ASIGNATURA:Anlisis Clnicos II

TEMA: Practica N 02 - Lipoprotenas.

INTEGRANTES: Huatuco Casachagua, Roci.Loarte Flores, Vernica.Roque magno, Wilfredo.Vega Len, Claudio.

SECCIN:FB8N1.

DOCENTE: Len Meja, Enrique Augusto

LIMA - PER2015

LIPOPROTENAS

INTRODUCCION.Las lipoprotenas son conjugados deprotenasconlpidos, especializadas en eltransportede estos ltimos y se dividen en variosgrupossegn sudensidad.HDL: Lipoprotenas de alta densidad. Estas se conocen como las protectoras. Ya que no permiten que las otras lipoprotenas que son las agresoras se peguen a lasclulasy nos provoque daos en nuestro cuerpo.IDL: Lipoprotenas intermedias.LDL: Lipoprotenas de baja densidad. Estas son las agresoras y son las que msdaonos pueden producir porque contienen mayor cantidad de colesterol, estas cantidades de colesterol y steres asociadas a la LDL son habitualmente de unas dos terceras partes del colesterol plasmtico total.Su importancia radica enel conocimientode la homiostasis del colesterol que puede comprenderse revisando las consecuencias que tienen las concentraciones plasmticas elevadas de colesterol cuando se mantiene de forma prolongada. El colesterol es muy insoluble y se acumula en los leucocitos que se depositan en las zonas de lesin sobre las paredes internas de las arterias.Si las concentraciones de colesterol son demasiado altas para su posterior eliminacin hacia el torrente sanguneo, estas clulas quedan repletas de depsitos grasos, que luego se endurecen formando una placa, y finalmente obstruyen vasos sanguneos causando infartos, o sea, ataques cardiacos.VLDL: Lipoprotenas de muy baja densidad y son precursoras de las lipoprotenas de baja densidad.

Conformacin de una lipoprotena

Tanto el colesterol como los triglicridos son transportados ensangreformando parte de molculas llamadas lipoprotenas. Estas lipoprotenas estn constituidas adems por fosfolpidos, colesterol, protenas y apolipoprotenas. De acuerdo a la participacin porcentual de los diferentes componentes estructurales, se las clasifica en quilomicrones (QM), lipoprotenas de baja densidad (LDL), lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL), lipoprotenas de elevada densidad (HDL) y lipoprotenas de densidad intermedia (IDL).

DETERMINACIN DE HDLMARCO TERICO.Las lipoprotenas sanguneas cuya principal finalidad consiste en transportar el colesterol, triglicridos y otras grasas. Tenemos al HDL llamada tambin lipoprotenas de alta densidad porque es el que elimina el colesterol de los tejidos perifricos transportndolos al hgado para su excrecin, y as evitan que las clulas capten el colesterol y los lpidos.COMPETENCIAS.Determinar e interpretar las pruebas de funcin lipdica en muestras de suero o plasma utilizando las tcnicas de laboratorio para su anlisis, cumpliendo y haciendo cumplir las normas de bioseguridad y tica.Determinar las lipoprotenas. por mtodos espectrofotomtricos conociendo sus propiedades fsico-qumicas, a partir de una muestra de sangre (suero sanguneo).

MATERIALES Y EQUIPOS.Materiales Pipetas automticas Tubos de ensayo Gradillas Centrifuga Espectrofotmetro

Reactivos Para La Separacin De Hdl Colesterol En SueroReactivos Fosfotungstato De SodioSolucin de Fosfotungstato de Sodio. Contiene perseverantes y estabilizadores. Mantener en refrigeracin.

Cloruro De MagnesioSolucin de Cloruro de Magnesio. Contiene perseverantes y estabilizadores. Mantener en refrigeracin.

Standard De Hdl- ColesterolSolucin de Colesterol 50 mg/dL. Mantener en refrigeracin.

PROCEDIMIENTO.

En primer lugar para poder empezar a trabajar debemos de extraer la muestra al mismo paciente de la semana anterior para poder seguir con la cuantificacin de sus lpidos.

Luego de tomar la muestra y dejar que coagule, procedemos centrifugar para luego poder extraer el suero problema para poder empezar a trabajar.

PRECIPITACIN:

Procedemos a preparar un tubo por cada muestra, como se indica a continuacin:

MUESTRAVOLUMEN

Suero200 l

Fosfatungstato250 l

Cloruro de Magnesio250 l

Mezclamos bien y dejamos en reposo por 5 minutos, luego centrifugar a 3,000 rpm x 15 minutos.

El sobrenadante claro su utiliza como muestra para la determinacin de HDL.

DETERMINACIN DE HDL COLESTEROL

Procederemos a colocar tres tubos rotulados como: Blanco, Estndar y Desconocido y procedemos a trabajar de la siguiente manera:

MUESTRABLANCOESTNDARMUESTRA

Reac. de Colesterol1 ml1 ml1 ml

Sol. Standar----10 l----

Sobrenadante--------100 l

Mezclamos suavemente e incubamos por 10 minutos a 37C a bao maria.

Luego procedemos a leer al espectofotometro a 505 nm. y anotamos las absorbancias obtenidas.

RESULTADOS OBTENIDOS.

Abs. Estandar:0.404 nmAbs. Desconocido:0.268 nm

CALCULOS.

RANGO REFERENCIAL.Hombres:35 - 65 mg/dLMujeres:45 - 65 mg/dL

RESULTADOS.

Se presenta el reporte de resultados al docente.

CUESTIONARIO.

1. Cul es la importancia clnica de la determinacin del HDL colesterol?Este examen se hace para verificar el nivel de colesterol en la sangre y para ver si la persona est en alto riesgo de sufrir un ataque cardaco, un accidente cerebrovascular u otro problema cardiovascular. Los estudios han mostrado que cuanto mayor sea el nivel de HDL, menor es el riesgo de sufrircardiopata coronaria, razn por la cual, este tipo de colesterol algunas veces se denomina colesterol "bueno".

2. Cul es el fundamento de la determinacin de HDL-colesterol?El presente, es un mtodo homogneo que emplea dos reactivos. En la primera etapa de la reaccin, se solubiliza y consume el colesterol libre o unido a protenas distintas de la HDL en una reaccin que involucra a colesterol oxidasa (CHO), peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil)- 3-toluidina disdica (TOOS) dando lugar a un producto no coloreado. En una segunda etapa, un detergente solubiliza especficamente las HDL. El HDL-colesterol es liberado para reaccionar con colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa y TOOS, dando un producto coloreado.

3. Qu importancia clnica tiene la determinacin de la VLDL?Esta partcula, compuesta sobre todo de triglicridos es secretada por los hepatocitos y contiene apolipoprotenas B-100. Concentraciones elevadas de VLDL dan como resultado hipertrigliceridemia.

Los triglicridos de la partcula C-VLDL plasmtica circulante son eliminadas por lipasas titulares (deslipidacin) para almacenarse (lipasa lipoproteica adiposa) o utilizarse (lipasa lipoproteica esqueltica). La apolipoprotena C tiene una funcin muy importante en lamodulacinde la actividad de las lipasas lipoproteicas. DETERMINACION LDL-COLESTEROL

MARCO TEORICO.La LDL llamadas lipoprotenas de baja densidad, son ricas en colesterol, y estas pueden depositar en los tejidos perifricos y asociarse a un riesgo de enfermedad cardiaca y vascular perifrica arteriosclertica. Por lo tanto niveles altos de LDL son aterognicas. La VLDL llamadas lipoprotenas de muy baja densidad, son las que transportan a los triglicridos aunque tambin transporta una pequea cantidad de colesterol.

COMPETENCIAS. Determinar e interpreta las pruebas de funcin lipdica en muestras de suero o plasma utilizando las tcnicas de laboratorio para su anlisis, cumpliendo y haciendo cumplir las normas de bioseguridad y tica.

Determinar las lipoprotenas. por mtodos espectrofotomtricos conociendo sus propiedades fsico-qumicas, a partir de una muestra de sangre (suero sanguneo).

PROCEDIMIENTO.

Conociendo los valores de Colesterol, Triglicrido y HDL - Colesterol nos permite el clculo de LDL - Colesterol segn la frmula de Friedwald:

Conociendo el valor de triglicridos de nuestro paciente de la prctica anterior, podemos determinar el valor e VLDL Colesterol.

Conociendo el valor del VLDL colesterol y teniendo el resultado de colesterol de la prctica anterior procedemos a determinar el valor de LDL Colesterol.

RANGO REFERENCIAL

RESULTADOS.

Se presenta el reporte de resultados al docente.CUESTIONARIO1. Qu patologas se presentan cuando existe incremento o disminucin de la LDL-colesterol?Arterosclerosis.Niveles elevados de colesterol en la fraccin LDL ("colesterol LDL" o "colesterol malo") se asocian fuertemente al desarrollo de enfermedad arterosclertica. Diversos modelos experimentales y observaciones epidemiolgicas sistemticas apoyan, de hecho, un papel causal del colesterol LDL en la iniciacin y progresin de la arterosclerosis.2. Cul es el fundamento bioqumico en la determinacin del LDL colesterol?El presente mtodo es un ensayo homogneo sin precipitacin, en dos pasos. En el primero, se agrega un tensioactivo (Reactivo A) que solubiliza las partculas lipoproteicas no-LDL. El colesterol liberado es consumido por la colesterol esterasa y la colesterol oxidasa en una reaccin sin desarrollo de color. Un segundo tensioactivo (Reactivo B) solubiliza las partculas de LDL formndose, por la presencia de enzimas y un Reactivo cromognico, un color proporcional a la cantidad de LDL colesterol presente en la muestra.3. cmo se encuentran las lipoprotenas (HDL) en personas que realizan actividades fsicas (Deportistas)?El HDL es una molecula muy sensible a cambiar su concentracin por actividad fsica. Se ha observado en personas sedentarias, que con ocho semanas de entrenamiento aerbico moderado y con sesiones mnimas de 29 minutos, 3 das por semana, se incrementa el C-HDL y disminuyen los TAG (9)

FUENTES DE INFORMACIN

Aiquel F. Manual de anlisis clnicos. 7 ed. Buenos Aires: Panamericana; 1997.

Gradwhol. Mtodos y diagnstico del laboratorio clnico. 8 ed. Buenos Aires: Mdica Panamericana; 1986.

Guerci A. Laboratorio. Mtodos de anlisis clnicos y su interpretacin. 3 ed. Buenos Aires: El Ateneo; 1985.

Krupp M. Manual de diagnstico clnico y de laboratorio. Mxico DF: Manual Moderno S.A.; 1986.