View
0
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
72 CHEMC3THERAPY JAN鱒t 958
カ ン ジ ダ 症 の 治 療 に 関 す る 実 験 的 研 究
螺 良 英 郎
大阪大学医学部第三内科教室(主 任:堂 野前維摩郷教授)
(昭 和32年8月30日 受 付)
(本論文 の要 旨は昭和28年7月 第1園 日本化学療
法学会総会,昭 和29年11月 日本化学療法学会近畿
支部第2回 総 会,昭 和30年11月 同学会第3回 総
会,昭 和31年11年5月 日本化学療法学 会第4回 総
会及 び昭和31年11月 日本化学療法学 会近畿 支部第
4回 総会において発表 した。)
緒 言
Candida副 あご幽s(以 下(瓦 認ゐ.)に よつてお こるカソ
ジダ症Candidiasis(以 下C症 と略す)に つ いては,古
くCAST£LLANI1)の 記載以来各科 の領域 に汎つ て数 多 く
の報 告があ るが,殊 に近年,抗 生物質療法 の普 及に伴い
交 代菌現象の1つ として深在性C症 の増加 が報ぜ られ 一
般 の注 目を浴 びるにいたつた。
わが国 の深在性C症 については美甘 ら2)が 呼吸器系C
症 例,つ いで堂 野前等の原発性汎発性C症3),及 び呼吸
器 系C症 例の4)報 告を契機 として多数症例 の続 出を見て
い る。 しか もC症,殊 に 内科領域C症 の重症型 にあつて
は的確な治療法に乏 しく従つ て予後 が概ね不 良であるこ
とを考え ると,本症 治療 法の研究 の緊要性が痛感 され る。
このよ うな現状 に鑑 み私は各種抗 真菌剤並びに抗 カンジ
ダ免疫血清等 による感 染防禦 並に治療 効果を実験的に検
討 した ので,こ こにその成績を報告す る。
舞1章 実験的C症 作成 に関す る研究
実験的C症 についてはCASTELLANii)を 始め,RA・
DELLiS), ST4VALL$),URSO7),SALVIN8・0),SCHWAKZ翼o),
岩 田1]),加 納12)らが各種実験動物を用いて研究を行つて
い るが,こ れ 等は病理組織学的検索を主 目的 とした もの
で あつ て,抗 カ ンジ ダ剤の感染防禦 または治療効果 判定
に適す る実験 的C症 の作成 には役立たない。
そこで著者 は各種の動物について,種 々なる菌量及び
接種方 法に よ り感染せ しめ,上 述 の目的 に適す る実験 的
C症 の作成 につ き検討 した。
1.実 験材料並びに実験方法
わ 使用 したC.adb.は 当教室 において汎発性C症 例
か ら分離 した ユ001株,又 肺C症 例か ら分離 された1株,
N株,阪 大微 研にて分離 された1002,1005株,順 天堂
大学 土 屋教授 よ り分与 され たHarvard株,Duke大 学
CONANT教 授 よ り分・与されたDuke株,東 大 美甘教授
か ら分与 されたM株 等の各菌株を用いた。
2)接 種 にはSabourauddxtroseagarで37。C,48
時 間培養 した ものを用いた。尚菌数計 算は赤 血球算定法
に準 じて行つた。
3)実 験動物 としては家兎(体 重2kg前 後),マ ウス
(NAZ, DM,dd系,12~209),ラ ツテ(1009前 後),モ
ル モツ ト(2509前 後),ハ ムス ター(1509前 後)を 用
いた。
4)接 種方法は常法に従い,静 脈 内,腹 腔内,皮 下,
肺 内,気 管内t鼻 腔 内,経 ロ,睾 丸内にそれぞれ接種 し
た。
5)接 種後 は死亡率,死 亡にいた る日数 を記録 し,死
後剖検及 び各臓器 か らの σ. alb.の 培養 を行つ た。
6)静 脈 内接種 マ ウス,肺 内0気 管内接種家 兎及びモ
ルモヅ トにつ いては,接 種 後,逐 日的に1群3~5匹 と
して屠 殺 ・剖 検 し,肉 眼的に各臓器 を観察 する と共に,
主要臓 器の病 理組織 標本を作成 し,Hematoxylin-Ensin
染色法に よつて病巣部 の組織 反応 を,PAS真 菌染色法
に よつて組織 中のC. alb.の 検出を行つた。
7)静 脈内接種 マウスについてはa逐 日的に1群5匹
あて屠殺 ・剖検 し,肺,、 心,肝s脾,腎 の各臓器全体 を
磨砕 し,生 理的食塩 水を加えて全量を5ccと し,こ れ
を一定 の割合 に稀釈,そ の0.2ccをSabouraud寒 天培
地 に培養 して集 落数 を算定 した。
2.実 験 成 績
各種実験動 物に α ¢乃.を 接 種 した結果を纒 める と,
表1に 示す 如 くである。
先づマウスにおいては,静 脈内に大 量(5×106以 上)
のC.atbOを 接種 し た 場 合}死 亡率は接種 後数 日中に.
100%に 達す るがtか か る際は病 巣の形 成はか えつ て少
ない。 それ以 下の菌 量(1~5×106)を 接種 し,5~9日 目
に衰 弱,死 亡 した マウスでは 肉眼的に も病理組織学 的に
も主 として腎及び心に著 明な病 変が認め られ る。即 ち,
肉眼的には腎は腫大 し,白 色ない し黄色 の小膿瘍 が表 面
に散在 して穎粒状化 を星 す る。心表面に も同様 の小膿 瘍
の散在がみ られ る場 合が 多い。かか る際は逆培 養に よつ
て各臓器か らC.σ 乃.を 検 出簸 明 し うる。
病理組織 学的所 見 としては,腎 では主 として皮質に,
心では主 として問質に膿瘍,結 節 の形成 がみ られ,接 種
後2~3日 目では多核白血球,組 織球,単 球の浸潤が主
で あるが,7日 目以降にな ると多核 白血 球の浸潤が減 じ
て,単 球及び組織球 の侵潤が主 とな り,且 つ淋巴球 も更
VOL.6NO.1 CHEMOTHERAPY 73
表1.各 種実験動物 におけ るe.説.接 種成績の概括
験
物
実
動
マ
ウ
ス
家
兎
モ
ル
モ
ツ
ト
ラ
ツ
テ
タ
ー
ハ
ム
ス
種
法
接
方
静 脈内
腹腔内
使 用
菌 株 名
1002
1001
Duke等
同 上
的
変病
眼
要
肉
主
経
要
後
大
種
の
接
過
璽謁
接菌依
0.5~50
10~200
5~10以 上 で 数
日 中 に 完 全 致
死01~5で 半 数
死 亡,0.5以 下で 死 亡 を み ず
80以 上 で 数 日中
に 完 全 致 死,60~30で5~10日
に50%致 死,30
以 下 で 死 亡 せ ず
腎,心 に主 と して穎粒状化
培 養 陽 性
臓 器
各 臓 器
敗 血
症 型
限 局
膿瘍型
20120*1【
C
腎駄 騨 状化■ 各 臓 器
鍔灘 韻 膿L L不 定
肺 内110011 50 死亡 せず 朧 開 的鵬i 肺 膿瘍 部のみ
鼻 腔 内IHarvard}>2・ ・ 同 上1な し 7日 後各臓器共陰性
12/205/20*i
4/5
皮 下
睾丸内
1001
Duke
1001
25
1
同 上
同 上
皮下膿瘍 自然治癒 をみ る
接種睾丸の発赤腫大
・ノ・・1・1・ ・
経of・ …1>…1同
翻 目まで醐!
5/5
接種 睾丸部以外は陰{生
18120
貝 な し な し1・ ノ・・1・ ノ・・
静脈 内
肺 内
1001
Duke
M、 茎.N.
50~100 疑躇 芝離 織1 各 臓 器15/15
1001
Du ke
ii再 感染(皮下引155~1520灘 職 間 形成0
肺実質 に膿雛 節 を 薩 捌 肺 病巣部の:7/48*24・148
E
気管内 レ ・・2 38淘 上i同i
上}肺 の み18/3・*2i2・ ノ3・
皮 下
堕 眼房 内
静脈内
肺 内
気管内
皮 下
静脈内
1001
1002
Duke
1001
1002
1005
1001
1001
1001
1001
10~50 死亡せ ず
1
36.43
7.77
7.77
50
同 上
2~3日 目よ り約
半数死亡
死亡せ ず
同 上
同 上
ほ0日 目に衰弱著50
i明
皮膚の発赤→ 膿瘍→硬結→痂 皮→ 治癒
眼球 充血→虹 彩毛様体 炎→・疲痕 治癒
約1 j5に 心,腎 に膿瘍 を形 成
皮膚膿瘍 部のみ
(7~10日 目迄)48150
5/5
各 臓 器
肺実質に鵬 結節k薮 、洗 管ま肇)
肺 に散在性の結節,膿瘍
皮膚 の変化(家 兎の場 合 と同 じ)
同 上
皮膚膿瘍部5~7日 目まで
腎,心 に穎粒状化 各 臓 器
35 j4・!
17124
22124
18120
5/5
肺 内i・ … 35 死亡せ ず 肺に限局性膿瘍 険 膿 瘍 副 315
腹腔内い … 40 同 上1 腹膜に膿瘍形成
上1な
1なし1・!5 0/5
1轟 腔内1・ …85 同 し な し 0/5 0/5
註*1分 母 は接 種動物数,*2何 れ も初感染例
分子は 各型該当例数
● ● ●●
JA・ 肉 三'1958CHEMOTHERA P Y74
C.σ肱 静 脈 内 接 種 マ ウ ス の 肉 眼 的 及 び 病 理 組 織 学 的 所 見(("1.σ乃.1001株 静 脈 内 接 種,1群5匹)表2.
見所的学織組理病肉 眼 酌 所 見
C.dlb.*
菌
体
菌
糸
源巴球
応r
心
胞 細
腎
反軍
球
組織
球
白血球
層多
核
膿
瘍
数
結
節
*6菌
体
c,α'う細 胞 反 応
菌
糸
淋巴球
単
球
組織球
白血球
多
核
膿
瘍
数
結
節
そ
の他
の臓
器
心
腎
状
化
穎
粒
腫 願状
大1粒化
接種後
日数
接
種
菌
量
帯帯帯帯帯
帯什什帯朴
卦帯粁冊耕
帯朴帯耕耕
一
一
岬
一
一
十=
±±±
十十
十十
十
十十十十十
十十十十井
十
十耗
十十
井汁帯帯辮
粁惜告帯帯
朴井什井昔
昔井朴粁什
什什瀞帯帯
帯帯帯耕帯
一十=
一
一
一±
一
±
一十=
十
一±±
一
十
十十十十
十十十十十
十
十十十卦
十十井十十
帯井井卦帯
十什卦井井
一
一
十十昔十静
昔珊掛帯帯
十
一十
一十
十升帯昔帯
1ー
ー
-
日
ウ9
3.4×106
卦什帯井昔
静井粁朴什
十十±十十
十什井升朴
朴卦什什什
十十±十十
一十
升朴井暑朴
帯辮卦糾辮
+十十++
吾卦井朴升
惜惜鈴帯帯
十十吾十十
苔什升督升
朴粋十粋昔
十十十十十
一十
十
±
一
一
一士
十什惜十什
十昔昔十十
辮粁十升帯
十十十十十
帯辮帯耕帯
著朴十井昔
什十帯十井
什粋帯什什
耕耕耕耕帯
一十
一
昔
什什督什
帯辮僻耕帯
十十升十十
軒昔鋒若升
帯琳朴帯耕
十十十十十
粁昔粁粁暮
昔暮十升什
±
十
十
十
十
一十
一
十
一
十升暑十什
井暑帯什升
昔粁十昔軒
一
一
一
十十帯十十
井
冊辮帯冊
一
十朴昔赫卦
帯辮帯冊措
一+=
十十蒔十十
柵耕柵柵帯
-1--
ー
!ー
1
3
10
0.84x106
所 見 の程 度 に 応 じて 帯,軒,十,±,一 で 判 定 した 。率PAS染 色 法 に よ る組 織 中 のC .rxlb.の 多 少 に よつ て判 定 した 。
註
に敗血症 死を来す。 しか し毒力が弱いか,又 は少い菌量
を接種 した場 合は,心s腎 等に病巣を形成 せず,腹 膜,
腸 間膜 に大小不同の膿瘍を形成 し,死 亡 率は著 し く低下
す る。
又,マ ウスの肺内,皮 下,睾 丸 内i経 口的にそれぞれ
C./ /を 表1に 示 した 条件で接種 した場 合には死亡を
み ないが3接 種部位に限局 した膿瘍 の形 成をみ とめ る。
Cdb.静 脈 内接種 ぞウスのr臓 器培養 集落数 の経過
(Cdb。1001株 匪XIO6舞事肱内接種マウス1群5匹 の平杓値)
●一 賢
◎一 一一〇心
距 一一一噌 肝
←・… 。・→ 肺
ムー一一一一ム脾嘩・閑
隻、べ
改℃ミこ
、煎
、
に増加 して くる傾向であ る。PAS染 色法に よ つ て病巣
中 のC. atb.を みる と菌 糸(仮 性 菌糸)及 び菌体(分 芽
胞子)が 多数 認め られ るが,こ れ らの数に比 して上記 の
如 き細 胞反 応は一般 に軽度な よ うであ る。
今,σ. alb.1!株,3,4及 び1 '×1'静 脈内接種
マウスの肉眼的及び病理組織学的所見 の1例 を示せば,
表2の 如 くである。
また,C. al b.1001株,1×M'静 脈 内接種 マウ
スを,接 種後,2,4,6,9,12日 目に1群5匹
あ て屠 殺 し,各 臓器 の定量的培癒 を行 いi算 出 し
た集落数 を示せば,図1の 如 くで ある。 しか し接
種菌量 を2×106以 上,0ま たは0,5×106以 下 と
した場 合は死 亡ない し自然治癒に よつ てその成績
が不定 とな る。又1001株 の代 りに他 の菌株 を用
い ても略 々同様の成 績を得た。
腹腔 内接種 に よつては接種菌量,菌 力,マ ウス
の個体 差等に よつて感染の様相が異 るが動物通 過
に よつ て毒力の上昇をみた σ。r r.の3~6×107
接種 では,静 脈内接 種におけ る場合 と略 々同様 の
肉眼的,病 理 組織学的所見を呈 し,比 較 的短 期間
獲
(乙
10
8
6
4
2
;
VO」6,NO.1 CHEMOTHERAPY 75
しか し鼻腔 内接種 では何 等の病変 も生 じない。
次 に家兎の耳 静脈内に5×107以 上 のC.r r.を 接種
す る と,数 日後 に食思不振,衰 弱,呼 吸器症状又は脳症
状 を呈 し,4~7日 後に死亡す る。 この際,肉 眼的病変
はマ ウス静脈内接種におけ る場合に類似す るが,そ の程
度は よ りi著明であ る。
臨床上内科領域におい て比較的例数 の多 い気管 支,肺
C症 に類似 した ものを実験的 に作成す る 目的 で,家 免の
肺内及び気管 内にC.atb.の 接種を試みた ところ,膿 瘍
及び結節 の形成が認 め られ た。 しか しこの場 合,肺,気
管内へ直接C・ σ∫う.を 接種す る と厘 々敗血症 死を来 すの
で,予 め皮下にC.alb.を 接種 した後,肺,気 管内に再
接種 した ところ,敗 血症 死を来す ことな く,比 較 的限局
した病巣を形成 せ しめ ることが出来た。なお この際,皮
下の接種 方法 については,生 菌,加 熱死菌,接 種回数,
期 間等に関 し検討 したが大差がないので爾後の実験に際
しては皮下に1回 生菌を接種 し,7日 後肺及び気管内に
再接種せ しめ ることと した。
これ らの実験の ユ例 を示せば,表3の 如 くで ある。 こ
れはC.α 乃.1001株 の25×107を 皮下接種 し,膿 瘍 を
形成 した7日 後,さ らに肺 実質内に15.2×108接 種 し,
接種後3,7,14,21,35,70日 目に各3匹 宛雇殺,解
剖 し,そ の肉眼的所見及び病理学的所見 を経時的 に観察
したものであ る。即ち,肉 眼 的には,肺 内接種後早期 は
充血壊死を主 とし,7日 目頃 より膿…瘍,結 節の形成 が認
め られ,35日 目以後は撒 布性 の小結 節は次 第 に 消槌す
るが,比 較的大 きい限 局性 の結節 及び壁 の薄 い膿瘍は 略
略m日 目までみ られ る。 尚接種部 位の肋膜 に も早期 に
結節の散在がみ られ るが,そ の後次第に肋膜 が肥厚 し,
癒着を来たす。
病巣部か らのC.σ1ゐ.の 検出は14日 目まで陽性で,
その後は膿瘍,結 節の内部,壁,周 辺部か ら培養を試み
たが,い つれ も陰性に終つた。
その病理組織学的所見は3~7臼 目では軽度 の出血,
充血が主で,肺 胞壁は単球a組 織球 の浸潤 に よつ て肥厚
を呈 し,間 質性炎 の形 を とる。7~14日 目と進む につれ
て,膿 瘍部は大 とな り,そ の部 に は 多 数 のC.α 肱 菌
糸,菌 体 と共 に,多 核 白血球 及び少数の単球を認 める。
さ らに21~35日 目に及ぶ と大型 の単球,線 維芽 細胞が
増加 し,病 巣部は次第に被包,限 局化 され,病 巣中の
C.alb.は 漸次 その数 を減 じてゆ く。70日 目には病巣周
辺部 に血 管新生が認め られ る。なお興味あ る こ とは14
日目以 後の膿瘍 周辺部に多核巨細胞の 出現を認め ること
で,そ の性状は細胞の中心部に クロマチ ンの比較的少い
核 の集合がみ られ,ラ ングハ ンス型 と所見を異にする点
である。
気管内接種 の病変は,肺 門部 を中心に両側の中,下 葉
に著 しいが,そ の肉眼的 及び病理学的所見,病 巣部 よ り
の逆培養成績等 の経過は肺 内接種 の場合 と略 々同様の傾
向を示す。ノ
C. alb.の 皮下接種 によつ ては膿瘍形成が認め られ,前
眼房 内接種 に よつては虹彩 毛様 体炎 をみ とめたが,い つ
れ も限局 的変化 のみ であつ た。
モルモ ッ トに おいては,各 接種法に よつて得た結果は
家 兎の場合 に類 似するが,一 般 に病変は少い 様 で あ つ
た。
ラヅテにおいては静脈内接種 で家兎 と同様 の病変 の形
成 をみたが,ハ ムスターについて行つた実験 では現在迄
の ところ0比 較 的大量 を接 種 したに不拘 ず,殆 ど明 らか
な病変の形成をみ なかつ た。
以上の実験成績 よ り,マ ウス,家 兎}ラ ッテに対 して
はC. alb.の 病原1生が比較的大であ り,か つ これ ら動物
において種 々の接種法に よ り作成 した実実験的C症 は,
これを1 Jの 全身撒布に よる敗血症型 と,限 局的な
膿瘍形成 を示す膿瘍型 とに2大 別 しうることを知つた。
そ こで爾後 の感染 防禦,治 療実験には主 として この2つ
を用 いること とした。
表3。t /.肺 内接 種家兎の肉眼 的及び病理組織学
的所 見C. rxlb.1001株25×107皮 下 注射 後7
日目に家兎右肺 実質内に15.2×108接 種,家
兎1群3匹
接
種
後
日
数
肉 眼 的 所 見
注射 側肺
限
局結
節
充
血壊
死
膿
瘍
撒布
結
節
肋膜
結
節
癒
着
肥厚
病巣部
よりの菌培養
病理組織学的所見
肺 病 変(Hema-
toxylin--Eosin
染 色)
結 職 線
肺胞壁肥厚
出
血
充
血 節 瘍
維
化
C.1 f.
(PAS
染豊皇菌 菌
体 糸
土
十十
苔帯朴
昔十十
卦什
牽
十十十
朴什朴
帯惜耕
一
一
一
一
一
一
粋什
+
帯帯
帯
十±
十
±十±
一+=
一一}
什昔昔
昔朴什
什十十
十
十±±
+朴+
朴十什
什朴朴
帯柵耕
十十十
十十
十
十十十
十
十±
一十
一
一
一
一
一
一
一
一
一
十十督
十十
十
一
一
一
十十
十
十
十
一
十
十
十
十
一
一
二
L
ト
十
一
【
一
一
一一
一
一
一
昔什督
辮帯
碍
昔
一
什什什
耕耕昔
帯帯耕
に
量
世
十十
十
十
廿十
什辮辮
一一一
一一一
一什粋
耕辮耕
耕析辛
耕辮惜
帯昔昔
什粋
什
僻
柵什
粁
卦昔
.枡辮紐
柵耕耕
昔耕
一
辮惜辮
帯什昔
ー
ー
1ーー-
ー
ー
ー
3
日
7
17
21
35
70
註 一,±,十,井,冊 は 病 変 の程 度,(λ ¢乃.の
多 少 に よ り判 定 した(以 下 の表 に お い て も同 様)
76 CHEM◎7HERAPY JANI.91958
第2章 抗 カ ンジダ剤に関す る研究
内科 領域におけ る深在性C症 の治療 には従来,主 とし
て沃 度剤の内服,Genfiianvioletの 静注等 が行 わ れ て
来 たが,そ の効果は確実ではない。 また最近 には多数の
抗 真菌性抗生物質が分離 され ているが,な おその効果の
不 明な ものが多い13>。
そ こで著者は従来 の各種抗 真菌 剤並に新に登場 しつつ
あ る抗真菌性抗生物 質につ き試 験管内及び動物実験を通
じてそ の有 効性 を検討 して見た。
L試 験管 内実 験
実験 方法:培 地はSabourauddextarosebroth(pH
5.0~6.0)を 用いた。被験 物質 は最初 それぞれの溶媒で
溶解後,上 記培地 で倍数稀 釈 し,全 量を2ccと した。
これに 同じ培地 で2日 間 前 培 養 したC.4あ.(1001,
Harvard株)の 菌液を1白 金耳宛植菌 し,37。C,48時
表4.抗 真菌性抗 生物質のC.認 ゐ.最小発育阻止 濃度
(Sabouraud液 体培地使 用)恥
抗生物質名
Chromin
aEurocidin
Aureothricin
PolymyxinB
Trichomycin
Candimycin
Aurevfacin
Virゥcin
AntipyriculinA
Nystatin
LTnam ycinB
No.342
Datemycin
Amphoteric三n
A
Amphotericin
B
Toyamycin
M-1
単 離 者(供試者)
若 木
田研酵
武醗(
沢有
辺
梅
万
田
(
(
谷沢
田研酵
細藤
武醸
(
!」~
〃
〃
'
脇醐祠瓢
藩
昭藷
田研
屋
酵武醗
黒
(
(Squibb)
ハノ脇醐謝
い
薇
儀
産生菌株名
3'.
`加o物genus
3≠.
σ」う〃6彦∫o%だ
St. ; fdrc伽`ご 銘3
: r吻 甥・ジ紹*3
st.hrachijaensis
st.No.138
st.64-F
3≠.3292
s≠.
kitasawaensis
st.%傭 アsei
s彦.ノ伽8茗o娩3
3彦.goμ 、9召70κ
β.subtilissp,*3
3〃 ψ ≠o獅ツご6s
sp・
〃
〃
〃
最小発育阻止濃 度
(mcg1搬1)
0.36~0.8
1.5
15.0
100.0
mfg:0.039*4Na:0.078B-a10.017
問 目の 渥 濁 度 を 肉 眼 的 に.対照 試 験 管 と比 較 して 最 小 発 育
阻 止 濃 度 を 判 定 した 。
実 験 成 績:抗 真 菌 性抗 生 物 質 並 に そ の 他 の抗 真 菌 剤 の
C.鋤.に 対 す る 最 小 発 育 阻 止 濃 度 は それ ぞ れ 表4及 び
表5に 示 す 如 くで あ る。
i)抗 真 菌 性 抗 生 物 質 中,最 小 発 育 阻 止 濃 度 の 最 も小
さい も のは'Frichomycinで あ り,就 中 ア ル ミナ 吸 着 法
に よつ て 抽 出精 製 せ ら れ た 製 剤B-ALの 最小 阻 止 濃 度
は0.019mcg/ccで 抗 カ ンジ ダ作 用 が 最 も大 で あ る。 そ
の他1mcg/cc以 下 で 発 育 阻 止 を 認 め た も の にChromin・
Amphatericin B,Tayamycin,M-1が あ り,Eurocidin・
Aureofacin,Virosin,AutipyriculinA(Antimycin),
No.342,UnamycinBは01.56~6.25mcglccでC.
alb.の 発 育 阻 止 を 示 す 。 そ の 他Amphotericin A,
PalymyxinO s,AureothricinsDatemycinの 最 小 発 育
阻 止 濃 度 は1 !ノcc以 上 で あ つ た 。
ii)色 素 剤 及 び そ の 他 の 合 成 剤 に つ い て 検 した 結 果
では,水 銀 製 剤 で あ るMerzaninに 最 も 強 い 抗 カ ンジ
ダ作 用 がみ られ,0。078mcg/ccで σ・atb.の 発 育 阻 止
を認 め た。 色 素 剤 中Gentianvioletは5・O mcg]cc,
0xyquinゥline誘 導 体 中$-Hydraxyquxnalin.eがfi. 25
mcglccで,こ れ らは比 較 的強 い 抗 カ ンジ ダ作 用 を 呈 し
衷5.各 種 抗 真 菌 合 成 剤 の(Σ 認う.最 小 発 育 阻 止 濃 度
(Sabouraud液 体 培 地 使 用)
薬 剤 名 1最 小発育阻止
濃 度(mcglcc}
3.12
1.56
1.56
1.56
3.12~6.25
2。5~5.0
6.25
100
10。0
0.62~2.5
0.31~0.62
0.31
*1st .;S魏 ψ≠o伽グ083
*2sp .;species
*3β .;st〃%3
*4精 製 法 に よ る略 号
Gentianviolet
Methylenblue
Brilliantgreen
Sodiumethylmerculi-thio-
saUcylate(Merzonin)
Parahydroxybenzoicacidmethyl,
propylandethylesteres(Paraben)
Dehydroaceticacid
8-Hydroxyquinoline
8-AzoquinQIine
5-Methyloxyquinoline
7LMethyloxyquinoline
5,7Dinitroxyquinoline
2-Methyloxyquinoline
2-Methylmercap七 〇1,4
照phtoquinone(V.K3)
1,4Naphtoquinone
6,7Dimethylnaphtoquinone
2。Laurylmercapto]卜 丁.Q.*コ
2-AminoNQ. ,
No.356substances*2
5.0
50.0
200.0
0.1 '
62.5
20,0
62.5
62.5
31.2
31.2
325
500
250
15.5
15,5
62.0
62.0
5.0~20.0
註;*1N. Q.;Naphtoquinone*2北 里 研 西 村 氏 合 成
VOL6NO1 CHEMOTHERAPY 77
たが,そ の他 の合成剤では余 り強 力な ものは なかつ た。
II.動 物 実 験
1ボ 毒 性 試 験
各種抗 カ ンジダ剤 の 伽2加oに おけ る効果 判定 に先立
ち,そ の毒性 を検す るこ とが必要 であ る。そ こで被 験薬
剤 をマウス(129)の 腹腔 内及び静脈内に注射 し,又,
経 口的に投与 してそ の後 の死亡率 を観察 し,急 性 毒性及
び慢性毒性 を検 した。先づ腹腔 内注射に よる急性毒性試
験は,表6に 示す如 くである。即 ち,抗 真菌 性抗生物質
の完全致死量 について見 ると,Virosin,Antipyriculin
A及 びAureofacinで は2mglkg前 後,Trichumy-
cin,Candimycznは 、4~5mglkgで あつて,毒 性 は相
当大である。 これ らに 比 してChromin,Eurocidin,
Nystatin,UnamycinB,No.342で は20~30mg/kg
で,や や毒性 を減 ずるが,急 性毒性の低い 点 で はAm-
photericinA&B,Datemycinが 注 目に 価 す る。 一・
方,合 成剤中 勿vitraで 抗 カ ンジダ作用 の大 で あつた
Mer20ninは62.5mg/kg以 上で 完全致 死 を 見,31.2
rngJkg以 下では死亡 を認めない。 静脈 注射に よる急 性
毒性は略 々腹腔内注射時 の毒性値 に平行を示 したが,爾
余の実験に関連が少 いので省略 する。
次に経 口投与に よる慢性毒性試 験では,各 抗生物質を
1日1回 連 日10日 間経 口投与 した結果,Trichoxnycin,
UnamycinBは36 mg/kglday以 下 で は全 然死亡をみ
ず,Candzmycin,Nystatin,No.342に おいては60
mglkglday以 下 では亡死 した ものはなか つた。
又腹腔内注射に よる慢性 毒性 試験の結果,Trichomy一
図2
100
表6.抗 カ ンジダ剤のマ ウスにおけ る急性毒性試験
マウス腹腔 内注射,1群5匹(NA2)
観察期間:7日 間
薬 ニ斉 名
Chromin
Eurocidin
Trichゥmycin
Candimycin
Aureofacin
Virocin
Antipyriculln
Nystatin
UnamycinB
No.342
Datemycin
AmphotericinA
Amphoterici蹴B
Merzoni益
LD重oo*I
mg/kg
LDo*2mg/kg
>25
>25i>4.21
>5.o;
>2,1・
>1.67i
>1、45,
>330
>33
>33
>62.5
1<・2.5
<6.25
<1,0
<1.4
<0.5
<0.42
<0.72
<16.6
く8.3
<16。6
<500
<130
<65
<31.2
単 離 者 の
報 告LD50mg/kg
26
22
2.5
1~5
0.82
7.58
20~26
20~26
27
1,000
450
280
註:*i完 全 致 死 を来 す 量
㌔ 致 死 に至 らぬ量
C121,CandimycinOAureofacin,Nystatin,No.342は
5~2mglkg/day以 下 で は10日 間腹 腔 内連 続 注 射 に よ
つ て死 亡 を み ず,DatemycinrAmphotericinBは 急 性
毒 性 試 験 の場 合 と同様 に毒 性 が低 く60mg/kg!day以 下
で は 死 亡 を み なか つ た。 又Merzoninは13mg/kgJday
以 上 では 死 亡 す る もの が あ り,6mg/kg/day以 下 で は 死
亡 を見 なか つ た。
抗眞菌性抗生物員にぷる鳳染防禦実験α}(死 亡率)
i欝 瓢 同時腹一(麓 脇希儲 鞭}同 時腹腔
2 4 6 8
1認ii)雛麟 艦 蹄 醐 寸
1'
凶 一x邑 一"働一蝋一 →1
5なハ∂αガど刀
1'
80
60
40
20
0 8
!Nぴ342
芦備"
2 162σ 日
!藷lv)織 糠 訴徽 騰 腔内注射
痂 ρ物 伽1~M
20B
2.0.α 必.腹 腔 内接種 マウ
スに対す る感染防禦実験
動物通過に よつて毒 力を上昇
せ しめたC.σ 乃.を マウス腹腔
内に接種 した場合の敗血症死を
目標 と してeこ れに対す る各薬
剤 の感染防禦効果を見 ることと
した。
実験方法:C.σ ∫う.の 各株 を
用いa接 種菌量 は各実験毎に予
備実験 を行い,4~10日 冒に80
~100%の 死亡率 を示す量 を選
んだ。 マウスは体重129前 後
のNAz,又 はDM系 を1群5
~10匹 として用い た。 各薬剤
は それぞれの溶媒で溶解後,生
理的 食塩水 で稀 釈 し,C.1 10腹
腔 内接種 と同時に腹腔内に注射
した。然 る後10~20日 闘に至
78 CHEMO「rHERAPY JAN;;'1958
図3杭 眞 菌 性 抗 生 物 賃 によ6感 染 防 禦 実 験(丑)(死亡率)
同時鞭腔肉注射
1講viD躍 瓢 騰 内注射1諾 難 鵬 翻 陥㈱ 寸
24681D
咲!蜘傑
-1櫛讐"
24681012日
る聞の死亡の経過を観察す ると共 に,死 亡 マウスについ
ては剖検所見及び臓器培養 をも行 い,感 染防禦 効果 を判
定 した。
実験成績:Chrゥmin,N◎,342,Nystatxn,Antipyri-
culinA,TrichomycinOEurocidin,Aurecfaczn,Ca-
ndrmycinに ついて,そ れぞれ10mcglmouseあ て腹腔
内に注射 した場合 の感染防禦 効果は図2,図3に 示す如
くで ある。薬 剤に よつて試供 の時期が異な るため同時に
比較す るこ とは 出来 なか つたが,Trichamycin,Chro-
minに は強い感染防禦 効果が み られ,Nystatin,A.u-
revfacin,Candimycinの 効果 も明 らかであ るが,N◎.
342で は弱 く,Euracidin,AutipyricuiinAで は対照
群 に比 し殆 ど差がなかつた。なお別に 行 つ た 実験では
Viracin,LTnamycinBに も感染防禦 効果を認め得 なか
つた。
抗 真菌性 抗生物質以外では 伽 癬 γoにおいて強い抗 カ
ンジダ作 用を示 したMerz◎ninで は図4に 示す如 く,可
成 りの感染防禦 効果 が認 め られ た。
3.治 療 実 験
上記 の感染防禦 実験に よ り感染初期 におけ る各薬剤の
効果をみた のであるが,次 に σ・σ畝 接 種後多少の時間
を経 てか ら各薬剤 を一定期 間投 与 してその治療 効果をみ
ることとした。治療実験 の実施 及び判定 には種hの 方法
があ るので,予 め この点 につき検討 した。
最初にC.atb.腹 腔内感染 の敗血症型 実験的マ ウスC
症 に治療を行 い,そ の死亡率 に よつて効果を判定す る方
法 を試みた が,敗 血症死 を来たすをこは大量のC. alb.を
図4理 εzzo〃功 による感染防禦 実験
名(死亡率)1謝 蹴llワ}itI司 時腹 腔 内注項寸
θo
60
40
20
対 照
"θrzoη2η)←一← や一x●・-x・→←一雄 一潔一噌
12日
要 し,又,死 亡の経過 も急速であ るた
め,治 療 期間に制約を受けざ るを得 な
か つた。
次 にマ ウス睾丸内に σ。alb.を 接種
し,限 局的膿瘍 型C症 を用い て睾 丸培
養 に よつて効果を判定す る方法 を試 み
たが,手 技が困難で,し か も実験結果
が不均一であ るため,治 療 実験に適 し
ない ことを知つた。
そ こで結局、C.¢乃.の 比較的 少量 を静注 した マウスが
治療実験に最適で あるこ とを知 つた。既述の如 く,マ ウ
ス静脈 内に敗血症死 を来 たさ しめない菌 量(1~2×106)
を接種 した場 合(図1),各 臓器中 のC.σ 肱 は肺,心,
肝,脾 においては接 種後2~4日 目か ら徐 々に減 少 し,
9日 目以降 においては著 明に減少す るのに対 し,腎 にお
い ては一時 減少の傾向 もあ るが,9~12日 目でも略 々恒
常 的に培養証明 し得 る。又病理組織学的 の検 索の結 果か
らも(表2)a腎 が主病巣で あるこ とが覗 え る。 これ ら
の点か ら,腎 の培養成績及びそ の病理組 織学的所見に よ
つて治療効果を判定す る方法 が最 も適当であ ると考 える
られ るのであ る。
その他v限 局的病 巣に対 す る治療効果判定 の 目 的 に
はa家 兎肺 内 σ。σ乃,接 種 に よる実験的肺C症 の病理組
織学 的検索を主 とした治療実験 を試 みた。
a)σ1 J.静 脈 内接種 マウスに対 す る治療実験
D腹 腔 内注射 による治療実験
試験管 内実験,感 染防禦 実験に よつ て効 果を認めた一・
部 の抗真菌性抗 生物質及び合成剤を中心 に治療 実験を試
みた。
i)抗 真菌性抗生物質,No・342,A、ntipyricuiixt,
Nystatin,. UnamycinB,Trichamycin
実 験方法はC. atb.Harvard株2×106を 静脈 内接 種
後,感 染早期,即 ち,1,15,24,36時 間 目に各抗 生物
質を等量,10mcglmouse宛,計4回}腹 腔 内注射 を行
い,そ の後放置 しr10日 目に屠殺,解 剖 し,肉眼 的所 見,
VOL.6NO.1 CHEMOTHERAPY 79
表7.C.atb.静 脈 内接 種 マ ウス に 対 す る抗 真 菌 性 抗
生 物 質 に よ る治療 実 験 総 括
(C.dlb.Harvard株2x106静 脈 内 接 種 後,
1,15,24,36時 間 目に 各抗 生 物 質 を1fl mcgj
mouseあ て 腹 腔 内 注 射,10日 間 観 察)
実 験 群
対 照 群
No.342治 療 群
Antipyriculin〃
UnamycinB〃
Nystatin〃
Trichomycin"
離
蜥騎
の伽
死
亡
率
(%)
各群
の
マウス数
2
0
0
0
8
0
Gり
9召
6δ
9臼
2
0
0
0
0
0
4
1占
り御
¶■
9臼
AU
O
《U
9臼
AU
「ム
「△
ーム
ー4
1義
電二
腎培養 腎の病理 組織所見103稀
性 のも1節・膿瘍)、C.認う.陽の 陪 性の も性 のもの
(%)1の(%)(%)
釈で陽搬(結 跳 変中
100
50
80
70
58
10
100
60
60
80
8
0
2
0
0
0
7
0
9
5
5
6
1
2
㍉治療効果
十
±
±
‡
灘 宅攣臨 灘 鑑 ㌻ 幡
較 した 。
即 ち,σ.¢Zう.1038株1.5×106を マ ウス 静 脈 内 に接
種 後,接 種 日よ り1日1回,Trich。mycin,Nystatin
を1Q mcg f mause宛,7日 間}腹 腔 内注 射 を 行 い,9
日目に 屠 殺,解 剖 し,肉 眼 的 所 見 を 観 察 す る と共 に 腎 の
定 量 培 養 を行 つ た 。
そ の 結 果,表9に 示 す 如 く,対 照 群 に 比 し,Nysta-
tin,Trichomycinい つ れ の治 療 群 に お い て も,肉 眼 的
表8.σ.σ あ.静 脈 内 接 種 マ ウス に対 す る抗 真 菌 性 抗
生 物 質 に よ る治 療 実 験
(e.dtb.Harvard株2×106静 脈 内接 種
接 種 後1,15,24,36時 間 目に 各抗 生 物質 を
1a mcg/mouseあ て腹 腔 内 注 射,10日 間 観 察)
実 験 群
腎の培養及び各臓器 の病理組織標本 を作成 しi各 項 目毎
に対照群 と比較 した。
実験成績は,表7に 総括す る如 く,10日 間の死亡率
は対照群の42%に 比 し,い つれ の治療 群で も低 く,各
治療群の間に大差は なかつ た。肉眼的所見 として,腎 の
腫大,穎 粒状化を呈 した ものが,対 照群では92%に 及
んでいるのに対 し,い つれ の治療 群で も低 率で,且 つ病
変が軽度であつ た。 次に一一側腎 の定量 培養を 行 つ た 結
果,103稀 釈で陽性 の ものは対照群の100%に 対 しi
AntipyriculinA,LTnarnycinB治i療 群では70~80%
で対照群 と大差がなかつた が,No.342,Nystatin治 療
群では50~60%迄 低下 し,さ らに'Trichomycin治 療
群では僅かに10%が 陽性であ るに過 ぎなかつた。一方,
病理組織学的検 索に よる腎病変(結 節,膿 瘍)を 認 めた
ものはTrichomycinrNystatin治 療群 に少 く,且 つ 腎
病巣中C.alb。 の菌 糸,菌 体 を検出 したの も,こ の2つ
の治療群に低かつた。
以上,総 括 的に述 べた実験成績の内,N。 ・342,Ny-
statin,Trzch。mycin治 療群についての詳細なデ ータを
例示すれば,表8の 如 くで ある。
以上 の実験におけ る観察各項 目を綜合 して各薬 剤の効
果を判定す ると,Nystatin,Trichvmycin治 療群にお
け る効果が最 も…著明であ り,No.342治 療群に もあ る程
度の効果が認め られ るが,AntipyriculinA・Unamy-
cinB治 療群では対照群 と大差が なかつた。
ii)Nystatin,Trichvrnycinの 連続投与
特に治療効果 の顕著 であつたNystatin・Trichomycln
につ き,さ らに比較 的長 期連続投与に よる治療効果を比
対 照 群
No.342
治 療 群
Nystatin
治 療 群
Trichamycin
治 療 群
腎肉眼的所 見
(腫大・穎粒化)
十帯昔
什十帯十十耕十冊
十
十
腎培養集落数(103)
0
0
0
0
0
2
0
0
2
0
5
0
0
0
0
0
0
2
0
2
1
0
2
0
2
2
2
2
2
2
2
2
>
〉
〉
〉
〉
〉
〉
〉
2
0
0
0
5
0
6
4
0
0
5
0」
噌上
FO3
腎病理組織所見
変鋤節
病億版
十十帯惜紐粋帯什什帯十
十
一±
1:63十 ト
3-
31圭
7±
8=00000000203 ±
病 巣 中 の
c.al b、
什什十
十
一十
「骨
一卦
十
十
十
8◎ CHEMO「rHERAPY JAN。,1958
表9.C.1 !.静 脈 内 接 種 マ ウ スに 対 す るNysta#in,
Trichomycinの 治療 実 験
(C.! f.1038株1.5×106静 脈 内接 種9日 間
観 察)
実 験 群
対 照 群Saline*10.2cc/mvuse
7日 間 腹 腔 内注 射
Nystatin治 療 群
NystatinIO mcglmouse
7日 間腹 腔 内 注 射
Trichomycin治 療 群
Trichomycin
10 mcg/mouse
7日 間 腹 腔 内 注 射
的見)
眼
腎
肉所(
十赫
一十
十
一十井十
十
十
十
一
一十
、十卜
腎培養集落数
102*2
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
4
0
0
0
2
2
2
2
2
2
1
2
2
2
>〉〉〉≧
〆
〉〉〉
>200222548221560442652
>20030
1712400020
103*2
>20090
>200119
1101204261
>20016
2826310215
2
3
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
種 々な る用量 に よ り治 療 実 験 を 行 つ た。
即 ち,C. at b.1040株1.7×106,静 脈 内接 種 後,Am・
PhotericinBの 生 理 的 食 塩 水 浮 游 液 を マ ウ ス 当 り,100
mcg,3DO mcg,1 mgあ て}接 種 日よ り5日 間 腹 腔 内 に
注 射 し,60目 に 屠 殺,剖 検 した 。
実 験 成 績 は 表11に 示 す 如 く}6日 間 の観 察 で 死 亡 率
は 対 照 群 が70%で あ つ た の に 比 し,治 療 群 で は10%
以 下 で あ り,平 均死 亡 日数 の 上 で も,治 療 量 に 応Lて 差
が み とめ られ た 。 腎 の 培 養 を 行 つ た 結 果 で も治 療 群 に 明
らか に 培 養 集 落 数 が 少 くy殊 に1mglmouse治 療 量 で
はs対 照 群 に 比 し著 明 に 少 な か つ た 。
v)Merzanin
C.dlb.1001株1×106静 脈 内 接 種 後Merzoninを0.4
mcg・,o。02mcg/m◎useO又OTrichomycinを10mcg/
mouse宛y接 種 日 よ り8日 間 腹 腔 内注 射 した 。 又 別 に
Merzaninを1mcg/mouse宛8日 間 筋 注 した 。 そ の 結
果,表12に 示 す 如 く,MerzoninO.4 mcg/mouse治 療
群 で は}firiehomycin治 療 群 に 比 し,や や 劣 るが 腎 培
養 集 落 数 の上 で 効 果 が 認 め ら れ た 。 しか しMerzonin
O.02 mcg/mouse腹 腔 内 注 射 群 及 び 別 に 行 つ た1 mcgl
mouse筋 肉 内注 射 群 に お い て は,対 照 群 と大 差 な く治
療 効 果 を 認 め な か つ た 。
yr)そ の他Gentran vi。1et4mcg/mouse,Brilliant
greenlO mcg f mause,SodiumiodideO.8mg/mouseを
そ れ ぞ れ σ.σ彦δ.静 脈 内 接 種 マ ウ ス に8~9日 間,腹 腔
註*1滅 菌 生理的食塩水(以 下同 じ)*2稀 釈倍数(以 下同 じ)
所 見 並 び に 腎培 養成 績 の上 か ら,明 らか に 治 療 効 果 が 認
め られ る が,Nystatinに 比 し,Trichvmycinの 効 果 は
よ り優 つ て い る。
iii)Datemy¢in,Trichorn[y¢111
Datemycznはin拶 ∫〃oの 抗 カ ン ジ ダ作 用 は 弱 い が ・
勿vivoに お い て 抗 カ ン ジ ダ作 用 を 示 す とい わ れ て い る 。
そ こでC. alb.Harvard株1・5×106を マ ウ ス静 脈 内 に
・接 種 し,接 種 日 よ り6日 間,Datemycinlmg/mouse,
・また これ と比 較 す る た めTrich◎mycin10mcg/mouse
を それ ぞ れ腹 腔 内 注 射 し,腎 の 肉 眼 的 所 見 及 び 培 養 成 績
を 比 較 した が,そ の 結 果 は 表10に 示 す 如 く,'1'rzcha一
加ycin治 療 群 に 比 して 劣 るが,Datemycin治 療 群 に も
多 少 の 効 果 を認 め 得 た 。
iv)AmphatericinB
AmphoteracinBに つ い て はS`TERNBERG14)ら が
C.alb.感 染 マ ウス に 治 療 効 果 を 認 め て い る。 本 剤 は毒
性 が低 く,大 量 を 投 与 し得 る利 点 が あ る0そ こで本 剤 の
表za.C. atb.静 脈 内,接種 マ ウ ス に 対 す るDatemy・
cin,Trichamycinの 治 療 実 験
(C. atb.Harvard株1.5×106/mouse静 脈 内
接 種,10日 間 観 察)
実 験 群
対 照 群Saline
O。2cc/mouse
80間 腹 腔 内 注 射
的
見)
眼
腎
肉所(
十十
十
腎 培 蒸 集 落 数
102
《U(り
OVOVnVO
4
(V(り
0
0vO
《U2
ワリワリワのワリワの
ゐ
〉
〉
〉
〉
>
〉
103
>200>200
102>200
32>200
6
104
>200187323343
9e射
群
㎝注
㎞
加
m内
騨療踏醗
お
D
治
D
日8
Trichamycin
治 療 群Triehomycin
IO mcg jmouse
8日 間腹 腔 内 注射
=>2器'一・72
+>200
=i91
8'
2ゴ6
54
8
1
iaZ
0
、9
1;
五4
AU
O
-占0
0
噌↓Qり0
4
0
AU
000000
VOL.6NOa CHEMOTHERAPY 81
表11.(二 σ」う.静 脈 内 接 種 マ ウ スに 対す るAmphゥtericinBの 治 療 実 験
(C.rxlb.1040株1.7~106静 脈 内接 種6日 間 観 察)
実 験 群
治 療 量
対 照 群 AmphotericaB治 療 群(腹 腔 内 注射,5日 間)
i100mcg/mause/day
死 亡 率1 9J13(70%) 1110(IQ%)
平均死亡 日数(6日 間観察)
腎肉眼的所見
並
腎培養集落数
4.3日 5.8目
腎肉眼所 見
十十
十十十
一十
一[十十十
1Q2
0
00
0
0
0
2
1
6
1
0
0
0
3
00
0
00
6
6
3
4
0
0
0
1
2
2
2
2
2
1
1
1
2
2
2
>>
〉
〉
〉
〉
〉
〉
103
11469387
102859
802623864852
腎肉眼所 見
102
0
2
2
2
0
2
1
3
2
8
震り
ー
103
0050
001
000
3・・mcg/mause/day】 1mcglmouse/day
1110(10%) 0110(0%)
5.9日 6.0日
腎肉眼所 見
Za2
1
0
1
6
0
0
0
0
0
0
1
103
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
腎肉眼所 見
102
0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
103
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
表12.C.α%.静 脈 内接 種 マ ウス に 対 す るTri-
chomycin,Merzoninの 治 療 実 験
(C。σ」う.1001株1×106静 脈 内接 種9日・間 観 察)
表13、C.σ あ.静 脈 内 接 種 マ ウス に 対 す るTri・
chomycinの 経 口投 与 治療 実 験(1)
(σ.認う、Harvard株1×106静 脈 内接 種
9日 間 観 察)
実 験 群
対 照 群Salineo.2 cc/mvuse
8日 間腹 腔 内 注射
Trichomycin
lUmcgf mouse/day
8日 間 腹 腔 内注 射
Merzvnin
O.2 mcg/mvuse/day
8日 間 腹 腔 内 注 射
貯曜射蹉
n加腔
㎡
㎎腹
zom間
α02
日
M
q8
的見)
眼
腎
肉所(
十
十
十
十
十
十
十
十
十
十
腎培養集落数 実 験 群
102
>200
>200
>200
>200
>200
-ゐ
可ゐ
9創
9耐
9耐2
49
4
63
104
>200
>200176
>200
>200
>200
103
9
6
1
3
0
1
3
4
7
8
対 照 群Saline
O,2cc/mouse
8日 間 経 口投 与
AU
《U
O
《V
O∂
Trichamycin200mcg/
mouselday
8日 間経 口投 与
3
0
7σ
4
8
1ふ
つ》
ハ◎
つり
8
7.
1
1
1
9創
鑑》
ワ.
Trichamycin
20 mcgj
mouse/day
8日 間 経 口投 与
Trichomycin
2mcg!
r糠ouse/day
8日 間 経 口 投 与
的見)
眼
腎
肉所(
十
十
十
十
十
十
十
十
±
腎 培 養 集 落 数
・・21・ ・8
>200>200>200>200
74
72
>20010816
196
71
96
68
7
104
6
9
1
9
5
3
2
1ニ
ー↓
ρQ
O
-ゐ
り白
-晶
}3匹(3一 輔 死亡)
4
2
AU
5
6
7
3
5
8
◎V
1
1
1
>200>200>200>200>200
26
7
4
2
1
0
0
114
109
98
38
17
2
ウ創
O
AU
O
《U
O
ウ臼
9
Qり
6δ
-凸
0
1
82 CHEMO7HERAPY JAN.,1958
表14.C.alb.静 脈 内接 種 マ ウ スに 対 す る'Tri-
chomycin経 口投 与 治 療 実 験(】1)
(C.認 う.Harvard株1x106静 脈 内 接 種
10日 間 観 察)
実 験 群
群㎜鯉
照郵㎞
醐
対飴9
Trichomycin
40 mcg Jmouse/day
9日 間経 口投 与
群㎜騨
照麟舗
対鉱
9
Tr呈chomycin
10mcg/mouse/day
9日 間 経 口投 与
的見)
眼
腎
肉所(
十十十十±
十±
一十
十
十
一
一十
十±
腎培養集落数
103
>20029333010
AU
4凸《U
AU
3
1
>1!11318147
>200
2
ウ臼ハ6
78{8
eO
遭4
104
7
3
6δ
1
0
3
0
1
0
0
0
>2007
31582
0
0
5
2
0
1
内 注射を行つたが,い つれ も明 らか な治療効果 を見 出 し
得 なかつた。
2.経 口投与に よる治療実験
前述 の腹腔内注射で特に効果を認めたTrichomycin,
Nystatinに つ き,さ らにC.6あ 。静脈内接種 マウスに
対 す る経 口投与に よる治療実験 を行 つた。
量)Trichornycin
C,σ乃.Harvard株1×106静 脈 内接種 後,接 種 日よ
り8~9日 間,'Trichamycinの 種 々な る量を毎 日,経 口
=投与 した成績は表13,14に 示す如 くであ る。即ち,毎
日200mcglmouseの 投与に よつ ては3~4日 目に 約半
数 が 下 痢,衰 弱,死 亡 し,こ の 量 は 多 き に過 ぎ る と思 わ
れ る。 之 に反 しe40 mcg,24 mcg,10mc9投 与群 に お
い て は,対 照 群 に 比 し,肉 眼 的 所 見 及 び 腎培 養 集 落 数 か
ら見 て 明 らか に 効 果 を 認 め 得 た が,1日2mcgの 少 量 投
与 は無 効 で あ つ た 。
ii)Nystatin
σ.σ あ.Harvard株1×106静 脈 内 接 種 後,1群 に は
接 種 日 よ り9日 間hTystatinの125ufm。useを,他 の1
群 に はNystatin200mcg/mause蓼 こ少量 のParabenを
混 じた もの を5日 間,そ れ ぞ れ 経 口投 与 した 。 そ の 結果,
い ず れ の 投 与 群 に お い て も対 照 群 に 比 し,腎 培 養 集 落 数
が 少 く7そ の 有 効 性 を証 明 し得 た 。
iii)そ の他AureafacinrVir◎S 121,Paraben(propyl
ester)等 の経 口投 与 に よ る治 療 実 験 を 行 つ た が,い つ
れ も治 療 効 果 を認 め 得 な か つ た 。
i▼)マ ウ ス糞 便 中 σ。α必.消 長 に 及 ぼ すNystati随,
及 びTrichomycixt経 口投 与 の影 響
臨 床 上 抗 生 物質 の 内服,殊 にTetracycline系 抗 生 物
質 の 服 用 に よつ て 糞 便,な い しは喀 疾 か らC.' alb.の 検
出の 増 多 を み る。 最 近 か か る症 例 に 対 し,抗 真 菌性 抗 生
物 質,殊 にNystatin,Trichomyc圭n.,の 内服 効果 が 報
ぜ られ てい る のでaこ の 点 に 関 し マ ウ スを 用 い て実 験 を
行 つ た 。
即 ち,C. alb.1001,1040株,16,20×107を 経 口接
種 した マ ウ ス を1群5匹 宛 の1)無 処 置 対 照 群,2)Au-
reomycin又 はAchromycinの 経 ロ投 与 群,3)2)に
Nystatin及 びTrichomyrcinを 同 時 経 口 投 与 す る群 に
分 ち,4~5日 間 に 亘 つ て,マ ウ ス糞 便 約0.19を2cc
の生 理 的 食 塩 水 に 浮 遊 せ しめ,そ の0.1ccをSabou・
raud寒 天培 地 で 培 養,発 生 した 集 落 数 を算 定 したo
そ の結 果 は 表16に 示 す 如 く,C.σ 乃.経 口接 種 後 の
無 処 置 対 照 群 で は2~3日 後 に 糞 便 中 よ り ℃, cxlb.を 証
明 し得 な くな る。 しか し・Aureomycin又 は,Achromy
表15.r r静 脈 内接 種 穿 ウ ス に対 す るNystatinの 経 口投 与 治 療 実験
(C・alb.Harvard株1×1'静 脈 内接 種10日 間 観察)(G. atb.Ha rva rd株1×106静 脈 内 接 種7日 間 観 察)
実 験 群
対 照 群Sai.ineo.2 cc jmvuse
9日 間経 ロ投 与
Nystatin
125u/mousef day
9日 間経 口投 与
肉眼的所 見(腎)
十十十十
十十
腎培養集落数
・・3卜 ・3
>200>200
>200>200126
3
11
29
100
0
293033
>20010
0
0
3
4
0
1
104実 験 群
nδ
1
2》7・OV
3
対 照 群SalineO.2 cc f mause
5日 間 経 ロ投 与
0
0
0
ハδ0
Nystatin200mcglmouse
Methy・lgaraben4〃
PropylparabenO.1〃
5日 間 経 口 投 与
的見)
眼
腎
肉所(
十十十
膿培養集落数
102
>200>200>200
>20036
0
0
2
2
1
1
り向
103
743914.6173
ハU
ハU
ハU
FO
O
VOL.6NO1 CHEMOTHERAPY 83
表16.(:. rxtb.経 ロ接 種 マ ウ スに 対 す るTetracycline系 抗 生 物 質 並 びに 抗 カ ン ジ ダi剤の 影 響
(マ ウ ス 糞 便 培 養 集 落 数 の 経 過)
C.alb.1001株160×106経 ロ接 種().dlb.1040株200×106経 口接 種
実 験 群
対 照
Aureomycin
4mg/mouse
5日 間経 口投 与
h
Aurevmycin4 mg f mouse
十
Paraben{識1=5儲
m◎use
5日 間 経 ロ
投与前
±
Aureomycin 4 rng/mouse
十
Trichomycin100μgl
rnuuse
5日 間 経 ロ投 与 }一
接 種 後 日数
・z
井
帯暮什帯帯
井軒廿昔什
±
±
井+十帯
井+十十
一昔赫+±
十昔暮+静
3 1 4
±±
十十
十十軒十
±
井十
十
一十十
十
5実 験 群
ー±
対 照
±±±十±
Achrarnycin2 mg f mouse
4日 間 経 口投 与
±+
=
4
Nystatin100μ ・glmouse
4日 間経 口投与
AchrarnyernZmg/mause
Ny'statin100μg加ouse
4日 間 経 口 投 与
投豊目lj
±
接 種 後 日 数
1
井
冊柵柵冊
÷
十
十昔
十
213
十昔±十十
÷
十=
十十
十±
十十十
井++
±
十±±
一±
4
十朴"+
十±
5
十昔十十十
±
註 培 養 した 集 落 数 を 柵>100,帯100~26,i十m~II,十10~0,±3~1で 示 す 。
"nの 経 ロ投与 をつ づける事 に よつ て糞便中 のC.dlb.
の検出日数は延長を来すが,こ の際Trichomycin,Ny-
.statinの併用に よつて,こ の検出 日数の延長をあ る程度
阻止 し得 るこ とを知 つた。 なおParabenの 併用に よつ
て も,軽 度なが らかか る効果を認めた。
0)σ.α 飴.肺 内接 種家兎に対す る治療実験
マウスにおけ る感染防禦 実験又は治療実験 で効果 のあ
つた ものの中か らTrichomycin,1Vlerzoninを 選 び,さ
らに以下の如 き方法 に より作成 した家兎 の肺C症 に つい
て治療実験を試みた。
即 ち,C.σ%0を 予め皮下接種後,7日 冒に肺内に2~
5×108の σ.albOを 注射 して肺C症 を作成 し,再 注射5
~7臼 後か ら治療 を開始 した。 その実験 方法の詳細は後
章 の免疫血清及 び併 用治療 実験 と一括 して表17に 示す
通 りであ る。治療効果は 治療終 了後,屠 殺剖検 し,肺 の
肉眼的及び病理組織学的所 見を対 照群 と比較判定 した。
Trichom)℃inの 経 口投与 に よる治療実験 は4回 実施
したが,そ の成績 は表18に 示す 如 く,第 互実験では対
魚 群 と大差 がなか つたが,他 の実験においては対 照群に
比 し,肉 眼 的所見 の上 で膿 瘍形成 の傾向が少なかつた。
病理組織学 的所見 の上 か らは,Trichomycin治 療群に
おい ては,病 巣周辺部 に線維芽 細胞の増殖に よる線維被
包化 の治癒 的傾向がみ られた。 さらにPAS染 色法に よ
表17.実 験 的家兎肺C症 治療 実験 の方法(総 括)
実
験
番
号
1
皿
皿
日
敏1
ま
での期間
、蟹
劃~
晒i
肺
内
×
までの期間
種
菌
量
晒
感
染
皮
下
×
蕪 霧駄
280 7
ロH
2007
2507
2507
5007
日
7
日
4。。1、。1、。口
200510
4005 10
薬 剤 名
1使腿
Trichamycin
免 疫 血 清
Merzonzn
Propylparaben
Trichor織ycin
免疫 血 清
Trichomycin
免 疫 血 清
Merzanin
Trichomycin
免疫 蜘 清
Merzanin
Prapyl&MethylParaben
(投
与
量
家
兎当り1日)
投
与
方
法
5mg経 口
1.Occ筋 注
0.5mg筋 注
4mg経 口
5mg
1.Occ
5mg
1.Occ
2mg
5mg
1.Occ
2mg
3十
7.5mg
口
注
経
筋
口
注
注
経
筋
筋
口
注
注
経
筋
筋
経 口
84 CHEMO「 「HERAPY JAN.,1958
表18.(;. rxlb.肺 内接種 家兎に対す るTfichomycin
の治療 実験(肺 病変の肉眼的並 びに病理組織
学 的所 見)(*表17参 照)
実験
番号*
1
皿
皿
肉眼的所見{病 理組織学的所見
充
血壊
死
ネ群験実
対照群{
T審鵯{
対 照 群{
T留h糊
対 照 群{
T紫h劉
対 照 群{
T審h黙{
結
節
膿
瘍
農i結
編:
鯵 …節
膿
瘍
肺胞壁肥厚
線
維
化
PAS
染色
菌
糸
菌
体
±
十±
一+=
暮荘+
井±±
一±±
昔中±
±十十
井肝十
井帯帯
荘+±
井井卦
昔
一十
十十十
十
一十
十冊軒
暮十
一
井井十
井
一±
十十
一
±十十
什耗什
昔昔十
井+昔
十十十
+卦帯
井柵+
十赫昔
十十井
十
十
一
一
一 帯
十十十
十
十十
一+=
十±十
帯卦帯
十+十
粁十井
十+十
十十十
十±十
暮十暮
荘十昔
井+赫
十+十
十
十
荘井
井軒+
帯帯
帯帯+
十耗
±±十
井帯
十十十
暮朴十
±±±
帯辮
帯
+++
±十十
一十十
十±十
帯柵什
+卦卦
帯帯続
+++
十十十
十升昔
卦昔十
十十十
帯静十
+粁升
る病 巣中のC.鋤.は 対照群に比 し治療群 ではや や少 く,
殊 に仮性菌 糸を伴つて増殖す る像 が少 なかつ た。
次 にMerzゥnin(1. 5,2mgの 筋 肉内注射 による治療 実
験を3回 実施 したが,肉 眼的所見 におい ては対 照群 と大
差な く,病 理組織学 的所見 の上で,Merzonin治 療 群に
線維化 の傾向が多少認め られたに過 ぎなかつ た。
又Parabenを 内服せ しめた2回 の実験 においては,
肉眠的にも病理組織学的に
も対照群との間に差を認め
なかつた。
以上の家兎肺C症 に対す
る治療実験 か ら見 てTr鮎1。 葱
chomycin経 口投 与 の 効 果80
が 最 も優 れ,Merzvninの
筋 注 これ に 次 ぐ がiPara・60
benの 内 服 の 効=果 は 明 ら40
か で な か つ た 。
20
第3章 抗 カ ンジダ家兎免疫血清 に関す る研究
抗 カンジ ダ実兎免疫血清 が肺C症 の1例 に有効で あつ
た ことをHIATT15)は 述べ,堂 野前 らも汎発性及び肺C
症 の重症例に用いて効果を認 めてい る。然 し未だそ の動
物 実験に関す る報告 に接 しない。 そ こで著者は抗 カ ンジ
ダ家兎免疫血清を種 々な る方法 で作成 し,マ ウス,家 兎
の実験 的C症 に用いてそ の感染 防禦 及び治療効果を検討
した。
免疫血 清の作成 方法 としては,実 兎にV・ σ危 の加熱
死菌 を皮下 ない し静脈内に血清 の凝集価 を目標 に増量 注
射 し,最 後 に生菌 を静注 した。 この際使 用菌 株に よる凝
集価 の差異はなかつた。
1。 試験管 内抗 カ ンジダ作用
免疫 皿清は2,560倍 稀釈に よつ て もC・ σ肱 を凝 集
せ しめ るが,σ. dlb.に 対す る殺菌な い し静菌作用 は認
め られ なかつた。
2。 感染防禦 実験
実験方法 は既述 せ る抗 カ ンジ ダ剤 の場合 と同 様,σ.
i r.1001株 の腹腔 内接種 と同時 に 免 疫 血清 を0.2cげ
=mause宛 腹腔 内注 射 した。用いた免疫血清はNo・7~14
まで の8種 で,そ れ らの凝 集価 は1.;~2,560倍 であ
つ た。
実験成績 は図5に 示す如 くsNo.8,9,11,12の 各免
疫血清共,多 少の差異は あ るが,対 照群が接種後3日 目
に100%の 死亡率 を示す のに対 して,免 疫血清注射群 で
はいつれ も死亡率 の低下及 び死期 の延長を見,感 染 防禦
効果を認め る。そ の他 の免疫血 清において も略 々同様 の
効果を認め得たo
次に免疫血清のかか る感染 防禦 効果 は血清を生理 的食
塩 水で倍数稀釈 し,8倍 稀釈 に よつて も尚,対 照群 に比
し効果を認め得た(図6)。
3.治 療 案 験
a)σ 。αめ。静脈 内接種 マウスに対 す る治療実験
免疫血清は マ ウ ス腹 腔内に0.2cc宛 連続10日 間注
図5抗 カン ジ ダ'家 鬼 免 疫 血 済 にょる感 染 防 禦 実 験
(死亡率)雛f蹴 謝 距)α2㏄}陥翻 注射(マ ゥスNAzlお¥6匹)
100
o2468蓄OI214・8
80
60
40
20
VOL.6NO.1 CHEMOTHERAPY 85
表19.免 疫血清作成方法,凝 集価及び治療効果(総 括)
免 疫 血 清No.
免 疫 方
抗 原 陳 量(・剛 注 射 方 法1回 数翻[糠 価
法 最 終
)果集よ
効養に定
療培数判
治腎落
り(No.38
鴇1巽1籍0.5-a・mgl皮下1・3回 ノ53日i・:8・
No.56
No.994''
lq5-2.・mgl
No.990 〃
''
1・8回〃3日 ほ:翻
1α5-6・ ・mgl皮 下→ 静脈内}・8回/73日i・:64・
十±
No.998C.rr.1001株
加 熱 死 菌 → 生 菌0.5-2・mgl編 内(死菌)(生菌)[・8回 ノ73日[・:32・
No.125No.130 加 熱 死 菌{幡 一・臥・mgl静 脈 内 9回 ノ30日 1:1280
1:2560十十
射 して も何等の副作用が見 られ なかつ た。
治療実験 の方法 としては,抗 カ ンジダ剤におけ
る場合 と同様yC.¢%.Harvard株1×106静 脈
内接種後,免 疫血清 を接種 当 日か ら9日 間毎 日皮
下注射 し屠殺後,腎 培養 集落数 によつ て治療 効果
を判定 した。 なお本 実験 に用いた 免 疫 血 楕 は 表
19に 示す如 く,免 疫方法及 び凝集価 に差 異 の あ
る7種 のものを用い た。
実験結果は表20に 示す 如 く,No.998を 除 き,
No.56,No.130,No.125の 各免疫血 清治療群
ではいつれ も対照群に比 し腎 の肉眼的所 見及び培
養集落数か ら見て治療効果を認め得 た。 この他,
No、38,No.990,No.994等 の免疫血 清につい
て も同様の実験を行つたが無効であつた。即 ち,
lQO
図6免 疫血清 稀繹にお6感 染防禦 実験
(死亡率秘 鞭 融同職 内注射
80
凱 乳5=遮 ご/
24681012日
←→ 対 照 群
か一→免疫血清8倍 稀樫"4倍"
a原 液
これ ら
免疫血清の効果 は表19に 見 られ る如 く,大 体凝集 価に
平行し,奏 効 を期す るには凝集価が1, 2$0倍 以上 の血清
を用いる必要 があ ると思われ る。
b)σ.α あ.肺 内接種家兎に対 す る治療実験
実験方法は表17に 記載 した如 くであ る。尚用いた免
疫血清の凝集価は1,280~2, 5fiO倍 の もので,そ の原液
1,0cc宛7~10日 間毎 日筋注 した。
実験成績は表21の 如 く,肉 眼 的所見 においては第1,
第 ∬実験で膿 瘍,結 節 の形成 が少なかつ たが,第 皿,第
W実 験 では対 照群 との間に大差がなかつ た。病理組織学
的所見 において,第 ∬実験の0部 及び第 皿実験において
線維化 の傾 向が治療 群に強 くみ られた外は特に著 しい治
療機転 の促進 がみ られ ず,ま たPAS染 色に よる病巣中
の分芽胞子及び仮性菌 糸の状態 も対 照群 と治療 群 との間
で大差が なかつ た。
以上か ら見て免疫血清療法は実験 的肺C症 に対 して軽
度 なが ら治癒促進的効果を有す るものと思われ る。
第4章 抗 カンジダ剤及び抗 カンジダ蒙兎
免疫血清の併 用に関す る研究
一 般に抗真菌 性抗生物質中,抗 カンジダ作用の強い も
のは毒性 もまた大 きい よ うであ る。そ こで もし2種 以上
表20・C・atb.静 脈 内 接 種 マ ウ スに 対 す る免 疫 血 溝
治 療 実 験(C.σ 」う.Harvard株1×106静 脈
内接 種 免疫 血 清0.2 ce/mouseあ て9日 間 皮
下 注 射10日 間観 察)
実 験 群
対 照 群
免 疫 血 清No.125
免 疫 血 清No。130
免 疫 血 清No.56
免 疫 血 清No.998
肉眼的所 見(腎)
十十十十十十
一十
十十
[十十
腎 培 養 集 落 数
101 102 103
>200>200146
>200172
>2001541105443nり
7暉バ7ρ0
のO
R)3
1ゐハ0
7`2
2
1凸2
9醒ワ一ウ臼【り
>200>20076
>200>200
2
8
2
4
1
8
2
2
2
3
4
4
0
4
3
つり1義哩↓
9
3
1
5
0
3
2
2
3
0轟」
盈U
FO
7.AU
4
9
7
8
ρ0
2
0
2
1ゐ
ー
2
1
1
0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
▼8
2
0
46
1
86 CHEMO↑HERAPY JAN.,1958
の薬 剤又は さ らに免疫血清を併用す るこ とに よ り効果を
増強せ しめ得れ ぽ1剤 の用量 を減ず るこ とが出来て臨床
応 用上好都合で あろ う。 この ような観点か らi著者は2,
3の 抗 カンジ ダ剤及 び抗カ ンジダ家兎免疫血清 の併用 に
ついて実験を行 つた。
1.試 験管 内実験
Sabourauddextrosebrゥthの 培数稀釈法 に よつて各
種 薬剤 の併 用に よ り効果 の増強 をみた結 果,表22に 示
す 如 くTrichomycinとMerzoninと の併 用に よ り効果
表21・C・alb.肺 内接種家兎に対す る免疫血 清
の治療実験
(肺病変の 肉眼的並 に病理組織学 的所 見)
(*表17参 照)
実験番号
1
互
皿
実 験 群*
肉眼的所見 病理組織学的所見
の増強を見た。 その他,Chromin,Eurocidin,Candi・
mycin,Aureaf acin,VKsら の間に も多少の併用効果 を
みたが一 著明ではな かつた。
2.感 染防禦 実験
感染防禦実験 においては図7に 示す如 く,Trichomy-
cinに 免疫血 清を併 用 した場合}長 期 間観察において単
独使用 に比 しt感 染防禦効果 の増強 をみた。
3.治 療 実 験
a)C.σ 乃.を マウス静 脈内に接種 し,抗 カ ンジダ剤
及 び抗 カンジダ家兎免疫血 清の単 独ない し併用治療 を行
い,腎 の培養集落数 で治療 効果 を調べた。 これ ら実験 の
内,表23に 示す如 く,Trichomycin,Me rzon inの 併
用,及 び表24に 示す如 く,Nystatin,`Trichomycin
充
血壊
死
結
節
昔井+
+++
十+
一
=
赫
{
ーモ
群
清群
照
窄
対
免治
膿
瘍
十
肋膜(醗
)
結 膿
+i_i+1+i一
肺胞壁肥厚
線
維
PAS
染色
菌 菌
糸体U拷1瘍鯛1
±十±
十
一十
井粁
十
十+十
一±±
±
一一
±
十十
±
十十
静
帯帯
+
一
朴
什十
±±
十
十十
十十
砦粁畳
十十十
卦柵柵
+静什
一
一
一
一十
十
十
十
十
十
±
±
荘帯帯
+什什
卦什暑
+卦什
升十暑
十+十
十井冊
一十+
十暮什
十十十
十十
一
十十十
ー
ー
群
清群
照
㌢
対
免治
赫+甘
±+±
帯昔帯
什什+
一
十十十
一±
}
十
十
十
柵骨帯
卦朴静
昔十赫
++十
十十十
十十十
赫+卦
+什+
昔+赫
十++
一
一
一
ー群照対
ー清群
灘療
免治
!ー
ー
群
清群
照
㌢
対
免治
十
十十
十十
十
昔什十
朴井升
帯赫十
昔朴朴
帯
図ワ7}``加 聖`ごη,免疫血漬併用にょる感染防禦実験
幌亡率)
一 対照群
100
80
60
40,
200
246δIO12ョ'16182022za26286
表23.σ.σ 乃.静 脈 内 接 種 マ ウ ス に.対 す る
Trichamycin,Merzanin併 用 治 療 実 験
(C.atb.Harvard株1×10s静 脈 内 接 種10
日 間 観 察)
実 験 群
昔升+
士++
帯帯帯
粁帯什
一=
+=
±
一十
十
十昔昔
帯帯粁
井升升
表22。Trichomyci獄,Merzonin併 用 効 果
(Sabouraud液 体 培地 使 用,混 濁 度 を肉
眼 的 に対 照 と比 較 帯 → 一 で 示 す)
対 照 群
SalineO.Zcc/mause
8日 間 経 口投 与
Trichomycin治 療 群
Trichomycin
10mcg/mouse/day
8日 間 経 口投 与
\Trichomycin\
ぺMerzonin\
0.125mcg
O.06
0.03
0.015
0。007
0.03
0
mcg
1.250.62 0.31
十十
十
0.15
十十什什井
0。078
帯
0
+井什帯帯帯
Merzanin治 療 群
Merzanin
O.4mcg/mouse/day
8日 間 腹 腔 内 注 射
Tr三choτnycinO
Merzanin併 用 治 療 群
TrichomycinIO mcg
Merzonin 0.4 mcg
震腔禺}8日 間
的見)
眼
腎
肉所(
腎培養集落数
・・1・ ・21・ ・3
十
一十
十
十
OOO
ハUウUO
3
8
0
5
0
ゐ
ワリ ゐウリ
〉
〉
ハUO
O
ハUO
O
AUO
ハUハU
ワほ
ワのウのワけ
〉
〉
〉
〉
〉
2>200>200
>20000
0>200
nδ
向◎
ハU
ハQ
gU
4
7
8
0
0
ハ0
3
ハU
で ウロ
>
0
0
0
0
AU
O
O
O
O
O
ワけウのりのウのリロ
〉〉〉〉〉
II
>揚
/
0
ハO
PO
O
O
OO
雪⊥
戸0ρ0
4
ワ●RV
2
8
1
2
0
3
2
2
0
0りーゐ
0
5
1
3
9
9一FO
09100
VO」6NO.1 CHEMOTHERAPY 87
の併用 に よつて,腎 培養 集落数の上で併用効果が認め ら
れ た。 しか し免疫 血清 とTrichomycin,更 に これ らに
Merzoninを 併用 した実験 では併 用効 果が明 らかでなか
つ た。
b)C.α`う.家 兎肺内接 種に対 して,Trich。mycin,
免疫血清,更 に この両者にMerzoninを 併 用 して 治療
実 験を行つた。 この際の実験条件及び実験方法 につ いて
は表17に 示す如 くであ る。そ の結果,表25に 見 られ
る如 く,肉 眼的所見の上で,併 用治療群 においては,対
照群 よ りも膿瘍形成が少 く,結 節数 も少なかつ た。又,
病理組織学的所見 におい て,併 用治療群で は肺胞壁 肥厚
の像が強 く,病 巣 の線維被包化 に よる治癒 傾向 も大 であ
つた。且つ,そ れ らの程度は,Trichomycin,免 疫血清
の2者 併用治療群 よ りも,こ れ にMeτ2◎nlnを 加えた3
者併用治療群 に更に強 くみ られ た。 又,3者 併用治療群
では,病 巣中のC, drb .も 分芽胞子 が少数 散在 して認め
られ る程度で,そ れぞれ の単 独治療群 及び対 照群 に比 し
て明 らか に少い。
以上2つ の家験成績を総括 す る と,Trich◎mycin,
Nystatin,Mer2nnin,免 疫血 清の内2種 以上の併用に
よ り治療効果 が増強 され るもの といい うる。
表24・C.rxlb.静 脈 内接 種 マ ウス に 対 す るNystatin,
Trichomycin併 用 治 療 実 験
(c.1 /.Harvard株1×1'静 脈 内接 種10
日間 観 察)
考 按
C症 の治 療 に 関 す る実 験 的 研 究 を行 うに 当つ て,先 づ
之 に 適 す る実 験 的C症 を 作成 す る こ とが 前 提 条 件 で あ
る。 著 者 は そ の第1着 手 と して 各種 実 験 動 物 に 対 す る
C.aib.の 病 原 性 の検 討 を試 み た ので あ る。 既 にCASTE-
LLANII)ら は 家 兎,マ ウス,ラ ツテ 等1まC.dlb.に 対 し
感 受 性 が 高 い こ とを述 べ てい るが,著 者 の 実 験 結 果 も略
々 同様 の傾 向 を認 め得 た。 然 しなが らe病 原 性 の 問 題 を
論 ず るに 当 つ ては,接 種 に用 い る菌 株,接 種 菌 量,接 種
方 法 及 び被 接 種 動 物 の 状 態 等,所 謂Host・Parasite-
relationsh呈Pに 対 し充 分 に 考 慮 を払 わ なけ れ ば な らな い
こ とは云 うま で も な い。
次 に これ ら実 験 動 物 にC.αZう.を 接 種 した 後 の 死 亡経
過,培 養 成 績,肉 眼 的 及 び病 理 学 的 所 見 に つ い て は
URSa?),SALVIltlg.9),ADRIANO監o)r岩::,加 納12)等 の
報 告 もあ る が,著 者 が 行 つ た 動 物 実 験 の結 果 で は,そ の
感 染 様 相 を 敗 血 症 型 と膿 瘍 型 に 大 別 し 得 る。 即 ち,C.
πあ.を 家 兎,マ ウス の 静 脈 内 に接 種 し た 場 合 は全 身 撒
布 を 見,一 定 量 以 上 の菌 量 を 接 種 した 場 合 は 敗 血 症 死 を
来 た す の で,こ れ を敗 血 症 型 と よ び,一 方,同 じ菌 を 家
兎肺 実 質 内 に接 種 した 場 合 は 肺 に 限 局 的 膿 瘍 を 形 成 す る
の で,こ れ を膿 瘍 型 と よぶ こ と と した 。
実 験的見)
眼
腎
肉所(
群腎 培 養 集 落 数
・・{・ ・21・ ・3
seou
群
m与
、W投
2
ロ
照
0
経㏄問
PU日
対飴
9
‡ ≧魏>2器s-.s140
十>20σ>20020
=1§18
一・310
十>200,543
十192216
=21ぎ8-100
/
表25・C. dtb・ 肺 内接 種 家 兎 に対 す る免 疫 血 清,
TrzchomyczntMerzonin併 用 治 療 実験
(肺 病 変 の 肉眼 的 並 びに 病 理 組 織 学 的 所 見)
(*裏17参 照)
実験麟号
Nystatin治 療 群
Nystatin
loOu/mouse/day
9日 間 経 口投 与
皿
十Trichomycin治 療 群 一
Tzichamycin十
10mcglmouse/day±
9日 間 経 口投 与 士
>20020
>200124
5
51『
12424
60
345
121
00
60
実 験 群*
対 照 群
{免 疫 血 清TrichQmycin
併 用 治療 群
糖 濫ycin}繕 療鐸
¥濫 轟n118鑑cg}9日=間経 口投 与
0
肉眼的所 見i病 理組織学的所 見
結
節
十
十十十
膿
瘍
劃 結結癒
随茸i節
十十十
什十暮
十 十十十
十
膿
瘍
筋胞壁肥厚
線
維
化
騰 撫注1王
一+=
帯昔帯
圭縢
0
0
7●462
0
ハU
(U
(U
ハU
ハU
nU
00
0
0
0
0
粁
+
什
一十
一
一十
一
±
十
±
対 照 群十
十
十十
一十
十
十
.m
…
.m
群
清
翼群
清
W
n療
熱鹸鼎
免T
併
免TM者
{
一ー
3
帯搬
汁
十十十
朴什
+
一幸
÷
.
惜
帯
朴
…
菰 §一隔
染 色
菌 】菌
体 係
柵
十十十
十十
十
帯
十什
一±
±
十
一十
一
十朴千
朴什卦
十
一十
一十
±
十
十
十
±
±
±
一十
一
十 ±±
±
辮什
帯
十±
十
十十
十 帯
±
88 CHEMOTHERAPY JAN。.195 8
実験的C症 の病 理組織学的所 見の特長 としては一般に
軽 度 の壊死性 変化を伴 う,弱 い炎症反応 に過 ぎなかつた
が,単 なる異 物反応の状態 とは判 じ難 い。
最 も重要 な ことは,こ れ ら実験 的C症 の内如何な る対
象を選 び,如 何な る方法に よ り抗 カソジダ剤ない しは免
疫血清 の治療 効果を判定す るか の問題 である。 この点に
関 し池本16),細 谷17),ら は主 としてC. alb.静 脈内接 種
マウスを用いてChτomin,Trichomycin等 の効果 を死
亡 率,病 理組織所 見に よつて判定 してい る。・
然 しan痂oに おけ る抗 カソジダ剤 の効果 の現 われ方
は,接 種に用 いたC.rxlb.一 被 接種動物一治療薬剤 の3
者 相互間 の種 々な る因子に よつて影響 さ れ る 処 が 大 き
く,従 つてた だ1つ の方 法のみに よつて効果を判定す る
ことは妥当 でない と考え る。殊に実験動物にf /.に
よる病変を形成せ しめ るには,相 当大量 の接種菌量 を要
し,か つ同一菌量 を接種 して も,菌 の毒力0実 験動物 の
状 態如何等に よつ て,そ の感染様相を異にす る場合が少
くない。加 うるに,強 力 な抗 真菌性抗生物質は一般に毒
性が大 きい 点に も実験 の困難性があ る。 これ らの諸点 を
充 分に考慮 し,ま た著者 の現在 迄の経験に基 き,動 物実
験に よ り抗 カンジダ剤の効果判定法 として以下の如 き方
法を考按 した。
1)感 染防禦実験:C.rxtb.を マ ウス腹腔内接種 と同
時 に薬剤を腹腔 内に注射 してyマ ウスの敗血 症死に対す
る薬剤の感染防禦効果 を死期,死 亡率 の上 か ら判定す る。
2)治 療実験:i)C.σ 翫 をマ ウス静脈内接 種後一定
期 間薬剤に よる治療 を行 い,主 として腎の肉晩的所 見及
び培養集落数 か ら治療 効果を判定す る。ii)家 兎肺実質
内にC.atb.を 接種 して作成 した膿瘍型肺C症 に対 して
治療 を行い,肺 病巣 の肉眼的,病 理組織学的所 見か ら治
療 効果 を判定す る。
以上 の3つ の実験結果を綜合 して全般的 な治療 効果 を
判 定す る。以下 これ につ いて少 しく説 明を加えてみ る。
感染防禦実験は 各薬剤 のスク リ戸ニ ングの意味におい
て優れ るが,COt f。 と薬 剤 とを同時 に接種 す るので多
少 伽vitroで のC.σZう.と 薬剤 との直接 作用が加味 せ
られ る欠点があ る。 この際,マ ウスの急性敗血症死 を来
たす ためには,結 核 死 菌 の添 加9),又 はAureomycin,
Cortison18),Gast ricmucin8)等 の併用 も試み られ てい
るが,著 老は動 物通過に よ り毒力の上昇 した菌株 を用い
て満足す べき成 績を得てい る。
次に マウスを用いての治療 実験においては,σ.σ肱 を
接 種 し,慢 性 の経過 を とつて致死せ しめ ることは困難で
あ り,従 つて死亡率 の比較に よる効果の判定は困難で あ
る。そ こで比較 的少量のC. rxlb.を マ ウス静脈内に接種
し。主 病巣であ る腎 の培養集落 数を算定 する方法を とつ
た。 この方 法において も1群 申 の集落数 の変動 がやや多
い欠 点もあるが,か な り長期間に亘つて治療 を行い得て,
これに よつ て一応 の治療 効果を判定 しうる点 で優れ てい
る。更 に治療 効果 判定の確実を期す るため に病理組 織学
的に も検討す る ことが望 ましい。ただ し後者 の所 見は前
述の腎培養成績 に略 々平 行す る。
家兎肺C症 に対す る治療実験は,深 在性,限 局性のC
症に対す る効果 を観 察す るとい う点で,有 意義 であ るか
ら,事 情 の許す限 り,こ の種の実験 も併せ行 うこ とが望
ましい。併 し相 当の費用 と労力を要す るため,'こ の方 法
に よ り,多 種薬剤 の効果比較 を広汎に実施す るこ とは 困
難 であ ろ う。
=撫て,抗 カンジダ剤 としては吉元19),池 本16)らは各種
の色素剤,合 成剤,抗 生物質等 について主に試験管 内抗
カンジダ作用をみてい る。著者 もここ数年来 入手 し得た
種 々の薬 剤につ き,先 づ試験管 内でC. dtb.の 最小発育
阻止濃 度を測定 した。 その結果 に よるとTrichnrnycin
を始 め とす る一部 の抗真菌性抗生物質 及 び 合 成 剤 中,
Merzoninが0.02~5mcg/ccで 発育阻止を来 たす こ と
を認 めた。次 いで数種薬 剤については毒性試験 を試 みた
所,そ の中には毒性 の極めて大 きい ものもあつ た。 か よ
うな薬剤は臨床応 用に際 し慎重な注意を要す るのである
が,最 近分離せ られ たAmphoteridnI4)は 毒性 が 著 し
く低 く,し か もC.σ あ.以 外の真菌類に もbroadspect-
rumで あ る点において興味深い抗生物質 と考 え る。
以上 の如 き試験管 内実験 及び毒性試験 の結果 を参考 と
して,数 種 の抗 力γジダ剤を選 び,こ れについ て上述 の
方 法に よ り感染防禦 及び治療実 験を行つた。 そ の結果 を
要 約す る と,Trichomycin,Nystatinは 感染防禦実験
において も,腹 腔 内注射 及び経 口投与に よるC症 各型 の
治療実験において も明らか な効果 を認めたが, Merzanin
の効果は両者に比 し,梢 々劣つ てい る。 さらにAmpho-
tericinBrNo.342,Datemycinに も部分的効果 を認 め
ることが出来た。なおChromin,Candimycinは か な
りの感染防禦 効果を示 したが,試 料 の入手杜 絶のため治
療 実験を行い得なかつた。
各種抗カ ソジダ剤に関す る実験結果 は,最 近 堂野前 ら
が中心 となつて集計 し得たわが 国におけ る内科的C症 の
治療 成績に対照 して興味深い ものがあ る21}。即ち,1956
年 までに集計 し得た内科領域のC症 は合計67例 に及ぶ
が,こ れ らC症 例の治療には ヨー ドカ リ,色 素剤,抗 真
菌性 抗 生物質,合 感剤(vitaminK3,Paraben等)の 各0
種 薬剤が用い られてい る。 これ等 の治療 効果 に関 して,
報 告者の判断に よれば}Trichamycin使 用26例 中多少
とも臨床的改善 の見 られた ものが85%に 及んでい る。
Trichamycinの 内服 に よ り果 して有 効な血 中濃度に
VOL6NO.1 CHEMO「rHERAPY 89
達 し得 るかが 問題 であるが,最 近 農崎2。)は本 剤の内服
後 その血 中移 行を生物学 的方法に よ り証 明 し得 た とい
う。 いつれ にせ よ上述 の本邦症 例における臨 床観察及び
著者 の実験結果 か らみて,本 剤の内服 は深在性病巣に対
してある程度 有効 なこ とが肯定 され る。
さて抗 カンジダ家兎免疫血 清の実験 的研究}こついては
未だ先人 の報告 を見ない。著者 がその感染防禦 及び治療
効果 を検討 した結果 に よれば,凝 集価が1,280倍 以上の
ものを比較的大量 用いれ ば有効であ ると認あ られ る。
さらに抗 カソジダ剤及 び家兎免疲血 清の併用に関 し3
2,3の 実験 を 行 つ た結果,TrichcmyciniNystatin,
Merzonin,免 疫血清 等の内2種 以上 の併用 に よつ て,
その効果の増強 を認 め得た。 かかる併 用は今 後臨床応用
の面で有意義 である と考 える。
総 括
1.家 兎,マ ウス,ラ ツテ,モ ルモ ツ ト.ハ ムスター
につき,C. aZb .を 接種 してそ の経過 を観察す る と共 に,
病理組織学的検索,臓 器中 の σ1 f.培 養を行つた結果,
本菌の病原性は家兎iマ ウス,ラ ッテに大である ことを
知つた。 また これ等動物 におけ る実験 的C症 は接種菌の
毒力,菌 量,接 種方法等 によ り種 々の経 過を とる も,之
を全身的撒布を来す敗血症型 とi限 局的な膿瘍 を形成 す
る膿瘍型に2大 別 し得 るこ とを認 めた。
2.抗 カ ンジダ物質 の効果判定 に関す る動物 実験 の方
法につき研究 した結果,次 の方法 を考案 した。
a)マ ウスの急性敗血症型C症 に対 する感染防禦 実験,
4~10日 以内に敗血症に よ り致死 せ しめ る量 の σ.1 1.と
被験薬剤の一定量 とを同時 にマウスの腹腔 内に注射 し,
その後の死亡率及び死亡 日数を観察 して対 照 と比較す る。
b)マ ウスの慢性敗血症 型C症 に対す る治療実験:比
較的慢性の敗血症を起 さ しめる量 のC. albOを マ ウスの
静脈内に接 種 し,感 染早期 か ら4~9日 間被 検薬剤を投
与 して,0定 期間後屠殺剖検 して腎の肉眼的及び組 織学
的所見を観察す ると共に,腎 の臓器培養 を行い,対 照 と
比較す る。
c)家 兎の肺C症 に対す る治療実験:C.σ 肱 の肺 内注
射 に より肺 に限局的膿瘍を形成せ しめた家兎 に対 し,一
定 期間被検薬剤を投与 した後,屡 殺剖検 し,肺 の肉眼的
及 び病理組 織学的所見を対照 と比較す る。
以上,3つ の実験結果を綜合 して治療効果 を判定す る
のであ る。
3.抗 真菌1生抗生物質17種,合 成剤25種 につ き,
試験 管内実験及び上述の動物実験を行いa治 療効果を判
定 した結果,前 者 中Trich。mycin・Nystatin,Amph。-
tericinBの 効果が最 も優れ,No.342,Datemyeinも
ある程度の有効性を認め得 た。 また後者中ではMerz。0
ninが 有効で あることを証 明 し得 た。
4.抗 カ ンジダ家兎免疫血清を作成 してその感染防禦
及び治療効果を実験的に検討 した結果,凝 集価の高 い も
のは有効であ ることを認め た。
5.TrichcmycinrNystatin,Merzonin,免 疫血 清等
の併用実験を行つた結果}こ れ等の内2鍾 以上の併 用に
よ り治療効果 の増強 され ることを認めた。
(終 りに二本実験 は文部 省科学研究 費に負 う とこ ろが大
であつ た。 又各種薬 剤,免 疫血清 を供与 された若木重敏
氏,細 谷省吾 氏,相 磯和嘉 氏,黒 屋政彦氏,原 田雄二郎
氏,金 子順一 氏,升 尾結核研究所堀研究室,武 田醸酵研
究所,藤 沢薬 品a塩 野義製薬a昭 和薬品,協 和醸酵に感
謝 の意 を表す る。
また本実験 に際 し,終 始御懇篤 な御指導,御 校閲を賜
つ た堂 野前教授,河 盛教授,高 橋講師 に深謝 し,病 理組
織 に関 し御 教示 を頂 いた宮地教援 に深 き謝意 を表す る◎)
参 考 文 献
1) CASTELLANI, A.. Arch. Dermat. & Syph. 17, 61, 1928
2)美 甘 義 夫,上 塚 昭:結 核,25(9,10,11合 併),
513,1950
3)堂 野 前 維摩 郷,松 本 芳 次 郎:日 本 臨 床;10(3)
1952
4)堂 野 前,山 上,山 本,螺 良:日 本 臨 床,11(1),1953
5) URSO, B.. J. Trap. Med. ; 54, 94-98, 1951 6) STOVALL, W. D. & PESSIN, S. B.: Am. J.
Pub. Health; 24, 594-602, 1934 7) RADAELLI, P.: J. Trop. Med. : 27, 211-213, 1924 8) SALVIN, S. B., CORY, J. C. & BERG, M. K..
J. Infect. Dis. ; 90, 177-182, 1952 9) SALVIN, S. B.: J. Immunol. 69, 89-99, 1952
10) ADRIANO, S. M. & SCHWARZ, J.. Am. J. Path. 186, 859,--873, 1955
11)岩 田和 夫,大 久保 新 也:最 新 医 学,9(10),197~
199,1954
12)加 納 守 男 日本 病 理 学 会 雑 誌,42,1953
13)堂 野 前 維 摩 郷:日 本 内 科 学 会 雑 誌,44(6),477~
519.1956
14) STERNBERG, T. H. WRIGHT, E. T. & OURA, M. Antibiotic Annual, 1955-1956
15) HIATT, J. S. & MARTIN, D. S. - J. A. M. A. 130, 205, 1946
16)池 本 秀 雄 」.Antibiotics,Ser.B.8(8);327
~339,1955
17)細 谷 省 吾:Chemotherapy;2(1),1~14,1954
18) SELIGMAN, E.: Yroc. Soc. Exp. Biol. & Mea.
79, 481-489, 1952, 83, 778,-781, 1953
19)吉 元 昭 治:日 本 産 科 婦 人 科 学 会 雑 誌,7(5),551
~598ら1955
20) KARASAKI, T.: Antibiotics & Chemotherapy; 7 (5), 209---230, 1957
21)堂 野前,高 橋,螺 良,田 中:第13回 抗生物質協
議会関西支部会(昭32.5月)に て発表
Recommended