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F A C U L T A D D E F A R M A C I A Y B I O Q U Í M I C A

E S C U E L A D E F A R M A C I A Y B I O Q U Í M I C A

INFORME DE TESIS II

“CUANTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES TOTALES EN EXTRACTO DE PROPOLEOS

(Própolis) DE LA MARCA “KAITA” COMERCIALIZADO EN LA CIUDAD DE TRUJILLO”

AUTORES:

ARAUJO GUTIÉRREZ, Jacqueline Denisse

LINARES RUIZ, Diego Armando

ASESOR:

Mg Q.F Roger Antonio Rengifo Penadillos

TRUJILLO – PERÚ

2015

Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación

Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/

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PRESENTACIÓN

Señores Miembros del Jurado:

Dando cumplimiento a las disposiciones establecidas en el reglamento de la Facultad de

Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo - UNT, someto a su consideración y

elevado criterio científico el presente trabajo de investigación intitulado:

“CUANTIFICACION DE FLAVONOIDES TOTALES EN EXTRACTO DE PROPOLEOS

(Própolis) DE LA MARCA “KAITA” COMERCIALIZADO EN LA CIUDAD DE TRUJILLO”

Es propicia la oportunidad para manifestarles el más sincero reconocimiento a nuestra Alma

Mater y plana docente, que con su capacidad y buena voluntad contribuyeron con nuestra formación

profesional.

Dejamos a vuestro criterio señores miembros del jurado la calificación y veredicto del

presente trabajo de investigación científica.

Trujillo, Julio de 2015

_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ Araujo Gutiérrez, Jacqueline Denisse Linares Ruiz, Diego Armando



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JURADO EVALUADOR

_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ______ _ _ _ _ _ _ _

Dr. Q.F. Segundo Guillermo Ruiz Reyes

PRESIDENTE

_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ______ _ _ _ _ _ _ _ _

Dr. Q.F. Edmundo Arturo Venegas Casanova

MIEMBRO

_ _ _ _ _ _ _ _ ______ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

Mg. Q.F. Roger Rengifo Penadillos

MIEMBRO



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DEDICATORIAS

A nuestro Señor Jesucristo, por su protección y bendición

brindada, ayudándome a esforzarme y ser valiente ante

cualquier adversidad en el cumplimiento de mis metas.

A mis padres Leo y Conce, por haberme apoyado en

todo momento, por sus consejos, llamadas de

atención, valores, por la motivación constante que me

ha permitido ser una persona de bien, pero más que

nada, por su amor incondicional.

A mis hermanas, Karina Isabel y Pamela Naomi, por su

interminable apoyo y motivación a seguir adelante, porque

gracias a ellos todo fue más fácil. Los quiero mucho.

Diego Armando



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iv

A nuestro Señor Jesucristo, por su protección y bendición,

ayudándome a esforzarme y ser valiente ante cualquier

adversidad en el cumplimiento de mis metas.

A mis padres Juan y María, por ser las personas a

quien más admiro, por su inmenso sacrificio en todos

estos años, por ser el motivo que me impulso a seguir

adelante y no amilanarme frente a cualquier

adversidad, por su interminable paciencia y perdón

ante mis constantes errores, pero más que nada, por

su amor incondicional. Los amo.

A mis hermanos, Jovana, Edwin, Tania, Juan y Edgar, por

ser el ejemplo a seguir, por sus consejos, interminable

apoyo y motivación a seguir adelante, porque gracias a

ellos todo fue más fácil. Los quiero mucho.

Jacqueline Denisse



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AGRADECIMIENTOS

A la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la

Universidad Nacional de Trujillo y sus docentes por la

exigencia y elevado nivel académico brindado a lo largo

de la carrera, responsables de nuestra formación

Académico-Profesional.

A nuestro asesor de trabajo de investigación, el

Profesor Roger Rengifo Penadillos, por su apoyo

desinteresado, por sus conocimientos y enseñanzas

impartidas, por su interminable paciencia, por su

buena disposición y comprensión en la ejecución de

este trabajo, pero sobre todo por ser amigo y

compañero.

Los Autores



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ÍNDICE GENERAL

Pág.

Presentación i

Jurado Dictaminador ii

Dedicatoria iii

Agradecimiento v

Índice vi

Resumen vii

Abstract viii

I. INTRODUCCIÓN 01

II. MATERIAL Y MÉTODO 07

III. RESULTADOS 11

IV. DISCUSIÓN 14

V. CONCLUSIONES 17

VI. RECOMENDACIONES 18

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 19

VIII. ANEXOS 22



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RESUMEN

El presente trabajo tuvo por finalidad determinar la cantidad de flavonoides totales que

contiene el extracto de Propóleos (Própolis) de la marca “Kaita” (Propóleos Forte). Se obtuvo la

muestra de propóleos en la casa naturista “Kaita” de la ciudad de Trujillo; con la cual se hicieron

pruebas de identificación de flavonoides, Se realizó la extracción de flavonoides por hidrolisis hasta la

obtención de cristales. La cuantificación de los flavonoides totales se realizó por el método descrito

por Kostennikova Z. adaptado por la cátedra de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y

Bioquímica de la U.N.T., mediante espectrofotometría UV-visible a 258 nm., para la cuantificación de

estos se usó estándar de quercetina. Los resultados indican que el extracto de propóleos contiene en su

composición flavonoides al presentar respuestas positivas en todas las pruebas realizadas. La cantidad

de flavonoides totales expresados como quercetina fue de 0,254 mg/mL.

.

Palabras clave: Propóleos, Flavonoides, extracto.



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ABSTRACT

The present study was aimed at determining the amount of total flavonoids containing extract Propolis

(propolis) brand "Kaita" (Propolis Forte). Propolis sample naturist home "Kaita" of the city of Trujillo

was obtained; with which tests were identification of flavonoids, the flavonoids extraction was

performed by hydrolysis to obtain crystals. Quantification of total flavonoids was performed by the

method described by Z. Kostennikova adapted by the chair of Pharmacognosy, Faculty of Pharmacy

and Biochemistry of the UNT, by UV-visible spectrophotometry at 258 nm., For the quantification of

these it was used quercetin standard. The results indicate that the propolis extract containing

flavonoids in its composition to present positive responses in all tests. The amount of total flavonoids

expressed as quercetin was 0.254 mg / mL.

Keywords: Propolis, Flavonoids, extract.



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I. INTRODUCCIÓN

En los últimos años ha surgido una tendencia global hacia el uso de sustancias bioactivas presentes en

fuentes naturales como frutas, hortalizas, aceites vegetales y hierbas. Hoy el mundo parece ser cada

vez más interesado en la prevención y tratamiento de enfermedades. Se acepta generalmente que los

efectos beneficiosos de los remedios a base de plantas medicinales se pueden obtener de componentes

activos presentes en estas (por ejemplo, flores, frutos, raíces u hojas), o se pueden preparar extractos,

ya sea crudos o estado procesado1,2.

El Perú se encuentra inmerso en este contexto, la comercialización de los productos naturales se viene

dando a gran escala. Estos productos son elaborados en laboratorios de fitofármacos, apoyados por

distribuidoras nacionales o internacionales3. En esta búsqueda, la presente investigación está centrada

en el estudio de algunos productos comercializados como extractos preparados de Propóleos

(Própolis).

Los propóleos son un conjunto de sustancias que se obtiene por la adición de cera y secreciones

salivales de las abejas al material resinoso, gomoso y balsámico, de consistencia viscosa recogido por

éstas, de algunas especies vegetales (pino, abeto, sauce, abedul, varias especies de álamo, fresno,

roble, etc.)4.

El producto presenta propiedades antiinflamatorias, inmunoestimulantes, hepatoprotectoras,

carcinoestáticas, antimicrobianas, antivirales, antifúngicos, antiprotozoarios, y de regeneración tisular.

Diversos trabajos han demostrado que el propóleos es una fuente natural de antioxidantes, que

protegen a los aceites y lipoproteínas séricas de la oxidación. Sus propiedades antioxidantes se deben

a su actividad antirradicalaria particularmente, frente a radicales alcoxi y en menor grado, a



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superóxido y al efecto inhibidor sobre el ión cuproso, iniciador de la oxidación de las lipoproteínas de

baja densidad5.

De los compuestos identificados en esta especie el 50% son compuestos fenólicos, a los cuales se les

atribuye acción farmacológica. Los principales fenoles identificados son: flavonoides, ácidos

aromáticos y sus ésteres, aldehídos aromáticos, cumarinas, triglicéridos fenólicos. Los flavonoides,

son quizá los componentes de mayor interés en los propóleos4.

El extracto de propóleos es un producto semielaborado que se obtiene procesando los propóleos con

un solvente de manera de extraer los componentes biológicamente activos. Posteriormente, se evapora

el alcohol trabajando a una temperatura baja y controlada. A partir del extracto se pueden desarrollar

una gran variedad de productos5.

Los flavonoides son un grupo de compuestos fenólicos ampliamente distribuidos en el reino vegetal.

Como características generales de estos compuestos debemos señalar su solubilidad en agua y etanol,

su carácter fenólico y su intensa absorción en la región ultravioleta del espectro debido a la presencia

de sistemas aromáticos conjugados. Estos compuestos tienen importantes propiedades antioxidantes,

ya que minimizan la peroxidación lipídica y el efecto de los radicales libres, contribuyendo de esta

manera a reducir el riesgo de enfermedades cardiovasculares5,6.

La cuantificación de flavonoides en productos naturales, usualmente se hace mediante cromatografía

de capa fina, análisis colorimétrico, cromatografía de gas, cromatografía de gases acoplada a masas

GC/MS y cromatografía líquida de alta eficiencia. Los métodos por cromatografía de gases y de alta

eficiencia aportan información definitiva en la caracterización de las muestras, pero presentan

limitaciones importantes debido a los costos del equipamiento y la participación de personal con

formación específica en el área instrumental. En cambio, los métodos espectrofotométricos permiten

cuantificar flavonoides con estructuras similares y son convenientes y apropiados en las



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determinaciones de rutina, aunque presenten limitaciones en la sensibilidad y especificidad. Las

flavonas y flavonoles, desde el punto de vista reactivo, forman complejos estables con el tricloruro de

aluminio y son susceptibles de analizar mediante espectrofotometría ultravioleta-visible4,7.

La necesidad de cuantificar flavonoides totales en Propóleos (Própolis) es debido al incremento y

desarrollo de preparados comerciales a base de estas especies, además la literatura existente en estos

productos menciona que en su formulación contiene flavonoides a los cuales les atribuyen la actividad

principal del Propóleos (Própolis) siendo la relación flavonoides-efecto biológico la que revela el

interés de cuantificar estos fitoconstituyentes.

De acuerdo a las consideraciones se formuló el siguiente problema:

¿Cuál es la cantidad de flavonoides totales en el extracto de Propóleos (Própolis) de la marca “Kaita”

comercializado en la ciudad de Trujillo?

Objetivos:

1. Cuantificar flavonoides totales en extracto de Propóleos (Própolis) de la marca Kaita

comercializado en la ciudad de Trujillo.



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II. MATERIAL Y MÉTODO

1. Material de Estudio:

1.1. Material Botánico:

Extracto de Propóleos (Própolis) de la marca “Kaita” comercializado en la ciudad

de Trujillo.

Presentación: Frasco x 120 mL (2 frascos).

Lote: 004319K.

Fecha de Vencimiento: Febrero 2016.

1.2. Material de Laboratorio:

El de uso común de laboratorio.

2. Equipos:

Balanza analítica, Sartorius Cod. 38886.

Espectrofotómetro, Jenway Modelo 6105.

Estufa Fanem Modelo 315 S.E.

Refrigerador Avanti Modelo 34 – 3R G.

3. Reactivos:

Acetato de plomo al 10%

Ácido sulfúrico 98% de pureza

Ácido clorhídrico cc

Agua destilada



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Cloruro de aluminio al 10%

Estándar de Quercetina

Etanol al 96%

Láminas de Magnesio metálico.

4. Método:

Se utilizó el método de “Espectrofotometría UV- visible” 8

4.1. Recolección de la muestra:

La muestra de estudio se adquirió en la casa naturista “Kaita” en la ciudad de

Trujillo, donde se comercializa como extracto etanólico en la siguiente

presentación:

- Nombre del producto: “Propóleos Forte” frasco x 120 mL

- Dirección del Establecimiento: Jirón Francisco Pizarro N° 769, La Libertad -

Trujillo.

4.2. Identificación de compuestos flavonoides:

4.2.1. Reacción con acetato de plomo:

Se pipeteó 2,5 mL de extracto de Propóleos (Própolis) en un tubo de

ensayo y se adicionó 7,0 mL de etanol al 95% y 0,5 mL de acetato de

plomo al 10%. Se agitó bien y se dejó en reposo por 24 horas. Pasado este

tiempo se anotó el color del precipitado8.



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4.2.2. Reacción de Magnesio en presencia de ácido clorhídrico. (Reacción

de Shinoda):

En un tubo de ensayo se colocó 2,0 mL de extracto de Propóleos

(Própolis) y se adicionó granallas de magnesio metálico y 0,3 mL de

ácido clorhídrico concentrado. Se dejó reposar por 10 minutos. Se anotó

la coloración observada 8

4.3. Cuantificación de flavonoides totales del extracto de Propóleos (Própolis)

mediante espectrofotometría UV- visible:

La cuantificación de flavonoides totales se realizó por el método descrito por

Kostennikova Z. adaptado en la cátedra de Farmacognosia de la Facultad de

Farmacia y Bioquímica de la UNT, utilizando el espectrofotómetro UV-visible,

expresándose como mg/mL de quercetina.

4.3.1. Preparación de la muestra:

Hidrólisis de Flavonoides8:

Se midió 50 mL del extracto de propóleos y llevándose a sequedad hasta obtener

un extracto blando. Se trasvasó a un balón, y llevándose a reflujo en baño maría

con 5,6 mL de ácido sulfúrico al 10 % y 100 mL de agua destilada durante 2 horas.

4.3.2. Purificación de flavonoides totales:

Se añadió 100 mL de agua hirviendo enfriándose el extracto a temperatura

ambiente y se llevó a refrigeración a 10°C durante 1 hora.



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El extracto refrigerado se filtró al vacío sobre embudo büchner previamente

acondicionado a una temperatura menor a 15ºC, luego se lavó el residuo con 3

volúmenes sucesivos de 400 mL de agua destilada helada.

Se llevó el papel filtro que contiene los flavonoides totales, en forma de

cristales, a la estufa a 40ºC durante 2 horas.

4.3.3. Cuantificación de Flavonoides8,9,10:

Preparación de la solución problema

Se pesó los cristales purificados equivalentes a 0,2 g de droga aforándose a

100 mL con etanol al 96°GL; de éste aforo se midió tres alícuotas de 3 mL

aproximadamente, y de cada alícuota se obtuvo 3 lecturas de absorbancias a

258 nm en el espectrofotómetro UV-Visible.

Como estándar se empleó 0,04 g de Quercetina, disolviéndose con etanol de

96°GL y se aforó a 50 mL; de esta solución se midió 1 mL y aforándose a 100

mL con etanol al 96°GL, luego se vertió una alícuota a la celda y se llevó a

realizar la lectura de la absorbancia por triplicado.

Como blanco se utilizara etanol al 96°GL.

Para los cálculos de flavonoides totales expresados como quercetina en el extracto

de Propóleos (Própolis) se utilizará la siguiente ecuación:

X= Am x CST x 100 x PST

AR

Dónde:

X : Contenido de flavonoides totales expresados como Quercetina (mg/mL).



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Am : Absorbancia de la solución muestra.

CST : Concentración del estándar de lectura (mg/mL).

AR : Absorbancia de la solución de referencia.

PST : Potencia del estándar.

4.4. Análisis de los datos:

Utilizando el programa Microsoft Office Excel 2013, a los datos obtenidos se

realizó un tratamiento estadístico con los estimadores de promedio, desviación

estándar, coeficiente de variación y límites de confianza.



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III. RESULTADOS

Tabla 1: Identificación de Flavonoides en la muestras de extracto de propóleos (Própolis) de la

marca “Kaita” (Propóleos Forte).

ANALISIS COLORACION

Acetato de Plomo

Amarillo

Shinoda

Rojo púrpura

Tabla 2: Absorbancias del extracto de propóleos (Própolis) de la marca “Kaita” (Propóleos

Forte).

Muestra Abs <258nm> Promedios de las

Absorbancias

M1

0.143

0.144 0.145

0.144

M2

0.145

0.145 0.144

0.145

M3

0.146

0.146 0.145

0.146

Tabla 3: Absorbancia de 0.0080 mg/mL de Quercetina Estándar

Nombre Abs <258nm> Promedio

Estándar

Lectura 1 0.46

0.459 Lectura 2 0.458

Lectura 3 0.459



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Tabla 4: Flavonoides Totales expresados como Quercetina en el extracto de propóleos (Própolis)

de la marca “Kaita” (Propóleos Forte)

Muestras Flavonoides Totales

mg/mL

M1 0.252

M2 0.254

M3 0.255

Promedio 0.254

Tabla 5: Análisis estadístico para los Flavonoides Totales expresados como Quercetina en el

extracto de propóleos (Própolis) de la marca “Kaita” (Propóleos Forte)

Desviación Estándar 0,0014 mg/mL

Coeficiente de Variación 0,5%

Límites de Confianza 0,2536 ± 0,0139 mg/mL



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IV. DISCUSIÓN

En el presente trabajo de investigación se cuantificaron los flavonoides totales presentes en el extracto

de propóleos (Própolis) de la marca “Kaita” (Propóleos Forte) con la finalidad de asentar las bases

bibliográficas y la literatura de este producto la cual menciona que en su formulación contiene

flavonoides a los cuales les atribuyen la actividad principal del Propóleos (Própolis).

Los flavonoides se pueden identificar experimentalmente mediante diferentes ensayos de coloración.

Para la identificación cualitativa de flavonoides se utilizó la reacción con acetato de plomo y la

reacción de Shinoda. Según la norma Salvadoreña, estándar de calidad oficial europeo que establece

no sólo la identificación cualitativa de compuestos flavonoides, sino también la cuantificación de estos

compuestos ambas reacciones deben ser positivas para que el producto sea aceptado. Un precipitado

amarillento o una solución turbia, color amarillo opaco es prueba positiva con acetato de plomo,

mientras que una coloración anaranjada, roja, verde, azul o violeta es prueba positiva con la reacción

de Shinoda5,11.

En la tabla 1 se observa los resultados obtenidos después de aplicar las pruebas de identificación de

flavonoides; en la reacción con acetato de plomo se obtuvo un precipitado amarillo. La reacción con el

acetato de plomo se fundamenta en la formación de un complejo coloreado entre el plomo y los di y

polihidroxifenoles como las flavonas, flavonoles, flavanonas dihidroxiladas, flavanoles y

antocianidinas di y trihidroxiladas. En la reacción de Shinoda se observó una coloración rojo púrpura.

Las coloraciones observadas en esta reacción se ajustan a lo indicado en la norma Salvadoreña.

Los flavonoides con el núcleo benzopirona (p. ej. flavonas, flavonoles, flavanonas, etc.) producen

coloraciones rojizas cuando a sus disoluciones acuosas o alcohólicas se les adiciona magnesio seguido

de HCl concentrado, el magnesio metálico es oxidado por el ácido clorhídrico concentrado, dando



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como productos al hidrógeno molecular, que es eliminado en forma de gas y el cloruro de magnesio,

que es el que forma complejos con los flavonoides dando coloraciones características. El magnesio

divalente, actúa sobre el grupo carbonilo de dos flavonas, produciendo una coloración roja, este

aumento de intensidad es debido a que el magnesio divalente intensifica la coloración por estar

doblemente coordinado3,13.

En la cuantificación de flavonoides se empleó el método espectrofotométrico, este se basa en la

estructura de los flavonoides que tienen la presencia de grupos aromáticos que presentan absorbancias

características en el UV, las cuales están sujetas a desplazamientos pronosticables, por eso todos los

flavonoides en etanol presentan la banda II, intensa a 240-270 nm, esta se asocia con el anillo A o

sistema benzoil de los Flavonoides , la cual permite cuantificar diversos tipos de flavonoides por la

similitud estructural que posee 10.

En la tabla 4, la cantidad de flavonoides totales encontrados en el extracto de propóleos (Própolis) de

la marca “Kaita” (Propóleos Forte) fue de 0,254 mg/mL expresados como quercetina con una

desviación estándar de 0,0014 y con un coeficiente de variación de 0,5%.

La desviación estándar es una medida de dispersión que muestra el grado de proximidad de los datos

al valor de la media, cuanto menor es la desviación estándar, más estrechamente se agrupan los datos

alrededor de la media 10. En la Tabla 05, los datos que se obtuvieron presentan un grado de dispersión

muy pequeños, lo que indica que existe una cierta homogeneidad entre ellos.

El coeficiente de variación es una medida relativa de dispersión que expresa a la desviación estándar

como un porcentaje de la media, nos indica si la distribución está concentrada en torno a la media

independientemente de la escala que utilicemos y se considera muy homogéneo a valores de 0% a

10%10.



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En la Tabla 05, los valores obtenidos en este estudio están dentro de este rango, por lo tanto son

precisos ya que se mantuvieron constantes todas aquellas condiciones que, si cambiarían, podrían

causar desviaciones sistemáticas de medición.

Asimismo el intervalo de confianza para la cantidad de flavonoides totales en el extracto fue (0,2536 ±

0,0139) mg/mL expresados como quercetina.

Se han realizado trabajos de investigación sobre cuantificación de flavonoides totales expresados

como quercetina utilizando el método de Kostennikova Z., en la especie Piper adúncum como el

desarrollado por Valle B. y Yanac A. en el cual al analizar hojas de esta especie procedentes del

distrito de Chota-Cajamarca, y del jardín botánico "Rosa Elena de Ríos Martínez" de la Universidad

Nacional de Trujillo, obtuvieron una concentración de 0,0201 mg/mL y 0,0097 mg/mL de flavonoides

totales en el extracto hidroalcohólico, respectivamente. Asimismo en el trabajo realizado por Miranda

N. y Mori I. obtuvieron 0,2815 mg/mL de flavonoides totales en el extracto hídroálcohólico de hojas

de Piper aduncum procedentes de San Marcos-Cajamarca expresados como quercetina6,14.



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V. CONCLUSIONES

1. El extracto de Propoleos (Própolis) de la marca “Kaita” (Propóleos Forte) comercializado en

la ciudad de Trujillo, tiene una concentración de 0,254 mg/mL de flavonoides totales

expresados como quercetina.



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VI. RECOMENDACIONES

1. Realizar estudios farmacológicos, tóxicos y clínicos del extracto de Propóleos (Própolis)

de la marca “Kaita” (Propóleos Forte) con la finalidad de dar un soporte científico a la

acción del extracto de propóleos.



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VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Dehbi F, et al. Bioactive Constituents, Antioxidant Activity and in Vitro Cancer Cell

Cytotoxicity of Moroccan Prickly Pear (Opuntia ficus indica L.) Juices. Journal of Natural

Sciences Research. [revista online]. 2013, [citado 10 Febr. 2015], 3(14): 12-20. Disponible

en: http://www.iiste.org/Journals/index.php/JNSR/article/viewFile/9694/9909

2. Valenzuela F. Comercialización de los Productos Naturales en Lima Metropolitana,

Dirección Ejecutiva de Medicina Alternativa y Complementaria, Centro Nacional de Salud

Intercultural. Instituto Nacional de Salud. Lima, Perú. 2005. [Artículo online]. [citado 05

Ener. 2015]. Disponible en:

http://www.ins.gob.pe/repositorioaps/0/7/jer/censi_ofer_estu/Comercializacion_productos_naturales.pdf

3. Rengifo R. Cuantificación de Flavonoides en el Extracto Etanólico de Propóleos. Rev.

Pharmaciencie [revista online]. dic. 2013, [citado 01 Ener. 2015], 1(2):51-56. Disponible en:

http://revistas.unitru.edu.pe/index.php/farmabioq/article/view/462/418

4. Salamanca G, et al. Perfil de flavonoides e índices de oxidación de algunos propóleos

colombianos. [articulo online]. mar. 2007, [citado 09 Febr. 2015], 25(2):95-102. Disponible

en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0798-72692007000200005&script=sci_arttext

5. Portal C, Avendaño P. Control de calidad del extracto etanólico de propóleos comercializado en

las casas Naturistas de la ciudad de Trujillo. [Trabajo de Investigación II]. Trujillo; Biblioteca de

la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo - Perú; 2009.



http://www.ins.gob.pe/repositorioaps/0/7/jer/censi_ofer_estu/Comercializacion_productos_naturales.pdf

http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0798-72692007000200005&script=sci_arttext

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6. Miranda N y Mori Z,. Cuantificación por el método espectrofotométrico de flavonoides

totales en extracto hidroalcohólico de hojas de Piper aduncum. [Trabajo de Investigación I].

Trujillo; Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de

Trujillo - Perú; 2009.

7. Bedascarra, E. Contenido de Fenoles y Flavonoides del Propóleos Argentino. [articulo

online]. 2004, [citado 18 dic. 2014], 23(3):369-72. Disponible en:

http://www.latamjpharm.org/trabajos/23/3/LAJOP_23_3_2_2_5OA9K8V7K9.pdf

8. Lock O,. Investigación. Métodos en el estudio de productos Naturales. Peru: Fondo

Editorial; 1994.p. 91, 111, 206.

9. Horna L, López C,. Estudio Farmacognostico y Cuantificacion de Flavonoides Totales de las

Hojas de Sambucus peruviana H.B.K. (Sauco) proveniente de la ciudad de Huamachuco.

[Trabajo de Investigación I]. Trujillo; Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de

la Universidad Nacional de Trujillo - Perú; 2012.

10. García M, Sandoval J. Cuantificación por el Método Espectrofotométrico de Flavonoides

Totales en el extracto etanolico de hojas de Cordia lutea Lam. “Flor de overo” procedente

del distrito de Laredo, provincia de Trujillo, región la Libertad.

11. Norma Salvadoreña. NSO 65.19.02:03 Calidad de propóleo crudo. [artículo de periódico en

línea]. CONACYT – 2003. < http://faolex.fao.org/docs/pdf/els49789.pd f>. [consulta: 22 de

julio 2015].

12. Russian Regional Standards RSFSR Norma Rusa RS-RSFR-317-77. (1977). [consulta: 22 de

julio 2015].



http://www.latamjpharm.org/trabajos/23/3/LAJOP_23_3_2_2_5OA9K8V7K9.pdf

BIBLIO

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13. Ruiz S, Venegas E,. Identificación preliminar de los metabolitos secundarios de los extractos

acuosos y etanolicos del fruto y hojas de Morinda Citrifolia L. “noni” y cuantificación

espectrofotométrica de los flavonoides totales. Rev. UCV Scientia [revista online]. Set. 2010,

[citado 03 Julio. 2015], 2(2):19. Disponible en: http://ojs.ucv.edu.pe/index.php/UCV-

SCIENTIA/article/view/405.

14. Valle B. y Yanac A. Cuantificación de Flavonoides totales en los extractos hidroalcoholicos

de las hojas de piper aduncum “matico” procedentes del distrito de Chota, departamento de

Cajamarca y del jardín botánico “Rosa Elena de Los Rios Martinez” de la Universidad

Nacional de Trujillo. Informe de Investigacion Tipo I. Facultad de Farmacia y Bioquimica.

Universidad Nacional de Trujillo 2014. pp: 18-26.



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VII. ANEXOS



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ANEXO 01: Cálculos para determinar la concentración de flavonoides totales en el extracto de

Propóleos (Própolis) de la marca “Kaita” (Propóleos Forte) comercializado en la ciudad de

Trujillo

Peso del estándar : 0,0404

Potencia del estándar (PST) : 99,4%

Concentración del estándar de Lectura (CST) : 0,00808 mg/mL

CST = 0,0404

100×

1

50

CST = 0,00808 mg/mL

X = Am x CST x 100 x PST

AR

Dónde:

X : Contenido de flavonoides totales expresados como Quercetina (mg/mL).

Am : Absorbancia de la solución muestra.

CST : Concentración del estándar de lectura (mg/mL).

AR : Absorbancia de la solución de referencia.

PST : Potencia del estándar.

MUESTRA 1 (M1):

Am = 0,144

X = 0,144 x 0,00808 x 100 x 0.994

0,459



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X = 0,2519 mg/mL

MUESTRA 2 (M2):

Am = 0,145

X = 0,145 x 0,00808 x 100 x 0.994

0,459

X = 0,2537 mg/mL

MUESTRA 3 (M3):

Am = 0,146

X = 0,146 x 0,00808 x 100 x 0.994

0,459

X = 0,2554 mg/mL

ANEXO 02: Tratamiento Estadístico de los resultados para el contenido de Flavonoides totales

en el extracto de Propóleos (Própolis) de la marca ”Kaita” (Propóleos Forte) comercializado en

la ciudad de Trujillo.

1. Determinación de la Media “ ”

Se utilizó la siguiente fórmula:

= ∑ 𝒙𝒊𝒏

𝒊=𝟏

𝒏

Dónde:

: Media

𝑛 : Numero de determinaciones

= 0,2519 + 0,2537 + 0,2554

3



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= 0,2536 mg/mL

2. Determinación de la Desviación estándar “S”:

Se empleó la siguiente fórmula:

𝑺 = √∑ (𝒙𝒊 − )𝟐𝒏

𝒊=𝟏

𝒏 − 𝟏

Muestra 𝒙𝒊 (𝒙𝒊 − ) (𝒙𝒊 − )𝟐

1 0,2519 -0,0017 0,00000289

2 0,2537 0,0001 0,00000001

3 0,2554 0,0018 0,00000324

Suma 0,00000614

𝑆 = √0,00000614

3

𝑆 = 0.0014 mg/mL

3. Determinación del coeficiente de variación (CV):

Se empleó la siguiente fórmula:

𝒄𝒗 =𝒔 𝒙 𝟏𝟎𝟎

Dónde:

: Media

𝒔 : Desviación estándar

cv =0,0014 x 100

0,2536



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cv = 0,55%

4. Determinación de los Intervalos de confianza de la Media:

± ttab x 𝒔

√𝒏

Dónde:

: Media

ttab : Valor de t de las tablas para un 95% de confianza y n-1 grados de libertad

𝒔 : Desviación estándar

𝑛 : Numero de determinaciones

0,2536 ± 4,30 x 0,0014

√3

(0,2536 ± 0,0139) mg/mL



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ANEXO 03: Tabla de la t de Student

Para un nivel de confianza de 95% con 2 grados de libertad el valor de t es 4.30.

Como la distribución es simétrica, un valor de 95%(0.95) al centro de la curva nos deja necesariamente 2.5%(0.025) en cada extremo de la curva.

El valor que buscamos deja sobre si a 2.5% de los sujetos o 0.025 si trabajamos sobre base 1, que es como están los valores en la tabla.



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