Identificacin molecular de hongos entomopatgenos en una epizootia de Bacteria cockerelli

Identificacin molecular de hongos entomopatgenos en una epizootia de Bactericera cockerelli . Sicairos Medina Laura Yaneth, Romero Quintana Jose,aguilar Medina Elsa,arambula Meras Eliakim, Ramos Payan Rosalio Et.Al.Laboratorio De Microbiologia Molecular, Facultad De Ciencias Quimico Biologicas. Universidad Autonoma De Sinaloa Introduccin

Bactericera cockerelli (Hemiptera)

Fitoplasmas

Para el manejo de plagas es importante identificar las especies entomopatgenas con exactitud.

Por lo que se necesita utilizar mtodos rpidos, confiables y sensibles.

Los marcadores moleculares son discriminativos, sensibles, reproducibles, de fcil interpretacin y reproducibles.

Una tcnica ampliamente utilizada es PCR acoplada a anlisis de enzimas de restriccin PCR-RFLP.

La regin utilizada para hongos entomopatgenos es la de ADN r correspondiente al ITS.53

Materiales y metodosLas muestras de B.cockerelli fueron obtenidas del valle de Culiacan, donde se utilizo TRI-SIN, fabricado con (Paeclomycetes fumosoroseus, Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae)Aislamiento:Los hongos de la superficie del insecto se aislaron en medio agar-saouraud adicionado con extractos de levadura y malta, inoculados e incubados a 29c el tiempo necesario para su identificacin.

Micelio:La extraccin del micelio se realizo como describe Osuna et. Al. (2003).

Anlisis molecularEl ADN total se obtuvo mediante el mtodo de extraccin salina (Aljanabi, 1997)

Se amplifico la regin ITS utilizando los iniciadores ITS4 e ITS5

Los productos fueron sometidos a digestin enzimtica con EcoR1 y Haelll

Con posterior electroforesis en geles de poliacrilamida y tincin de nitrato de plata.Resultados y discusinNinguna de las colonias obtenidas de las paratriozas micosadas correspondio a B.bassiana o M.anisopliae.

Solo hubo correspondencia con P. fumosoroseus.

El anlisis molecular concuerda con la caracterizacin morfolgica.

conclusinCon base en lo anterior , se concluyo que al menos una de las cepas aplicadas estaba presente en la epizootia de B. cockerelli. Lo que sucede con B. bassiana y M. anisopliae y por que no se manifiestan en la micoso ser estudiado posteriormente.