3gAllergy™ Specific IgE Universal Kit - Diagnostic ... · A skin test with the proposed initial dilution of the allergenic extract should be performed first to demonstrate the patient's

3gAllergy™ Specific IgEUniversal Kit

IMMULITE® 2000 3gAllergy™Specific IgE Universal Kit

2 IMMULITE 2000 3gAllergy™ Specific IgE Universal Kit (PIL2KUN-15, 2005-09-14)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE 2000 Analyzer — forthe quantitative measurement of allergen-specific IgE in human serum, as an aid inthe clinical diagnosis of IgE-mediatedallergic disorders.Catalog Number: L2KUN6 (600 tests)Test Code: SPE Color: Light Gray

Summary and ExplanationMany allergies are mediated byimmunoglobulins of the IgE class. Insensitized individuals suffering from thisimmediate (atopic or anaphylactic) type ofallergy, IgE molecules act as points ofcontact between the allergen andspecialized cells that release histamineand other agents upon exposure to theallergen; this initiates the events which werecognize as allergic reactions.5,9 Whenevaluated in the light of other clinical andlaboratory findings, in vitro allergen-specific IgE tests can help the physicianidentify the allergen (or allergens) to whichan individual is sensitive.

Principle of the ProcedureIMMULITE 2000 3gAllergy™ Specific IgEis a solid-phase, two-step,chemiluminescent immunoassay thatexploits liquid phase kinetics in a beadformat.10,11 (U.S. Patent No. 4,778,751) Itrepresents a significant advance overconventional methods relying on allergensattached to a solid-phase support, such asa paper disk.The allergens are covalently bound to asoluble polymer/co-polymer matrix, whichin turn is labeled with a ligand. The use ofan amino acid co-polymer amplifies theamount of allergen that the matrix cansupport.Incubation Cycles: 2 × 30 minutes.

Specimen CollectionThe use of an ultracentrifuge isrecommended to clear lipemic samples.

Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receiptby the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneousresults due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE 2000 3gAllergy™ Specific IgEhas not been tested with all possiblevariations of tube types. Consult thesection on Alternate Sample Types fordetails on tubes that have been tested.Volume Required: 50 µL serum.Storage: 7 days at 2–8°C, or6 months at –20°C.13

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.

Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.

Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Sourcematerials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.Sodium azide, at concentrations less than0.1 g/dL, has been added as apreservative. On disposal, flush with largevolumes of water to prevent the buildup of

IMMULITE 2000 3gAllergy™ Specific IgE Universal Kit (PIL2KUN-15, 2005-09-14) 3

potentially explosive metal azides in leadand copper plumbing.

Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)Water: Use distilled or deionized water.

Materials SuppliedComponents are a matched set. Labels onthe inside box are needed for the assay.

3gAllergy™ Specific IgE Bead Pack(L2UN12)With barcode. 200 beads, coated withanti-ligand. Stable at 2–8°C untilexpiration date.L2KUN6: 3 packs.

3gAllergy™ Specific IgE ReagentWedge (L2UNA6)With barcode. 28 mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to monoclonal murineanti-human IgE antibody in ahuman/nonhuman serum buffer matrix.Stable at 2–8°C until expiration date.L2KUN6: 1 wedge.

Before use, tear off the top of the label atthe perforations, without damaging thebarcode. Remove the foil seal from the topof wedge; snap the sliding cover down intothe ramps on the reagent lid.

3gAllergy™ Specific IgE Adjustors(L2UNJ3, L2UNJ4)Two vials (Low and High), 2.0 mL each, ofhuman IgE in a nonhuman serum matrix,with preservative. Stable at 2–8°C for 30days after opening, or for 6 months(aliquotted) at –20°C.L2KUN6: 2 sets.Before making an adjustment, place theappropriate Aliquot Labels (supplied withthe kit) on test tubes so that the barcodescan be read by the on-board reader.

3gAllergy™ Specific IgE AdjustorAntibody (L2UNS1)Two tubes, 2.75 mL each of liquid, ready-to-use ligand-labeled polyclonal goatanti-human IgE antibody, withpreservative. Stable at 2–8°C untilexpiration date. This reagent is placed inthe Allergen Holder Wedge when runningthe Specific IgE Adjustors.L2KUN6: 2 sets.

3gAllergy™ Specific IgE (SPE)Universal Kit Controls (L2UNC1,L2UNC2)Two vials, 2 mL each of human IgE in anonhuman serum matrix, withpreservative. Stable at 2–8°C for 30 daysafter opening, or for 6 months (aliquotted)at –20°C.L2KUN6: 2 sets.Refer to the control insert forconcentration levels.Before use, place the appropriate AliquotLabels (supplied with the kit) on test tubesso that the barcodes can be read by theon-board reader.

3gAllergy™ Specific IgE ControlAntibody (L2UNS2)Two tubes, 2.75 mL each of liquid, ready-to-use ligand-labeled polyclonal goatanti-human IgE antibody, withpreservative. Stable at 2–8°C untilexpiration date. This reagent is placed inthe Allergen Holder Wedge when runningthe IMMULITE 2000 IgE Controls.L2KUN6: 2 sets.

Kit Components SuppliedSeparately

3gAllergy™ Specific IgE SampleDiluent (L2UNZ)For on-board dilution of samples. One vial,concentrated (ready-to-use), human serumalbumin matrix, with preservative. Storage:30 days (after opening) at 2–8°C or 6months (aliquotted) at –20°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.L2UNZ: 25 mLBarcode labels are provided for use withthe diluent. Before use, place anappropriate label on a 16 × 100 mm testtube, so that the barcodes can be read bythe on-board reader.L2UNZ: 3 labels

L2SUBM: Chemiluminescent SubstrateL2PWSM: Probe WashL2KPM: Probe Cleaning KitLRXT: Reaction Tubes (disposable)L2AW1-3: Allergen Holder Wedges(barcoded)L2AW1: serially coded 1-33L2AW2: serially coded 34-66L2AW3: serially coded 67-99L2ATC: Allergen Tube CapsL2ATS: Allergen Tube Septa


Also AvailableMC6L, DC1L, DC2L, L2SNC: Humanserum-based allergen-specific IgE controlsAlso RequiredDistilled or deionized water; test tubes;controls.

3gAllergy ™Specific Allergens andMixed Allergen PanelsIndividual allergens and mixed allergenpanels in liquid phase, with preservative,are packaged and sold in 40 and 20 testmodules, and are intended for use withboth the IMMULITE 2000 and IMMULITE2500 platforms. (For catalog numbers, seethe 3gAllergy™ Product Catalog). Storerefrigerated: stable at 2–8°C until theexpiration date marked on the label. Donot use if signs of microbial contaminationsuch as a cloudy appearance have beenobserved.

Assay ProcedureNote that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE 2000 Operator's Manual.

See the IMMULITE 2000 Operator'sManual for: preparation, setup, dilutions,adjustment, assay and quality controlprocedures.

Allergen Loading1 Select an open position on the

Reagent Carousel through thesoftware.

2 Replace caps on Allergen Tubes withsepta. Do not invert the Allergen Tubeonce the septum is installed.

3 Place Allergen Tubes containingIMMULITE 2000 specific allergens,specific allergen panels, Specific IgEAdjustor Antibody, and/or Specific IgEControl Antibody in the AllergenHolder Wedge, with the barcodesfacing the open side of the wedge.

4 Close the wedge and scan theallergen barcodes with the hand-heldimaging scanner.

5 Once scanning is complete, load theAllergen Holder Wedge into thereagent carousel.

6 Repeat this procedure to loadsubsequent Allergen Holder Wedges.

The Allergen Holder Wedge must bescanned prior to installation into theinstrument to ensure correct instrumentoperation. Removing or replacing any vialswithin the allergen wedge will requirerescanning of the wedge with the barcodescanner to update the allergeninformation.

Recommended Adjustment Interval:2 weeks.Quality Control Samples: To monitoradjustment, use the controls supplied withthe kit. Specific allergen controls are alsoavailable, see “Kit Components SuppliedSeparately” section. The specific allergencontrols (DC1L, DC2L, MC6L and L2SNC)should be tested to monitor allergenperformance.

Interpretation of Results

Individual Allergen Results:The class number is an indication of theamount of endogenous IgE specific for theselected allergen. Quantitative values(kU/L) and interpretation of class resultsfor two scoring systems (standard andextended) are provided in the tablesbelow.The standard classification systemutilizes the following class cutoffs:

Class kU/L

Reactivity forIndividual/Component

Allergen(s)

< 0.10 Absent or ND†

0*0.10 – 0.34 Very Low

I 0.35 – 0.69 Low

II 0.70 – 3.49 Moderate

III 3.50 – 17.49 High

IV 17.5 – 52.49

V 52.5 – 99.99

VI ≥ 100

Very High

* Class 0 in the standard system signifies: notdetectable by second-generation assays.† ND: not detectable by IMMULITE 20003gAllergy.


The extended classification systemutilizes the following class cutoffs.

Class kU/L

Reactivity forIndividual/Component

Allergen(s)

0 < 0.1 Absent or ND†

0/1 0.11 – 0.24 Very Low

I 0.25 – 0.39 Low

II 0.40 – 1.29 Moderate

III 1.30 – 3.89 High

IV 3.90–14.99

V 15.00– 24.99

VI ≥ 25

Very High

† ND: not detectable by IMMULITE 20003gAllergy.

The choice of classification systems canbe made by the user within the IMMULITE2000 operational software.

Mixed Allergen Panel ResultsA positive result (Class I or greater) with aMixed Allergen Panel indicates thatantibodies to one or more of thecomponent allergens in the panel arepresent in elevated amounts in the patientserum sample. To identify the allergen-specific IgE, the sample should beretested with individual allergenscorresponding to components of thepanel.

A negative result (Class 0) indicates theabsence or very low levels of IgE specificfor the panel's components.Panel results cannot be compared withresults based on testing for individualallergens, nor can they be considered thecumulative total of individual allergenresults.

LimitationsA definitive clinical diagnosis should notbe made solely on the basis of an in vitroallergen-specific IgE result. Diagnosisshould be made by the physician onlyafter all clinical and laboratory findingshave been evaluated.2,4

In vitro allergen-specific IgE results shouldnot be used as a definitive guide toselecting an initial dose forimmunotherapy. A skin test with theproposed initial dilution of the allergenicextract should be performed first to

demonstrate the patient's ability to toleratethe dose.

In food allergy, circulating IgE antibodiesmay remain undetectable if directedtowards allergens which are revealed oraltered during processing or digestion andwhich therefore do not exist in the originalfood for which the patient is tested.1,3

Identical results for different allergens maynot be associated with clinically equivalentmanifestations, due to differences in IgE-binding capacity.6

The user should be aware of thepossibility of clinical crossreactivity withinan allergen family.7,8

The following special considerations applyto latex allergy testing:

• The possibility of clinicalcrossreactivity exists between latexand certain foods including avocado,banana, chestnut, and kiwi.12

• Since the latex assay measuresallergen-specific IgE, type IV delayedreaction or irritation from latex will notbe detected.

Class 0 results for insect venoms indicateabsent or very low levels of circulatingvenom-specific IgE antibodies. Suchresults do not preclude existence ofcurrent or future clinical hypersensitivity toinsect sting.Heterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnosticpurposes, the results obtained from thisassay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.


Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in kU/L. (Unlessotherwise noted, all were generated onserum samples collected in tubes withoutgel barriers or clot-promoting additives.)IMMULITE 2000 3gAllergy Specific IgEhas been the subject of a number ofpublished studies.14,15

Working Range: 0.1 – 100 kU/L(WHO 2nd IRP 75/502).Analytical Sensitivity: 0.1 kU/L.Functional Sensitivity: 0.2 kU/L

Precision: Samples were assayed induplicate over the course of 20 days, tworuns per day, for a total of 40 runs and 80replicates. (See “Precision” table.)

Linearity: Samples were assayed undervarious dilutions. (See "Linearity" table forrepresentative data.)Specificity: The antibodies are highlyspecific for human IgE and exhibit nocrossreactivity to other humanImmunoglobulin classes.Bilirubin: Presence of conjugated andunconjugated bilirubin in concentrationsup to 200 mg/L has no effect on results,within the precision of the assay.Hemolysis: Presence of hemoglobin inconcentrations up to 500 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.Lipemia: Presence of triglycerides inconcentrations up to 3,000 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.Alternate Sample Type: To assess theeffect of alternate sample types, bloodwas collected from 18 volunteers intoplain, heparinized, EDTA and BectonDickinson SST® vacutainer tubes. Allsamples were assayed by the IMMULITE2000 3gAllergy™ Specific IgE procedure,with the following results.(Heparin) = 1.10 (Serum) + 0.16 kU/Lr = 0.986

(EDTA) = 0.81 (Serum) + 0.01 kU/Lr = 0.996

(SST) = 0.91 (Plain Tubes) + 0.15 kU/Lr = 0.992

Means:7.1 kU/L (Serum)8.0 kU/L (Heparin)5.8 kU/L (EDTA)6.6 kU/L (SST)

Method Comparison: The assay wascompared to DPC's AlaSTAT MicroplateAllergen-Specific IgE, a standard scoringassay, on 7,520 samples.

6 1 3 31 42 303

5 11 76 33 35

4 3 178 168 26 10

3 1 292 604 49 2 2

2 16 229 886 98

1 108 172 94 4IMM

ULI

TE 2

000

0 3,912 118 11 20 1 2 3 4 5 6

AlaSTAT Microplate

Total Agreement: 97%Relative Sensitivity: 96%Relative Specificity: 97%Total Identical: 81%Class 1 Identical: 99%Class 2 Identical: 100%

Means of Class Scores:1.29 (AlaSTAT)1.37 (IML 2000)

The same data was analyzed in aregression analysis with the followingresults:(IML 2000) = 0.989 (AlaSTAT) + 1.21 kU/L

r = 0.87

Means:8.53 kU/L (AlaSTAT)9.64 kU/L (IMMULITE 2000)

References1) Aas K. The diagnosis of hypersensitivity toingested foods. Clin Allergy 1978;8:39–50. 2) Barbee RA, et al. Longitudinal changes inallergen skin test reactivity in a communitypopulation sample. J Allergy Clin Immunol1987;79:16–24. 3) Bleumink E. Food allergy:the chemical nature of the substance elicitingsymptoms. World Rev Nutr Diet 1970;12:505–70. 4) Bloch K, Salvaggio J. Use andinterpretation of diagnostic immunologiclaboratory tests. JAMA 1982; 246:2734–58. 5) Halpern GM. Markers of human allergicdisease. J Clin Immunoassay 1983;6:131–8. 6) Lichtenstein LM, et al. IgE antibodymeasurements in ragweed hay fever;relationship to clinical severity and the results ofimmunotherapy. J Clin Invest 1973; 52:472–82. 7) Lowenstein H. Cross reactions among pollen


antigens. Allergy 1980;35:198–200. 8) WeberRW, Nelson HS. Pollen allergens and theirinterrelationships. Clin Rev Allergy 1985;3:291–318. 9) Wide L, Bennich H, Johansson SGO.Diagnosis of allergy by an in vitro test forallergen antibodies. Lancet 1967;2:1105–7. 10)El Shami AS, Alaba O. Liquid-phase in vitroallergen-specific IgE assay with in situimmobilization. Adv Biosci 1989;74:191–201. 11) Alaba O, El Shami AS. Evaluation of non-specific IgE binding: comparison of two in vitroallergen assays. Adv Biosci 1989;74:203–14. 12) Pecquet C. IgE-mediated allergy to latex in80 patients. Presented at the XVth EuropeanCongress of Allergology and ClinicalImmunology, Paris, 12 May 1992. 13) Tietz NW,editor. Clinical guide to laboratory tests. 3rd ed.Philadelphia: WB Saunders, 1995:358. 14) LiTM, Chuang T, Tse S, Hovanec-Burns D, ElShami AS. Development and validation ofa third generation allergen-specific IgEassay on the continuous random accessIMMULITE 2000 analyzer. Ann Clin Lab Sci2004;34(1):67-74. Available viawww.AnnClinLabSci.org. 15) Guilloux L,Hamberger C. Évaluation du dosage desIgE spécifiques sur l'IMMULITE® 2000DPC. Immuno-analyse & BiologieSpécialisée. 2004;19(1):71-80. Available viawww.sciencedirect.com.

Technical AssistanceIn the United States, contact DPC'sTechnical Services department.Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828Fax: 973.927.4101. Outside the UnitedStates, contact your National Distributor.The Quality System of Diagnostic ProductsCorporation is registered to ISO 13485:2003.

Tables and Graphs

Precision (kU/L)

Within-Run Total

Mean SD CV SD CV

1 0.5 0.05 10% 0.06 12%

2 0.7 0.07 10% 0.08 11%

3 1.1 0.04 3.6% 0.05 4.5%

4 1.1 0.08 7.3% 0.08 7.3%

5 1.5 0.08 5.3% 0.09 6.0%

6 1.6 0.15 9.4% 0.16 10%

7 1.8 0.10 5.6% 0.10 5.6%

8 1.9 0.14 7.4% 0.16 8.4%

9 2.1 0.12 5.7% 0.14 6.7%

10 2.4 0.10 4.2% 0.14 5.8%

11 3.0 0.15 5.0% 0.17 5.7%

12 3.4 0.12 3.5% 0.16 4.7%

13 3.6 0.20 5.6% 0.24 6.7%

14 4.1 0.28 6.8% 0.32 7.8%

15 6.1 0.28 4.6% 0.36 5.9%

16 8.9 0.44 4.9% 0.56 6.3%

17 9.5 0.53 5.6% 0.65 6.8%

18 10 0.36 3.6% 0.50 5.0%

19 12 0.56 4.7% 0.76 6.3%

20 15 0.67 4.5% 0.67 4.5%

21 19 1.7 8.9% 1.9 10%

22 43 1.9 4.4% 2.6 6.0%


Linearity (kU/L)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 32 in 32 96.6 – –

16 in 32 53.8 48.3 111%

8 in 32 26.6 24.2 110%

4 in 32 12.1 12.1 100%

2 in 32 5.74 6.04 95%

1 in 32 3.04 3.02 101%

2 32 in 32 53.7 – –

16 in 32 30.1 26.8 112%

8 in 32 13.8 13.4 103%

4 in 32 6.81 6.71 102%

2 in 32 3.40 3.35 101%

1 in 32 1.70 1.68 101%

3 32 in 32 36.4 – –

16 in 32 17.3 18.2 94%

8 in 32 9.48 9.11 104%

4 in 32 4.78 4.55 106%

2 in 32 2.48 2.28 109%

1 in 32 1.21 1.14 106%

Deutsch. Precision: 1Intra-Assay, 2Gesamt,3Mittelwert, 4SD (Standardbereich), 5CV(Variationskoeffizient).

Español. Precision: 1 Intraensayo, 2Total,3Media, 4DS, 5CV.

Français. Precision: 1Intraessai, 2Total,3Moyenne, 4SD, 5CV.

Italiano. Precision: 1Intra-serie, 2Totale, 3Media,4SD (Deviazione Standard), 5CV (Coefficiente diVariazione).

Português. Precision: 1Entre-ensaios, 2Total,3Média, 4Desvio padrão, 5Coeficiente devariação.

Deutsch

IMMULITE 2000 3gAllergy™spezifisches IgE Universal KitAnwendung: Zur in vitro-Diagnostik unterVerwendung des IMMULITE 2000Systems - zur quantitativen Bestimmungvon allergenspezifischem IgE inHumanserum als Hilfe zur klinischenDiagnosestellung IgE-vermittelterAllergien.Artikelnummer: L2KUN6 (600 Tests)

Testcode: SPE Farbe: hellgrau

Klinische RelevanzHäufig sind Allergien durch IgE-Antikörpervermittelt. Bei bereits sensibilisiertenPersonen kommt es zwischen den auf denhistaminhaltigen (Mast)zellen sitzendenIgE-Antikörpern und den entsprechendenAllergenen zu einer Zellreaktion, die zurFreisetzung von Histamin und anderenMediatoren führt. Die Folge davon sind dietypischen klinischen Erscheinungen(Juckreiz, Quaddeln, Atemnot u.a.).5,9

Zusammen mit der Anamnese undweiteren Laboruntersuchungen kann mitHilfe der spezifischen IgE-Bestimmungdas Allergen/die Allergene identifiziertwerden, gegen die der Patientsensibilisiert ist.

MethodikIMMULITE 2000 3gAllergy™ spezifischesIgE ist ein 2-Schritt-, Chemilumineszenz-Enzymimmunoassay (Flüssigphase-Kinetik) im Kugelformat10,11 (U.S PatentNr. 4 778 751). Diese Technologie stellteinen großen Fortschritt gegenüberkonventionellen Methoden dar, dieAllergene an eine Festphase, wiebeispielsweise an Papierscheibengekoppelt, nutzen.Die Allergene sind an eine löslichepolymer/copolymer Matrix kovalentgebunden, die wiederum mit einemLiganden verbunden ist. Mit Hilfe einerAminosäure Kopolymers können mehrereAllergene molekular an die Matrixgekoppelt werden, was einenVerstärkereffekt hat.Testdauer: 2 × 30 minuten

ProbengewinnungDer Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.

Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse zurückhaltendzu interpretieren.Das Zentrifugieren der Proben vor demvölligen Abschluss der Gerinnung kann zuFibringerinnseln führen. Um fehlerhaftenAnalysenergebnissen infolge vonGerinnseln vorzubeugen ist


sicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Probenabgeschlossen ist. Bitte beachten Sie,dass einige Proben, insbesondere solchevon Patienten unterAntikoagulanzientherapie eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen können.Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab. IMMULITE 20003gAllergy™ Spezifisches IgE sind nicht mitallen möglichen Röhrchenvariationenausgetestet worden. Details dergetesteten Röhrchenarten sind demKapitel "Alternative Probenarten" zuentnehmen.Probenvolumen: 50 µl Serum.Lagerung: 7 Tage bei 2–8°C, oder6 Monate bei –20°C.13

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenAusschließlich zur in-vitro Diagnostikverwendbar.Reagenzien: Bei 2–8°C lagern. UnterEinhaltung der geltenden gesetzlichenVorschriften entsorgen.Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potenziellinfektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht undnegativ befundet.

Bestimmten Komponenten wurdeNatriumazid (<0,1 g/dl) hinzugefügt. Umdie Bildung von explosiven Metallaziden inBlei- und Kupferrohren zu verhindern,sollten die Reagenzien nur zusammen mitgroßen Wassermengen in die Kanalisationgespült werden.

Chemilumineszenz-Substratmodul:Kontaminationen sowie direkteSonnenlichteinwirkungen müssenvermieden werden (siehePackungsbeilage).

Wasser: Destilliertes bzw. deionisiertesWasser benutzen.

Im Lieferumfang enthaltenDie Bestandteile sind aufeinanderabgestimmt. Die Aufkleber auf derInnenverpackung werden zurTestdurchführung gebraucht.

3gAllergy™ Spezifisches IgE - Kugel-Container (L2UN12)Der barcodierte Kugel-Container enthält200 Kugeln, beschichtet mit Anti-Ligand.Bei 2–8°C bis zum Ablaufdatum haltbar.L2KUN6: 3 Container.

3gAllergy™ Spezifisches IgE -Reagenzbehälter (L2UNA6)Barcodiert. 28 ml mit alkalischerPhosphatase des Rindes markiertermonoklonaler antihumaner IgE-Mausantikörper imhumanen/nichthumanen Serum-/Puffermatrix. Bei 2–8°C bis zumAblaufdatum haltbar.L2KUN6: 1 Behälter.Vor Gebrauch den Aufkleber an derPerforation abreißen, ohne dabei dieBarcodierung zu beschädigen. Die Folievon der Oberseite des Containersentfernen. Den Schiebedeckel nach untenin die Führung des Reagenziendeckelseinrasten lassen.

3gAllergy™ Spezifisches IgEKalibratoren (L2UNJ3, L2UNJ4)Zwei Flaschen (niedrig und hoch), zu je2 ml, mit humanem IgE in einernichthumanen Serummatrix, mitKonservierungsstoffen. NachRekonstituierung 30 Tage bei 2–8°C,sonst 6 Monate (aliquotiert) bei –20°Chaltbar.L2KUN6: 2 Sets.

Vor der Kalibrierung die entsprechendenAufkleber (dem Kit beiliegend) aufRöhrchen kleben, so dass die Barcodesvom Barcodereader des Systems gelesenwerden können.

3gAllergy™ Spezifisches IgE KalibratorAntikörper (L2UNS1)2 Röhrchen, je 2,75 ml, mit Ligandmarkiertem, polyklonalen antihumaner-IgEZiegen-Antikörper, mitKonservierungsstoffen. Gekühlt (2–8°C)


haltbar bis zum angegebenenVerfallsdatum; zur Kalibration in einemAllergenhalter zu platzieren.L2KUN6: 2 Sets.

3gAllergy™ Spezifisches IgE (SPE)Universal Kit-Kontrollen (L2UNC1,L2UNC2)2 Flaschen, je 2 ml, mit humanes IgE-Antikörpern in einer nichthumanenSerummatrix, mit Konservierungsstoffen.30 Tage nach dem Öffnen bei 2–8°Chaltbar, oder für 6 Monate (aliquotiert) bei–20°C.L2KUN6: 2 Sets.Aktuelle Kontrollwerte entnehmen Sie bittedem Informationsblatt.Kleben Sie den im Kit enthaltenenvorgedruckten Barcode auf das Röhrchenmit der Kontrolle, so dass er vomBarcodereader im Gerät gelesen werdenkann.

3gAllergy™ Spezifisches IgE Kontroll-Antikörper (L2UNS2)2 Röhrchen, je 2,75 ml, mit Liganden-markiertem polyklonalen antihumaner-IgEZiegen-Antikörper, mitKonservierungsmitteln. Gekühlt (2–8°C)haltbar bis zum angegebenenVerfallsdatum; zur Kontrolle in einemAllergenhalter zu platzieren.L2KUN6: 2 Sets.

Separat erhältliche Testsystem-Komponenten

Probenverdünnungsreagenz 3gAllergy™Spezifisches IgE (L2UNZ)Zum automatischen Verdünnen derProben. Eine Flasche mit einemgebrauchsfertigen Konzentrat aus einerhumanen serum Albumin-Matrix versetztmit Konservierungsstoffen. Lagerung: 30Tage (nach Öffnen) bei 2–8°C oder 6Monate bei –20°C (aliquotiert). UnterEinhaltung der geltenden gesetzlichenVorschriften entsorgen.L2UNZ: 25 ml

Zum Einsatz des Verdünnungsreagenz(Diluents) werden Barcode Etikettenmitgeliefert. Vor Verwendung einentsprechendes Etikett so auf ein16×100 mm Teströhrchen kleben, dass esvom eingebauten Barcode Reader

gelesen werden kann.L2UNZ: 3 Etiketten.

L2SUBM: Chemilumineszenz-SubstratmodulL2PWSM: WaschmodulL2KPM: ReinigungsmodulLRXT: Einweg-ReaktionsgefäßeL2AW1-3: Allergenhalter (barcodiert)L2AW1: Allergenhalter Nr. 1-33L2AW2: Allergenhalter Nr. 34-66L2AW3: Allergenhalter Nr. 67-99L2ATC: Allergen StandardverschlussL2ATS: Allergen Septum (zumpipettieren)Ebenfalls erhältlich:Allergen spez. IgE-Kontrollen: DC1L,DC2L, MC6L, L2SNCEbenfalls benötigtDestilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Teströhrchen; Kontrollen.

3gAllergy™ Spezifische Einzelallergeneund Gruppenallergene (Panelallergene)Flüssigphasen-Einzelallergene und -Allergenmischungen, mitKonservierungsstoffen, werden als 40erund 20er Testeinheiten verpackt undverkauft. Sie sind sowohl zur Verwendungim IMMULITE 2000 als auch imIMMULITE 2500 System geeignet.(Katalognummer siehe 3gAllergy™Produktkatalog). Gekühlt bei 2–8°C biszum Verfallsdatum auf der Packunghaltbar. Bei Anzeichen von mikrobiellerKontamination (Trübung) nicht mehrverwenden.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes istunbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE 2000-Handbuch beschrieben, regelmäßigdurchgeführt werden.Die Angaben zur Vorbereitung,Einrichtung, Kalibration, Test- undQualitätskontrollverfahren entnehmen Siebitte dem IMMULITE 2000 Handbuch.

Allergenbeladung1 Wählen Sie eine freie Position auf

dem Reagenzienkarussell mit Hilfeder Software.

2 Tauschen Sie denStandardverschluss des Allergens


gegen das Septum aus. Das Allergenmit dem Septum nicht schwenken.

3 Platzieren Sie die Allergenröhrchenmit: IMMULITE 2000 spez.Allergenen, spez. Allergenpanels,spez. IgE-Adjuster-Allergen und / oderspez. IgE-Kontroll-Allergen imAllergenhalter. Die Barcodes derRöhrchen sollten dabei imAllergenhalter lesbar sein.

4 Schließen Sie den Allergenhalter undscannen Sie die Allergenbarcodes mitHilfe des Hand-Scanners ein.

5 Nach Beendigung des Scan-Vorgangssetzen Sie den Allergenhalter in dasReagenzienkarussell.

6 Wiederholen Sie diesen Vorgang umweitere Allergenhalter mit Allergenenzu platzieren.

Bitte beachten Sie, dass derAllergenhalter vor dem Einsetzen in dasReagenzienkarussell gescannt werdenmuss um eine korrekte Abarbeitung zugarantieren. Das Entfernen oder Ersetzenjeglicher Röhrchen im Allergenhaltererfordert ein erneutes Scannen desAllergenhalters mit dem Barcodescanner,um die aktuelle Platzierung der Allergenezu gewährleisten.Empfohlenes Kalibrationsintervall:2 Wochen.

Qualitätskontrollseren: Um dieKalibration auf Gültigkeit zu überprüfenbenutzen Sie die Adjuster-Kontrollen dieim Kit enthalten sind. Ebenso stehenKontrollen für spezifische Einzelallergenezur Verfügung (siehe unter Separaterhältliche Testsystem-Komponenten).Diese Kontrollen (DC1L, DC2L für Milben,MC6L für Schimmelpilz und L2SNC alsNegativkontrolle) sollten der Überprüfungvon spezifischen Einzelallergen-Messungenen dienen.

Interpretation der Ergebnisse

Einzelallergene:Neben der quantitativen Angabe derErgebnisse in internationen Einheiten kU/lfür das IgE (WHO 75/502) kann eineZuordnung in Klassen erfolgen. DieAllergie-Klasse ist ein Hinweis auf dieMenge endogen zirkulierender IgE-Antikörper, die gegen das jeweiligeAllergen.

Das Standardklassifizierungs-Systemnutzt folgende Einteilung der Klassen.

Klasse kU/lReaktivität mit Einzel-/Gruppenallergen(en)

< 0,10 Fehlend oder n.n.†0*

0,10 – 0,34 Sehr Niedrig

I 0,35 – 0,69 Niedrig

II 0,70 – 3,49 Moderat

III 3,50 – 17,49 Hoch

IV 17,5 – 52,49

V 52,5 – 99,99

VI ≥ 100

Sehr Hoch

* Klasse 0 im Standardsystem bedeuted: nichtnachweisbar mit Assays der zweitenGeneration.† n.n.: nicht nachweisbar mit IMMULITE 20003gAllergy.

Das erweiterte Klassensystem basiertauf den nachfolgenden Klassengrenzen.

Klasse kU/l

Reaktivität mit Einzel-/Gruppenallergen(en)

0 < 0,1 Fehlend oder n.n.†

0/1 0,11 – 0,24 Sehr Niedrig

I 0,25 – 0,39 Niedrig

II 0,40 – 1,29 Moderate

III 1,30 – 3,89 Hoch

IV 3,90–14,99

V 15,00– 24,99

VI ≥ 25

Sehr Hoch

† n.n.: nicht nachweisbar mit IMMULITE 20003gAllergy.

Die Entscheidung für eines der beidenKlassifizierungssysteme obliegt demAnwender und kann direkt in derGerätesoftware des IMMULITE 2000voreingestellt werden.

Gruppenallergen (Panels):Bei Gruppenallergenen weist einpositives Ergebnis, Klasse I odergrößer, auf das Vorhandensein spez. IgE-Antikörper gegenüber einem odermehreren, der im Extrakt enthaltenenEinzelallergene hin. Zur genauenIdentifizierung des Allergens, sollten dieim Gruppenallergen enthaltenen Allergenenochmals als spezifische Einzelallergene


mit dem Patientenserum nachgetestetwerden.

Ein negatives Ergebnis (Klasse 0) weistauf fehlende oder sehr niedrige Spiegel anspez. IgE für die Komponenten desPanels hin.

Bedingt durch kumulative Effekte könnendie Ergebnisse für die jeweiligenEinzelallergene nicht mit dem Resultat desGruppenallergens verglichen werden.

Grenzen der MethodeEine abschließende klinische Diagnosesollte sich nicht ausschließlich auf dieErgebnisse des in-vitro Nachweisesallergen-spezifischer IgE-Anikörperstützen, sondern vielmehr alle klinischenBefunde und Laborergebnisseeinbeziehen.2,4

Das Ergebnis der in vitro-Diagnostik vonspezifischem IgE sollte nicht Grundlageder Dosierung einer medikamentösenTherapie sein. Der Hauttest, mit dervorgeschlagenen Verdünnung desAllergenextraktes durchgeführt, sollte zurFeststellung der Toleranz des Patientengegenüber dem Allergen vorgeschaltetwerden.Bei Nahrungsmittelallergien könnenzirkulierende IgE-Antikörper unterUmständen nicht nachgewiesen werden,wenn die Allergene der Nahrungsmitteldurch die Verdauung oder Zubereitung soverändert sind, dass sie nicht mehr demnativen Allergen entsprechen auf das derPatient reagiert.1,3

Identische Ergebnisse für verschiedeneAllergene können nicht mit den gleichenklinischen Symptome gleichgesetztwerden. Sie beruhen auf unterschiedlicheIgE- Bindungskapazitäten.6

Der Anwender sollte sich möglicherKreuzreaktionen innerhalb einerAllergenfamilie bewusst sein.7,8

Besonders bei Tests auf eineSensibilisierung gegenüber Latex ist zuberücksichtigen, daß

• gegenüber einigen Nahrungsmitteln,wie Avocado, Banane, Kiwi undKastanie Kreuzreaktivitäten bestehenkönnen.12

• ausschließlich IgE-vermittelteReaktionen des Soforttyps im Latex-Test nachgewiesen werden können,

während verzögerte Spätreaktionen(zellvermittelte, Typ IV) unentdecktbleiben.

Klasse 0 Ergebnisse für Insektengifteweisen auf fehlende oder sehr niedrigeSpiegel an zirkulierenden spez. IgEAntikörpern gegen Insektengifte hin. DieseErgebnisse schließen eine bestehendeoder zukünftig klinische Reaktion gegenInsektengift jedoch nicht aus (Toxizität).

Heterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen in vitroImmunoassays verursachen. (Clin. Chem.1988:34:27-33) Proben von Patienten, diehäufig mit Tier- bzw. Tierserumproduktenzu tun haben, können die erwähntenInterferenzen verursachen und zuanomalen Resultaten führen. Dieverwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zudiagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenSiehe Tabellen und Grafiken mitrepräsentativen Daten für den Assay.Ergebnisse sind im kU/l dargestellt. Sofernnicht anders angegeben, wurden hierfürSerumproben in Röhrchen ohneGeltrennung und Gerinnungshilfeneingesetzt.IMMULITE 2000 3gAllergy SpezifischesIgE ist Inhalt mehrerer publizierterStudien.14,15

Arbeitsbereich: 0,1 – 100 kU/l(WHO 2 IRP 75/502).Analytische Sensitivität: 0,1 kU/l.Funktionell Sensitivität: 0,2 kU/l.

Präzision: Proben wurden an 20 Tagenmit jeweils zwei Testansätzen inDoppelbestimmung gemessen (insgesamt40 Testläufe und 80Doppelbestimmungen). (Siehe “Precision”Tabelle.)


Linearität: Die Proben wurden nachunterschiedlicher Vorverdünnungbestimmt. (Siehe Tabelle "Linearity" fürrepräsentative Daten.)Spezifität: Die verwendeten Antikörpersind hochspezifisch für humanes IgE undzeigen keine Kreuzreaktivität mit anderenhumanen Immunglobulinen.Bilirubin: Unkonjugiertes undkonjugiertes Bilirubin hat inKonzentrationen bis zu 200 mg/l keinenEinfluss auf die Ergebnisse, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.Hämolyse: Hämoglobin hat inKonzentrationen bis zu 500 mg/dl keinenEinfluss auf die Ergebnisse, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.Lipämie: Triglyceride hat inKonzentrationen bis zu 3 000 mg/dlkeinen Einfluss auf die Ergebnisse, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.

Alternativer Probentyp: Um dieAuswirkungen von verschiedenenProbenarten zu untersuchen, wurde Blutvon 18 Freiwilligen in Röhrchen ohneAdditiva, in Heparin-, EDTA- und BectonDickinson SST® Vacutainer-Rörchengesammelt. Alle Proben wurden mit demIMMULITE 2000 3gAllergy™ spezifischesIgE Assay mit den nachfolgendaufgeführten Ergebnissen bestimmt.(Heparin) = 1,10 (Serum) + 0,16 kU/lr = 0,986

(EDTA) = 0,81 (Serum) + 0,01 kU/lr = 0,996

(SST) = 0,91 (einfachen Röhrchen) + 0,15 kU/lr = 0,992

Mittelwerte:7,1 kU/l (Serum)8,0 kU/l (Heparin)5,8 kU/l (EDTA)6,6 kU/l (SST)

Methodenvergleich: Das Testsystemwurde anhand von 7 520 individuellenPatientenergebnissen mit dem DPC'sAlaSTAT Microplate Allergen-spezifischenIgE verglichen. Die Ergebnisse wurdenentsprechend dem StandardKlassensystem ausgewertet undgegenübergestellt.

6 1 3 31 42 303

5 11 76 33 35

4 3 178 168 26 10

3 1 292 604 49 2 2

2 16 229 886 98

1 108 172 94 4IMM

ULI

TE 2

000

0 3 912 118 11 20 1 2 3 4 5 6

AlaSTAT Microplate

Totale Übereinstimmung: 97%Relative Sensitivität: 96%Relative Spezifität: 97%Total identisch: 81%Klasse 1 identisch: 99%Klasse 2 identisch: 100%

Mittelwerte der Allergie Klassen1,29 (AlaSTAT)1,37 (IML 2000)

Mit denselben Daten wurde anhand derermittelten Konzentrationen eine lineareRegressionsanalyse durchgeführt:(IML 2000) = 0,989 (AlaSTAT) + 1,21 kU/l

r = 0,87

Mittelwerte:8,53 kU/l (AlaSTAT)9,64 kU/l (IMMULITE 2000)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre DPC Niederlassung.Das Qualitätssystem der Diagnostic ProductsCorporation ist nach ISO 13485:2003 registriert.

Español

IMMULITE 2000 3gAllergy™ IgEEspecífica Kit Universal

Utilidad del test: Para diagnóstico in vitrousado con el Analizador IMMULITE 2000,para la determinación cuantitiva de la IgEAlérgeno-Específica en suero humano,como ayuda en el diagnóstico clínico delas alteraciones alérgicas mediadas porIgE.Número de Catálogo: L2KUN6 (600 tests)Código del Test: SPE Color: Gris Claro


Resumén y Explicación delTestMuchas alérgias estan mediadas porinmunoglobulinas de tipo IgE. Enindividuos sensibilizados que sufren estetipo de alérgia inmediata (atópicas oanafilácticas) las moléculas de IgE actuancomo puntos de unión entre los alergenosy células especializadas que liberanhistamina y otros agentes tras laexposición al alérgeno; esto inicia losprocesos que son conocidos comoreacciones alérgicas.5,9 Cuando sonevaluados a la luz de otras observacionesclínicas y de laboratorio, los análisis invitro de la IgE Alérgeno-Específicapueden ayudar al médico a identificar elalérgeno (o alérgenos) al cual un individuoes sensible.

Principio del TestIMMULITE 2000 3gAllergy™ IgEEspecífica es un análisisenzimoinmunométrico quimioluminiscenteen fase sólida, en dos pasos, que se basaen cinéticas en fase líquida en formato debola 10,11 (U.S. Patent No. 4 778 751).Representa un avance significativo sobrelos métodos convencionales basados enla unión de los alérgenos a un soportesólido, como los disco de papel.Los alérgenos se unen covalentemente auna matriz polímero/copolímero soluble, lacual a su vez está marcada con unligando. El uso de un copolímeroaminoacídico aumenta la cantidad dealérgeno que puede soportar la matriz.Ciclos de incubación: 2 × 30 minutos.

Recogida de la muestraSe recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.Muestras hemolizadas pueden indicar unamala recogida de la misma antes de serremitida al laboratorio; Estos resultadosdeberían ser interpretados conprecaución.La centrifugación de las muestras desuero antes de que se formecompletamente el coagulo puedeocasionar la presencia de fibrina. Paraevitar resultados erróneos debidos a lapresencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coagulo completamente

antes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulación.

Los tubos de extracción de distintosfabricantes pueden generar valoresdiferentes, dependiendo del material deltubo y de los aditivos, incluyendo barrerasde gel o barreras físicas, activadores de lacoagulación y/o anticoagulantes. El3gAllergy™ IgE Específica IMMULITE2000 no ha sido analizado con todos losdistintos tipos de tubos. Para obtenerdetalles sobre los tipos tubos que se hananalizado, consulte la sección de Tipos deMuestras Alternativos.Volumen Requerido: 50 µl de suero.Conservación: 7 días a 2–8°C, o6 meses a –20°C.13

Advertencias y Precauciones.Para uso diagnóstico in vitro.Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo con las normas aplicables.

Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerposfrente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.Se ha usado Azida sodica, enconcentraciones menores de 0,1 g/dl,como conservante. Para su eliminacion,lavar con grandes cantidades de aguapara evitar la constitucion de residuos deazidas metalicas, potencialmenteexplosivas, en las cañerías de cobre yplomo.Substrato quimioluminiscente: Evitar lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el prospecto).Agua: Usar agua destilada o desionizada.

Materiales SuministradosLos componentes representan un juegocompleto. Las etiquetas incluidas en lacaja son necesarias para el ensayo.


Cartucho de Bolas de 3gAllergy™ IgEEspecíficaCon código de barras. 200 bolas,recubiertas con anti-ligando. Estable a2–8°C hasta la fecha de caducidad.L2KUN6: 3 cartuchos.

Vial de Reactivos de 3gAllergy™ IgEEspecífica (L2UNA6)Con código de barras. 28 ml de Fosfatasaalcalina (de intestino de ternera)conjugada con anticuerpo monoclonalmurino anti-IgE humana en una matriz desuero humano y no humano procesadacon solución tampón. Estable a 2–8°Chasta la fecha de caducidad.L2KUN6: 1 vial.

Antes de usar, cortar la parte superior dela etiqueta en la perforación, sin dañar elcódigo de barras. Quitar el precinto delorificio del vial; encajar la cubiertadeslizante en las rampas de la tapa delreactivo.

Ajustadores de 3gAllergy™ IgEEspecífica (L2UNJ3, L2UNJ4)Dos viales (bajo y alto) que contienen2,0 ml de IgE humana en una matriz nohumana de suero, con conservante.Estable a 2–8°C durante 30 días despuésde su apertura, o durante 6 meses(alicuotedos) a –20°C.L2KUN6: 2 juegos.Antes de hacer un ajuste, colocar lasetiquetas de las alicuotas apropiadas(suministradas con el kit) sobre tubos deensayo, de tal forma que los códigos debarras puedan ser leídos por el lector.

Anticuerpo Ajustador 3gAllergy™ IgEEspecífica (L2UNS1)Dos viales que contienen 2,75 ml delíquido cada uno de anticuerpo policlonalde cabra anti-IgE humana marcado conligando, listo para su uso y conconservante. Estable a 2–8°C hasta lafecha de caducidad. Este vial es colocadoen la cuña de alergenos cuando seprocesan los ajustadores de IgEespecífica del ensayo.L2KUN6: 2 juegos.

Kit Universal de Controles de3gAllergy™ IgE Específica (SPE)(L2UNC1, L2UNC2)Dos viales que contienen 2 ml de líquidocada uno de IgE humana en una matriz

de suero no humano, con conservante.Estable a 2–8°C durante 30 dias despuésde su apertura, o durante 6 meses(alicuoteados) a –20°C.L2KUN6: 2 juegos.

Consultar el protocolo del control para verlas concentraciones de referencia de cadanivel.Antes de usar, colocar las etiquetas de lasalicuotas apropiadas (suministradas con elkit) sobre tubos de ensayo, de tal formaque los códigos de barras puedan serleídos por el lector.

Anticuerpo Control 3gAllergy™ IgEEspecífica (L2UNS2)Dos viales que contienen 2,75 ml delíquido cada uno de anticuerpo policlonalde cabra anti-IgE humana marcado conligando, listo para su uso y conconservante. Estable a 2–8°C hasta lafecha de caducidad. Este vial es colocadoen la cuña de alergenos cuando seprocesan los controles de IgE específicadel ensayo.L2KUN6: 2 juegos

Compoenentes del kit que sesuministran por separado

Diluyente para muestras de 3gAllergy™IgE Específica (L2UNZ)Para diluciones en el instrumento demuestras. Un vial de un concentrado (listopara su uso) de una matriz albúminasérica humana, con conservantes.Conservación: 30 días (después de suapetura) a 2–8°C o 6 meses (alicuotado) a–20°C. Desechar de acuerdo con lasleyes aplicables.L2UNZ: 25 ml

Se suministran etiquetas con códigos debarras para usarse con este diluyente.Antes de uso, colocar la etiqueta con elcódigo de barras en un tubo de ensayo de16 × 100 mm, así los códigos de barraspueden ser identificados por el lector delinstrumento.L2UNZ: 3 etiquetasL2SUBM: Substrato QuimoluminiscenteL2PWSM: Módulo de Lavado de SondaL2KPM: Kit de limpieza de sondaLRXT: Tubos de reacción (desechables)L2AW1-3: Cuñas para colocar alergenos(con codigo de barras)L2AW1: codigos 1-33


L2AW2: codigos 34-66L2AW3: codigos 67-99L2ATC: Tapones para alergenos.L2ATS: Septum para alergenosTambien disponible:MC6L, DC1L, DC2L, L2SNC: ControlesIgE Alérgeno-Específica en suero humanoTambién necesarios:Agua destilada o desionizada, tubos deensayo, controles.

3gAllergy™ Alérgenos Específicos yPaneles de Mezcla de Alérgenos.Alérgenos específicos y paneles demezclas de alérgenos en fase líquida, conconservante, se embasan y se venden enmódulos de 20 y 40 tests, para su uso enlas plataformas IMMULITE 2000 eIMMULITE 2500. (Para referencias, vea elcatálogo de productos de 3gAllergy™).Almacenar refrigerado: estable a 2–8ºChasta la fecha de caducidad marcada enla etiqueta. No utilizar si muestra signosde contaminación bacteriana, tales comoturbidez

Procedimiento de EnsayoAviso: para obtener el funcionamientoóptimo, es importante realizar todos losprocedimientos del mantenimiento generalsegún lo definido en el manual deloperador de IMMULITE 2000.Consulte el Manual del operador deIMMULITE 2000 para: la preparación,instalación, ajuste, ensayo yprocedimientos de control de calidad.

Carga de Alérgenos.1 Seleccionar una posición libre en el

Carrusel de Reactivos a través delsoftware.

2 Reemplazar los tapones de los tubosde alergenos por los septum. Noinvertir el tubo de alergeno una vezque el septum ha sido colocado.

3 Colocar los Viales de Alérgenos quecontienen alérgenos específicos,panéles de alérgenos específicos,anticuerpo Ajustador IgE Específica,y/o anticuerpo Control IgE Específica,en el Soporte de Viales de Alérgenos,con los códigos de barras orientadoshacia el lado abierto del soporte.

4 Cerrar el Soporte de Viales deAlérgenos y escanear los códigos de

barras de los alérgenos con el lectorde códigos de barras manual.

5 Una vez que la lectura de códigos debarras se ha completado, cargar elSoporte de Viales de Alérgenos en elcarrusel de reactivos.

6 Repetir este procedimiento paracargar los siguientes Soportes deViales de Alérgenos.

El Soporte de Viales de Alérgenos debeser escaneado antes de colocarlo en elcarrusel de reactivos, para asegurar unacorrecta operación del instrumento. Quitaro sustituir un Vial del Soporte de Viales deAlérgenos requiere volver a escanear elsoporte con el lector de códigos de barras,para actualizar la información de losalérgenos.

Intervalo de ajuste recomendado:2 semanas.Muestras de Control de calidad: Paramonitorizar el ajuste, utilizar los controlessuministrados con el kit. Tambien estándisponibles los controles de alérgenosespecíficos: consultar la sección. Loscontroles de alérgenos específicos (DC1L,DC2L, MC6L and L2SNC) deben serprocesados para monitorizar losresultados de los alérgenos.

Interpretación de losResultados

Resultados de Alérgenos Individuales:Las clases es una indicación de lacantidad de IgE endógena para undeterminado alérgeno. En la siguientestablas, se muestran los resultadoscuantitativos (kU/L) y la interpretación delresultado en clases para los dos sistemasde clasificación (estandar y extendido).


El sistema de clasificación estandarutiliza los siguientes puntos de corte.

Clase kU/l

Reactividad paraalérgenos

Individuales/paneles

< 0,10 Ausencia oindetectable†

0*0,10 – 0,34 Muy Bajo

I 0,35 – 0,69 Bajo

II 0,70 – 3,49 Moderado

III 3,50 – 17,49 Alto

IV 17,5 – 52,49

V 52,5 – 99,99

VI ≥ 100

Muy alto

* Clase 0 en el sistema estandar significa: nodetectable por ensayos de segunda generación.† ND: no detectable por IMMULITE 20003gAllergy.

El sistema de clasificación extendido usalos siguientes puntos de corte de clases.

Klasse kU/l

Reactividad paraalérgenos

individuales/paneles

0 < 0,1 Ausencia oindetectable†

0/1 0,11 – 0,24 Muy bajo

I 0,25 – 0,39 Bajo


III 1,30 – 3,89 Alto

IV 3,90–14,99

V 15,00– 24,99

VI ≥ 25

Muy alto

† ND: no detectable por IMMULITE 20003gAllergy.

La elección del sistema de clasificaciónpuede realizarla el usuario dentro delsoftware IMMULITE 2000.

Resultados de Paneles de AlérgenosUn resultado positivo (Clase I o superior)con un Panel de Alérgenos indica que, enla muestra de suero del paciente, existencantidades elevadas de anticuerpos frentea uno o más de los alérgenos quecomponen el panel. Para identificar la IgEAlérgeno-Específica, la muestra debe serde nuevo procesada con cada uno de losalérgenos individuales que componen elpanel

Un resultado negativo (Clase 0) indica laausencia o niveles muy bajos de IgEespecífica para los componentes delpanel.Los resultados obtenidos con Paneles deAlérgenos no pueden ser comparados conresultados obtenidos con alérgenosindividuales, y no pueden serconsiferados con una acumulación de losresultados obtenidos con alérgenosindividuales.

LimitacionesUn diagnóstico clínico definitivo no debehacerse sólo en base a los resultados invitro de IgE Alérgeno-Específica. Elmédico debe dar el diagnóstico despuésde que todas las observaciones clínicas yde laboratorio hayan sido consideradas.2,4

Los resultados In vitro de IgE Alérgeno-Específica no deben ser utilizados comoguía definitiva para la elección de unadosis inicial de inmunoterapia. Antes deberealizarse un test cutáneo con la dilucióninicial propuesta para demostrar latoleracia del paciante a esa dosis.

En alergias alimentarias, los anticuerposIgE circulantes pueden permanecerindetectables, si los alérgenos sondescubiertos o alterados durante ladigestión, y por tanto, no existen en laalimento original para el cual el pacienteesta siendo analizado.1,3

Idénticos resultados para diferentesalérgenos pueden no estar asociados amanifestaciones clínicas equivalentes,debido a la diferente capacidad de uniónde las IgEs.6

El usuario debería tener en cuenta laposibilidad de que existan reaccionescruzadas dentro de una misma familia dealergenos.7,8

Las siguientes consideracionesespeciales deben ser aplicadas al análisisde la alergia la latex:

• Hay posibilidad de reaccionescruzadas entre el latex y ciertosalimentos como aguacate, platano,castaña y kiwi.12

• Dado que el análisis de la alergia allatex mide IgE Alérgeno-Específica, lareccion retardada de tipo IV y lairritación por latex no será detectada.


Los resultados Clase 0 para los venenosde insectos indican ausencia o nivelesmuy bajos de anticuerpos IgE específicosde venenos. Estos resultados nodescartan la existencia de una futura oactual hipersensibilidad clínica frente a lapicadura de insectos.Los anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productosséricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmenteocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos coneste ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, lahistoria médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características analíticasConsultar las tablas y gráficos de datosrepresentativos de las cualidades delensayo. Los resultados son expresadosen kU/l. (A menos que se indique locontrario, los resultados de las muestrasfueron generados a partir de muestras desuero recogidas en tubos sin barrera degel o promotores de la coagulación).El ensayo IgE específica IMMULITE 20003gAllergy ha sido objeto de un número deestudios publicados.14,15

Intervalo de trabajo: 0,1 – 100 kU/l(WHO 2 IRP 75/502).Sensibilidad Analítica: 0,1 kU/l.Sensibilidad Funcional: 0,2 kU/l.Precisión: Las muestras fueronanalizadas en duplicado durante 20 días,dos tandas por día, para un total de 40tandas y 80 replicados. (ver tabla“Precision” .)

Linearidad: Las muestras fueronanalizadas con varias diluciones. (Ver

tabla "Linearity" para los datos encuestión.)

Especificidad: Los anticuerpos sonaltamente específicos para IgE humana yno muestran reacción cruzada a otrasclases de inmunoglobulinas.

Bilirubina: La presencia de bilirrubinaconjugada y no conjugada, enconcentraciones hasta 200 mg/l, no tieneningún efecto sobre los resultados entérminos de precisión.Hemólisis: La presencia de hemoglobina,en concentraciones hasta 500 mg/dl,notiene ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.

Lipemia: La presencia de triglicéridos enconcentraciones hasta 3 000 mg/dl notiene efecto alguno en los resultados, enlo correspondiente a la precisión delensayo.Tipo de Muestra Alternativa: paraevaluar el efecto de los diferentes tipos demuestras alternativos, se recogió sangrede 18 voluntarios en tubos normales,tubos con Heparina, tubos con EDTA ytubos vacutainer SST® de BectonDickinson. Todas las muestras fueronanalizadas con el procedimiento3gAllergy™ IgE Específica IMMULITE2000, con los siguientes resultados.(Heparina) = 1,10 (Suero) + 0,16 kU/lr = 0,986

(EDTA) = 0,81 (Suero) + 0,01 kU/lr = 0,996

(SST) = 0,91 (tubos simples) + 0,15 kU/lr = 0,992

Medias:7,1 kU/l (Suero)8,0 kU/l (Heparina)5,8 kU/l (EDTA)6,6 kU/l (SST)

Comparación de Métodos: El ensayo fuécomparado con el sistema AlaSTATmicroplaca de DPC para la determinaciónde IgE específica de alérgeno en 7 520muestras.


6 1 3 31 42 303

5 11 76 33 35

4 3 178 168 26 10

3 1 292 604 49 2 2

2 16 229 886 98

1 108 172 94 4IMM

ULI

TE 2

000

0 3 912 118 11 20 1 2 3 4 5 6

AlaSTAT Microplaca

Correlación: 97%Sensibilidad Relativa : 96%Especificidad Relativa: 97%Coincidencia: 81%Coincidencia Class 1: 99%Coincidencia Class 2: 100%

Media de los resulatdos de clases:1,29 (AlaSTAT)1,37 (IML 2000)

Los mismos datos fueron analizadosmediante análisis de regresión, con lossiguientes resultados:(IML 2000) = 0,989 (AlaSTAT) + 1,21 kU/l

r = 0,87

Medias:8,53 kU/l (AlaSTAT)9,64 kU/l (IMMULITE 2000)

Asistencia técnicaPóngase en contacto con el distribuidornacional.El Sistema de Calidad de Diagnostic ProductsCorporation está registrado para laISO 13485:2003.

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IMMULITE 2000 3gAllergy™ IgEspécifiques coffret universelDomaine d'Utilisation: Mesurequantitative des allergènes IgEspécifiques dans le sérum humain.Réservé à un usage diagnostique in vitroavec l'analyseur IMMULITE 2000, ce testconstitue une aide au diagnostic cliniquedes désordres allergiques IgE médiés.Référence catalogue : L2KUN6(600 tests)

Code produit : SPE.Code couleur : Gris clair.

IntroductionDe nombreuses allergies sont médiéespar des immunoglobulines de la classeIgE. Chez les personnes sensibiliséesatteintes d'un type d'allergie immédiate(atopique ou anaphylactique), lesmolécules d'IgE agissent comme despoints de contact entre l'allergène et lescellules spécialisées qui relarguentl'histamine et d'autres agents lors del'exposition à l'allergène; c'est l'initiationdes événements que nous reconnaissonscomme réactions allergiques.5,9 Etudiésconjointement à la clinique et aux autresrésultats de laboratoire, les dosages invitro d'IgE spécifiques peuvent aider leclinicien à identifier l'allergène (ou lesallergènes) auquel est sensibilisé lepatient.

Principe du testLe test IMMULITE 2000 3gAllergy™ IgEspécifiques est un immunodosagechimiluminescent, en phase solide et endeux étapes, qui utilise une cinétique enphase liquide sur un format de bille.10,11

(Brevet U.S. No. 4 778 751) Celareprésente une avance significative parrapport aux méthodes conventionnellesreposant sur des allergènes fixés sur unephase solide, telle qu'un disque de papier.

Les allergènes sont fixés par covalence àune matrice polymère/copolymère qui estmarquée par un ligand. L'utilisation d'uncopolymère d'acides aminés amplifie ladensité d'allergènes que la matrice peutporter.Cycles d'incubation : 2 × 30 minutes.

Recueil des échantillonsIl est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.

Des échantillons hémolysés peuvent êtresigne d'une souffrance du prélèvementavant son arrivée au laboratoire ; il faudradonc interpréter les résultats avecprudence.La centrifugation des échantillons avant laformation complète du caillot peutentraîner la présence de fibrine. Pouréviter les résultats erronés dûs à laprésence de fibrine, s'assurer de laformation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certains


échantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anticoagulants, peuventnécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret IMMULITE 2000 3gAllergy™ IgEspécifiques n'a pas été testé sur tous lestypes de tubes possibles. Veuillezconsulter le chapitre intitulé Autres Typesd'Échantillons pour plus derenseignements sur les tubes qui ont étéévalués.Volume nécessaire : 50 µl de sérum.Conditions de conservation :7 jours à +2°C/+8°C ou 6 mois à–20°C.13

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitro.

Réactifs : conserver les réactifs à +2/+8 °C. Eliminer les déchets conformémentà la réglementation en vigueur.Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-VHC et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.De l'azide de sodium à des concentrationsinférieures à 0,1 g/dl a été ajouté commeconservateur ; lors de l'élimination,l'évacuer avec de grandes quantités d'eaupour éviter une accumulation d'azidesmétalliques explosifs dans lescanalisations.Substrat chimiluminescent : éviter toutecontamination et l'exposition directe à lalumière solaire (voir la fiche technique).

Eau : utiliser de l'eau distillée oudésionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Les

étiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Cartouche de billes 3gAllergy™ IgEspécifiques (L2UN12)Avec code-barre. 200 billes revêtues d'unanti-ligand. Stable à +2°C/+8°C jusqu'à ladate d'expiration.L2KUN6: 3 cartouches.

Cartouche réactif 3gAllergy™ IgEspécifiques (L2UNA6)Avec code-barre. 28 ml d'anticorpsmonoclonal murin anti-IgE humainemarqué à la phosphatase alcaline(intestins de veau) dans un matrice traitéetampon/sérum humain/non-humain. Stableà +2°C/+8°C jusqu'à la date d'expiration.L2KUN6: 1 cartouche.

Avant l'emploi, retirer la partie supérieurede l'étiquette au niveau des perforationsen ayant soin de ne pas endommager lecode-barres. Retirer le film protecteursitué sur la partie supérieure de lacartouche-réactif ; insérer le couverclecoulissant entre les glissières sur ledessus de la cartouche-réactif.

Ajusteurs 3gAllergy™ IgE spécifiques(L2UNJ3, L2UNJ4)Deux flacons (bas et haut) contenantchacun 2,0 ml d'IgE humaines dans unematrice de sérum non humain avecconservateur. Stable à +2°C/+8°Cpendant 30 jours après ouverture ou6 mois (aliquoté) à –20°C.L2KUN6: 2 jeux.

Avant de réaliser un ajustement, placerl'étiquette correspondante (fournie dans lecoffret) sur les tubes de manière à ce quele code-barre puisse être lu par le lecteurcode-barre.

Anticorps de l'Ajusteur 3gAllergy™ IgEspécifiques (L2UNS1)Deux tubes, 2,75 ml chacun, contenant unliquide prêt à l'emploi composé d'unanticorps polyclonal de chèvre anti-IgEhumaine marqué par un ligand avecconservateur. Stable à +2°C/+8°C jusqu'àla date d'expiration. Ce réactif est placédans une cartouche d'allergènes lors dupassage des Ajusteurs IgE spécifiques.L2KUN6: 2 jeux.


Contrôles universels 3gAllergy™ IgEspécifiques (SPE) (L2UNC1, L2UNC2)Deux flacons contenant chacun 2 ml d'IgEhumaines dans une matrice de sérum nonhumain avec conservateur. Stable à+2°C/+8°C pendant 30 jours aprèsouverture ou 6 mois (aliquoté) à –20°C.L2KUN6: 2 jeux.

Pour connaître les valeurs du contrôleactuel, se reporter à la fiche technique ducontrôle.Avant de réaliser un contrôle, placerl'étiquette correspondante (fournie dans lecoffret) sur les tubes de manière à ce quele code-barre puisse être lu par le lecteurcode-barre.

Anticorps du contrôle 3gAllergy™ IgEspécifiques (L2UNS2)Deux tubes de 2,75 ml de liquide prêt àl'emploi contenant un anticorps polyclonalde chèvre anti-IgE humaine marqué parun ligand avec conservateur. Stable à+2°C/+8°C jusqu'à la date d'expiration. Ceréactif est placé dans une cartouched'allergènes lors du passage desContrôles IMMULITE 2000 IgEspécifiques.L2KUN6: 2 jeux.

Composants du coffret fournisséparément

Diluant échantillon 3gAllergy™ IgEspécifiques (L2UNZ)Pour la dilution à bord des échantillons.Un flacon contenant une matriceconcentrée d'albumine sérique humaineavec conservateur (prêt à l'emploi).Conservation: 30 jours (après ouverture) à+2°C/+8°C ou 6 mois (aliquoté) à –20°C.Éliminer les déchets conformément auxlois en vigueur.L2UNZ: 25 ml

Les étiquettes code-barres sont fourniesavec le Diluant. Avant utilisation, placerl'étiquette appropriée sur un tube de16X100 mm de façon que le code-barrepuisse être lu par le lecteur de l'appareil.L2UNZ : 3 étiquettesL2SUBM : Substrat chimiluminescentL2PWSM : Solution de lavageL2KPM : Coffret de décontamination del'aiguille de prélèvementLRXT : Godets réactionnels (jetables)L2AW1-3 : Cartouche d'allergènes (avec

code-barre)L2AW1 : numérotée 1–33L2AW2 : numérotée 34–66L2AW1 : numérotée 67–99L2ATC : Bouchons pour tube d'allergèneL2ATS : Septum pour tube d'allergèneEgalement disponibleMC6L, DC1L, DC2L, L2SNC: ContrôlesIgE spécifiques à base de sérum humain.

Egalement nécessaire :Eau distillée ou désionisée ; tubes ;contrôles.

3gAllergy™ Allergènes spécifiquesisolés ou Mélanges d'allergènesLes allergènes isolés et les mélanges enphase liquide, avec conservateur, sontvendus conditionnés en coffrets de 20 et40 tests et sont destinés à être utilisésavec les systèmes IMMULITE 2000 etIMMULITE 2500. (Se reporter aucatalogue 3gAllergy™ pour lesréférences). Conserver réfrigéré : stable à+2°C/+8°C jusqu'à la date d'expirationindiquée sur l'étiquette. Ne pas utiliser sides signes de contamination microbienne,comme un aspect trouble, sont observés.

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation IMMULITE 2000.

Voir le manuel d'utilisation de l'IMMULITE2000 pour la préparation, le démarrage dusystème, les ajustements, le dosage et lesprocédures de contrôle de qualité.

Chargement des allergènes1 Sélectionner par le logiciel une

position libre sur le CarrouselRéactifs.

2 Remplacer le bouchon des tubesd'allergènes par un septum. Ne pasretourner le tube d'allergène une foisle septum mise en place.

3 Place les tubes d'allergènes contenantles allergènes isolés, les mélangesd'allergènes, l'Anticorps de l'AjusteurIgE spécifiques et/ou l'Anticorps duContrôle IgE spécifiques IMMULITE2000 dans la Cartouche d'Allergènes,les code-barres tournés vers le côtéouvert de la cartouche.


4 Refermer la Cartouche et lire lescode-barres des allergènes avec ladouchette code-barre.

5 Une fois la lecture terminée, chargerla Cartouche d'Allergènes sur lecarrousel réactifs.

6 Reprendre cette procédure pourcharger toutes les Cartouchesd'Allergènes suivantes.

La Cartouche d'Allergènes doit être lueavant chargement dans l'instrument afinde s'assurer un fonctionnement correct.Retirer ou remplacer tout tube de laCartouche d'Allergènes nécessitera larelecture de la Cartouche pour mettre àjour les informations concernant lesallergènes.Intervalle d'ajustement recommandé :2 semaines.

Echantillons pour le contrôle dequalité : Les contrôles fournis dans lecoffret doivent être utilisés commecontrôle de qualité de l'ajustement. Descontrôles d'allergènes spécifiques sontégalement disponibles, voir le chapitre« Composants du coffret fournisséparément”. Les contrôles d'allergènesspécifiques (DC1L, DC2L, MC6L etL2SNC) doivent être utilisés commecontrôle de qualité pour assurer le suivides performances des allergènes.

Interprétation des RésultatsRésultats d'allergènes isolés :Le numéro de classe est une indicationsur la quantité d'IgE spécifiquesandogènes pour l'allergène sélectionné.Les résultats des valeurs quantitatives(kU/l) et interprétation de classe pour deuxsystèmes (standard et étendu) sontreportés dans les tableaux ci-dessous.

Le système de classification standardutilise les seuils suivants pour les classes :

Classe kU/l

RéactivitéIndividu/Composant(s)

Allergénique(s)

< 0,10 Absence ouindétectable†

0*0,10 – 0,34 Très bas

I 0,35 – 0,69 Bas

II 0,70 – 3,49 Moyen

III 3,50 – 17,49 Elevé

IV 17,5 – 52,49

V 52,5 – 99,99

VI ≥ 100

Très élevé

* Classe 0 dans un système standard signifie:non détectable par des dosages de 2nde

génération.† ND: non détectable avec le dosage IMMULITE2000 3gAllergy.

La classification étendue du systèmeutilise les seuils de classe suivants.

Classe kU/l

RéactivitéIndividu/Composant(s)

Allergénique(s)

0 < 0,1 Absence ouindétectable†

0/1 0,11 – 0,24 Très bas

I 0,25 – 0,39 Bas

II 0,40 – 1,29 Moyen

III 1,30 – 3,89 Elevé

IV 3,90–14,99

V 15,00– 24,99

VI ≥ 25

Très élevé

† ND: non détectable avec le dosage IMMULITE2000 3gAllergy.

Le choix du système de classification peutêtre fait par l'utilisateur via le logicielopérationnel IMMULITE 2000.

Résultats des mélanges d'allergènesUn résultat positif (Classe I ou supérieure)avec un mélange d'allergènes indique queles anticorps dirigés contre l'un ouplusieurs allergènes composant lemélange sont présents à un taux élevédans l'échantillon sérique du patient. Pouridentifier les IgE spécifiques, l'échantillondoit être retesté avec des allergènesindividuels correspondant au mélange.


Un résultat négatif (Classe 0) indiquel'absence ou des taux très bas d'IgEspécifiques pour les composants dupanel.Les résultats d'un mélange ne peuventpas être comparés aux résultats de testsavec les allergènes individuels, ils nepeuvent pas non plus être considéréscomme un total cumulé des résultats desallergènes individuels.

LimitesUn diagnostic clinique définitif ne doit pasdépendre uniquement d'un résultat d'IgEspécifiques in vitro. Le diagnostic doit êtreétabli seulement après avoir étudié lecontexte clinique du patient, lasymptomatologie et d'autres données delaboratoire. 2,4

Les résultats d'IgE spécifiques in vitro nedoivent pas être utilisés comme guidepour sélectionner une dose initialedéfinitive d'immunothérapie. Un testcutané à la dilution initiale proposée del'extrait allergènique doit être tout d'abordeffectué afin de démontrer la capacité dupatient à tolérer la dose.Dans le cas de l'allergie alimentaire, lesanticorps IgE circulants peuvent resterindétectables s'ils sont dirigés contre lesallergènes révélés ou transformés durantla préparation ou la digestion et donc quin'existe pas dans l'aliment d'origine pourlequel le patient est testé.1,3

Des résultats identiques pour différentsallergènes ne peuvent pas être associés àdes manifestations cliniques équivalentesà cause des différentes capacités deliaison des IgE.6

L'utilisateur doit être conscient de lapossibilité d'une réaction croisée cliniqueà l'intérieur d'une famille d'allergènes.7,8

Ces considérations spéciales s'appliquentau dosage de l'allergène latex :

• La possibilité d'une réaction croiséeclinique existe entre le latex etcertains aliments comprenant l'avocat,la banane, la châtaigne et le kiwi.12

• Puisque le test du latex dose les IgEspécifiques, les réactions retardées detype IV ou l'irritation par le latex neseront pas détectées.

Des résultats en classe 0 pour les veninsd'insectes indiquent l'absence ou des taux

très bas d'anticorps IgE spécifiques antivenin circulants. De tels résultatsn'excluent pas l'existence d'unehypersensibilité clinique présente oufuture pour la piqure d'insecte.

Les anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avecles immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1998:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultatanormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,cependant des interactions potentiellesentre des sérums rares et les composantsdu test peuvent se produire. Dans un butdiagnostique, les résultats obtenus avecce dosage doivent toujours être utilisés enassociation avec un examen clinique,l'histoire médicale du patient et d'autresrésultats.

Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances de ce test. Les résultatssont exprimés en kU/l. (En l'absenced'indication contraire, tous les résultats ontété obtenus sur des échantillons sériquesrecueillis sur tubes, sans gel, ni activateurde la coagulation).Les dosage IMMULITE 2000 3gAllergyIgE Specifiques a été l'objet d'un grandnombre d'études publiées.14,15

Domaine de mesure: 0,1 – 100 kU/l(OMS 2 IRP 75/502).Sensibilité analytique: 0,1 kU/l.Sensibilité fonctionnelle: 0,2 kU/l.

Précision: Les échantillons ont été dosésen doublets pendant 20 jours, deux sériespar jour, soit un total de 40 séries et de 80résultats. (Voir le tableau “Precision”.)

Test de dilution: Les échantillons ont ététestés sous différents taux de dilutions.(Voir le tableau "Linearity" pour lesdonnées représentatives.)


Spécificité: Les anticorps sont hautementspécifiques des IgE humaines et neprésentent pas de réaction croisée avecles autres classes d'immunoglobulineshumaines.

Bilirubine: La présence de bilirubineconjuguée ne présente aucun effet sur lesrésultats ni sur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 200 mg/l.

Hémolyse: La présence d'hémoglobinene présente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 500 mg/dl.Lipémie : La présence de triglycéridesjusqu'à une concentration de 3 000 mg/dln'interfère ni sur la précision du dosage, nisur les résultats.Autres types d'échantillons: pourestimer l'effet de l'utilisation de différentstype d'échantillons, 18 volontaires ont étéprélevés sur tubes secs, héparinés, EDTAet sur tubes vacutainer SST® BectonDickinson. Tous les échantillons ont étédosés avec le protocole IMMULITE 20003gAllergy™ IgE spécifiques et ont donnéles résultats suivants.(Hépariné) = 1,10 (Sérum) + 0,16 kU/lr = 0,986

(EDTA) = 0,81 (Sérum) + 0,01 kU/lr = 0,996

(SST) = 0,91 (tubes ordinaires) + 0,15 kU/lr = 0,992

Moyennes :7,1 kU/l (Sérum)8,0 kU/l (Hépariné)5,8 kU/l (EDTA)6,6 kU/l (SST)

Comparaison de méthode : Le test a étécomparé au dosage IgE spécifiquesAlaSTAT Microplaque de DPC, un test demarquage standard, sur 7 520échantillons.

6 1 3 31 42 303

5 11 76 33 35

4 3 178 168 26 10

3 1 292 604 49 2 2

2 16 229 886 98

1 108 172 94 4IMM

ULI

TE 2

000

0 3 912 118 11 20 1 2 3 4 5 6

AlaSTAT Microplaque

Concordance totale: 97%

Sensibilité relative: 96%Spécificité relative: 97%Total de résultats identiques: 81%Résultats identiques en Classe 1: 99%Résultats identiques en Classe 2: 100%

Moyenne des classes:1,29 kU/l (AlaSTAT)1,37 kU/l (IML 2000)

Les mêmes données ont été étudiées lorsd'une analyse de regression et ont donnéles resultats suivants:(IML 2000) = 0,989 (AlaSTAT) + 1,21 kU/l

r = 0,87

Moyennes:8,53 kU/l (AlaSTAT)9,64 kU/l (IMMULITE 2000)

Assistance techniqueContacter votre distributeur national. EnFrance distribué par DPC France 90 bdNational 92257 La Garenne-ColombesLe système d'assurance qualité de DPC estcertifié ISO 13485 (2003).

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IMMULITE 2000 Kit Universale3gAllergy™ IgE SpecificheUso: A solo uso diagnostico in vitro conl'Analizzatore IMMULITE 2000 — per ladeterminazione quantitativa delle IgEAllergene Specifiche nel siero umanoquale ausilio nella diagnosi clinica deidisturbi allergici IgE mediati.Codice: L2KUN6 (600 test)Codice del Test: SPEColore: Grigio Chiaro

Riassunto e Spiegazione delTestMolte allergie sono mediate dalleimmunoglobuline della classe IgE. Inindividui sensibilizzati affetti da questo tipodi allergia (atopica o anafilattica), lemolecole IgE agiscono come punti dicontatto tra l'allergene e le cellulespecifiche che rilasciano istamina ed altriagenti in seguito ad esposizioneall'allergene; ciò innesca il processo cheva sotto il nome di reazione allergica.5,9 Sevalutati alla luce di altre indagini cliniche e


di laboratorio, i test sulle IgE allergenespecifiche possono essere d'aiuto almedico nell'identificazione dell'allergene(allergeni) ai quali un soggetto è sensibile.

Principio del DosaggioIl dosaggio IMMULITE 2000 3gAllergy™IgE Specifiche è un immunodosaggio inchemiluminescenza in due step in fasesolida, che utilizza la cinetica in faseliquida sotto forma di sferetta.10,11

(Brevetto U.S. No. 4 778 751) Questodosaggio rappresenta un miglioramentosignificativo rispetto ai metodiconvenzionali basati sugli allergeni adesiad un supporto in fase solida quale undischetto di carta.Gli allergeni sono adesi in manieracovalente ad una matrice di polimericopolimeri solubili, a sua volta marcatacon un ligando. L'utilizzo di un aminoacidocopolimero amplifica la quantità diallergene che la matrice può contenere.Cicli di Incubazione: 2 × 30 minuti.

Prelievo del CampioneSi consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.Campioni emolizzati possono indicare untrattamento non idoneo del campioneprima dell'arrivo al laboratorio; quindi irisultati devono essere interpretati concautela.

La centrifugazione dei campioni di sieroprima che la coagulazione sia completapuò produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che la coagulazione siacompleta prima di centrifugare i campioni.Alcuni campioni, in modo particolare quellidi pazienti sottoposti a terapia conanticoagulanti, possono richiedere tempidi coagulazione più lunghi.Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE 2000 3gAllergy™ IgESpecifiche non é stato testato con tutte lepossibili variazioni di tipi di provette. Perdettagli sulle provette testate consultare lasezione sulla Tipologia dei CampioniAlternativi.

Volume Richiesto: 50 µL di siero.Conservazione: 7 giorni a 2–8°C, o6 mesi a –20°C.13

Avvertenze e PrecauzioniAd uso diagnostico in vitro.

Reagenti: Conservare a 2–8°C. Eliminaresecondo le disposizioni di legge vigenti.Seguire le precauzioni generali emanipolare tutti i componenti come sefossero potenzialmente infetti. I materialiderivati da sangue umano sono statitestati con esito negativo per la Sifilide; glianticorpi anti-HIV 1 e 2; l'Antigene diSuperficie dell'Epatite B; e gli anticorpianti-Epatite C.E' stata aggiunta sodio azide, aconcentrazioni inferiori a 0,1 g/dL, comeconservante. Al momentodell'eliminazione, irrorare con molta acquaper evitare la formazione di azidimetalliche nelle tubature di piombo e dirame.Substrato Chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucesolare diretta. (Vedi metodica.)

Acqua: Utilizzare acqua distillata odeionizzata.

Materiali FornitiI componenti costituiscono un set misto.Le etichette all'interno della confezionesono necessarie per il dosaggio.

Confezione di Sferette 3gAllergy™ IgESpecifiche (L2UN12)Con codice a barre. 200 sferette coattatecon anti-ligando. Stabili a 2–8°C fino alladata di scadenza.L2KUN6: 3 confezioni.

Porta Reagente 3gAllergy™ IgESpecifiche (L2UNA6)Con codice a barre. 28 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata conun anticorpo monoclonale IgE murino anti-umano in un matrice di siero/tamponeumano/non umano. Stabile a 2–8°C finoalla data di scadenza.L2KUN6: 1 Porta Reagente.

Prima dell'utilizzo rimuovere la partesuperiore dell'etichetta lungo laperforazione senza danneggiare il codicea barre. Togliere il foglio protettivo dalla


parte superiore del flacone. Far scattarenella corretta posizione il coperchioscorrevole lungo le guide del coperchiodel reagente.

Calibratori 3gAllergy™ IgE Specifiche(L2UNJ3, L2UNJ4)Due flaconi (uno Basso e uno Alto), da2,0 mL ciascuno di IgE umane in unamatrice di siero non umano, conconservanti. Stabili a 2–8°C per 30 giornidopo l'apertura, o per 6 mesi (aliquotati) a–20°C.L2KUN6: 2 set.

Prima di ricalibrare collocare le etichettegiuste sulle provette delle aliquote (fornitecol kit) cosicché i codici a barre possanoessere registrati dal lettore.

Anticorpo del Calibratore 3gAllergy™IgE Specifiche (L2UNS1)Due provette, da 2,75 mL ciascuna di unanticorpo policlonale di capra anti-umanoIgE marcato con ligando, in forma liquidae pronto all'uso, con conservanti. Stabile a2–8°C fino alla data di scadenza. Questoreagente è collocato nel wedge degliAllergeni quando si eseguono i CalibratoriIgE Specifiche.L2KUN6: 2 set.

Controlli del Kit Universale 3gAllergy™IgE Specifiche (SPE) (L2UNC1, L2UNC2)Due flaconi, 2 mL ciascuno di IgE umanein una matrice sierica non umana, conconservanti. Stabili a 2–8°C per 30 giornidopo l'apertura, o per 6 mesi (aliquotati) a–20°C.L2KUN6: 2 set.Fare riferimento alla metodica dei controlliper i livelli di concentrazione.Prima dell'utilizzo, collocare le etichettegiuste sulle provette delle aliquote (fornitecol kit) cosicché i codici a barre possanoessere registrati dal lettore.

Anticorpo di Controllo 3gAllergy™ IgESpecifiche (L2UNS2)Due provette, contenenti ciascuna2,75 mL di un anticorpo policlonale dicapra anti-umano IgE marcato con ligandoin forma liquida, pronto all'uso, conconservanti. Stabili a 2–8°C fino alla datadi scadenza. Questo reagente vienecollocato sul wedge degli Allergeniquando si eseguono i Controlli IgE

IMMULITE 2000.L2KUN6: 2 set.

Componenti del kit fornitiseparatamente

Diluente 3gAllergy™ IgE Specifiche perCampioni (L2UNZ)Per la diluzione sul luogo dei campioni deipazienti. Un flacone concentrato prontoall'uso, una matrice albumina di sieroumano con conservanti. Conservazione:30 giorni (dopo l'apertura) a 2–8°C oppure6 mesi (in aliquote) a–20°C. Eliminare inconformità alle leggi vigenti.L2UNZ: 25 mLVengono Fornite Le provette da utilizzarsicon il diluente. Prima dell'utilizzo,collocare un'etichetta appropriata su unaprovetta 16 × 100 mm cosicchè i codici abarre possano essere letti dal lettoreinterno.L2UNZ: 3 etichetteL2SUBM: Substrato ChemiluminescenteL2PWSM: Soluzione di LavaggioL2KPM: Kit di Pulizia dell'AgoLRXT: Tubi di Reazione (monouso)L2AW1-3: Wedge di Allergeni (con codicea barre)L2AW1: codificati serialmente 1–33L2AW2: codificati serialmente 34–66L2AW3: codificati serialmente 67–99L2ATC: Tappi per AllergeniL2ATS: Septum per AllergeniSono anche disponibiliMC6L, DC1L, DC2L, L2SNC: ControlliIgE Allergene Specifiche basati su sieroumano.Materiale RichiestoAcqua distillata o deionizzata; provette;controlli.

Pannello di Allergeni Specifici3gAllergy™ e Pannello di AllergeniMistiPannelli di allergeni singoli e di allergenimisti in fase liquida, con conservanti, sonoconfezionati in moduli da 40 e 20 test epossono essere utilizzati sia con lapiattaforma dell'IMMULITE 2000 che conquella dell'IMMULITE 2500. (Per i codici,vedi il listino prezzi dei Prodotti3gAllergy™). Conservare refrigerati: stabilia 2–8°C fino alla data di scadenzaindicata sull'etichetta. Non utilizzare se


sono presenti segni di contaminazionemicrobica quali aspetto torbido.

Procedura del DosaggioAttenzione: per ottenere prestazioniottimali, è importante effettuare tutte leprocedure di manutenzione di routinecosiccome definite nel Manualedell'Operatore IMMULITE 2000.Vedi Manuale dell'Operatore IMMULITE2000 per: preparazione, messa a punto,calibrazione, dosaggio e procedure dicontrollo di qualità.

Caricamento degli Allergeni1 Selezionare, attraverso il software una

posizione libera sul CaroselloReagenti.

2 Togliere i tappini dalle Provette degliAllergeni. Non invertire il tubodell'allergene una volta che il setto èinstallato.

3 Collocare le Provette contenenti gliallergeni specifici IMMULITE 2000, ipannelli Allergene Specifici,l'Anticorpo del Calibratore e/ol'Anticorpo del Controllo nel wedgedegli Allergeni, con il codice a barreposto in modo tale che risulti visibiledall'esterno.

4 Chiudere il wedge ed eseguire lascannerizzazione dei codici a barrecon l'apposito scanner.

5 Al completamento dellascannerizzazione, caricare il wedgedegli Allergeni nel carosello reagenti.

6 Ripetere questa procedura percaricare tutti i successivi wedgenecessari.

Il wedge degli Allergeni deve esserescannerizzato prima dell'installazione nellostrumento per assicurare l'operativitàcorretta dello strumento. Rimuovere oricollocare un qualsivoglia flaconeall'interno del wedge degli allergeni verràrichiesta la riscannerizzazione del wedgeper aggiornare le informazioni relative agliallergeni.Intervallo di Calibrazione Consigliato:2 settimane.Campioni per il Controllo di Qualità:Per monitorare la calibrazione, utilizzare icontrolli forniti con il kit. Sono anchedisponibili i controlli Allergene Specifiche,

vedi la sezione “Componenti del Kit FornitiSeparatamente”. Devono essere testati icontrolli Allergene Specifiche (DC1L,DC2L, MC6L and L2SNC) per monitorarele prestazioni degli allergeni.

Interpretazione dei Risultati

Risultati degli Allergeni Singoli:La classe indica il quantitativo di IgEendogene specifiche contenutenell'allergene selezionato. I valoriquantitativi (kU/L) e l'interpretazione deirisultati della Classe per due sistemi diconteggio (standard ed esteso) sonoforniti nelle tabelle seguenti.

Il sistema di classificazione standard usa iseguenti cutoff relativi alla classe:

Classe kU/L

Reattività perAllergene(i)Individuali/

Componenti

< 0,10 Assente o nonRilevabile†

0*0,10 – 0,34 Molto Basso

I 0,35 – 0,69 Basso

II 0,70 – 3,49 Moderato

III 3,50 – 17,49 Elevato

IV 17,5 – 52,49

V 52,5 – 99,99

VI ≥ 100

Molto Elevato

* Nel Sistema Standard la Class 0 sta per: nonrilevabile dai dosaggi di seconda generazione.† ND: non rilevabile dall'IMMULITE 20003gAllergy.

Il sistema di classificazione estesa utilizzai seguenti cutoff di classe.

Classe kU/l

Reattività perAllergene(i)Individuali/C

omponenti

0 < 0,1 Assente o nonRilevabile†

0/1 0,11 – 0,24 Molro Basso

I 0,25 – 0,39 Basso

II 0,40 – 1,29 Moderato

III 1,30 – 3,89 Elevato

IV 3,90–14,99

V 15,00– 24,99

VI ≥ 25

Molto Elevato

† ND: non rilevabile dall'IMMULITE 2000


3gAllergy.

La scelta dei sistemi di classificazione puòessere effettuata dall'utilizzatore all'internodel Software Operativo dell'IMMULITE2000.

Risultati del Pannello di Allergeni MistiUn risultato positivo (Classe I o superiore)con un pannello di Allergeni Misti indica lapresenza in quantitativi elevati, nelcampione di siero del paziente, di anticorpiverso uno o più componenti allergenichedel pannello. Per identificare le IgEAllergene Specifiche, il campione deveessere ritestato con allergeni singolicorrispondenti alle componenti delpannello.

Un risultato negativo (Class 0) indical'assenza o livelli molto bassi di IgEspecifiche per le componenti del pannello.I risultati del pannello non possono essereparagonati con i risultati basati sul testdegli allergeni singoli, né essi possonoessere considerati il totale cumulativo deirisultati degli allergeni singoli.

LimitiUna diagnosi clinica definitiva non deveessere effettuata solo sulla base di unrisultato IgE Allergene Specifiche in vitro.La diagnosi deve essere effettuata dalmedico solo dopo aver valutato tutte leindagini cliniche e di laboratorio.2,4

I risultati delle IgE allergene-specifiche invitro non devono essere utilizzati comeriferimento definitivo per scegliere la doseiniziale da somministrarenell'immunoterapia. Deve essereeffettuato prima di tutto un test cutaneocon la diluizione iniziale suggeritadell'estratto allergenico per dimostrare lacapacità dei pazienti di tollerare la dose.

Nelle allergie alimentari, gli anticorpi IgEcircolanti possono rimanere a livelli nonrilevabili se diretti verso allergeni chesiano evidenti o alterati durante laprocessazione o digestione e che quindinon fossero presenti originariamente nelcibo per il quale il paziente è statotestato.1,3

Risultati identici per allergeni diversipossono non essere associati conmanifestazioni cliniche equivalenti, acausa di differenze nella capacità legantedelle IgE.6

Potrebbe essere presente unacrossreattività clinica all'interno dellafamiglia degli allergeni.7,8

Le seguenti considerazioni particolarisono relative ai test per l'allergia al lattice:

• La possibilità che esista unacrossreattività clinica tra il lattice ealcuni cibi incluso l'avocado, labanana, la nocciola, ed il kiwi.12

• Poiché i dosaggi al lattice misurano leIgE allergene-specifiche, le reazioniritardate di tipo IV o fenomeni irritativinon verranno identificati.

Risultati appartenenti alla Classe 0 relativial veleno di insetti indica l'assenza o valorimolto bassi di anticorpi IgE specifiche peril veleno in circolo. Tali risultati nonprecludono l'esistenza di un'ipersensibilitàclinica presente o futura alle punture degliinsetti.

Gli anticorpi eterofili presenti nel sieroumano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentarequesto tipo di interferenza causapotenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti deltest. A scopo diagnostico, i risultati ottenuticon questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esameclinico, all'anamnesi del paziente e adaltre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedi tavole e grafici per datirappresentativi. I risultati sono espressi inkU/L. (Laddove non diversamentespecificato, tutti i dati sono stati generatisu campioni di siero raccolti in provettesenza gel separatore o additivi chefavoriscano la formazione di coaguli).L'IMMULITE 2000 3gAllergy IgESpecifiche è stato oggetto di moltepubblicazioni.14,15


Range Operativo: da 0,1 a 100 kU/L(WHO secondo IRP 75/502).Sensibilità Analitica: 0,1 kU/L.Sensibilità Funzionale: 0,2 kU/L.

Precisione: I campioni sono stati dosati induplicato nel corso di 20 giorni, duesedute al giorno, per un totale di 40sedute ed 80 replicati. (Vedi la tabella“Precision”.)Linearità: I campioni sono stati dosati avarie diluizioni. (Vedi tabella "Linearity" perdati rappresentativi).Specificità: gli anticorpi sono altamentespecifici per le IgE umane e nonpresentano crossreattività verso altreclassi di immunoglobuline umane.Bilirubina: La presenza di bilirubinaconiugata e non coniugata inconcentrazioni fino a 200 mg/L non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Emolisi: La presenza di emoglobina inconcentrazioni fino a 500 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Lipemia: La presenza di trigliceridi inconcentrazioni fino a 3 000 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Tipologia di Campioni Alternativi: Perdeterminare l'effetto di campionialternativi, da 18 volontari è statoprelevato del sangue in provette semplici,eparinizzate, EDTA e Becton Dickinsonvacutainer SST®. Tutti i campioni sonodosati mediante la procedura IMMULITE2000 3gAllergy™ IgE Specifiche, con iseguenti risultati.(Eparina) = 1,10 (Siero) + 0,16 kU/Lr = 0,986

(EDTA) = 0,81 (Siero) + 0,01 kU/Lr = 0,996

(SST) = 0,91 (tubi semplici) + 0,15 kU/Lr = 0,992

Valore medio:7,1 kU/L (Siero)8,0 kU/L (Eparina)5,8 kU/L (EDTA)6,6 kU/L (SST)

Comparazione di Metodi: Il dosaggio èstato comparato al dosaggio DPCAlaSTAT Micropiastra IgE AllergeneSpecifiche. La comparazione è espressa

utilizzando le classi standard su 7 520campioni.

6 1 3 31 42 303

5 11 76 33 35

4 3 178 168 26 10

3 1 292 604 49 2 2

2 16 229 886 98

1 108 172 94 4IMM

ULI

TE 2

000

0 3 912 118 11 20 1 2 3 4 5 6

AlaSTAT Micropiastra

Correlazione totale: 97%Sensibilità Relativa: 96%Specificità Relativa: 97%Totale Identici: 81%Classe 1 Identici: 99%Classe 2 Identici: 100%

Medie delle Classi Standard:1,29 (AlaSTAT)1,37 (IML 2000)

Gli stessi dati sono stati dosati conun'analisi della regressione come segue:(IML 2000) = 0,989 (AlaSTAT) + 1,21 kU/L

r = 0,87

Media:8,53 kU/L (AlaSTAT)9,64 kU/L (IMMULITE 2000)

Assistenza tecnicaAll'Estero: Contattare il proprio distributorenazionale.Il Sistema Qualità della Diagnostic ProductsCorporation è certificato secondo le normeISO 13485:2003.

Português

Universal 3gAllergy™ IgEEspecífica IMMULITE 2000Utilização: Uso no diagnóstico in vitrocom o Analisador IMMULITE 2000— paraa quantificação de ImunoglobulinasEspecíficas (IgE), no soro como auxiliarno diagnóstico diferencial de atopia.

Números de catálogo:L2KUN6 (600 testes)Código do teste: SPECor: Cinzento claro


Sumário e explicação do testeMuitas alergias são mediadas porimunoglobulinas específicas (IgE). Nosdoentes sensibilizados que sofrem destetipo de alergia, IgE mediada (atópica ouanafilática), as moléculas de IgEfuncionam como ponto de contacto entreo alergénio e células especializadas quelibertam histaminas e outros agentesquando na presença desses alergénios;desecandeado-se uma reacçãoalérgica.5,9 Com base na história clinica,os testes in vitro de IgE específica podemauxiliar o clinico a identificar o alergénio(ou alergénios) para o qual o doente estásensibilizado.

Princípio do ProcedimentoIMMULITE 2000 3gAllergy™ IgEEspecífica é um imunoensaioquimioluminiscente com 2 passosreaccionais, basedo numa tecnologia defase-líquida e em esferas revestidas10,11

(U.S. Patent No. 4 778 751. Estatecnologia representa um avançosignificativo face a outros métodosconvencionais, onde os alergénios estãoligados a um suporte sólido, como umdisco de papel.Os alergénios ligam-secovalententemente a uma matriz solúvelpolimérica/co-polímerica, que por sua vezestá marcada com um ligando. Autilização de um amino ácido co-polimerico permite aumentar a quantidadede alergénio que se liga à matriz.Ciclos de incubação: 2 × 30 minutos.

ColheitaRecomenda-se o uso de uma ultracentrífuga para clarear amostraslipémicas.Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto das amostras antesdo envio para o laboratório; pelo que osresultados devem ser interpretados comcuidado.

A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados errados devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo foi completa antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentes que

recebem terapia anticoagulante podemrequerer um maior tempo de formação docoágulo.Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE 20003gAllergy™ IgE Específica não foramainda testados com todas as possiveisvariações originadas pelos tipos de tubos.Consultar a secção Tipos de AmostrasAlternativas para obter detalhes sobre ostubos que foram testados.Volume de Amostra: 50 µL de soro.Estabilidade: 7 dias a 2–8°C, ou por6 meses a –20°C.13

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.

Reagentes: Manter a 2–8 °C. Elimine deacordo com as leis aplicáveis.Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primas,obtidas de soro humano, foram testadas,revelando resultados negativos para asífilis, para os anticorpos do vírus daimunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.Azida de sódio foi adicionada comoconservante; para evitar acumulações deazidas metálicas explosivas emcanalizações de cobre e alumínio, osreagentes devem ser rejeitados no esgotoapenas se estiverem diluídos e foremlavados com grandes volumes de água.

Substrato quimioluminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula do substrato).Água: Use água destilada ou deionizada.

Materiais FornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. Os códigos de barras nointerior das caixas são necessárias para oensaio.


Embalagem de pérolas de 3gAllergy™IgE Específica (L2UN12)Com código de barras. 200 pérolasrevestidas com anti-ligando. Estável àtemperatura 2–8ºC, até expiração deprazo de validade.L2KUN6: 3 embalagens.

Embalagem de Reagente 3gAllergy™IgE Específica (L2UNA6)Com código de barras. Contém 28 mL defosfatase alcalina (de intestino bovino)marcada com anticorpo monoclonal demurino anti-IgE humana em matriztamponizada, processada, de soro deorigem humana e não humana. Estávelaté a data de validade a 2–8°C.L2KUN6: 1 embalagem.Antes de utilizar, retire a etiqueta deprotecção da tampa deslizante; levante atampa,remova o remanescente daetiqueta com o cuidado de não danificar ocódigo de barras. Remova o selo dealumínio do topo da embalagem, encaixea tampa deslizante nas ranhuras everifique se a tampa desliza.

Ajustes de 3gAllergy™ IgE Específica(L2UNJ3, L2UNJ4)Dois frascos (baixo e alto) com 2,0 mL deIgE humana numa matriz sérica nãohumana com conservantes. Estável a2–8°C durante 30 dias após abertura oupor 6 meses (aliquotas) a –20ºc.L2KUN6: 2 conjuntos.

Antes de realizar qualquer ajuste, coloqueas etiquetas nas alíquotas apropriadas(fornecidas com o "kit") de forma que oscódigos de barras possam ser lidos pelodispositivo de leitura do aparelho.

Anticorpo Ajuste de 3gAllergy™ IgEEspecífica (L2UNS1)Dois tubos cada com 2,75 mL de ligandomarcado com anticorpo policlonal decabra anti -IgE-humana comconservantes, pronto a usar. Estável até adata de validade a 2–8°C. Este reagente écolocado na embalagem dos alergéniosespecíficos, quando se efectuam osajustes.L2KUN6: 2 conjuntos.

Controlos Universal 3gAllergy™ IgEEspecífica (SPE) (L2UNC1, L2UNC2)Dois frascos cada com 2 mL de IgEhumana numa matriz sérica não humana.

Estável, após a abertura, durante 30 diasa 2–8°C, ou por 6 meses (aliquotado) a–20°C.L2KUN6: 2 conjuntos.Refira-se à literatura inserida para osníveis de concentração.

Antes de realizar qualquer ajuste, coloqueas etiquetas de alíquota apropriadas(fornecidas com o "kit") em tubos deamostra de forma que os códigos debarras possam ser lidos pelo dispositivode leitura do aparelho.

Anticorpo Controlo de 3gAllergy™ IgEEspecífica (L2UNS2)Dois tubos cada com 2,75 mL de ligandomarcado com anticorpo policlonal decabra anti-IgE humana com conservantes,pronto a usar. Estável até a data devalidade a 2–8°C. Este reagente écolocado na embalagem dos alergéniosespecíficos, quando se efectuam oscontrolos.L2KUN6: 2 conjuntos.

Componentes do kit fornecidosseparadamente

Diluente de Amostra de 3gAllergy™ IgEEspecífica (L2UNZ)Para diluições no aparelho de amostras.Um frasco, de concentrado (pronto a usar)constituido por uma matriz albumina desoro humano, com conservante.Estabilidade: 30 dias (após abertura) a 2–8°C ou 6 meses (em alíquotas) a –20°C.Elimine de acordo com as normasaplicadas.L2UNZ: 25 mLEtiquetas de código de barras sãofornecidas para usar com o diluente.Antes de usar, colocar a etiquetaapropriada num tubo de teste(16 × 100 mm) de modo a que o códigode barras possa ser lido pelo dispositivode leitura do aparelho.L2UNZ: 3 etiquetasL2SUBM: Substrato quimioluminescenteL2PWSM: Solução de lavagemL2KPM: Kit de limpeza do pipetadorLRXT: Tubos de reacção (descartáveis)L2AW1-3: Embalagens para alergénios(barcoded)L2AW1: código de série 1-33L2AW2: código de série 34-66L2AW3: código de série 67-99


L2ATC: Cápsulas AlergéniosL2ATS: Septa alergénios

Também disponívelMC6L, DC1L, DC2L, L2SNC: IgEespecífica baseados em soro humanoTambém necessárioÁgua destilada ou desionizada; tubos deamostra; controlos.

3gAllergy™ Alergénios específicos epainéis de alergéniosAlergénios e mistura de alergénios emfase liquida, com conservante, sãoembalados e fornecidos em módulos de20 e 40 testes para serem utilizados nossistemas Immulite 2000 e Immulite 2500(ver nº catálogo no Catálogo de Produto3gAllergy™). São estáveis a 2–8°C até àdata de expiração inscrita na etiqueta.Não utilizar na presença de indícios decontaminação tais como aparência turva.

Procedimento de doseamentoTer em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos demanutenção de rotina conforme definidono Manual de Operador do IMMULITE2000.Consulte o Manual do Operador deIMMULITE 2000 para instruções sobrepreparação, ajustes, doseamento eprocedimentos de controlo de qualidade.

Procedimento1 Através do software, seleccione uma

posição vazia no carrossel dosreagentes

2 Substitua as cápsulas dos tubos dealergénios pelas septas. Não inverta otubo de alergénio após colocação dasepta.

3 Coloque os alergénios específicos,painéis de alergénios, alergénio dereferência, controlo de curva naembalagem dos alergénios com oscódigos de barra voltados para fora.

4 Feche a embalagem dos alergénios efotografe com o leitor de código debarras.

5 Após terminada a leitura, coloque aembalagem de alergénios nocarrossel de reagentes.

6 Repita este procedimento para todosos alergénios.

A embalagem de alergénios tem que serfotografada antes da sua colocação noinstrumento, por forma a garantir ofuncionamento correcto do mesmo. Aremoção ou adição de outros alergéniosna mesma embalagem de alergéniosimplica nova fotografia para actualizaçãoda informação.Intervalo entre ajustes aconselhável:2 semanas.Amostras de Controlo de Qualidade:Para monitorizar o ajuste, utilize oscontrolo de curva fornecidos com o kit.Controlos de alergénios específicos estãotambém disponíveis, consulte“Componentes fornecidosseparadamente”. Os controlos dealergénios específicos (DC1L, DC2L,MC6L and L2SNC) devem ser efectuadospara monitorizar os alergénios.

Interpretação dos resultados

Resultados Alergénios Individuais:A classe é uma indicação da quantidadede IgE endógena para um determinadoalergénio. Nas tabelas abaixo, apresenta-se a interpretação dos resultados de IgEespecífica em classes e em KU/L, em doissistemas de classificação diferentes, opadrão e o extenso.

A classificação padrão utilizada nestesistema é dada pelos seguintes cut-offs:

Classe kU/L

Reactividade acomponentesalergénicos

< 0,10 Ausente ouindetectável†0*

0,10 – 0,34 Muito baixo

I 0,35 – 0,69 Baixo


III 3,50 – 17,49 Elevado

IV 17,5 – 52,49

V 52,5 – 99,99

VI ≥ 100

Muito elevado

* Classe0 significa que não há IgE detectávelnum ensaio de 2ª geração.† ND: não detectável pelo método IMMULITE2000 3g Alergias.


A classificação extensa utilizada nestesistema é dada pelos cut-offs abaixoindicados.

Classe kU/l

Reactividade acomponentesalergénicos

0 < 0,1 Ausente ouindetectável†

0/1 0,11 – 0,24 Muito Baixo

I 0,25 – 0,39 Baixo


III 1,30 – 3,89 Elevado

IV 3,90–14,99

V 15,00– 24,99

VI ≥ 25

Muito elevado

† ND: não detectável no sistema 3gAlergiaIMMULITE 2000.

A escolha do sistema de classificaçãodepende do utilizador do IMMULITE 2000,e é determinada directamene no software.

Resultados de painéis de alergéniosUm resultado positivo (classe I ousuperior) indica que existem anticorpos nosoro do doente para um ou maisalergénios presentes no painel dealergénios. Para identificar os alergéniosindividuais as amostras deverão sernovamente testadas para cada um dosalergénios individuais existentes nopainel.Um resultado negativo (Classe 0) indica aausência ou níveis muito baixos de IgEespecífica para os componentes dospainéis.Os resultados dos painéis não podem sercomparados com resultados baseadosnos testes dos alergénios individuais, nempodem ser considerados como a soma detodos os resultados dos alergéniosindividuais.

LimitaçõesDiagnósticos clínicos definitivos nãodevem ser feitos unicamente com base noresultado de um único teste de rastreio. Odiagnóstico deve ser efectuado pelomédico após a avalição de todos osdados clínicos e laboratoriais.2,4

Os resultados de IgE específicas obtidosin vitro para alergénios não devem serusados como guia definitivo de selecção

de uma dose inicial de imunoterapia:primeiro,deve-se realizar um testecutâneo com diluição inicial do extractoalergénico, para determinar a capacidadede tolerância do doente à dose aadministrar.Na alergia alimentar, as IgE específicascirculantes para uma dada proteínaalergénica podem não ser detectadaspelos testes in vitro, caso essa proteínanão exista no alimento original (extractoutilizado no teste), mas exista apenas noalimento processado ou digerido.1,3

Os resultados idênticos para alergéniosdiferentes podem não estar associadoscom manifestações clinicamenteequivalentes devido a diferenças emcapacidade de ligação IgE.6

Podem existir ou não reacções cruzadasentre alergénios da mesma familia quecondicionem o resultado.7,8

No teste de alergia ao latex, aplicam-seconsiderações adicionais:

• A possibilidade de reacções cruzadasentre o latex e algumas frutas como oabacate, banana, kiwi e castanha.12

• Como este teste mede a IgEespecífica ao latex, reacçõesretardadas tipo IV ou irritações nãosão detectadas.

Resultados classe 0 para venenos deinsectos indicam a ausência de IgEespecífica ou níveis de IgE específicacirculante não detectáveis. Estesresultados não excluem a possibilidade deuma futura hipersensibilidade à picada deinsecto.Os anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentesforam formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados em


combinação com o exame clínico, históriade medicação do doente e outrosachados que possam correlacionar.

Características do EnsaioConsulte Tabelas e Gráficos para dadosrepresentativos do desempenho dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em kU/L. (Salvo referênciaem contrário, todos os dados provêm deamostras de soro colhidas em tubos semanticoagulantes, barreiras de gel ouaditivos promotores da coagulação.)IMMULITE 2000 IgE Específica3gAlergias foi objecto de inúmerosestudos e publicações.14,15

Valores Operacionais: 0,1 – 100 kU/L(WHO 2 IRP 75/502).Sensibilidade Analítica: 0,1 kU/L.Sensibilidade Funcional: 0,2 kU/L.Precisão: Amostras foram processadasem duplicado num período de 20 dias, doisensaios por dia, perfazendo um total de 40ensaios e 80 réplicas. (Consulte a tabela“Precision”.)Linearidade: As amostras foram testadassob diferentes diluições. (Ver tabela"Linearity" para dados representativos.)Especificidade: O doseamento éespecífico para IgE específicas humanassem reacções cruzadas com outrasclasses de imunoglobulinas.Bilirrubina: A presença de bilirrubinaconjugada e não-conjugada emconcentrações até 200 mg/L não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Hemólise: A presença de hemoglobinaem concentrações até 500 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Lipemia: A presença de trigliceridos emconcentrações até 3 000 mg/dL não temefeito nos resultados, dentro da precisãodo ensaio.Tipo de amostra alternativa: Paradeterminar o efeito de amostrasalternatives, foi colhido sangue de 18voluntários em tubos secos, com EDTA,heparinizados e tubos de vacum SST® daBecton Dickinson. Todas as amostrasforam ensaiadas pelo método IMMULITE

2000 3gAllergy™ IgE Específica, com osseguintes resultados.(Heparina) = 1,10 (Soro) + 0,16 kU/Lr = 0,986

(EDTA) = 0,81 (Soro) + 0,01 kU/Lr = 0,996

(SST) = 0,91 (tubos simples) + 0,15 kU/Lr = 0,992

Médias:7,1 kU/L (Soro)8,0 kU/L (Heparina)5,8 kU/L (EDTA)6,6 kU/L (SST)

Comparação de Métodos: O ensaio IgEespecífica no Immulite 2000 foicomparado com AlaSTAT Microplacas, osresultados das 7 520 amostras testadassão apresentadas na tabela.

6 1 3 31 42 303

5 11 76 33 35

4 3 178 168 26 10

3 1 292 604 49 2 2

2 16 229 886 98

1 108 172 94 4IMM

ULI

TE 2

000

0 3 912 118 11 20 1 2 3 4 5 6

AlaSTAT Microplacas

Concordância total: 97%Sensibilidade relativa: 96%Especificidade relativa: 97%Identidade total: 81%Identidade a uma classel: 99%Identidade a duas classes: 100%

Médias das Classes:1,29 (AlaSTAT)1,37 (IML 2000)

Os mesmos dados foram analisados emtermos de valor absoluto, obtendo-se aseguinte correlação linear:(IML 2000) = 0,989 (AlaSTAT) + 1,21 kU/L

r = 0,87

Médias:8,53 kU/L (AlaSTAT)9,64 kU/L (IMMULITE 2000)

Assistência TécnicaPor favor contacte o seu DistribuidorNacional.O Sistema de Qualidade da Diagnostic ProductsCorporation está registado sob ISO 13485:2003.


Diagnostic Products CorporationCorporate Offices5210 Pacific Concourse DriveLos Angeles, CA 90045-6900USA2005-09-14PIL2KUN – 15

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3gAllergy™ Specific IgE Universal Kit - Diagnostic ... · A skin test with the proposed initial dilution of the allergenic extract should be performed first to demonstrate the patient's