Eプレヸト‘栄研’ Disc ペプシノゲンⅠDisc 標準 PG Ⅰ－ E (60ng/mL) 1.0mL ･1パヱ Disc 標準 PG Ⅰ－ F (200ng/mL) 1.0mL ･1パヱ＜ヘフサヌグヱⅡ＞

Eプレート‘栄研’Disc ペプシノゲンⅠEプレート‘栄研’Disc ペプシノゲンⅡ

基礎資料

ペプシノーゲンキット

3058 BMK

2011年6月作成

Eプレート‘栄研’Disc ペプシノゲンⅡEプレート‘栄研’Disc ペプシノゲンⅠ

1

＜ペプシノゲンⅠ＞

(1) ペプシノゲンⅠ抗体固相化プレート 96ウェル･1プレート

(2) Disc 酵素標識PGⅠ抗体 12mL･1ビン

(3) Disc 緩衝液 25mL･1ビン

(4) 基質剤 2錠･1袋

(5) Disc 溶解液 12mL･2ビン

(6) 洗浄剤 50mL･1ビン

(7) 反応停止液 12mL･1ビン

(8) Disc 標準PGⅠ－A (0ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅠ－B (2ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅠ－C (6ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅠ－D (20ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅠ－E (60ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅠ－F (200ng/mL) 1.0mL･1ビン

＜ペプシノゲンⅡ＞

(1) ペプシノゲンⅡ抗体固相化プレート 96ウェル･1プレート

(2) Disc 酵素標識PGⅡ抗体 12mL･1ビン

(3) Disc 緩衝液 12mL･1ビン

(4) 基質剤 2錠･1袋

(5) Disc 溶解液 12mL･2ビン

(6) 洗浄剤 50mL･1ビン

(7) 反応停止液 12mL･1ビン

(8) Disc 標準PGⅡ －A (0ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅡ －B (1ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅡ －C (3ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅡ －D (10ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅡ －E (30ng/mL) 1.0mL･1ビン

Disc 標準PGⅡ －F (100ng/mL) 1.0mL･1ビン

(1) 基質液

基質剤1錠を溶解液12mLに加えて溶解し、基質液とする。

ただし、基質剤は使用する15分前に溶解し、30分以内に使用する。

(2) 洗浄液

洗浄剤を別の容器にとり、精製水を加えて2000mLとし洗浄液とする。

(3) その他の試薬はそのまま使用する。

■キット構成■キット構成

【試薬の構成】

劇

劇

【試薬の調製】 (共通)


2

＜ペプシノゲンⅠ・Ⅱ共通＞

1分間撹拌後、25℃で一晩(16～24時間)放置

撹拌した後、上清を別の試験管に移したものを抽出検体とする。

5分間撹拌後、15～30℃で2時間反応反応液を除去後、洗浄液で3回洗浄

撹拌後、15～30℃で1時間反応反応液を除去後、洗浄液で3回洗浄

遮光し25℃で30分間反応

ペプシノゲンⅠ･Ⅱ抗体固相化プレート 1ウェル

Disc 標準PGⅠ･Ⅱまたは抽出検体 100μL

Disc 酵素標識PGⅠ･Ⅱ抗体 100μL

基質液 100μL

反応停止液 100μL

吸光度測定 (492nm)

ろ紙検体(3mmφ) 8枚

Disc 緩衝液 400μL

■■測定プロトコール測定プロトコール


3

＜ペプシノゲンⅠ＞＜ペプシノゲンⅡ＞

標準曲線例 (PGⅠ)

標準曲線例 (PGⅡ)

2008200

73860

26720

856

332

80

O.D. (abs.)標準 (ng/mL)

2090100

66430

23010

813

381

180

O.D. (abs.)標準 (ng/mL)

10

100

1000

10000

1 10 100 1000

ペプシノゲンⅠ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

10

100

1000

10000

1 10 100

ペプシノゲンⅡ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

■■標準曲線例標準曲線例


4

(O.D.)

2.73.94.4C.V.(%)

25.917.99.8S.D.

963.3463.6221.0mean

9414602198

9714992257

9964622236

9934742135

9314672344

9784602343

9634402102

9334472101

C-3C-2C-1

3.04.14.7C.V.(%)

2.31.40.7S.D.

74.433.515.3mean

72.533.215.28

75.136.215.67

77.333.315.56

77.034.314.85

71.633.716.34

75.733.216.33

74.431.614.52

71.832.214.51

C-3C-2C-1

(ng/mL)

5.03.02.5C.V.(%)

36.49.63.4S.D.

721.4323.3133.4mean

7293261348

7333431367

7683231316

7603171305

6553211374

7123271373

7233101282

6913191341

C-3C-2C-1

(O.D.) (ng/mL)

■■同時再現性同時再現性＜ペプシノゲンⅠ＞


5.13.02.9C.V.(%)

1.60.40.1S.D.

31.113.75.2mean

31.413.85.28

31.614.55.37

33.113.65.16

32.813.45.05

28.213.55.34

30.713.85.33

31.113.14.92

29.713.55.21

C-3C-2C-1

＜Ⅰ／Ⅱ比＞

3.13.13.8C.V.(%)

0.10.10.1S.D.

2.42.53.0mean

2.32.42.98

2.42.53.07

2.32.43.16

2.42.62.95

2.52.53.14

2.52.43.13

2.42.43.02

2.42.42.81

C-3C-2C-1


5

コントロール標準 (ng/mL)

4.5 4.6 4.1 1.2 2.1 1.9 2.8 3.0 9.1 C.V.(%)

3.31.60.623.9 15.8 5.1 2.4 1.0 0.7 S.D.

73.334.514.52007.9 737.6 267.4 85.1 33.1 7.8 mean

70.032.513.62029759273873378

71.034.214.22020743272813387

78.536.014.31973722261873486

71.232.114.21992744265873275

74.235.514.72013717261853284

78.236.615.51983721265823393

71.734.514.12009741269863582

71.734.915.02044754273863371

C-3C-2C-12006020620


3.9 3.8 5.8 3.0 2.6 3.6 4.2 2.6 9.1 C.V.(%)

1.20.50.363.0 17.0 8.3 3.4 1.0 1.6 S.D.

31.814.35.02090.1 663.9 230.1 80.9 38.1 17.6 mean

32.714.85.021696642318140208

32.814.94.720116582267938197

31.113.74.421977042458937166

30.613.55.120936542267938185

31.714.35.220406492207938194

33.814.65.020746572368037163

30.213.84.920786642358139172

31.314.75.320596612227938161

C-3C-2C-11003010310

■■測定間再現性測定間再現性

(O.D.(abs.))＜ペプシノゲンⅠ＞


(ng/mL)

(O.D.(abs.)) (ng/mL)


6

■■測定測定者者間再現性間再現性




6.2 5.3 4.8 3.6 3.9 4.3 5.8 5.8 14.0 C.V.(%)

4.61.80.773.9 29.1 11.4 4.9 1.9 1.1 S.D.

74.134.615.22025.6 738.6 264.6 84.2 33.2 7.8 mean

71.734.915.02044754273863375

70.032.214.81966708253813274

71.333.614.42004740260803173

81.135.416.31969713257823492

76.437.015.52145778280923691

C-3C-2C-12006020620


7.9 6.3 7.1 4.6 4.2 5.3 6.0 4.5 10.5 C.V.(%)

2.60.90.496.8 28.4 12.4 5.1 1.8 1.9 S.D.

33.114.24.92112.4 671.0 233.2 83.8 39.8 18.6 mean

31.314.75.320596612227938165

30.813.44.820616672338541214

34.513.24.421757032488942203

37.015.35.120176312207838182

31.914.65.122506932438840181

C-3C-2C-12006020620




7

73.274.574.274.6C-3

34.735.335.535.8C-2

14.414.514.715.0C-1

測定値測定値測定値測定値コントロール

(ng/mL)

2033205620131909200

75573971768560

27727626125020

928685786

343432312

87880

4時間3時間2時間1時間

1

10

100

1000

10000

0 2 6 20 60 200

PGⅠ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

1時間

2時間

3時間

4時間

0.0

20.0

40.0

60.0

80.0

1時間 2時間 3時間 4時間

時間

濃度

(ng/m

L)

C-1

C-2

C-3

(第1反応)

タイムコース (第1反応) 標準

タイムコース (第1反応) コントロール値

■タイムコース■タイムコース(1)(1)



8



1

10

100

1000

10000

0 2 6 20 60 200

PGⅠ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

30分

1時間

2時間

4時間

0.0

20.0

40.0

60.0

80.0

30分 1時間 2時間 4時間

反応時間

濃度

(ng/m

L)

C-1

C-2

C-3

(第2反応)



73.870.371.273.6C-3

33.734.932.133.6C-2

15.015.214.214.8C-1


(ng/mL)

2273208119921644200

82477974460860

30927726522120

1038987696

463632242

1812740

4時間2時間1時間30分



9

1

10

100

1000

10000

0 2 6 20 60 200

PGⅡ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

1時間

2時間

3時間

4時間



0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

1時間 2時間 3時間 4時間

時間

PG

Ⅱ濃

度 (

ng/m

L)

C-1

C-2

C-3

32.032.131.734.3C-3

14.614.414.315.5C-2

5.05.25.25.6C-1


(ng/mL)

2320220820401649200

73770864951760

25224022017920

898479656

424138322

191819170

4時間3時間2時間1時間(第1反応)




10

1

10

100

1000

10000

0 2 6 20 60 200

PGⅡ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

30分

1時間

2時間

4時間

0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

30分 1時間 2時間 4時間時間

PG

Ⅱ濃

度 (

ng/m

L)

C-1

C-2

C-3



(第2反応)

30.530.830.630.3C-3

13.713.413.513.9C-2

5.05.45.15.0C-1


(ng/mL)

2338220820931906200

73768665463860

28524022621820

1319779716

885638312

663518110

4時間2時間1時間30分




11

反応温度の影響 (標準)

反応温度の影響 ( コントロール値)

81.276.870.073.174.9C-3

36.834.532.533.933.2C-2

14.714.513.613.413.9C-1

測定値測定値測定値測定値測定値コントロール

(ng/mL)

1674 1938 2026 1839 1593 200

600 695 759 669 588 60

230 256 273 243 212 20

75 79 87 76 64 6

30 30 33 29 24 2

9 7 7 6 5 0

37℃30℃25℃15℃4℃

1

10

100

1000

10000

0 2 6 20 60 200

PGⅠ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

4℃15℃

25℃30℃37℃

10.0

100.0

4℃ 15℃ 25℃ 30℃ 37℃温度

PG

Ⅰ濃

度 (

ng/m

L)

C-1

C-2

C-3

■反応温度の影響■反応温度の影響

＜ペプシノゲンⅠ＞ (O.D.(abs.))


12

反応温度の影響 (標準)

反応温度の影響 (コントロール値)

31.830.932.731.832.7C-3

14.513.214.814.414.7C-2

5.74.95.04.94.6C-1

測定値測定値測定値測定値測定値コントロール

(ng/mL)

1284 1810 2169 2343 2259 100

336 543 664 816 769 30

119 188 231 283 271 10

49 68 81 92 89 3

32 37 40 40 38 1

24 23 20 13 10 0

37℃30℃25℃15℃4℃

1

10

100

1000

10000

0 1 3 10 30 100

PGⅡ濃度 (ng/mL)

吸光

度 (

O.D

.)

4℃

15℃

25℃

30℃

37℃

0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

4℃ 15℃ 25℃ 30℃ 37℃

温度

PG

Ⅱ濃

度 (

ng/m

L)

C-1

C-2

C-3

■反応温度の影響■反応温度の影響

＜ペプシノゲンⅡ＞ (O.D.(abs.))


13

3.4 9.9 33.4 3.3 11.7 38.2 43

5.5 4.8 26.3 5.5 5.5 30.4 42

1.1 19.8 21.4 1.2 20.7 24.7 41

2.7 23.5 64.2 2.7 26.9 72.7 40

2.4 38.5 92.6 2.3 40.2 92.4 39

2.8 12.9 36.2 3.0 13.7 41.3 38

5.3 18.1 95.8 5.5 18.4 101.4 37

1.6 38.1 61.2 1.6 38.3 61.5 36

2.0 28.7 56.9 2.0 31.5 62.7 35

3.2 31.1 100.5 3.0 34.9 103.5 34

1.9 32.8 63.9 2.1 30.8 64.3 33

3.0 16.1 47.8 3.1 16.5 51.9 32

2.0 11.8 23.8 2.3 11.8 27.0 31

4.1 2.8 11.5 4.1 3.1 12.8 30

5.4 9.8 53.2 5.6 10.7 60.4 29

6.1 5.4 33.2 5.9 6.5 38.4 28

4.5 12.2 55.3 4.6 12.8 58.7 27

5.9 7.0 41.3 5.3 8.1 42.6 26

4.5 8.4 37.7 4.5 8.8 39.9 25

3.9 13.7 53.8 3.9 15.2 59.2 24

3.0 18.4 55.2 3.1 18.9 58.3 23

6.9 7.3 50.2 7.1 7.9 56.0 22

3.4 12.7 42.6 3.6 14.0 50.6 21

4.6 8.3 38.3 5.0 8.5 42.5 20

4.6 6.4 29.6 4.5 7.9 35.4 19

8.9 4.3 38.3 8.3 4.9 40.5 18

3.7 15.0 55.6 3.7 16.9 63.0 17

5.7 8.3 47.7 5.6 9.7 54.2 16

6.0 4.8 28.6 5.5 5.8 31.7 15

2.5 24.2 60.0 2.7 26.1 71.1 14

5.1 7.7 38.9 5.0 9.4 46.7 13

5.1 6.0 30.5 4.8 7.0 33.4 12

3.3 19.4 64.4 3.3 21.8 71.9 11

6.1 8.6 52.5 5.9 9.7 57.2 10

7.9 6.9 54.8 7.5 8.4 62.9 9

3.4 19.5 66.3 3.4 22.0 75.0 8

5.2 6.7 35.1 5.1 7.9 40.6 7

2.6 15.7 40.5 2.8 18.8 52.5 6

4.9 13.4 65.9 4.9 15.5 75.2 5

5.1 6.5 33.0 4.9 8.2 40.5 4

3.5 15.3 52.9 3.6 17.9 64.3 3

1.5 20.4 30.6 1.5 22.8 33.9 2

4.7 7.3 34.1 4.5 10.1 45.7 1

血清Ⅰ/Ⅱ血清PGⅡ血清PGⅠろ紙Ⅰ/Ⅱろ紙PGⅡろ紙PGⅠNo.

■血清との相関■血清との相関(ng/mL)


14

0

20

40

60

80

100

120

0 50 100 150

血清中PGⅠ濃度 (ng/mL)

ろ紙

血液

中P

GⅠ

濃度

(ng/m

L)

y = 1.0086x + 4.9735

r = 0.9872

n = 43

0

10

20

30

40

50

0 10 20 30 40 50

血清中PGⅡ濃度 (ng/mL)

ろ紙

血液

中P

GⅡ

濃度

(ng/m

L)

y = 1.0169x + 1.1031

r = 0.9936

n = 43

相関 (PGⅠ)

相関 (PGⅡ)

相関 (Ⅰ/Ⅱ)

0

2

4

6

8

10

0 2 4 6 8 10

血清中PGⅠ/Ⅱ

ろ紙

血液

中P

GⅠ

/Ⅱ

y = 0.9244x + 0.284

ｒ = 0.9928

n = 43

■血清との相関■血清との相関


15

4℃

25℃

37℃

60℃

82.7 79.6 75.4 58.0 50.3 40.1 24.1 19.1 16.7 14

114.4 102.6 100.0 70.1 57.2 45.6 28.5 22.6 19.4 7

115.2 94.6 111.7 65.2 67.6 51.2 30.5 25.3 21.9 3

123.6 91.1 103.8 79.8 68.0 52.6 30.0 26.4 21.2 1

154.7 137.5 127.2 94.6 83.5 56.9 39.3 31.9 26.5 0

IHGFEDCBA日数

141.1 111.6 120.1 76.0 71.9 51.5 35.4 29.1 22.4 14

128.7 134.1 129.1 81.0 78.1 54.5 33.6 30.9 23.0 7

148.4 115.1 125.8 86.1 74.9 52.5 37.0 27.9 24.7 3

133.8 119.2 134.3 90.1 74.9 54.3 38.9 29.9 23.4 1

154.7 137.5 127.2 94.6 83.5 56.9 39.3 31.9 26.5 0

IHGFEDCBA日数

155.7 118.2 122.4 87.7 79.8 57.4 36.9 31.0 24.9 14

151.1 126.2 130.8 89.5 81.5 60.2 36.5 31.0 26.4 7

146.5 123.8 135.5 94.6 83.7 62.1 38.4 32.8 25.9 3

144.4 124.4 144.8 98.0 84.3 58.7 35.9 32.3 25.4 1

154.7 137.5 127.2 94.6 83.5 56.9 39.3 31.9 26.5 0

IHGFEDCBA日数

157.6 127.8 136.0 86.9 84.6 60.2 36.9 31.9 24.3 14

155.1 134.6 121.4 96.6 85.0 57.0 39.1 32.4 28.8 7

158.2 129.0 138.9 86.8 83.0 57.3 36.2 34.1 27.0 3

154.7 137.5 127.2 94.6 83.5 56.9 39.3 31.9 26.5 0

IHGFEDCBA日数

高値検体中値検体低値検体

(ng/mL)

■検体の安定性■検体の安定性



16

25℃

37℃

60℃

30.5 17.7 11.6 20.7 28.7 7.8 11.0 3.9 7.9 14

40.3 24.4 13.7 23.2 29.0 8.7 12.6 5.2 9.2 7

40.3 23.5 15.6 23.2 37.1 9.5 12.4 5.4 10.3 3

43.3 22.3 15.0 27.4 48.8 9.5 12.8 5.2 10.6 1

62.9 31.1 20.6 33.1 49.1 10.7 15.2 5.7 12.7 0

IHGFEDCBA日数

46.7 24.2 15.6 26.5 41.5 9.4 14.0 5.0 10.8 14

47.7 29.5 16.6 28.6 44.7 9.8 13.8 5.7 10.5 7

53.5 27.1 18.2 29.9 48.2 9.9 14.4 6.0 11.3 3

52.1 27.6 18.8 32.2 41.5 10.6 16.1 6.0 11.1 1

62.9 31.1 20.6 33.1 49.1 10.7 15.2 5.7 12.7 0

IHGFEDCBA日数

58.7 28.9 16.9 31.7 46.5 10.2 15.7 5.3 11.5 14

57.7 30.2 19.3 33.3 45.1 11.1 15.4 5.9 12.0 7

52.4 30.8 17.6 33.2 48.1 10.8 15.0 5.6 12.2 3

53.4 31.7 20.0 34.8 48.8 10.1 14.7 5.5 11.9 1

62.9 31.1 20.6 33.1 49.1 10.7 15.2 5.7 12.7 0

IHGFEDCBA日数

59.4 30.9 18.6 32.2 50.4 10.7 15.8 5.9 11.4 14

64.7 33.7 17.0 34.3 48.6 10.9 15.9 5.9 14.2 7

60.6 33.3 18.1 36.4 48.1 10.8 17.3 5.2 11.1 3

62.9 31.1 20.6 33.1 49.1 10.7 15.2 5.7 12.7 0

IHGFEDCBA日数

高値検体中値検体低値検体

(ng/mL)

4℃

■検体の安定性■検体の安定性


Documents

Eプレヸト‘栄研’ Disc ペプシノゲンⅠDisc 標準 PG Ⅰ－ E (60ng/mL) 1.0mL ･1パヱ Disc 標準 PG Ⅰ－ F (200ng/mL) 1.0mL ･1パヱ ＜ヘフサヌグヱⅡ＞

Eプレヸト‘栄研’ Disc ペプシノゲンⅠDisc 標準 PG Ⅰ－ E (60ng/mL) 1.0mL ･1パヱ Disc 標準 PG Ⅰ－ F (200ng/mL) 1.0mL ･1パヱ＜ヘフサヌグヱⅡ＞