DAFTAR PUSTAKA - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/552/7/DAFTAR PUSTAKA_QORI WAHYUNINGSIH _FARMASI...Aktivitas Penghambatan Tirosin..., Qori Wahyuningsih, Farmasi UMP, 2013

27

DAFTAR PUSTAKA

Andersen, Q. M., and Markham, K. R. 2006.Flavonoids.Chemistry, Biochemistry,

and Applications.Boca. Raton, FL: CRC Press, Taylor & Francis.

Arung ET, kusuma IW, Iskandar YM. Yasutake S. Shimizu K. Kondo R.

2006.Screening of Indonesian plants for tyrosinase inhibitory activity.

Journal Wood Science 51:520-525.

Backer, CA and Bakkuizen v/d Brink RC Jr. 1963.Flora of Java vol 1. Wolter-

Noordhoff NV. Groningen. P:2.

Balsam, M.S. and Sagarin, E., 1972.Cosmetics Science and Technology, 2 nd

ed,

Vol. 3, John Wiley and Sons, New York.

Batubara I, Darusman LK, Mitsunaga T, Rahmniwati M, Djauhari E.2010.

Potency of Indonesia medicinal plants as tyrosinase inhibitors and

antioxidant agent. Journal of Biologi Science, 10 :138- 144.

BPOM. 2004. Monografi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia Volume I. Jakarta :

BPOM RI.

Chang T, Ding HY, Tai SSK, Wu CY. 2007. Mushroom tyrosinase inhibitory

effects of isoflavones isolated from soygerm koji fermented with

Aspergillus oryzae BCRC 32288. Journal of Food chemistry. 105: 1430-

1438.

Chang T. 2009. An updated review of tyrosinase inhibitor. International Journal of

molecular science: 2440- 2476.

Depkes, RI. 1979. Farmakope Indonesia ed III. Jakarta: Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.

Depkes, RI. 1986. Sediaan Galenika. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik

Indonesia.

Depkes, RI. 1995. Farmakope Indonesia ed IV. Jakarta: Departemen Kesehatan

Republik Indonesia.

Aktivitas Penghambatan Tirosin..., Qori Wahyuningsih, Farmasi UMP, 2013

28

Depkes RI.2000.Inventaris Tanaman Obat Indonesia (I).Jilid I. Jakarta :

Departemen Kesehatan RI dan Kesejahteraan Sosial RI Badan Penelitian

dan Pengembangan Kesehatan. Halaman 131-132.

Depkes, RI. 2006. Inventaris Tanaman Obat Indonesia (VI). Jakarta: Badan

Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Tawangmangu.

Food and Drug Administration (FDA). 2003.Guidance for Industry Photosafety

Testing, Pharmacology Toxycology Coordinating Committee in the Centre

for Drug Evaluation and Research (CDER) at the FDA.

Gennaro, RA., 1995. Remington‟s : Practice of Pharmacy. Nineteenth edition Vol

II.Pennsylvania : Mack Publishing Company Easton.

Germano, M.P., Cacciola, F., Donato, P., Dugo, P., Certo, G., D‟Angelo, V., et

al., 2012., Betula pendula leaves :polyphenolic characterization and

potential innovative usi in skin whitening products, Fitoterapia. 83:877-

882.

Harborne.1987.Metode Fitokimia Penuntuk Cara Modern MenganalisisTumbuhan.

Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata. Bandung: ITB Press.

Hill, MG. 2010. Specialty Board Review Dermatology.

Katzung, G.B. 1995. Basic and Clinical Pharmacology, a lange medical book.

Prentice-Hall International, USA.

Kim, Y. J., K.J. Kyung, J.H. Lee., and H. Y. Chung. (2004). “4-4‟-

Dihydroxybiphenyl as a New Potent Tyrosinase Inhibitor”. J. Biol. Pharm.

Bull. 28 (2) 323-327.

Kubo, I., Ikuyo, KH., Ken, IN., Frida, S., Midori, T., Jose, S., et al., 2003.

Tyrosinase Inhibitors From Galls of Rhus javanica Leaves and Their

Effects on Insects. Naturforsch 719-725.

Lachman, Leon, dkkl. 1994. Teori dan Praktek Farmasi Industri II (terjemahan )

Siti suyatmi.Edisi ketiga. Jakarta: UI Press.

Likhitwitayawuid.K. 2008.Stilbenes with tyrosinase inhibitor activity.Current

Science, 94: 44- 52.

Manoi,F. 2009. “Binahong (Anredera cordifolia) sebagai Obat”.Warta penelitian

dan Pengembangan Tanaman Industri. Vol.15 (1): hal 4.


29

Marliana, Soerya dewi, Venty Suryanti, dan Suyono.2005.Skrining Fitokimia dan

Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam

(Sechium edule Jacq.Swatrz.)dalam ekstrak etanol. Biofarmasi 3(1): 26-

31.

Miyazawa, M. and Naotaka T., 2007. Inhibitory Compound of Tyrosinase

Activity from the Sprout of Polygonum hydropiper L. (Benitade). Biol.

Pharm.Bull.30(3) 595-597.

Mus. 2008.Informasi Spesies Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis).

http://www.plantamor.com. Diakses 15 Desember 2012.

Octavia,D. R. 2009. Uji Aktivitas Penangkap Radikal ekstrak petroleum Eter, Etil

Asetat dan Etanol Daun binahong (anredera cordifolia(Tenore) Steen)

dengan Metode DPPH (2,2- difenil-1-pikrilhidrazil).Skripsi Sarjana pada

fakultas farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Pink A. 2004.Gardening for the Million. Project Gutenberg Literary Archive

Foundation.http://www.gutenberg.org. Diakses 10 Desember 2012.

Rahayu, Elvi. 2012. Aktivitas Gabungan Ekstrak Bakau (Rhizophora apiculata),

Alamanda (Allamanda schottii), Dan Binahong (Anredera cordifolia)

Terhadap Enzim Tirosinase. Skripsi Sarjana pada fakultas farmasi Institut

Pertanian Bogor.Diakses 12 Juni 2012.

Rochani, N. 2009. Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Daun Binahong (Anredera

cordifolia(Tenore) Steen) Terhadap Candida albicans serta skrining

fitokimiannya. Skripsi Tidak Diterbitkan. Surakarta : Fakultas Farmasi

UMS Surakarta.

Rowe RC, Paul JS dan Paul JW. 2003. Handbook of Pharmaceutical

Excipients,4th

edition. London: Chicago Pharmaceutical Press.

Sembrook, J and David, WR., 2001. Molecular Cloning edisi III. New York. Cold

Spring Harbor laboratory Press.

Setiaji, A. 2009.Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Petroleum eter, Etil asetat Dan

Etanol 70% Rhizoma binahong (Anredera cordifolia (Tenore) Steenis)

Terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 Dan Escherichia coli


http://www.plantamor.com/

http://www.gutenberg.org/

30

ATCC 11229 Serta Skrining Fitokimianya. Skripsi Tidak Diterbitkan.

Surakarta :Fakultas Farmasi UMS Surakarta.

Seymour, M.B. 1975. Medicated application, Remington‟s Pharmaceutical hal

295-296, (1523).

Susetya Darma,S.P. 2011. Khasiat & Manfaat Daun Ajaib Binahong. Yogjakarta:

Penerbit Pustaka Baru Press.

Voigt, R.1994. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi Ed-5. Noerono Soendani,

penerjemah. Samhoedi Raksohadiprojo, editor. Yogyakarta: Gajah Mada

Press. Terjemahan dari Lehburch Der Pharmazeutischen Technologie.hlm:

314-316.

Winarsi H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal bebas Potensi dan Aplikasinya

Dalam Kesehatan. Yogjakarta: Penerbit Kanisius.

Yamauchi K, Mitsunaga T, Batubara I. 2011. Isolation, identification, and

tyrosinase inhibitory activities of the extractives from Allamanda

cathartica. Natural Resources 2: 167-172.


31

LAMPIRAN


32

Lampiran 1. Surat Keterangan determinasi daun binahong (Anredera

cordifolia (Tenore) Steen)


33


34

Lampiran 2. Hasil persentase inhibisi ekstrak daun binahong


35

Lampiran 3. Hasil persentase inhibisi Hidroquinon


36

Lampiran 4. Hasil aktivitas penghambatan tirosinase

Keterangan :

Absorbansi kontrol (-)

Absorbansi +

enzim

Absorbansi –

enzim

1A, 1B, 1C 1D, 1E, 1F

Absorbansi Hidroquinon (kontrol positif)

Konsentrasi Absorbansi +

enzim

Absorbansi -

enzim

1,375 1G, 1H, 2A 2B, 2C, 2D

2,75 2E, 2F, 2G 2H, 3A, 3B

5,5 3C, 3D, 3E 3F, 3G, 3H

11 4A, 4B, 4C 4D, 4E, 4F

22 4G, 4H, 5A 5B, 5C, 5D


37

Lampiran 5.Perhitungan pembuatan buffer fosfat pH 6,8

a. Pembuatan larutan .2 O 1 M

BM .2 O = 177,99 g/mol

M =

mol = M x V

= 1 x 0,1 L

= 0,1 mol

mol =

g = mol x BM

= 0,1 x 177,99

= 17,80 g

Jadi, membuat larutan .2 O 1 M dengan cara menimbang 17,80 g

.2 O dan melarutkannya dengan aquabides 100 mL.

b. Pembuatan larutan . O 1 M

BM . O = 137,99 g/mol

M =

mol = M x V

= 1 x 0,1 L

= 0,1 mol

mol =

g = mol x BM

= 0,1 x 137,99

= 13,80 g

Jadi, membuat larutan . O 1 M dengan cara menimbang 13,80 g

. O dan melarutkannya dengan aquabides 100 mL.


38

c. Pembuatan buffer fosfat 0,1 M pH 6,8

Pembuatan buffer fosfat 0,1 M pH 6,8 dengan mengambil sebanyak 46,3 mL

larutan .2 O 1 M dilarutkan dengan larutan . O 1 M

sebanyak 53,7 mL lalu diukur hingga pH 6,8.

d. Pembuatan buffer fosfat 0,02 M pH 6,8

Pembuatan buffer fosfat 0,02 M pH 6,8 dengan melakukan pengenceran dari

larutan buffer fosfat 0,1 M pH 6,8.

M1 x V1 = M2 x V2

0,1M x V1 = 0,02 M x 100 mL

0,1M x V1 = 0,02 M x 100 mL

V1 =

V1 = 20 mL

Jadi, mengambil 20 mL dari larutan buffer fosfat 0,1 M lalu diencerkan

dengan aquabides hingga 100 mL lalu diukur hingga pH 6,8.


39

Lampiran 6. Perhitungan pembuatan larutan L-DOPA

BM L-DOPA = 197, 19 g/mol

a. Pembuatan larutan L-DOPA 5 mM

M =

mol = M x V

= 5. x 2,5.

= 1,25. mol

mol =

g = mol x BM

= 1,25 x 197, 19

= 0,02465 g

= 24,65 mg

Jadi menimbang sebanyak 24,65 mg L-DOPA lalu dilarutkan dengan 25 mL

larutan buffer fosfat 0,02 M pH 6,8.

b. Pembuatan larutan L-DOPA 0,85 mM

M1 x V1 = M2 x V2

5 x V1 = 0,85 x 10

5 V1 = 8,5

V1 =

V1 = 1,7 mL

Jadi, caranya dengan mengambil sebanyak 1,7 mL larutan L-DOPA 5 mM lalu

diencerkan dengan larutan buffer fosfat 0,02 M pH 6,8 hingga 10 mL.


40

Tabel 3.Hidroquinon (Kontrol positif)

Konsentrasi Replikasi Absorbansi + Enzim Absorbansi – Enzim

1,375 I 0,188 0,034

II 0,190 0,033

III 0,189 0,035

2,75 I 0,172 0,033

II 0,172 0,034

III 0,172 0,034

5,5 I 0,160 0,033

II 0,158 0,033

III 0,157 0,034

11 I 0,153 0,034

II 0,157 0,034

III 0,155 0,035

22 I 0,149 0,035

II 0,147 0,038

III 0,145 0,038

Tabel 4.Kontrol negatif

Replikasi Absorbansi +Enzim Absorbansi -Enzim

I 0,232 0,033

II 0,225 0,034

III 0,222 0,035

Tabel 5. Ekstrak daun binahong

Konsentrasi Replikasi

Absorbansi +

Enzim

Absorbansi -

Enzim

50 I 0,147 0,041

II 0,140 0,040

III 0,158 0,040

100 I 0,149 0,049

II 0,152 0,052

III 0,171 0,054

200 I 0,176 0,069

II 0,182 0,068

III 0,183 0,078

400 I 0,239 0,115

II 0,220 0,137

III 0,239 0,119

800 I 0,353 0,239

II 0,356 0,265

III 0,367 0,273


41

Lampiran 7. Perhitungan persentase inhibisi

Rumus = [ ( A B) (C D)] x 100%.

A B

Keterangan: A = Absorbansi larutan tanpa sampel + enzim

B = Absorbansi larutan tanpa sampel tanpa enzim

C = Absorbansi larutan sampel + enzim

D = Absorbansi larutan sampel tanpa enzim

Perhitungan persentase inhibisi hidroquinon

1. Konsentrasi 1,375 ppm

R1 = [ (0,222 0,034) – (0,188 0,034) ] x 100%

0,222 0,034

= (0,188 – 0,154) x100% = 18,085 %

0,188

R2 = [ (0,225 0,034) – (0,189 0,034) ] x 100%

0,225 0,034

= (0,191 – 0,155) x100% = 18,848 %

0,191

R3 = [ (0,232 0,034) – (0,190 0,034) ] x 100%

0,232 0,034

= (0,198 – 0,156) x100% = 21,212 %

0,198

Rata- rata = 18,085+ 18,848+ 21,212 =54,145 = 19,381 %

3 3


R1 = [ (0,222 0,034) – (0,168 0,033) ] x 100%

0,222 0,034

= (0,188 – 0,135) x100% = 28,191 %

0,188


42

R2 = [ (0,225 0,034) – (0,172 0,033) ] x 100%

0,225 0,034

= (0,191 – 0,139) x100% = 27,225 %

0,191

R3 = [ (0,232 0,034) – (0,172 0,033) ] x 100%

0,232 0,034

= (0,198 – 0,139) x100% = 29,797 %

0,198

Rata- rata = 28,191+ 27,225+ 29,797 =85,213 = 28,404 %

3 3


R1 = [ (0,222 0,034) – (0,157 0,033) ] x 100%

0,222 0,034

= (0,188 – 0,124) x100% = 34,042 %

0,188

R2 = [ (0,225 0,034) – (0,158 0,033) ] x 100%

0,225 0,034

= (0,191 – 0,125) x100% = 34,554 %

0,191

R3 = [ (0,232 0,034) – (0,160 0,033) ] x 100%

0,232 0,034

= (0,198 – 0,127) x100% = 35,858 %

0,198

Rata- rata = 34,042+ 34,554+ 35,858 =104,454= 34,818 %

3 3

4. Konsentrasi 11 ppm

R1 = [ (0,222 0,034) – (0,153 0,034) ] x 100%

0,222 0,034

= (0,188 – 0,119) x100% = 36,702 %

0,188


43

R2 = [ (0,225 0,034) – (0,155 0,034) ] x 100%

0,225 0,034

= (0,191 – 0,121) x100% = 36,649 %

0,191

R3 = [ (0,232 0,034) – (0,157 0,034) ] x 100%

0,232 0,034

= (0,198 – 0,123) x100% = 37,878 %

0,198

Rata- rata = 36,702+ 36,649+ 37,878 =112,229 = 37,076 %

3 3


R1 = [ (0,222 0,034) – (0,145 0,037) ] x 100%

0,222 0,034

= (0,188 – 0,108) x100% = 42,553 %

0,188

R2 = [ (0,225 0,034) – (0,147 0,037) ] x 100%

0,225 0,034

= (0,191 – 0,110) x100% = 42,408 %

0,191

R3 = [ (0,232 0,034) – (0,149 0,037) ] x 100%

0,232 0,034

= (0,198 – 0,112) x100% = 43,434 %

0,198

Rata- rata = 42,553+ 42,408+ 43,434 =128,395 = 42,795 %

3 3

Perhitungan persentase inhibisi ekstrak daun binahong


R1 = [ (0,222 0,033) – (0,140 0,040) ] x 100%

0,222 0,034

= (0,189 – 0,1) x100% = 47,089 %

0,189


44

R2 = [ (0,225 0,033) – (0,147 0,040) ] x 100%

0,225 0,033

= (0,192 – 0,107) x100% = 44,270 %

0,192

R3 = [ (0,232 0,033) – (0,158 0,040) ] x 100%

0,232 0,033

= (0,199 – 0,118) x100% = 40,703 %

0,199

Rata- rata = 47,089+ 44,270+ 40,703 =132,062 = 44,020 %

3 3


R1 = [ (0,222 0,033) – (0,149 0,051) ] x 100%

0,222 0,033

= (0,189 – 0,098) x100% = 48,148 %

0,189

R2 = [ (0,225 0,033) – (0,152 0,051) ] x 100%

0,225 0,033

= (0,192 – 0,101) x100% = 47,395 %

0,192

R3 = [ (0,232 0,033) – (0,171 0,051) ] x 100%

0,232 0,033

= (0,199 – 0,12) x100% = 39,698 %

0,199

Rata- rata = 48,148+ 47,395+ 39,698 =135,241 = 45,080 %

3 3


R1 = [ (0,222 0,033) – (0,176 0,071) ] x 100%

0,222 0,033

= (0,189 – 0,105) x100% = 44,444 %

0,189


45

R2 = [ (0,225 0,033) – (0,182 0,071) ] x 100%

0,225 0,033

= (0,192 – 0,111) x100% = 42,187 %

0,192

R3 = [ (0,232 0,033) – (0,183 0,071) ] x 100%

0,232 0,033

= (0,199 – 0,112) x100% = 43,718 %

0,199

Rata- rata = 44,444+ 42,187+ 43,718 =130,349 = 43,449 %

3 3


R1 = [ (0,222 0,033) – (0,220 0,123) ] x 100%

0,222 0,033

= (0,189 – 0,097) x100% = 48,677 %

0,189

R2 = [ (0,225 0,033) – (0,239 0,123) ] x 100%

0,225 0,033

= (0,192 – 0,116) x100% = 39,583 %

0,192

R3 = [ (0,232 0,033) – (0,239 0,123) ] x 100%

0,232 0,033

= (0,199 – 0,116) x100% = 41,708 %

0,199

Rata- rata = 48,677+ 39,583+ 41,708 =129,968 = 43,322 %

3 3


R1 = [ (0,222 0,033) – (0,353 0,289) ] x 100%

0,222 0,033

= (0,189 – 0,094) x100% = 50,264 %

0,189


46

R2 = [ (0,225 0,033) – (0,356 0,259) ] x 100%

0,225 0,033

= (0,192 – 0,097) x100% = 49,479 %

0,192

R3 = [ (0,232 0,033) – (0,367 0,259) ] x 100%

0,232 0,033

= (0,199 – 0,108) x100% = 45,728 %

0,199

Rata- rata = 50,264+ 49,479+ 45,728 =145,471 = 48,490 %

3 3


47

Lampiran 8. Gambar pelaksanaan penelitian

A. Pengambilan daun binahong B. Simplisia basah

C. Proses pengeringan D. Simplisia kering daun binahong

E. Serbuk daun binahong F. Proses maserasi

G. Penguapan dengan evaporator H. Ekstrak kental daun binahong


48

Lampiran 9.Uji aktivitas penghambatan tirosinase

A. Seri konsentrasi sampel B. Seri konsentrasi kontrol positif

D. Tempat penyimpanan enzim D. Perubahan warna


49

Lampiran 10. Identifikasi kandungan senyawa

Larutan ekstrak uji dan pembanding


50

Lampiran 11. Gambar hasil pengamatan kromatografi lapis tipis ekstrak

etil asetat daun binahong

A.

A. Identifikasi Flavonoid B.Identifikasi Tanin

(UV366nm) (UV 366nm)

C. Identifikasi Saponin D.Identifikasi Alkaloid

Sinar tampak Sinar tampak


51

Lampiran 12. Alat dan bahan

1. Alat- alat gelas 2. Neraca Analitik

3. PH meter (Metrohm) 4. Microplate reader

5. Temperature suhu ruangan 6. Mikroplate


Documents

DAFTAR PUSTAKA - repository.ump.ac.idrepository.ump.ac.id/552/7/DAFTAR PUSTAKA_QORI WAHYUNINGSIH _FARMASI...Aktivitas Penghambatan Tirosin..., Qori Wahyuningsih, Farmasi UMP, 2013