� Interfaz del equipo: USB 2.0

� Dimensiones: 11.5” x 3.8” x 8.4” (29.2 cm x 9.6 cm x 21.3 cm)

� Peso: 9.5 lbs (4.3 kg)


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Status del InstrumentoLED Multicolor: Barra de luces que indica el estado

Naranja: Calentamiento Rojo fijo: Ensayo Cmpletado

Rojo Parpadeante: Falla

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Verde: Listo

Azul: Ensayo en Progreso

Sin Color: Standby


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Kit de Control de Matriz para Detección Molecular 3M

Verifica que la matriz no inhibe la amplificación

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Ensayo de Salmonella – Matrices aprobadas

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3M Food SafetyEnsayo de Salmonella – Matrices aprobadas

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Ensayo de E. coli O157 Assay – Matrices aprobadas

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Ensayo Listeria – Matrices ambientales

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Salmonella Sensibilidad

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Salmonella Sensibilidad

120 cepas de diferentes procedencias

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Salmonella Especificidad

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Listeria Sensibilidad


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procedencias

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Listeria Especificidad


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E. coli O157 Sensibilidad

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E. coli O157 Especificidad

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Víctor Campos – Región Andina

[email protected]

087221521

Muchas Gracias!!

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