Embed Size (px)
Citation preview
De la Cruz Mendieta Dulce AdrianaEsquivel Medina Alicia Karina
Enterobacter sakazakii
También denominado anteriormente Enterobacter cloacae de pigmento amarillo, y actualmente Cronobacter sakazakii.
Género: Enterobacter
Especies: E. aerogenes, E. cloacae, E. sakazakii, E. agglomerans y E. gergoviae
son PATÓGENOS OPORTINISTAS.
MicroorganismoBacilo Gram negativo
No esporulado
Presenta movilidad por flagelo.
Mesófilo; Temperatura óptima de crecimiento: 30-37°C
Anaerobio facultativo
Quimioorganótrofo.
Metabolismo fermentativo y respiratorio.
Crecimiento y supervivencia pH alrededor de 6 o 7
Termotolerante
Permanece viable a temperaturas entre 5.8 y 8 ºC, no se desarrolla a 4º CValor Z (°C) Valor D (min)
52 54.8
54 23.7
56 10.3
58 4.2
60 2.5
Pruebas bioquímicas
Prueba ResultadoRojo de metilo -
Voges- Proskauer
+
Lisina -Arginina +Ornitina +Lactosa +
Hidrólisis de gelatina
-
Ureasa -
Hábitat
Existe una escasez de datos respecto a la ecología microbiana de E. sakazakii.
Muytjens y Kollee informaron que no fueron capaces de aislar el microorganismo del agua de superficie, tierra, lodo, madera en descomposición, grano, roedores, animales domésticos, ganado vacuno o leche de vaca sin pasteurizar.
Por lo tanto, el nicho ambiental preciso de E. sakazakii continúa siendo una incógnita. . .
Sin embargo se ha aislado de los materiales clínicos, incluyendo el líquido cefalorraquídeo, sangre, piel, heridas, de las vías respiratorias (esputo, la garganta y la nariz), el tracto digestivo y la orina.
Los investigadores también han aislados de E. sakazakii en la leche reconstituida basada en la fórmula infantil.(1)(1) http://www.defendingfoodsafety.com/food-safety-law/common-food-borne-pathogens/e-sakazakii/
Vía de transmisión
Productos infantiles deshidratados, debido a su contaminación después del tratamiento térmico.
Mecanismo de patogenicidad
Produce enterotoxinasAerobactinas (destrucción de la células adyacentes) yHemaglutininas (adhesión)
Sin embargo, se desconoce su mecanismo de patogenicidad.
Lehner A, Stephan R. Microbiological, epidemiological and food safety aspects of Enterobacter sakazakii. J Food Prot. 2004;67:2850-7.
Factor de virulenciaEl lipopolisacárido (forma parte de la membrana externa) en particular el lípido A, también llamado endotoxina.
Mecanismos que le permiten adaptarse a sobrevivir en los productos desecados:
Tolerancia a los bajas concentraciones de vapor de agua libre ( aw ), poniendo en juego un mecanismo bioquímico adaptativo , permitiéndole ser más resistente en su fase estacionaria al stress osmótico y a la desecación, que otras bacterias que forman parte de la misma familia , como Escherichia coli y Salmonella
Resistencia
Antimicrobianos de la familia de los betalactámicos, por la formación de enzimas betalactamasas de espectro expandido por el mecanismo de inducción frente al mismo.
DetecciónEl nivel de detección:
Rango de 0.36 a 66 UFC/100g
Dadas las condiciones de preparación de la fórmulas y los tiempos que a veces permanecen reconstituidas, permiten un crecimiento exponencial del microorganismo, llegando a niveles de concentración de unidades formadoras de colonias por gramo, suficientes para causar enfermedades en población de riesgo susceptible.
Supervivencia a largo plazo en los preparados en polvo para lactantes
Dosis Infectiva
Niveles bajos de E. sakazakii en los preparados en polvo para lactantes.
< 3 UFC/100 g pueden aparecer infecciones.
Enfermedad
Ha estado relacionada con casos de pequeños brotes de sepsis neonatales, meningitis, cerebritis y enterocolitis necrotizante.
Se han notificado tasas de mortalidad debida a la infección por E. sakazakii de hasta el 50%.
La enfermedad suele responder a la terapia con antibióticos.
También se ha informado de la existencia de α-lactamasas y cefalosporinasas procedentes de E. sakazakii. Son bien conocidas las secuelas neurológicas a largo plazo.
Meningitis
Es una inflamación de las membranas que cubren el cerebro y la médula espinal. La meningitis bacteriana puede resultar en daño al cerebro, pérdida del oído o discapacidad para el aprendizaje.
Síntomas:
En personas mayores de dos años:
Fiebre altaDolor de cabezaRigidez de cuello
En recién nacidos (difícil detectarlos)
NáuseaVómitoObservar lucesConfusión Somnolencia.
Estos síntomas pueden aparecer después de varias horas, o pueden tomar de 1 a 2 días.
En lactantes
Pueden parecer lentos o inactivos VómitoEstar irritables o ser alimentado de forma deficiente.
A cualquier edad los pacientes pueden tener convulsiones
Enterocolitis necrotizante
Es una enfermedad grave que afecta a recién nacidos, en especial prematuros.
Se presenta como un síndrome gastrointestinal y sistémico.
Se caracteriza por necrosis de la mucosa o de capas incluso más profundas del intestino, sobre todo en el íleon terminal y con menos frecuencia del colon y del intestino delgado proximal.
Síntomas:
Distensión e hipersensibilidad abdominalSangre en hecesIntolerancia a la alimentación Apnea (problemas respiratorios que se caracterizan por la obstrucción de las vías aéreas)Letargia (estado de somnolencia profunda y prolongada. )
En casos avanzados
AcidosisSepsisShock.
Su fisiopatogenia no está todavía completamente aclarada.
La vía final es una cascada inflamatoria que se desencadena en recién nacidos con determinados factores de riesgo y que lleva a una necrosis de la pared intestinal.
Brotes
Se ha reportado E. sakazakii como agente causal de meningitis en países como Suiza, España y Estados Unidos.
El primer brote de meningitis causada por E. sakazakii fue reportado por Urmenyi y Franklin en 1961.(1)
(1) Urmenyi, A.M.C. and Franklin, A.W. 1961. Neonatal death from pigmented coliform infection. Lancet 1:313-315.
1983, Muytjens Simmons et al., identificaron a E. sakazakii como agente etiológico asociado a un brote ocurrido en Holanda, donde los utensilios empleados para la preparación de la fórmula infantil estuvieron implicados en su origen.
Se reportó en un estudio en el Hospital de Baltimore, Estados Unidos, en el cual los utensilios utilizados para la preparación de las fórmulas infantiles estaban contaminados con E. sakazakii; debido a esto el hospital tomó medidas de control con el fin de evitar la presencia de este microorganismo (2)
(2)Iversen C, Forsythe S, Risk profile of Enterobacter sakazakii, an emergent pathogen associated with infant
milk formula. T in Food Science 2003;14:443-54.
2004, En Francia y Nueva Zelanda, dos brotes infecciosos protagonizados por Enterobacter sakazakii, bacteria presente en leches en polvo para lactantes causaron la muerte de tres bebes y dejaron con secuelas neurológicas a otros cuatro.
2005, En Argentina Enterobacter sakazakii fue hallada en un lote de la leche Enfamil AR, importada de México, lo que motivó, a principios de esa semana, su retiro del mercado y la prohibición de su consumo.(3)
2008, En México, 2 niños hospitalizados por E. sakazakii, el varón murió y la mujer permaneció hospitalizada, ambos niños habían sido alimentados con leche en polvo y otros alimentos. Tenían diferentes cepas de la bacteria. (4)
(3) La Nación Líen. Fecha de consulta: 20 de marzo de 2010,Disponible en http://www.lanacion.com.ar/nota.asp?nota_id=725151
(4) http://www.enterobactersakazakiiblog.com/articles/e-sakazakii-watch/
ControlDurante la producción
Monitorear materias primas, específicamente aquellos ingredientes que no requieren tratamiento térmico antes de la mezcla.Reducir el nivel de las enterobacterias en las zonas utilizadas para la producción, a fin de evitar contaminación posterior.Revisar las instrucciones para la preparación de la leche, lo que sugiere una mayor temperatura de agua, pero no superior a 80°C, para la solubilidad (>70°C). Una temperatura demasiado alta podría dañar la características nutricionales del producto.
En casaUsar biberones limpios y descontaminados. Preparar los alimentos sólo lo suficiente para la comida, evitar la preparación de después de las comidas, si es necesario limitar el número de comidas preparadas con antelación a 1o 2.Evite dejar sin utilizar leche reconstituida en temperatura ambiente.Conservar en el refrigerador el producto reconstituido.Reducir en lo posible el paso del tiempo entre la reconstitución de la fórmula y la su uso.
En hospitales/ guarderías
Esterilizar todos los utensilios utilizados para la preparación con tratamiento térmico (por ejemplo, el lavado en lavavajillas) o con autoclave.Siempre que sea posible uso de utensilios desechables.Emplear personal cualificado y especializado.Almacenar el producto reconstituido en un refrigerador.Reducir en lo posible el paso del tiempo entre la reconstitución del producto y su uso.Debidamente sellado todos los contenedores con resto de la leche, colóquelos en el refrigerador.
DetecciónPesar 333g muestra
Diluirlo en Agua destilada estéril, agitar suavemente hasta que el polvo es uniformemente suspendido
10 ml de la suspensión + 90 ml de caldo EE estéril. Incubar a 36ºC durante 24h
Se inocula 0,1 ml en placas de agar VRBG por duplicado ***Si se sospecha que la fórmula en polvo para lactantes
contiene un alto número de E. sakazakii, el caldo EE se deben diluir a 10-4 a 10-6
con caldo EE estéril.)
Aislamiento: Inocular colonias características de E. sakazakii en una placa de TSA
Incubar a 25ºC durante 48-72 horas.
Realizar Pruebas Bioquímicas
Medios de cultivo
Composición:
Bilis de Buey 20,0 g.Glucosa 5,0gPeptona de Gelatina10,0gPotasio di-Hidrógeno Fosfato 2,0gdi-Sodio Hidrógeno Fosfato 8,0gVerde Brillante 0,015g
http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm
Caldo de Enriquecimiento de Enterobacterias (EE)
Por la presencia de la Bilis de buey y del Verde Brillante se inhibe el crecimiento de la flora indeseable.
A su vez la Glucosa permite el crecimiento de todas las Enterobacteriáceas, tanto lactosa-positivas como lactosa-negativas.
La mezcla de fosfatos tampona el medio y evita que por efecto del descenso del pH se pudieran frenar los crecimientos.
Se emplea para el enriquecimiento selectivo de todas las Enterobacteriáceas en productos alimenticios y otras muestras de interés
Composición:
Peptona de Soja 5,0g
Peptona de Caseína 15,0g
Cloruro de Sodio 5,0g
Agar 15,0g
http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm
Agar Soja y Tripticaseína (TSA)
Por el contenido de peptona de soja y peptona de caseína resulta una aportación nutritiva que permite el desarrollo óptimo de un gran número de microorganismos, tanto exigentes como no exigentes.
La lectura consiste en contar las colonias típicas que aparecerán con pigmentos amarillos después de 48-72 h de incubación a 25 ° C.
Medio muy rico en nutrientes empleado para el desarrollo de gran variedad de microorganismos.
Fig1.http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm
Composición:
Extracto de levadura 3,0 g.Peptona 7,0 g.Cloruro sódico 5,0 g.Sales biliares 1,5 g.Rojo neutro 0,03 g.Cristal violeta 0,002 g.Glucosa 10.0 gAgar 15,0 g.
http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm
Agar bilis rojo violeta glucosa (VRBG).
Las sales biliares y el cristal violeta del medio inhiben la flora acompañante Gram positiva.
La fermentación de la glucosa hace que vire el indicador rojo neutro a un color rojo púrpura.
También. se produce una precipitación de las sales biliares.
La lectura consiste en contar las colonias rojo púrpura rodeadas de una zona de precipitación de las sales biliares color violeta.
Medio selectivo utilizado en la identificación presuntiva y enumeración de enterobacterias en alimentos, productos lácteos y otras muestras de importancia sanitaria.
Fig2.http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htm
Otros medios ( Métodos Rápidos)
Agar Chromocult ® Enterobacter sakazakii
Gracias a su sistema de detección cromogénico, basado en la alfa-D-glucosidasa (una enzima específica para E. sakazakii) sólo las colonias de E. sakazakii aparecen de color turquesa, mientras que otras bacterias tienen colonias incoloras.
El Agar Chromocult ® Enterobacter sakazakii permite una detección rápida y fiable en tan sólo 24 horas
http://www.rapidmicrobiology.com/news/1054h11.php
Fig.3 http://www.rapidmicrobiology.com/news/1054h11.php
Medio RAPID'sakazakii
Es un medio cromogénico selectivo utilizado para el aislamiento y detección de Cronobacter spp. (anteriormente clasificados como Enterobacter sakazakii).
La hidrólisis del sustrato cromogénico 5-bromo-4-cloro-3-indol glucopiranósido conduce a la formación de colonias de color turquesa, típica.
El medio incluye compuestos cuidadosamente seleccionados para promover el crecimiento de las especies de Cronobacter, mientras que suprime la flora a interferir, dando al medio un aumento de selectividad.
Sin embargo la flora acompañante no es completamente inhibida y puede formar colonias de luz violeta o gris.
www.rapidmicrobiology.com/news/1027h26.php
Fig. 4 www.rapidmicrobiology.com/news/1027h26.php
Referenciashttp://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/ucm114665.htmhttp://www.cdc.gov/meningitis/about/faq.htmlhttp://www.sccalp.org/boletin/46_supl1/BolPediatr2006_46_supl1_172-178.pdfhttp://www.who.int/foodsafety/publications/micro/es_sp.pdfhttp://www.fao.org/docrep/009/y5502s/y5502s07.htmhttp://ftp.fao.org/codex/ccfh36/fh04_12s.pdfDavid Hendricks Bergey,John G. Holt, et. al., Bergey’s manual of Determinative Bacteriology, 9ª. Edición, 1994.http://www.alertanutricional.org/interior.php?num=103http://www.iss.it/binary/publ/cont/275%20-%20ANN_08_39%20Fiore.1224498732.pdf
