Caspase-Activated DNase Is

Required for Maintenance of

Tolerance to Lupus Nuclear

Autoantigens Neelakshi R. Jog, Lorenza Frisoni, Qin Shi, Marc Monestier,

Sairy Hernandez, Joe Craft, Eline T. Luning Prak, and Roberto Caricchio

Autoinmunidad. Enero 2013 - Barcelona.

• María Carpintero Serrano.

• Andres Fernandez De Obarrio.

INTRODUCCIÓN

◦ Enfermedad autoinmune poligénica y multifactorial.

◦ Rotura de tolerancia del SI a Ag propios.

◦ Producción de autoAc: ANAs, Anti-dsDNA. Inflamación.

Muerte celular por apoptosis.

Otros mecanismos de disregulación.

◦ Condicionantes: Predisposición genética.

Ambientales.

Disregulación inmunológica.

◦ Puede implicar cualquier órgano o sistema.

LUPUS ERITOMATOSO SISTÉMICO (LES):

CASPASE ACTIVATED DNASE (CAD)

Endonucleasa

Activada por Caspasa3 por la vía extrínseca de apoptosis.

Desregulación del proceso de clearence: Necrosis

◦ Cross-presentación y activación de cel. B AutoAc

C. Apoptóticas Degradación cromatina

Unidades nucleosoma-

les

Cuerpos apoptóticos

Cleareance

CAD

MODELO DE ESTUDIO ANIMAL

SLE1 pérdida tolerancia a cromatina.

SLE123 pérdida tolerancia a cromatina + glomerulonefritis.

3H9 Knock-In de la cadena pesada de anti-DNA de ratón MRL/lpr.

◦ No aumentan los niveles de AutoAc.

◦ Células B autoreactivas son anérgicas y se excluyen de la zona folicular.

Autoinmunidad genéticamente predeterminada.

Introducción de deficiencia de CAD:

Determinar el papel de la fragmentacion de cromatina en LES.

RESULTADOS

Estudio con CAD-/- Sle1 y CAD-/-

Sle123.

Incremento de los niveles de AutoAc anti-cromatina en CAD-/- Sle1 y CAD-/- Sle123.

Deposición de IC en riñón sólo en CAD-/- Sle123 nefritis más severa. (Background)

Sle1 Sle1 CAD-/- Ctrl-

Ctrl+

3H9 CAD-/- : rotura de la tolerancia

de cél. B autoreactivas

Generación espontánea de AutoAc en ratones CAD-/-

3H9 IgM y IgG

Modelo de cél. B anérgicas.

CAD-/-

Estudio patrones de ANA en 3H9

CAD-/-

CAD-/- no varía el patrón de ANA.

CAD-/- varía el título de ANA.

Estudio de checkpoints de tolerancia

de células B en 3H9 y 3H9 CAD-/-.

Méd

ula

óse

a

Bazo

Fr.D: pre-rearragenment CL.

Fr.E: inmadura IgM+.

Fr.F: cel.B recirculantes.

Méd

ula

óse

a

Bazo

B

azo

N=9

No variaciones entre desarrollo y maduración de

células B en 3H9 y 3H9 CAD-/- en médula ósea. (A),(B).

Aumento de cel.B en MZ en 3H9 y 3H9 CAD-/- (C).

Reducido número de T2 en 3H9 y 3H9 CAD-/- (D).

Aumento de IgMA en en 3H9 y 3H9 CAD-/- en médula ósea

y bazo.

Estudio de checkpoints de tolerancia

de células B en 3H9 y 3H9 CAD-/-.

Estudio de la exclusión folicular.

Las células B autoreactivas no muestran exclusión folicular

en 3H9 CAD-/- y están presentes en cel. B del folículo.

Cel.

B f

olícu

lo

Estudio de la capacidad de opsonización de

los autoAc.

Los auto Ac se unen más a

CAD-/- (A).

Los Ac especificos contra

histonas H2B , H2A-H2B,

nucleosoma y H3-H4 se une

más a las apoptoticas CAD-/-.

En los Ac especificos anti-

DNA no hay diferencias. (B)

La unión del autoAc no varía

ni la densidad ni el

tamaño ni en CAD-/- ni

CAD+/+.

DISCUSIÓN

La deficiencia de CAD produce un aumento de AutoAc y

mayor severidad de nefritis.

El background génetico es importante para el desarrollo

de la enfermedad.

La fragmentación de la cromatina apoptótica es

esencial para la inducción a tolerancia a AutoAg nucleares.

SLE tiene defectos intrínsecos en uno o mas checkpoints

de la tolerancia.

Mejora de la opsonización de las cél. apoptóticas en

CAD-/-,incrementando la capacidad de las CD de activar

cél.T.

CONCLUSIONES

CAD puede ser responsable de mantener la

tolerancia a autoAg nucleares.

Potencial de la manipulación farmacológica de

pasos específicos de la apoptosis para una mejora

del control de la autoinmunidad.

BIBLIOGRAFÍA • Autoimmunity and the Clearance of Dead Cells.

Shigekazu Nagata, Rikinari Hanayama, Kohki Kawane.

• Caspase-Activated DNase Is Required for

Maintenance of Tolerance to Lupus Nuclear

Autoantigens.

Neelakshi R. Jog, Lorenza Frisoni, Qin Shi, Marc Monestier, Sairy

Hernandez, Joe Craft, Eline T. Luning Prak, and Roberto Caricchio

• Apuntes de Enfermedades Autoinmunes (Máster

inmunologia UB-UAB).