Pestenegradelnogal:AvancesenelconocimientodelabiologíaycontroldelpatógenoXanthomonasarboricolapv.juglandis.
Walnutblight:AdvancesintheknowledgeofthebiologyandcontrolofthepathogenXanthomonasarboricolapv.juglandis.
RetamalesJ.1-2,SegoviaC.3,4,SantanderJ.3,4,AlvaradoR.1&NúñezP.1
1SociedadAgroadvanceLtda.,CaminoaMelipilla26200,Peñaflor,Chile.2InsItutodeCienciasNaturales,UniversidaddelasAméricas,7Norte1348ViñadelMar,Chile;3UniversidadMayor,FacultaddeCiencias,Huechuraba,Chile;4MemorialUniversityofNewfoundland,Canadá.
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1.- Determinar factores que posibilitan lapatogénesisdeXajenelnogaltalescomo:- ResistenciaaagentesanImicrobianos- Metabolismodehierro- Quorumsensing2. Evaluar el rol de bacteriófagos líIcos de XajcomoalternaIvadecontrolde lapestenegraelnogal
Xanthomonasarboricolapv.juglandis(Xaj)eselagentecausal de la peste negra del nogal, una enfermedadcaracterizadaporgenerardañonecróIcoendiferentestejidos de la planta e incluso frutos en formación. Laincidenciadeestabacteriageneraentreun50y80%depérdidas en la producción dependiendo de lascaracterísIcas climáIcas de zona. A pesar de larelevancia de este patógeno pocos han sido losestudiosasociadosasubiologíaquepermitanademásel desarrollo de herramientas de prevención/controlefecIvas y disIntas al poco sustentable uso dederivadoscúpricos.
ResistenciaaagentesanKmicrobianos:Cobre ResistenciaaagentesanKmicrobianos:AnKbióKco
Metabolismodelhierro Quorumsensing
Figura2.(A)RepresentacióngráficadelcontextogenéIcodegenesderesistenciaacobreenelgenomadeXajJ303.(B)EsquemaquerepresentaputaIvasfuncionescelularesdegenesderesistenciaacobrepresenteenelgenomadeXajJ303.(C)EvaluacióninvitrodelaresistenciaadisIntosderivadoscúpricosdeXajJ303.
Figura 3. (A) Representación gráfica del contextogenéIco de genes de resistencia a anIbióIcos en elgenoma de Xaj J303. (B) Esquema que representa lafunción celular de putaIvas bombas de eflujo deanIbióIcos presente en el genoma de Xaj J303. (C)AnIbiograma que muestra diferentes niveles deresistencia a estrepomicina -oxitetraciclina de dosaisladoschilenosdeXaj.
Figura 4. (A) Esquema que representa putaIvas funcionescelulares de genes asociados a mecanismo de captación dehierropresenteenelgenomadeXajJ303.(B)EvaluacióndelapresenciadesideróforosporXajJ303mediantelauIlizacióndeplacas CAS. Es importante notar que existe una correlacióndirecta entre el aumento de secreción de sideróforos (halonaranjo) y la concentración de 2,2 dipiridil (DIP) como agentequelante de hierro. (C) Efecto del suplemento/secuestro dehierro en la virulencia de Xaj J303 sobre frutos inmaduros denogal.
Figura 5. (A) Esquema que representa putaIvas funciones celulares de genes asociados aquorumsensingpresenteenelgenomadeXaj J303. (B) Efectodosisdependienteentre ladensidadcelular(UFP/mL)deXajJ303yvirulenciabacterianasobrefrutosinmadurosdenogal.
BacteriófagosencontroldeXaj
A B
C
C
A
B
A
B
C
XajJ303 Xaj3A
A
B
A
B
C
Conclusiones
MetodologíaGeneral
1 2 3
D
Figura 6. (A) Microscopía electrónica de transmisión donde es posibleapreciar lamorfología correspondientea la familiaPodoviridae deunodelosbacteriófagosaislados.(B)Decaimientobacterianoinvitro:efectodelaaplicacióndeunbacteriófagosobreelculIvodeXajJ303.(C)Imágenesdefrutos de nogal post-tratamiento: 1 Control (tesIgo), 2 tratamientoconvencional (CuSO4) y 3: Mix de bacteriófagos. (D) Determinación deincidencia(%)yseveridaddepestenegradelnogalpostaplicacióndedosisdebacteriófagos(ResoluciónExentaSAGNº:7898/2015).
ObjeKvos:
A
B
Referenciasclaves
Ø Retamales J, Segovia C, Alvarado R, Núñez P & Santander J. (2017). Dran genome ofXanthomonasarboricolapv juglandisJ303isolatedfrominfectedwalnuttrees inSouthernChile.GenomeAnnouncements.Aceptado.
Ø Retamales J, Vásquez I, Santos L, Segovia C, Alvarado R, Nuñez P& Santander J. (2016).Complete genome sequences of lyIc bacteriophages of Xanthomonas arboricola pv.juglandis.GenomeAnnouncements,4(3):e00336-16.doi:10.1128/genomeA.00336-16.
Ø ElaisladoXajJ303presentaensugenomaunrepertoriodegenesasociadosaresistenciaacompuestosanImicrobianoscomúnmenteempleadosenagricultura.EsprobablequeestosjueguenunrolacIvodurantelaexposiciónespecificaagradientesdeconcentracióndederivadoscúpricosasícomoaunamezcladeanIbióIcoscomoestreptomicinayoxitetraciclina.
Ø LaadiciónosecuestrodehierroenelmediodeculIvopuedeninfluirenlosparámetrosdevirulenciadeXajJ303sobrefrutosinmadurosdenogal.Másaúnlavirulenciadeeste
fitopatógenoestáligadaalacargabacterianaydirigidaporlaexpresióndegenesasociadosaquorumsensing.Ø DebidoalaresistenciagenéIcaacobreyanIbióIcosasícomounpotenterepertoriodeestrategasparaproducirdañoenelhospedero,esteestudiopermiteinferirqueelusode
bacteriófagosesunaalternaIvarealparaelcontroldelapestenegradelnogal.
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