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ESTUDIO DE LIQUIDOS
BIOLOGICOS
LIC. TM DAVID G. QUISPE ARANDA
2008
ESPERMATOGRAMA ( ESPERMIOGRAMA)
I. EXAMEN MACROSCOPICO ( Características Físicas )
VOLUMEN Normal 2 – 6 ml ( 3 – 5 días de abstinencia ) Polisemia > 8 ml Oligosemia < 2 ml
LICUEFACCION Normal 15 minutos tras emisión Aumentada > 15 minutos tras emisión
COLOR Normal blanquecino – opalescente Amarillento Proceso supurativo ( piosperma ) Prolongada abstinencia sexual Rosado-Rojizo Sangre
PH Normal 7.3 – 7.4 Variación Fisiológica 7- 8.1 prostatitis
> 8 infl. de glándulas sex. vesiculitis epididimitis
Pat
< 8 oclusión de conductos eyac ( patol. crónicas )
VISCOCIDAD Se observa el deslizamiento del semen desde la punta de unapipeta pasteur de forma que si su viscosidad es normal cuandocae gota a gotaDisminución - ausencia de coagulación espontáneadel liquido seminal ( disminución de espermatozoides oausencia de espermatozoides )Aumentada - anulación total de progresiónespermática en el moco cervical
FILANCIA
El semen forma un filamento de hasta 1 cm al introducir unavarilla fina o una asa de siembra y retíralo suavemente.Aumentada - filamento > 1 cm ( semen nolicuado o viscosidad aumentada
Recuento VASECTOMIAII. EXAMEN MICROSCOPICO Movilidad Índice de vitalidad Estudio morfológico
1. EXAMEN DIRECTO Observación en fresco en lamina P-O Presencia y ausencia de esper. y cls espermáticas Concentración aproximada de esp.
MovilidadObservar Aglutinación de espermatozoides Formas anormales de esp. Leucocitos, hematíes Cristales de fosfato de espermita ( agujas)
2. ESTUDIO DE MOTILIDAD
Se valora observando varios campos ( 40 x), contando por lo menos200 espermatozoidesSe registrar el porcentaje total de espermatozoides que presentanmovilidad y el porcentaje de inmóvilesSe debe hacer el porcentaje cualitativo ( % ) de la motilidadclasificando los espermatozoides según categoríasOtra forma de clasificarlos es según :
• Movilidad activa ------ avanzan• Movilidad pasiva------- se mueven pero no avanzan
SE REALIZA CUANDO EL SEMEN ESTA YA LICUADO
Portaobjetoscalentado a 37
º
Depositar unagota de muestra
Cubrir concubreobjetos
Observar con elobjetivo 40 x
3. INDICE DE VITALIDAD
Estudio de Necrospermia ( espermatozoides muertos )Estudio complementario de la motilidad – distingue dentro del grupo de formasmóviles las vivas de las muertas
Los resultados se expresan como % de espermatozoides teñidos
Normal ------ coloración con eosina < 40 % Patológica --- ( infertilidad ) > 40 %
4. RECUENTO
1. homogeneizar muestra2. Dilución de la muestra 1/20 ( diluyente macomber – saunders )3. Llenar cámara de Neubauer – reposar 2 minutos ( cámara húmeda)4. Observar muestra 10 x – 2 cuadrados de leucocitos5. Calculo ( espermatozoides / ml )
% de teñidos < % de inmóviles
Después de licuefacción del semen
• Movimiento rápido y rectilíneo categoría a
• Movimiento progresivo pero menor o no rectilíneo categoría b
• Movimiento sin progresión categoría c
• Inmóviles categoría d
Interpretación Clínica
NORMAL 60-50 % movilidad
ASTENOSPERMIA Menos de 50 % de formas móviles a las 2 horas
NECROSPERMIA Todas las formas carecen de motilidad
Sol. eosina
Sol. nigrosina
Depositar 1 gota demuestra y 1 gota de
sol. Eosina .Homogeneizar 20 “
Añadir una gota desol. De nigrosina
Homogeneizar
Tapar con el cubreprocurando no hacer
burbujas
Observar con elobjetivo de 40 x
Hasta 11 condiluyente 0.5 muestra
Llenado de la pipeta de thomaDilución 1/20
Llenado de la cámara de Neubauer ysedimentación de los espermatozoides encámara húmeda
Zona derecuento
Nº de espermatozoides contados = NC
Normal = 50 – 120 millones de espermatozoides / ml
5. FORMULA ESPERMATICA
Valora el potencial fecundativo junto con el numero total de espermatozoides ysu motilidad. Se valora los tipos de espermatozoides normales y anormales enextensiones teñidas también se observa células de espermiogenesis
Nº espermatozoides / ml =NC x 100 000
CLASIFICACION DEL SEMEN EN FUNCION DEL NUMERO DE ESPERMATOZIDES
HIPERESPERMIA Superior a 250 millones / ml
NORMOSPERMIA De 20 a 250 millones / ml
OLIGOSPERMIA De 1 a 20 millones / ml
AZOOSPERMIA Ausencia de espermatozoides madurosPresencia de células de espermiogenesis
ASPERMIA Ausencia de espermatozoidesAusencia de células de espermiogenesis
NORMAL
ANOMALIASDE LA
CABEZA
• Cabezas duplicadas• Cabezas gigantes• Cabezas pequeñas• Cabezas redondas• Cabezas alargadas• Cabezas amorfas• Cabezas encogidas
ANOMALIASDEL
CUELLO
• Engrosado• Largado• Inmaduro• Ausente
ANOMALIASDE LA COLA
• Bifida• Mal implantada• Enrollada• Ausente
Depositar 1gota de muestraen un extremo
Hacer unaextensión
Cubrir conalcohol metilico 5minutos y dejar
secar
Cubrir conwrigth durante
4 minutos
7.2
Diluir con aguade ph 7.2 , 4
minutos
Lavar conagua
destilada
Cubrir congiemsa
diluido 12minutos
*Lavar con agua
corriente
suavemente
*Secar
*observar con
objetivo 100x
Giemsa
Se registran los porcentajes de espermatozoides normales y anormales y dentrode estas ultimas el tipo de anormales encontradas y su proporción (anormalidades en cola, cabeza y cuello ) . También se informa de la presenciade células de espermiogenesis y teratogenas , células sanguíneas y cualquierotro tipo de células que se pueden observar .
Normal – índice de malformaciones < 30 %Patológica - > 40 % ( teratospermia esterilidad definitiva ) Liquido seminal hipofecundante - alteraciones morfológicas 30 – 40 % Aumento de cls. Descamación (uretra – próstata) / uretritis – prostatitis
III. EXAMEN QUIMICO
Dosificación de ciertos compuestos secretados por :
Vesículas seminales - fructosaPróstata - acido cítrico, fosfatasa acida, zinc ( act. Bacteriana)Epidídimo - carnitina
EXAMEN MICROSCOPICO RANGO NORMALNumero de espermatozoides Mayor de 25 millones / ml
Movilidad Mayor de 50 %
Vitalidad Mayor de 50 %
Espermatozoides normales Mas de 70 %
Alteraciones de cabeza 18 %
Alteraciones de cuello 5 %
Alteraciones de cola 5 %
Alteraciones mixtas 0 – 2 %
Células espermiogenicas y teratogenas 1 – 3 %
Leucocitos 1-2 / campo ( menos de 15/campo )
Eritrocitos Ausentes
Otras células 0 – 0.5 %
Hallazgos en el liquido seminal en las patologías mas frecuentes
Hallazgos en el liquido seminal PatologíasVolumen, recuento y motilidad disminuidos • Infertilidad
Licuación• Inflamación de próstata• Inflamación de vesículas seminales
Viscosidad elevada • Función prostática defectuosa BlancoColor alterado Claro Rojo
• Infección• Oligospermia• Sangre
Motilidad y recuento disminuidos ( menos del50 % de movilidad a las 2 horas )
• Lesión de los testículos• Lesión del epidídimo
AspermiaDisminución delNumero de OligospermiaEspermatozoides con motilidad y morfología normal
• Insuficiencia testicular de excreción• Oclusión de conductos deferentes
• Lesión en los testículos• Trastorno en el mecanismo eyaculat• Estenosis de los conductos deferentes• Periodo corto de abstinencia sexual
Morfología alterada
Infertilidad debida a :• Orquitis por parotiditis• Mala nutrición• Medicamentos• Radiaciones• Exceso de calor local ( rop apretad)• Cirugía• Infección de conductos deferentes• Criptorquidia• Aplasia germinal• Defectos hormonales (hipofisiarios, tiroideos)
Aumento de leucocitos
• Prostatitis• Uretritis• Epididimitos• Orquitis
Presencia de eritrocitos o hemoglobina• Traumatismo• Tumor maligno del tracto genital• Daño renal
Acido cítrico disminuido• Inflamaciones prostáticas• Neoplasias prostáticas
Fructosa disminuida• Falta de estimulación hormonal• Trastorno funcional de las vesículas seminales
ESTUDIO DEL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
I. TOMA DE MUESTRAEstéril ( cultivo )
VOLUMEN ( 2.5 – 5 ml ) Heparina ( citológico )
3 tubos Fluoruro de sodio ( bioquímica )
HOJA DE INFORME DE UNA ANALISIS DE LIQUIDO SEMINALCONDICIONES DEL EXAMEN
Hora de eyaculacion……………….. Método de obtención …………………….Hora de examen …………………… Abstinencia sexual ………………….........Tiempo de transporte ……………… Ultimo proceso febril …………………….
EXAMEN MACROSCOPICOVolumen………………………....... Aspecto …………………………………..Color……………………….........… Licuación………………………............….Olor………………………...……… Filancia………………………...………….Viscosidad………………………… Ph………………………...……………….
EXAMEN MICROSCOPICO
PREPARADO DE ORIENTACIONEspermatozoos……………………. Aglutinación………………………………Células……………………………. Cristalización……………………………...Espermiofagia…………………….. Leucocitos por campo…………………….
NUMERO DE ESPERMATOZOIDES POR ML……………………………………..MOVILIDADInmóviles…………………………%Movilidad total …………………...% Activa………….% Pasiva …………%VITALIDAD Espermatozoos teñidos ……………………………% Índice de vitalidad…………………………………%
ESPERMIOCITOGRAMA Espermatozoos normales…………….…% Espermatozoos anormales……...…….…% Alteraciones de cabeza……...………% Macros ………..% Micros ………% Alteraciones de Seg. Int……………..% Alteraciones de cola……...…………% Alteraciones mixtas……...……….…% Células de espermiogenesis …………. Leucocitos……………………………. Otras células………………………….
BIOQUIMICA
Fructosa………………………..……..mg/dl Acido cítrico………………..mg/dlFosfatasa acida……………………….UI/ml Zinc………...……………….mg/dl
DIAGNOSTICO………………………………………………………
Análisis a realizar en una muestra de LCR
ANALISIS
EXAMEN FISICO Estudio de caracteres organolépticosEXAMEN
CITOLOGICORecuento y diferenciación de célulassanguineas y tisulares
EXAMEN QUIMICO Determinaciones de metabolitos y Ph
EXAMENMICROBIOLOGICO
Demostración del germen causal o deetiología infecciosa
EXAMENINMUNOLOGICO
Detección de antigenos y anticuerpos
Bioquímica Microbiología Citología
II. EXAMEN FISICO
Normal : liquido / límpido / cristalino / transparente ASPECTO Anormal :Turbio / empañado / opalescente / sanguinolento Se expresa la turbidez en cruces ( 0-4)
Cuando hay aumento de proteínas ( exceso de fibrinogeno )pueden aparecer coágulos
COLOR Normal : incoloro Anormal : rojizo – hematíes Oxihemoglobina Amarillo (xantocromico) :pigmento Metahemoglobin Bilirrubina
III. EXAMEN CITOLOGICO Leucocitos mononuclearesMalignas
Células (escasas) Plasmáticas Macrófagos Glias . Ependimarias
1. RECUENTO CELULAR TOTAL
1. Homogenizar muestra . Diluir ( muestra ) si esta turbio2. Llenar cámara de Neubauer3. Observar muestra ( 10x ) se cuentan los 4 cuadrados grandes de las
esquinas .
4. Calcular leucocitos / ul ( si no hay dilución )Nº de células contadas = NC
Normal < 5 células / ul Monocitos Aumento PLEOCITOSIS Linfocitos de células
Enfermedades infecciosas inflamación
Características físicas del LCR normal
PARAMETRO VALORES NORMALESVolumen 90 – 200 ml (adultos)
10-60 ml (recién nacidos)Presión 70-200 mm agua( adultos )
50-100 mm agua ( niños )Color TransparentesTurbidez InexistenteViscosidad Similar a la del aguaDensidad 1,005-1,008pH 7,4 - 7,5
Procesos Infecciosos-TURBIDEZ-
Leucocitos Eritrocitos Microorganismos
Se diferencia una hemorragia traumática porpunción, cuando al centrifugar la muestra y se
observa el sobrenadante este esta claro.
Examen dentro de la primera media hora de extracciónpues las alteraciones celulares aparecen rápidamente
Nº células / ul = NC / 4 x 10
Retículo de la cámara de Neubauer.Zona de recuento
Dirección del contaje de leucocitos. Secuentan los dos leucocitos sobre las
líneas gruesas
1. RECUENTO DIFERENCIAL
Indica el porcentaje de Liquido Turbio Frotis directo del LCRmononucleares ypolimorfonucleares Liquido transparente Concentrar el LCR
1. Concentración celular ( centrifugación suave por 15 minutos2. Tinción con wrigth3. Observación al microscopia ( 100 X) se cuentan los diferentes tipos de
células y se expresa en porcentaje.
III. EXAMEN QUIMICOSangre ( difusión )
1. PROTEINAS Origen SNC ( síntesis )
METODO TURBIDIMETRICO ( precipitación de proteínas )
1. Mezclar en un tubo LCR (sobrenadante de la centrifugación ) y reactivo tricloroacetico al 3% en partes iguales
2. Reposar 10 minutos3. Leer absorbancia 500 nm frente al blanco de agua destilada4. La Absorbancia leída es proporcional a la concentración de
Proteínas
Normal : 0.2 - 0.4 gr /L Recién Nacidos : aumentan ( 5to – 6to mes ) > 40 años : aumentan mayor de 0.6 gr/L ******Procesos infecciosos que afectan al SNC aumenta la
concentración de Proteínas del LCR ******
Resultados del análisis citológico en diferentes patologías
EXAMEN CITOLOGICO PATOLOGIAS ASOCIADAS
RECUENTO
TOTAL
Pleocitosis moderada10-30celulas/mm3
Meningitis tuberculosaEncefalitis
Tumores del SNCPleocitosis acentuada
100-10,0000celulas/mm3 Meningitis purulentaPleocitosis extrema
Hasta 50,0000celulas/mm3 Roturas de abscesos cerebrales
RECUENTO
DIFERENCIAL
Predominio de neutrofilos Meningitis purulenta
Predominio de linfocitos
Meningitis tuberculosa y bacterianatratada
Meningitis víricas y sifilíticaMeningitis nicóticas
Síndrome de Guillain Barre
Presencia de eosinofilos Meningitis de origen parasitario
Presencia de célulasplasmáticas con linfocitos
Procesos inflamatorios crónicosEsclerosis múltiple
Presencia de histiocitosmalignos
Tumores cerebrales
Presencia de macrófagos Infartos cranealesSustancias extrañas en LCR
Proteinorraquia Patologías Causas
AUMENTO Siempre que haya
Sangre
Pus
HemoglobinaProteínas plasmáticas
Proteínas celularesExudado por meningesinflamadas
AUMENTO
LIGERO
Inflamación de tejidos cerebralesEsclerosis múltipleEncefalitis , polineuritisMeningitis tuberculosa y luéticaAlteraciones vascularesProcesos tumorales
Exudación por la inflamaciónAumento del contenido celularObstrucción de la circulación
AUMENTO
IMPORTANTE
Bloqueo del canal espinalMeningitis infecciosaAbscesos cerebralesSíndrome de Guillain-Barre
Estasis en la resorción del LCRMayor permeabilidad de labarrera sangre-LCRDegeneración tisular
La concentración de proteínas en el LCR son20 veces menor que las del plasma
2. GLUCOSA
Aumenta : diabetes mellitus Disminuye : uso aumentado debido a la presencia de
leucocitos o gérmenes en el LCR
Se realiza por el método enzimático de la glucosa Oxidasa de maneramanual o automatizada ( HITACHI )
difusión de sangre3. LACTATO DESHIDROGENASA gérmenes,
( LDH ) -origen- células ( leucocitos,células Tumorales )
Se utiliza para el diagnostico diferencial de una meningitisbacteriana y víricaAumenta en hemorragias subaracnoideas, leucemias y linfomas ocarcinomas metastáticos del SNC
4. ADENOSIN DESAMINASA ( ADA )
Diagnostico de meningitis tuberculosaValor > 9 U / L
5. TGO
Aumenta en meningitis , hemorragias y tumores
Variaciones de la glucorraquia en diversaspatologías
Glucorraquia Patologías
DISMINUIDA
Meningitis purulentas
Meningitis tuberculosa
Carcinomas meníngeos
Hipoglucemia
NORMAL Infecciones virales
Meningitis no infecciosa
AUMENTADA Diabetes mellitus
La concentración de glucosa es la mitad de losniveles sanguíneos ( 50 – 80 mg / dl )
Reacción de PANDY : colocar en un tubo 2 mlreactivo ( 10 gr fenol /100 ml agua destilada-estufa 37ºC 2 – dias. Tomar el sobrenadante ) , yagregar 1 gota de LCR.Normal – no hay turbidez o ligera turbidezAnormal – turbidez lechosa ( aumento deglobulinas ). Hemorragia, alteracionesinflamatorias o degenerativas, meningitis TBC osifilítica .
N = normal E = Elevado ME = Muy ElevadoMME = Muy Muy Elevado D = Disminuido MD = Muy Disminuido
Perfiles analíticos del LCR en diversas patologías del SNC
Patología Aspecto Células Proteínas Glucosa Cloruros Presión Otros
Normal Claro De 2-5 mm3.
Linfocitos
50-80mg/dl
120-130mmol/l
70-200mm
H2O
Meningitisbacteriana
Turbioamarillocoágulos
MME80-90% de
granulocitosMME MD N o D ME
Meningitisvírica
Claro o ligerocolor amarillo
MEInicialmenteGranulocitos
Despuéslinfocitos
E N N N o E
MeningitisTuberculosa
ClaroRaramente
turbio
ELinfocitos ME D MD E Bacter
+
MeningitisSifilítica
Incoloro.A vecescoágulos
10-1000cel/mm3linfocitos
E N o D N MEPbas
Serolo+
Hemorragiacerebral
SanguinolenHematíes ensedimento
Xantocromia
25-2000Predominiolinfocitos
MME N o E N o D E
Abscesocerebral
Claro o turbioPredominan
PMN alinicio.
Despuéslinfocitos
E N o E N o E E
Trombosiscerebral Claro N o E N o E N o E N o D E AST
Elev.
Esclerosismúltiple
Claro EPredominan
linfocitos
ElevadasPT/IgGElevadaA/GT
Oligoclonal
N N E
TumorCerebral
Incoloro oXantocromico
N o EPredominan
linfocitosN o ME N N E Celu.
tumor
Muy hemorragicoen 3 tubos sucesivos
Muy turbio
Claro opoco turbio
PROTEINAS
Xantocromico
GLUCOSA
PROTEINAS
ESTUDIO DEL LIQUIDO SINOVIAL
1.Características Físicas 2. Bioquímica 3. Citología 4. Estudio de cristales 5.Examen bacteriológico 6. Examen inmunológico
I. EXAMEN FISICO.
1. ASPECTO Normal amarillo pálido – casi incoloro
Hoja informe de un análisis de LCRMuestra : liquido cefalorraquídeo
VOLUMEN EXTRAIDO :PRESION :ASPECTO :COLORACION :PIGMENTOS :DENSIDAD :
EXAMEN CITOLOGICO CRITERIOS DE VALORACION
LEUCOCITOS TOTALES :MononuclearesPolinucleares
Hasta 5/ ulHasta 5/ ul
Menos de 1/ulHEMATIES :OTRAS CELULAS :
AusenciaAusencia
BIOQUIMICA CRITERIOS DE VALORACION
PROTEINAS TOTALES 0,15-0,40 g/LPROTEINOGRAMA
Pre-albuminaAlbuminaGlobulinas totalesAlfa-1Alfa-2BetaGammaCociente A/GT
3-7%50-70%20-45%3-8%
4-10%7-12%4-12%Hasta 8
GLUCOSAAdultos :0.4-0.75 g/L
Niños : 0.5-0.8g/LCLORUROS 120-130mmol/LLACTATO 1.1-2.8 mmol/LTGO 7-45 mU/mLADA Hasta 5 U/L
INMUNOLOGIA CRITERIOS DE VALORACION
AntiVIH NegativoFTA-ABS No se detectanANTICUERPOSANTIMICROBIANOS
Ausentes
MICROBIOLOGIA CRITERIOS DE VALORACION
Crecimiento de microorganismosEstudio de sensibilidad
Aspecto Normal : amarillo pálido transparente
LECHOSO
Artritis tuberculosaArtritis reumatoide crónicaArtritis gotosaLupus eritematoso
PURULENTOArtritis infecciosaArtritis supurada de otro origen
VERDOSOArtritis por HemophilusSinusitis aguda por gota o pseudo gota
AMARILLO INTENSO Procesos inflamatorios
ROJO SANGUINOLENTO
Artritis traumáticaTumores sinovialesArtropatía neurogenicaDiatesis hemorrágicasPunción traumática
Fragmento
cartílagos
Cristales Fibrina
Procesos
inflamatorio
Aumento de
leucocitos
Patológico
-TURBIO-0- 4 cruces
2. VISCOCIDAD Y FILANCIA
Normal liquido viscoso , pegajoso al tacto
Patológico disminuye la viscosidad
Procedimiento
1. Dejar gotear el liquido desde una jeringa desprovista de laaguja , a un tubo de ensayo
2. Se observa si cae gota agota formando un filamento en sucaída……….VISCOCIDAD NORMAL
***FILANCIA Estudio complementario de la viscosidad
Procedimiento1. S coloca una gota de liquido sinovial entre el dedo pulgar
y el dedo índice y se presiona2. Se separan los dedos3. Se debe observar un filamento de 3 a 6 cm de longitud
PRUEBA DEL COAGULO DE MUCINA
1. Colocar en un tubo 2 ml de acido acético 10 %2. Adicionar una gota de liquido sinovial3. Normal, si se observa un coagulo o precipitado firme
Patológico , si el coagulo es blando que se fragmentafácilmente o se observa una suspensión turbia sincoagulo. ( enfermedades inflamatorias activas )
II. EXAMEN CITOLOGICO
1. RECUENTO CELULAR
Normal 10 – 200 células / ul ( casi todos leucocitos )
Patológico > 200 leucocitos / ul
Procedimiento
1. Homogeneizar muestra2. Dilución si es necesario ( 1/20 o 1/50 o 1/ 100 )
Con suero fisiológico al 0.1 % de azul demetileno
3. Reposar 10 minutos, antes de llenar la cámarade Neubauer
4. Llenar cámara de recuento5. Observar al microscopio con 10 x para
comprobar la distribución homogénea. Observarcon 40 x y se cuentan 4 cuadrados grandes delas esquinas ( leucocitos)
6. Calculo : Nº de células contadas = NCVISCOSIDAD NORMAL :Elevada aunque depende de la articulación
DISMINUIDA EdadDerrames articulares inflamatoriosInfecciones
SE MANTIENE ELEVADA Derrames traumáticosDerrames de las artrosis
Una filancia disminuida se observa cuando elfilamento formado es menor de a 3cm
Nº células(leucocitos) / ul = NC x2.5x Dilución ( inversa)
Si el liquido sinovial es hemorrágico, lisar hematíesutilizando una solución hipotónica (0.3% ),Hematíes de cuantifican de manera cualitativa , ausenciao presencia ( escasos, abundantes , muy abundantes )
2. RECUENTO DIFERENCIAL.
Polimorfonucleares 7 – 10 % ( aceptable hasta 25 % )
Mononucleares 70 % Linfocitos 15 - 35 % Monolitos 35 - 55 %
Células sinoviales 3 – 5 %
Células plasmáticas 10 %
Otras células hasta 7 %
Procedimiento
1. Tinción directa de liquido sinovial o tinción del sedimento obtenida por centrifugación2. Elaboración del frotis3. Tinción – Wrigth4. Estudio morfológico celular – 100 x
Normal < 25 % PMNPatológico Aumento de PMN ---- Inflamación e infecciones
articulares.
III. INVESTIGACION DE CRISTALES.
El liquido sinovial debe recogerse sin anticoagulantes o preservantes ( EDTA uOxalato de calcio ) porque pueden formar cristales que pueden dar falsosresultados .En el procedimiento para observar cristales :
1. Se utiliza un microscopio óptico convencional. Tambiénse puede utilizar un microscopio de luz polarizada,donde los cristales se observan mas brillantes ybirrefrigentes.
2. Se deposita una gota de liquido en una lamina portaobjetos limpio.
3. Se cubre con una laminilla cubre objeto, realizando unaligera presión
4. Se absorbe el liquido sobrante con papel filtro5. Se sella con barniz el borde de la laminilla para evitar la
desecación6. Observa al microscopio ( 40 x)
CELULAS AR…. Leucocitos PMN coninclusiones citoplasmáticas abundantes y oscurasque contienen IgG e IgM ( FR ).Se presentan en pacientes con Artritis reumatoide (no son especificas de esta patología ), gota, artritissepticas .
CELULAS LE ….Son neutrofilos cuyas vacuolascontienen material nuclearSe presentan en la artritis del Lupus Eritematoso.
Urato monosodico
Hidroxiapatita
Pirofosfato calcico
Colesterol
IV. EXAMEN QUIMICO
1. PROTEINAS Normal : 15 – 30 gr / L artritis reumatoide Artritis séptica Patológico : procesos articulares gota
Artritis - TBC
Se realiza de manera automatizada ( HITACHI )
2. GLUCOSAConcentración similar al plasma sanguíneo oLigeramente menorSi disminuye a la mitad sugiere infección bacteriana
Se realiza de manera automatizada ( HITACHI )
3. LDHIndica alguna inflamación
> de 30 mg/dl …inflamación
CRISTAL ESTRUCTURA PATOLOGIA
URATO
MONOSODICOAlargados con forma de agujas de tamaño variableBirrefringencia positivaAbundantes en el líquidos sinovial de las articulacionesInflamadas flotando libres o en el citoplasma de neutrofilos
GOTA
PIROFOSFATO
CALCICO
Tienen forma de barra, bastones o romboides.Localizados dentro de los leucocitos y fuera de ellosPueden ser muy escasosBirrefringencia positiva
PSEUDOGOTA
HIDROXIAPATITA
Brillantes con el contorno irregular y de muy pequeñotamaño.Forma de vara o aguja. Aislados solo visibles al microscopioelectrónico. Se ven agregados en masas brillantes nobirrefringentes en derrames
ARTRITIS
COLESTEROL La forma habitual es en placas finas. En procesos crónicos,forma de agujas o romboides.Tamaño mayor que los anteriores
ARTRITISREUMATOIDE(ocasionalmente)
MUESTRA LIQUIDO SINOVIAL
Procedencia:………………………...………………………...…………………….Presencia de derrame………………………...………………………...……….……Volumen extraído ………………………...………………………...………………Aspecto………………………...………………………...……………………….....Viscosidad /Mucina………………………...………………………..........................
EXAMEN CITOLOGICO
LEUCOCITOS TOTALES………………..neutro/mm3 hasta 200 Mononucleares ………………………...% 75 – 90 % Polinucleares ………………………...…% 10 – 25 %
FORMULA LEUCOCITARIA
Segmentados…………..…..% 5 – 10 %Cayados…………………....% 0 – 1 %Eosinofilos………………...% 0 – 1 %Linfocitos……………….…% 15 – 35 %Monolitos……………….…% 35 – 55 %Plasmocitos………………..% 8 – 10 %Fagocitos…………………..% hasta 7 %Células sinoviales………….% hasta 5 %
HEMATIES ..…………………… Ausentes
CRISTALES
Presencia de : …………………... Ausentes
EXAMEN QUIMICO
Glucosa …………………….... g/l 0.55 - 1.0 g/l
Proteínas totales …………….. g/l 5 – 30 g/l
Lactato ………………….….. mg/dl 20 – 30 mg/dl
MICROBIOLOGICO
Sedimento………………………...………………………...………………………...
Cultivo………………………...………………………...………………………........
INMUNOLOGICO
Complemento………………………...………………………...…………………….
Hallazgos en el LIQUIDO SINOVIAL en las patologías mas frecuentes
TIPOSValores
Normales
No
inflamatorio
InflamatorioSéptico Hemorrágico
Aspecto
Color
Viscosidad
Leucocitos
% de PMN
Proteínas g/l
Glucosa
Cristales
Gérmenes
Transparente
Claro
Elevada
Menor de 200
Menos del25%
15 – 30
Similar a
glucemia
No
No
Transparente
Amarillento
Elevada
20-2000
Menos del25%
15 – 30
Similar a
glucemia
No
No
Turbio
Amarillo
Disminuida
2000-75000
Mas del 50%
Mas de 30
Reducida
Si
No
Purulento
Amarillo7marro
Disminuida
Mayor100000
Mas del 75 %
Mas de 30
Muy reducida
No
Si
Turbio
Rojizo
Elevada
Hematíes
Según sangre
Mas de 30
Similar a glucemia
Si
No
PATOLOGIAS
*Artrosis
*Artropatías
postraumáticas
* Artropatías
nerviosas
* Artropatías
metabólicas
*Osteonecrosis
*Artritis por
cristales
*reumatismos
inflamatorios
*Artritis sépticas *Traumatismos
articulares
*Diatesis hemorrágicas
*Artropatías
neuropaticas
*Neoplásicas
ESTUDIO DEL LIQUIDO PLEURAL , PERICARDICO
Y PERITONEAL
TRASUDADO EXUDADOInsuficiencia congestiva Infección bacteriana o
nicóticaCirrosis hepática Neoplasia
HIpoproteinemia ( síndromenefrotico)
TraumatismoEnfermedad Reumatoidea
Lupus EritematosoSistémico
FISICO Observación del aspecto
ANALISIS DE
LOS
DERRAMES
SEROSOS
CITOLOGICORecuento de hematíesRecuento de leucocitosRecuento diferencial
BIOQUIMICO Proteínas totalesADA
MICROBIOLOGICO
Tinciones , cultivos.Demostración del bacilotuberculoso.Enterobacteriasy anaerobios de tubodigestivo
Las muestras de líquidos serosos se toman contubos heparinizados ( tubos con 2 – 3 gotasheparina sodica 1% con 10 ul de liquido y semezcla rápidamente )
I. EXAMEN CITOLOGICO
1. RECUENTO DE HEMATIES Y LEUCOCITOS
1) Homogenizar muestra . Diluir ( muestra ), si esta turbio2) Llenar cámara de Neubauer3) Observar muestra ( 10x ) se cuentan los 4 cuadrados grandes de las esquinas .
4) Calcular leucocitos / ul ( si no hay dilución )
Nº de células contadas = NC
2. RECUENTO DIFERENCIAL O ESTUDIO MORFLOGICO
1. concentración de células por centrifugación lenta ( 10 ‘ )2. Se resuspende el sedimento celular en 1-5 ml de tampón fosfatoisotónico ph = 7.43. Tinción con colorante wrigth4. Recuento diferencial , se distingue el porcentaje de linfocitos,neutrofilos , monolitos y eosinofilos……………..PARA REALIZAR EL ESTUDIO DE CELULASTUMORALES SE UTILIZA COLORACION PAP …………….
ASPECTO PATOLOGIAS
Liquido
Pleural
Transparente.Amarillo palido.Volumen < 20 ml Normal
Transparente.Amarillo palido.Volumen > 20 ml Insuficiencia cardiaca congesti
Turbio purulento
Aumento del numero de leucocitos
Inflamación séptica o no
Infección bacteriana
Tuberculosis
Enfermedades Reumatoideas
Lechoso
Derrame quiloso Quilotorax
Hemorrágico
*Si la sangre procede de la punción traumática ,
no esta uniformemente distribuida*
Neoplasia de pulmón
Neumonía
Traumatismo toracico
Infarto pulmonar
Pancreatitis
Liquido
Pericardico
Transparente.Amarillo palido.Volumen < 50 ml Normal
Turbio
Empañado
Peritonitis
Infección bacteriana
Traumatismo
Verdoso
Presencia de bilis
Prueba de bilirrubina para confirmar
Ulcera duodenal perforada
Intestino perforado
Colecistitis o vesícula perforada
Pancreatitis aguda
Lechoso
Derrame quiloso
Obstrucción linfática
Síndrome nefrotico
Hemorrágico
*Diferenciar de manchas de sangre * Neoplasia
Purulento Patología infecciosa
Mucinoso Seudoxantoma peritoneal
Liquido
Peritoneal
Hemorrágico
PericarditisInfección bacteriana. Tubercul.Artritis reumatoidea .LECarcinomaAneurisma hemorrágico
Lechoso
Derrame quiloso
Obstrucción del conducto torác
Purulento Infección bacteriana.
Nº células / ul = NC / 4 x 10
Retículo de la cámara de Neubauer.Zona de recuento
Dirección del contaje de leucocitoscuentan los dos leucocitos sobre las
líneas gruesas
II. EXAMEN QUIMICO
LIQUIDO PLEURAL
- Proteína equipo automatizado ( HITACHI ) - ADA Pleuritis TBC > 45 U/L - Glucosa equipo automatizado ( HITACHI ) Anormal < de 60 mg/dl o 40 mg/dl menor que la
glucosa serica Disminuye exudado Normal trasudado
-Triglicéridos equipo automatizado ( HITACHI )Liquido pleural lechoso( QUILURIA )Tg ( < 50 mg/dl ) PseudoquilotoraxColesterol aumenta ( TBC o reumatoideo)
LILIQUIDO ASCITICO
- Glucosa equipo automatizado ( HITACHI )Igual concentración al del sueroDisminuye < 60 mg/dl :peritonitis, carcinomas, TBC
- Fosfatasa equipo automatizado ( HITACHI ) Alcalina Aumenta al doble en una perforación del intestino
delgado, apéndice perforado.
LILIQUIDO PERICARDICO
- Glucosa equipo automatizado ( HITACHI ) Disminuye : pericarditis bacteriana, Inflamaciones
no sépticas ( enfermedad reumatoide, tumor )
CITOLOGIA PATOLOGIAS
Liquido
Pleural
Hipercelularidad ( >1000 leucocitos/ul)
Linfocitos ( mas del 50% )
Escasez de células mesoteliales
Enfermedades de evolución crónica
Tromboembolismo pulmonar
Hipercelularidad ( >10000 leucocitos/ul)
Predominio de neutrofilos
Enfermedades inflamatorias agudas
(Pleuroneumonias)
Eosinofilia Lesión pleural inespecífica
Células malignas Derrames neoplásicos
Células LE
Raras
Lupus eritematoso sistémico
Liquido
Pericardico
Recuento > 250/uL
Trasudado
Infección o Tumor
Recuento > 500/uL
Mas del 50% neutrofilos
Peritonitis
Peritonitis infecciosa piógena
Celularidad Variable
Presencia de hematíes Tumor
Eosinofilia
Insuficiencia cardiaca congestiva
Linfoma abdominal
Quiste hidatídico desgarrado
LiquidoPeritoneal
Recuento leucocitario > 1000 /ul
Predominio de neutrofilos
Pericarditis bacteriana
Algunas pericarditis víricas
Recuento leucocitario > 1000/ul
Predominio de linfocitos
Síndrome infarto posmiocardico
REACCION DE RIVALTA : colocar en un tubo5 ml de agua destilada y 0.1 ml de acido acético glacialse mezcla bien , se deja caer una gota de liquido enexamen.TRASUDADO– no hay turbidez o ligera turbidez
EXUDADO – nube blancoazulada en la estela de lagota como humo de cigarrillo ( aumento de globulinas ).
AnálisisQuímico
CitologíaCentrifugar
Ph=7.4
1 – 5 ml
PROTEINA DE BENCE JONES
• Proteína de bajo peso molecular y de sensibilidad térmica,
• Parapoteina
• Presente en casos de mieloma múltiple( fase Terminal ) , neoplasias óseas ,
osteomalacia y leucemias linfoides y mieloides crónicas.
Procedimiento :
1. Se colocan en cada uno de tres tubos 5 ml de orina filtrada.
2. En el primer tubo se coloca una gota de acido acetico al 33 %
3. En el segundo tubo se colocan dos gotas de acido acetico al 33 %
4. El tercer tubo ( blanco ) no recibe acido
5. SE calienta gradualmente en baño maria, se agitan los tubos y se observa
la aparición de turbidez.
6. 5. La proteína de BJ aparece entre 40 y 60 ª C y desaparece a mayor
temperatura
7.
***Otras proteínas precipitan si la temperatura pasa de 65ºC. Si se
encuentran otras proteínas estas deben ser calentadas hasta ebullición
y filtradas por papel en caliente, donde quedan retenidas. La proteína
de BJ aparece nuevamente cuando el filtrado alcanza unos 50ªC
aproximadamente***
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Características
TRASUDADO EXUDADO
Inflamatorio Empiema
Aspecto Claro, trasparente Turbio Purulento
Densidad 1,003-1,019 Superior a 1,020
Proteínas Menos de 3 g/dl Mas de 3g/dl
Proteína liquido/
Proteína serica
Menor de 0.5 Mayor de 0.5
Glucosa Como la serica Menos de 60mg/dl
LDH Menos de 200UI/L Mas de 200UI/L
LDH liquido/
LDH sericaMenor de 0.6 Mayor de 0.6
pH Mayor de 7.3 Menor de7.3
Leucocitos Menor de 1.000 Mayor de
1.000
Mayor de
25.000
PATOLOGIAS Trastornos
Hemodinamicos
Enfermedades que lesionan
Directamente la serosa Se colocan 5 ml de orina en un tubo y cuidadosamente2ml de HCl concentrado por sus paredes. En la zona deseparación de ambos fluidos aparece un anillo de colorblanco. Puede diferenciarse de otras proteínas presentes,pues la proteína de BJ da positiva la prueba después dediluir la orina