Hepatitis ViralesHepatitis ViralesLa importancia del La importancia del

Laboratorio de Biología Laboratorio de Biología MolecularMolecular

Bioquímico Alejandro Kuc

Servicio de Inmunología

Hospital “Dr. Julio C. Perrando”

Virus de la Virus de la Hepatitis CHepatitis C

Bioq. Alejandro Kuc

*Servicio de Inmunología

Hospital “Dr. Julio C. Perrando”

*Cátedra Virología Clínica

FaCENa - UNNE

HCVHCV

Agente etiológico de las HNANB Agente etiológico de las HNANB transmitidas por transfusionestransmitidas por transfusiones

Flia: FlaviviridaeFlia: Flaviviridae Género: hepacivirusGénero: hepacivirus EsféricoEsférico EnvueltoEnvuelto ARN (+) sc ARN (+) sc

región hipervariable

capside

Proteina de

cubierta

proteasa/helicasa

RNA polimerasa

5’ URT

core E1 E2 NS2

NS3

NS4

NS5

3’ URT

Genoma

evasión de la respuesta

inmune

Variabilidad GenéticaVariabilidad Genética Genotipo: >70% identidadGenotipo: >70% identidad

6 hasta ahora6 hasta ahora Subtipo: > 90% Subtipo: > 90% Cuasiespecie: IntraindividuoCuasiespecie: Intraindividuo

En Argentina:En Argentina:– 1a: 39%1a: 39%– 1b: 33%1b: 33%– 2a: 19%2a: 19%– 3a: 7%3a: 7%

Hepatitis por virus CHepatitis por virus C

Vías de transmisión

Vertical 5 %

Percutánea90-50%

Intrafamiliar 0-2%

¿Desconocido? 5%

Vías de transmisiónVías de transmisión

– Exposición a sangre o fluidos contaminados Exposición a sangre o fluidos contaminados

– Transmisión vertical: madre-recién nacidoTransmisión vertical: madre-recién nacido Depende de la carga viral (> 2 x 10 Depende de la carga viral (> 2 x 10 66

copias/ml)copias/ml) Aumenta en coinfección HIV-HCVAumenta en coinfección HIV-HCV Lactancia materna: no contraindicadaLactancia materna: no contraindicada

– Transmisión horizontal: exposición percutánea oTransmisión horizontal: exposición percutánea o

de las membranas mucosas al material infectadode las membranas mucosas al material infectado

Periodo de Incubación: Media 6-7 sem

Clínica (ictericia): 20-30%

Hepatitis crónica (HCV RNA>6 meses): 70-85%

Manif. Extrahepáticas: 40%

Inmunidad: No Anticuerpos protectores

Hepatitis C – Datos Clínicos

Historia naturalHistoria natural

INFECCIÓNINFECCIÓN 10 años10 años

Hepatitis crónicaHepatitis crónica 15 años15 años

CirrosisCirrosis 20 años20 años

HepatocarcinomaHepatocarcinoma

Infección Aguda

Infección Crónica

Patrones de ViremiaPatrones de Viremia

Diagnóstico de Diagnóstico de LaboratorioLaboratorio

Anticuerpos Anti-VHC:Anticuerpos Anti-VHC: – F(-) en la fase aguda y en inmunosuprimidos. VENTANA: 7-F(-) en la fase aguda y en inmunosuprimidos. VENTANA: 7-

8 semanas.8 semanas. EIA o RIA: Screening. S: 98,8-100%EIA o RIA: Screening. S: 98,8-100% RIBA o LIA: Ensayo suplementario para confirmar. E: 100%RIBA o LIA: Ensayo suplementario para confirmar. E: 100%

Antígeno VHCAntígeno VHC - mediante EIA: Acorta el período de - mediante EIA: Acorta el período de ventana en el screeningventana en el screening

RNA-VHC:RNA-VHC: Cualitativo: Puede utilizarse para diagnosticar la infección por Cualitativo: Puede utilizarse para diagnosticar la infección por

VHC en la fase aguda.VHC en la fase aguda. Cuantitativo (Carga Viral): Para monitorizar la respuesta a la Cuantitativo (Carga Viral): Para monitorizar la respuesta a la

terapia antiviralterapia antiviral

GenotipificaciónGenotipificación

Marcadores durante la Marcadores durante la infección tempranainfección temprana

HCV RNA

Anti-HCV

12

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

Infection Day 0

HCV RNA Day 12

HCV Antibody Day 70

NAT CualitativaNAT Cualitativa

Acorta el período de Ventana: baja de Acorta el período de Ventana: baja de 2 meses a 1-2 semanas2 meses a 1-2 semanas

– Importante en Bancos de SangreImportante en Bancos de Sangre– Accidentes transfusionales: 1/276.000 a Accidentes transfusionales: 1/276.000 a

1/2.000.0001/2.000.000

Control posterapéuticoControl posterapéutico Dx de Hepatitis AgudaDx de Hepatitis Aguda

NAT Cuantitativa (Carga Viral)NAT Cuantitativa (Carga Viral)

Pronóstico de evolución y respuesta al Pronóstico de evolución y respuesta al TtoTto– La carga viral basal La carga viral basal – Curva viral (4 y 12 sem)Curva viral (4 y 12 sem)

Indica el cese del tratamientoIndica el cese del tratamiento

No esta relacionada directamenete con No esta relacionada directamenete con riesgo de transmisión sexual ni nivel de riesgo de transmisión sexual ni nivel de daño hepáticodaño hepático

GenotipificaciónGenotipificación

Predice la respuesta al Tto y la duración del Predice la respuesta al Tto y la duración del mismomismo

Determina la dosis de RibavirinaDetermina la dosis de Ribavirina

Genotipos 2 y 3 responden mejor y mas Genotipos 2 y 3 responden mejor y mas rápido que 1rápido que 1

GenotipificaciónGenotipificación

Secuenciación es el Gold Standard Secuenciación es el Gold Standard Amplificación de secuencias genotípicas Amplificación de secuencias genotípicas

especificas + RFLPespecificas + RFLP– CoreCore– 5´URT5´URT– NS5NS5

Hibridación Reversa Hibridación Reversa (INNO-LiPA HCV, Innogenetics)(INNO-LiPA HCV, Innogenetics)

Serotipifiación de genotipos Serotipifiación de genotipos (MurexTM HCV (MurexTM HCV Serotyping 1 Assay)Serotyping 1 Assay)

5’

core E1 E2 NS2 NS3 NS4 NS5

3’

Algoritmo Diagnóstico

Accidentes tranfusionales y avance diagnóstico

Importancia de la BM en

el Seguimiento

y Tratamiento

Hepatitis C OcultaHepatitis C Oculta

HCV erradicada: HCV RNA (-) >24 sem HCV erradicada: HCV RNA (-) >24 sem de terminado el Ttode terminado el Tto

Pero se observo que 40-45% de estos Pero se observo que 40-45% de estos pacientes pueden tener HCV RNA pacientes pueden tener HCV RNA detectable en biopsias Hep o Celulas detectable en biopsias Hep o Celulas mononucleares de Sangre circulantemononucleares de Sangre circulante

Hepatitis por virusHepatitis por virus cc

– Profilaxis. Profilaxis.

No se dispone de No se dispone de vacuna vacuna

(gran variabilidad (gran variabilidad genómica del virus)genómica del virus)

No se dispone de No se dispone de gamma globulinagamma globulina

Screening de donantes de sangre y órganos

Modificación de conductas de riesgo

Precauciones con la sangre y fluidos corporales

Profilaxis de la Hepatitis C