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LOS FENOMENOS DE MAREA ROJA Y TOXICIDAD DE MOLUSCOS BIVALVOS

EN EL MAR ARGENTINO

por

J. 1. CARRETOM.L. LASTAR. NEGRIH. BENAVIDES

~ - 1981Prohibida la reproducción total o parcial sin mencionar la fuente

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Abstraet. Red-tides and toxicity of bivalve molluscs in the Argentine Sea.

Two unusual blooms of dinoflagellates appeared in the Argentine Continental Shelf in spring/summe'period of 1980 and 1981, but these differed, one from the other. The first was an intense red-ti de with wh ielwere associated no signs of toxicity, whereas the second, although not showing special coloration, was associatedwith (and doubtless the cause of) intense toxicity in bivr~',es of the Gulfs of San Matías and San José and of theshelf waters off Península Valdés; the death of two fishermen was atributed to the latter.

The first bloom developed as an unusual surface concentration of the predatory dinoflagellate Noctilucascintillans. It was supposed that this con:'GI1tíation was produced by a particular combination of processes of cir

culation of water masses.The second bloom was characterized by high concentrations of Gonyaulax excavata.(Braarud) Balech 1971.

Investigations at the time determined that toxins in molluscs of the area corresponded to what is called "paralyticshellfish poison" which groups the Gonyautoxins INJ, the saxitoxin, and the neosaxitoxin. Investigations withregard to the thermal stabi lit y of the tox in and the symptomatology of the intoxications, pointed with I ittledoubt to direct connections between the bloom, the toxicity of the molluscs and the two fatalities.

The bloom of Gonyaulax excavata, according to evidence, orig:)c" the Argentine Continental Shelf,off Península Valdés, and was associated with a front between well mixed and well stratified water masses. Phyto-planktonic populations, with a net predominance of dinoflagellates (among them G. excavata)were found in thisarea and near the front.

The distribution of G. excavata and its cysts leads us to believe that the highly toxic bivalve molluscs irthe Gulfs of San José and San Matías had been carried there from the "Constanza" bank. An hypothesis withregard to the development of this phenomenon is shown in Fig. 25.

The maximum toxicity centre occured in the mussel bank "Constanza" (42°23'27'S and 62°45'66W)which coincides with the front referred to above.

I

The highest value reached was 173.000 U R/l00 gr of shellfish meat, which corresponds to the highest re-ported in the literature cited.

Experiments carried out with fish which might include bivalve molluscs in their diet showed them to beseverely affected when fed with mussels from the "Constanza" bank.

The highest values of toxicity were found in the following bivalve molluscs:

- mussels (Mytilus platensis): 173.000 UR/l00 gr of shellfish meat;- "cholgas" (Au lacomya ater): 14.828 U R/l 00 gr of shellfish meat;- "vieiras" (Chlamys tehuelchus): 10.860 UR/l00 qr of shellfish meat.The rates of detoxification of mussels and "cholgas" (Mytilus platensis and Aulacomya ater) are similar and

relatively high (t 1/2 = 7 to 9 days), wh ile "vieiras" (Chlamys tehuelchus) detoxifies at a lower rate (t 1/2 .. 15days).

Studies of the distribution of toxins in the "vieira" determined that the eatable section. (the key) is freeof toxin; nevertheless, it is not advisable to allow the sale of this species during the period of Quarantine.

1n the case of the mussels from the "Constanza" bank the detoxification curve is not smooth; in Novemberthe rate was t 1/2 = 7 days, and this decreased to t 1/2 .. 61 days fram Jaunary on, and remained util the last

control with values over the security limits. It is presumed that this phenomenon is caused by the ingestion ofcysts that remained in sediments.

The literatu re cited, and the observation of cysts of Gonyaulaxexcavata in the area suggest the posibi Iityof a new dinoflagellate bloom during next spring with a risk of this becoming an endemic zone, and thus indica-ting a need for programmes to monitor the occurence of this organism and the incidence of toxicity in molluscs,and to control the harvesting and sale of the molluscs during the periods when toxicity exceeds safe levels.

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1. INTRODUCCION

Durante la primavera y el verano de 1980, fuerondetectados y estudiados dos fenómenos ecológicos delMar Argentino, que trascendieron a la opinión públicacon el nombre genérico de "Marea Roja" y que agrupódos eventos de características netamente diferentes porsu origen, intensidad y consecuencias.

Los estudios se inician, como consecuencia del te-rrible episodio que costara la vida a dos pescador"es delbuque pesquero "Constanza" y del hallazgo posterior detoxina paralizante en mejillones pertenecientes a la mis-ma partida de los que fueran ingeridos por los mencio-nados pescadores. Por otra parte, la sintomatología y lasdeclaraciones efectuadas por un pescador - que habiendoIngerido sólo dos ejemplares sufrió trastornos graves -coincidían en señalar la existencia de un fenómeno demarea roja tóxica, con producción de "veneno paralizan-te de moluscos" (Dr. Enrique Balech, comunicación per-sonal).

El segundo episodio de "marea roja" se produce enel mes de diciembre, cuando aún se desarrollaban las in-vestigaciones mencionadas, y afecta en principio a unárea que se extiende desde Mar del Plata a Miramar, ale-jada unas 10-15 millas de la costa y hasta por lo menos50 millas hacia el este. En la misma se observa en la su-perficie del mar, una intensa coloración naranja rojiza.

Estos acontecimientos, uno trágico y sin anteceden-tes para el Mar Argentino y el otro inusual por su inten-sidad, extensión y persistencia, demandaron el esfuerzode un numeroso grupo de investigadores de diversas ins-tituciones del país, entre las que destacamos: Museo Ar-gentino de Ciencias Naturales "Bernardino Rivadavia"Servicio Nacional de Sanidad Animal, Centro NacionalPatagónico, Instituto "Alimirante Storni", Instituto Na-cional de Microbiología Dr. "Carlos Malbrán", InstitutoArgentino de Ocoonografía, e Instituto Nacional de In-vestigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP).

Los resultados de estas investigaciones, coordinadas,y dirigidas por el INIDEP, en su carácter de organismo

rector del manejo de los recu rsos renovables del Mar Ar-gentino' alcanzan exitosamente su objetivo, permitien.do a las autoridades ejecutivas, la aplicación rápida deeficientes medidas de seguridad, que limitaron el númerode personas afectadas, a la irremediable pérdida de lasdos vidas humanas con que se iniciaron estas investiga-c lones.

Este trabajo por lo tanto, persigue el objetivo prin-cipal de dar a conocer los resultados sobresalientes de lasInvestigac'iones real izadas, presentándose las mismas enun contexto más amplio Que involucra la revisión criticadel problema en sus diversos aspectos científicos.

1. 1.- ANTECEOEN=rES HISTORICOS

El cambio de color de la superficie del mar, es unfenómeno natural conocido posiblemente antes de laaparición de la palabra escrita. Los chinos, japoneses yromanos así como las civilizaciones abor ígenes de Amé.rica del Norte, tenían conocimiento de su existencia.

El documento escrito más antiguo sobre este fenó'meno se encuentra en la Biblia (Exodo, Cap. V 11,versículo 20-21) que al referirse a las plagas de Egipto diceasí: "y se convirtieron las aguas del río en sangre, lospeces que había en el río murieron, quedó apestado el.río y todo el país de Egipto".

De acuerdo a los relatos de Alvar Nuñez Cabeza deVaca (Naufragios) en el Méjico precolombino ya se cono.cía el peligro de ingerir moluscos extraídos al comienzodel año, época en que aparecían las "Mareas rojas" y enque se prohib ía comer mariscos) (Balech, 1977; LópezCapont,1978).

Probablemente, la primera cita científica de envene.namiento por ingestión de moluscos, sea la aparecida en"Ephemérides des curiex de la nature" (1698). Tambiénmerece citarse la descripción de una marea roja porScoresby (1820) y por Darwin (1809-1882) en su relatoa bordo del Beagle, producida en las aguas de las costaschilenas (López-Baluja, 1980); (Gestal Otero y col. 1977).

En Canadá, pals de gran tradición en 'intox icacioneshumanas por ingestión de moluscos, el primer informe seencuentra en el diario del naturalista Mr. Menzies, perte.neciente a la expedición del capitán George Vancouver alPacífico (Vancouver 1798) en que un miembro de lamisma perece por ingestión de mejillones (Prakashycol.1971). En 1799 la expedición rusa Boranoff pierde cienhombres en el estrecho de Peril, en Alaska, por las mis-mas causas (Petroff, 1884 citado en Quayle, 1969).

Entre 1799 y 1903 no fueron detectados en las cosotas del Pacífico otros incidentes de intox icaciones, peroentre 1903 y 1957 se presentaron 375 casos de envenena-miento, produciéndose solamente en California 30 muer-tes (Mc. Farren y col. 1959). En 1936, y a raíz de la granepidemia registrada, se establecieron los primeros siste-mas de control, empleando el método desarrollado porSommer y Meyer (1937), qu ¡enes identificaron el orga-nismo causal de las intoxicaciones como Gonyaulax ea-tenella, cuya toxina se aisló en 1948. En Canadá, estoscontroles se realizan en forma sistemática desde 1943,existiendo zonas de veda permanente. (Prakash y coi1971; Quayle, 1969).

No es intención compilar los numerosos episodiosde envenenamiento registados en la literatura mundial,por lo Que se remite al lector a la realizada por Halstead(1965), ampliada posteriormente por Prakash y col.

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11971). que se presenta en forma esquemática en la figu-ra No. 1 donde pueden apreciarse las áreas donde el fe-nómeno se presenta con mayor frecuencia e intensidad.

Un hecho destacable es que en la mayoría de lasáreas del mundo en que el fenómeno se presenta por vezprimera, éste vuelve a repetirse en forma más O menosperiódica con diferente intensidad, transformándose lamisma en zona endémica.

Los casos de "mareas rojas" producidas por organis-mos no productores de toxinas son aún más numerosos,y muchos de ellos no han sido mencionados en la litera-

tura. En muchas áreas, este fenómeno es bastante regular,y ha dado lugar a los nombres vernáculos de "purga del

mar" en Galicia (España), "" aCQua rosa" en el Golfo deSpeZla (Italia), el "turbio" en Venezuela, el "akashisho"en Japón, que corresponden a la denGminación inglesade "red tide" o "red water" (Balech 1977).

Estos fenómenos, aunque no se acompañan de toxi-cidad pueden producir efectos deletéreos en la fauna ma-rina, especialmente cuando la intensidad del fenómenoes muy elevada y alcanza a provocar la muerte por asfi-x ia, ya sea por taponamiento de branquias o por defi-ciencia de oxígeno en la columna de agua.

De acuerdo con Balech (1977). en Río de Janeiro yUruguay son comunes hemotalasias producidas porScrippsiellatrochoidea y a veces Gymnodinium splen-dens, mientras que en Argentina el fenómeno aparecemuy raras veces, citando a Doello Jurado como la prime-ra mención del aspecto lechoso del agua producido porNoctiluca. Sin embargo, el fenómeno parece ser bien co-nocido por los pescadores del área de Mar del Plata. Enmarzo de 1979, tuvimos (Carreta y Negri, sin publicar)la oportunidad de presenciar una hemotalasia de Noctilu-ca, aunque su intensidad fue mucho menor Que la regis-trada en 1980.

1. 2.- LOS ORGANISMOS RESPONSABLES

Los cambios de coloración de la superficie del marpueden producirse por diversos mecanismos, pero los in-tensos y espectaculares tienen su origen en el crecimien-to e.xplosivo y acumulación' superficial de diversos orga-nismos del plancton.

Estos cambios de color pueden tener diversos mati-ces (amarillo, naranja, rojo, pardo, etc.) de acuerdo a lanaturaleza y concentración de los organismos responsa-bles, especialmente de su composición pigmentaria, porlo que la denomianción común con el término de "marearoja" no es apropiada. Balech (1977) ha propuesto ladenominación de discoloración o alocoloración del mar.

Entre los organismos responsables de estos fenóme-nos se han citado a diversas bacterias (Génovese, 1961;

Devéze y Faurel, 1966; Kobayashi y Fuyi, 1979). ciano-fitas (Graham y col., 1954; Hutton 1960) ciliados (Ji-ménez, 1966; Barber y coL, 1969: Avaria, 1970), dia-tomeas (Halim, 1960; Sournia y Plessis, 1974) dinoflage-lados (Balech 1977; Lassus, 1978; Jacques y Sournia,1979; etc.) y en ocasiones a organismos del zooplanctonmuy pigmentadoscomo ciertos copépodos(Hutton, 1966)y eufáusidos (Balech, 1977).

De todos ellos, los dinoflagelados son los agentescausales más frecuentes, especialmente algunas especiesde las familias GymnodiniaceaeNoctilucaceae,Peridinia-ceae, Prorocentraceoey Conyaulococeae (Lassus, 1978).

Del gran número de especies comprendidas en estasfamilias, sólo unas pocas han sido asociadas con la pro-ducción de toxinas (Halstead, 1965; Steindinger, 1979;Lassus y col. 1980).

En muchos casos, sin embargo, la asociación entretoxicidad y presencia del organismo no fue acompañadode la determinación experimental de toxina en la especieconsignada como tóxica, por lo que algunos fenómenosde mortalidad de fauna marina puede sospecharse fuerondebidos a la asfixia de origen físico o Químico. En la Ta-bla l. se citan las especies mejor conocidas.

Además, algunas especies parecen presentar toxici-dad en determinadas ocasiones. Tal es el caso de Gonyau-lax po/yedra agente causal de intensas mareas rojas en elGolfo de California, algunas acompañadas de elevadasmortalidades de peces y otras inocuas (Balech, 1977).Schradie y Bliss (19.62) han demostrado que G.po/yedraen cultivo es productor de toxinas, aunque Balech (1977)expresa dudas sobre la correcta indentificación de la es-pecie estudiada.

Similarmente, tanto en Portugal (Santos Pinto ySousa y Silva, 1956) como España (López Capont, 1978)la presencia de veneno paralizante (PSP) en moluscos, hasido asociada con la presencia de Prorocentrum micans,organismo causante de intensas mareas rojas en el nor-te de Chile (Silva, 1962; Reyes, 1960), algunas de hastatres meses de duración (Rodriguez, 1966) que transcu-rrieron sin signos de toxicidad. Probablemente, el brotede PSP en España (1976) deba su origen a una especieestremadamente tóxica de Gonyaulax del denominado"Grupo Tamarensis" (Gestal-Otero y col. 1977).

Otro ejemplo de duda, lo constituye el dinoflageladoGyrodinium aureolum, el organismo que con mayor fre-cuencia y desde 1966 (Braarud y Heimbal, 1970) produ-ce "mareas rojas" en las aguas del norte de Europa (Han-sen y col. 1969; Pingree y col. 1975; 1977). Las mismasse han acompañado con mortalidad de diversos organis-mos, especialmente mejillones y peces (O'Sullivan, 1978;Boalch, 1979). Mientras Tangen (1977) ha señalado co-mo causa de mortalidad la disminución de ox (geno du-

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rante la noche (debido a la respiración Y descomposiciónde la masa de dinoftagdados). H8'88I YSarma (1969)su-gieren la producción de una ic1iOlDxO. IJII!WiddolNsycol. (1979) denues1nIn. se vata de una citotoxo conefectos delelénKJ5 sobre los mejillones.

Aun el nJY estudiado ~ bR!tIe.cultiva-do en cmdiciones artificiales" pnsenta ID8'cadas varia-ciunes de la toxicidad. depend"lI!I1dode la edad del culti-vo utilizado (Ray y Wilsm. 1957).

Este organismo (JII! prolifera en el Golfo de UéfICO.produce neurotoxinas y sus florecinientos sUeleniICOII1-pañ;ne de ~ mortalidades de peces. siendo la demayor extensión la ocurrida en 1946-1947 en que pro-dujo la mue1e de aproximadamen8! 500 millones de pe-ces (S1eidinger y.loyte. 1973).

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TA8lA 1- lisia no exhaustiva de las principales espe-cies de dinoflagelados tóxicos..

Entre los ilMr1ebrados. también los moIuscos sonafectados aunque las difl!ren1es.~ ies p sus-ceptitilidades lI81:8diImente diferenciales (Roberts y cut.

1919). También el hombre es afec8do rlfri1aciolll!S por

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cenndores) 8UI1CJII dificil prOWOlJl8l aa:iden1lllS

pII!S.. Otra de dinoflag!tldos tóxials que flore-cen ..-iiIdic:In81e en el Golfode 1Ii¡ico.es Gan)wd8r~ lJI'CdJcb de .ir8s que CIII8' mortalidaden pecese CW8'dleycot 1975).

El organismomejor esa.diIdo y definidocomo pro-ductorde tul.. es el cIincJfIIgÑdO~ CIIMM-'18.nJY frea81. .. delPlcaico.c:onocidoagen-1e C8JSII de intoxic:a:iones desde 1937 (Sommer Y Me-yf!l 1937) Y lJI'CdJcb de U18 de lB t más poten-

.. que se COIIOC8IfSd8ttz. 191OJ-Al_1isIIda inicial-mili. .. mejinones de California y pas1eñormelde enaaltivos de GaD,... eA.. !m. (Burte y col. 1960.SdwIn y col. 1966). demOSlrÓ" forma conduyen1ey por primn wz. su origen tiosin1élico.

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IPSPI en las costas de Massachusetts desde 1972 (Hurst,

1975) plantearon la necesidad de clarificar la taxonomiade las especies componentes del denominado "ComplejoTamarensis" (Taylor, 1975),

Hasta los trabajos de Anderson y Wall (1978) el or-ganismo productor de veneno paralizante (PSP) fue iden-tificado como Gonyaulax tamarensis varoexcavata (Braa-rud, 1945), al que Balech (1971) propuso elevarlo a ni-vel de especie: Gonyaulax excavata (Braarud) - Balech1971. Loeblich y Loeblich (1975), lo diferenciaron deotras formas no tóxicas por la ausencia de poro ventral,blOluminiscencia y toxicidad. Anderson y Wall (1978)han demostrado sin embargo, la existencia de por lo me-nos otra especie tóx ica dentro del denominado "Comple-JO Tamarensis". Reid (1980) ha señalado las dificultadesque presenta la diferenciación taxónomica de los com-ponentes de este complejo y la necesidad de definir nue-vos criterios de clasificación basados en el estudi o de to-dos los estadios de sus ciclos vitales. En adelante, usare-mos indistintamente las denominaciones G. tamarensis oG. excavata al referirnos a estas especies, manteniendola denominación usada en el trabajo citado.

1.3.- LOS FACTORESDESENCADENANTES

En razón de la complejidad y grado de interacciónde los factores desencadenantes de marea roja, resultaconveniente considerar en forma particular, los diferen-tes y consecutivos estadios de este proceso: iniciación,crecimiento. acumulación celular y disipación (Steindin-ger,1975).

La transición de un estadio a otro es un proceso de-pendiente de la interacción concertada de una serie defactores fl'sicos. qu Imicos y biológicos cuya acción indi-vidual pasaremos a discutir.

3. 1.- Las condiciones que favorecen la iniciación delcrecimiento

La iniciación del crecimiento es uno de los aspectosmenos conocidos de toda la fenomenologla desencade-nante de un proceso de marea roja, que está Intimamen-te relacionado con el ciclo de vida de los dinoflagelados,especialmente, con el efecto de las variaciones ambienta-les inductoras de la transformación de sus estados móti-les (planctónicos) en céluldas enquistadas (bentónicas) yviceversa.

Esta transformación ha sido considerada como unasimple alternancia anual entre una célula móvil biflagela-da, generalmente p'rotegida por una pared celulósica (du-rante el verano), con una célula bentónica inmóvil (du-rante el invierno), existiendo entre ambas diversas fases

intermedias (Wall y Dale, 19681Aunqu~ la formación de qlttstes es un tenómeno en-

dógeno, el proceso suele estar directamamente asociadocon los florecimientos de dinoflagelados y se manifiestaal finalizar o luego de un periodo de crecimiento expo-nencial. El dinoflagelado pierde su movilidad y sedimen-ta, produciendo una forma bien diferente, en la que sedestaca una gruesa membrana de resistencia. un conteni-do celular que incluye sustancias de reserva (1Ipidos y al-

- midón). un cuerpo intensamente coloreado, un núcleo ycitoplasma microgranular (Wall y Dale, 1968). Estosquistes presentan un per lodo de resistencia, durante elcual el organ ismo no puede transformarse en la formamóvil. Pasado este periodo, si las condiciones ambienta-les son favorables, se restaura la fase móvil iniciándose sucrecimiento.

Prakash (1967-1971) ha descripto la formación ase-xual de quistes del dinoflagelado tóxico Gonyaulax ta-marensis en cultivos senescentes o sometidos a condicio-nes desfavorables de temperatura, intensidad luminosa onutrientes, sugiriendo su presencia en las aguas de la Ba-hla de Fundy, donde las manifestaciones de toxicidad(PSP) son endémicas y se presenta tox icidad en moluscosdurante el invierno, en que no se observan forma móviles.

Dale (1977) ha señalado una inducción similar deenquistamiento en los cultivos de Gonyaulax excavata,pero dado que los mismos regeneran rápidamente. susformas móviles-al ser trasladados a condiciones normalesde crecimiento-los ha considerado como quistes tempo-rarios, diferenciándolos de los quistes de resistencia co-lectados en los sedimentos del fiordo de Oslo. Ademásde las netas diferencias morfológicas entre ambos tiposde quistes, los de resistencia sólo pueden producir célulasmóviles después de un perldo de tiempo predetermina-do. Dale y col. (1978) han observado un cambio morfo-lógico progresivo en el desarrollo de estos quistes, espe-cialmente la aparición progresiva de inclusiones celularesfuertemente coloreadas de rojo, determinando que la via-bilidad de los mismos sólo es positiva al finalizar este pe.ríodo de desarrollo, que han calculado de alrededor decuatro meses.

En algunas especies de dinofla~lados. la deficienciade nitrogeno en el medio de cultivo induce su reproduc-e ión sexual, cuyo resultado final es la formación dehypnocigotas que en muchos casos son quistes de resis-tencia (Wal ker y Steindin~r, 1979). Este parece ser elmecanismo de formación de quistes en algunas especiestóxicas del denominado "Complejo tamarensis" (Ander-son y Wall, 1978; Turpin y col., 1978; Anderson y Morel,1979; Anderson, 1980) y Quizás de Gonyaulax monilata,otra especie tóxica productora de mareas rojas (Walker ySteidinger, 1979).

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Steidinger, 11975) Y Wall (1975) han discutido lo~mecanismos por los cuales los estados de resistencia,producidos sexual o asexualmente, determinan la inicia-ción de una marea roja, puntualizando la existencia deacumulaciones de quistes de resistencia, de especies pro-ductoras de florecimientos, en áreas bien localizadas. Pa-rámetros f ísico-qu ímicos tales como temperatura, inten-sidad luminosa y nutrientes pueden influir en la transfor-mación a sus formas planctónicas.

La existencia de zonas de acumulación de quistes es-tá bien documentada y se corresponde con las áreasdonde el fenómeno de mareas rojas se produce en formarepetitiva e indica que el proceso de iniciación está (nti-mamente ligado con la finalización del ciclo anterior enque se producen los quistes. Esta es la explicación por locual el desarrollo de una marea roja por primera vez enun área, significa la conquista por esa especie, de un es-pacio donde repetir su ciclo de vida, manteniendo duran-te el invierno una importante biomasa de formas enquis-tadas y eventualmente florecer. Tal es el caso del golfodel Maine EE.UU., (Bond, 1975; Hurst, 1975; Bicknell yWalsh, 1975; Dale y Yentsch, 1978: Anderson y Wall,1978), de las costas de las Islas Británicas (1ngham y col.1968; Ayres y Cullum, 1978) y de algunas bah(as de Ja-pón (Oshima y Col. 1976; Hashimoto y col., 1976; No.guchi y col. 1978; Onoue y col. 1980).

La distribución de estos quistes sin embargo no eshomogénea, notándose un elevado grado de agregaciónen cietas regiones particulares de la costa separadas entres( por áreas marginales (Reid, 1980). Los quistes de otrasespecies de dinoflagelados no productores de mareas ro.jas, también presentan este tipo de distribución localiza-da a lo largo de las costas, (Reid, 1980).

Dale y col. (1978) han discutido los posibles meca.nismos de agregación de quistes, señalando que debido asu comportamiento como finas parti'culas de sedimento,su distribución estará determinada por los procesos desedimentación, formándose áreas de acumulación y dedilución,

En las bah ías costeras, con reg(menes de circulaciónrestringida pueden producirse ciclos regulares y repetiti-vos de conversión entre formas móviles y quistes perpe-tuándose de esta manera su presencia.

Por el contrario, en aguas profundas y como resul-tado del transporte y concentración originado en el régi.men hidrográfico y sedimentológico, los quistes puedenacumularse en áreas alejadas de su fuente plactónica.

En las aguas profundas del golfo del Maine (90m),Dale y col. (1978) han hallado en sus sedimentos "yaci-mientos" de Quistes extremadamente ricos, siendo la to-xicidad de los quistes diez veces mayor que la corres-pondiente a las formas móviles. Estos quistes son los res.

ponsabl~ de-Ia acumulación de toxinas en los moluscosbivalvos del área durante el invierno, en que se presentael máximo de toxicidad (Dale y col. 1978; Hsu y col.,1979). Además, si como resultado de un fenómeno deupwelling o de la acción de una fuerte tormenta son Ile.vados a la zona eufótica en estado de maduración, pue.den restablecer los florecimientos de las aguas externas.Las dos grandes mareas rojas en el Golfo de Maine, de1972 (la primera tóxica producida en la región) y de1974, se iniciaron en aguas oceánicas próximas a la costa(Mulligan,1975).

3. 2.- Las condiciones que favorecen la multiplicacibnde los organismos

3.2. 1.- La temperatura del agua

En la mayor (a de las observaciones descriptas, estefenómeno ha coincidido, con per(odos de temperaturasdel aire anormal mente elevadas y asusencia de agitaciónde la masa de agua, con el consecuente desarrollo determoclinas superficiales (Margalef, 1956; Yentsch, 1975;Lassus y col., 1980). De acuerdo con Balech (1977) esteúltimo factor debe considerarse como el más constantede todos los señalados.

El incremento, muchas veces. brusco de la tempera-tura superficial del agua, no actuar ¡'asin embargo en for-ma directa, incrementando la velocidad de división celu-lar, ya que su falta de selectividad favorecería el predo-minio de especies cuya velocidad de división es muchomás elevada que la de la mayor(a de los dinoflageladosinvolucrados en estos fenómenos. As¡' mientras que eltiempo de duplicación celular de Gonyoulox excavoto encultivos es de aproximadamente 3. 5 Mas (Prakash y col.1971; White y Maranda, 1978), algunas diatomeas pue-den duplicarse dos o más veces por día.

Su efecto ser(a el resultado del desarrollo de termo-clinas superficiales, en las cuales, los dinofla~lados mi-gradores (Por ejemplo: Gonyoulox polyedro) puedencompetir con ventaja sobres otras especies no migrado-ras, profundizándose durante la noche -en que asimilanlos nutrientes disponibles por debajo de la termoclina- ycompitiendo por la radiación luminosa durante el día enque suben a la superficie. Dado que las velocidades demigración se encuentran entre 1-2 metros por hora(Eppley y Harrison, 1975), estos organismos son capacesde atravesar un rango de profundidades comprendidasentre los 10-15 metros en un per (odo de veinticuatrohoras. Holmes y col. (1967) estudiando una marea rojaen aguas del golfo de California encuentra Que en la su-

perficie la concentración de nitrato es de 0.07 ¡.IM/I, a lossiete metros de 0,13 ¡.IM/I, alcanzando a los doce metros

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de profundidad un valor de 7,68 )JM/I.Que la acción de la temperatura es Indirecta y supo-

ne la modificación del ambiente f(sico a condiciones quefavorecen la competencia de los dinoflagelados sobre lasdiatomeas, lo señala el hecho que en las aguas del Golfode California, la intensidad del fenómeno de upwellingdetermina que el florecimiento sea producido por dia-tomeas O dinoflagelados. Si el fenómeno es de suficienteintensidad para llevar nutrientes a la superficie, florecenlas diatomeas, mientras que si no alcanzan la superficie yse enriquecen hasta los 5-10 metros de profundidad, seforma una termoclina muy superficial en la que florecenlos dinoflagelados (Eppley y Harrison, 1975).

3. 2. 2.- la salinidad

Si bien los dinoflagelados son organismos considera-dos como tolerantes a amplios rangos de salinidad (Pra-kash y col. 1971), se ha señalado cierta relación entre lasmareas rojas producidas por Gymnodinium breve, en lacosta de Florida y los aportes de agua dulce y conse-cuente disminución de la salinidad de las aguas (SIobod-kin, 1953). Estudios posteriores (Feinstein, A, 1956;Morton y Burklew, 1969) han hallado sólo relación indi-recta y posiblemente relacionada con los aportes de ma-terial orgánico de dichas aguas continentales.

Prakash, (1967) ha demostrado que los cultivos deGonyaulax tamarensis crecen mejor cuando la salinidadse encuentra entre 15 v 23 0100 y considerablemente máslentos a salinidades mayores. En la Bah(a de Fundy (Ca-nadá) la abundancia estacional de G. tamarensis está biencorrelacionada con la salinidad, aunque el efecto prin-cipal parece estar determinado por el condicionamientode las aguas enriquecidas de compuestos orgánicos-Vita-mina 812, tiamina, biotina, ácidos húmicos, fúlvicos,etc.Prakash y Rashid, 1968; Prakash y col. 1971)- que sonaportados por esas aguas de baja salinidad. Los floreci-mientas de este mismo organismo en el fiordo de Oslo(Noruega) también se encuentran (ntimamente ligadoscon el enriquecimiento orgánico que aportan las aguas dedesecho (Oftebro, 1965) y el aporte terr(geno de los rlOS(Sakshaugycol.1971).

Que el efecto principal de la salinidad está ligado alaporte de sustancias orgánicas, lo refuerza el hecho queen regiones áridas y semiáridas, como en el caso de lascostas de California, los fenómenos de marea roja son unhecho frecuente (Eppley y Harrison, 1975).

Sin embargo no debe descartarse (al menos para G.excavata) la acción directa de la salinidad y la tempera-tura, sobre la velocidad del crecimiento. También debetenerse presente que en ciertos casos, el agua dulce apor-tada por los r(os por su menor densidad, puede producir

frentes h idrográficos de Cánvefgencia en los que se con-centran los dinoflagelados, (Ay ter, 1955).

3. 2. 3.- las sustancias nutritivas y los factores orgáni-cos condicionantes

Genéricamente, los dinoflagelados son consideradosorganismos altamente adaptados a desarrollarse en me-dios con escasas concentraciones de nutrientes, presen-tando en cambio complejos requerimientos orgánicos yelevada sensibilidad a la acción tóxica de diversos meta-les, (Anderson y Morel, 1978).

Su predominio estival en aguas templadas pobres ennutrientes, puede explicarse por sus bajos valores de laconstante de saturación (Ks) para la asimilación de nu-trientes, su capacidad de realizar migraciones verticales(Eppley y Harrison, 1974; Eppley y col.. 1958), y por elcondicionamiento de las aguas producidas por el flore-cimiento previo de diatomeas durante la primavera, (Ri-ce, 1954).

Este predominio sin embargo, se corresponde nor.malmente con pequeños valores de biomasa y queda cla-ro que las elevadas concentraciones celulares observadasen las mareas rojas (hasta 80 x 106 céJ/I; Balech 1977)implican la asimilación de importantes cantidades de ni.trógeno y fósforo.

Otro requerimiento importante para el crecimientode los dinoflagelados en general, y como se ha señalado,de las especies particulares causales de mareas rojas tóxi-cas, es la disponibilidad de vitaminas (vitamina B 12, bio-tina y tiamina) y de diversos factores orgánicos asociadoscon la fracción húmica de la tierra (ácidos húmicos y fúl-vicos) cuya acción estimulante (Prakash y Rashid, 1968;Prakash y col., 1971) está relacionada con su capacidadpara quelar metales, reduciendo de esta forma las con-centraciones de metales tóxicos a niveles no inhibitoriospara el crecimiento de los dinoflagelados (Dale yYentsch, 1978; Anderson y Morel, 1978).

3. 2. 4.- la contaminación de las aguas

El hecho evidente que los fenómenos de mareas ro-jas están aumentando en intensidad y extendiéndose anuevas áreas en las que eran desconocidas (1968 sur deEscocia; 1972 Massachusetts, EE.UU.; 1980 Mar Argen-tino) ha señalado a la contaminación industrial de lasaguas como el factor desencadenan te o amplificador delfenómeno.

ASI el vertimiento de hidrocarburos que acompañóel desastre del buque petrolero "Torre Canyon" (1967),fue precedido por la aparición de intensos florecimientosde dinoflagelados, por lo que dichos sucesos fuero'

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asociados en forma directa (Brusson,1967;Cooper, 1968).Similarmente, los fenómenos de marea roja en la costa .

de Bretaña (Francia) durante 1978 fueron asociadoscon el derrame de petróleo del" Amoco-Cádiz" (Lassusy col. 1980). Esta teor ía ha sido sin embargo desestima-

da por Le Févre (1979). señalando Que además de losflorecimientos de 1967 y 1978, se presentaronfenóme-nos similares en 1975 y 1976. Por otra parte, y para lamarea roja de 1978, el área de desarrollo ,no coincidiócon las áreas contaminadas por hidrocarburos, por elcontrario, este tipo de contaminación parece haber inhi-bido su extensión (Le Févre, 1979 y Lassus y col. 1980).

Otros tipos de contaminación, particularmente la deorigen u rbano, han sido destacados como factores ampli-ficadores del fenómeno de marea roja (Sakshaug y col.1971). ya Que implican el aporte de importantes concen-traciones de nutrientes, vitaminas y sustancias orgánicasQuelantes.

Los antecedentes históricos, y la imposibilidad deaceptar alguna contaminación de las aguas de la Américaprecolombina, nos indicarían Que la acción de la conta-minación sólo puede aceptarse como factor amplificadordel fenómeno.

3. 3.- Las condiciones que favorecen la acumulación deorg81ismos

La mayoría de los florecimientos planctónicos, pre-sentan las etapas de iniciación, crecimiento y desapari-ción o dispersión, pero el estado de acumulación es elcarácter distintivo de las mareas rojas y el responsable delas concentraciones celulares excepcionalmente elevadasQue se alcanzan en estos florecimientos. (Ayther. 1955;Pincemin, 1969).

La existencia de estos mecan ismos ha sido postuladapor un gran número de autores (Ayther, 1955, 1960; Po-merey y col. 1958; Seliger y col. 1970; Taylor y col.1966; Holmes y col. 1967; Loftus y col. 1972) ya Que lacantidad de nitrógeno celular Que corresponde a estaselevadas concentraciones, excede en mucho al nitrógenoex istente inicialmente en toda la columna de agua (Hol-mes y col. 1967; Seliger y col. 1970; Eppley y Harrison,1974).

Esta acumulación excepcional de organismos ha sidoex plicada, por la interacción concertada de dos factoresbásicos: 1) la movilidad de los propios organismos y 2)su interacción con factores físicos tales como vientos,frentes hidrográficos, circulación de Langmuir o mareasinternas (Ayther, 1955; Pingree, 1975; Kamykowski,1974; Wyatt, 1975; Evans y Taylor, 1980).

Como anteriormente se dijo, la mayoría de los orga-nismos causantes de mareas rojas son dinoflagelados ca-

paces de des¡úazarse activamente a través de la columnade agua y como las excepcionesson organismosflotado-res (Trichodesmiun, Noctiluca) la acumulación puede re-sultar del movimiento propio de los organismos, de laacción de los factores físicos nombrados, o de la interac-ción de ambos.

En el caso de los organismos flotadores, la accióndel viento y de las corrientes convergentes, pueden pro-ducir notables acumulaciones de material superficial erun espacio restringido, originado en área de amplitudmucho mayor (I.C.E.S.,1976). Tal parece ser el caso delas notables discoloraciones producidas por Noctiluca.Por este mismo mecanismo otros organismos flotadoresdiferentes de los dinoflagelados, (por ejemplo huevos depeces) también pueden ser acumulados (Le Févrey Grall1970).

El efecto de la circulación de Lagmuir sobre la dis,tribución del fitoplancton, ha sido discutido reciente.mente por Taylor y Evans (1980). Estos movimientosdel agua accionados por el viento, originan compartmientos de convección o celdas de Langmulr. que pue.den describirse como tubos de agua rotatoria con sus ejesalineados exactamente en la dirección del viento y en laQue los tubos adyacentes rotan en direcciones opuestasciclónica y anticiclónica. Su ex istencia fue postulada porLangmuir (1938) y aunque much~s explicaciones han Si-do sugeridas,la teoría de la generación por interferenclasde frentes de ondas (Craik y Leibovich, 1976) ha recibl'do recientemente apoyo experimental (Faller y Capan l.1978 ).

En su estudio de interacción de la circulación deLangmuir con los movimientos propios de los dinoflage-lados migradores y flotadores Taylor y Evans (1980)concluyen Que el proceso de acumulación depende engran medidcrde la posición inicial del organismo y de losdetalles de su movimiento vertical, siendo relativamentemenos importante el movimiento propio del agua.

La acción concentradora de las mareas internas se.semidiurnas ha sido demostrada anal iticamente porKamykowski (1974). En su modelo de interacción conorganismos capaces de realizar migraciones a través de latermoclina u otro gradiente de densidad, la concentra.ción de organismos eselevada, si las aguas por encima 'ydebajo de la discontinuidad se mueven a diferentes velo-cidades. Las predicciones de su modelo guardan estrechaconcordancia con las observaciones sobre la forma y dis-tribución de las manchas de mareas rojas producidas enaguas de California (Eppley y Harrison, 1974).

Pringree y col. (1975-1978) han relacionado laformación de frentes hidrográficos producidos por laacción de las mareas y la abundancia de dinoflageladosen las aguas que rodean las Islas Británicas. Sus estudios

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han señaladG que la intensa marea roja producida en elverano de 1968, se desarrolló en la zona de transiciónentre aguas bien homogeneizadas y bien estratificadas(Robinson, 1968) que caracteriza a esta región duranteel verano.

3. 4.- Las condiciones que favorecen la desaparición odispersión de los organismos

La duración del estado de acumulación de una ma-rea roja, es extremadamente variable desde unos diashasta varios meses, habiéndose señalado una marea rojaproducida por Prorocentrum micons, de tres meses deduración (Rodriguez, 1966).

Numerosos factores y especialmente los menciona-dos como condicionantes del crecimiento y concentra-ción de los organismos, actuando como limitantes, pue-den interrumpir el proceso: consumo de los nutrientes,pérdida de movilidad celular, modificaciones climáticas ehidrológicas adversas, etc. A ellos debemos agregar elcontrol que ejercen los organismos predadores del zoo-plancton como los tintinidos Fovello ehrenbergii (Nee-dler, 1949) Fovellosp. (Praskash y col. 1971) que predanselectivamente sobre Gonyoulox excovoto' e incluso, deotros dinoflagelados predadores tales como Noctilucascintillons, Oxy"his marino y Polykrikos schwortzii(Margalef, 1956, Balech y Ferrando, 1964).

Balech (Balech y Ferrando, 1964) señala ademásque "la terminación de una gran hemotalasia en el sur deCalifornia, fue precedida por la proliferación del dinofla-gelado Fragilidium heterolobum que a pesar de ser foto-sintetizador, resultó un activo y voraz consumidor deGonyoulox polyedro".

1. 4.- LAS TOXINAS

A pesar de la heterogeneidad de las sustancias tóxi-cas producidas por los dinoflagelados, podemos agruparlas mismas en dos grupos de toxinas bien diferenciadaspor sus propiedades flsico-qut'micas y biológicas.

Un grupo lo constituyen las toxinas que recuerdanpor su acción farmacológica a las tox inas producidas porel Gymnodinium breve y que tomamos como tipo porser estas las más estudiadas.

Esta (s) toxina (s) se trata de una endotoxina, solu-ble en agua y en alcohol, insoluble en cloroformo, ter-molábil, ácido resistente y no dializable, que se destruyerápIdamente por oxidación ya pH inferior a siete (Starr,1958; Sasner, 1965; Me. Farren y col. 1965; Schantz ycol. 1966; Ray y. Wilson 1957). La toxina (s) de natura-leza lipidica está compuesta de por lo menos cuatrofracciones (Martln y col. 1970; Trieff y col. 1975) sien-do una de ellas una endotoxina de peso molecular 650,

cuya fórmula empirica es C90 H 162017 P Martin y col.,1970).

Su efecto farmacológicÚ es-el de una neurotoxina,similar a la de Gimnodinium veneficum (Abbott y Ba-lIantine, 1957) que produce una parálisis similar a la delcurare y que no inhibe "in vitro" la actividad colinestera-sa. Estas toxinas ejercen su acción sobre diversos anima-les poiquilotermos, en especial a los peces, ejerciendoefectos secundarios para el hombre a través de la irrita-ción de los bronquios por inhalación de aerosol es mari-nos.

El otro tipo de toxinas, originalmente denominadamytilotoxina por su presencia en mejillones (Mytilusedulis) y saxitoxina por haber sido aislada en la almejagigante de Alaska (Soxidomus giganteus), corresponde alti po más peligroso, ya que se trata de uno de los venenosmás poderosos que se conocen y se las ha agrupado des-de 1937, con el nombre genérico de veneno paral izantede moluscos (Porolytic Shelfish Poison o PSP).

La mayor parte de nuestro conocimiento actual so-bre la estructura quimica de estas toxinas, ha sido apor.tado por los trabajos del Dr. E. J. Schantz y sus colegasde los laboratorios biológicos de la Armada de losEE.UU. En 1957 (Schantz y col., 1957) aislan de la al-meja gigante de Alaska (Soxidomus giganteus), una toxi-na idéntica en sus propiedades a la aislada del mejillón deCalifornia, que identifican como un derivado de la puri.na, denominada con el nombre de saxitoxina. Burke ycol. (1960) demuestran la gran similitud existente entreambas y la producida por cultivos de Gonyoulox cotene-110, la que es aislada y purificada de cultivos axénicos porSchantz y col. (1966).

Esta toxina, es una base nitrogenada, cuyo diclorhi-drato es un sól ido higroscópico blanco, altamente solu-ble en agua y en menor extensión en alcohol aunque in-soluble en solventes no polares. La toxina es estable alcalor y en soluciones ácidas, pero se descompone en so-luciones alcalinas. Es dializable y no precipita por losreactivos comunes de los alcaloides. El peso moleculardel diclorohidrato es de 372, siendo su fórmula empt'ricaC1O H 17 N7 04 2 HC\. La toxina pierde su toxicidadpor reducción catal (tica o la acción de un oxidante enér-gico como el hipoclorito de sodio. Por su naturalezacompleja, recién en 1975 fue totalmente determinada suestructura qu ¡'mica y estereoisomer (a (Bordner y col.,1975; Schantz y col. 1975) la que se representa en la Fig.No.2.

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o

1 ) R1 = - Oe N H2 i R1= - HR.

~, H

hN

>HN +

/! ¡ N H2

H21'1~N~N+

1H

O/'"H

~,/ OH\

R¡,

Saxitoxlna.,.....

o

1) R1 = - ot NH2 i R2 = o<,-OH Gonyautoxina :1

'"'.....

3)R1 = -OCNH2. R2=.a-OH GonY'JutoxinaI

1'"l... ..

FIGURA No. 2.- Fórmula estructural de la saxitoxina y toxinas relacionadas..

La toxina es un poderoso veneno muscular (cincuen-ta veces másactivo y cien veces más potente que la estric-nina), Que bloquea el sistema nervioso central (centrorespiratorio y vasomotor) y el sistema nervioso periférico(unión neuromuscular. terminaciones cutáneas, táctiles,ete.) que produce una depresión respiratoria que puedellevar a la muerte por anoxia así como por depresión delmiocardio al colapso cardiovascular. El bloqueo de latransmisión neuromuscular se atribuye a una interferen-cia específica con el incremento de la permeabilidad dellón sodio, normalmente asociado con la excitación. Latoxina bloquea en forma selectiva el influjo positivo deNa + a través de las membranas excitables produciendoparálisis (Evans. 1965; Narahashi. 1972; Narahashi y col.19751-

Los estudios realizados en el aislamiento y purifica-ción de la toxina producida por Gonyau/ax tomarensis.indicaron que aunque su acción biológica es similar a lade la saxitoxlna aislada en Gonyou/QxcotenellG.sus pro-Piedades QUímicas v físicas eran algo diferentes (Schantl,1970). Su hetomgeneidad fue sospechada al aislarse másde un producto tóx ICO,en extractos de mejillones (Evans.1970) tóxicos luego de una marea roja producida por G.

["moren!.;!..

L~$ estudios realizados en cultivos de esteorganis.9i[' ($.~ 'A:?U V coi. 1975. 1976) han demostrado Que

además de la saxitoxina, presente en escasa proporcJónrelativa, produce tres toxinas de estructura similar a la

saxitoxina. denominadas GonyautoxilltlS 1,11,111. En tra-

bajos posteriores (Oshima y col. 1977. Boyer Vcol. 1978),

se aislan tres nuevas toxinas. denominadas Gonyautoxi-

nos IV y V Y neasoxitoxino, cuyas estructuras son simi¡a-

a las anteriores.

Las mismas toxinas han sido aisladas en diversos mo.luStos bivalvos. luego de mareas rojas causadas por Gorr-yaulQX tDmarensis (Ghazarossiam V col. 1974; Shimizu y

col. 1975; Buckley V col. 1916; Oshima V col. 1977; Hsuy col. 1979), pero en proporciones diferentes entre si y

con las obtenidas en cultivos (Qshima y col. 1977; Hsu V

col. 1979), Por es1l razón se ha sugerido cierta biotrans.formación de lis toxinas por los moluscos (Shimizu V

col. 1977; White V Uaranda. 1978)queexplicaríaade-más la pramcia en~os de otrastoxinasde es.tructura simitar (GhazlfOSSiamy col. 1976: Hsu Vcol.1979).

Es interesante mencionar que la I3Itidad de toxinaspor cdlula de Gon)lWNlloxlWIIncftnsis o G. exctMll.ll en cul.

tivos, varia con la edad del mismo (Prakash y col. 1971.WhiteV Maranda, 1978) y que diferentesclonespresen.tan marcadas diferencias en SUSmáximos contenidos ce-

lulares, fluctuando los mismos entre 1, 2 - 4. 5 x 10-5

u9r equivatentesdesaxitoxina por célula (Whitey llaran-

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da, 1978).Otro aspecto digno de mención es que mientras to-

dos los estudios realizados con G. cotenello en cultivosdemuestran la producción de una única toxina, la saxito-x ina, (8uckley y col. 1976; Proctor y col. 1975; Schantzy col. 1975) una especie tóxica de japón indentificada

como G. cotenello (Hashimoto y col. 1976) produce lasmismas tox inas que el Gonyoulox tomorensis: saxitox ina,neosaxitoxina y Gonayutoxinas 1, 11, 111, IV y V (Oshi-ma y col. 1976; Onoue y col. 1980).

Recientemente, Yasumoto y col. (1978) han señala-do la ocurrencia en Japón de un nuevo tipo de envenena-miento por consumo de moluscos bivalvos, cuyos sínto-mas en humanos son los desórdenes gastrointestinales,.especialmente diarreas. El organismo productor de estatoxina, salubre en éter, ha sido identificado como Dino-physis forti! (Yasumoto y col. 1980), siendo la primerespecie de este género mencionada como tóxica, aunqueestos sín tomas, fueron asociados en Ch ile (Avaria, 1979)con una marea roja producida por Dinophysis sp.

Además de las toxinas producidas por dinoflagela-dos planctónicos, ciertas especies bentónicas han sido se-ñaladas como responsables de intoxicaciones en huma-nos por consumo de peces de áreas tropicales del Pacífi.ea y del Caribe (Yasumoto y col. 1979) que se conocencon el nombre de ciguatera (Halstead, 1965),

Recientemente, Yasumoto y col (1980) han aisladodel dinoflagelado bentónico Prorocentrum limo, dos to-x inas muy semejantes a las aisladas en peces tropicaJesproductores de ciguatera: scaritox ina y ciguatox ina, se-ñalando que la especie Gombierdiscus toxicus, anterior-mente señalada como productora.de toxinas (Yasumotoy col. 1979 a) en cultivos no lo hacen (Yasumoto y col.

1979 b).

1. 5.- LOS METODOS DE CUANTIFICACIONDE TOXINAS

Existen métodos de determinación de toxinas enmoluscos bivalvos, algunos de ellos de aplicación especí-fica para un determinado tipo de toxina, por ejemplo elensayo de hemol isinas para las toxinas del Gymnodinlumbreve o Prymesiun porvum (Yasumoto y col. 1980) porlo que la discusión se reducirá a los métodos aplicables ala determinación del veneno paralizante de moluscos(P.S.P.).

5. 1.- Método biol6gico

Este método, utilizado por primera vez por Sommery Meyer (1937), consiste en: 1) Extracción de la tox ina(s) en solución acuosa acidificada en la que es estable,

2) Inoculación' de 1 mi del extracto a ratones de carac-

terísticas genéticas y fisiológicas predeterminadas, 3) Me-dición del tiempo de muerte de los mismos y 4) Adop-ción de una unidad ratón (MU), que se define como "lacantidad de toxina contenida en 1 ml de solución acuo-sa (pH 3-4) que, inyectada intraperitonealmente a unratón blanco de 20 gr. de peso, le causa la muerte en 15minutos.

Se ha establecido una correlación entre los tiemposde muerte y las unidades ratón correspondientes, siendoel logaritmo de la dosis una función lineal de la inversadel tiempo de muerte, valores estos que se encuentra ta-bulados. Si el tiempo de muerte se encuentra entre 240-480 segundos, la dosis puede calcularse directamente dela sigu iente ecuación:

Lag. dosis - (145/t) -0.2, siendo t el tiempode muerte en segundos.

Si el extracto de moluscos, contiene elevadas con-centraciones de toxinas, debe diluirse con agua destiladaacidificada, de forma que el tiempo de muerte seencuen-tre entre 5 y 7 minutos, considerándose en los cálculos elfactor de dilución.

La .cantidad de toxina equivalente a una unidad ra-tón, puede calcularse si se cuenta con un estandar'de to-x ina purificada. El mismo es dependiente de los detallesde la técnica o de la cepa de ratón util izada, habiéndoseestablecido para dos cepas diferentes, valores de 0.16 j.1grde saxitoxina/unidad ratón y de 0.22 j.1gr de saxitoxinaiunidad ratón (Prakash y col. 1971), respectivamente.

La técnica original (Sommer y Meyer, 1937), ha si-do mejorada por un gran número de autores, siendo es-tanda rizada por varios laboratorios de Canadá y EE.UU.,

Y publicada como método oficial de la Association ofOfficial Analytical Chemists (1975).

Además de su laboriosidad y los problemas deriva-dos del mantenimiento de una colonia de ratones, el mé-todo es inespecifico, poco sensible y preciso, pero irrem.plazable para la dosificación de las toxinas producidaspor las especies tóx icas del" Grupo tamarensis".

La precisión del método ha sido estimada en =20 010(Schantz, 1960) pero a bajas concentraciones de toxinaproduce estimaciones en menos, del orden del 50 010.

La escasa precisión ( :!: 200/0) se explica por la res-puesta diferencial de los individuos, por errores cometi.dos en la inoculación intraperitoneal y aún por la varia-ción diurna de la sensibilidad del ratón (Prakash y col.1971 ).

El limite de sensibilidad ha sido establecido en alre-dedor de 30 ¡,¡gr de saxitoxina por 100 gr. de moluscos

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bivalvos (Schantz y col. 1958),siendo este valor cercanoal límite fijado en las normas de consumo (80 ~gr de sa-xitoxina por 100 gr.) Que en la práctica no se alcanza,debido a la presencia de iones sodio en los extractos sindiluir.

5. 2.- Métodos serológicos

Johnson y Mulberry (1966), han preparado un antí-geno de las toxinas de los moluscos, Que presentan pro-piedades hapténicas y produce la aglutinación pasiva yprotección de los ratones con el antisuero.producido. Es-te antígeno pudo ser fijado en glóbulos rojos y usado enensayos de hemaglutinación. Este ensayo es más sensibleQue el bioensayo, pero la preparación de las células sart~--gu íneas es muy inestable. La adsorción del antígeno enpartículas de OOntonita, es mucho más estable, pero susensibilidad se encuentra muy disminu ída, (Prakash y col.1971).

5. 3.- Métodos químicos

Mc. Farren y col., (1958) han desarrollado un méto-do Químico para la estimación cuantitativa del PSP, basa-do en al adsorción selectiva de la toxina presente en elextracto ácido, por una resina de intercambio iónico. La .

toxina, es luego eluída y determinada colorimétricamen-te por formación de un complejo con el ion picrato enmedio alcalino. El método, posteriormente mejorado escomplejo y muy laborioso, no es específico y presentauna sensibilidad menor Que la del bioensayo. El métododesarrollado por Neve (1972) en el cual la saxitoxina esacoplada con 1-fluoro-2-4-dinitro benceno parce po-seer las mismas desventajas (Bates y Rapoport, 1975).

Bates y Rapoport, (1975) han desarrollado un méto-do fluorométrico altamente espedfico para la saxitoxi-na, basado en su oxidación con peróxido de hidrógenoen medio alcalino y medición de la fluorescencia a pH= 5,del producto formado: 8-amino-6-hidroximetil-2-iminopurina-3 (2H) ácido propiónico. La técnica es cienveces más sensible Que el bioensayo y su precisión de al-rededor de .:!: 5 %. La técnica puede ser utilizada enuna versión abreviada, Que elimina el proceso de adsor-ción en columnas de intercambio iónico, con lo Que elblanco de reactivos sólo se incrementa en un 50 % (Ba-tes y Rapoport, 1975).

Greshey y col. (1977). han desarrollado un métodocolorimétrico basado en la oxidación de la saxitoxinacon peróxido de hidrógeno en medio ácido y posteriorreacción del producto formado (grupos guanidino) conla 2-3 butanodiona. El método requiere como los ante-riores un paso previo de "cleanup" por adsorción en co-

lumnas de intercambio iónico. La sensibilidad del méto-do es similar a la del bioensayo, pero es poco específico(interferencias de arginina, derivados no tóxicos de saxi-toxina, gonyautoxinas) e incapaz de determinar la toxi-cidad total en moluscos contaminados con las toxinas deG. exc(]II(Jto, ya Que estas presentan diferentes comporta-mientos cromatográficos Que la saxitoxina (Shimizu ycoL 1975).

Los métodos comentados, incluyendo el más promi-sorio de Bates y Rapoport (1975). son incapaces de de-tectar la toxicidad total de las diferentes toxinas produ-cidas por G. excOIIoto, ya Que las mismas tienen un com-portamiento cromatográfico diferente entre sí y con lasaxitoxina (Buckley y col. 1976; Oshima y col. 1977;Shimizu y col. 1975; Hsu y col. 1979).

La apl icación de un sistema de separación cromato-gráfico en capa fina (Buckey y col. 1976) o en columnade elución diferencial y la consiguiente determinación defluorescencia de las diversas fracciones permitiría la de-terminación de las concentraciones de las diversas toxi-nas. Sin embargo, tanto la gonyautoxina I como la neo-saxitoxina, no dan respuesta fluorométrica, aunque pre-sentan una toxicidad específica comparable con la saxi-toxina, (Hsu y col. 1979).

Por estas dificultades, por el costo del equipo nece-sario para realizar esta técnica, por ~I consumo de tiem-po Que implica, el método del bioensayo sigue siendo elmás aconsejable, especialmente para las intoxicacionesprodu!:idas por las especies tóxicas del "Grupo Tamaren-sis".

Cualquiera sea el método aplicado, es necesario te-ner en consideración, la eficiencia de los métodos de ex-tracción de toxina, ya Que recientemente I kawa y col.(1980) han señalado Que la extracción repetitiva de PSPcon metanol ácido, seguida de la extracción en calientecon HCI 0,05N, produce valores de toxicidad 2-3 vecesmayores Que los obtenidos con el método standard(AOAC, 1975).

Otro aspecto digno de discutir es el relacionado conel muestreo y conservación de la muestra del extractoácido, ya Que como ha señalado Prakash y col. (1971) lametodología oficial (AOAC) no considera el hecho Queen la práctica, la toxicidad de las muestras de moluscos bí-valvos cambia luego de la recolección (Medcof y col.1947). Prakash y col. (1971) indican Que es común unincremento de toxicidad del orden del 100 0/0 por alma-cenamiento de la muestra durante tres días a la tempera-tura del laboratorio y aún a temperaturas de -15 a-20. C. Un incremento similar se presenta cuando estosmoluscos vivos son colocados en acuarios de agua fluyen-

" te o trasportados a áreas naturales no contaminadas.Resulta evidente Que en todo programa de control, esne-

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cesario estandarizar el método de manipuleo de las mues-tras, desde el momento de la recolección hasta la extrac-ción. Los extractos ácidos de toxinas de G. tomorensis en

cambio, son estables por largos períodos de tiempo, y sualmacenamiento durante un año a -200 C no altera supotencia.

1. 6.- SINTOMATOLOGIA DE LA INTOXICACION

La mayor(a de las enfermedades derivadas de la in-gestión de moluscos bivalvos, tiene su or (gen en reaccio-nes de tipo alérgico o en infecciones (bacterianas o vira-les) del sistema digestivo. Las primeras no están relacio-nadas con la salubridad del molusco, mientras que las se-gundas son causadas por la contaminación de moluscospor afluentes cloacales.

La intox icación por "veneno paral izante de molus-cos", P. S. P. (efecto producido por la marea roja) no esuna alergia o una infección y es causada por un potenteveneno que ocasionalmente pueden contener los molus-cos bivalvos y que es sintetizado por unas pocas especiesde algas planctónicas.

La sintomatolog(a de la intoxicación con "venenoparalizante de moluscos", puede distinguirse fácilmentede los otros tipos de enfermedades inducidas por la in-gestión de moluscos, ya que los s(ntomas aparecen pocodespués de la ingesta (alrededor de media hora). CI(ni-camente los s(ntomas son de tipo nervioso: parestesias,inestabilidad, adinamia, trastornos en la pronunciación,disfagia, pudiendo llegar en casos más graves a producirla muerte por parálisis respiratoria.

Esta sintomatolog(a ha sido resumida por Halstead(1965) de la siguiente manera: "La enfermedad se carac-teriza por presentar s(ntomas patognomónicos. En unprincipio se presentan cosquilleos o sensación de quema-zón en los labios, enc(as, lengua y cara, con progresióngradual al cuello, brazos, punta de los dedos, piernas ypies. Después de la parestesia, aparece obnubilación, difi-cultándose los movimientos voluntarios. En los casos gra-ves, la ataxia y la incoordinación motora generalizadas,se acompañan, en la mayor.{a de los casos, por una pecu-liar sensación de liviandad "como si se flotara en el aire".

"En los casos más severos aparece sensación cons-trictiva en la garganta, dificultad en el lenguaje y y afo-n(a. También puede presentarse, debilidad, vértigo, ma-lestar, postración, cefaleas, incremento de la secreciónsalival, taquicardia, intensa sed, disfagia, transpiración.anuria y mialgias".

"Los s(ntomas gastrointestinales tales como náuseas,vómitos, diarreas y dolor abdominal son menos comunes.Los reflejos casI nunca están afectados. Los cambios pu-pilares son variables y puede presentarse dificultad en la

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visión y aún ceguera transitoria. Los s(ntomas mentalesson variables, pero la mayor (a de los enfermos estántranquilos y conscientes de su condición a lo largo de la

enfermedad".El grado de la intoxicación, puede ser clasificado

como: leve, moderado o grave, correspondiendo a cadauno de ellos los siguientes s(ntomas (Prakash y col.,1971 ):

LEV

Sensación de hormigueo y a-dormecimiento peribucal quese extiende progresivamentea cara y cuello. Hormigueoen la punta de los dedos Ce-falea, vértigo y náuseas.

GRAVE

Alteraciones en la pronunciación.Extensión del hormigueo a brazos ypiernas.Rigidez muscular e incoordinación delos miembros.Debilidad general y sensación de flotaren el aire.ligera debilidad respiratoria.Taquicardia.

Parálisis muscular, severa dificultad respiratoria.Sensación de ahogo y opresión.

MODERAD

1. 7.- TRATAMIENTO Y PREVENCION

Aunque- han sido ensayadas muchas sustancias, alpresente no se conoce ningún ant(doto para estas intox j-caciones, Mientras no se descubra un ant(doto, la mejorprotección contra el P. S. P. es la educación públ ica,acerca de las áreas en que pueden presentarse moluscosbivalvos tóxicos, en que épocas del año, que especies yque parte del cuerpo del molusco es peligrosa y final-mente cual es el efecto de la cocción sobre el nivel de to-xicidad (Prakash y col. 1971).

Halstead (1965). indica que el tratamiento reco-mendado es básicamente sintomático: "EI veneno notiene antídoto. La apomorfina es más efectiva que el la-vado gástrico para la eliminación de los trozos de molus-cos tóxicos del contenido estomacal. Como el veneno seadsorbe rápidamente por el carbón activado, puedeemplearse el reactivo de Lloyd o adsorbentes similares.También son valiosos los fluídos alcalinos, ya que la to-xina es inestable en medio alcalino. La diuresis puedeprovocarse por la administración de una solución de clo-ruro de amonio al 5 %".

"La respiración artificial es de suma importancia ydebe ponerse en práctica a la menor evidenciadB dificul-tad respiratoria. Esta técnica ha sido uti Iizada experi-mentalmente con muy buenos resultados y se la reco-mienda. Puede presentarse un shock primario que requie-re atención".

"La terapéutica con drogas tiene diversos grados de

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éxito, los anticurarizantes tales como la neostigmina, sonútiles cuando su administración se acompaña con respira-ción artificial. La DL- anfetamina, la efedrina y elDMPP (1, 1-ioduro de dimetil-4-fenil-piperazonio)también se recomienda".

"Se ha recomendado también el uso de ox imas talestomo la lodometilato de 2-piridincarboxialdoxima, paracontrarrestar el efecto inhibitorio del tipo acetilcolines-terasa. No se recomiendan los digitálicos y el alcohol".

Después de cinco minutos de la masticación de meji-lIones altamente tóx icos, aparecen las sensaciones labia-les descriptas por todos los pacientes. Por esta razón, laprimera acción debe estar dirigida a detener la rápidaabsorción del veneno, vaciando el estómago lo más rápi-damente posible. Elsistema digestivo parece no absorbertodo el veneno que entra en él, pues una misma dosis esmás activa por v(a intraperitoneal que por v(a entérica.

Los pacientes no deben recibir ningún tratamientoQue incremente la absorción del tóxico por el aparato di.gestivo. Por ejemplo NO DEBE DARSE ALCOHOL pueséste solubiliza la toxina y acelera su absorción. (prakashy col. 1971).

11." LAS INVESTIGACIONES REALIZADAS EN ElMAR ARGENTINO

11. 1.- ~L DESARROLLO DE LASINVESTIGACIONES

Dos fueron los episodios detectados en el Mar Ar-gentino duran~e el año 1980, presentando ambos carac-terísticas netamlmte diferenciales por su orígen, intensi-dad y consecuencias.

Las investigaciOnes se inician como consecuencia delterrible episodio Que costara la vida a dos pescadores delBuque "Constlnza", al ingerir mejillones capturados enaguas de la pl8taforma, frente a la Península de Val des(21-11-80). Este hecho, ttasciende rápidamente a la opi-nión pública, siendo diversas las versiones que pretendeninterpretar la causa deestos decesos.

El Oro Enrique Balech (23-11-80) en comunicaciónpersonal y luego en declaraciones period ísticas, informaque la sintomatolog(a de las intoxicaciones y las declara-ciones efectuadas por los compañeros de los fallecidos,-entre ellos uno que habiendo ingerido sólo dos ejempla-res sufrió trastornos graves- indican la sospecha que elenvenenamiento fue causado por la presencia de una po-tente toxina presente en los mejillones, la saxitoxina,producida por unas especies tóxicas de dinoflageladosdel género Gonyaulax y la posible existencia de un fenó-meno de "Marea Roja" tóxica.

Los informes producidos por el Instituto Nacional

de Microbiologia (27-11-80) "Dr. Carlos A. Malbránpor el Laboratorio Regional de SELAB (SENASA)(1-12-80) y por la Dra. Adela Carias del Museo Argenti-

. no de Ciencias Naturales "Bernardino Rivadavia", des-cartan la presencia de toxinas bacterianas y señalan queen los mejillones de la misma partida de los que fueroningeridos por los mencionados pescadores se encuentranelevadas concentraciones de una tox ina que se sospechapertenece al grupo de las denominadas "veneno paral i-zante de moluscos" (P.S.P.).

Entretanto, la pericia tóxico química efectuada enlas visceras de los pescadores fallecidos, indican la ausen-cia de venenos voláticos tóxicos orgánicos, medicamen-tos o alcaloides normalmente buscados en estos casos.

Con estos resultados previos, se alerta a otros Insti-tutos de Investigación del Area (Centro Nacional Patagó-nico, Instituto "Almirante Storni", Instituto Argentinode Oceanografía) con el objeto de determinar la existen-cia de toxicidad en otros bancos de moluscos bivalvos.Las primeras comunicaciones nos informan que las expe-riencias urgentes y directas realizadas con gatos y pollosseñalan la presencia de toxicidad en diversos bancos demoluscos de los Golfos San Matías, San José y casi en el1ímite de detección, en el Golfo Nuevo, estando ausenteal sur del mismo, as! como en los bancos de Necochea yde Mar del Plata.

Ante la extensión y peligrosidad del fenómeno desa-tado, el Instituto Nacional de Investigación y DesarrolloPesquero, en su carácter de Organismo Rector en el ma-nejo de los Recursos Naturales del Mar Argentino, decre-ta la veda total para la explotación, comercialización yconsumo de moluscos bivalvos en la zona comprendidaentre Carmen de Pataganes y la ciudad de Rawson, asu-miendo la dirección de la investigación del fenómeno.

Al mismo tiempo, se estudian los contenidos esto-macales de los meji lIones del buque "Constanza" y de

los colectados en los numerosos bancos muestreados.Una enorme cantidad de muestras se movil izan desde dis-tintas regiones y localidades hasta eIINIDEP, donde seestudian y remiten al Dr. Balech para su confirmación,de destacado especial ista mundial en la taxonom ía dedinoflagelados.

El día 2 de diciembre, se recibe un mensaje de laPrefectura Naval, avistando la "presencia de animalesmuertos, cachalotes, peces y muchos pinguinos" eninmediaciones de península de Valdés (43°00 S,63°35W)'

Mientras diversas Instituciones, venciendo serias difi-cultades, en forma acelerada y eficiente, trabajan en lapuesta a punto del método bi ológico para la cuantifica-ción de las toxinas por inoculación a ratones (A.O.A.C..1975), ellNIDEP envl'a al BIP "Dr. Holmberg" a la zonaafectada para investigar la existencia del fenómeno de

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"Marea ROja", su intensidad, extensión y el grado de to-xicidad de las poblaciones de moluscos del área, inaccesi-bles desde la costa. Se confirma de esta manera el eleva-

do grado de toxicidad en el ahora denominado banco"Constanza" y la ex istencia de concentraciones elevadasde un dinoflagelado del género Gonyaulax conocido co-mo extremadamente tóxico.

Decretada la veda, las poblaciones de moluscos afec-tados por la presencia de toxinas (mejillón, cholga, viey-ra, ostra, etc.) son monitoreados en forma periódica,estableciéndose los niveles de toxicidad y el grado de de-toxificación de las diferentes especies de los distintosbancos afectados. En la primera Reunión Interinstitu-cional de Evaluación, realizada en ellNIDEP (16-12-80)se establece el I(mite de toxidad compatible con el con-sumo humano, fijándose el mismo en 300 UR/100 gr. decarne de moluscos (aprox. 60 jJgr. de equivalentes de sa-x itoxinal1 00 gr. de carne), que siendo algo menor quelos valores internacionales aceptados (80 jJgr. de equiva-lentes de saxitoxinal1 00 gr - de carne), tiene en cuentalos hábitos de la población argentina.

Sobre esta base, la veda generalizada fue levantadaen forma selectiva, de acuerdo a la evolución de toxici-dad para cada especie de las distintas áreas afectadascontrolándose el fenómeno sin que se presentara ningúnotro caso de intoxicación por consumo de moluscos. Lapresencia en el plancton de formas equistadas, aSI comola anormal detoxificación de los mejillones del banco"Constanza" entre los meses de enero y febrero, hicieronsospechar la ingestión de quistes por dichos moluscos yen consecuencia el mantenimiento de valores de toxinapor encima del nivel permitido. Por esta razón la zona, semantiene en veda permanente y se continúan los estu-dios de detoxificación.

Al tiempo que se realizan estos controles, un nuevofenómeno natural, se presenta en las cercan las de Mardel Plata.

En la mañana del 26 de diciembre, la Prefectura Na-val de Mar del Plata, nos informa haber recibido de losbuques de bandera Argentina "Medanitos" y "Punta Mé-dan os" la denuncia que, e~ la proximidades de Mar delPlata y entre Miramar y Necochea, se detectan en la su-perficie del agua, manchas de intensa coloración naranjarojiza. De manera más precisa la posición de las manchasse sitúa a las 11 hs. de la mañana en 38036' S y 57 W, ya las 12,30 hs. en 380 17' S Y 57 25' W.

En forma inmediata, el personal cientlfico y técnicodellNIDEP se traslada al área mancionada en la embar-cación de la Prefectura Naval de Mar del Plata, "Mar delPlata", al tiempo que se procede al traslado de las mues-tras tomadas por el "Medanito", que detiene su tránsitoa este fin. Mientras un grupo de cient(ficos y un fotógra-

fo recorren la zona tomando muestras, evaluando su ex-tensión y documentando el aspecto de la superficie delmar, las muestras del "Medanito" son analizadas. Su as-pecto es semejante al de una "sopa de tomate", no sólopor el color naranja-rojizo sino por su elevada densidady hasta por su t(pico olor.

Se analizan las muestras de plancton y no se obser-van formas tóxicas, siendo enorme la concentración deldinoflagelado Noctiluca scintillans. Se realizan tambiénlos ensayos de toxicidad, en este caso con extractos delas muestras de plancton y se inyectan pollos y ratones.Esa tarde, de "motus propio" se presentan los pescado-res de la zona (pesca costera) con muestras de su captu-ra, a los fines de analizar lo pescado y asegurarse de suinocuidad, antes de ser enviado a la venta, lo que fue ase-gurado.

Mientras se aguardaban estos resultados, se env(a alDr. Balech una muestra de plancton, para que confirmeen su calidad de destacado especialista, la ausencia deformas tóxicas. Su informe, elaborado el mismo dt'a diceas¡': "La muestra remitida es casi pura Noctilucascinti-

lIans. La mayor parte de ella tiene muy poca cosa ingeri-da y tampoco hay fuera de ellas nada que valga la penaseñalar. Los únicos elementos que he encontrado son po-qu (simos dinoflagelados tecados, alguna ScrippsiellaunProtoperidinium semidestruido (quizá P. vulgore) algunasdiatomeas: Coscinodiscuslineatus,Coscinodiscussp. al.gunos Pleurosigma muy raros Actinophtychus, Parelia(todas en baj(simo número). Hay cierta cantidad de untintinido: Tintinnopsis compressa",

Transcurridas más de doce horas de la ino~ulación,se tuvo la confirmación de la inexistencia de toxina enlas muestras de plancton. Con estos resultados y dadoque, los órganos de difusión emitian trascendidos, elINIDEP, procedió a dar un comunicado oficial, el día sá-bado 27 a las 14,30 hs., cuya conclusión mayor era quela "marea roja" detectada carec(a de elementos tóxicos-

La investigación sin embargo no se detuvo, y el lu-nes 29, con la colaboración de la Base Aerea Mar del Pla-ta, se realizó un vuelo de reconocimiento, localizándoseuna intensa mancha tipo filiforme, que fue fotografiada.La misma se extend(a desde la ciudad de Miramar hastaNecochea, estando alejada entre 15 y 20 millas de la cos-ta estimándose su extensión haria el este en por los me-nos 50 millas.

Los análisis de toxicidad de los mejillones en losbancos de Mar del PLata y Necochea, en coincidenciacon lo esperado dieron resultados negativos.

El d(a 30, la Prefectura Naval de Mar del Plata, nosinforma que el buque "Petromar Mendoza", ha avistadoen su ruta de navegación una intensa coloración en la su-perficie del mar, a aproximadamente 87 millas al Noroes-

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te del Faro 2da. Barranca, cerca de Carmen de Patagonesy dando posición para la hora 10,30: 40' 29' S y 60°21' W.

El mismo buque informa la imposibilidad de tomarmuestras y la describe como un conjunto filiforme de co-lor naranja rojizo, alineado en la dirección del viento,dando una estimación de su extensión (8 millas cuadra-das).

El día 2 de enero, se recibe un informe del Serviciode Hidrografía Naval, retrasmitiendo la información delbuque "Ingeniero Huergo" Que en la posición 43°06,2' SY 63° 30, 8' W, a veinte millas al sur de Punta Delgada,lasuperficie del mar presenta en una extensión de 10 millascuadradas, intensa coloración rojiza. El día 10 de enero,otro informe proveniente del buque "Golondrina delMar" nos hace saber la presencia de agua coloreada en laposición 36°55' S y 56°40' W.

Ante esta situación, ellNIDEP env(a al BIP "Capi-tán Cánepa", para realizar un reconocimiento de la plata-forma desde Mar del Plata hasta la Pen(nsula de Valdés,donde a su vez se muestrean los mejillones del banco"Constanza" para controlar la evolución de su toxicidad.Como resultado de la misma, y con la colaboración deotros bUQues en atenta escucha, se pudo localizar la zonade intensa coloración, delimitándose su extensión, y enla Que pod ía reconocerse zonas de mayor densidad en.forma de franjas o vetas, separadas de otras de menor in-tensidad, apreciándose en los bordes un blanqueo de lacoloración y una tendencia a disgregarse y hundirse. Laobservación microscópica a bordo, como en las diversasmuestras Que fueron obtenidas, mostró el predominiocasi exclusivo de Noctiluca scintillans.

En la Figura ~ 3 se presenta a modo de resumen, laposición de las diversas manchas observadas.

11.2.- RESULTADOS OBTENIDOS

2. 1.- La marea roja no tbxica:

Este fenómeno de Marea Roja, fue producido poruno de lbs agentes causal es de discoloración del agua máscomunes, el dinoflagelado predador Noctiluca scintillans.Es conocido Que este organismo no produce toxinas, loQue comprobamos experimentalmente, y por lo Que elfenómeno se desarrolló sin la peligrosidad Que acompañóal florecimiento de G. excavata.

Tampoco se produjeron señales de mortandad defauna marina por anoxia Hsica o Química, ya Que la con-centración del mismo, si bien muy elevada en la superfi-cie, estaba restringida a los primeros cinco metros de lacolumna de agua y como se dijo, en bandas paralelas a ladirección del viento predominante (Noroeste), Que noalcanzaron a interesar las zonas más costeras de baja pro.

fundidad. Según nos relataron los pescadores, la capturade caballa era muy abundante en este mar teñido de rojoy nunca observaron mortalidad de fauna marina.

El fenómeno tuvo lugar en un área de gran exten-sión ya Que fue observado desde aproximadamente los36° S hasta los 43° S, aunque de manera discont(nua, enmanchas bastante bien delimitadas y de escasas dimen-siones relativas, presentando, su máximo desarrollo en elárea comprendida entre las ciudades de Mar del Plata yNecochea.

Este fenómeno de "Marea Roja" no tóxica no esnuevo en el Mar Argentino, siendo el primer antecedentela observación de 009110 Jurado, Que mencionó el aspec.to lechoso del agua producido por Noctiluca. Deacuerdocon Balech (1977), el fenómeno en el Mar Argentinoaparece muy raras veces y nunca en la forma espectacu-lar en Que lo hizo esteaño. En el mes de marzo de 1979,aunque pasó desapercibido por la prensa y la poblaciónen general, el fenómeno se presentó con bastante nitidezen las a~as costeras de Mar del Plata, pudiendo obser.varse desde la costa grandes franjas de color naranja-ma-rrón Que cubria el horizonte. El muestreo realizado conuna lancha pesQuera permitió identificar a Noctilucascinti/Jans como agente causal de la discoloración (Carre-to y Negri, resultados sin publ icar), la Que de acuerdo concon los pescadores abarcaba un área muy extensa.

Es muy poco lo Que puede adelantase, acerca delorigen de estas discoloraciones, producidas por un orga-n ismo herb ívoro como Noctiluca scinti/lans, ya Que pare-cería necesario como elemento previo al mismo, un flo.recimiento algal de grandes proporciones con el cual ali-mentarse. Sin embargo, nunca se han mencionado ma-reas rojas de algas y protozoos en forma conjunta. (Wyatt,1975).

Por su naturaleza de organismo flotador, puedeaceptarse Que las elevadas concentraciones superficialesobservadas, fueron consecuencia de la acción de factoresmeteorológicos sobre la circulación superficial del agua.La acción del viento y las corrientes convergentes (circu-lación de Langmuir, frentes oceánicos, olas internas)pueden haber producido la acumulación de organismosen áreas restringidas, produciendo el fenómeno de "Ma-reaRoja" (Ryther, 1955; La Fevre y Gral!, 1970; Kamy-kowsky, 1974; Pingree y col. 1975; Taylor y Evans,1980).

2. 2.- La Marea Roja tóxica

2. 2. 1.- El organismo responsable de la producción

de toxinas

Los estudios de los contenidos estomacales de los

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mejillones del buque "Constanza" y de diversos molus-cas colectados en el área afectada por el fenómeno detoxicidad resultaron infructuosos para identificar elagente productor de la toxina. En los mismos sólo pudoobservarse, además de algunas diatomeas, ciliados y res-tos de copépodos, el predominio del dinoflagelado Pro-rocentrum micans. Aunque ha sido citado ocasionalmen-te como agente sospechoso de la producción de brotesde intoxicaciones con veneno paralizante de moluscos,en Portugal y España (López Capont, 1978), fue descar-tado como tal, ya que su presencia era común en los me-¡illones con alto contenido de toxina, como en los pro-venientes de otras áreas (Banco de Necochea) en que nose detectaba toxicidad.

En opinión del Dr. Balech, de~ía sospecharse comoagente causal a una especie muy tóxica del denominado"Complejo Tamarensis", posiblemente Gonyaulax exca-vatlJ (Braarud) Balech, 1971 (Primera Reunión Interins-titucional de Evaluación, INIDEP, 16-12-80. Esta sospe-cha fue confirmada, al analizarse las muestras de planc-ton sedimentadas, recogidas en botellas durante lacampaña del BIP "Dr. Holmberg" en las que pudo obser-varse la presencia de este organismo en el área afectada(Figura W 3). En el epicentro del fenómeno, (42°26' 03 Sy 62° 27'2 W) alcanzó concentraciones elevadas, cercanasa las 120 x 103 cel/litro, que aunque insuficientes paraproducir discoloración de la masa de agua, indican clara-mente su responsabilidad como agente causante del fenó-meno de toxicidad. En la Bahía de Fundy (Canadá),donde el fenómeno de tox icidad se presenta durante to-do el año, los máximos valores de toxicidad en el Puertode Head, alrededor de 4.000 U.RJ100 gr. de carne demejillón (Mytilus edulis) Ó 200 ~gr. de equivalentes desaxitoxinal100 gr. de carne, se corresponden con con-centraciones de Gonyaulax tamarensis de alrededor de19 x 103 células /Iitro, siendo estas concentraciones su-ficientes para detectar toxicidad en las muestras deplancton (Prakash y colo, 1971). Debe tenerse presenteque se trata de especies extremadamente tóxicas, siendoel contenido celular de toxinas, del orden de-1, 2 a 4, 5 x10-5 ~gr. de equivalenres de saxitoxina por célula, porlo que sólo son necesarias alrededor de 5.000 células pa-ra producir una unidad ratón (Prakash y col., 1971; Whi-te y Maranda, 1978).

Por otra parte, de los valores de toxicidad en los me-jillones (Mytilus platensis), del buque "Constanza"(173.000 U.R./100 gr. de carne) y los obtenidos en elmismo banco durante la Campaña mencionada (43.335U. R./1 00 gr. de carne) puede extrapolarse que las mayo-res concentraciones de G.excavata se presentaron conanterioridad a la época de nuestro muestreo y aún posi-blemente, al accidente que costara la vida a los dos pes-

cado res, no siendo dificil qüe el fenómeno haya produci-do una discoloración de las aguas que pasó inadvertida.En muchos casos, el fenómeno es de corta duración, co-mo lo muestra el producido en el Golfo de Maine por unorganismo de este mismo grupo, donde en el término deuna semana, las concentraciones de G. tamarensisvaria-ron desde 2,8 x 10e cti/L a 1.33 x 103 cel/L (Mulligan,1973).

En la Figura N° 4 puede observarse, que de acuerdocon la distribución de este organismo, es I{cito suponerque el fenómeno tuvo su origen y máximo desarrolléldoen las aguas de la plataforma frente a Península de Val-dés, ejerciendo luego su influencia en la parte sur delGolfo de San Matías y en el Golfo de San José, siendo suinfluencia m(nima en el Golfo Nuevo. Este esquema hi-drográfico del área, fue observado con anterioridad (Ca-rreto y col., 1974) y es además coincidente con los valo-res de distribución de toxicidad hallados en los moluscosbivalvos del área.

Es interesante mencionar, que durante el desarrollode la c~mpaña y ante la imposibilidad de analizar lasmuestras sedimentadas, guiamos nuestro derrotero porlas muestras obtenidas con red. Luego de transponer elGolfo de San Matias, observamos en la superficie del margrandes manchas de color grisáceo netamente distingui-bles, que demostraron contener gran cantidad de mate-rial detr{tico y que correspond(a a un área con intensamezcla vertical, en la que predominaban las diatomeas.Transponiendo la misma y en las cercan {as del banco demejillones, ahora denominado "Constanza", luego decomprobar la elevada tox icidad de estos moluscos, (yancorrespondencia con ello), las muestras de red presenta-ron una intensa coloración rojo-violácea, ~ran biolumi-nicentes y compuestas casi exclusivamente de dinoflage-lados, entre los que se destacaba por su abundancia Pro-toperidiniun depressum. Este organismo presentaba ensu citoplasma numerosas inclusiones lipídicas fuertemen-te coloreadas de rojo debido a la presencia de pigmentoscarotenoides que estamos estudiando y que se asemejanal hallado en Protoperidinium ovatum (Neveux y Soyer,1976) agente causal de mareas rojas no tóxicas en aguasdel Mar Mediterráneo.

Las primeras experiencias a bordo, inyectando ex-tractos ácidos de estas muestras de plancton a un pingui-no y posteriormente a ratones, dieron resultados negati-vos.

A pesar de todo, las muestras de red, y posterior-mente un sistema elemental de muestreo contínuo dise-ñado durante la campaña por un miembro de la tripula-ción, permitió delimitar un área de abundancia de dino-flagelactos.

El posterior análisis cuantitativo de las muestras co-

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lectadas con botellas no tóxicas, permitió identificar aGonyaulax excavata (Braarud) Balech, como el organis-mo causal del fenómeno de toxicidad. La taxonom(a deG. excavata merece ser objeto de estudios más profundos(Reid. 1980; Balech - comunicación personal). En lasmismas muestras, además de las formas móviles, fueronobservados dos tipos de quistes: temporarios y ae resis-tencia (Oale, 1977). También fueron observadas las co-rrespondientes tecas sin contenido, que nos indican que elfenómeno estaba en su fase de decadencia. Esto está deacuerdo con las bajas concentraciones de nitratos presen-tes en esa área. El estudio posterior de los hepatopáncreasde los mejillones del área, mostró la presencia de quistesde resistencia de G. excavata lo que permite inferir queparte de la toxicidad fue debido a la ingestión de los mis-mos (Oale y col. 1978),

2. 2. 2.- Factores hidrobiológicos asociados con eldesarrollo del fenómeno - Posibles orígenes.

Los factores desencadenantes de un fenómeno de"Marea Roja", según se ha discutido, son ditlciles de es-tablecer con certeza ya que el proceso es el resultado dela interacción de diversos factores, que actúan de maneradiferencial en las distintas etapas del proceso: iniciación,crecimiento, acumulación y disipación (Steidinger, 1975\

La iniciación del fenómeno supone la existenciaprevia al florecimiento, de quistes de resistencia de estosorganismos y por lo tanto de formas planctónicas origende los mismos. Aunque esta especie nunca fuera citadapara el Mar Argentino, resulta difícil imaginar un proce-so de transporte desde áreas muy alejadas (en las quepuede ser endémico), por lo que cabría admitir la exis-tencia normal de esta especie, aunque en concentracio-nes tan bajas como para pasar inadvertidas o en pulsos deescasa magnitud y corta duración que han pasado desa-percibidos.

Cabe destacar que el foco de máxima toxicidad co-rresponde a un banco de mejillones no explotados co-mercialmente y situados a 60 millas de la costa. El fe-nómeno de toxicidad puede haberse presentado en otrasoportunidades y pasar inadvertido, alria comprometerlas poblaciones de moluscos de la zona costera de losGolfos rpatagónicos, donde su extracción y consumoes consl ble.

Admitida su existencia, cabe considerar los factoresdeterminantes del crecimiento inusual de esta especie.Como se ha señalado, este fenómeno ha coincidido conperíodos de temperaturas del aire elevadas y ausencia deagitación de la masa de agua, con el consecuente desarro-llo de termoclimas muy superficiales (Margalef, 1956;Prakash y col., 1971; Yentsch, 1975; Lassus y col., 1980).

11

Si comparamos las temperaturas del agua registradas durante la campaña del BIP "Dr. Holmberg" con lasobtenidas para la mismaépocaen otrosaños, (S.H.N., lO/X1971) surge que estas son elevadas, siendo la diferencia dellrededor de dos grados centígrados (Figura N° 5).

Por otra parte la compleja hidrogratla del área nosseñala la existencia de frentes hidrográficos entre aguasintensamente mezcladas, con otras bien estratlficadas (Fgura N° 6) presentándose además en algunas estacionesdoble termoclina, siendo la primera de ellas muy suped;cial. En la Figura N°7 se presenta el registro del STO correspondiente a la estación Ad. 8, en la que se detectó lamáxima concentración de G. excavata. La distribUCiónvertical de esta especie en la mencionada estaclOn (durante el día) guarda estrecha correlación con la presenCiade la termoclina superficial (Tabla N° 2). presentándoseel máximo a los 10 m. de profundidad.

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TABLA N° 2: Distribución vertical de G. excavata V susquistes en la estación de mayor abundancia (Ad. 8).

Pingree y col. (1975; 1977) han señalado que la ma.rea roja, producida en la costa este de Inglaterra en 1968se inició en una zona de transición entre aguas bien ha.mogenizadas y bien estratificadas, relacionando la forma.ción de estos frentes hidrográficos por acción de las ma.reas, con la abundancia de dinoflagelados Nuestras observaciones son coincidentes con lo señalado y puede serapreciado en el corte de distribución vertical de temperatura (Figura W8) as'- como en los registros del termosal!nógrafo (Figura W9).

La iniciación del crecimiento, requiere el transporte de los quistes maduros desde las aguas profundas hastala zona eufótica, lo que en el área puede produCirse porlas fluctuaciones del mismo frent€. Cabe señalar quemientras en noviembre de 1980, la columna de agua quecubr ía el banco "Constanza" presentaba termocl ina, erfebrero de 1981, la distribución de temperatura era casIhomogénea (Figura W10).

En las Figuras W 11/20, se ha graficado la distribu.

ción de ox ¡geno disuelto, sal inidad, nitratos, fosfatos, s!.

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licatas, amonio, nitrltos, fitoplancton total, número dedlatomeas y número de dinofla~lados en una transecta

Que corta las zonas diferenciadas por su estratificación.(Figura N° 6),

Del análisis de las mismas queda evidenciada la exis-tencia de un frente entre aguas bien mezcladas con otrasbien estratificadas, como se expresó anteriormente. Enlas primeras, la diferencia de temperatura entre las pro-fundidades de O y 50 m. es menor de 0,5° C, mientrasque la estación más estratificada alcanza más de 4°C (Fi-gura N° 8). Las diferencias de densidad son debidas a esteparámetro, ya que la salinidad presenta escasas variacio-nes verticales. (Figura N°l1).

Las aguas bien mezcladas presentan concentracionesde nitratos uniformemente distribuídas, siendo sus valo-res mayores (1-3 ).lgr-at-N-NO "3/U que las superfi-ciales de la zona estratificada «.1.0 ugr-at-NNO "3/U y

mucho menores que los correspondientes a las profundi-dades por debajo de la termoclina de estas últimas (17.0ugr-at-N-NO "3/U(Fig. 12).

Los fosfatos muestran una distribución similar, aun-que sus concentraciones superficiales en el área-estratifi-cada son relativamente elevadas. (Figura N° 14).

También se observa, que los valores más altos se co-rresponden con las aguas de mayor salinidad correspon-dientes al umbral del Golfo de San Matías. Las concen-traciones de amonio (Figura N° 15) y nitritos (FiguraN °16) se corresponden con el encuentro de ambas masasde agua donde presentan los valores más elevados. Lasconcentraciones de silicatos muestran una distribuciónerrática, aunque sus valores, en términos generales sonrelativamente elevados (2-10 ugr-at-Si-SiO 3/U(Fi-gura N° 17).

Las máximas concentraciones de fitoplancton (Figu-ra N o

18). se presentan en coincidencia con la zona decontacto entre ambas masas de agua (frente). Un análisismás detallado nos indica que dicho frente divide a doscomunidades fitoplanctónicas completamente diferentes.En las aguas bien mezcladas hay una neta dominancia dediatomeas (Figura N°19). mientras que en las estratifica-das se encuentran sóla dinoflagelados, entre ellos G.ex-covoto (Figura N°20). (Tabla N°3).

Esta neta diferenciación puede explicarse si se consi-deran las diferencias fisiológicas que presentan ambas co-munidades. Los dinoflagelados presentan menores reque-rimientos de nitrógeno asimilable, son capaces de real izarmigraciones verticales y proliferan en ambientes termica-mente estabilizados. Para el caso especial de G.excovoto,White (1976) ha demostrado el efecto inhibitorio de laagitación sobre la velocidad de crecimiento.

La abundancia de diatameas es coincidente con lasmayores concentraciones de nitratos observadas en las

aguas bien mezcladas.Otras observac iones interesantes de destacar, es la

coincidencia de la I (nea del frente con la ubicación delbanco de mejillones que no parace casual, sino relacio-nada con la mayor producción del fitoplancton. Pingreey col., (1974) destacan que además de una mayor pro-

ducción planctónic,-" .dScomunidades bentónicas presen-tan mayor desarrollo en los frentes océanicos de la costaBritánica. Esta situación ya fue descripta para las aguasdel Golfo San Matías, durante la primavera (Carreta ycol. 1974) en que se concluía que las aguas del sur de es-te golfo, con temperaturas y salinidades más bajas quelas del extremo norte, eran de origen externo, hechocoincidente con la extensión del fenómeno de toxicidada los Golfos SanMatías y San José.

La acción de las lluvias y el consecuente descenso dela salinidad, considerada como otro factor desencade-nante, no parece en este caso ser de mayor importancia,dado el régimen de lluvias del área, con una media anual(1901-1951) comprendida entre 200 mm. y 400 mm.Los mayores aportes en el área son realizados por el RioNegro, no advirtiéndose durante el desarrollo de lacampaña, variaciones de salinidad que indiquen anorma-lidades respecto de otros años (Figura N" 21), y Que pu-dieran actuar incrementando la velocidad de crecimiento,por el aporte de sustancias orgánicas (vitaminas, a~ntescomplejantes, etc.).

Estos aspectos ecológicos del problema, serán discu-tidos en detalle en una próxima publicaéión (Carreto ycol. en preparación). En el apéndice I se presenta en for-ma esquemática los resultados correspondientes al desa-rrollo total de la campaña.

2. 2. 3.- Naturaleza de la toxina

Aunque no se han realizado aún los estudios de se-paración e identificación qu ímica de las toxinas, la sinto-matología de las intoxicaciones y la estabilidad de lasmismas frente al calor (Dr. Elbusto, Primera ReuniónInterinstitucional. INIDEP. 1980) señalan claramenteque se trata de toxinas del grupo de las denominadas"Veneno paralizante de moluscos" (P. S. P.).

Por otra parte, la identificación del organismo causaldel fenómeno de toxicidad como Gonyoulox excovota(Braarud) Balech 1971, nos confirma esta aseveración ypermite adelantar la presencia de por lo menos 8 tox inas:Gonyautoxinas: 1,11,111, IV, V y VI, saxitoxina y neo-saxitoxina (Shimizu y col. 1975, 1976; Oshima y col.1977; .Hsu y col. 1979) todas ellas de estructuras simila-res a la saxitoxina purificada por Schantz y col., (1975)y producida por el dinoflagelado Gonyoulox coteneJlo,

cuyo efecto farmacológico esel bloqueo selectivo del flu-

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FIGURA No. 7.- Registro continuo de temperatura (STO) en laestación adicional No. 8 (Ad.8).

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jo de iones Na + a través de las membranas excitables(Narahashi y col. 1975).

A los efectos de confirmar la presencia de estas toxi-nas se han enviado las muestras correspondientes al Dr.Yuzuru Shimizu (Departament of Pharmacognosy andEnvironmental Health Sciences, Colleges of Pharmacy,USA).

Es interesante mencionar que ante la preocupacióndel efecto de la tox ina sobre especies de peces tales co-mo. meros (Acanthistius brasilianus), salmones de mar(Pinguipes somnanbula), etc. que pueden incluir en sudieta bivalvos se realizaron ensayos en base a ejemplarescolectados durante la campaña y mantenidos en el acua-rio del buque. Los resultados de estos ensayos demostra-ron que estos peces son severamente afectado~ por lastoxinas presentes en los mejillones del banco "Constan-za", produciéndose en definitiva la muerte (8astida yLichtschein, informe interno- 1N I DEP).

Aunque en las muestras de plancton del área afecta-da se comprobó la presencia del dinoflagelado Gonyau-lax grindleyi, productor de una intensa marea roja deSud Africa (Grindley y Talylor, 1964) asociada con mor-talidad de fauna marina, no está demostrada su naturale-za tóxica. Puede por lo tanto sostenerse que las toxinasproducida~ por G. excavata,son también letales para lospeces ensayados como fuera experimentalmente compro-bado para el arenque (CIupeaharengus harengus) (White,1977, 1980). Este autor durante un florecimiento de G.excavata en la 8ah ía de Fu ndy. concluye que la morta-lidad de arenques observada, fue causada por la ingestióndel pterópodo Limacina retroversas, que actuó como or-ganismo vector de las toxinas de G. excavata.

2. 2. 4.- Organismos concentradores de toxinas. Nivelesde toxicidad y velocidades de detoxificación.

En las tablas 417, se presenta a modo de resumen losvalores de toxicidad hallados en las distintas especies demoluscos bivalvos analizadas. Los mismos han sido obte-nidos por diversos laboratorios que participaron en estetrabajo (lNIDEP - SENASA - IBM Y P. "AlmiranteStorni" y D.G.P. y R.M. Río Negro. C.N.P.) y parte hansido publicados (Elbusto y col. 1981).

El máximo valor de toxicidad, corresponde a los me-ji lIones del banco "Constanza" de la partida cuya inges-tión provocara dos muertes. El valor hallado para losmismos fue de 173.360 U.R. por 100 gr. de carne yconstituye uno de los valores más elevados registrados enla bibliografía internacional. (Tabla N°8).

Resulta difícil comparar la velocidad de concentra-ción de toxinas por las diferentes especies, ya que losmuestreos fueron realizados en distinas localidades o pi-

sos bioecológicos y en general en fechas no coincidentes,pero sin lugar a duda se destacan: El mejillón (Myti/usplatensis), la cholga (Aulacomya ater) y la vieira (Ch/a-mys techuelchus), Que por otra parte fueron los organis-mos más estudiados.

Si para establecer una comparación, se toman comoequivalentes los resultados obtendios en la primera se-mana de diciembre (Figura 22) los máximos valores detoxicidad corresponden a los mejillones del banco ahoradenominado "Constanza" en los que se encontraron45.335 U.R./l00 gr. de carne.

Esto concuerda con lo afirmado anteriormente so-bre la base de la presencia del organismo productor de latoxina y demuestra Queel origen y epicentro del fenóme-no estuvo localizado en las aguas externas de los golfos.En el litoral de los mismos, la zona de mayor toxicidadcorresponde a la localidad de Arroyo Salado (Golfo deSan Matías) donde los valores hallados para cholga(14.828 U.R./100 gr.) falsa ostra, (5.913 U.R./l00 gr.) yvieira (2.263 U.RJ100 gr.) nos indica que la influenciaexterna ha sido importante.

Como puede verse en la figura N° 21, la distribuciónde toxicidad no es uniforme en una dirección determi-nada, ya Que luego de disminuir desde Arroyo Salado aPuerto Lobos, se incrementa en Punta Quiroga y dismi-ruye finalmente en el Golfo San' José. Esto concuerdacon lo observado por Schantz y col. (1975) quién sostie-ne Que puede encontrarse un banco muy tóxico, separa-do de otro sin signos de toxicidad, por una distancia desólo un décimo de milla.

.

Dado Que las diferentes especies de moluscos bival-vos por su actividad metabólica. presentan diferentes ve-locidades de acumulación y eliminación de toxinas (Pra-kash y col. 1971) en la Figura N° 23 hemos representadolas curvas de detoxificación del meji IIlón del banco"Constanza", y de la cholga y vieira del infralitoral deArroyo Salado. En las mism~ podemos observar la dis-minución exponencial del contenido de toxinas, queaunque por simplicidad suponemos independiente de latemperatura, probablemente presente un coeficiente detemperatura (g 10) próximo a dos, como la mayoria delas reacciones enzimáticas. De todas formas para el pe-ríodo considerado y en vistas a los errores inherentes a lametodologia del bioensayo ( : 20 010), su efecto puededesestimarse.

Con esta limitación, puede suponerse que la veloci-dad de detoxificación ( f ) es una función dependientede la concentración de taima y por lo tanto.

dTdt

donde T es la concentración de toxina,t: el tiempo trans-

= K. T

19

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curndo v K una constante característica de la especie.Integrada la ecuación entre determinaciones sucesivas, en

Idénticas condiciones ambientales y suponiendo la ausen.cla de organismos productores de toxina (células o Quis-tes de G. excavota) podemos calcular K de la siguientemanera

K = 2.3(log.T o -Iog. T)

t - to

donde To es la toxicidad al tiempo to'

y T la toxicidad

a tiempo 1. También conocida K puede calcularse eltiempo para el cual la concentración de toxina se reducea la mitad (t 112) t 112 = ~ .

En la figura No

24 se han presentado los valores de

toxIcidad en forma logarítmica, comprobándose buenacorrespondencia. los cálculos realizados nos indican Queel tiempo de detoxificaciónmedio para el mejillón(t 1/2 = 7 días ~ 20 0/0) y la cholga(t 1/2 - 9 días20 0/0) son similares entre sí y marcadamente diferentes

del Que presenta la vieira (t 112 =-15 días "!"20010).

Este resultado es interesante, pues en un programa

de control de toxicidad, deben buscarse las especies Queconcentran toxina a mayor velocidad como indicación

de la iniciación del fenómeno, pero también la Que deto-

xifica más lentamente, para evitar riesgos. También des-

de este punto de vista es interesante el hecho Que la toxi-na no se distribuya uniformemente en el cuerpo del mo-

lusco. la concentración en los diferentes órganos depen-

de de la especie en cuestión y de la época del año o esta-

do de detoxificación. En !J!neral, las mayores concentra-

ciones se encuentran en las glándulas di{JJstivas, siguién-

dole en orden decreciente las gonadas, el manto y final-

mente las partes musculares (sifones, músculo aductor)

Que contienen pequeñas concentraciones relativas de to-

xina (Medcof y col. 1966).

los análisis efectuados en vieiras, han demostradoQue mientras el animal completo presentaba toxicidades

de 1.498 y 596 U.Al100 gr. de carne, tOs músculosaductores de ambos lotes' de vieiras estaban libres de to-

xina (Estevez y col. Informe C.N.P.) . Sin embargo, esnecesario tornar estos resultados con precaución ya que

los valores de toxicidad de los animales estudiados son

relativamente bajos. si se los compara con los máximos

detectados para esta especie (10.860 U.All00 gr. de car-ne). Por otra parte, es desaconsejable la idea de permitir

el consumo de los callos de vieiras aunque los mismos se

encuentren libres de toxina. principalmente por el costo

del control de calidad Que sería necesario aplicar para

evitar riesgos.

La velocidad de detoxificación está relacionada con

la velocidad de acumulación' de toxinas, la Que resulta

dependiente de la velocidad de filtración del molusco, de

SUselectivdad frente al organismo productor de toxinas,de la concentración de este último y de los factores

ambientales que modifican la velocidad de filtración. En

general, los organismos Que acumulan toxinas en forma

rápida se detoxifican también a mayor velocidad.

Lo observado en la figura W24, puede interpretarse

de esa manera, ya Que la especie Que se detoxifica a me-

nor velocidad (vieira) alcanza su máxima concentración

de toxinas en un período de tiempo más prolongado Que

el mejillón o la cholga y cuando estas especies, se en-

cuentran en franco período de detoxificación. Es impor-

tante resaltar Que los valores de toxicidad corresponden

a moluscos de la misma localidad y estrato litoral (infra-litoral), ya Que tanto la acumulación como la eliminación

de toxina dependen del tiempo Queel molusco se encuen-

tra sumergido. Esto explicaría las diferencias observadas

en la velocidad de detoxificación de las vieiras del infrali-

toral (t 112 = 15 d¡as)y mesolitoral (t 1/2 - 25 días).Sin embargo es necesario destacar Que para estas últimas

sólo se cuenta con dos determinaciones y Que para el ca-

so de la cholga, las diferencias observadas no son si!11ifi-cativas, siendo los valores de t 1/2 de 9 y 10 días respec-

tivamente.

Nuestros cálculos suponen la inexistencia de fuentes

de toxina en el medio, lo Que puede ser falso, especial-

mente en el sedimento de las aguas más profundas del

epicentro del fenómeno donde la presencia de Quistes de

G. excavata ouede ser significativa. Es importante desta-

car Que los mismos presentan una toxicidad diez vecesmayor que las formas planctónicas (oale y col. 1978),

Las experiencias de laboratorio realizadas en Canadápara el mejillón (Mytilus edulis) en condiciones de tem-

peratura (12,0o C) y salinidad (33 o/oo)similares a nues-

tros valores "in situ" (S: 33,5,t = 12,5) dan tiempos dedetoxificación casi i~ales a nuestros cálculos: t 112 =7,6

días (Pralcash y col. 1971, pág. 64, t:21).

Por estar razón, puede suponerse que la anormal de-

toxificación de los mejillones del banco "Constanza" en-

tre los meses de enero y febrero (Figura N° 24) es el re-

sultado de la ingestión de quistes de G. eSCOYata.oale y

col. (1978) han demostrado Que los moluscos bivalvos deaguas profundas, presentan un máximo de toxicidad du-

rante el invierno, cuando no se observan formas móviles

en el plancton y han sugerido, Que se origina en la inges-

tión de Quistes (Hsu y col. 1979). Ayres y Cullum (1978)encuentran Que los Quistes tóxicos eran comunes en el

plancton (15.000 Q /1) de las costas de Inglaterra en el

momento de la máxima toxicidad del proceso ocurrido

en 1970, y que la toxicidad durante el año siguiente, fue

coincidente con la aparición de Quistes en el contenido

20

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~

estomacal de los mejillones.Como se ha dicho, durante la campaña del BIP "Dr.

Holmberg" ( 12-80 ) en el área externa a los golfos seobservó la presencia en el plancton de formas reciente-mente enQuistadas en concentraciones de hasta 7.000Q /1 (Carreta y col. en preparación).

También, el análisis previo de la campaña del BIP (Dr.Holmberg" de mayo de 1981, mostró formas planctóni-cas de G. excavata en eScasasproporciones, pero una granabundancia de sus Quistes de resistencia en los sedimen-tos. Esto indica la probable existencia de una zona endé-mica, con toxicidad latente durante todo el año y con elpeligro de repetir el fenómeno explosivo de la primaverade 1980.

Por esta razón, el área se ha vedado en forma perma-nente, mientras se sigue el control anual de toxicidad.111.- CONCLUSIONES

1.- En la primavera y verano de 1980-1981 se produje-ron en el Mar Argentino dos fenómenos de crecimientoinusual de dinoflagelados: uno de ellos produjo una in-tensa marea roja, sin signos de toxicidad y el otro, sin serapreciado ningún signo de discoloración, una elevada to-xicidad en los moluscos bivalvos de los Golfos San Ma-tías, San José y de la plataforma frente a la península deValdés Que ocasionó la muerte de los pescadores.2.- El primero de los descriptos se debió a la inusualconcentración superficial del dinoflagelado predadorNoctiluca scintiIJans, sospechándose Quela misma se ori-ginó en procesos de circulación de masas de agua cuyaconsecuencia fue la concentración superficial de esta es-pecie en áreas relativamente restringidas.3.- Para el segundo fenómeno, lo~yos realizadossobre estabilidad térmica de la toxiña,laifritomatolog(ade las intoxicaciones, la eliminación de otras probablescausas y el hallazgo en el área de concentFaciones eleva-das del dinoflagelado Gonyaulax excovota (Braarud) Ba-lech 1971, indican Que las toxinas presentes en los mo-luStoS bivalvos del área afectada, son del grupo de lasdenominadas "Veneno paralizante de moluscos", Queagrupa a las Gonyautoxinas I/VI, saxitoxina y neosaxi-toxina.4.- El fenómeno del florecimiento de Gonyaulax exca-vata, según todas las evidencias tuvo su epicentro en elárea de la Plataforma Continental Argentina, frente a Pe-n ínsula de Valdés y estuvo asociado a la presencia de unfenómeno oceánico, entre aguas bien mezcladas yaguasbien estratificadas; presentándose en estas últimas y enlas cercan ías del frente una población fitoplanctón ica conpredominio neto de dinoflagelados, entre ellos G.exco-voto.

La distribución de G. excavata y sus quistes hace su-

poner Que la extensión del fenómeno de toxicidad en losmoluscos bivalvos de los Golfos San José y San Matias sedebe al tranposrte de los mismos. En la figura N° 25 seeSQuematiza la hipótesis del desarrollo del fenómeno.5.- El centro de máxima toxicidad de moluscos, se pre.sentó, en concordancia con lo dicho, en el banco de me.jillones "COnstanza" (42° 23'37S 62° 45' 66W¡, siendosu posición coincidente con la I¡'nea del frente anterior-mente descripto.

Los máximos valores alcanzaron a 173.000 UR!100gr. de carne, constituyéndose en uno de los más eleva-dos de la literatura consultada.6.- Losensayos realizados con peces que pueden incluiren la dieta moluscos bivalvos, demostraron que los mis-mos son severamente afectados por las toxinas presentesen los mejillones del banco "Constanza".7. - De todas las especies de moluscos bivalvos que pre-sentaron toxicidad, el mejillón (Mytilus plotens;s), lacholga (Aulacomya ater) y la vieira (Chlomys tehuelchus),se destacan por sus elevados valores: 173.000; 14.828 Y10.860 UR/l00 gr. de carne respectivamente.8.- Lavelocidad de detoxificación de mejillones y chal.gas, essimilary relativamente elevada (t 1/2 = 7-9 dias),mientras que la vieira se detoxifica más lentamente(t 1/2 = 15 dias).

9.- Los estudios realizados sobre la distribución de to-xinas en el cuerpo dé la vieira, muestran que su partecomestible (el callo), está libre de toxina. A pesar de ello,no se aconseja su comercial ización en épocas de veda.10.- En el caso del mejillón del banco "Constanza", lacurva de detoxificación cambia su pendiente en formamarcada, disminuyendo su velocidad a t 1/2 = 61 dias ypermaneciendo a la fecha de la última determinación convalores por encima de lo establecido como I (mite de se-guridad. Se supone que el fenómeno es causado por in.gestión de quistes remanentes en los sedimentos.11.- La bibliograHa consultada, y la observación deQuistes de G. excavota, permiten sospechar que el fenó.meno de florecimiento de esta especie tóxica vuelva a re-petirse en la próxima primavera, transformando al áreaen una zona endémica, lo que indica la necesidad de esta.blecer un sistema de prevención y control del fenómeno.

21

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AGRADECIMIENTOS

Queremos dejar constancia del esfuezo realizado, el apoyo sin limites y la jerarquía del trabajo desa-

rrollado por diversos investigadores, técnicos y personal en general, de las Instituciones que han colaborado

en el desarrollo de las investigaciones que se presentaron en este trahajo a modo de resumen.

Al servicio Nacional de S<inidad Animal (SENASA) y su laboratorio Regional Mar del Plata (SELAB).por las determinaciones de toxicidad en las numerosas muestras enviadas que excedieron en muchos casos a

su capacidad instalada, lo que suplieron con eficiencia y esfuerzo.

Al Centro Nacional Patagónico, por su pronta y eficiente respuesta y por los numerosos e importantes

informes elaborados sobre fa evolución de toxicidad de las poblaciones de moluscos bivalvos de las Costas de

la Provincia de Chubut, por la hospitalidad brindada a los científicos y técnicos del BI P "Dr. Eduardo L.

Holmberg".

Al Instituto Nacional de Microbiologla "Dr. Carlos Malbran", por el apoyo y asesoramiento brindado

en las primeras etapas del proceso.

Al personal del Instituto "Almirante Storni" y a la Dirección General de Pesca y Recursos Marinos de

la Provincia de Rlo Negro, por el importante apoyo logística brindado en los muestreos realizados a lo largo

de la costa de la Provincia de R la Negro y las experiencias real izadas en sus laboratorios.

Al Museo Argentino de Ciencias Naturales "Bernardino Rivadavia" y especialmente al distinguido in-

vestigador Dr. Enrique Balech, por adevertirnos del peligro desatado, por el enorme esfuerzo realizado en el

análisis de innumerables muestras de mejillones, por la orientación y asesoramiento general y especialmentepor la colaboración en la identificación del organismo causal del fenómeno de toxicidad.

Al Director del Instituto Argentino de Oceanografía (lADO), Lic. LeonclO Montesarchio, por elimportante material bibliográfico facilitado.

Al Servicio de Hidrografía Naval, por la comunicación de discoloraciones y la emisión del aviso a los

navegantes.

A la Fuerza Aérea Argentina y a la Aviación Naval por el apoyo generoso, que hizo posible los recono-

cimientos aéreos de las zonas afectadas. A la Prefectura Naval Argentina y su dependencia en Mar del Plata,por los informes enviados, por el constante aviso de la presencia de discoloraciones y po~j..apoyo brindado

en el muestreo realizado con el Patrullero "Mar del Plata".

A los Patrones de Buques Pesqueros ya la flota de Yacimientos Petrol{feros Fiscales, por su apoyo en

la localización de las discoloraciones.

A la Policta de la Provincia de Buenos Aires, que a través del Comando Radioeléctrico resolvió urgen-

cias de comunicación.

Ade'más, a todo el personal dellNIDEP y especialmente al Licenciado A. LUSQuiños, ai Dr. Ricardo Bas-

tida, a la Lic. Victoria' Lichtschein ya los técnicos D.Cucchi Colleoni. M.Carignan, P. Glorioso, S. Cocovi, al

Sr. Santos Pereyra, al Sr. M. Scelzo por sus excelentes fotograft'as, a la Sta. Graciela Spinel!i V a las Sras.

María Emilia Cordini y Marla Inés Cosulich por la dactilografía del manuscrito.

Finalmente a los señores Capitanes, oficiales y tripulantes de los Buques de Investigacioo "Dr.

Eduardo L. Holmberg" y "Capitán Cánepa", por el esfuerzo, apoyo y ayuda bri ndada.

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APENDICEDatos complementarios, obtenidos en la Campaña 02/80 del B IP "Dr. H01mberg".-

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TABLA No. 3: Distribución de las especies de fitoplancton por estación.

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° Variaciones espacio temporales de toxici-TABLA N 4 Pta. Lobosdad en Mytilus platensis (mejillón). (G.S. Matias) Mesol ¡toral 3-12-80 1.003

LOCALIDAD CARACTERIS. FECHA TOXICIDAD

Pta. lobosBco. Constanza GOm. proL 20-11-80 173.600 (G .S. Matías) Infralitoral 5-12-80 1.945

Bco. Constanza GOm. prof. 7-12-80 45.335 Pta. Qu iroga(G.S. José) Infral itoral 5-12-80 2.930

Bco. Constanza 60m. prof. 10-01-81 1.369Pta. Logaritmo(G.S. José) Infral itoral 5-12-80 2.477

Bco. Constanza 60m. prof. 21-02-81 849

Bco. Constanza 60m. prof. 6-05-81 365 Pta. Quiroga(G.S. José) Infral itoral 12-02-81 254

Playa El Bote Infral ¡toral 5-12-80 268Bah ía Nueva(G. Nuevo) Infral ¡toral 5-12-80 302

Playa El Bote Infral itoral 7-01-81 n/d

Pta. EstePlaya El Bote Infral itoral 12-01-81 n/d (G. Nuevo) Infral ¡toral 5-12-80 334

Est. Ad.-5 Ba" ía Camarones Infralitoral 5-12-80 21642"04'5-64°90'0 44m. prof. 6-12-80 1.272

Mar del Plata varias n/dPta. Peligro(G.S. Jorge) Infral itoral 5-12-80 220

Necochea vanas n/d Arroyo Salado(G.S. Matías) Infralitoral 2-12-80 14.828Las Grutas cultivos 1-12-80 n/d

Pta. MejillónArroyo Salado

Mesolitoral 3-12-80 n/d (G.S. Matías) Infral ¡toral 13-01-81 712

Arroyo Salado Mesol ¡toral 13-01-81 n/dArroyo Salado(G.S. Matías) Infral itoral 28-01-81 207

Arroyo Salado Mesol ¡toral 28-01-81 245

TABLA N° 5: Variaciones espacio temporales de toxici- Arroyo Salado

dad en Aulamcomya ater (cholga).(G.S. Matías) Medio Litoral 27-12-80 3.711

LOCALIDAD CARACTERIS. FECHA TOXICIDAD

Arroyo SaladoPta. Lobos (8.S. Matias) Medio Litoral 13-01-81 1.150(G.S.Matias) Infral itoral 3-12-80 320

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TABLAS N 06: Variaciones espacio temporales de toxici- TABLA N° 7: Nivel de- toxicidad en otras especies dedad en Chlomys tehuelchus (vieira). moluscos estudiadas.

LOCALIDAD CAltACTEIUS. ~ECHA TOXICIDAD ESIlECIE LOCALIDAD ~ECH. TOXICIDAD

Arroyo Salado Pododesmus sp.(6.S. Matías) Infral itoral 2-12-80 2.663 .(falsa ostra) Arroyo Salado 2.12-80 5.913

Arroyo Salado Pododesmussp. Pto. Lobos 3-12-80 741(6.S. Matías) Infralitoral 27.12-80 9.470

A meghlnomyoArroyo Salado Qfltlguo Pta. Ouiroga 5-12-80 1.136(6.5". Matías) Infralitoral 13-01-81 .4.045

Chlomys 11sch_¡ Est.13.(179m)Arroyo Salado (vieira patria) (4t02-64"3O) 6.12-80 328(6.S. Matías) Infralitoral 28-01-81 2~128

&/Qnus sp. Las 6rutas 1-12-80 nldArroyo Salado(6.S. Matías) I nfral ¡toral 7-03-81 332

0stTet1 puelchQflQ(ostras) LBS6rutas 1.12-80 n/d

Arroyo Salado(6.S. Matías) Medio Litoral 27.12-80 10.860

8rrIchldontes sp.(mejillón) Pta.Mejillón 3-12-80 nld

Arroyo Salado'(6.S. Matías) Medio Litoral 28-01-81 4.418

Amlontlspurpuroto Pta.Villarino 3-01-81 n/d

Pta. Logaritmo(6.S. José) Infral itoral 5.12-80 1.498

Pta. Logaritmo(6.S. José) Infralitoral 4-03-81 596

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TABLA N° 8: Comparación de valores de toxicidad obtenidos de la bibliografía y el hallado en el Mar Arqentino

PAIS ORGANISMO ORGANISMO CONCENTRACION REFERENCIASREGION RESPONSABLE CONCENTRADOR U.R./100gr.

Mar Argentino G. excavata Mejillón 173.000 Este trabajo

Costa Atlántica G. tamarensis Mejillón 140.000 Prakash y col. (1971)de Canadá

Ria de Muros G. excavata Mejillón 104.000 Gestal Otero y Col.España (1978)

Bah ía Bell G. catenel/a Mejillón 96.000 Guzmán y Campodó-Chile nico (1978)

Masachussett G. tamarensis Mejillón 42.000 Hartwell - (1975)E.E.U.U.

Costas de Califor- G. catenel/a Mejillón 42.000 Quayle - (1969)nia - E.E.U.U.

Fiordo de Trond- G.excavata Mejillón 13.400 Sakshaug y col. (19711heinms - Noruega

Bahía de Ise G. catenel/a Almeja 10.000 Noguchi V col. (19781Japón

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11

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FIGURANo. 9.- Registro contJ'nuo de temperatura (-) y salinidad (. . .) superficial (termosalinógrafo) enla derrota entre lasestaciones Ad. 13 YNo.38.

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