UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA DE VETERINARIA

TEMA:

Extracción de ADN de un tomate

ASIGNATURA:

Biología

INTEGRANTES:

Elizabeth Carchi

Jhon Guerrero

Pamela Ortiz

Raúl Tigre

PROFESOR:

Dra. Malena Herrera

AULA:

Grupo 1 Veterinaria

INDICE

Introducción...................................................................3

Planteamiento del problema..........................................4

Hipótesis........................................................................4

Objetivo..........................................................................4

Objetivos específicos...............................................................4

Marco teórico.................................................................5

Extraccion de acidos nucleicos...........................................5

Métodos de extracción............................................................6

Parte experimental.........................................................7

Materiales................................................................................7

Procedimiento..........................................................................8

Resultados y análisis....................................................11

Conclusiones................................................................11

Bibliografía...................................................................12

INTRODUCCIÓN

El ADN es una molécula de gran tamaño que guarda y transmite de

generación en generación toda la información necesaria para el

desarrollo de todas las funciones biológicas de un organismo, está

formado por la unión paralela de dos cadenas, cada cadena se

encuentra conformada por 4 diferentes nucleótidos. Lo que hace que el

ADN sea tan variado (por ejemplo de peces, plantas, bichos, humanos

etc.)

Los ácidos desoxirribonucleico (ADN) y ribonucleico (ARN) son

polímeros de nucleótidos formados por un azúcar de cinco carbonos

(desoxirribosa en el ADN y ribosa en el ARN), una base nitrogenada

(que puede ser adenina, timina, citosina, guanina o uracilo) y una

molécula de fosfato.

La expresión de los genes es la base del metabolismo celular, y por ésta

se entiende que el ADN se transcribe en ARN, que a su vez se traduce

en proteínas. Esta secuencia ADN-ARN-proteínas constituye el dogma

central de la biología molecular.

La molécula de ADN está constituida por dos largas cadenas de

nucleótidos unidas entre sí formando una doble hélice. Las dos cadenas

de nucleótidos que constituyen una molécula de ADN, se mantienen

unidas entre sí porque se forman enlaces entre las bases nitrogenadas

de ambas cadenas que quedan enfrentadas.

Si pudiésemos tomar una cadena de ADN humano y la estiráramos de

forma lineal nos daríamos cuenta que el ADN humano tiene una

longitud de extremo a extremo de 2 metros, el ADN se enrolla sobre

proteínas y se compacta formando los cromosomas.

El ADN de manera global dirige la síntesis de todas las proteínas, se

podría decir en términos más sencillos que el ADN es una acumulación

de genes (fragmentos de ADN) y cada gen es la clave para la

producción de una proteína.

En la extracción de los ácidos nucleicos, existen diferentes métodos que

permiten su obtención partiendo de diferentes fuentes por ejemplo;

plantas plásmidos, gotas de sangre, cabellos, células bacterianas, o

eucariotas, etc.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

¿Cómo extraer el ADN de un tomate?

HIPÓTESIS

Los jabones líquidos utilizados como lavavajillas emulsionan los

lípidos de las membranas celulares y las rompen.

La sal evita la unión de las proteínas.

El alcohol separa el ADN de otros componentes celulares.

OBJETIVO

Utilizar técnicas sencillas para extraer el ADN del tomate observando

su estructura y cómo estas técnicas ocasionan cambios en las células

haciendo que se pueda llevar a cabo este proceso que es de gran

importancia para el estudio del ADN.

Objetivos específicos

Extraer el ADN del tomate

Observar el ADN extraído

MARCO TEÓRICO

ADN: el ADN es la sustancia química donde se almacenan las

instrucciones que dirigen el desarrollo de un huevo hasta formar un

organismo adulto, que mantienen su funcionamiento y que permite la

herencia. Es una molécula de longitud gigantesca, que está formada

por agregación de tres tipos de sustancias: azúcares, llamados

desoxirribosas, el ácido fosfórico, y bases nitrogenadas de cuatro tipos,

la adenina, la guanina, la timina y la citosina. 

EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS

La extracción y purificación de ácidos nucleicos constituyen la primera

etapa de la mayoría de los estudios de biología molecular y de todas las

técnicas de recombinación de ADN. En este caso, los métodos de

extracción permiten obtener ácidos nucleicos los ácidos nucleicos

purificados a partir de diversas fuentes para después realizar análisis

específicos de modificaciones genéticas mediante la reacción en cadena

de la polimerasa.

Dada la gran variedad de métodos de extracción y purificación de

ácidos nucleicos existentes, la elección de la técnica más adecuada

suele efectuarse conforme a los criterios siguientes:

Ácidos nucleicos

Organismo fuente

Material inicial (tejido, hoja, semilla, material transformado, etc.)

Resultados deseados (rendimiento, pureza, tiempo que requiere la

purificación)

Uso posterior (PCR, clonación, etiquetado, transferencia, RT-PCR,

síntesis de ADN, etc.)

Dentro de algunos conceptos que pueden ser reforzados mediante la

realización de

Este laboratorio, tenemos:

El hecho de que el ADN se encuentra localizado en el

núcleo de las células eucarióticas y por lo tanto solo puede

ser obtenido de células nucleadas.

Las células de un organismo eucariótico multicelular no

presentan diferencias de tamaño ni secuencia de su ADN,

las diferencias se presentan es a nivel de expresión

genética, por lo tanto, si se quiere conocer o estudiar el

ADN de un individuo lo podemos hacer a partir de

cualquiera de sus células nucleadas.

Debido a la expresión genética diferencial en los diferentes

tipos de células, estas presentan diferencias en su

estructura, propiedades biológicas y propiedades físicas y

químicas, con base en esto, se sabe que las células

sanguíneas presentan diferencias de densidad y

características de membrana y que estas diferencias se

pueden utilizar para separarlas mediante técnicas de

centrifugación y hacer lisis diferencial de dichas células.

Conocer los componentes de las macromoléculas que

constituyen las células.

Métodos de extracción

Para extraer los ácidos nucleicos del material biológico es preciso

provocar una lisis celular, inactivar las nucleasas celulares y separar los

ácidos nucleicos de los restos de células. El procedimiento de lisis

idóneo suele consistir en un equilibrio de técnicas y ha de ser

suficientemente fuerte para romper el material inicial complejo (un

tejido, por ejemplo), pero suficientemente suave para preservar el ácido

nucleico.

PARTE EXPERIMENTAL

MATERIALES:

Zumo de tomateLicuadora

Sal y Varilla Cuchara

Jabón líquido de

lavavajilla

Colador

Embudo

Jeringuilla

AguaTubo de ensayo

Alcohol antisépticoRecipiente (vasos)

PROCEDIMIENTO

1. Preparar los materiales.

2. Licuar el tomate durante 15 segundos

para romper las células y luego colocar en

un recipiente.

3. Poner una cucharada de sal puesto que proporciona al ADN un

ambiente favorable y a su vez este permite separar sus proteínas

y contribuye con átomos cargados positivamente que neutralizan

la carga negativa normal del ADN.

4. Agregar una cucharada de jabón líquido en el

zumo de tomate y mezclamos suavemente. El

jabón se añade porque cada célula está

rodeada por la membrana celular, el ADN se

encuentra dentro del núcleo y para verlo hay

que romper las dos membranas Cuando este

entra en contacto con la célula, captura los

lípidos y las proteínas.

5. Agregar 15 ml de agua para hacer la mezcla un poco más liquida.

6. Proceder a filtrar la mezcla del tomate usando el colador, el

embudo y el tubo de ensayo; dejar reposar durante un minuto.

7. Verter por las paredes del tubo de ensayo 5 ml alcohol etílico

para que suceda la separación del ADN, este cuando se

encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface

entre el alcohol y el agua

8. Esperar para ver los resultados de 1 a 3

minutos.

RESULTADOS Y ANÁLISIS

El resultado obtenido de la extracción no es ADN puro ya que,

entremezclado con él, hay fragmentos de ARN.

Una vez que estas membranas se han roto, el ADN es liberado de la

célula.

El alcohol además de permitirnos ver el ADN, este separa el ADN de

otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución

acuosa y así el ADN se precipita en el alcohol fuera de la solución,

donde puede ser visto.

CONCLUSIONES

Las membranas celulares son rotas por el detergente debido a

que los detergentes rompen la barrera lipídica solubilizando las

proteínas e interrumpiendo la interacción lípido-lípido, lípido-

proteína y proteína-proteína. Los detergentes, al igual que los

lípidos, se asocian entre ellos y se unen a superficies hidrofóbicas.

Se componen de una cabeza polar hidrofílica y una cola no polar

hidrofóbica.

La sal ayuda para que el filamento de células se unan; es decir

evita la unión de las proteínas del ADN.

Es indispensable el alcohol etílico ya que el alcohol debe ser de

una concentración establecida sino podría romper moléculas de

las células y entonces no se podría observar el ADN. El alcohol

precipita (solidifica) el ADN fuera de la solución y separa así los

componentes de las células. El ADN es soluble en agua, pero

cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la

interface entre el alcohol y el agua. El alcohol forzó al ADN a

agruparse en hebras las cuales subieron a la parte superior del

tubo de ensayo.

BIBLIOGRAFÍA

VINDEL RODRIGUEZ, Glexi; 2013; Slideshare; Extracción de ácidos

nucleicos lab. Genética UNAH;

http://www.slideshare.net/glexirodriguez/extraccion-de-acidos-

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ÁLVAREZ SÁNCHEZ; Nicole; 2010; Slideshare; Experimento

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http://www.slideshare.net/NicoleAlvarezSanchez/experimento-

extraccion-adnfinalnicolealvarez

MARTINEZ Stella Maris; 2009; Blogger; Alcohol como desinfectante;

http://quimicamente.blogspot.com/2009/07/alcohol-como-

desinfectante.html

SYNGENTA MEXICO 2013; Biotecnología; ¿Qué es ADN?;

http://www.syngenta.com.mx/que-es-adn.aspx