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Albun Virtual de Microbiologia II Estudiantes de la Universidad Nacional de Panamá- Producción Rowlbest
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S
UNIVERSIDAD DE PANAMÀ
FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE TECNOLOGIA MÉDICA
MICROBIOLOGIA II
ALBÚM VIRTUAL
S
PROFESORES Dra. EVELIA QUIROZ Dra. DORA DE MORENO Dra. MARKELA DE QUINZADA DR. FRANCISCO RIVAS MG. CARMEN ESPINO MG. VALENTIN ROJAS LIC.ALEXA PRISCILLA
ESTUDIANTES
LUISA PINEDA 8- 863-1423 ANDREA ORTIZ 9-731-873
ERODITA MORÀN 8-845-1341 EVELYN MADRID 2-726-2246
KIZMETT MARTINEZ 2-726-850 JULIA POLO 8-860-149
JENILEE PINILLA 9-733-1401 GLADYS MORALES 8-858-581
MARDELYS PITTY 4-757-1841
BACTERIOLOGÌA MICROORGANISMOS IMPLICADOS EN INFECCIONES NOSOCOMIALES Las infecciones nosocomiales son aquellas que se adquieren dentro del hospital y que no tienen relación directa con la dolencia que lo llevó a una hospitalización.
LABORATORIO #2 BACILOS GRAM POSITIVO ESPORULADOS Y NO ESPORULADOS AEROBIOS DEIMPORTANCIA MEDICA
Bacillus cereus • Bacilo Gram positivo, esporulado, aerobio o anaerobio facultativo, móvil. • La espora es ovoidea, central y no deformante. • Hidroliza la lecitina de la yema del huevo y no fermenta el manitol. • Produce dos tipos de toxiinfecciones alimentarias: la forma diarreica y la forma emética • Móvil • Gamma hemolítico
Bacillus megaterium • Bacteria Gram positivos, formadores de endosporas, bacteria con forma de bastón. • Se considera aeróbico. • Se encuentra en el suelo y se considera un saprofito.
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Bacillus anthracis • Es un Gram-positivo , inmóviles, endospora formador, en forma de vara bacteria. • Causante del Ántrax
Inoculación de ratón de laboratorio
Bacillus anthracis Hígado
Bacillus anthracis
Pulmón
Bacillus anthracis Riñón • Listeria monocytogenes • Bacilo Gram positivo • Beta hemolítico • Crecimiento a temperatura ambiente • Prueba de motilidad en SIM: forma de paraguas
Listeria monocytogenes Colonia Bacillus anthracis - Colonias
• Encapsulado • Prueba de motilidad en SIM: negativo • Altamente virulento con aplicaciones en armas biológicas y bioterrorismo • Gamma hemolítico
LABORATORIO # 3: CONTROL DE CALIDAD EN MICROBIOLOGIA Y CONSERVACION DE CEPAS DE REFERENCIA EN EL LABORATORIO
Proteusspp. (Prueba-) - Medio mal inoculado, o
contaminado. Se debió insertar la aguja en el centro para que se diera la reacción alcalina àK/AH2S (Prueba +)
A/Ag Klebsiella pneumoniae
CITRATO DE SIMMON’S
Klebsiella pneumoniae
Proteusspp
Mc CONKEY
Klebsiella pneumoniae Lactosa (+) - Color rosa
Pseudomona aeruginosa Lactosa (-) – Color verde
Staphylococcus aureus G (+) – No debió crecer
Klebsiella pneumoniae G (-)
FENILALANINA
Klebsiella pneumoniae
Proteusspp.
Pseudomona aeruginosa + aceite mineral, que cubra el pico de flauta.
CONSERVACION DE CEPAS AGAR CORAZÓN
MICOLOGÍA Levaduras de importancia clínica Hongos de crecimiento principalmente unicelular capaces de causar o contribuir en la producción de enfermedades de seres humanos y animales.
Candida albicans
Candida albicans (Blastosporas)
Candida albicans (Cul=vo en Sabourand)
Candida albicans (Levaduras en =nción de Gram)
Candida albicans túbulo germinal en medio de hagar, harina de maíz
Cryptococcus neoformans
Tinción de tinta china
Cultivo de Cryptococcus neoformans
Colonias de apariencia mucoide DERMATOPHITOS Trichophyton rubrum
Microconidias en forma de lágrimas al lado de las hifas
Trichophyton mentagrophytes
• Microconidias esfericas en racimos • Hifas en espiral
Trichophyton mentagrophytes en sab. Colonias de crecimiento rápido, de centro granuloso color blanco a beige y bordes bellosos. Reverso incoloro a chocolate. El t. ment. Var interdigitale colonias algodonosas.
Microsporum canis
Abudantes macroconidias de pared gruesa y equinulada con la extremidad prominente y a menudo curvada.
Colonias de crecimiento moderadamente rápido, vellosas, color amarillo naranja. Reverso
incoloro a a naranja.
Abundantes macroconidias de pared fina y equinulada, de forma
apepinada muy irregular y extremidad redondeada.
Colonias de crecimiento rápido, de aspecto granular, en el centro de color canela y bordes vellosos blancos, reverso incoloro a crema.
Epidermophyton floccosum
Macroconidias de pared fina con forma de dedos
Estos hongos se caracterizan por la producción de esporas que son diseminadas por el viento y a partir del hombre o los animales llegan a los reservorios antes mencionados. Las esporas son resistentes a los cambios de temperatura, humedad, calor y desecación, su período de incubación se desconoce. Cladiosporum Conidióforos cortos y pigmentados, con formación acropétala de conidios (sólo es terminal) y cada conidio produce al subsecuente por gemación, de manera que forman cadenas. Las cadenas pueden ser cortas, de 3 a 4 esporas y son muy ramificados y con conidios elípticos de tamaño constante.
DEMATIÁCEOS
T í t u l o : C u l = v o d e Cladiosporum spp. Agar Sabouraud. Desarro l lo promedio 15 -‐ 21 días.
Desc r ipc ión : Co lon ia s p u l v e r u l e n t a s , a t e r c i o p e l a d a s o algodonosas, de color gris verdoso, verde oliva a negro.
Título: Morfología microscópica a par=r de cul=vo de Cladosporium herbarum. Azul de lactofenol, 40x.
Descripción: Hifas gruesas, septadas, dema=áceas. Células conidiógenas indiferenciadas. Conidias dema=áceas, en cadenas, y con cicatrices café oscuro.
Curvularia: Es un patógeno de plantas con gran importancia en los trópicos. En humanos, causa queratitis y sinusitis. Hay varios casos descritos de infección profunda en pacientes inmunodeprimidos.
Las conidias son curvadas, 20-‐32 x 9-‐15 μm de diámetro, con 3 tabiques; la penúl=ma célula es asimétrica y más oscura que las otras.
Título: Cul=vo de Curvularia spp. Agar Sabouraud. Desarrollo promedio 5 días. Descripción: Colonias algodonosas, de color blanco a gris que se torna verde oliva, café a negro a medida que madura.
Células fumagoides Ta m b i é n l l a m a d o esclerotes de Medlar, s o n e s t r u c t u r a s patognómicas para un hongo dematiáceo en el examen directo de la muestra clínica con cromoblastomicosis. Se observan en grupos de 2 o más; son esféricas u ovaladas, miden de 4 a 8 um de diámetro, son d e c o l o r c a f é amarillento, presentan membrana gruesa y en ocasiones se observan divisiones o filamentos; se comparan a granos de café o monedas de cobre.
DIMÓRFICOS Algunos hongos y especialmente, las especies patógenas, muestran dimorfismo, es decir, dos formas de crecimiento. Estos hongos pueden crecer como moho o como levadura. A menudo, este dimorfismo depende de la temperatura de incubación: a 37ºC el hongo es levaduriforme mientras que a 25ºC es filamentoso.
Histoplasma capsulatum var. capsulatum Enfermedad aguda, subaguda o crónica, producida por un hongo dimórfico sexuado que afecta el sistema retículo endotelial. Vive en tierras ricas en nitrógeno, húmedas, suelos fértiles, temperatura promedio 15 a 25 ºC
Título: Morfología microscópica a par=r de un cul=vo en fase miceliar de Histoplasma capsulatum var. capsulatum. Azul __de lactofenol, 40x.
Descripción: Hifas delgadas, septadas, hialinas, macroconidias tuberculadas, redondeadas, de doble membrana y microconidias piriformes adheridas a la hifa.
Título: Examen directo Histoplasmosis (sangre periférica). Giemsa. 100x.
Descripción: Levaduras al interior de los leucocitos, de 1 a 2 µm, unigemantes, rodeadas de un halo transparente.
Título: Examen directo Histoplasmosis (ganglio). Wright. 100x.
Descripción: Levaduras intracelulares de 1 a 2 µm, unigemantes, con un halo transparente.
Blastomyces dermatitidis: Micosis sistémica granulomatosa y supurativa causada por Blastomyces dermatitidis, Inhalación de esporas produce infección pulmonar. Lesiones en piel, huesos, articulaciones, aparato genitourinario Predominio en varones 9:1. Mujeres susceptibles en menopausia o embarazos (cambios hormonales) 30-60 años.
Levaduras grandes, 8-15 μm. La gemación tiene una base ancha y a menudo se ve un tabique que separa las células.
HONGOS CONTAMINANTES COMUNES
CARACTERISTICAS GENERALES Las esporas y fragmentos miceliales de muchas especies y géneros de mohos se encuentran ampliamente distribuidos en el ambiente y constituyen una porción significativa de la materia encontrada en el aire; de esta forma pueden ser alergénicos al inhalarlos, como ocurre en el caso de polen y de los insectos. También pueden causar patologías importante en pacientes inmunocomprometidos tales como los diabéticos, cancerosos, con SIDA entre otros.
Penicilium spp.
Colonias de crecimiento rápido y abundante, de aspecto variable, afelpado, algodonoso o pulverizado, de colores diversos que van del blanco, azul-verdoso a verde olivo, etc.
Microscopiacamente produce micelio vegetativo con hifas septadas coloreadas o hialinas, con un micelio reproductor diferenciado a partir de hifas vegetativas, simetricas, que dan lugar a las ramas en cuyos extremos se tienen los esterigmaso fiálides, los cuales sostienen las conidias dispuestas en cadena.
Aspergillus spp.
Colonias de crecimiento rápido y aspecto variable, afelpado, pulvurulento o algodonoso, de colores diversos que van del blanco al amarillo pálido o cetrino, del rojo vinoso o marrón oscuro, de olor característico a “moho”
Microscopicamente los conidióforos son fácilmente distinguibles del micelio vegetativo, delongitud variable terminando en una vesicula globosa o clavada, rodeada parcial o totalmente, con sus conidias globosas o elipsoidales, hialinas o
Cladosporium spp.
Colonia de crecimiento abundante o circunscrito a una pequeña área de aspecto afelpado o algodonoso, de color verde al verde negruzco.
Hifas vegetativas oscuras septadas, con conidióforo simple o ramificado produciendo en el ápice conidias, con o sin septos elipsoidales o limoniformes, coloreadas.
Fusarium spp.
Colonias de crecimiento rápido y abundante generalmente de aspecto algodonoso, de diversos colores que van del blanco, rosado, salmón o violeta cubriendo toda la superficie del medio.
Conidióforos simples o ramificados; s o l i t a r i o s o a g r u p a d o s f o r m a n d o esporodoquios, conidias apicales simples (microconidia) o septadas (macroconidias) típicas de bordes curvados ( apariencia de media luna), con ápices obtusos o agudos.
Rhizopus spp.
Presenta micelio vegetativo formado por hifas sin septos ( cenocíticas) hialinas o ligeramente coloreadas a partir de las cuales se diferencian los conidióforos (esporangióforos) sobre un rizoide típico que le da una apariencia al hongo de los tallos estoloníferos de la “fresa”.
Scopulariopsis spp. Colonias de color chocolatoso
Conidióforos ramificados, las esporas nacen del conidióforo y se desprenden de la base hacia el ápice en forma distal.
Mucor spp. Espongióforos solitarios y sin rizoides
VIROLOGÍA Inclusiones virales
OJO DE BUHO
En infecciones por CMV se observaran células más grandes que las normales, con inc lusiones intranucleares basoGlicas, rodeada de un halo claro que se exJende a la membrana nuclear.
CUERPOS DE COWDRI
Inclusiones causada por miembros de la familia
Herpes viridae
CUERPOS DE COWDRI
OJO DE BUHO Y CUERPOS DE COWDRI
COILOCITOS Inclusión viral causada por virus papiloma humano
Pruebas Rápidas Diagnósticas Hepatitis b à detección de Anticuerpos
Kit de hepatitis b Inserto para hepatitis b Procedimiento para la prueba
Resultados
Prueba rápida VIH à detección de Antígenos
Prueba rápida virus sincitial respiratorio (RSV)àdetección de Antígeno
Prueba rápida para virus influenzaà detección de Antígenos
Prueba rápida para rotavirus
Prueba rápida para dengue dúo detección Antígeno- Anticuerpo
Métodos para cultivar células Es un método mediante el que células se conservan las propiedades bioquímicas y físicas donde puedan cultivarse en condiciones controladas.
1. Macar la cámara de aire de los embriones de 9 a 11 días. 2. Trabajar en la cámara de flujo. Limpiar todo el área de trabajo, el huevo
con alcohol al 70%, usar guantes, tratar de no hablar durante el experimento, para así mantener toda la asepsia posible.
3. Romper el cascarón con mucho cuidado procurando sacar el embrión sin dañarlo y ponerlos en el plato petri.
4. Separar el embrión de las membranas y posteriormente quitarle las partes como la cabeza, alas, patas y órganos, es decir células que ya estén diferenciadas
5. Lavar lo obtenido con solución salina, macerar previniendo no perder tejido y pasarlo a una jeringa.
6. Se coloca en un portaobjeto una gota de la solución y se observa la cantidad de fibroblasto que hay, para así poder agregarle el medio de cultivo (RPMI) necesario. Dependiendo de la cantidad de células.
7 Luego pasamos a unas botellas para cultivo las células con el medio de cultivo y el indicador (rojo fenol). Se deja incubando a 37°C, procurando observar su crecimiento todos los días para ver si se forma la monocapa de células y así poder hacer el subcultivo.
7 Luego pasamos a unas botellas para cultivo las células con el medio de cultivo y el indicador (rojo fenol). Se deja incubando a 37°C, procurando observar su crecimiento todos los días para ver si se forma la monocapa de células y así poder hacer el subcultivo.
8. Después de dos semanas se observo el crecimiento de la monocapa de células, pero el medio se volvió básico y también se estaba terminando por lo cual se le puso más. Para poder remover las células se le puso tripsina, dando golpes energéticos y así pasar a otra botella de cultivo.
NOTA: Las imágenes de subcultivo fueron adquiridas de otra mesa, ya que nuestro cultivo se contamino con hongos.
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