Valproic Acid - Diagnostic Products Corporation...IMMULITE 2000 Valproic Acid (PIL2KVA-7, 2005-04-05) 3 Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are

Valproic Acid

IMMULITE® 2000 Valproic Acid

2 IMMULITE 2000 Valproic Acid (PIL2KVA-7, 2005-04-05)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE 2000 Analyzer — forthe quantitative measurement of valproicacid in serum or heparinized plasma, asan aid in monitoring drug therapy.

Catalog Number: L2KVA2 (200 tests),L2KVA6 (600 tests)Test Code: VAL Color: Aqua

Summary and ExplanationValproic acid is used primarily in thetreatment of simple and complex absenceseizures.1 It can be administered alone orin combination with other drugs such asphenobarbital or phenytoin. Valproic acidincreases the concentration of γ-amino-butyric acid (GABA) by inhibiting GABAtransaminase.2 GABA is a potent inhibitorof pre- and postsynaptic discharges in thecentral nervous system.Valproic acid circulates mainly bound toprotein. It competes with phenytoin forprotein-binding sites. Valproic acid alsoinhibits the renal clearance ofphenobarbital. When these two drugs areused in combination, the concentration ofphenobarbital can be increased by up to40 percent.3,4

Valproic acid is rapidly and almostcompletely absorbed after oraladministration, reaching its peakconcentration after 1 to 2 hours. In adults,its half-life is 16 hours.4 The therapeuticrange for valproic acid is 50 to 100 µg/mL.Levels above 100 µg/mL are consideredtoxic. Plasma concentrations should bemonitored to help maintain an effectivedosage and prevent side effects causedby an excessive concentration.4

Principle of the ProcedureIMMULITE 2000 Valproic Acid is a solid-phase, competitive chemiluminescentenzyme immunoassay.Incubation Cycles: 1 × 30 minutes.

Specimen CollectionThe use of an ultracentrifuge isrecommended to clear lipemic samples.

Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receiptby the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.

Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneousresults due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE 2000 Valproic Acid has notbeen tested with all possible variations oftube types. Consult the section onAlternate Sample Types for details ontubes that have been tested.Volume Required: 10 µL serum orheparinized plasma.

Storage: 2 days at 2–8°C, or1 month at –20°C.5

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Sourcematerials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)Water: Use distilled or deionized water.

IMMULITE 2000 Valproic Acid (PIL2KVA-7, 2005-04-05) 3

Materials SuppliedComponents are a matched set. Labels onthe inside box are needed for the assay.

Valproic Acid Bead Pack (L2VA12)With barcode. 200 beads, coated withmonoclonal murine anti-valproic acid.Stable at 2–8°C until expiration date.L2KVA2: 1 pack. L2KVA6: 3 packs.

Valproic Acid Reagent Wedge(L2VAA2)With barcode. 11.5 mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to 6-amino-2-propylhexanoicacid in a human protein buffer/matrix.Stable at 2–8°C until expiration date.L2KVA2: 1 wedge. L2KVA6: 3 wedges.Before use, tear off the top of the label atthe perforations, without damaging thebarcode. Remove the foil seal from the topof wedge; snap the sliding cover down intothe ramps on the reagent lid.

Valproic Acid Adjustors (LVAL, LVAH)Two vials (Low and High), 2.0 mL each, ofvalproic acid in processed human serum,with preservative. Stable at 2–8°C for 30days after opening, or for 6 months(aliquotted) at –20°C.L2KVA2: 1 set. L2KVA6: 2 sets.Before making an adjustment, place theappropriate Aliquot Labels (supplied withthe kit) on test tubes so that the barcodescan be read by the on-board reader.

Kit Components SuppliedSeparatelyL2SUBM: Chemiluminescent SubstrateL2PWSM: Probe WashL2KPM: Probe Cleaning KitLRXT: Reaction Tubes (disposable)SDCM: Bi-level, human serum-basedmulti-constituent control moduleAlso RequiredDistilled or deionized water; test tubes;controls.

Assay ProcedureNote that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE 2000 Operator's Manual.

See the IMMULITE 2000 Operator'sManual for: preparation, setup, dilutions,adjustment, assay and quality controlprocedures.Recommended Adjustment Interval:2 weeks.

Quality Control Samples: Use controlsor serum pools with at least two levels(low and high) of valproic acid.

Therapeutic RangeThe commonly accepted therapeuticrange for valproic acid is 50 – 100 µg/mL(347 – 693 µmol/L). Toxicity has beenreported at concentrations greater than100 µg/mL.4

Consider these limits as guidelines only.

LimitationsA complete understanding of theinformation contained in this packageinsert is necessary for proper use of thisproduct.The specificity table should be consultedfor a list of substances which havemeasurable crossreactivity in this assay.Other medications and/or food not foundon this list may nevertheless crossreact inthe assay.The following should be considered in theinterpretation of the valproic acidconcentration:

• All concurrent medications taken bythe patient

• The time of sampling in relation to thedosing history

• Existing diseases or conditionsHeterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnostic


purposes, the results obtained from thisassay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.

Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in µg/mL. (Unlessotherwise noted, all were generated onserum samples collected in tubes withoutgel barriers or clot-promoting additives.)Conversion Factor:µg/mL × 6.93 → µmol/LCalibration Range: 10 – 200 µg/mL(69 – 1,386 µmol/L).Analytical Sensitivity: 1.5 µg/mL(10.4 µmol/L).

Precision: Samples were assayed induplicate over the course of 20 days, tworuns per day, for a total of 40 runs and 80replicates. (See “Precision” table.)

Linearity: Samples were assayed undervarious dilutions. (See "Linearity" table forrepresentative data.)Recovery: Samples spiked 1 to 19 withthree valproic acid solutions (525, 1,050and 2,300 µg/mL) were assayed. (See"Recovery" table for representative data.)Specificity: The antibody is highly specificfor Valproic Acid. (See "Specificity" table.)

Bilirubin: Presence of conjugated andunconjugated bilirubin in concentrationsup to 200 mg/L has no effect on results,within the precision of the assay.

Hemolysis: Presence of hemoglobin inconcentrations up to 512 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.

Lipemia: Presence of triglycerides inconcentrations up to 3,000 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.Alternate Sample Type: Samples(n = 15) were collected into plain andheparinized vacutainer tubes. All sampleswere spiked with valproic acid and thenassayed by the IMMULITE 2000 ValproicAcid procedure.(Heparin) = 1.04 (Serum) – 0.13 µg/mLr = 0.970

Means:82 µg/mL (Serum)85 µg/mL (Heparin)

Method Comparison: The assay wascompared to DPC's IMMULITE ValproicAcid assay on 128 samples.(Concentration range: approximately 13 to200 µg/mL. See graph.) By linearregression:(IML 2000) = 1.0 (IML) – 1.8 µg/mLr = 0.997

Means:79 µg/mL (IMMULITE 2000)80 µg/mL (IMMULITE)

References1) Gerson B, editor. Essentials of therapeuticdrug monitoring. New York: IGAKU-SHOIN,1983: 215-26. 2) Boeckx RL. In: Moyer TP,Boecks RL, editors. Applied therapeutic drugmonitoring. Washington DC: The AmericanAssociation for Clinical Chemistry, 1984: 79-81. 3) Drug Monitoring Data Pocket Guide II,2nd ed. Washington DC: AACC Press, 1994:133-5. 4) Moyer TP. Therapeutic drugmonitoring. In: Burtic AC, Ashwood ER, editors.Tietz textbook of clinical chemistry, 3rd ed.Philadelphia: WB Sanders, 1999; 873,876-7. 5)Quest Diagnostics. The 1997/1998 QuestDiagnostics Nichols Institute reference manual.San Juan Capistrano: Quest Diagnostics, 1997:271.

Technical AssistanceIn the United States, contact DPC'sTechnical Services department.Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828Fax: 973.927.4101. Outside the UnitedStates, contact your National Distributor.The Quality System of Diagnostic ProductsCorporation is registered to ISO 13485:2003.

Tables and Graphs

Precision (µg/mL)

Within-Run1 Total2

Mean3 SD4 CV5 SD CV

1 15.6 0.6 3.8% 1.1 7.1%

2 34.3 1.4 4.1% 2.3 6.7%

3 55.5 1.5 2.7% 3.0 5.4%

4 110 3.0 2.7% 5.1 4.6%


Linearity (µg/mL)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 8 in 8 103 — —

4 in 8 49.2 51.5 96%

2 in 8 21.5 25.8 83%

1 in 8 10.8 12.9 84%

2 8 in 8 128 — —

4 in 8 63.0 64.0 98%

2 in 8 29.8 32.0 93%

1 in 8 14.1 16.0 88%

3 8 in 8 150 — —

4 in 8 76.8 75.0 102%

2 in 8 37.0 37.5 99%

1 in 8 15.9 18.8 85%

4 8 in 8 167 — —

4 in 8 86.0 83.5 103%

2 in 8 42.5 41.8 102%

1 in 8 17.5 20.9 84%

5 8 in 8 185 — —

4 in 8 99.4 92.5 107%

2 in 8 45.5 46.3 98%

1 in 8 21.5 23.1 93%

Recovery (µg/mL)

Solution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 — ND — —

A 25.6 26.3 98%

B 52.5 52.5 100%

C 112 115 97%

2 — 10.1 — —

A 35.9 35.8 100%

B 65.4 62.1 105%

C 125 125 100%

3 — 14.8 — —

A 40.9 40.3 101%

B 69.1 66.6 104%

C 129 129 100%

4 — 25.2 — —

A 52.1 50.2 104%

B 80.2 76.5 105%

C 143 139 103%

5 — 50.2 — —

A 77.5 73.9 105%

B 110 100 110%

C 165 163 102%

Specificity

Compound1µg/mLAdded2

% Crossreactivity3

Carbamazepine 140 ND

Clonazepam 1.2 16%

Diazepam 25 2%

Ethosuximide 120 ND

2-propyl Glutaric Acid 250 11%

2-n-propyl-4 Pentenoic Acid 100 20%

Phenobarbital 200 ND

Phenytoin 160 ND

Sodium Salicylate 100 ND

ND: Not detectable.4


Method Comparison

IMMULITE Valproic Acid, µg/mL 0 50 100 150 200

IMM

ULI

TE 2

000

Val

proi

c A

cid

0

50

100

150

200

(IML 2000) = 1.0 (IML) – 1.8 µg/mLr = 0.997

Deutsch. Precision: 1Intra-Assay, 2Gesamt,3Mittelwert, 4SD (Standardabweichung), 5CV(Variationskoeffizient). Linearity: 1Verdünnung,2Beobachtet (B), 3Erwartet (E), 4% B/E, 58 in 8.Recovery: 1Probe, 2Beobachtet (B), 3Erwartet(E), 4% B/E. Specificity: 1Verbindung,2zugesetzte Menge, 3% Kreuzreaktivität, 4NN:Nicht nachweisbar. Method Comparison:Valproic Acid: Valproinsäure.

Español. Precision: 1Intraensayo, 2Total,3Media, 4DS, 5CV. Linearity: 1Dilución,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 en 8.Recovery: 1Solución, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E. Specificity:1Compuesto, 2Cantidad añadida, 3% Reaccióncruzada, 4ND: no detectable. MethodComparison: Valproic Acid: Acido Valproico.Français. Precision: 1Intraessai, 2Total,3Moyenne, 4SD, 5CV. Linearity: 1Dilution,2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A, 58 dans 8.Recovery: 1Solution, 2Observé (O), 3Attendu(A), 4%O/A. Specificity: 1Composé, 2ajouté,3Réaction croisée%. 4ND: non détectable.Method Comparison: Valproic Acid: Acidevalproïque.

Italiano. Precision: 1Intra-serie, 2Totale, 3Media,4SD (Deviazione Standard), 5CV (Coefficiente diVariazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery:1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.Specificity: 1Composto, 2quantità aggiunta,3Percentuale di Crossreattività, 4ND: nondeterminabile. Method Comparison: ValproicAcid: Acido valproico.

Português. Precision: 1Entre-ensaios, 2Total,3Média, 4Desvio padrão, 5Coeficiente devariação. Linearity: 1Diluição, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8. Recovery:1Solução, 2Observado (O), 3Esperado (E),4%O/E. Specificity: 1Composto, 2Quantidadeadicionada, 3Percentagem de reacção cruzada,

4ND: não detectável. Method Comparison:Valproic Acid: Acido Valpróico.

Deutsch

ValproinsäureAnwendung: Zur in vitro-Diagnostik mitdem Analysegerät IMMULITE 2000 – zurquantitativen Bestimmung vonValproinsäure im Serum oderHeparinplasma als Hilfestellung für dieÜberwachung der medikamentösenTherapie.

Artikelnummern: L2KVA2 (200 tests),L2KVA6 (600 tests)Testcode: VAL Farbe: Aqua

Klinische RelevanzValproinsäure wird in erster Linie zurBehandlung von einfachen undkomplexen Petit-mal-Anfällen eingesetzt.1Sie kann allein oder in Verbindung mitanderen Medikamenten wie etwaPhenobarbitol oder Phenytoin verwendetwerden. Valproinsäure erhöht dieKonzentration an γ-Amino-n-buttersäure(GABA), indem sie GABA-Transaminasehemmt.2 GABA ist ein potenter Hemmervon prä- und postsynaptischenEntladungen im zentralen Nervensystem.Im Blutkreislauf tritt Valproinsäure vorallem in proteingebundener Form auf. Esbesetzt Proteinbindungsstellen kompetitivmit Phenytoin. Ferner hemmtValproinsäure die renale Clearance vonPhenobarbital. Bei gemeinsamerVerwendung von Valproinsäure undPhenobarbital können sich diePhenobarbitalwerte um bis zu 40 Prozenterhöhen.3,4

Valproinsäure wird nach oralerVerabreichung rasch und nahezuvollständig resorbiert und erreicht nach 1–2 Stunden ihren Spitzenwert. IhreHalbwertzeit bei Erwachsenen beträgt 16Stunden.4 Der therapeutische Bereich fürValproinsäure liegt bei 50–100 µg/ml.Werte von über 100 µg/ml gelten alstoxisch. Die Plasmakonzentrationensollten überwacht werden, um einewirksame Dosierung zu gewährleisten undNebenwirkungen infolge einer


übermäßigen Konzentration zuverhindern.4

MethodikDer IMMULITE 2000 Valproinsäure ist einkompetitiver Festphasen-,Chemilumineszenz-Immunoassay.Inkubationszyklen: 1 × 30 minuten.

ProbengewinnungDer Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse mit Vorsicht zuinterpretieren.Die Zentrifugation der Serumproben vordem völligen Abschluss der Gerinnungkann zu Fibringerinnseln führen. Umfehlerhaften Analysenergebnissen infolgevon Gerinnseln vorzubeugen, istsicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Proben vollständigabgeschlossen ist. Insbesondere Probenvon Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen.Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab. IMMULITE 2000Valproinsäure sind nicht mit allenmöglichen Röhrchenvariationenausgetestet worden. Details dergetesteten Röhrchenarten sind demKapitel "Alternative Probenarten" zuentnehmen.Erforderliche Menge: 10 µl Serum oderheparinisiertem Plasma.Lagerung: 2 Tage bei 2–8°C, oder1 Monat bei –20°C.5

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenZur In-vitro-Diagnostik.Reagenzien: Bei einer Temperatur von2–8°C lagern. Gemäß der anwendbarenVorschriften verwerfen.

Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potenziellinfektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht undnegativ befundet.Chemilumineszenz–Substratmodul:Kontaminationen sowie direkteSonnenlichteinwirkungen müssenvermieden werden. (SiehePackungsbeilage.)Wasser: Destilliertes bzw. deionisiertesWasser benutzen.

Im Lieferumfang enthaltenDie Bestandteile sind aufeinanderabgestimmt. Die Aufkleber auf derInnenverpackung werden zurTestdurchführung gebraucht.

Valproinsäure Kugel-Container(L2VA12)Der barcodierte Kugel-Container enthält200 Kugeln, enthält eine mitmonoklonalem Anti- Valproinsäure-Mausantikörper beschichtete Kugel. Bei2–8°C bis zum Ablaufdatum haltbar.L2KVA2: 1 Container. L2KVA6: 3 Container.

Valproinsäure - Reagenzbehälter(L2VAA2)Mit Barcode. 11,5 ml mit alkalischerPhosphatase (Rinderkalbsdarm)konjugierte 6-Amino-2-propylhexansäurein einer humanen Protein-/Puffermatrix.Bei 2–8°C bis zum Ablaufdatum haltbar.L2KVA2: 1 Behälter. L2KVA6: 3 Behälter.Vor Gebrauch den Aufkleber an derPerforation abreißen, ohne dabei dieBarcodierung zu beschädigen. Die Folievon der Oberseite des Containersentfernen. Den Schiebedeckel nach untenin die Führung des Reagenziendeckelseinrasten lassen.

Valproinsäure- Kalibratoren (LVAL,LVAH)Zwei Fläschchen (Low und High) jeweils mit2 ml mit Valproinsäure in verarbeitetemHumanserum, (mit Konservierungsmittel).


30 Tage nach dem Öffnen bei 2–8°Chaltbar oder 6 Monate bei–20°C (aliquotiert).L2KVA2: 1 Set.L2KVA6: 2 Sets.Vor der Kalibrierung die entsprechendenAufkleber (dem Kit beiliegend) aufGlasöhrchen kleben, so daß die Barcodesvom Barcodereader des Systems gelesenwerden können.

Separat erhältliche Testsystem-KomponentenL2SUBM: Chemilumineszenz-SubstratmodulL2PWSM: WaschmodulL2KPM: ReinigungsmodulLRXT: (Einmal-) ReaktionsgefäßeSDCM: Multikomponentenkontrollmodul inzwei Konzentrationen.Ebenfalls benötigtDestilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Teströhrchen, Kontrollen.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes istunbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE 2000-Handbuch beschrieben, regelmäßigdurchgeführt werden.Hinweise zur Vorbereitung, täglichenInbetriebnahme des Systems, derKalibrierung sowie Verfahren zur Test-und Qualitätskontrolle entnehmen Sie bittedem IMMULITE 2000-Handbuch.Empfohlenes Kalibrationsintervall:2 Wochen.

Qualitätskontrollseren: Kontrollen oderSeren mit Valproinsäure in zumindest zweiKonzentrationen (niedrige und hohe)verwenden.

Therapeutischer BereichDer allgemein anerkannte therapeutischeBereich für Valproinsäure ist 50–100 µg/ml (347–693 µmol/l). ÜberToxizität wurde bei Konzentrationen über100 µg/ml berichtet.4

Diese Grenzwerte sind lediglich alsRichtlinien aufzufassen.

Grenzen der MethodeZur ordnungsgemäßen Verwendungdieses Produkts ist es erforderlich, dassdie Informationen in dieserPackungsbeilage vollständig verstandenwerden.

Bitte entnehmen Sie der Spezifitätstabellejene Substanzen, die eine messbareKreuzreaktivität in diesem Testsystemaufweisen. Es kann jedoch nichtausgeschlossen werden, dass auchandere, in dieser Auflistung nichtenthaltene Medikamente und/oderLebensmittel zu einer Kreuzreaktivität imAssay führen.Beim Interpretieren der Valproinsäure-Konzentration sind folgende Punkte zuberücksichtigen:

• Alle vom Patienten gleichzeitigeingenommenen Medikamente

• Zeitpunkt der Probenentnahme imVerhältnis zum Dosierungsverlauf

• Bestehende Krankheiten bzw.Beschwerden

Heterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen innerhalb des invitro Immunoassays verursachen. (Clin.Chem. 1988:34:27-33) Proben vonPatienten, die häufig mit Tier- bzw.Tierserumprodukten zu tun haben, könnendie erwähnten Interferenzen verursachenund zu anomalen Resultaten führen. Dieverwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zudiagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenRepräsentative Daten zum Testentnehmen Sie bitte den Tabellen undgraphischen Darstellungen im englischenTeil dieser Anleitung. Die Ergebnisse sindin µg/ml angegeben. (Sofern nicht andersangegeben, wurden hierfür Serumprobenin Röhrchen ohne Geltrennung undGerinnungshilfen eingesetzt.)


Umrechnungsfaktor:µg/ml × 6,93 → µmol/lMessbereich: 10 – 200 µg/ml(69 – 1 386 µmol/l).Analytische Sensitivität: 1,5 µg/ml(10,4 µmol/l).Präzision: Proben wurden innerhalb von20 Tagen mit jeweils zwei Testansätzen inDoppelbestimmung gemessen (insgesamt40 Bestimmungen und 80 Einzel-messungen). (Siehe Tabelle ”Precision”.)Linearität: Proben wurden getestet, undzwar nachdem sie verschiedenerweiseverdünnt wurden. (Siehe Tabelle”Linearity” für repräsentative Daten.)Wiederfindung: Proben wurden mit dreiValproinsäure Lösungen (525, 1 050 und2 300 µg/ml) im Verhältnis von 1:19versetzt. (Siehe Tabelle ”Recovery” fürrepräsentative Daten.)

Spezifität: Hochspezifischer Anti-Valproinsäure -Antikörper (siehe Tabelle„Specificity“).Bilirubin: Konjugiertes undunkonjugiertes Bilirubin hat inKonzentrationen bis zu 200 mg/l keinenEinfluss auf die Messung, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.

Hämolyse: Hämoglobin hat inKonzentrationen bis zu 512 mg/dl keinenEinfluss auf die Ergebnisse, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.

Lipämie: Triglyceride hat inKonzentrationen bis zu 3 000 mg/dlkeinen Einfluss auf die Ergebnisse, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.Alternative Probenarten: 15 Probenwurden in heparinisierte Röhrchen, bzw.unbehandelte Röhrchen abgenommen.Alle Proben wurden mit Valproinsäureversetzt und anschließend mit demIMMULITE 2000 Valproinsäure Testgemessen.(Heparin) = 1,04 (Serum) – 0,13 µg/mlr = 0,970

Mittelwerte:82 µg/ml (Serum)85 µg/ml (Heparin)

Methodenvergleich: Der Assay wurdeunter Verwendung von 128Patientenproben mit DPC's IMMULITEValproinsäure verglichen.

Konzentrationsbereich: ca. 13 bis200 µg/ml. (Siehe Grafik.) Durch lineareRegression:(IML 2000) = 1,0 (IML) – 1,8 µg/mlr = 0,997

Mittelwerte:79 µg/ml (IMMULITE 2000)80 µg/ml (IMMULITE)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre DPC Niederlassung.Das Qualitätssystem der Diagnostic ProductsCorporation ist nach ISO 13485:2003 registriert.

Español

Acido ValproicoUtilidad del análisis: Para diagnóstico invitro, empleado con el AnalizadorIMMULITE 2000 — para la cuantificaciónde ácido valproico en suero o plasmaheparinizado, como ayuda en el control dela terapia con fármacos.Números de Catálogo:L2KVA2 (200 tests), L2KVA6 (600 tests)Código del Test: VAL Color: Agua

Resumen y Explicacióndel TestEl ácido valproico es usadoprincipalmente en el tratamiento deataques epilépticos con pérdida deconciencia, simples y complejos.1 Puedeadministrarse sólo o en combinación conotros fármacos, como fenobarbital ofenitoína. El ácido valproico eleva laconcentración de ácido γ-aminobutírico(GABA) inhibiendo la transaminasa deGABA.2 GABA es un potente inhibidor delas descargas pre- y postsinápticas en elsistema nervioso central.El ácido valproico circula principalmenteunido a proteína. Compite con la fenitoinapor los sitios de unión a la proteína. Elácido valproico también inibe ladepuración renal del fenobarbital. Cuandoel ácido valproico y el fenobarbital se usanjuntos, la concentración de fenobarbitalpuede elevarse hasta un 40 por ciento.3,4


El ácido valproico es absorbidorápidamente y casi por completo despuésde su administración oral, alcanzando suconcentración máxima después de 1–2horas. En los adultos, su vida media es de16 horas.4 El intervalo terapéutico para elácido valproico es de 50 a 100 µg/ml. Losniveles superiores a 100 µg/ml seconsideran tóxicos. Las concentracionesen plasma deben controlarse para ayudara mantener una dosis efectiva y prevenirlos efectos secundarios por unaconcentración excesiva.4

Principio del análisisEl IMMULITE 2000 Acido Valproico es uninmunoensayo enzimáticoquimioluminiscente competitivo en fasesólida.Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos.

Recogida de la muestraSe recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.

Las muestras hemolizadas podrían indicaruna mala manipulación de la muestraantes de ser recibida por el laboratorio; eneste caso, los resultados debeninterpretarse con precaución.La centrifugacion de las muestras desuero antes de que se forme el coagulopuede ocasionar la presencia de fibrina.Para evitar resultados erroneos debidos ala presencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coagulo completamenteantes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulacion.Los tubos para recoger sangre dedistintos fabricantes pueden producirvalores diferentes, dependiendo delmaterial del tubo y de los aditivos,incluyendo barreras de gel o barrerasfísicas, activadores de la coagulación y/oanticoagulantes. El Acido ValproicoIMMULITE 2000 no ha sido analizado contodos los distintos tipos de tubos. Paraobtener detalles sobre los tipos tubos quese han analizado, consulte la sección deTipos de Muestras Alternativos.

Volumen requerido: 10 µl suero oplasma heparinizado.

Conservación: 2 días a 2–8°C, o1 mes a –20°C.5

Advertencias y PrecaucionesPara uso diagnóstico in vitro.Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo con las normas aplicables.Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerposfrente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.Substrato quimioluminiscente: Evitar lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el prospecto).Agua: Usar agua destilada o desionizada.

Materiales SuministradosLos componentes representan un juegocompleto. Las etiquetas incluidas en lacaja son necesarias para el ensayo.

Cartucho de bolas de Acido Valproico(L2VA12)Con códigos de barras. 200 bolas,recubierta con anticuerpo monoclonalmurino anti-ácido valproico. Estable a2–8°C hasta la fecha de caducidad.L2KVA2: 1 cartucho. L2KVA6: 3 cartuchos.

Vial de reactivo de Acido Valproico(L2VAA2)Con códigos de barras. 11,5 ml defosfatasa alcalina (de intestino de ternera)conjugado a ácido 6-amino-2-propilhexanoico, una matriz proteicahumana en solución tampón. Estable a 2–8°C hasta la fecha de caducidad.L2KVA2: 1 vial. L2KVA6: 3 viales.Antes de usar, cortar la parte superior dela etiqueta en la perforación, sin dañar elcódigo de barras. Quitar el precinto delorificio del vial; encajar la cubiertadeslizante en las rampas de la tapa delreactivo.

Ajustadores de Acido Valproico (LVAL,LVAH)Dos viales (bajo y alto) de cada uno con2 ml que contienen ácido valproico en


suero humano procesado, conconservante. Estable a2–8°C durante 30 días después de abrise,o hasta 6 meses (alicuotados) a –20°C.L2KVA2: 1 juego. L2KVA6: 2 juegos.Antes de procesar adjustadores ocontroles, colocar las etiquetas a lasalícuotas apropiadas (suministradas conel kit) sobre tubos de ensayo, de forma talque los códigos de barras puedan serleídos por el lector.

Componentes del kit que sesuministran por separadoL2SUBM: Substrato quimioluminiscenteL2PWSM: Lavado de sondaL2KPM: Kit de limpieza de sondaLRXT: Tubos de reacción (desechables)SDCM: Un módulo control de suerohumano, de dos niveles, que contieneácido valproico.También necesarioAgua destilada o desionizada, tubos deensayo, controles.

EnsayoAviso: para obtener el funcionamientoóptimo, es importante realizar todos losprocedimientos del mantenimiento generalsegún lo definido en el manual deloperador de IMMULITE 2000.Consulte el Manual del operador deIMMULITE 2000 para: la preparación,instalación, ajuste, ensayo yprocedimientos de control de calidad.Intervalo de ajuste recomendado:2 semanas.

Muestras de Control de Calidad: Utilizarcontroles o pooles de sueros con almenos dos niveles diferentes de ácidovalproico (bajo y alto).

Intervalo TerapéuticoEl intervalo terapéutico comúnmenteaceptado para el ácido valproico es 50 –100 µg/ml (347 – 693 µmol/l). La toxicidadse comunica a concentracionessuperiores a 100 µg/ml.4

Estos límites han de considerarse sólocomo una guía.

LimitacionesEs necesario un conocimiento completode la información contenida en elprotocolo para el correcto uso de esteproducto.Debe consultarse la tabla de especificidadpara ver una lista de sustancias quepueden mostrar una reactividad cruzadamensurable en este ensayo. Otrasmedicaciones y/o alimentos que no seencuentren en esta lista pueden, sinembargo, dar una reactividad cruzada enel ensayo.Debe considerarse los siguientes puntosen la interpretación de la concentración deácido valproico:

• Todas las medicaciones que elpacientes esté tomando en esemomento.

• El tiempo de la muestra en relacióncon la historia de dosificación

• Enfermedades o condicionesexistentes

Los anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productosséricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmenteocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos coneste ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, lahistoria médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características AnalíticasPara ver resultados representativos de lascualidades del ensayo ver las tablas y losgráficos. Los resultados se expresanen µg/ml. (A no ser que se indique locontrario, todos los resultados fuerongenerados en muestras de suero


recogidas en tubos sin geles oactivadores de la coagulación).

Factor de Conversión:µg/ml × 6,93 → µmol/lRango de Calibración: 10 – 200 µg/ml(69 – 1 386 µmol/l).Sensibilidad: 1,5 µg/ml (10,4 µmol/l).Precisión: Las muestras fueronanalizadas por duplicado durante 20 días,en dos tandas de trabajo por día, para untotal de 40 tandas y 80 replicados. (Ver latabla de “Precision”).

Linealidad: Las muestras fueronanalizadas en varias diluciones. (Ver latabla de “Linearity” para resultadosrepresentativos.)Recuperación: Se analizaron muestrassobrecargadas 1 en 19 con tressoluciones ácido valproico (525, 1 050 y2 300 µg/ml) (Ver la tabla de “Recovery”para resultados representativos.)

Especificidad: El anticuerpo es altamenteespecífico para ácido valproico. (Ver latabla "Especificidad")Bilirrubina: La presencia de bilirrubinaconjugada y libre en concentracioneshasta 200 mg/l no tiene efecto en elensayo, en lo concerniente a la precisióndel ensayo.

Hemolisis: La presencia de hemoglobina,en concentraciones hasta 512 mg/dl, notienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.

Lipemia: La presencia de triglicéridos enconcentraciones hasta 3 000 mg/dl notiene efecto alguno en los resultados, enlo correspondiente a la precisión delensayo.Tipo alternativo de muestra: Lasmuestras (n = 15) fueron recogidas entubos vacutainers vacios y heparinizados.Todas las muestras fueron cargadas conácido valproico y ensayadas con el kit deAcido Valproico IMMULITE 2000.(Heparina) = 1,04 (Suero) – 0,13 µg/mlr = 0,970

Medias:82 µg/ml (Suero)85 µg/ml (Heparina)

Comparación del Método: El ensayo fuecomparado con el Acido ValproicoIMMULITE de DPC en 128 muestras depacientes. (Rango de Concentración:

aproximadamente 13 a 200 µg/ml. Ver elgráfico.) Por regresión linear:(IML 2000) = 1,0 (IML) – 1,8 µg/mlr = 0,997

Medias:79 µg/ml (IMMULITE 2000)80 µg/ml (IMMULITE)

Asistencia técnicaContáctese con su Distribuidor Nacional.El Sistema de Calidad de Diagnostic ProductsCorporation está registrado para laISO 13485:2003.

Français

IMMULITE 2000Acide ValproïqueDomaine d'utilisation : Dosagequantitatif de l'acide valproïque dans lesérum ou le plasma hépariné. Réservé àun usage diagnostic in vitro avecl'Analyseur IMMULITE 2000, ce testconstitue une aide au suivi d'un traitementpar l'acide valproïque.Référence catalogue :L2KVA2 (200 tests), L2KVA6 (600 tests)Code produit : VAL.Code couleur : bleu vert.

IntroductionL'acide valproïque est principalementutilisé pour le traitement des crisesd'absence simples ou complexes.1 Il peutêtre administré seul ou associé à d'autresmédicaments, comme le phénobarbital oula phénytoïne. L'acide valproïque accroîtla concentration d'acide gamma-aminobutyrique (GABA) en inhibant laGABA transaminase.2 Le GABA est unpuissant inhibiteur de libération desmédiateurs pré- et post-synaptiques dusystème nerveux central.L'acide valproïque circule principalementlié aux protéines. Il entre en compétitionavec la phénytoïne pour les sites deliaison des protéines. L'acide valproïqueinhibe également la clairance rénale duphénobarbital. Administré conjointementavec l'acide valproïque, le phénobarbitalpeut voir sa concentration augmenterjusqu'à 40%.3,4


L'acide valproïque est rapidement etpresque totalement absorbé aprèsadministration orale, atteignant saconcentration maximale après 1 à 2heures. Chez l'adulte, sa demi-vieplasmatique est de 16 heures.4 La zonethérapeutique de l'acide valproïque va de50 à 100 µg/ml. Un taux supérieur à100 µg/ml est considéré comme toxique.La concentration plasmatique doit êtresuivie dans le temps pour maintenir uneposologie efficace et prévenir les effetssecondaires dus à une concentrationexcessive.4

Principe du testIMMULITE 2000 Acide Valproïque est uneimmunoenzymologie chimioluminescentecompétitive à phase solide.Cycles d'incubation : 1 × 30 minutes.

Recueil des échantillonsIl est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.

Des échantillons hémolysés peuvent êtrerévélateurs d'une préparation inadéquatedu prélèvement avant son envoi aulaboratoire ; il faudra donc interpréter lesrésultats avec prudence.La centrifugation des échantillonssériques avant la formation complète ducaillot peut entraîner la présence defibrine. Pour éviter les résultats erronésdûs à la présence de fibrine, s'assurer dela formation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certainséchantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anti-coagulants, peuventnécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret Acide Valproïque IMMULITE 2000n'a pas été testé sur tous les types detubes possibles. Veuillez consulter lechapitre intitulé Autres Typesd'Échantillons pour plus derenseignements sur les tubes qui ont étéévalués.

Volume nécessaire : 10 µl de sérum oude plasma hépariné

Conditions de conservation :2 jours à +2°C/+8°C ou 1 mois à –20°C.5

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitro.Conserver les réactifs à +2°C/+8°C.Éliminer les déchets conformément auxlois en vigueur.

Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-HCV et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.Substrat chimiluminescent : éviter lacontamination et l'exposition directe ausoleil. (Voir notice).Eau : utiliser de l'eau distillée oudésionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Lesétiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Cartouche de billes Acide valproïque(L2VA12)Avec code-barres. 200 billes revêtuesd'anticorps monoclonal murin anti-acidevalproïque. Stable à +2°C/+8°C jusqu'à ladate de péremption.L2KVA2 : 1 cartoucheL2KVA6 : 3 cartouches

Cartouche à réactif Acide valproïque(L2VAA2)Avec code-barres. 11,5 ml d'acide6-amino-2-propylhexanoïque marqué à laphosphatase alcaline (intestins de veau)dans une matrice tampon / protéineshumaines. Stable à +2°C/+8°C jusqu'à ladate de péremption.L2KVA2: 1 cartouche.L2KVA6: 3 cartouches.Avant l'emploi, retirer la partie supérieurede l'étiquette au niveau des perforationsen ayant soin de ne pas endommager le


code-barres. Retirer le film protecteursitué sur la partie supérieure de lacartouche-réactif ; insérer le couverclecoulissant entre les glissières sur ledessus de la cartouche-réactif.

Ajusteurs Acide valproïque (LVAL,LVAH)2 flacons ("haut" et "bas"), 2 ml chacun,d'acide valproïque dans du sérum humainprétraité, avec conservateur. Stable à+2°C/+8°C pendant 30 jours aprèsouverture ou 6 mois (aliquoté) à –20°C.L2KVA2: 1 jeu. L2KVA6: 2 jeux.Avant de procéder à un ajustement, placerles étiquettes correspondant à l'aliquot(fournies avec le coffret) sur des tubes enverre de sorte que les code-barres soientlisibles par le lecteur.

Composants du coffret fournisséparémentL2SUBM : Substrat chimiluminescentL2PWSM : Solution de lavageL2KPM : Coffret de décontamination del'aiguille de prélèvementLRXT : Godets réactionnels (jetables)SDCM: Un module contrôle à deuxniveaux à base de sérum humain.Egalement requisEau distillée ou désionisée; tubes ;contrôles.

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation IMMULITE 2000.Se reporter au manuel d'utilisation del'IMMULITE 2000 pour : la préparation, ledémarrage du système, les ajustements,le dosage et les procédures de contrôlede qualité.Intervalle d'ajustement recommandé :2 semaines.

Echantillons pour le contrôle de qualité :Utiliser des contrôles ou des pools desérums avec au moins deux niveaux deconcentration (faible ou élevé) d'acidevalproïque.

Zone thérapeutiqueLa zone thérapeutique communémentadmise pour l'acide valproïque va de 50 à100 µg/ml (347 à 693 µmol/l). Une toxicitéa été rapportée pour des concentrationssupérieures à 100 µg/ml.4

Utiliser ces valeurs à titre indicatifuniquement.

LimitesLa parfaite compréhension desinformations données dans cette fichetechnique est indispensable à une bonneutilisation de ce produit.

Le tableau de spécificité doit être consultépour la liste des substances quiprésentent une réactivité croiséemesurable avec ce test. D'autresmédicaments et/ou aliments nonmentionnés dans cette liste sontnéanmoins susceptibles de produire uneréaction croisée avec ce test.Les points suivants doivent êtreconsidérés pour l'interprétation de laconcentration en acide valproïque :

• tout autre médicament prissimultanément par le patient ;

• le moment du prélèvement en liaisonavec l'histoire de la posologie ;

• les maladies ou états cliniques établis.Les anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avecles immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultatanormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,cependant des interactions potentiellesentre des sérums rares et les composantsdu test peuvent se produire. Dans un butdiagnostique, les résultats obtenus avecce dosage doivent toujours être utilisés enassociation avec un examen clinique,l'histoire médicale du patient et d'autresrésultats.


Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances du test. Les résultats sontdonnés en µg/ml. (En l'absence deprécision supplémentaire, tous lesrésultats ont été obtenus sur deséchantillons sériques prélevés sur tubessans gel, ni activateur de la coagulation).

Facteur de conversion :µg/ml × 6,93 → µmol/lDomaine de mesure : 10 – 200 µg/ml(69 – 1 386 µmol/l).Sensibilité analytique : 1,5 µg/ml(10,4 µmol/l).Précision : les valeurs ont été établies àpartir de doublets dosés dans deux sériesdifférentes chaque jour pendant 20 jourssoit au total 40 séries et 80 résultats. (Voirle tableau “ Precision ”.)

Linéarité : les échantillons ont été testésavec des taux de dilution variés. (Voir letableau “ Linearity ” pour des donnéesreprésentatives.)

Récupération: les échantillons testés ontété chargés dans un rapport de 1 à 19avec trois solutions l'acide valproïque(525, 1 050 et 2 300 µg/ml). (Voir letableau “ Recovery ” pour des donnéesreprésentatives.)Spécificité : l'anticorps utilisé esthautement spécifique de acide valproïque.(Voir le tableau « Specificity ».)Bilirubine : La présence de bilirubine,conjuguée ou non, n'a aucun effet sur ledosage ni sur sa précision si laconcentration ne dépasse pas 200 mg/l.Hémolyse : La présence d'hémoglobinene présente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 512 mg/dl.

Lipémie : La présence de triglycéridesjusqu'à une concentration de 3 000 mg/dln'interfère ni sur la précision du dosage, nisur les résultats.

Utilisation de différents typesd'échantillons : les échantillons (n = 15)ont été prélevés sur tubes vacutainer secsou héparinés. Tous les échantillons ontété chargés l'acide valproïque, puis dosésavec le test IMMULITE 2000 AcideValproïque.

(Héparine) = 1,04 (Sérum) – 0,13 µg/mlr = 0,970

Moyennes:82 µg/ml (Sérum)85 µg/ml (Héparine)

Comparaison de méthodes : le test a étécomparé au test IMMULITE AcideValproïque de DPC sur 128 échantillons(dont les concentrations allaient d'environ13 à 200 µg/ml environ. Voir graphique).Par régression linéaire :(IML 2000) = 1,0 (IML) – 1,8 µg/mlr = 0,997

Moyennes :79 µg/ml (IMMULITE 2000)80 µg/ml (IMMULITE)

Assistance techniqueEn France distribué par DPC France 90bd National 92257 La Garenne-ColombesLe système d'assurance qualité de DPC estcertifié ISO 13485 (2003).

Italiano

Acido valproicoUso: Per prove diagnostiche in vitro conl'analizzatore IMMULITE 2000 — per lamisurazione quantitativa dell' acidovalproico nel siero o plasma eparinizzato,quale ausilio nel monitoraggio dellaterapia farmacologica.Codice: L2KVA2 (200 test)L2KVA6 (600 test)Codice del Test: VAL Colore: acqua

Riassunto e spiegazione delTestL'acido valproico viene utilizzatoprincipalmente nel trattamento delle crisid'assenza semplici e complesse.1 Puòessere somministrato da solo o incombinazione ad altri farmaci come ilfenobarbitale o la fenitoina. L'acidovalproico aumenta la concentrazionedell'acido γ-aminobutirico (GABA) inibendola transaminasi del GABA.2 Il GABA è unpotente inibitore delle scariche pre epostsinaptiche del sistema nervosocentrale.


L'acido valproico circola legatoprincipalmente alle proteine. Compete conla fenitoina per i siti di legame delleproteine. L'acido valproico inibisce anchela clearance renale del fenobarbitale.Quando questi due medicinali vengonoutilizzati insieme, la concentrazione delfenobarbitale può aumentare fino al40%.3,4

L'acido valproico viene rapidamente equasi completamente assorbito dopo lasomministrazione orale, raggiungendo laconcentrazione massima dopo 1 – 2 ore.Negli adulti, la sua emivita è di 16 ore.4 Ilrange terapeutico per l'acido valproico ètra 50 e 100 µg/mL. Livelli superiori a100 µg/mL sono considerati tossici. Leconcentrazioni nel plasma devono esserecontrollate per aiutare a mantenere undosaggio efficace e ad evitare gli effetticollaterali causati da una concentrazioneeccessiva.4

Principio del procedimentoIMMULITE 2000 Acido Valproico é undosaggio immunoenzimatico competitivoin chemiluminescenza in fase solida.Cicli d'incubazione: 1 × 30 minuti.

Raccolta del CampioneSi consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.

I campioni emolizzati posson indicare iltrattamento non idoneo del campioneprima dell'arrivo al laboratorio; per questomotivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.La centrifugazione dei campioni del sieroprima che la coagulazione sia completapuò produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che il processo dicoagulazione sia completo prima dicentrifugare i campioni. Alcuni campioni,in modo particolare quelli di pazientisottoposti a terapia con anticoagulanti,possono richiedere tempi di coagulazionepiù lunghi.Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE 2000 Acido Valproico non éstato verificato con tutte le possibili

variazioni di tipi di provette. Consultare lasezione riguardante Campioni Alternativiper dettagli sulle provette testate.Volume richiesto: 10 µL di siero oplasma eparinizzato.Conservazione: 2 giorni a 2–8°C o1 mese a –20°C.5

Avvertenze e PrecauzioniAd uso diagnostico in vitro.Reagenti: Conservare i reagenti a 2–8°C.Eliminare in conformità alle leggi vigenti.Seguire le precauzioni generali emanipolare tutti i componenti come sefossero potenzialmente infetti. I materialiderivati dal sangue umano sono statitestati con esito negativo per la sifilide, glianticorpi anti-HIV 1 e 2, l'Antigene diSuperficie dell'Epatite B e gli Anticorpidell'Epatite C.Substrato Chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucesolare diretta. (Vedi metodica.)

Acqua: Utilizzare solo acqua distillata odeionizzata.

Materiali FornitiI componenti costituiscono un unico set.Le etichette all'interno della confezionesono necessarie per eseguire i dosaggi.

Contenitore di Sferette Acido Valproico(L2VA12)Con codice a barre. 200 sferette coattatecon un anticorpo monoclonale murino anti-acido valproico. Stabile a 2–8°C fino alladata di scadenza.L2KVA2: 1 confezioneL2KVA6: 3 confezioni

Porta reagente Acido Valproico(L2VAA2)Con codice a barre. 11,5 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata con6-amino-2-acido propilesanoico in unamatrice di proteina umana/tampone.Stabile a 2–8°C fino alla data di scadenza.L2KVA2: 1 Porta reagente.L2KVA6: 3 Porta reagenti.Prima dell'utilizzo rimuovere la partesuperiore dell'etichetta lungo laperforazione senza danneggiare il codicea barre. Togliere il foglio protettivo dallaparte superiore del flacone. Far scattare


nella corretta posizione il coperchioscorrevole lungo le guide del coperchiodel reagente.

Calibratori Acido Valproico (LVAL,LVAH)Due flaconi (Basso ed Alto), ciascuno con2 mL di acido valproico in siero umanoprocessato, con conservanti. Stabile a 2–8°C per 30 giorni dopo l'apertura, o per6 mesi (aliquotato) a –20°C.L2KVA2: 1 set. L2KVA6: 2 set.Prima di ricalibrare collocare le etichettegiuste sulle provette delle aliquote (fornitecol kit) cosicché i codici a barre possanoessere registrati dal lettore.

Componenti del kit fornitiseparatamenteL2SUBM: Substrato ChemiluminescenteL2PWSM: Tampone di lavaggio dell'AgoL2KPM: Kit di Pulizia dell'AgoLRXT: Tubi di Reazione (monouso)SDCM: Un modulo di controllo a due livellibasato su siero contenente acidovalproico.Materiali richiestiAcqua distillata o deionizzata; provette divetro; controlli.

Procedura del DosaggioAttenzione: per avere prestazioni ottimali,è importante effettuare le procedure dimanutenzione di routine cosiccomedefinito nel Manuale dell'Operatoredell'IMMULITE 2000.Vedere il manuale dell'operatoreIMMULITE 2000 per: la preparazione, lamessa a punto, la regolazione, la prova edi procedimenti per il controllo della qualità.Intervallo di Calibrazione Consigliato:2 settimane.Controllo di Qualità: Utilizzare controlli opool di sieri con almeno due livelli (Alto eBasso) di acido valproico.

Range terapeuticoIl range terapeutico generalmenteaccettato per l'acido valproico è tra 50 e100 µg/mL (347 – 693 µmol/L). Si èriscontrata tossicità a concentrazionisuperiori a 100 µg/mL.4

Detti valori dovrebbero essere consideratisolo come suggerimento.

LimitiE' necessaria una comprensione completadelle informazioni contenute nellametodica di questo kit per un utilizzoottimale del prodotto.

E' consigliabile consultare la tabella dellaspecificità per un elenco delle sostanzeche crossreagiscono in questo dosaggio.Altri farmaci e/o alimenti che non appaionoin questo elenco possono crossreagirecon il dosaggio.E' consigliabile considerare quanto seguenell'interpretazione della concentrazionedell'acido valproico:

• Tutti i farmaci assunti dai pazienti inconcomitanza.

• Il momento del prelievo del campionein relazione alle dosi assunte.

• Le altre patologie esistentiGli anticorpi eterofili presenti nel sieroumano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentarequesto tipo di interferenza causapotenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti deltest. A scopo diagnostico, i risultati ottenutida questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esameclinico, all'anamnesi del paziente e adaltre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedere le tabelle e le grafiche per i datirappresentativi delle prestazioni dellaprova. I risultati sono espressi in µg/mL.(Se non è notato altrimenti, tutti i risultatisono stati generati nei campioni di sieroraccolti in tubi senza barriere di gelatina oadditivi che promuovono la coagulazione.)


Fattore di Conversione:µg/mL × 6,93 → µmol/LRange di calibrazione: 10 – 200 µg/mL(69 – 1 386 µmol/L).Sensibilità analitica: 1,5 µg/mL(10,4 µmol/L).Precisione: Sono stati dosati campioni indoppio in 20 giorni, due sedute al giorno,per un totale di 40 sedute ed 80 replicati.(Vedi la Tabella “Precision ”.)Linearità: Sono stati dosati campioni invarie forme diluite. (Vedi la Tabella"Linearity" per dati rappresentantivi.)Recupero: Sono stati dosati campioni1:19 ai quali sono state aggiunte tresoluzioni (525, 1 050 e 2 300 µg/mL).(Vedi la Tabella "Recovery" per datirappresentantivi.)Specificità: L'anticorpo è molto specificoper acido valproico. (Vedi tabella"Specificità")

Bilirubina: La presenza di bilirubinaconiugata e non coniugata inconcentrazioni fino a 200 mg/L non hanessun effetto entro il range di precisionedel dosaggio.Emolisi: La presenza di emoglobina inconcentrazioni fino a 512 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.Lipemia: La presenza di trigliceridi inconcentrazioni fino a 3 000 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.Tipo di Campione Alternativo: Icampioni (n = 15) sono stati prelevati inprovette semplici, eparinizzate ovacutainer. L'acido valproico è statoaggiunto a tutti i campioni; poi i campionisono stati analizzati mediante il dosaggioIMMULITE 2000 Acido Valproico.(Eparina) = 1,04 (Siero) – 0,13 µg/mLr = 0,970

Valore medio:82 µg/mL (Siero)85 µg/mL (Eparina)

Comparazione di Metodi: il dosaggio èstato comparato all'Acido Valproico DPCIMMULITE in 128 campioni di pazienti.(Range di concentrazione: da 13 a200 µg/mL circa. Vedere il grafico.)Mediante regressione lineare:

(IML 2000) = 1,0 (IML) – 1,8 µg/mLr = 0,997

Valore medio:79 µg/mL (IMMULITE 2000)80 µg/mL (IMMULITE)

Assistenza TecnicaAll'estero: Si prega di contattare il proprioDistributore DPC Nazionale.Il Sistema Qualità della Diagnostic ProductsCorporation è certificato secondo le normeISO 13485:2003.

Português

Ácido ValpróicoUtilização: Doseamento quantitativo doácido valpróico em soro e plasmaheparinizado em diagnósticos in vitro, emconjunto com o analisador IMMULITE2000, como auxílio na monitorização daterapia de drogas.Números de catálogo:L2KVA2 (200 testes)L2KVA6 (600 testes)Código do teste: VAL. Cor: Verde água

Sumário e explicação do teste O ácido valpróico é usado primàriamenteno tratamento de crises de ausênciacomplexas e simples.1 Pode seradministrado sozinho ou em combinaçãocom outras drogas como fenobarbital oufenitoína.O ácido valpróico aumenta aconcentração do ácido γ-aminobutírico(GABA) inibindo a transaminase GABA.2GABA é um inibidor potente de descargaspré e pós-sinápticas no sistema nervosocentral.

O ácido valpróico circula principalmenteligado a proteínas. Compete com afenitoína por locais ligados à proteína. Oácido valpróico também inibe a libertaçãorenal de fenobarbital. Quando o ácidovalpróico e fenobarbital são usados emconjunto, a concentração de fenobarbitalpode ser aumentada em até 40porcento.3,4

O ácido valpróico é rápida e quasecompletamente absorvido apósadministração oral, alcançando a suaconcentração máxima em 1 a 2 horas. Em


adultos, a sua semi-vida é de 16 horas.4 Ovalor terapêutico para o ácido valpróico éde 50 a 100 µg/mL. Níveis superiores a100 µg/mL são considerados tóxicos. Asconcentrações em plasma devem sermonitorizadas para ajudar a manter umadosagem efectiva e prevenir efeitoscolaterais causados por umaconcentração excessiva.4

Princípio do procedimentoO IMMULITE 2000 Ácido Valpróico é umimunoensaio competitivo de fase sólida,de enzimas quimico-luminosas.Ciclos de incubação: 1 × 30 minutos.

ColheitaRecomenda-se o uso de uma ultracentrífuga para clarear amostraslipémicas.Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto de uma amostraantes do envio para o laboratório; portantoos resultados devem ser interpretadoscom cuidado.A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados errados devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo foi completa antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentes querecebem terapia anticoagulante podemrequerer um maior tempo de formação docoágulo.

Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE 2000Ácido Valpróico não foram ainda testadoscom todas as possiveis variaçõesoriginadas pelos tipos de tubos. Consultara secção Tipos de Amostras Alternativaspara obter detalhes sobre os tubos queforam testados.Volume de amostra: 10 µL de soro ouplasma heparinizado.Estabilidade: 2 dias a 2–8°C, ou 1 mês a–20°C.5

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.Reagentes: Manter a 2–8°C. Elimine deacordo com as normas aplicadas.

Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primasobtidas de soro humano foram testadas,dando resultados negativos para a sífilis,para os anticorpos do vírus daimunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.Substrato quimioluminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula).Água: Utilize água destilada oudesionizada.

Materiais fornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. Os códigos de barras nointerior das caixas são necessários para oensaio.

Embalagem de pérolas de ÁcidoValpróico (L2VA12)Com código de barras. Contém 200pérolas revestidas com anticorpo anti-ácido valpróico monoclonal de rato. Estávelaté a data de validade a 2–8°C.L2KVA2: 1 embalagem.L2KVA6: 3 embalagens.

Embalagem de reagentes de ÁcidoValpróico (L2VAA2)Com código de barras. 11,5 mL defosfatase alcalina (de intestino de vitela)conjugada com anticorpo de ácido6-amino-2-propilhexanóico, em matrizproteica humana, tamponizada. Estávelaté a data de validade a 2–8°C.L2KVA2: 1 conjunto.L2KVA6: 3 conjuntos.Antes de utilizar, retire a etiqueta deprotecção da tampa deslizante; levante atampa,remova o remanescente daetiqueta com o cuidado de não danificar ocódigo de barras. Remova o selo dealumínio do topo da embalagem, encaixea tampa deslizante nas ranhuras everifique se a tampa desliza.


Ajustes Ácido Valpróico (LVAL, LVAH)Contém dois frascos (nível alto e baixo)cada um contendo 2 mL de ácido valpróicoem soro humano processado, comconservante. Estável, após a abertura,durante 30 dias a 2–8°C, ou por 6 meses(aliquotado) a –20°C.L2KVA2: 1 conjunto.L2KVA6: 2 conjuntos.Antes de realizar qualquer ajuste, coloqueas etiquetas da alíquota apropriadas(fornecidas com o "kit") em tubos deamostra de forma que os códigos debarras possam ser lidos pelo dispositivode leitura do aparelho.

Componentes do kit fornecidosseparadamenteL2SUBM: Substrato quimioluminescenteL2PWSM: Solução de lavagemL2KPM: Kit de limpeza do pipetadorLRXT: Tubos de reacção (descartáveis)SDCM: Um módulo de controlo baseadoem soro humano de dois níveis contendoácido valpróico.

Também necessárioÁgua destilada ou desionizada; tubos deamostra; controlos.

Procedimento do doseamentoTêr em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos demanutenção de rotina conforme definidono Manual de Operador do IMMULITE2000.Consulte o Manual do Operador deIMMULITE 2000 para para instruçõessobre preparação, ajuste, doseamento eprocedimentos de controlo de qualidade.

Intervalo entre ajustes aconselhável:2 semanas.Amostras de controlo de qualidade:utilize controlos ou "pools" com, pelomenos, dois níveis (alto e baixo) de ácidovalpróico.

Zona terapêuticaA zona terapêutica vulgarmente aceitepara o ácido valpróico é de 50 –100 µg/mL (347 – 693 µmol/L). Toxicidadefoi relatada em concentrações superioresa 100 µg/mL.4

Estes valores devem ser consideradosapenas como directrizes.

Limitações A total compreensão da informaçãocontida no protocolo desta embalagem énecessária para o uso adequado desteproduto.

A tabela de especificidade deve serconsultada para a lista de substânciasque apresentam reactividade cruzadamensurável neste doseamento. Outrosmedicamentos e/ou alimentos nãoencontrados nesta lista podem mesmoassim apresentar reactividade cruzada nodoseamento.

O seguinte deve ser considerado nainterpretação de concentrações de ácidovalpróico:

• Todos os medicamentossimultâneamente ingeridos pelodoente

• A hora da colheita de amostrarelativamente à história da dosagem

• Doenças ou condições existentesOs anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentesforam formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados emcombinação com o exame clínico, históriade medicação do doente e outrosachados que possam correlacionar.

Características do ensaioVer tabelas e gráficos para dadosrepresentativos da performance dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em µg/mL. Salvo referênciaem contrário, todos os dados provêm deamostras de soro colhidas em tubos sem


anticoagulantes, barreiras de gel ouaditivos promotores da coagulação.

Factor de conversão:µg/mL × 6,93 → µmol/LCalibração: 10 – 200 µg/mL(69 – 1 386 µmol/L).Sensibilidade Analítica: 1,5 µg/mL(10,4 µmol/L).

Precisão: As amostras foram doseadasem duplicado durante 20 dias, 2 ensaiospor dia, perfazendo um total de 40ensaios e 80 réplicas. (Ver a tabela de"Precisão ".)Linearidade: As amostras foramdoseadas sob vários níveis de diluição.(Ver a tabela de "Linearidade" para dadosrepresentativos.)

Recuperação: Às amostras foramadicionadas na relação de 1 para 19 comtrês soluções ácido valpróico (525, 1 050e 2 300 µg/mL) antes do doseamento.(Ver tabela de "Recuperação" para dadosrepresentativos.)Especificidade: O doseamento éespecífico para ácido valpróico. (Consultea tabela de "Specificity".)Bilirrubina: A presença de bilirubinaconjugada e não conjugada emconcentrações até 200 mg/L não temefeito no procedimento dentro da precisãodo ensaio.Hemolise: A presença de hemoglobinaem concentrações até 512 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Lipemia: A presença de trigliceridos emconcentrações até 3 000 mg/dL não temefeito nos resultados, dentro da precisãodo ensaio.Tipo de amostras alternativas: Asamostras (n = 15) foram extraídas paratubos de vacutainer heparinizados esimples. Todas as amostras foramadicionadas com ácido valpróico e depoisdoseadas pelo procedimento de ÁcidoValpróico IMMULITE 2000 da DPC.(Heparina) = 1,04 (Soro) – 0,13 µg/mLr = 0,970

Médias:82 µg/mL (Soro)85 µg/mL (Heparina)

Comparação de Métodos: Odoseamento foi comparado ao Kit de Acid

Valpróico IMMULITE da DPC em 128amostras de doentes. (Zona de trabalho:aproximadamente 13 a 200 µg/mL.Consulte o gráfico.) Regressão linear:(IML 2000) = 1,0 (IML) – 1,8 µg/mLr = 0,997

Médias:79 µg/mL (IMMULITE 2000)80 µg/mL (IMMULITE)

Assistência Técnica:Por favor contacte o seu DistribuidorNacional.O Sistema de Qualidade da Diagnostic ProductsCorporation está registado sob ISO 13485:2003.

Diagnostic Products CorporationCorporate Offices5210 Pacific Concourse DriveLos Angeles, CA 90045-6900USA2005-04-05PIL2KVA – 7

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Valproic Acid - Diagnostic Products Corporation...IMMULITE 2000 Valproic Acid (PIL2KVA-7, 2005-04-05) 3 Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are