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INSTITUTO TECNOLÓGICO DE CD. ALTAMIRANO
BIOLOGÍA CELULAR
LIC. EN BIOLOGÍA 3B
UNIDAD II TÉCNICAS DE ESTUDIO CELULAR
ALUMNO: CHRISTIAN E. LEÓN SALGADO
ASESOR: ERIKA OROPEZA BRUNO
MICROSCOPIA ÓPTICA
PARTES
Oculares, foco, platina,
objetivo, condensador,
diafragma, tubo, brazo, pie, revolver.
Anton Van Leeuwenhook, en el
siglo XVII.
Descubridor
CONTRASTE DE FASE
Permite realizar exámenes
inmediatos y observar
células viva.
Desarrollado por: Zernike en
1932
Aumenta el contraste entre las partes
claras y oscuras de las células sin
colorear.
MICROSCOPIA O. DE
INTERFERENCIA
Permite obtener datos cualitativos y cuantitativos.
Diseñado por:Labedeff en 1930.
Permite apreciar los cambios que se
producen en la masa seca de los cultivos
celulares durante los procesos de
crecimiento y división.
Existen tres tipos:
Microscopio de interferencia de
longitud desdoblada, los
de ondas y ondas múltiples.
MICROSCOPIA ÓPTICA DE
LUZ ULTRAVIOLETA
.
Energía que se utiliza para observar ácidos nucleicos, proteínas y
aminoácidos.
Toma microfotografías
usando una película sensible a
esta radiación.
Radiación de alta energía que si se
observa directamente daña
la retina.
MICROSCOPIA DE
FLUORESCENCIA
Los objetos son iluminados por rayos de una determinada
longitud de onda.
Inventor:
Kôhler y Siedentopf en
1908
Utiliza los mismos
principios de la microscopia óptica, con
diferencias en el diseño y manejo.
MICROSCOPIA ÓPTICA DE
CAMPO OSCURO
Utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de
un cono hueco concentrado sobre el
espécimen.
El objeto iluminado dispersa la luz y se
hace así visible contra el fondo
oscuro que tienen detrás.
MICROSCOPIA
ELECTRÓNICA DE
TRANSICIÓN
Longitud de onda de los electrones que se utilizan en los
electrónicos es de alrededor de 0,5
angstroms.
Emite electrones que chocan contra el
espécimen, creando una imagen aumentada.
Utiliza electrones para iluminar un objeto. Dado que los electrones tienen
una longitud de onda mucho menor que la luz,
pueden mostrar estructuras mucho más
pequeñas.
MICROSCOPIA DE LASER CONFOCAL
Su éxito de debe a las indudables ventajas
que ofrece frente a la microscopia óptica
tradicional.
Su principio se basa en eliminar la luz
reflejada o fluorescente
procedente de los planos fuera de foco.
Inventor:
Petran 1968.
Es básicamente un microscopio óptico que incluye como fuente de luz láser y un sistema electrónico que ayuda
a la captación de imágenes.
MICROSCOPIA DE
TRANSMISIÓN
Desarrollado por:Ruska y sus
colaboradores en 1931.
Utiliza un haz de electrones para
visualizar un objeto, debido a que la potencia
amplificadora de un microscopio
óptico esta limitada por la
longitud de onda de la luz visible.
Estructura:Cañón de
electrones, lentes magnéticas,
sistema de vacío, placa fotográfica,
sistema de registro.
Electroforesis
Desarrollado por: Arne Tiselius en
1973. Biolquímico.
Técnica para la separación de
moléculas según la movilidad de
estas en un campo
electrónico.
Metodología: 1.- Preparar gel de agarosa. 2.- Mezclar las muestras a
analizar adecuado y un colorante. 3.- Montar las muestras en el gel. 4.-
Realizar la corrida electroforética. 5.- Visualizar los ácidos nucleicos.
MÉTODOS CITOQUÍMIC
OS
Rama de la biología celular que se dedica a
la identificación y localización de los
compuestos químicos y macromoléculas de las
células
Reacciones existentes: 1.-
Progresivas estables. .- Progresivas
indefinidas. 3.- Fugaces
Sustancia más utilizada: Tetraóxido
de osmio. O5O4
• Fraccionamiento del contenido celular
Tres etapas:• Disgregación o
rotura• Filtración
• Purificación de componentes
celulares
Técnica que tiene como objetivo
obtener fracciones puras o
enriquecidas en un determinado componente
celular.
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