NUCLEOTIDOS

Fases Mviles

Fase Mvil A: Buffer Fosfato 0,1 M y 4 milimolar de tetrabutil amonio pH = 6 (llevar con KOH)

PARA PREPARAR 2 litros de SOLUCIN de BUFFER

1) Solucin I: PO4H2K 0,2 M

PM = 136,09

Pesar 27,218 g y diluir y llevar avolumen con Agua Milli Q en matraz de 1 litro

2) Solucin II: PO4HK2 0,2 M

PM = 174,18

Pesar 6,9672 g y diluir y llevar avolumen con Agua Milli Q en matraz de 200 ml (o pesar 8,709 g para matraz de 250 ml)

3) Tetrabutilamonio 4 milimolar

Pesar 2,7162 g

Preparacin del Buffer Fosfato 0,1 M pH = 6

Colocar en matraz de 2 litros: 877 ml de la Solucin I: PO4H2K 0,2

+ 123 ml de la Solucin II: PO4HK2 0,2 M

agregar 2,7162 g de Tetrabutilamonio

llevar a volumen con Agua Milli Q.

Llevar a pH = 6 con KOH.

Filtrar solucin final.

Fase Mvil B: Metanol-Agua Milli Q, 70:30 pH = 7,2

PARA PREPARAR 1 litro DE SOLUCIN

Metanol 700 ml + 300 ml de Agua Milli Q

Llevar a pH con HCl diludo

(en cajita de alfajores de la colonia arriba del armario de metal de Clarisa, estan los frasquitos con el KOH y el HCl para llevar a pH las soluciones)