11
Antioxidants inhibit endothelin-1 (1±31)-induced proliferation of vascular smooth muscle cells via the inhibition of mitogen-activated protein (MAP) kinase and activator protein-1 (AP-1) Moe Kyaw, Masanori Yoshizumi, Koichiro Tsuchiya, Kazuyoshi Kirima, Yuki Suzaki, Shinji Abe, Toyoshi Hasegawa, Toshiaki Tamaki * Department of Pharmacology, The University of Tokushima School of Medicine, 3-18-15 Kuramoto, Tokushima 770-8503, Japan Received 30 October 2001; accepted 11 April 2002 Abstract We previously found that human chymase cleaves big endothelins (ETs) at the Tyr 31 ±Gly 32 bond and produces 31-amino acid ETs (1± 31), without any further degradation products. In the present study, we investigated the effects of various antioxidants on the ET-1 (1±31)- induced change in intracellular signaling and proliferation of cultured rat aortic smooth muscle cells (RASMC). ET-1 (1±31) stimulated rapid and signi®cant activation of the mitogen-activated protein (MAP) kinase family, i.e. extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2), c-Jun NH 2 -terminal kinase (JNK), and p38 MAPK, in RASMC to an extent similar to that of ET-1. All of the antioxidants examined, i.e. N-acetyl-L-cysteine (NAC), diphenyleneiodonium chloride (DPI), and L-()-ascorbic acid (ascorbic acid), inhibited both ET-1 (1±31)- and ET-1-induced JNK and p38 MAPK activation but not ERK1/2 activation. Electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy measurements revealed that NAC, DPI, and ascorbic acid inhibited xanthine oxidase-induced superoxide (O 2 ) generation in a cell-free system. ET-1 (1±31) in addition to ET-1 increased the generation of cellular reactive oxygen species (ROS) in RASMC. ET-1 (1±31)- and ET-1-induced cellular ROS generation was inhibited similarly by NAC, DPI, and ascorbic acid in RASMC. Gel-mobility shift analysis showed that ET-1 (1±31) and ET-1 caused an increase in activator protein-1 (AP-1)±DNA binding activity in RASMC that was inhibited by the above three antioxidants. ET-1 (1±31) increased [ 3 H]thymidine incorporation into cells to an extent similar to that of ET-1. This ET-1 (1±31)-induced increase in [ 3 H]thymidine incorporation was also inhibited by NAC and DPI, but not by ascorbic acid. These results suggest that antioxidants inhibit ET-1 (1±31)-induced RASMC proliferation by inhibiting ROS generation within the cells. The underlying mechanisms of the inhibition of cellular proliferation by antioxidants may be explained, in part, by the inhibition of JNK activation and the resultant inhibition of AP-1±DNA binding. # 2002 Elsevier Science Inc. All rights reserved. Keywords: Endothelin-1 (1±31); Human chymase; Mitogen-activated protein kinases; Reactive oxygen species; Antioxidants; Rat aortic smooth muscle cell 1. Introduction It has been reported that the proliferation of VSMC is mediated by ROS, which are derived, at least in part, from a ¯avin-containing membrane-associated NADH/NADPH oxidase [1,2]. NADH/NADPH oxidase has also been reported to be the major source of ROS in several animal models of vascular disease [3,4]. Ang II was demonstrated to be a potent inducer of ROS through the activation of NADH/NADPH oxidase in VSMC [1]. In addition, ROS generation in response to various external stimuli has been shown to relate to the activation of MAP kinase [5] and AP- 1 [6]. In a previous study, we demonstrated that antiox- idants inhibit Ang II-induced JNK and p38 MAP kinase activation in RASMC [7], suggesting an important role of ROS in VSMC. A growing body of evidence suggests that ET-1 plays a role in the pathogenesis of several cardio- vascular diseases associated with VSMC proliferation [8,9] and also induces ROS generation in different cell types Biochemical Pharmacology 64 (2002) 1521±1531 0006-2952/02/$ ± see front matter # 2002 Elsevier Science Inc. All rights reserved. PII:S0006-2952(02)01349-7 * Corresponding author. Tel.: 81-88-633-7061; fax: 81-88-633-7062. E-mail address: [email protected] (T. Tamaki). Abbreviations: Ang II, angiotensin II; AP-1, activator protein-1; DMEM, Dulbecco's Modi®ed Eagle's Medium; DMPO, 5,5-dimethyl-1- pyrroline-N-oxide; DPI, diphenyleneiodonium chloride; DTPA, diethyle- netriaminopentaacetic acid; ERK1/2, extracellular signal-regulated kinase 1/2; ET-1, endothelin-1; HPX, hypoxanthine; JNK, c-Jun NH 2 -terminal kinase; MAP, mitogen-activated protein; p38 MAPK, p38 mitogen- activated protein kinase; NAC, N-acetyl-L-cysteine; PMSF, phenylmethyl- sulfonyl ¯uoride; RASMC, rat aortic smooth muscle cell(s); ROS, reactive oxygen species; SOD, superoxide dismutase; VSMC, vascular smooth muscle cell(s); XOD, xanthine oxidase.

Antioxidants inhibit endothelin-1 (1–31)-induced proliferation of vascular smooth muscle cells via the inhibition of mitogen-activated protein (MAP) kinase and activator protein-1

Embed Size (px)

Citation preview

����������� ������ ������ ���� �������������� ��� ��������� �� ���� ������ ��� � �� ��� �� ��������� �� �����������������

������� ����� ����� ��� ��������� ��������� ������

��� � �!" ������� #��$���" ������� %��� �" ��$� �� ������"#��� &�$���" &��'� ���" %� �� (����!�" %����� %�����)

���������� ������ ���� ��� ���������� �������� � �� ���� ���� ������ !������ �������� ""#�� #�� $����

*������� �+ ,������ -++�. �������� �� ���� -++-

��������

/� ������� ����� ��� ���� � ��� � ���� ��� ������ �� �0%� �� �� % ����1 �- ���� ��� ������� �������� ���� 0% ���

���" !����� �� ������ ����������� �������2 3� �� ������ ��� " !� ����������� �� ������ �� ������ ����������� �� �� 0%�� �������

������� ����� �� ������� � �� ���� ��� ��� ��� ��������� �� �� ����� ��� ������ ���� ��� � �� �*�&�4�2 0%�� ������ ���� ����

����� ��� ����5���� ���������� �� �� ����������������� ������� ����� ����� ���� " �2�2 ������� � �� ���� ����� ���� ����� �6-

�0*��6-�" ��7�� 8(-�������� ����� �78��" ��� ��9 ����" �� *�&�4 �� �� ������ ��� �� �� ��� �� 0%��2 � �� �� �����������

��������" �2�2 %����� �:�� ����� �8�4�" ����� ����������� � ����� �;�3�" ��� :������������ ���� �������� �����" �������� ���

0%�� ������� ��� 0%���������� 78� ��� ��9 ���� ���������� ��� ��� 0*��6- ����������2 0 ������ ������������ �������� �0�*�

��������� ���������� ����� �� ��� 8�4" ;�3" ��� ������� ���� �������� ������� �������������� ��������� �,-��� ����������

�� � �� ����� ���2 0%�� ������ �� �������� �� 0%�� �������� �� ���������� �� �� � �� �������� �� ��� ����� �*,&� �� *�&�42 0%��

������� ��� 0%���������� �� � �� *,& ���������� !� �������� ��� �� � 8�4" ;�3" ��� ������� ���� �� *�&�42 1� ����� �� ���

��� � �!�� ��� 0%�� ������ ��� 0%�� ����� �� ������� �� ��������� ��������� �������;8� ������� ������� �� *�&�4 ��� !�

�������� � �� ����� ���� �����������2 0%�� ������ �������� <�(=� ������ ������������� ���� �� �� �� ������ ��� �� �� ��� �� 0%��2

%� 0%�� �������������� ������� �� <�(=� ������ ������������� !� � � �������� � 8�4 ��� ;�3" ��� ��� � ������� ����2 %��

��� � ����� ��� ����������� ������ 0%�� �������������� *�&�4 ��� ��������� � ��������� *,& ���������� !���� �� �� 2 %�

����� ��� ������� �� �� ��������� �� �� � �� ��� ��������� � ����������� �� �� ��� �����" �� ����" � �� ��������� �� 78�

���������� ��� �� ��� ���� ��������� �� �����;8� �������2

� -++- 0 ����� &������ 3��2 � ���� �������2

!��&���' 0����� ���� ������. (���� � ���. ����������������� ������� �����. *������� �� ��� �����. �����������. *�� ������ ���� ��� � ��

� ���� ������

3� � ���� �������� ��� �� ��� ��������� �� >&�4 �

�������� � *,&" !�� ��� �������" �� ��� �� ����" ���� �

?��������������� ����������������� 8�;(68�;�(

������ <�"-=2 8�;(68�;�( ������ � � � ����

�������� �� �� �� ��'�� ����� �� *,& �� ����� �����

���� �� ���� �� ����� <�"@=2 ��� 33 !� �����������

�� �� � ������ ������� �� *,& ����� �� ���������� ��

8�;(68�;�( ������ �� >&�4 <�=2 3� ��������" *,&

���������� �� ������ �� ������ ������� ���� � � ����

�!� �� �� ��� �� �� ���������� ����� ����� <A= ��� ���

� <B=2 3� � ������� ��� " !� ����������� ��� �������

����� ������ ��� 33�������� 78� ��� ��9 ��� �����

���������� �� *�&�4 <C=" �������� �� ��������� �� � ��

*,& �� >&�42 � ���!��� ��� �� �������� ����� ���

0%�� � � � �� � �� �� ��������� �� ����� �������

���� �� ����� �������� !�� >&�4 ��� ��������� <9"D=

��� � � ������ *,& ���������� �� ��������� �� � ��

E�������� ������� �� B@ �-++-� �A-���A��

+++B�-DA-6+-6F � �� ����� ������ � -++- 0 ����� &������ 3��2 � ���� �������2

�33G & + + + B � - D A - � + - � + � � @ D � C

) 4����������� �����2 %� 2G �9��99�B���C+B�. ���G �9��99�B���C+B-2

(����� �������' ������H����2���2���������2��2'� �%2 %������2

)**���������' ��� 33" ���������� 33. ����" ��������� ���������.

;�0�" ;� �����I ����5�� 0�� �I ������. ;��," A"A������ ���

� ��� ����%������. ;�3" ����� ����������� � �����. ;%��" ���� ��

��������������������� ����. 0*��6-" ������� � �� ���� ����� ���� �����

�6-. 0%��" ������ ����. (�J" ���������. 78�" ��7�� 8(-��������

�����. ���" ����������������� �������. ��9 ����" ��9 ��������

��������� ������� �����. 8�4" %����� �:�� �����. ��&K" ��� ��� �

� ��� ?������. *�&�4" ��� ������ ���� ��� � �� ��. *,&" ��������

�� ��� �����. &,;" ��������� �������. >&�4" ���� �� ����

��� � �� ��. J,;" ������� ������2

<�+��-=2 0%�� ��� ��� 33 � ���� �!� �� ������ *,&�

��������� ���������� �� ��� ����� �� >&�4 <��=2 &����

!� ������� �������� ��� ���� � ��� � ���� ���

������ �� �0%� �� �� % ����1 �- ���� ��� �������

�������� ���� 0% ������" !����� �� ������ �����������

������� <�@=" ��� ��� 0%�� ������ ��� � �� � ���������

������� ��� >&�4" ������ ���� >&�4 ��� ���������"

��� � � ��� �L�������� �� 0%�� <�A=" !� �����$�� ���

*,& �� � � ������� 0%�� ����������� ���� ������� �

� �� ���� ��� ������ ���� ���� >&�4 ��� ���������2

3� �� ������ ��� " !� ����������� �� ������ �� ��

����������� 8�4" ;�3" ��� :������������ ���� ��������

����� �� 0%�� ������� � !� � 0%������������� �����

����������" �2�2 0*��6-" 78�" ��� ��9 ����" �� �� �����

*�&�42 3� ��������" !� ������ ������� �� ���������

������ �� ��� ����������� �� *,& �� � �� ����� ���

��� ���������$�� �� *,& ���������� � 0%�� ������ ���

0%�� �� *�&�4" ���� 0�* ��������� 2 K��� " ��

������ �� ����������� �� ���� ����������" ��� �� �������

�� ;8� ���� ������ � 0%�� ������ ��� 0%�� !���

��������2

� ��������� �� ����� �

+,�, -���� ���

(���� 0%�� ������ ��� ���� 0%�� !��� �������

���� �� ������� 3�������" 3��2 8�4" ;�3" &E -+�A9+ �@�

<@�?������� =�-�<@���� � 5� ���� =�A�<@�� ���

� =��(������$� ��" ;%��" J,; ����� �������� ��" ���

(�J !��� �������� ���� �� &���� 4����� 4�2 :�����

������� ���� !� ���� /��� ���� 4����� 3�������"

:��2 �����0*� �6- ������� �%�-+-6% �-+@�" �����

��9 ���� ������� �%��9+6% ��9-�" ��� �� &���678�

�� ��� !��� ������� ���� 8�! 0�� ��� E�� ��" 3��2

;��, !� ������� ���� :������2 � ���� ������

!��� �� ������� �����" !��� �������� ���� ���������

�����" ��� !��� ��� !����� ������ ����5������2

+,+, -������ .)��-

%�������� �� �� ��� !� ���� �� �� 1���� ��� ��

4��� ��� M� �� :�������� ����� ��� ��� � �� M2&2

8������ 3������� �� (�� � �83( ��� ������� 8�2 9A�-�"

������ �D9A�2 %� ������� ������ �� �� � &�������;�!�

� ��� !��� ������ ����� ��� ������� �� ;�0�

���������� ������ �� ��++ M6�:�6������� ��� ��++ ��6�:�2 %� ������ !��� ����� �� ���������� ���� ���

������� ���2 %� �� ���� ������� !��� ��� ����" ���

�� ������ ��� !� ������� � ���� ������� ��� ��

������ ������ !�� ��� ����2 ;������ ������ !���

��� ���� ����� ���� ��� � ���� ������ ��������!� ����

���� �A��� �� ���� ��� �3/��3�2 ;�0� ����������

�+N ���� ������ ���� ��� ������ ��6������� ��� !�

���� ����� �� �� ��� �� ����� �� ���� !�����

���������� �� �� ����������� �� �� ��� ���2 >&�4 !���

� �!�� �� ���! ��� ���� �� ���� �C��+ �� �" ��� ��

���� !��� ������� ����� ���� �$�� 5�� �������. ��

>&�4 ������!� !��� !��� !�� �� ���� ������2

����� ������� ���?����� �� ���� �A��� ���" ��

!��� ������� � ����� �� ����$����� ��� ���!� �� %�CA

?�� �3/��3� ������ ��2 0�� ���� ����� �� �����

����� -�A� !��� ��� �� � ����������2 %� ����� ��

�� >&�4 !� �������� �� �� OD+N � ����� �� ���

� �� �������� �� � ��� � �������� ������� <�B=2

4� ����� �� !� OD9N � ���������� � ��� ���� ��

+2-N �� ��� � ��2

+,�, ���������� ��� ������� � �)� ������

� ������ �����

*�&�4!��� ����� ���-� �+@ �� ���-� ��� ���!�

�� �����?����� �� B+��� �� ���� ��� �3/��3� ��

;�0���+N ���� ������ ����2 4� !��� ���� L����

���� ��� @9 � �� ��������� ;�0� ��� ������������ !��

�� !����� ����������� ��� ������ ���� ��+ ��� �� - ��

�� �!�� � ���� ����� !�� 0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�

� ��++ ��� �� �� ��������� ���� �����2 %� ����������

������ !� ��������" ��� �� ���� � �� !��� !���

���� !�� �� � �E& ���������� ����� ������������

�� ���2 4� !��� �� ��+�B+ ��� �� @�� !�� �� ������� �������� �� -+ �� %���(4 ��( C2@�" �A+ ��

8�4 " � �� 0;%�" � �� 01%�" �N %����� J��++"

-2A �� ����� � ��������" � �� ��� �����������" � �� ����� ������������" � ��6�: �� ������

���" ��� � �� ��&K2 ����� ����������" �� �� !���

�������� �(��� &���� M*�-+ �. %�� &���� 4�" :��2� ��

��� ��� � ���" ���������� �� ��������������� ����" ���

����������� �� �B"+++ � ��� -+ ��� �� @�2 %� �������

������������� �� �� ���������� !��� ������� !�� �

������� �� ��� �������� ��� ����� �� �9+� ���� �� ����� ��� ����� ������� 2

+,/, ������������ (.!�0+ ��� ��� �)�!

� �������� �� .)��-

������� " !� ������� ��� ��� ����� �������

���� �� ����� ����� �� !�� ����5� �������2

(�!����" !� ����� ��� �� ��������� �� 0*��6- ���

��9 ����" � ������� � �� ����� ����� �� " ���

���� ����� ����� ����" � �� �� � ������� ���

����" !��� �� ����� ���� �.- � +�D+� �� *�&�4

������ ��� �����2 %�������" !� ��� ������� ������

��� �� ��������� �� �����0*��6- ��� �������9

���� �� ��� ���� 0*��6- ��� ��9 ���� ����������" �

�������� ������� <�C=2 K�� ������� �� ��� �" ��

��� !��� ��'����� �� &;&���10" ��� ������� !���

���������� �� ������� � �� �������� �( ����%��04:.

������ �������� E������" � �������� �������

<�C=2 %� �������� !��� � ����� ��� � � �� ����

����������� !�� � ��������� � ������ ������ ����

�A-- �, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� ��

������ �������� E�����2 %� � �� !��� ��� �����

����� ��� �- � !�� �������������5� 0*��6- �� ��9

���� ��������� �8�! 0�� ��� E�� ���" �� �!�� �

���������� ��� � � !�� � ������� ������� ����'������

������� ����������2 3������������� ���� !���

���� �$�� ���� ������� ���� ���������� �04:.

������ �������� E������ ��� !��� L�����5�� �

���������� �� �� ����� ����� �� 5 � ������� ���� �

M��J ���� --++ ������ �M��J %���� ����� ���

83( ����� �2B+ ���!���2

+, , $%! � ������ �����

78� ������� !� ������� !�� � ��������� ���� �

�� � ��� ���� �� �� ����� ����� �� ����������� ��7��

�8�! 0�� ��� E�� ���2 ����� ���������" �� !��� �����

�!��� !�� ������ � �E&" ������ ��� �� � ��� ���� �

������ ���� ���� �� �� ����" ��� �������� ���� ���� ��

���2 ����� �������� �� �� ����� � ��������������

��B"+++ �" -+ ���" @��" �� ������� ������� �� �� �����

������ !� ������� ���� � ������� �� ��� ��������2

0L�� ������ �� ������� ��++ ��� !��� ��� ����������

��������� !�� ��7�� ���9D� ����� ������� ���� ��������2

����� !���� �� ����" ����� �� !��� ���������

��������� �� �� ���������� �� �� ������������2 E���

!��� ����� �� � �+N &;&��� ��� ����� �� " ���

������� ������ !� ��������� !�� �� ������� ������

��������5� ��7�� <�C=2

+,2, ������������ ��� �����6��� � �������� � ������

����6������ *� ��� (�.����� �������� �����

%� ,-�� ��������� ��������� �� 8�4" ;�3" ���

������� ���� !��� ������ � �� 0�*���� ��������

�����2 &����� ������������� �� 8�4" ;�3" ��� �������

���� !��� ���������� ���� �� �������� ������� ����������

- �� (�J" +2-C- M6�: �� J,;" ��� �+N ;��, ��

+2� � (0�0& ������ ��( C2@�" ��� ��� ���� �� �C�2 ,�������� ����� �� �������� �� J,;" ��� � !��� �����

������ ���� � L����$ ?�� �� " !�� !�" �� ����" � ����

�� �� ����� �� �� 0�* ����������� �� ������ ��

;��,6,,� ���� 2 &������ !��� ����� �� �� 3E�6�4

�������� !�� ���!��� �0&�*3% @�-. 70,: 4�" :��2�

��� ��� �2 ;���� �� 0�* ��������� ��� �� �� 5����

�����2

+,", ������������ ������� .7� ��������� �� .)��-

%� ������� *,& ����������" !� ������� � ��� ����

�5������ �� �� 0�*���� �������� ����� �������� ����

���� <�9=2 *�&�4 !��� ����� ���-� �+@ �� ���-�

��� ���!� �� �����?����� �� B+��� �� ���� ���

�3/��3� �� ;�0���+N ���� ������ ����2 4� !���

���� L������� ��� @9 � �� ��������� ;�0� ���

������������ !�� �� !����� ����������� ��� ������

���� ��+ ��� �� - ��2 %� ���������� ������ !�

��������" ��� �� !��� !��� �!��� !�� �E& ��������

��� +2�N � ����2 �E& ���������� +2� �� ;%�� !�

����� ��� ���� ���� !�� 0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�

� ��++ ��� � � �++ �� ;��, �� �� ������� ��

������ �� ����������� ��� A ��� �� �C�2 4� !���

������� !�� � ���� � ������ ������ ��� ���������� ����

���� �� ����2 %��" �� ;��,6�,( ��� ������ !�

������� �� ��������� �� � �� *,& ����������" ���� 0�*

��������� 2

+,�, (�. ��� ��� ��

0�* ������ !��� �������� �� ���� �� ���� �� ����

����������� !�� � 70&�%0 �++ ����������� �70,: 4�"

:��2� ��������� �� J����� !�� �++��($ ���� ����� ����

L���� ��� �� 0&�M4J- ����� 2 &������ ��� ����� !���

��������� ���� � ��� ����� �������" /���� <�D=2

P����������� �� ������ !�� � ��� � ���� ������ ����

!� ��������� � ��������� �� �� ���� � ������� �� ��

������� ���� !�� ��� �� �� ��� 0�* ������� ��

��-�2

+,8, 9�� �*����� ���� �����

K�� �� �� ���� �� ��� �� " ��� ��� ������� �������

!��� �������� ���� *�&�4 �� B+��� ��� ����� ����

���������� !�� �� !����� ����������� �� &E -+�A9+ ���

������ ���� ��+ ��� �� - �� �� �!�� � ���� ����� !��

0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�� ��++ ��� �� �� ���������

���� �����2 %� ��� � !��� �������$�� �� +2@ �: ��

-+ �� (0�0& ��( C2D� ���������� +2@ � 8�4 " � ��

0;%�" � �� 01%�" �2A �� ��4 -" -+N � ���� "

�+ �� 8�K" � �� 8��>,@" +2- �� �����������

�;%%�" -+ �� ��� ����������" +2A �� ��&K"

B+ ��6�: �� ���������" ��� - ��6�: �� ��������" �����

����� �� ��� ��� �A ���" ��� ����������� �� �A"+++ � ���

�+ ��� �� @�2 %� ��� ���� ���������� !��� �� �� ���

������� ������������� ��� ����� �� �9+� ���� ���2 %���������� ��� �� �� ���� �� ��� �� � ����

�������� ������� <-+"-�=2 3� �����" �� �� ���� ��

��� �� �� *�&�4 ��� ��� ���� ������� ������� !�

��������� !�� �� � ������ ������ ����� ���������� ��

���� ������� �L����� �A��414%%1�%1�4%4�1441�1������ <--=2 %� ����� !� ���� ��� �� !�� <���-�=�%����� %@ �� ��� ������ �����" ��� ����5�� � ������

������ �� � E���&��� �� ��� �E���*��" � ���� 8���

;���� (���� ��2 K�� �� ;8��������� ������� ��������"

�� ��� � �� *�&�4 ��� ��� ������� ������� ��+ ���������� !��� ��������� !�� �+ ��� �� � �-�� ��� ��

� ������ ������ ���������� �� ������ ���� �������

��� �� ���� ����������� ��� -+ ���" �� -+ �: �� �������

������ �������� �� -+ �� (0�0& ��( C2D�" +2- ��

0;%�" +2- �� 01%�" 9+ �� 8�4 " +2� �� ��4 -"

� �� ;%%" +2- �� ��&K" BN � ���� " ��� - �� ��

�� ���� ������������ � ��� �� ���� ��� <�3��4=.

�������� E������ � � �������5� ����������2 %�

�, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� �� �A-�

;8��������� ���� ��� !��� �������� ���� �� ����

;8� ����� � � ���������� �� @N �������������

�� ��� ����� �� �� B2C �� %���(4 ��( C2A�"

�2� �� ����� �������" +2� �� 0;%�" ��� -2AN � �

���� 2 1� !��� ��� �� -++ >�� @� ��� � �" �����" ��'������� ������������� " ��� ��� $�� !�� � ���������� ����

$�� �E�&�-+++ K�'� K� ��2

%� ���������� �� ����5��� �� ;8��������� �������"

������� �������� !��� ��������� � �������� �����" ��

�� ������� �� � �++��� � �� �� ���� �� � ���� ��� ��

���� ������ � ������ ������ ����������" ��� �� �!��

� � ����������2 K���������" �� ������� �� ���� �

������������ �� ��7�� �� ����5� ���� ������� ������� "

������� �� !��� ��������� !�� ������ �������7��

3�1 ����� ������ ����� ���� -@C�-B� �� ��7�� �&����

4��$ E������� �� �2 �������7�� 3�1 ���� � ��� !�

����� �� �� ��� � ����� �� ������ ������� ��������

���!��� �� ������� ������� ������� ��� �� �-�� ��� ��

������ ���� � ������ ������2 %� �������� !� � �!��

�� ������� �� ���� ����������� ��� � �" ��� ��� ��

��� � !��� ��'����� �� � ����������" � ��������

�����2

+,�#, ������������ :�;<��������� �� �������

&�����?���� *�&�4 �� �-�!� �� ���� � ��� !���

���� L������� � � ����� ��� �� ��������� ;�0� ���

- �� 2 %� !��� ��� ���� ���� !�� 0%�� ������

��++ ��� �� 0%�� ��++ ��� �� �� ������� �� ������

�� ����������� �� &E -+�A9+ ��� -@ �2 %� ���� ����

�� !��� �� �� !�� � �4�6�: �� <�(=� ������ ������

�� �� 9 � �� �� ����2 4� !��� !��� ���� !�� �E&"

��� �!��� !�� ������ � AN ���� ��������� ���� �%4�� ��

������ �� �������������� <�(=� ������" ��� � ����

�$�� �� �++ �: �� +2-A 8 8�,( �� +2�N &;&" ���

������ �$��2 � �L��� �� ��� � !��� ����� �� �+ �:

�� ����� ����� ?���" ��� ������������ !� ���� �� ���

C+��2

+,��, �������� �� ��������

>� �� ��� �������� � �� ����� &; ���� �������

���� ���� �� L������ �����2 %!��!� �8,>�!� ��� ��

��������� �� ����5����� ����� �����" ����� !�� ��

����5�� ����� !�� �� E���������I ��� � ��� !� ���

��� ��������� ���!��� ��������� �����2 � �� �� ��

� � +�+A !� ��������� �� �� �������� ����5����2

� �������

�,�, ���� ���� � ��� � ������� (.!�0+� $%!�

��� ��� �)�! *� (��� 3�5��4 � (��� �� .)��-

%� ��� ���� �� �� ����� ��������� �� ��� �����

���������� � 0%�� ������ �� 0%��" ���!���������

*�&�4 !��� ������ �� 0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�

� ��++ ���2 0*��6-" 78�" ��� ��9���� ��������� �� ��

�� ��� !��� ���������� � �������� �� QQ�������

��� �����2II 0%�� ������ ��������� 0*��6- ��� 78�

!���� A ��� ��� ������ �� �A ��� �A2B@� ��� �2�B��� �"

��������� �2 ��9 ���� !� ��������� !���� A ��� ���

������ �� �+ ��� ��2-A��� �� ����� ���� ����� � 0%�� ���

��� �K��2 ���2 � �!� �� K��2 �4" 0*��6- !� ���������

��� ������ !���� A ��� �@2@��� �� ����� ���� ����� � 0%�

�2 78� ��� ��9 ���� !��� ��������� !���� A ��� ���

������ �� �+ ��� �-2�� ��� -2�@��� �" ��������� � �����

���� ����� � 0%��2 8� � �������� �� �� ������ �� ����

�������� �� ��7�� ����� �������" 0*��6-" ��� ��9

���� !��� ������� � �� ���� ����� �K��2 �� ���

4�2 %�� 5����� ��� ������$�� �� ���� E ��� ; ��

K��2 �2

�,+, -� ��������5������� ���� � ��� � �������

(.! �0+� $%!� ��� ��� �)�! *� (��� 3�5��4 �

(��� �� .)��-

/� � � ���������� �� ������������������������ ���

��� ����� ���������� � �� ��������� ������������� ��

0%�� ������ �� 0%�� �� *�&�4 ��� �� �� �!��� ����G

0*��6- ��� 78�" �A ���. ��� ��9 ����" �+ ��� ��� 0%�

� ������ ���� ����� ��� 0*��6-" A ���. ��� 78� ��� ��9

����" �+ ��� ��� 0%�� ���� �����2 0%�� ������� �� 0%�

��������� 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ����������

�������� �� � ����������������������� ������ �����

�+��+ �� �+�C ��2 0%�� ������� �� 0%������� ����

0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ���������� !� ������

�� �++ ��2 %� ��������� �� 78� ��� ��9 ���� �������

���� !� �� �� ��� ��� �� 0*��6- �� �� ����������

���� �� 0%�� ������ �� 0%�� �K��2 -��;�2 8� � �������� ��

�� ������ �� ���� �������� �� ��7�� ����� �������"

0*��6-" ��� ��9 ���� !��� ������� � �� ���� �����

�K��2 -� ��� 4�2

�,�, (� �� ��� ����6������ %)-� ��=� ��� �� �*�

� �� � ��� (�. ������ ��� ���7077����� ���� �

%� � ���� �� ,-�� ��������� ������� �� �����������

�� �� �� ����� ���" !� ��������� �� 0�*���� �����

���� ����� !�� ;��, �� ������ �� ���������� �� ��

;��,6,,� ��� ������ � J,; ��� �� (�J ���2

/�� +2-C- M6�: �� J,; !� ����� �� �� ��������

������� ���������� - �� (�J ��� -2C � ;��, ��

4� ���������� +2� � (0�0& ������ ��( C2@�" �� ��������

;��,6,,� ��� ������ !� ������� �K��2 ��" 4" ��� 0

�������� � QQ4����� II� !�� ���5�� � ������ �������

�� �8 � �@��A ��� �( � ����C 1 � �������� �������

<-�=2 8���" !� ������ �� ������ �� 8�4 ����� �+�A ��

�+�� ��" ;�3 ��+�C �� �+�� ��" ��� ������� ���� �����

�+�B �� �+�- �� �� �� ��������� �� �� ;��,6,,� ��������� ����J,; ��� �� (�J ���2 � �!� �� K��2 �"

��� ����������� �������� �� 0�* ���� �� ��

�A-@ �, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� ��

K��2 -2 4������������������� ����� �� 0%�� ������� �� 0%���������� 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ���������� �� *�&�42 �� ��� 4� *������������

� ��2 �E ��� ;� ;����������� ��� � �� 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ����������2 >� �� ������ &;" 8 � A� !��� ����� �$�� � ��������� ������ ��

���������� �� ������ �� �!����� ������� �� �2+2

K��2 �2 %��� ����� �� 0%�� ������� �� 0%���������� 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ���������� �� *�&�42 �� ��� 4� *������������ � ��2 �E ��� ;�

;����������� ��� � �� 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ����������2 >� �� ������ &;" 8 � A� !��� ����� �$�� � ��������� ������ �� ���������� ��

������ �� ����� � +� �� �2+2

�, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� �� �A-A

;��,6,,� ��� ������ �� � �����������������������

������2 3� �� ��� �� 8�4 ��� ������� ����" 0�* ����

�� �� ;��,6&� ��� ������ ��8 � �A��-" �( � �B��C 1�

<-@= ��� �������� ������ ��( � ��CD 1� <-A= ��������

����������� !�� �� ������� �� �� ;��,6,,� ���

������" ��������� 2

�,/, (� �� ��� ����6������ %)-� ��=� ��� �� �*�

� �� � ��� (�. ������ ��� ���70�7; ���� ���� �

���� �� *� (��� 3�5��4 � (��� �� .)��-

%� ��� ���� �� � �� *,& ����������" !� ������ ����

���� �� 0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������ ��

*�&�4 ���� �� 0�*���� �������� �����2 0%�� ������

��++ ��� �� 0%�� ��++ ��� ����� � ����5���� ������� ��

�� 0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������ �� *�&�4

������� !�� ���5�� � ������ ������� �� �8 � �A�+A��� �( � �@�BA 1 <-B=2 /� ���� ���������� �� ������ ��

�� ����������� �� �� 0%�� ������� �� 0%������� ����

������� �� 0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������2 %�

�� !��� ���������� !�� 8�4 ��+ ��� �� ������� ����

��++ ��� ��� �+ ���" ��� ;�3 ��+ ��� ��� - � ������ ��

���� ����� �� 0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�� ��++ ��� ���

� A���� ���������� ������ !�� +2� � ;��,2 0�* ����

�� �� ;��,6�,( ��� ������ !��� �������� ����5�

���� � �� �������� �� 8�4 ��+ ���" ;�3 ��+ ���" ���

������� ���� ��++ ��� �K��2 @�2

�, , (� �� ��� ����6������ %)-� ��=� ��� �� �*�

� �� � ��� � ������� (.!�0+� $%!� ��� ��� �)�!

*� (��� 3�5��4 � (��� �� .)��-

%� � ���� �� �� � �� *,& �� 0%�� ������� �� 0%���

������� ��� ����� ����������" !� ������ �� ������ ��

��������� ����������� �� 0%�� ������� �� 0%����������

0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ����������2 %� �� !���

���������� !�� 8�4 ��+ ��� �� ������� ���� ��++ ���

��� �+ ���" ��� !�� ;�3 ��+ ��� ��� - � ������ ��

���� ����� �� 0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�� ��++ ���

��� � �+� �� �A���� ���������� ������2 0%�� ������� �� 0%�

������ ���� 0*��6- ���������� !� ��� �������� � �� ��

�� ����������� ��������" !���� 78� ��� ��9 ����

���������� !��� ��� �������� � ��� �����������

�K��2 A��;�2 /� ��� � ���� ���5���� ��� � �� ��

����������� �������� �� �� ������ �� ��� ��� �����

������� �� >&�4 <C=2

K��2 �2 0����� �� ����������� �� �� 0�* ���� �� �� ;��,6,,� ��� ������ �� � �� ����� ���2 ��" 4" ��� 0� *������������ 0�* ���� �� ��

;��,6,,� ��� ������2 � �!� �� �� ������ 0�* ������ �� ���� � ��� 0" �� � ��� ����! ��� �� ������� ����! �������� 0�* ���� ��

�� ;��,6&� ��� ������ ��� �� �������� ������ " ��������� 2 �E" ;" ��� K� >� �� ������ &;" 8 � A� ��� ������� � �� ����� �� �� 0�* ����

������� ���!��� �� ���� ���� �� �� ;��,6,,� ��� ������ ��� �� �������� ���� �� �� ��-�2 �� G �)� ���������� ��������� ���� �� ������

�� � +�+A�2

�A-B �, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� ��

�,2, (� �� ����6������ ��� �1 +#� �# � ���

�� ����� �� )���5�%) *������ � ������ *� (��� 3�5��4

� (��� �� .)��-

&���� *,& ���������� �� ������ �� ������ �������

���� � � ���� �!� �� �� ��� �� �� ���������� �� �����

;8� �������" !� �������� �� ������ �� ��������� �����

������� �� 0%�� ������� �� 0%���������� �����;8�

������� ���������2 %� ���������� �� � ������ ����

� ������ ������ !�� *�&�4 ��� ��� ������� ��� ��� ��

�� ��������� �� � ����� ���� �� ���� ���� ���2 %�

����� ���� !� ����� �� ��� ����5� ������� ��� ����"

������ �� �������� �� �++��� � �� �� ���� �� ��

�� ��� �� ���� ������ � ������ ������ ��� ��� �� �

���� ��� ����������� ��������� �� �� ��������� �� ����

���� ���2 K���������" �� �������� �� �������7�� �����

��� �� �� ������� �������� ������� ��������� ����

� ��� �K��2 B�" 4" ��� 0�2 0%�� ������ ��++ ��� �� 0%��

��++ ��� ��������� ��� - � �������� ;8� ������� ������

���� �� �� ��� ��� ������� �� *�&�4 � -2�� ���

-2A��� �" ��������� " �������� !�� �� ������ 2 %��

�����;8� ������� ��������� ������� � 0%�� ������ ��

0%�� !��� �������� ����5���� � ������������ !��

8�4 ��+ ��� �� ������� ���� ��++ ��� ��� �+ ���"

��� !�� ;�3 ��+ ��� ��� - � ������ ���� ����� !��

0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�� ��++ ��� ��� � -�� ������

�K��2 B��;�2 /� � � �������� !���� ��9 ���� �

���� ��� �� �����;8� ������� ��������� � ���� &E

-+�A9+" � ����5� ��9 ���� ��������2 (�!����" &E

-+�A9+ �!�� �� ����5���� ������ �� �� 0%�� �������

�� 0%���������� ��������� �� � ����� ���� �� ����

���� ��� �K��2 B0 ��� K�2

�,", (� �� ����6������ ��� �1 +#� �# � �%)

��������� ���������� *� (��� 3�5��4 � (��� �� .)��-

%� � ���� �� �� � �� *,& �� ;8� ���� �� *�&�4"

!� �������� �� ������ �� ��������� ����������� �� 0%��

������� �� 0%���������� ������� �� <�(=� ������ ������

�������� ���� *�&�42 4� !��� ���!� ������� ���

���� ���� !�� 0%�� ������ ��++ ��� �� 0%�� ��++ ��� ��

�� ������� �� ������ �� 8�4 ��+ ���" ������� ����

��++ ���" ;�3 ��+ ���" ��� &E -+�A9+ ��+ ��� ��� �

-@�� ���������� ������2 0%�� ������ �� 0%�� ��� ��

�������� <�(=� ������ ������������� ���� *�&�42

%�� ������ !��� �������� ����5���� � 8�4 ���

;�32 (�!����" ������� ���� ��� � ����� �� ������� ��

<�(=� ������ ������������� ���� *�&�4 ��� ��� �� ��

������ ����� 0%�� ������� �� 0%���������� ������� ��

<�(=� ������ ������������� ���� *�&�42 3� �� ��� "

!� � � ����������� ��� &E -+�A9+ �� �� ����5����

������ �� 0%�� ������� �� 0%���������� ������� ��

<�(=� ������ ������������� �K��2 C�2

� ����������

(���� ��� �� � ��� � ������ � ���� ��� 0% ��

�� % ����1 �- ���� �� ������� ���� ����������������

��� �������� ���� ������ ��" 0% ������" !����� ��

������ ����������� ������� <�@=2 0%�� ������ � ����

���!� �� ��� � �� � ��������� ������� ��� >&�4" �� ����

(�&�4 ��� ���������" ��� �� �� � ��� �L�������� �� 0%��

<�A=2 3� �� ������ ��� " !� ����������� ��� 0%��

������ ����� � ����� ��� ����5���� ���������� �� ���

����� ������ 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� �� �

����������������������� ������ ��+��+ �� �+�C �� ��

*�&�4 �� �� ������ ��� �� �� ��� �� 0%�� �K��2 �

��� -�2 %�� ��� � ��� �������� !�� ��� �� � �������

��� ��� �������� ��� 0%�� ������ ���� ���� �� �������

���� �� 0*��6- �� ���� >&�4 � !� � �� ����

������� �� �� �� ������ ��� �� �� ��� �� 0%�� <�A"-C=2

/� � � �������� ��� 0%�� ������ �������� ��9 ���� ��

���� �������� �� <-9=2

%� 8�;(68�;�( ������ ��$ �� � ���� ���!� ��

������� �� ��������� ����� ������ �,-��� �� ������ ��

������� � �� ���� � �� � ��� 33" ������ ����" ���!�

������" ��� � ������ <��@=2 3� � � � ���� �������� ���

J,; ��� ���������� �� *,& ���������� !���� �� <-D=2 3�

�� ������ ��� " !� 5�� �������� �� ������ ���������

������ �� �� ����������� 8�4" ;�3" ��� ������� ����

�� � �� ����� ��� ���� 0�* ��������� 2 � �!�

K��2 @2 0����� �� ����������� �� �� 0%�� ������� �� �� 0%����������

0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������ �� *�&�42 ��� *������������

0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������2 �E� >� �� ������ &;"

8 � A� ��� ������� � � ���������� �� ������ �!����� ������� ��

�++N2 �� G �)� ���������� ��������� ���� �� �� �� �� 0%�� ������� ��

0%���������� 0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������ �� � +�+A�2

�, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� �� �A-C

�� K��2 �" !� ������ ������� �� ;��,6,,� ����

������� " !�� !� ������� ������� ���� �� ,-��

��������� ��� �� �������� �� (�J6J,; �� �� �� ����

�� ����� ���2 8�4" ;�3" ��� ������� ���� ����5����

�������� (�J6J,;�������� ,-�� ���������� �� � ����

�������������������� ������2 � ���� ;�3 !� �������

� ����� �� �� �� �������� �� 8�;(68�;�( ������"

0�* ���������� ����� �� ��� �� � � ������ J,;"

!�� � ���� �������� �� �� ���� ��� �� ,-�� ����������

�� �� <�+=2 /� ���� ����������� ��� �� 0�* ���� ��

�� ;��,6�,( ��� ������" ���������� �� � �� *,&

����������" �� *�&�4 ���� ���� � 0%�� ������ ��

0%�� !� �������� ����5���� � � �� �� �����������

�������� �K��2 @�2 3� � ���� �������� ��� ,-�� � �����

��������� �� �,( ��� �� K����� �������� !���� �� ��

<��=2 ,� �� ���� ���" �� 0�* ���� �� �� ;��,6�,(��� ������ ��� ���� ���� �� �������� �� �� �,( ������ "

�� ���� �� ���� �� �� ;��,6,,� ��� ������ �� ��

,-�� ������ " !�� �������� ����� �� ���� ;��,6

�,( <�-=2 (�!����" !� ��� � ��� ��������� !���� �� ���

�� ������� 0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������

!� ������� ������� ���� �� ,-�� ������ " ������ &,;

��� �� �� ������� �� ������� 0�* ���� �� �� ;��,6�,( ��� ������ ����� �� ������ ����������� ���������

����� ��� �!��2 &���� &,; ��� ������� !�� �� ��� ��

!���� ������� ���� ��"+++ �� 9+"+++" �� � �� ��������

���� ��� ��� ����� ����� <��=2 %�" �� �� ������ ���

�� � � � ��� ��� �������� &,; �� ��� ��� �� ������

�� �� ������� � �� ,-�� ������ 2 %���� �������" ��

������ ��� ����� ��� 8�4" ;�3" ��� ������� ����

�������� 0%�� ������� �� 0%���������� �� � �� *,&

���������� ������ ����� ��� ������ ���������

������ �� �� ,-�� �� �,( ������ ��� ��������� ������

�� �� ,-�� ������ ���������� ��$ �� ���2 %��

��� � ��� �������� !�� ��� �� ��� ������� ��� ���

�!�� ��� ����������� ��������� ��� 33�������� ������

���������� ��� ����� � �� ��� ���������� � �� �����

�� *,& ���������� �� *�&�4 <C=2

0%�� � !� � ��� 33 ��� ������ *,&����������

���������� �� ��� ����� �� >&�4 <-"��=2 3� � � �

���� �������� ��� 0%�� ���� *,& ���������� �� �� �����

��� ������� �� �� <�-=2 3� ��������" �--���" �� ������

��������� �� 8�;(68�;�( ������" � ���� �!� ��

�� �� ����� �� >&�4 ������� �� ������ ���� <�@=2

3� �� ������ ��� " !� �������� �� ������ �� ��

����������� 8�4" ;�3" ��� ������� ���� �� 0%�� ���

���� �� 0%���������� ��� ����� ���������� �� *�&�42

� �!� �� K��2 A" 78� ��� ��9 ���� ����������

������� � 0%�� ������ �� 0%�� !� �������� � � ��

�� ����������� �����" !���� 0*��6- !� ��� ��������

� ���2 %�� 5����� ��� �������� !�� ��� �� K��

�� ��, <��=" !� ����������� ��� 78� ���������� ��� ���

K��2 A2 0����� �� ����������� �� 0%�� ������� �� 0%���������� 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ���������� �� *�&�42 �� ��� 4� *������������ � ��2 �E ���

;� ;����������� ��� � �� 0*��6-" 78�" ��� ��9 ���� ����������2 >� �� ������ &;" 8 � A� !��� ����� �$�� � ��������� ������ �� ����������

�� ������ �� �!����� ������� �� �2+2 �� G �)� ���������� ��������� ���� �� 0%�� ������� �� 0%���������� ��� ����� ���������� �� � +�+A�2

�A-9 �, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� ��

0*��6- ���������� � 0%�� !� �������� ����5���� �

8�4 ��� ;�32 /� ��� � � �!� ��� ��� 33��������

78� ��� ��9 ���� ���������� !� �������� � 8�4"

;�3" ��� ������� ����" � ���� 0*��6- ���������� !�

��� �������� <C=2 %�� ��� � ����� ��� 78� ��� ��9

���� ��� ������� �� *,& ��� ��� 0*��6-2 %��� �� ��

���� *,&���������� ���� ��� ���!� �� 0%�� �������

�� 0%���������� 0*��6- ����������2

��� ����� �� � 0*��6- ��� 78� � � � ������

�� � �� �� ���� ����� �� ���� �������� ��� ����������

K��2 B2 0����� �� ����������� ��� &E -+�A9+ �� 0%�� ������� �� 0%���������� �����;8� ������� ������� �� *�&�4 ��� ��� �������2 ��" 4" ��� 0� �

������������� ����� ���� �� ���� ���� ��� ������ ��� � ��������� ���� �&&� ��� �!�2 �E" ;" ��� K� ;����������� ��� � �� �����;8� �������

���������2 >� �� ������ &;" 8 � A� !��� ����� �$�� � ��������� ������ �� ���������� �� ������ �� �!����� ������� �� �2+2 �� G �)�

���������� ��������� ���� �� 0%�� ������� �� 0%���������� ������� �� �����;8� ������� ��������� �� � +�+A�2

K��2 C2 0����� �� ����������� ��� &E -+�A9+ �� 0%�� ������� �� 0%���������� ������� �� ;8� ���� �� *�&�42 >� �� ������ &;" 8 � A� ���

������� � � ���������� �� ������ �!����� �������. �++� � C�"9++� C"A++ ���2 �� G �)� ���������� ��������� ���� �� 0%�� ������� �� 0%���

������� ������� �� <�(=� ������ ������������� �� � +�+A�2

�, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� �� �A-D

<�A"�B=2 %� 78� ������� ��7�� ���� �������� ��

���������� !�� ��7�� �� ��K� �� ���� �� ���� ����

� �� <�C=2 /� ������� �������� ��� �����;8� �������

������� !� �������� ����5���� � 0%�� ������ � !�

� 0%�� �� ���� >&�4 <�A=2 *,& ����������" ��

������ �� ������ ������� ���� �" � ���� �!� ��

�� ��� �� �� ���������� �� ��� ����� <A= ��� ���� <B=2

%�������" �� �� ������ ��� " !� �������� !����

����������� ������ �� 0%�� ������� �� 0%������� ����

������� �� �����;8� ������� ������� �� *�&�4 ��� ���

�������2 � �!� �� ���� ��; �� K��2 B" !� ��������

�������� ��� ����������� ��� ������ 0%�� ������� �� 0%�

������ ���� �����;8� ������� ������� 2 3� � � � ����

�������� ��� �� 0%���������� ������� �� ���� ������� �

������ ��������� �� *�&�4 <��=2 3� ��������" �� ������

��� �������� ��� ��9 ������ ��� �� ���� ��� �� 0%�

� ������� �� 0%���������� �����;8� ������� �������

�K��2 B0 ��� K�2 &���� 0*��6- !� ��������� �� � �� ��

����������� �� �� ������ ��� " 0%�� ������� �� 0%���

���� ���� �����;8� ������� ������� �� �� ��������

����� *,&���������� 78� ����������" � ���� �� ����

��� ��� �������� �� ������ �������� �� ��2

3� � ���� �������� ��� 0%�� ������� �� ����������

���� �� <�(=� ������ ���� ;8� ��� ���� ��� ��������� ��

>&�4 <�9=2 /� � � �������� ��� 0%�� ������ ��� � ��

� ��������� ������� ��� >&�4" ������ �� ��� ���������"

��� � � ��� �L�������� �� 0%�� <�A=2 � �!� �� K��2 C"

�� ������ ��� � ���������� ��� �� 0%�� �����������

����� ;8� ���� �� *�&�4!� � ��� �L���� ��� ��

��� �� 0%��2 *����� " >&�4 ��� ��������� � ����

�������� �� �� �������� � *,&" !�� ��� �������" ��

��� �� ����" ���� � ?��������������� ������������

������ 8�;(68�;�( ������ <�"-=2 %� ������ ���

���������� �������� ��� ��� 8�4 ��� ;�3 ������

�������� �� 0%�� ������� � !� � �� 0%����������

������� �� ;8� ���� �� *�&�42 3� �������" �����

��� ���� � ��� ����� �� ������� �� ;8� ���� ���

��� �� �� ������ �� 0%�� ������� �� 0%���������� �������

�� ;8� ���� �� *�&�42 3� � ���5�� � �� ��� ��� ��

������ �� ������� ���� �� ;8� ����. �� � ����

�������� ��� ������� ���� � � � ��� �� � � ��� ��

����������� ��� � ����������2 ������� ���� �� ��� � �

���������� �� ���� �� �� ������� �� ���� ��� <�D"@+="

!�� �� ���������� ��� ���� � ��� ������� ��� ��

������� �� <�(=� ������ ������������� ���� �� �� ��

������ �� ������� ����2 K����� ����� ��� ������ ��

��5�� �� ������ �� ������� ���� �� >&�4 ��� ���������2

� ���� ��������� ����� ��� ������� ��� ��9 ����

������� >&�4 ��� ��������� <@�=" ������� <@-=" ���

������� <@�=" �� � �� ��� ��� ��9 ���� � ���� ��� ��

>&�4 ��� ��������� ������ &E -+�A9+" � ����5� ��9

���� ��������" ��� �� �� ������ �� 0%�� ������� �� 0%���

������� ������� �� <�(=� ������ ������������� ����� ��

������ ����������� ��������� �K��2 C�2

K��� " !� ����������� �� �� ������ ��� ��� 0%��

�������������� *�&�4 ��� ��������� � ������ �����

*,& ���������� !���� �� �� " !�� � �������� �

�����������2 K���������" �� *,&�������� ������� � ��

���� ��� ������� ������ *�&�4 ��� ��������� ��

�� ��� �����" �� ����" � �� ���������� �� 78� ��� ��

��� ���� ���������� �� �����;8� �������2 %�" ��

5����� �� �� ������ ��� �� ������ �� ���������

�� � �� ����������� �� *,&��������� 0%�� ��������������

*�&�4 ��� ��������� ��� ����� � � ����� ��� ������� ��

����������� �� ���������� �� �����2

�������� ������

%� !��� !� ��������" �� ����" � 1����������� �8�2

�-AAC++9 �� %2 %������ ���� �� ������ �� 0��������"

&������" &���� ��� 4� ����" 7����2

����������

<�= 1����� ��� ��" ������� 4�" , �����! 7;" � ������� */2 ������

����� 33 ���� ��� 8�;( ��� 8�;�( ������ ������� �� �� �����

���� �� ���� ��� � �� 2 4��� *� �[email protected]@G��@��92

<-= M���K���� �" R����� ��" K���� %" 3�$��� 8" 1����� ��� ��2

�--��� � � ������� ��������� �� �� �������������������� 8�;(6

8�;�( ������ ��� ��� ���� ��� ���������� 33�������� ����

���� �� ���� �� ���� ��� � �� 2 7 E�� 4�� �DDB.-C�G-���C�

-�2

<�= /���� �$ �" 8�������� 1" &�� $ 0" �����$��� *" E���� 7("

&������� �" (���$�� %" &��� 7�" 1����� ��� ��" (������ ;1"

E�� �" �������$ %" ���$� %2 3������� 8�;(����������������

��������� ���������� �� �� ��� ���� �� ������ ����G ��������

��� ���� ������ �� �� ���������������� ���2 4���� �����

�DDD.DDG-+-C���2

<@= *�'����� �� &" ���$ &" ���$� %" %���� �" K������ E�" 1����� ���

��" (������ ;12 ���������� 33��������� ��������� �� �� ���

������� ���� �� ��������� ���������� ��� �������� 8�;(6

8�;�( ������ ����������2 4����������� �� � �������� �� ��������

����2 7 4 �� 3���� �DDB.DCG�D�B�-�2

<A= &�������� �" #� RJ" K����� >7" 3���� �" K���� %2 *�L�������� ���

���������� �� (-,- ��� � ��� ���������� ���!� ������ ���� ��������

����2 &������ �DDA.-C+G-DB�D2

<B= :� ##4" 4��$ %K2 3��� ������ �� �������� �� ��� ����� �� � ������

��� ���!� ��������� �� ��� �������� �� ������� ��2 7 E�� 4��

�DDA.-C+G��C-C��+2

<C= � �! �" #��$��� �" %��� � �" ������ �" %����� %2 �������

����� ������ 78� ��� ��9 ���� ���������� ��� ��� 0*��6- �������

���� � ���������� 33 �� ��� ������ ���� ��� � �� 2 ( ������ *�

-++�.-@G-A��B�2

<9= 4��E("����47" 4��44";�� ��4�2 0����� �� ���� ��� �������

���� �� ���� ��� � �� 2 �� 7 � �� �DD-.-B-G0@�-�B2

<D= ;��� � &�" :����� 4" >����� �4 ��� :�" &����� E:" (��� %"

K�������� 1R" 0 ���� 7;" , ���� 0(2 � �� � ��� ���������

������ ���� �� ��������� ��������� ����� ��� ������� ����� �� ���

������ �� G ���������� ������ �� �� ���� ����������� ������ ��

�������� ��������� &E -+DBC+2 4��� *� �[email protected]�D+�C2

<�+= (� �� (" &������ %" :������ 4" :��� (" ;�� �� �2 0����� ��

������� <4�-�=�" ������� ����� �����" ��� ,-� ���������� ��

���� � ��� �� ���������2 �� 7 � �� �DD�.-B�G:@C9�9@2

<��= 8���� %" K����� #" 7� 4" %������� &" M�'��� #" 3��� �" &���$�

%" ,���� (2 0����� ���� ���� ��� ����������� �A� ���� �����

������� ��� �� ��� ������ ��������� �� �� ��� ���� ���2 E�����

E��� *� 4����� �DD+.�B9G@9A�D2

�A�+ �, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� ��

<�-= 4��� %(" &� 8:" 4�� &#" /��� ;:" 4�� 772 *������� �� ���

����� ���� ��� ������ ������������ ��� ���� �������� �� ����

���� �� ��2 4�������� *� �DDD.@�GBA@�B-2

<��= K�� 7" >���� 4" &��� M" 0 ��� 4" 7�� :" ����$�� 72 0����� ���� ���

���� ��� � �� G ��������� �� 7�� ������������� ����� �����

�� �� ��� ������ �������� �������2 �������� �� %���� >��

E�� -+++.-+G�-@@�D2

<�@= ���� (" 8����� �" ,����� 8" /����� �� (" ��� K" 8��� � #"

#��$��� �" %����� %2 (���� � ���" �� ��$ �� ������� ����

��������� �������� ���� ���� ������ ��2 E�� 4�� �DD9.�CDG

99A�D�2

<�A= #��$��� �" ��� &" ������ &" (������� �" %��� � �" (����

(" 3!�� (" ���� (" %����� %2 0����� �� ������ ���� ������ ��

������� � �� ���� ����� ���� ����� ��� ��� ��������� �� ����

������� ����� ���� ��� � �� 2 E� 7 ������� �DD9.�-AG

�+�D�-C2

<�B= , ���� 0(" ;��� � &�" &��� 4�" #�� %:" :����� 4" �� �� �"

���� 1" *���� � 7� **" K�������� 1R2 4������ � " � ���������� ��

����" ������� ���� �� ���� ��� � �� ��� ���������" ���������"

��� ��������� ��������� �� �!��� ���� �� ��'�� 2 ���� 8�� ����

&�� M&� �DD�.D+GB�9D�D�2

<�C= #��$��� �" ��� 7" (����� �� 7" (���� P" E��� E42 &�� ��� 4�

������� 78� ���������� ��� ��� 0*��6- ��� ��9 ����� � ��������

�� ��� �����2 7 E�� 4�� -+++.-CAG��C+B��-2

<�9= M��� 3" �����"������ �"��$��� #" ��������� &2 *���� ������ ��

�� ������������ ������ ������ ���� A"A������ ���� ��� ������

����� ������ �� ��������� ���� �� �������� 2 7 E����� �%�� ��

�D9D.�+AGD+A��+2

<�D= ;� ��� ;*2 &��� ����� �� �� ��� � ������� �������� 0�* ������2 7

���� *��� E �DD@.�+@G�+A��+2

<-+= ��� &" 3$��� #" #��� �" (������ �" ����� �" #������� &"

�� �$��� (" 3!�� (2 ���������� � ������ ������ ���������� ��

����������������� ������� ����� �� ��� �� ������'���� ����� 2 4���

�� ����� �DD9.DCG�C���C2

<-�= (������� �" ��� &" #��� �" #������� &" 3!�� (2 ���������� ��

� ����� �� ����������������� ������� ����� �� ���������� 33�

�������� ���������2 7 �� &�� 8���� �DD9.DG�C-�9+2

<--= :��/"����� �" %'��� *2 �������� ������������ ������ ���� ��������

!�� %���������� � ������� � �����2 4� �D9C.@DGC@��A-2

<-�= E������� E0" ��� &" *��� 1�" :� �� ;�" E������� 1*2 ( ����

������ � ��� � ������� �� �� �������� �� ������� ������ ���

�������2 %� ����������� ���� �� �� ����������� ���� ����� ��

������� ������2 7 E�� 4�� �DD+.-BAG�CA���92

<-@= *� ;" 8������ �" �� ��� �2 %� ���������� ��� ���L���� ���� ��

� ������� ������ �� ��� ����� ���2 7 E�� 4�� �D9A.-B+G

�A+-9��-2

<-A= &��� 7� (7" 4������ 7%" ���� *�2 =� ���� ���� ������ ������ �� ��

���� ��� ��� � ���������2 ;�������� ;��� �DDC.-AG@B9�9+2

<-B= &����������� &" R!���� 7:" �����'�� 1" P���� �%" (�� ;:2

���������� ��� ���������$����� �� ��������� ���������� �� ������

� �� �� G �������� ��� �� 8�;�( ���������������� ���!� 2 ���

E����� E��� �DD9.�A�G��-�-�2

<-C= #��$��� �" ������ &" &�$��� #" %��� � �" (���� (" (�� ���

%" K���� (" %����� %2 0����� �� ������ ���� ������ �� ����

������� �� ��� ���������2 7�� 7 ������� -+++.9@G�@B�AA2

<-9= 3��� ;" #��$��� �" &�$��� #" ������ �" %��� � �" (���� ("

������ &" %����� %2 0����� �� ������ ���� ������ �� ��9 ��������

��������� ������� ����� �� �� ����� ���� ������� �� 2 :��� &��

-+++.B9GB�A�@A2

<-D= E��� E42 *���� ���� ��� ���� ��� �� ���� �� ������ �� ��'�� 2

%���� (����� �DDD.9-G9�+�C2

<�+= ;������� �" E������ :" ����� �" �� ��� 3" /������ 70&2 %�

( ���� ��������� �������� ����"@�������� �-�� ������$ ����

����������� ���� ��������� ������ �� ������� ������ ��������

���������� �� ��������� ������ 2 ��� E����� E��� -+++.�CCG

�+��92

<��= #��$��� �" %��� � �" %����� %2 &���� ����������� �� ��������

�� ��� ����� ��� ����������������� ������� ����� �� ���������

�� �� �����2 7 ��� 3���� -++�.@9G���-@2

<�-= *��� 1�" ��� &" *��� 4:" 4��� �&" E������� E02 K��� ������

��� ����� ��� �� 2 K�&0E 7 �DDA.DG-++�D2

<��= ���� �� ��" ����� �2 4� ����������� � �������� ���������

�������2 ���� � �� &���� &��� �D9+.@D-GBC�9+2

<�@= �$��� (" 3���� 8" %������ &" *������� #" ��!���� &" (� �� #"

3�� (" #��� ��� �2 0������� �� 8�;(68�;�( ������ �--���

�� ���� ������� �������2 4���� ����� �DDD.�++G�@D@�92

<�A= /����� �7" ;��� *72 %����������� ������ ���� ���� ����� �

����������������� ������� ����� ���� ����������� ���!� 2 7 ��

��� �DDB.C@GA9D�B+C2

<�B= ������ �" ����� �2 *��� ����� ��� �������� �� �� 78� ������� ��

��� �����2 E����� E��� ���� �DDC.����GK9A��+@2

<�C= ���� �" ����� �2 %� �� � �� 7��" K� ��� �� ���� ���� �� �� ��

��� ��������� ��� �������������2 E����� E��� ���� �DD�.�+C-G

�-D�AC2

<�9= 7��������� �" K��� ��" ;� >����� �7" %�������� 4" K���� 7" �� ��

�E2 0����� ���� ���� ��� ;8� ���� ��� ��� ��������� �� �� �

����� ����� ���� ��� �2 �� 7 � �� �DD-.-B�G4�-DA��+�2

<�D= ;������ �" R����� %2 =� ���� ���� ������������ �� ���� ����

���� $�� � ������ ���G ����������� ����� ��� ���������� �� � ��

��������2 :��� &�� �DD-.A+G9CA�9-2

<@+= 8��� 02 ������ �� ������� ���� � � �������� �� ������ ��� ��� �

�� ��� ������ 2 �� 7 4 �� 8��� �DD�.A@�B &��� �G���D&�-@&2

<@�= 3����� �" #������� (" (����� �" ;������" %������� �" ���� %2

3�� �� �������� ��9 ����������������� ������� ����� ����� ��� �

��� ����� ����� ����� �6��� B ���!� �� ���� �� ����

��� � �� 2 0�� 7 4 �� 3���� -+++.�+GBB9�CC2

<@-= M���K�����"� �������*/"�����"1����� �����2 ��9��������

��������� ������� ����� � � ������� ��������� �� �� �������������

���� ��� ���!� ��������� � ���������� 332 *� � �� ���� �� ����

��� � �� ������� 2 7 E�� 4�� �DD9.-C�G�A+--�D2

<@�= ;��� P8" %�� $ *�" &������� 0:2 ;������������ ����" � �������

��� ��� ������������������ ���������� �����" ������ ������� ��

���� �� ���� ��� � �� � ���� ����� �� ��9 �����������������

������� �����2 ( ��������� -+++.�BG9A��A2

�, !��& �� ��, 0 1� ���� �� ������ ��� 2/ 3+##+4 � +�5� �� �A��