Freshman2002 Semen Collection

8/19/2019 Freshman2002 Semen Collection

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S e m e n o l le c t io n a n d E v a l u a t i o n

Jon i L. Freshman, DV M , MS, DA CV IM Internal M edicine)

Confo rm at ion show ing and a va r ie ty o f dog spor ts a re inc reas-

ing ly popu la r . Propaga t ion o f an exce l len t dog requ i res norma l

fe r t i li t y . Semen co l lec t ion and eva lua t ion a re essen t ia l sk i l ls fo r

sma l l an ima l p rac t it ioners who work w i th b reeders and dog-spor t

en thus ias ts . Semen co l lec t ion can be per fo rmed on mo st dogs in

th

c l in ic se t t ing w i th m in ima l s tandard equ ipment . Prepara t ion

o f the co l lec t ion room and p resence o f a teaser b i t ch inc rease

the success o f samp le co l lec t ion . Semen eva lua t ion cons is ts o f

severa l compo nen ts . F i rs t, g ross charac te r is t i cs and sam p le

vo lume a re recorded . Percen tage and qua l i t y o f mot i l i t y a re

eva lua ted imme d ia te ly . The concen t ra t ion o f sperm atozoa in the

sample is de te rm ined and mu l t ip l ied by the to ta l samp le vo lume

to de te rm ine the to ta l number o f sperm in the e jacu la te . Mor -

pho logy o f ->100 spermatozoa is eva lua ted and recorded to

de te rm ine the percen t no rma l spermatozoa To ta l no rma l sperm

per e jacu la te is then ca lcu la ted . Add i t iona l tes ts a re o f ten per -

fo rmed. These inc lude cy to logy o f the second and th i rd f rac t ions ,

cu l tu re o f the semen, and m easureme nt o f semen a lka l ine phos-

pha tase . Know ledge o f no rma l pa rame te rs fo r can ine

s m n

enab les the p rac t i t ioner to eva lua te the resu l ts o f these tes ts w i th

con f idence .

Cop yr igh t 2002, E lsev ie r Sc ience USA) . A l l r igh ts reserved .

x h i b i t i o n o f d o g s i n c o n f o r m a t i o n a n d o b e d i e n c e c o m p e t i -

t i o n a s w e l l a s a v a r i e t y o f d o g s p o r t s ( e . g ., f i e ld , h e r d i n g ,

a g i l it y ) i s a n i n c r e a s i n g l y p o p u l a r a c t i v i t y i n t h e U n i t e d S t a t es .

T h e a b i l i t y t o p e r p e t u a t e a d o g ' s e x c e l l e n t q u a l i t i e s r e q u i r e s h i s

o r h e r f e r ti li ty . V e t e r i n a r ia n s m a y b e a s k e d t o p e r f o r m p r e -

b r e e d i n g o r p r e p u r c h a s e s e m e n e v a l u a t i o n s . I n a d d i t io n , t h e

u s e o f c h i l le d a n d f r o z e n s e m e n b r e e d i n g i s i n c re a s i n g . C o l le c -

t i o n a n d e v a l u a t i o n o f c a n i n e s e m e n i s e s s e n ti a l to t h e s e t e c h -

n i q u e s . F i n a l ly , t h e A m e r i c a n K e n n e l C l u b r e q u i r e s v e t e r i n a r y

c e r t i fi c a t io n o f f e r t il i ty f o r s t u d d o g s y o u n g e r t h a n t h e a g e o f 7

m o n t h s o r o l d e r th a n 1 2 y e a r s .

S e m e n c o l l e c t i o n a n d e v a l u a t i o n i s r e a d i l y l e a r n e d a n d e a s i ly

d o n e w i t h i n t h e p r a c t i c e s e tt in g . B r e e d e r a n d d o g s p o r t c l i e n t s

a p p r e c i a t e t h e a v a i l a b i l i t y o f t h e s e s e r v i c e s .

S e m e n o l l e c t io n

P r e c o l l ec t i o n P r o c e d u r e s

A t h o r o u g h h i s t o r y s h o u l d b e o b t a i n e d b e f o r e c o l l e c t io n . 1-3

T h i s s h o u l d i n c l u d e b r e e d i n g h i s t o r y , m e d i c a l h is t o r y , a n d a n y

m e d i c a t i o n o r s u p p l e m e n t s a d m i n i s t e r e d o v e r a t l e a s t t h e p r e -

v i o u s 6 m o n t h s . E n v i r o n m e n t a l a n d g e n e t i c o r f a m i l ia l i n f o r -

From C anine Consultations, Colorado Springs, CO

Address reprint requests to J. L. Freshm an, Canine Consultations,

3060 Woodvlew Court, Colorado Springs, CO 80918.

Copyright 2002, Elsevier Science USA). All r ights reserved.

1096-2867/02/1703-0002535.00/0

doi:l 0.1053/svms.2002.34326

m a t i o n i s a l s o h e l p f u l . A p e d i g r e e s h o u l d b e e x a m i n e d f o r

d e g r e e o f i n b r e e d i n g . R e c o r d t h e l e n g t h o f t i m e s i n c e t h e l a s t

b r e e d i n g o r c o l l e c t i o n . 4

E q u i p m e n t

E s s e n t i a l e q u i p m e n t f o r c a n i n e s e m e n c o l l e c t i o n a n d e v a l u a -

n o n i s l i s t e d in T a b l e 1 .3 M a n y s u p p l i e s w i l l b e a v a i l a b l e i n a n y

c l in i c a l se t ti n g . O t h e r s m a y n e e d t o b e o r d e r e d b e f o r e b e g i n -

n i n g s e m e n c o l l e c t io n s .

C o n c e r n h a s b e e n e x p r e s s e d a b o u t t h e e f f e c t o f la t e x a r ti f ic i a l

v a g i n a s ( A V ) o n m o t i l i ty o f c a n i n e s p e r m a t o z o a . S t u d i e s t h a t

f o u n d d e c r e a s e d m o t i l i ty o n c o n t a c t w i t h l a t e x ( g l o v e s o r A V )

u s e d a p r o l o n g e d c o n t a c t t i m e t h a t w i l l n o t b e a n i s s u e i f a p -

p r o p r i a t e c o l l e c t i o n t e c h n i q u e s a r e u s e d . 5 -r D i s p o s a b l e A V a r e

a v a i la b l e , b u t a r e n o t a s e a s y t o u s e b e c a u s e t h e y w i l l n o t a d h e r e

t o t h e e n g o r g e d p e n i s .

T h e f i rs t c o l l e c t io n t u b e a t t a c h e d t o t h e A V s h o u l d h a v e a

s m a l l h o l e n e a r t h e t o p . T h i s w i l l p r e v e n t v a c u u m f o r m a t i o n

t h a t c o u l d a d v e r s e l y a f f e c t s e m e n c o l l e ct i o n . 2

T h e t o p o f t h e A V s h o u l d b e f o l d e d b a c k t o f o r m a f i n a l l e n g t h

t h a t w i ll a l lo w t h e e r e c t p e n i s t o b e j u s t a b o v e , b u t n o t c o n t a c t -

i n g t h e a t t a c h e d c o l l e c ti o n t u b e . F o r t o y d o g s , t h e A V c a n b e c u t

d o w n i n s i z e .

P r e p a r a t i o n

T h e r o o m w h e r e c o l l e c t i o n i s t o o c c u r s h o u l d b e q u i e t a n d

i s o la t e d . I n t e r r u p t i o n s s h o u l d b e p r e v e n t e d . U s e o f a r u b b e r -

b a c k e d m a t w i l l p r o v i d e g o o d f o o t i n g a n d o l f a c t o r y c u e s to t h e

s t u d d o g . T o y d o g s m a y b e m o r e r e a d i l y c o l l e c te d o n a g r o o m -

i n g ta b le . R e q u e s t t h a t th e s t u d o w n e r b r i n g a n y e q u i p m e n t o r

a c c e s s o r i e s th a t t h e d o g a s s o c i a t e s w i t h b r e e d i n g .

T h e c o l le c t o r s h o u l d & v e s t t h e m s e l v e s o f a n y d o c t o r p a r -

a p h e r n a l i a , s u c h a s w h i t e c o a t o r s t e th o s c o p e . S e m e n c o l l e c t io n

s h o u l d b e p e r f o r m e d b e f o r e p h y si c a l e x a m i n a ti o n , v e n i p u n c -

t u r e , o r a n y o t h e r s t r e s s f u l p r o c e d u r e s . ~,7 T h e d o g ' s c o m f o r t a n d

c o o p e r a t i o n a r e e s s e n t ia l f o r s e m e n c o l le c t io n .

A ll e q u i p m e n t s h o u l d b e a t h a n d a n d w a r m e d t o b o d y t e m -

p e r a t u r e . 8 A t t a c h t h e A V t o t h e c o l l e c ti o n t u b e w i t h t h e v e n t

h o l e . A t e a se r b i t c h s h o u l d b e u s e d . I d e a l l y s h e s h o u l d b e i n

p r o e s t r u s o r e s t r u s a n d n e a r i n s iz e t o t h a t o f t h e m a l e d o g . I n

l i e u o f a n e s t r u s t e a s e r , a c a l m b i t c h c a n b e u s e d . E s t r u s s c e n t

c a n b e p r o v i d e d i n t w o w a y s . S w a b s t a k e n f r o m v a g i n a l s e c r e -

t i o n s o f e s tr u s b i t c h e s c a n b e f r o z e n i n p l a s t ic b a g s a n d t h a w e d

f o r th i s p u r p o s e . 8 S o m e h a v e h a d s u c c e s s u s i n g a p h e r o m o n e

c h e m i c a l , m e t h y l p - h y d r o x y b e n z o a t e ( A l d r i c h C h e m i c a l , M i l -

w a u k e e , W I ) s w a b b e d o n t h e v u l v a r a r e a a n d t ai l h e a d o f a n

a n e s t r u s t e a s e r . 7

A l t h o u g h m o s t d o g s a r e n o t p a r t ic u l a r a b o u t t h e t e a s e r b i t c h ,

s o m e a r e . W i t h d o g s t h a t s h o w n o i n t e r e s t i n t h e t e a se r , u s i n g a

b i t c h h e k n o w s a n d l i k es m a y b e b e n e f i c ia l , e v e n i f s h e h a s b e e n

o v a r i o h y s t e r e c t o m i z e d . A n a s s i s t a n t s h o u l d b e p r e s e n t t o r e -

s t r a i n t h e b i t c h w h i l e s t a y i n g o u t o f t h e s t u d d o g ' s w a y .

1 4 Clinical Techniques in Small An ima l Practice Vol 17, No 3 Augus t), 2002: pp 104 -107


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t i o n o f m o t i l i t y s h o u l d b e p e r f o r m e d a t 2 0 × a n d 4 0 × w i t h t h e

c o n d e n s e r l o w e r e d . ~ .r I f th e s a m p l e i s t o o c o n c e n t r a t e d t o e v a l -

u a t e m o t i l it y , a d r o p o f s e m e n c a n b e d i l u te d w i t h a d r o p o f

b u f f e r e d s a l i n e s o l u t i o n a t t h e a p p r o p r i a t e p H . n

R e c e n t i n f o r m a t i o n i n d i c a t e s a w a r m e d s l i d e m a y n o t b e

r e q u i r e d b e c a u s e c a n i n e s e m e n i s r e s is t a n t t o c o l d s h o c k , a t

l e a s t a b o v e 7 0 ° F .7 ,1 3 O t h e r i n f o r m a t i o n i n d i c a te s c o l d s h o c k

c a n b e a c o n c e r n i n d e c r e a s i n g m o t i l it y . 9 S u b j e c ti v e ly , s e m e n

m o t i l i t y i s i m p r o v e d w h e n e v a l u a t e d o n a s l i d e w a r m e r s e t a t

b o d y t e m p e r a t u re .

N o r m a l m o t i l i t y i s d e s c r i b e d a s r a p i d , p r o g r e s s i v e , f o r w a r d

m o t i o n . ~ T h i s i s s u b j e c t i v e l y r e c o r d e d i n p e r c e n t a g e o f m o t i l e

s p e r m . A t l e a s t 7 0 o f s p e r m s h o u l d s h o w t h i s m o t il i ty . S p e r -

m a t o z o a t h a t r o ll o r c i r c le a r e n o t e x h i b i t i n g n o r m a l m o t i l it y .

T h e a s s e s s m e n t o f s l o w , m e d i u m , a n d f a s t s p e e d c a n a ls o b e

m a d e . T h e p e r c e n t a g e o f p r o g r e s s i v e m o t i l i t y in c r e a s e s a f t e r 5

d a y s o f s e x u a l r e s t c o m p a r e d t o 1 d a y . r

D u r i n g t h e m o t i l i t y e v a l u a t i o n , a l s o e v a l u a t e f o r s p e r m a g -

g l u t i n a ti o n . A g g l u t i n a t i o n i s e v i d e n c e d b y s p e r m s t i c k i n g t o

e a c h o t h e r . * S t i c k i n g t o y o l k m a t e r i a l i n e x t e n d e r , d e b r i s o r , a i r

b u b b l e s i s n o t o f c o n c e r n .

S p e r m C o u n t

T h e f i r st s t e p i n d e t e r m i n i n g s p e r m c o u n t i s to d e t e r m i n e c o n -

c e n t r a t i o n o f th e s a m p l e . T h i s p r o c e d u r e i s p e r f o r m e d u s i n g a

U n o p e t t e

T

( B e c t o n - D i c k i n s o n ; R u t h e r f o r d , N J ) s y s t e m f o r

w h i t e b l o o d c e l l /p l at e le t c o u n t a n d a N e u b a u e r h e m a c y t o m e -

t e r . 1 ,2 ,r,8 ,1~,~* Th e sam ple of f i r s t an d sec on d f rac t i on s , o r se c-

o n d - o n l y f r a c t i o n is g e n t ly m i x e d , t h e n d r a w n u p i n t o t h e . 0 2

m L U n o p e t t e c a p i l l a r y t u b e . T h i s a l i q u o t is t h e n d i s p e n s e d i n t o

t h e 1 . 98 m L U n o p e t t e c h a m b e r a n d m i x e d . T h e d i lu t e d s a m p l e

i s d i s p e n s e d i n t o b o t h s i d e s o f t h e N e u b a u e r c h a m b e r a n d

a l l o w e d t o s e t t l e , w h i c h f a c i l i t a t e s f o c u s i n g .

T h e c e n t r a l s q u a r e ( o f n i n e s q u a r e s ) o n t h e N e u b a u e r c h a m -

b e r i s c o u n t e d o n e a c h s i d e a n d a v e r a g e d . 2 ,< r, 9 1 3,s 4 T h e n u m -

b e r s s h o u l d b e w i t h i n 1 0 o f e a c h o t h e r . T h i s n u m b e r r e p r e -

s e n t s t h e n u m b e r o f s p e r m a t o z o a ( i n m i l l i o n s ) p e r m i l li l it e r o f

s e m e n .

T h e n u m b e r o f s p e r m a t o z o a p e r m i l l il i te r is m u l t i p l ie d b y t h e

s a m p l e v o l u m e t o d e t e r m i n e t h e t o ta l s p e r m a t o z o a p e r e j a c u -

l a te . T h i s n u m b e r i s d e p e n d e n t o n t h e s iz e o f d o g a n d r e s u l t in g

s i ze o f te s te s . L a r g e r d o g s p r o d u c e l a r g e r n u m b e r s o f s p e r m a -

t o z o a . T h e a v e r a g e s iz e d o g s h o u l d p r o d u c e a t le a s t 2 5 0 t o 3 0 0

m i l l i o n s p e r m p e r e j a c u l a t e a n d m a y p r o d u c e m u c h m o r e . 3.7,~ s~

T o y d o g s m a y p r o d u c e l es s a n d g i a n t b re e d d o g s s h o u l d p r o -

d u c e m u c h m o r e .

T h e t o t a l s p e r m p e r e j a c u l a t e i s d e p e n d e n t o n a v a r i e t y o f

f a c to r s . V e r y y o u n g a n d v e r y o l d d o g s p r o d u c e l e ss s p e r m . 7 I n

D a l m a t ia n s , s p e r m c o u n t h a s b e e n d o c u m e n t e d t o d e cr e a s e

a f t e r 6 y e a r s o f a g e . ~ ° I n a d d i t i o n , t o t a l s p e r m n u m b e r i s d e -

c r e a se d w i t h i n b r e d d o g s .r I n n o r m a l d o g s , t o ta l s p e r m n u m b e r

d e c r e a s e d i n l a te s u m m e r a n d f a l l a s c o m p a r e d t o s p r i n g a n d

e a r l y s u m m e r , b u t d i d n o t f a l l b e l o w n o r m a l v a l u e s . ~

F r e q u e n c y o f e j a c u la t i o n a l s o a f fe c t s t h e t o t a l s p e r m p e r

e j a c u l a t e . D a i l y c o l l e c t i o n f o r 7 t o 1 0 d a y s e x h a u s t s t h e e p i d i d -

y m a l s to r a g e a n d r e s u l t s i n c o l l e c ti o n o f o n l y t h e d a i ly s p e r m

o u t p u t ( D S O ) . ~ 5a 6 E v a l u a t i o n o f s p e r m c o u n t s h o u l d n e v e r b e

b a s e d o n a s i ng l e s a m p l e . 2 .r A p o o r s a m p l e m a y n o t b e r e p r e -

s e n t a t i v e f o r t h e d o g i f h e i s n e r v o u s o r s t r e s se d . A n e x c e l l e n t

s a m p l e f r o m a d o g r a r e l y c o l l e c te d m a y l o o k q u i t e d i f f e r e n t b y

t h e t h i r d s a m p l e w i t h i n a 7 - d a y p e r i o d . T h e t i m e f r o m d i f f e r e n -

Tab le 2 . Sperm atozo a l Abnormal i ties1 2 8 9

Pr im ary abno rm a l i t ies

H ead abno rm a l i t i es

Py r i f orm head

T apered head

N ar row head

Sm a l l head

G ian t head

R ound head

D e f o rm ed head

D oub le head

M idp iec e abno rm a l i t i es

D oub le m idp iec e

Sw o l l en m idp iec e

Prox im a l d rop le t

Tai l abnormal i t ies

T ight ly co i led ta t l

Double ta i l

Sec ondary abno rm a l i t ies

H ead abno rm ah t i es

D e t ac hed head

M idp iec e abno rm a l i t i es

D is ta l drop let

Tal l abnormal i t ies

Bent ta i l

Reverse tai l

Distal coi led tai l

O t he r

R e leas ed a c ros om e

t i a ti o n o f s p e r m a t o g o n i a t o r e le a s e o f t h e r e s u l ti n g s p e r m i s 6 2

d a y s, s o a b n o r m a l it ie s i n s p e r m n u m b e r m a y b e s e e n m u c h l a te r

t h a n t h e i n s u l t t h a t c a u s e d t h e m . 15A n o r m a l s e m e n e v a l u a t i o n

d o e s n o t e q u a t e t o f e r ti li t y b e c a u s e s p e r m f u n c t i o n a n d b r e e d -

i n g a b i l i t y a r e n o t e v a l u a t e d .

S p e r m a t o z o a l M o r p h o l o g y

M o r p h o l o g y i s e v a l u a t e d b y e x a m i n i n g a s t a i n e d s e m e n s l i d e

u n d e r 1 0 0 × ( o il i m m e r s i o n ) a n d c o u n t i n g 1 0 0 t o 2 0 0 s p e r m a -

t o z o a . T w o d i f f e r e n t t e c h n i q u e s m a y b e u s e d t o p r o d u c e a s li d e

f o r m o r p h o l o g i c e x a m i n a t i o n . I n t h e f i rs t , a d r o p o f e o s in -

n i g r o s i n s t a i n ( H a n c o c k ' s s ta i n ; L a n e M a n u f a c t u r i n g , D e n v e r ,

C O ) i s p l a c e d o n t h e e n d o f a m i c r o s c o p e s l i d e . 2-7 ,8,1s A d r o p o f

g e n t l y m i x e d s e m e n s a m p l e ( s p e r m - r i c h f r a c ti o n ) i s p l a c e d n e x t

t o it . A s e c o n d s l id e i s u s e d t o g e n t l y m i x t h e t w o d r o p s , a n d

t h e n d r a w t h e m i x t u r e a l o n g t h e s l id e a s f o r a b l o o d s m e a r . T h e

s l i de i s a i r -dr i ed .

I n t h e s e c o n d t e c h n i q u e , a d r o p o f s e m e n i s s m e a r e d a s fo r a

b l o o d s m e a r , t h e n s t a in e d w i t h a m o d i f i e d W r i g h t ' s - G i e m s a

s t a i n ( D i f f - Q u i c k ; B a x t e r H e a l t h c a r e , M i a m i , F L ) . W i t h t h i s

t e c h n i q u e , t h e s l i d e is le f t i n e a c h o f th e t h r e e s o l u t i o n s f o r 5

m i n u t e s b e f o r e r i n s i n g a n d a i r d r y in g , r a l

T h e n u m b e r s a n d t y p e s o f a b n o r m a l m o r p h o l o g y a re r e -

c o r d e d a n d p e r c e n t a g e o f n o r m a l d e t e r m i n ed . C o u n t o n l y fr e e

h e a d s , n o t f r e e t ai ls , s W h e n a s p e r m a t o z o a h a s m o r e t h a n o n e

a b n o r m a l i t y , r e c o r d t h e m o s t s e r i o u s o n e . 8

A b n o r m a l i t ie s a r e c o n s i d e r e d a s p r i m a r y o r s e c o n d a r y ( T a b l e

2 ) . P r i m a r y a b n o r m a l i t ie s o c c u r d u r i n g s p e r m a t o g e n e s i s a n d

a r e th e r e f o r e m o r e s e r i o u s . S e c o n d a r y a b n o r m a l i t ie s m a y o c c u r

d u r i n g p a s s a g e t h r o u g h t h e e p i d i d y m i s o r d u r i n g c o l l e c t i o n a n d

p r e p a r a t i o n o f t h e s l i d e , s

N o r m a l s e m e n s a m p l e s s h o u l d h a v e < 1 0 p r i m a r y a b n o r -

m a l i t i e s a n d < 2 0 s e c o n d a r y a b n o r m a l i t ie s . S , 2 ,r ,9 . T o t a l a b n o r -

m a l i t ie s s h o u l d b e < 2 0 - 3 0 . ~ ,2,r,9 T h e t o t a l n u m b e r o f n o r m a l

s p e r m i n t h e e j a c u l at e is d e t e r m i n e d b y m u l t i p l y i n g t h e p e r c e n t

o f n o r m a l s p e r m b y t h e t o t a l s p e r m n u m b e r a s c a lc u l at e d

a b o v e . 9

C y t o l o g y

C y t o l o g y o f th e s p e r m - r i c h a n d p r o s t a t i c f r a c t io n s s h o u l d b e

e v a l u a t e d s e p a r a t e ly . T h e r e a r e s e v e r a l w a y s t o p r e p a r e t h e

c y t o l o g y sl id e . O n e w a y i s t o c e n t r i f u g e 0 .3 t o 0 . 5 m L o f s a m p l e

a t 1 2 0 g f o r 7 m i n u t e s , r T h e s l id e i s m a d e f r o m t h e r e s u l t i n g

p e l l e t a n d s t a i n e d w i t h D i f f q u ic k a s f o r a n y c y t o l o g i c p r e p a r a -

1 6

JONI L FRESHMAN


4/4

t i o n .r A l t e r n a t iv e l y , a s li d e c a n b e m a d e f r o m t h e w h o l e s a m p l e ;

h o w e v e r , f e w e r c e l l s w i l l b e s e e n . 9

N o r m a l c y t o lo g y o f t h e s p e r m - r i c h f r a c t i o n c o n t a i n s s p e r m a -

t o z o a , w h i t e b l o o d c e i l s ( W B C ) ( 2 - 4 / h p f ) , e p i t h e l i a l c e l l s , b a c -

t e ri a , a n d r e d b l o o d c e ll s, r I n c r e a s e d o r d e g e n e r a t e W B C o r

i n t r a c e l l u l a r b a c t e r i a i n d i c a t e i n f e c t i o n . P r o s t a t i c f l u i d a ls o c o n -

t a i n s e p i t h e l i a l c e i ls , b a c t e r i a , a n d W B C ( 2 - 4 / h p f ) . r I n c r e a s e d

r e d b l o o d c e ll s m a y i n d i c a t e p r o s t a t i c d i s ea s e o r b l e e d i n g f r o m

p e n i s o r p r e p u c e . 8

Semen ulture

S e m e n i s n o t s t e r i l e . A w i d e v a r i e t y o f n o r m a l f l o r a i s p r e s e n t , s r

W h e n c u l t u r e i s d o n e , e f f o r t s h o u l d b e t a k e n t o d e c r e a s e c o n -

t a m i n a t i o n . C o l l e c t p a r t o f t h e s a m p l e i n t o a s te r i l e v i a l . B e f o r e

c o l l e c t i o n , c l e a n t h e p r e p u c e a n d t i p o f p e n i s w i t h s t e r i l e s a l i n e

m o i s t e n e d g a u z e .1 C u l t u r e o f t h e d i s ta l u r e t h r a t o c o m p a r e f l o ra

m a y a l s o b e u se f u l. G r e a t e r t h a n 1 0 , 0 0 0 c f u o f a e r o b i c b a c t e r i a

p e r m L o f s e m e n i n d i c a t e s i n f e c t io n . ~ r A n a e r o b e s a r e n o t c o m -

m o n i n c a n i n e s e m e n . I f t h e y a r e s u s p e c t e d , a n a l i q u o t o f s e m e n

s h o u l d b e i m m e d i a t e ly i n o c u la t e d i n t o A n a t r a n s m e d i a a n d

t a k e n t o t h e l ab . M y c o p l a s m a i s a n o r m a l f i n d i n g in t h e d i s t a l

c a n i n e r e p r o d u c t i v e t r a c t . H o w e v e r , i t c a n c a u s e p r o b l e m s i f

p r e s e n t i n e x c es s a m o u n t s . M y c o p l a s m a a n d u r e a p l a s m a c a n b e

c u l t u r e d b y i n o c u l a t i n g s e m e n i n t o A m i e s T r a n s p o r t M e d i a

( D i f co L a b o r a t o r i e s , D e t r o i t, M I ) a n d s h i p p i n g i t to t h e l a b o r a -

t o r y o v e r n i g h t , s N o m o r e t h a n 2 4 h o u r s s h o u l d e l a p s e b e f o r e

c u l t u r e .

A l k a l i n e P h o s p h a t a s e

A l k a l i n e p h o s p h a t a s e ( A L P ) i s p r o d u c e d i n t h e e p i d i d y m i s . 15

T h i s m a k e s i t a n e x c e l l e n t m a r k e r f o r p a t e n c y o f t h e d u c t a l

s y s te m . I n a n a z o o s p e r m i c s e m e n s a m p l e , m e a s u r e m e n t o f A L P

i s e s s e n ti a l in d e t e r m i n i n g i f t h e a z o o s p e r m i a i s d u e t o p r o b -

l e m s w i t h l i b i d o , t e s t i c u l a r f a i l u r e , o r d u c t a l b l o c k a g e . H ,1 5 I n

n o r m a l s e m e n s a m p l e s , t h e A L P h a s a r a n g e o f 5 , 0 0 0 t o 4 0 , 0 0 0

U / L . M W i t h a c o m p l e t e c o l l e c t i o n , a l o w A L P i n d i c a t e s d u c t a l

b l o c k a g e , w h e r e a s a n o r m a l A L P i n d i c a t e s t e s t i c u l a r f a i l u r e .

A n i n c o m p l e t e c o l l e c ti o n c a n a l so r e s u l t i n l o w A L P .

S e r u m A L P a ss a y s c a n b e u s e d t o m e a s u r e s e m e n A L P . D i l u -

t i o n w i l l b e n e c e s s a r y f o r n o r m a l s a m p l e s . 1~

S l l l l n I l a r y

S e m e n c o l l e c t i o n a n d e v a l u a t i o n i s a v a l u a b l e s e r v i c e t h a t c a n

r e a d i l y b e p e r f o r m e d i n p r i v a t e p r a c t ic e . A t t e n t i o n t o t h e d o g s

c o m f o r t a n d t h e p r e s e n c e o f a t e a s e r b i t c h m a x i m i z e c o l l e c t i o n

q u a l it y . M u l t i p l e c o l l e c t io n s m a y b e n e e d e d t o t r u l y e v a l u a t e

t h e d o g . D e t a i l e d e v a l u a t i o n o f s e m e n , a s d i s c u s s e d h e r e , w i l l

e n a b l e t h e v e t e ri n a r ia n t o p r o v i d e p r e b r e e d i n g a n d p r e p u r c h a s e

a s s e s s m e n t , d e c i d e v i a b i l i t y f o r f r e s h , c h i l l e d a n d f r o z e n a r t i f i -

c i al i n s e m i n a t i o n , a s s e s s in f e r t il i ty c a s e s , a n d m o n i t o r r e s p o n s e

t o t r e a t m e n t .

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Freshman2002 Semen Collection