7
ORIGINAL PAPER Takuro Ohno á Tetsuji Yuge á Hidehiko Kariyazono Hisaji Igarashi á Kunitaka Joh-o á Naoko Kinugawa Kouichi Kusuhara á Toshiro Hara Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease Received: 21 March 2001 / Accepted: 27 September 2001 / Published online: 20 November 2001 Ó Springer-Verlag 2001 Abstract We investigated the possible use of serum he- patocyte growth factor HGF) and vascular endothelial growth factor VEGF) levels as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions CAL) in Kawasaki disease KD). Serum HGF and VEGF levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay in 41 patients with KD and 25 afebrile controls. Serum HGF levels of patients in the acute phase of KD were signi®cantly higher than those of afebrile controls Pc<0.05) and decreased to lower levels during recovery P<0.0001). Univariate analysis showed signi®cant correlations between occurrence of CAL and ®ve vari- ables: duration of fever P=0.018), serum C-reactive protein concentration P=0.024), albumin concentra- tion P=0.009), serum VEGF level P=0.009) and se- rum HGF level P=0.035). Furthermore, multivariate analysis revealed that serum HGF and VEGF levels and presence of oedema were major risk factors for the oc- currence of CAL. For prediction of the development of CAL, we established a new risk classi®cation system with these three variables, which showed a sensitivity of 100% and a speci®city of 94.4%. Conclusion: these data show that hepatocyte growth factor, together with vas- cular endothelial growth factor, might play an important role in the pathophysiology of Kawasaki disease and their serum levels could be a powerful predictor for the development of coronary artery lesions. Keywords Coronary artery lesion á Kawasaki disease á Serum hepatocyte growth factor á Serum vascular endothelial growth factor Abbreviations CAL coronary artery lesion á CRP C- reactive protein á Pc corrected P á HGF hepatocyte growth factor á IL interleukin á IVGG intravenous gammaglobulin á KD Kawasaki disease á VEGF vascular endothelial growth factor Introduction Kawasaki disease KD) is an acute systemic vasculitis of unknown aetiology in infancy and early childhood, characterised by prolonged high fever, polymorphous skin rash, conjunctivitis, in¯ammation of mucous membranes, oedema of the peripheral extremities and cervical lymphadenopathy [12]. Activation of the im- mune system including neutrophils, monocytes and lymphocytes occurs in the acute stage of the disease [7, 8, 17, 20, 31]. Cytokines such as tumour necrosis factor-a, interferon-c, interleukin IL)-1 [7, 19, 20, 21], IL-6 and IL-8 [21, 36] appear to play important roles in the pathophysiology of the disease. To identify predictive indicators for the development of coronary artery lesions CAL) in KD, we have been focusing on cytokines/growth factors which exert direct eects on vascular tissues. Actually, there was an ob- servation that sera from patients with acute phase of KD contained some humoural factors to enhance prolifera- tion or migration of endothelial cells [34]. Vascular endothelial growth factor VEGF) is a cytokine pro- duced by smooth muscle cells, immune cells and other cells and works as a vascular permeability factor as well as an endothelial cell mitogen [3, 6, 16]. Recently, we reported that serum VEGF levels in patients with KD Eur J Pediatr 2002) 161: 105±111 DOI 10.1007/s00431-001-0860-1 T. Ohno &) á T. Yuge á H. Kariyazono H. Igarashi á K. Kusuhara á T. Hara Department of Paediatrics, Graduate School of Medical Sciences, Kyushu University, 3-1-1 Maidashi, Higashiku, Fukuoka 812-8582, Japan E-mail: [email protected] Tel.: +81-92-6425421 Fax: +81-92-6425435 N. Kinugawa Department of Medical Informatics, Graduate School of Medicine, Kyushu University, Japan K. Joh-o Department of Paediatrics, Kyushu Kouseinenkin Hospital, Japan

Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

  • Upload
    toshiro

  • View
    212

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

�������� ����

������ ��� � ���� � ��� � ������� ������������� � �������� � ������� ����� � ����� �������������� �������� � ������� ����

����� ������� ��� ���� ������� ��� �������� ��������� ��� ���� �� � ��������� ������� �� �� ��������� � ����������� ������ �� �������� ���������� �� �� ����� ���� �������� �� ������ ���� � ����� �� !"��"� �� �! ��� ����� ����"#�$%���# ����

�������� & �" ��#��� �� �! ��� � !' ��� �$���!�(� #�!)�� '���!� *+�,- �"� � ����� "�!������#�!)�� '���!� *%�,- � � � � ������� �"�����!� '!��� !�����"� !' �!�!"��( ����( � �!" *.��- �"/�)� �0� �� � */1-2 ���� +�, �"� %�, � � )� �� ��� �( "3(�$��"0� ����"! !��"� � �(�" 4� ����"� )��� /1 �"� �5 �'���� �!"��!� 2 ����+�, � � !' ����"� �" �� ���� ��� !' /1 )� �#"�6��"��( ��#�� ���" ��! !' �'���� �!"��!� *��7�2�5- �"� ���� � �! �!)� � � ����"# ��! �(*�7�2����-2 8"� ����� �"��( � �!)� �#"�6��"��!������!" ��)" !�����"� !' .�� �"� 6 ���$��� � ������!" !' ' � *�9�2��:-; ��� .$����� ��!��" �!"�"�����!" *�9�2��4-; ������" �!"�"���$��!" *�9�2��<-; ��� %�, � � *�9�2��<- �"� $��� +�, � � *�9�2�=5-2 ,������!�; ����� ������"��( � � ��� ���� ��� +�, �"� %�, � � �"��� "� !' !��� )� ��>!� �� 0 '���!� '!� �� !�$����"� !' .��2 ,!� �������!" !' �� � �!��"� !'.��; ) ����� �� � ") �� 0 ��� �6����!" ( ��)��� �� ��� ������ ; )���� �!)� � " ��� ��( !'���? �"� � ���6���( !' <424?2 ��������� �� ���� �!) ���� ����!�(� #�!)�� '���!�; �!#��� )��� � $����� "�!������ #�!)�� '���!�; ��#�� ���( �" ���!���"�

�!� �" �� ����!��( �!�!#( !' /�)� �0� �� � �"����� ��� � � �!��� � � �!)�'�� ������!� '!� ��� �!��"� !' �!�!"��( ����( � �!" 2

������� .!�!"��( ����( � �!" � /�)� �0� �� � ����� ����!�(� #�!)�� '���!� � ���� � �����"�!������ #�!)�� '���!�

����������� ��� �!�!"��( ����( � �!" � � � .$����� ��!��" � �� �!����� � � +�, ����!�(�#�!)�� '���!� � �� �"����0�" � ���� �"��� "!� #����#�!����" � �� /�)� �0� �� � � ���� � ����� "�!������ #�!)�� '���!�

��������

/�)� �0� �� � */1- � �" ���� ( ���� � ������ !'�"0"!)" ���!�!#( �" �"'�"�( �"� ���( ������!!�;��������� � �( ��!�!"#� ��#� ' �; �!�(�!���!� 0�" �� �; �!">�"��� ��� ; �"@������!" !' ���!� �����" ; !��� !' �� �������� A������ �"��� ���� �(�����"!����( B��C2 ���� ���!" !' �� ��$��" ( �� �"�����"# "���!���� ; �!"!�(� �"��(���!�(� !���� �" �� ���� ��# !' �� �� � B�; :;��; ��; =�C2 .(�!0�" ��� � ���!�� "��! � '���!�$�;�"��'�!"$�; �"����0�" *��-$� B�; �<; ��; ��C; ��$D �"���$: B��; =DC ����� �! ���( ���!���"� �!� �" ������!��( �!�!#( !' �� �� � 2

E! ��"��'( ������� �"�����!� '!� �� � �!��"�!' �!�!"��( ����( � �!" *.��- �" /1; ) �� �"'!�� �"# !" �(�!0�" �#�!)�� '���!� )���� A�� �����F�� !" � ����� �� � 2 �������(; ��� )� �" !�$ � ���!" ���� �� '�!� ����"� )��� ���� ��� !' /1�!"���"� !� ���!���� '���!� �! "��"� ��!��'��$��!" !� ��#����!" !' "�!������ ��� B=4C2 %� �����"�!������ #�!)�� '���!� *%�,- � � �(�!0�" ��!$���� �( �!!�� �� �� ��� ; ����" ��� �"� !������ �"� )!�0 � � � ����� ���������( '���!� � )��� �" "�!������ ��� ���!#" B=; D; �DC2 ��"��(; )��!��� ���� ��� %�, � � �" ����"� )��� /1

�� G ������ *����- �D�� ��5H���1�� ��2����� ��4=�$���$�:D�$�

E2 ��"! *�- � E2 I�# � +2 /���(�3!"!+2 �#��� �� � /2 /� ����� � E2 +���1�����"� !' ��������� ;������� ���!!� !' ������ ���"� ;/(� �� 8"� � ��(; =$�$� ����� ��;+�#� ��0�; ,�0�!0� :��$:5:�; G���"$����� !�"!�J������2��20(� ��$�2��2>�E�2� K:�$<�$D4�54��,�A� K:�$<�$D4�54=5

�2 /�"�#�)�1�����"� !' ������ �"'!������ ;������� ���!!� !' �����";/(� �� 8"� � ��(; G���"

/2 G!�$!1�����"� !' ��������� ;/(� �� /!� �""0�" +! �����;G���"

Page 2: Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

)� � !����� )��� �� � �!��"� !' .�� B=�C2+���!�(� #�!)�� '���!� *+�,- � � ���!��!��� #�!)��'���!� ��!���� �( �!!�� �� �� ��� ; 6��!��� � �"�!��� ��� 2 �" ������!" �! �� '�"���!" � � �������!� '!�� ��!�� ������ !' ��� �(� B�=; ==; =5; 4�C; +�,��!�!� �� #�!)�� !' "�!������ ��� )���!�� � $����� �!!�� �� �� ��� ��������!" �"� ��� � � ��$ � �� '���!� '!� "�!������ ��� 2 ��"� +�, A�� �� ����� F�� !" �� "�!������ ��� �"� � ��!���� �( � ����� �!!�� �� �� ��� ; � �!��� +�, ( ��;�!" � ��"# !' +�, ��!�����!" �"� �� �� "� !' �� ����!�; �$��� ��!�!$!"�!#" ��!���� B4; �DC; ����� �! A� � �" � ����� �� � �" � ! � )�� � �" ���! B�5C2��"��(; �� �� �" ��!��� ���� +�, ���#�����%�, A�� �!" �" �!!�� �� �� ��� �"� %�,����!� @0$� �" ����" "�!������ ��� B=�; =:C2�!�! �; � ��"� ��!�� �� �!)" ���� +�, � �� �" ���( ���0� !' ������� ���!��� '!�����!";����!�#� ��� �!� !' +�, �� "!� �" �����6� B��C2E��'!�; ) �� ��� ��� +�, �"� %�, � � �"����"� )��� /1 �! �" ��#�� ���� �! ��� � '��" � � ������� �"�����!� '!� �� !�����"� !' .��2

������� ��� �����

���>��

� �!��� !' 4� G���" ������" *�� �!( �"� �4 #��� ; �#� ��)" ��"� ��D �!"�� ; ����"� ��2� �!"�� - )�! �� �� ���#"! ���#�����" '!� /1 )� �����2 ��� )� !����"� �" �!�� ����*'����- �"� ��! �( *�'����- ��� 2 E�( )� ����� �� /(� ��8"� � ��( �"� /(� �� /!� �""0�" +! ����� ��)" G�"���(�<<4 �"� G�" �<<<; �"� 5 *��2�?- !' �� 4� � �!�� .��2 �������"� ��� � �"��� "!� #����#�!����" *�%��- �����"�;�"����� ����"� �����!" !" ��( 42:L�2: *��" L �1- !' ���" ; )������(� ����(��� ���� *=� �#�0# �� ��(- A��� �" �)! �� )�!��� � !"�( ���(� ����(��� ���� ���� !' ���� (���!� 2 � "����"� ��� � �%�� *4�� �#�0# �� ��(- '!� = �! D �!" ���� ��( *�"��� ���!�� �<<4- �"� =� ����"� ��� �%�� *� #�0# �� ��(;! � �� �- '!� � �! 4 �!" ���� ��( * �"� �! ��� �<<4-2 �' ��=< ����"� ; �� *4=2D?- ��� � �� �� � �2D #�0# !' �%��2

�" ����"� )��� /1; �� )� !����"� !" ��( 42�L�2:*��" L �1- !' ���" �" �� ���� ��� *�� "� !' ' �- �'!��%�� ����"� �����!" � )�� � !" ��( ��2<L52= *��" L �1- !'���" �" �� ��! �( ��� *�� "� !' ' �-2 �!���� �!"��!� �"����� �� ��� �"� �#�� '��� ������" )���!�� �"'���!" ; �#���)" D2� �"� �=2� (�� *����" <2� (�� - �"� �� � �!"��!� �!���� � "�" ��� �"� �� '��� ������" )��� ���� �"'���!" *�" )��� �"��!"��; 6 ��!"����� ; �)! �"'���!� �!"!"���!$ � ; �)! �(�����"��� ; !" )��� �� � �"� !" )��� ���� ���)�(�"'���!"-; �#� ��)" � �"� �=� �!"�� *����" �:2� �!"�� -2�"'!��� �!" "� )� !����"� '�!� ���� ���"� �'!� ���(2E� �� )� �!����� �"� ��������( '�!3" �� H:��.2

E� '!��!)�"# ������ �� �� ��� !' ���� �!" )� �!" ��$�� � �!�"���� .�� �� 0 '���!� � �# *�!"��-; A; ��>!� (���!� A��� ' �; ������!" !' ' � *��( -; &M.; +� �!"$�"�����!"; ������ �!�"�; .$����� ��!��" *.��- � �; ��� !���� �"� �!�� ��� �!"�"�����!" ; �!��� ��!��" �"� ������"�!"�"�����!" ; ��E �"� ��E � � 2 ����"� )� �!" ���� �!�� ' � )�" �� �!�( �������� �! ��! =:�.2

������!" !' .�� �( ��!�����!#����(

E)!$���" �!"�� ��!�����!#����( )� ��'!��� �" ��� ����"� �� �� ��� !' ���#"! � �"� ����� �� �� � �)�� � )0 �"���

�� ����# *���� �!" ���!� �<2:L��25 ��( ; ��" L �1-2 .��)� �6"� � '!��!) � �- ���" ������ �� �� � = �� �" ������"�5 (�� !' �#N �- �"��"�� ������ !' � #�"� �� �� � �25 ��� � ���# � ���� !' �" ��>��"� #�"�N !� =- �����( ���#�������"2

+����� #�!)�� '���!� � �(

���� +�, � � )� �����"� �( � �"�)��� "3(�$��"0�����"! !��"� � �( 0�� *�O1 �( �� �"�2 ��""��!�� ; ��""2;8��-2 ��� !� ��!���"�"� ����" +�, ��"���� *��5H:��� �#��� ������ �" �1DP- *5� ��- �"� �5� �� � �( ����"� �1�& )����� �! �� )�� ���!��� )��� ����" �!"!��!"�� �"���!�(�#��" � ����" +�, �"� �"������ '!� � � �� =��.2 �'�� )� ��"#;��� �� !' �!�(��!"�� �"���!�( �#��" � +�, �!">�#��� �! �!� $���� � ��!A��� )� ���� �"� �"������ '!� � � �� =��.2 ���$ ���� !����!" *��� ���)��- )� ���� �"� �"������ '!� =� ��" ��=��. �"�� �" �� ���0 �"� �� �����!" )� ����"��� )��� ��� ��!' � � +���42 �� !���"� )� ��!��� �� 45� "�2 E� �����!"����� !' ��� � �( )� 4�2� �#���2

%� ����� "�!������ #�!)�� '���!� � �(

���� %�, � � )� �����"� �( � �"�)��� "3(�$��"0�����"! !��"� � �( 0�� *����"!$M�!�!#���� ���!���!�� .!2;G���"-2 ��� !� ��!���"�"� ����" %�, ��"���� *�O1 �( $�� ; ��""��!�� ; ��""2; 8��; �52DH���� �#���- *��� ��- )� ���� �! �� )�� ���!��� )��� �!� ����"!#�!��" � �#��" �����" %�, �"� �"������ '!� � � �� =��.2 �'�� )� ��"#; ��� ��!' ������ ����"!#�!��" � �#��" � ����" %�, *�25 �#��� �"�2�5? ��! ����$��F�� ���" )��� �? �! �" ��� ������"-�!">�#��� �! �!� ���� � ��!A��� )� ���� �"� �"������ '!�=� ��" �� =��.2 ��� ���� !����!" *��� ���)��- )� ���� �"��"������ '!� =� ��" �� =��. �" �� ���0 �"� �� �����!" )� ����"��� )��� ��� �� !' � � +���42 �� !���"� )� ��!��� ��45� "�2 E� �����!" ����� !' ��� � �( )� �52D �#���2 ����%�, � � �" 4� ����"� �" �� ���� �"� ��! �( ��� !' /1�"����� ��! !' =� ����"� !' !�� �� �!� ��!�� B=�C2

����� ����� �"��(

����" �"� ��"# *����"; ��"����; ��A����- )� � � � � ������ ���� ��� 2 1� �������!" !' ��� +�, � � !' ����"� )��� /1; ���� *'����- �"� ��! �( *�'����- ��� ; "!�����!"��!� �"� �� � �!"��!� )� �!����� � �"# �� ��""$&���"( 8 � � �"� �� ������� �!����� !" � � *M!"'��!"�Q ���!�-2 E� �!����� � ��� *��- )� !����"� �( �������(�"#�� � ��� �( �� "���� !' �� � � 2 ����� ����� �#"�6��"� )� �6"� � ��7�2�52 .!������!" ��)" ��� +�, � � �"����!���!�( ���� �"�����"# ��� %�, � � )� ����� �(������"Q �!������!" �!R��"� 2 � !�����!" ��)" .�� �$ �!��"� �"� ��� ������ �" ����"� )��� /1 )� ����� �(����� ����� �"��( � * ��)� �!#� ��� �#� �!" �"��( � -2 ��#"�'$���"� )� �6"� � �7�2�52

������

����� �����"���!" !' ��� ����!�(� #�!)�� '���!��"� � ����� "�!������ #�!)�� '���!� � �

����� ��� +�, � � !' ����"� )��� /1 �" ����*'����- �"� ��! �( *�'����- ��� �� �!)" �" ,�#2�2 ���� +�, � � �" �� ���� ��� *��"# D�:2:H:<��2< �#���; ����" �D5=24 �#���- )� �#"�6��"��(��#�� ���" ��! �" �� ��! �( ��� *��"# 4�<25H�:�42= �#���; ����" 4�<25 �#���N ��7�2�5-; �"�

��D

Page 3: Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

�!)� �#"�6��"� ��F�"� �! ��! !' "!���� �!"$��!� *��"# =<42:H�=D�2� �#���; ����" :��2: �#���N��7�2�5- �"� ��! !' �� � �!"��!� *��"# 55�25H

�:��2: �#���; ����" �D�2� �#���N ��7�2�5-2 ����%�, � � �" �� ���� ��� *��"# �2�H���=2D �#���;����" D:2� �#���- )� �� ! ��#�� ���" ��! �" ����! �( ��� *��"# �2�H=�:2� �#���; ����" 5:24 �#���N �9�2���=; &���!A!" �#"� ��"0 � �-2 �" =�*�:2�?- !' 4� ����"� )��� /1; ��� +�, � � �"�� ���� ��� )� #���� ���" �� <��� ���"���*��:424 �#���- !' ��! �" "!���� �!"��!� 2 �! �#"�6$��"� ��F�"� )� " ��)" ��� +�, � � �"�� ��! �( ��� !' /1 ����"� �"� ��! !' "!�����!"��!� !� �� � �!"��!� *��S�2�5; � ���� �(-2���� +�, � � *���� ��� - �" 6 ����"� )���.�� )� �4:<2�; =�<524; =�<42�; =���25 �"� DD��2: �#���; )���� ���� � �" ��! �( ��� 2

�����!" ��� ��)" ��� ����!�(� #�!)�� '���!�� � �"� !��� ���!���!�( ���� �" �� ���� ���

�����!" ��� ��)" ��� +�, � � �"� !��� ������ �"�����"# ��� %�, � � �" ����"� )���/1 )� ����� �( ������"Q �!������!" �!R��"� *E��� �-2 ���� +�, � � �" �� ���� ��� !' /1 �!)� �#"�6��"� �! ��� �!������!" )��� ������!" !'' � *��9�2=5�; �9�2��D�-; &M. �!�"� *��9�24�D;�9�2����-; "���!���� �!�"� *��9�24<D; �9�2����-; ��� .�� �!"�"�����!" *��9�2D4=; �7�2����- �"� ��� %�, � � *��9�25�D; �9�2���<-; �"� � "#�$�� �!������!" )��� ������" �!"�"�����!" *��9��24�5; �9�2��<5-2 E�� )� "! �#"�6��"� �!����$��!" ��)" ��� +�, � � �"� �� � "3(� *��E �"� ��E- �" �� ���� ��� !' /12 ,� ����"� � �!�� .�� ��!"# "�" ����"� )��� ��� %�,� � S�5� �#��� !� ��� +�, � � SD5�� �#���;)��� "!" ��� .�� ��!"# =� )��� ��� %�, � $� � �5� �#��� �"� ��� +�, � � � D5�� �#���*,�#2 �-2 E� ������� '!� ����!" !' � �!��"� !'.�� ��� � " ��� ��( !' ���? �"� � ���6���( !'::2<?2 �" �� "�" ����"� � ����� ��! ; !���)� !� � � �" " *��2:?- ����"� �"�����"# 6 )��� .�� �"� �)! )���!�� .��2 �" �� !��� ��"�; �:

��� ! ���� +�, � � �" ����"� )��� /1 �" �!�� ���� �"���! �( ��� 2 �� "� !' .�� *���� ������-; �� "� !' .��*����� ������-; "!���� �!"��!� *���� �������- �"� �� � �!"��!� *���� ��������-2 � "!� �#"�6��"�2 T��7�2�5 *��""$&���"( 8� � �"� ������� �!����� !" � �-

���" ! �����!" ��� ��)" ��� +�, � � �"� !������!���!�( ���� �" �� ������� !' /1

%������ ����� *�- ������" ��"0�!������!" �!R��"� *�-

1�����!" !' ' � *��( - 4� �2=5� �2��D�T&M. �!�"� *���- 4� �24�D �2����TT����!���� �!�"� *���- 4� �24<D �2���TT+� *#���- 4� H�2��< �2�4�=������ *���4���- 4� �2�5< �2=�=D+����!���� *?- 4� H�2��D �2�5��.�� *�#���- 4� �2D4= 7�2����TT�� *�U��- 4� H�2=�� �2�5D/ *�U��- 4� H�2��= �2:�=D��E *�8��- 4� �2��4 �24��D��E *�8��- 4� �2�== �2�=<<E!��� ��!��" *#���- 4� �2�D� �2D�==������" *#���- 4� H�24�5 �2��<5TT%�, *�#���- 4� �25�D �2���<TT

T�7�2�5TT�7�2��

���

Page 4: Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

*5D2=?- !' �� =� ����"� )��� �!) +�, �"� %�,� � �!)� !��� !' �� ��"� !� '�2

1����"���!" !' �� 0 '���!� '!� �!�!"��( ����( � �!"� �!��"� �( �"� ����� �"� ����� ����� �"��(

,�� ��(; �!������!" ��)" .�� � �!��"� �"��!"��"�!� ������ �" ����"� )��� /1 )� ����� �(�"� ����� �"��( � *��""$&���"( 8 � �-2 E��� � �!) �#"�6��"� �!������!" ��)" !�����"� !'.�� �"� 6 ������ � ������!" !' ' � *�9�2��:-; ��� .�� �!"�"�����!" *�9�2��4-; ������" �!"�"$�����!" *�9�2��<-; ��� %�, � � *�9�2��<- �"� ��� +�, � � *�9�2�=5-2 &��� � ��� �! ���#!����� ������ ��� � #"�� �"� �� "� !� �� "� !'�!">�"��� �� �">���!"; �(�����"!����(; �� �; !���!' ��"� !� '� �"� �(�����!� ���; ��� )� "!

�#"�6��"� �!������!" � �! �� � �!��"� !' .�� �".��$ U���� � � )��� I�� �!�����!" *���� "!� �!)"-2

��!"��(; ��)� �!#� ��� �#� �!" �"��( � �$ ��� ���� �#"�6��"� �!������!" A� �� ��)" !�$����"� !' .�� �"� ��� ������ � � ���!" !' ��� +�, �"� %�, � � )��� �( ��� �#���*�9�2�=<:; !�� ����!� �2�<; <5? �!"6�"� �"�� ����2<�H�2�� �"� �9�2����; !�� ����!� �2:�; <5? �!"6$�"� �"�� ��� �2<<H=25=; � ���� �(- �"� �� �� "�!' !��� !' �� ��"� !� '� *�9�2���=; !�� ����!)� "!� ��� �! � ������ '!� �!"!�!" ��0���!!�-;� �!)" �" E��� =2

,!� �������!" !' �� � �!��"� !' .��; ) $����� �� � '!����� �! �����" �� 0 �!� � '!��!) ��� 0 �!� 9 �2�:D:= � ��� +�, � � *�#���-����K�2D�D � ��� %�, � � *�#���-����K�=2�4 �!��� !' ��"� !� '� *�� "� 9 �; �� "� 9 �- $�<2��2 E� �� 0 �!� S� )� �!" ���� � � ��#� �� 0'!� �� � �!��"� !' .��2 &��� ��� �!�; �� "$ ��� ��( �"� ���6���( )� ���? �"� <424?; � ��$�� �( *,�#2 =-2

���������

.!�!"��( ����( �"��( � !� ��������!" !���� �" ��$��!A�����( 5?H�D? !' ����"� )��� /1 � ��� ���"��!�����!" !' ��#�$�! �%�� �����"� B<; �4; ��;�:C2 � �!�!"��( �"��( � � � �!" ��� '!� �! � !' ���!������( !' �� �� � B5; ��C; �� � "���� �! �����"�� 0 '���!� '!� �� � �!��"� !' �!�!"��( �"��( ��" �� �"� �! ����� � � ���� �����"� ����#(2

��!"# ���!� �(�!0�" !� #�!)�� '���!� ���� �� ����� F�� !" � ����� �� � ; ) �" ��#��� ���+�, � � �" ����"� )��� /1 �" �� �� "� ���(2� ���!" !' ��� +�, � � �" ����"� )��� /1 )�

��� # .!������!" ��)" ��� +�, �"� %�, � � �" 4�����"� )��� /1 �" �� ���� ��� 2 �� "� !' .�� *����������-; �� "� !' .�� *����� ������-

���" # 8"� ����� �"��( � !' �!"��"�!� ������ ����� �! .�� � �!��"�

%������ ����� *�- ����" *��"#- ��""$&���"( 8 � �

E!��� .�� .�� �

�! ��� �"#��� �! ��� �#���

�# *�!"�� - 4� 5�=D ��2� *4H55- �=25 *�H��D- �25<�1�����!" !' ' � *��( - 4� 5�=D < *�H�=- D *�H�5- �2��:TT&M. �!�"� *���- 4� 5�=D �D5�� *<���H��=5�- ���<� *5=��H���5�- �2�:�����!���� �!�"� *���- 4� 5�=5 ���<� *5D��H�4��5- 5��� *55�H�:�4�- �2�:�+��!#�!��" *#���- 4� 5�=D ��2D *:25H��2D- ��25 *:2�H�=2=- �2�D5������ *���4���- 4� 5�=D �<25 *�:2:H<:2�- =�2� *�D2�HD42�- �255.�� *�#���- 4� 5�=D �=2D *D2�H��2�- �2� *�2=H=425- �2��4T�� *�U��- 4� 5�=D �=D *�=4H�4�- �=� *��<H�4=- �2:4�/ *�U��- 4� 5�=D 425 *=2:H42<- 424 *=2�H52�- �24:4��E *�8��- 5�=D 44 *��H���- == *�<H5<�- �2<����E *�8��- 4� 5�=D 4= *��H��<- �= *5H4=5- �2D�4E!��� ��!��" *#���- 4� 5�=D D2: *D24H�2�- D2: *524H:2�- �2��4������" *#���- 4� 5�=5 =25 *�2<H42�- 42� *=2=H42�- �2��<TT%�, *�#���- 4� 5�=D ��::2: *D�25H���=2D- 5<2D *�2�H��DD2<- �2��<TT+�, *�#���- 4� 5�=D =�<42�*�4:<2�HDD��2:- �5��2� *D�:2:H:<��2<- �2�=5T

T�7�2�5TT�7�2��

��:

Page 5: Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

'!�"� �! � � ��>!� �� 0 '���!� '!� �� !�����"� !'.��2 ����!�#� ��� � "! �6"�� �"'!�����!" !"�!����� +�, 0�"��� !' ����#� � ; �� � �! ������� +�, )� ��!���� �!����( �"� ���'!� �!������)��� ���( !' �"@������!" �" � ����� �� � ���� +�, � ("�� � � �( �!!�� �� �� ��� �"� 6��!$��� � )����" � ����� �� � B�5C2 �" +"!��$���!V "��"������� B�<C; � ���!" !' ��� +�, � � )� �� !��!����( �� �! �� ��!�����!" !' +�, �( � ������� � )��� �"@������!"2 �" ����"��� A���"���!"�"���� ���� �! ����� !� �! �#"��� �">��� � ������� � ; ��� +�, )� ��!���� �( �"���� �� � !���� �" ���!���"� )��� �� �#� !' � ����� ����#2�" '���; �� +�, "�!���"$����� ����"� � '!� �� ������ !� �#"����!" !' �">��� !�#�" )� �## ��'�!� �"���� ���� 2 �" ��������( ������!�� � !��"��������( "�����!�� � ��� ; +�, ���� �"$��� � ������( �" �"���� !�#�" B=<C; �"� +�, ����!�)� ���0��( �!)"$�#����� �" �">��� !�#�" ��� "!��" �"���� !�#�" B��; �=C2

�" �� �� "� ���(; ��� +�, � � �!)� �! �$�� �!������!" )��� ������!" !' ' �; &M. �!�"�;"���!���� �!�"�; ��� .�� �!"�"�����!" �"� ���

%�, � �; �"� � "#��� �!������!" )��� ������"2 ��! ��� �!������!" ��)" ��� +�, �"� %�,� � )� �!" � �"� )��� � ��"� !� � ���!" ���� +�,���#����� %�, A�� �!" �" �!!�� �� �� ��� B=�C2 �" ������!"; �� � �! ��� ���� �! � �����" A�"�; ��� +�, � � �@�� � �#� !' ( ���� � ������"@������!" ���� !' �� �! ��� �!������!" )���������!" !' ' �; &M. �!�"�; "���!���� �!�"� �"� ��� .�� �!"�"�����!"; �"� !' � "#��� �!������!")��� ������"2 ,������!�; �� �!������!" ��)" ��� +�, � � �"� &M. �!�"� !� "���!���� �!�"���#�� � � ����� �" ���� �! �� ����� F�� !' +�, !"�� ��!��'����!" !' �����!�!���� ��!#"��!� ��� �"��� �!�!"( '!�����!" !' #��"��!�(�$�(���!��$�#�0$��(!�(� ��"�# B�4; =�C2

%���!� �� 0 '���!� '!� �� � �!��"� !' .���� �" ��!���2 1�����!" !' ' � �� �" !" !'�� ��>!� �� 0 '���!� �! ������ �!�!"��( �"��( � '!�"� �" ���� �" G���" �"� �� 8"��� ���� B�; �5C2M� � � ��2 B�C ��!��� � U�"���� �� 0 ��� �6����!"�" ����"� � �"# "���!���� �"� ��"� �!�"� ; ���!$#�!��" �!"�"�����!"; ������ �!�"�; �"� ' � !" ��'!��!)�"# ��( �'�� �%�� �"'� �!" �! ������ �� �$ �!��"� !' �!�!"��( �"��( � 2 & �� ��"��(��!��� ���� � ��� ��� %�, � � � � � �") �� 0 '���!� '!� �� � �!��"� !' .�� B=�C2 �" ���� "� ���(; ) �� ��"��6� ��� ������ �"$�����"# �� �� "� !' !��� !' �� ��"� !� '�; ��#� ��� %�, � � �"� ��#� ��� +�, � � � ��>!��� 0 '���!� '!� .�� � �!��"� �( ����� ������"��( � 2 �'�� �� �"��!�����!" !' ��#�$�! �%�������"�; �� "� !' !��� �" �� A������ )� 6� � ��"��6� � � �� 0 '���!� �" ��� ���(2 ��������� �! �@�� �� ���( !' � ������ �" A������ ;)���� ��#�� � �!������ )��� ���� �" �!�!"��( ����� 28 �"# �� ��� ������ ; ) �� ����� �� � ")��� �6����!" ( �� '!� �������!" !' �� � �!��"�!' .��2 &��� � ��� �! !��� !' �� ��"� !� '�; �"� �� U��"������ ������!" )� "!� ��'!��� �"��� ���(; ) ����� � !��� � � ���#!����� ������ �"�� '!�����2 ����!�#� �!�� +�, �"� %�,; �!)�"#����� F�� !" �� "�!������ ��� ; )� ��! �( � !$����� )��� ��� !��� �" ����"� )��� /1; ����� ����$�� �"��( � �!)� ���� ��( ������ �! )!�0�"��"�"��( � �� 0 '���!� '!� �� � �!��"� !'.��2 E�� ") �� 0 ��� �6����!" �!)�"# ��#�� ��$�6���( *<424?- ���" �� �!� !" *D�?HD5?-; ��" ��!" �� �� ��� !' ���#"! � �" �!"��� � �! �� �� �!�

���" $ ��"��6����!" !' �� 0'���!� '!� .�� �( ��)� �!#� ��� �#� �!" �"��( �

%������ � ��� ����! *<5? .�-

���� !' ��"� !� '��! ��� � �2���= H�

�#��� �

���� %�, � ���!" )��� �( ��� �#��� �2���� �2:� *�2<<H=25=-���� +�, � ���!" )��� �( ��� �#��� �2�=<: �2�< *�2<�H�2��-

����� !' ��"� !� '�N �! ��� � 6 ����"� )��� .�� �"� �� ����"� )���!�� .�� )� �"���������� !' ��"� !� '�N "#��� � �D ����"� )���!�� .�� )� �"��������� ����! )� "!� ��� �! � ������ '!� �!"!�!" ��0���!!�

��� $ �� 0 �!� '!� �������!" !' �� � �!��"� !' .�� �" 4�����"� )��� /12 �� "� !' .�� *���� ������-; �� "� !' .��*����� ������-

��<

Page 6: Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

��� �6����!" ; )���� "��� � �! �!����� �� ����$�"� ����#( �" �� �"� B�; �5C2 ,������!�; !" !���������!" � �"# �)! #�!)�� '���!� * ��� +�, �"�%�,- !"�(; �� ! ��� � ��#� " ��� ��( *���?- �"� ���6���( *::2<?-; ��( � �!� �"'!����� '!� �����"����"2 .!" � �(; ��� ( �� �� � �� �� �"��#���� ��� +�, �"� %�, � � �� "!� �!���" ���$!���!�( � �( �" �! ����� 2

��"� ��� � � �#"�6��"� � !�����!" ��)" ���+�, �"� %�, � � �"� .�� � �!��"�; +�,�"� %�, �!��� ���( ���!���"� �!� �" �� ����!$��( �!�!#( !' /1 �"� ���� ��� � � ��#�� � � �������!� '!� �� � �!��"� !' �!�!"��( �"��( � 2

����������

�2 � �� E *�<:=- ������!" ���!� '!� �� �#� !' ��!� " �" /�)� �0� �� � 2 ���� ������� G�" �5� ���

�2 M� � ��; E�0��� �� �; M�0� ��; ��"�� ��; �)���#�G& *�<<:- � ������� �" ����"� '!� �!�!"��( ����( �"�$�( � �" /�)� �0� �� � 2 8� ������"�� /�)� �0� 1� � ����( ��!��2 �� G .����!� :�� ���DH����

=2 M� M; M�!)" �,; %�" � &��� �; 1 !��0 +,; �"#� 1�*�<<�- %� ����� ���������( '���!� * � ����� "�!������#�!)�� '���!�- #" � A�� � ��F�"�����( �" "!������ � ; ����!���# ; �"� ���!� 2 �!� M�!� .�� =� ���H���

42 M!����! 1�; ����" G�; ,����! 1�; .��" ��; /����0 E;%�"� &!�� �,; ���!" !" �� *�<<�- ��"��6����!" !' ������!�(� #�!)�� '���!� ����!� � �� �$�� ��!�!$!"�!$#" ��!����2 ���"� �5�� :��H:�4

52 1����!" �; �)�!" �; ���� �E; +��� �� *�<<=- ��"�#�"�!' /�)� �0� �� � �" �� M���� � � � 2 ���� 1� .���� D<�D=�HD=D

D2 ,����� �; +"3� &G *�<:<- ��������( '!�������� ��� ��� �"! � �����"$��"��"# #�!)�� '���!� ���6� '!� � ����� "$�!������ ��� 2 M�!��� M�!��( � .!���" �D�� :5�H:5:

�2 ,���0�)� �; ��� ����� E; G�>!� /; I!" /; ��#�)��� E;�� �� /; /��! +; I����� / *�<::- �������� ��!!� �!"!$�(������!���# �"� ��� ���!� "��! � '���!� �" /�)�$ �0� �� � 2 .��" ����"!� ����"!����!� 4:� �4�H�5�

:2 ,���0�)� �; ��� ����� E; �!�!�� �� E; ��0���� �; �� �� /;I����� / *�<<�- A�� �!" !' ,� � ��!" ���.1�= !" �$������� ��!!� ����!���# ��!"!�(� �" /�)� �0� �� � 2.��" ����"!� ����"!����!� 5D� �:�H�:D

<2 ,��� �! /; /���(� E; ��0�"! +; /�(! �)� �; ���"!��(�/; +�(� ����� E; E����� E; +��! �; ��"�� I; I!0!($��� E; /�)���"! �; M��� /; M��� /; �!�� . *�<:4- +�#�$�! �"��� "!� #����#�!����" '!� /�)� �0� �� � 2 ��"$�� �� ��55H��5:

��2 +�#���� �; ��0����� E *�<<�- ��"��6����!" �"� ���"# �"�� ����!� '!� ����!�(� #�!)�� '���!� �" ��� �� � �'��������� ������!�( !� �"���� ������� 2 M�!��� M�!��( � .!���" ��D� 5<<HD��

��2 /��! +; ����"! ; /�)� �0� E *�<:D- �(!������� �"'�����!"�" /�)� �0� �� � � ���"���� �"��( �" �<5 �� 2 G ��������:� <�=H<��

��2 /�)� �0� E; /! �0� ,; �0�)� �; ���#��� � �; I�"�#�)� +*�<�4- � ") �"'�"��� ���� '���� ���!����"!� �(���"!� ("��!� *����- �� ����"# �" G���"2 �������� 54����H��D

�=2 /�"! ���� E; E� ���! /; ��0����� E *�<:<- ���0� �"��� !' +�, ���� �" "!"$���"��(��� �� � ��� !' ��� �����)��� ����!�!A�" 2 M�!��� M�!��( � .!���" �D5� ���<H��=4

�42 /����0 E; /��� G�; �! " ; %�" � &!�� �, *�<<�-+���!�(� #�!)�� '���!� � � ("�#� ��� '���!� '!� �� #�!)��!' ����!�!���� ��!#"��!� ��� 2 M�!!� :�� �454H�45�

�52 /!�" �; �� � �; �! %; �!) � *�<:D- /�)� �0� �� � �� �) !' �� 0 '���!� '!� �!�!"��( �"��( � 2 G ������ ��:�=::H=<�

�D2 ��"# 1&; .�����" �; /��"# &G; �!��� 1%; ,����� �*�<:<- %� ����� "�!������ #�!)�� '���!� � � ���� �"#�$!#"�� ���!#"2 ���"� �4D��=�DH�=�<2��2��"# 1I; ��#� ��; ����( �; /�" 0( �; ��� �;��"��3 �; ��� �� *�<:�- ����"!�#����!�( ��"!�����$�� �" ���!����"!� �(��� "!� ("��!�2 .��" ����"!�����"!����!� �=� ���H���

�:2 ��"# 1I; .�� E; &!!� �; ����( �; ��� �; ��� ��*�<:=- ����"!�#����!�( E ��� ��"!������� �" ���!����$"!� �(��� "!� ("��!�2 G ����"!� �=�� ����H���4

�<2 ��"# 1I; .!���" E; ������ ��; ��� ��; �!�� G�*�<:D- ����"!#�!����" � �"���!�� �� "� �" �� ������� !' /�)� �0� ("��!� �( ������� � ����� "�!$������ ��� �������� �( #���� �"��'�!"2 G .��" �" � ����4�:H�4=5

��2 ��"# 1I; ��� ��; �)���#� G&; M��" G.; ,�� &;������ ��; �!�� G� *�<:D- E)! �!"!0�" ; �"����0�" ��"� ���!� "��! � '���!�; �"�� ������� � ����� "�!��$���� ��� � ������ �! �( � �( �"���!�� ���������"# ����"#/�)� �0� ("��!�2 G A� �� �D4� �<5:H�<��

��2 ��" .I; ��" ..; +)�"# M; .���"# M *�<<�- ����� ���"# !' ��� �"����0�"$D; �"����0�"$:; �"� ���!� "��! � '���!������ ��!"# ����"� )��� /�)� �0� �� � 2 G ������ ����<�4H<�D

��2 ��� ��!�� �; �"! /; ,���0�)� I; �0��� �; �� �(��� �*�<<:- .��������"# ����!�(� #�!)�� '���!� � �" ���(���0� !' ������� ���!��� '!�����!"2 G�" .��� G D�� =��H=�=

�=2 ��#��0 �; +���! �; E�>��� +; �!>� �; E�"�#���� �;��� ��!�! /; ��0����� E *�<<�- �"!��!��� '�"���!" !'����!�(� #�!)�� '���!� �" �"�� �#"����!" �'�� �"�������"�����!�(2 G M�!� .�� �DD� ���:�H���:4

�42 ��#� ���� �; ��� � ���� �; ��� �!0� +; �#�)� �;�0����� � *�<:�- +�#�$�! #����#�!����" �����( '!�/�)� �0� �� � 2 G ������ ���� ���H���

�52 ��0����� I; �!�� ���� �; +�#�0� G; /��� �; �!0� �;�!��#���� �; I����� /; +�(� �� �; I! I; ��� ��!�! /;��0����� E; �#����� E *�<<5- A�� �!" !' �!��� ����!�(�#�!)�� '���!� ( �� �" � ����� �� � 2 M�!��� M�!��( � .!���" ��5� 4:=H4::

�D2 �����"� �; %�#"� ; ��� ����" ��; �����"! �; W��"#�� �;������!�!��! �/; .!�!#��! �� *�<<�- +���!�(� #�!)��'���!� *+�,- ������� �� �(�! �" 0�"� ���� ��( !' ������!� "�!�� �( �� ��!�!$!"�!#" �$�E2 �"�!#"D� 5��H5�4

��2 �)���#� G&; E�0��� �� �; M��" G.; M� � ��; .��"#/G; 1�F( .; ��!� ��; �� !" &+; ���( %; ��"�� ��;������" �E; &�##�" G&; +��0 �%; ,���!" 1�; �)� �M;��"# 1I�; �!��!" E; �! " ,�; ��� � � *�<:D- E������"� !' /�)� �0� ("��!� )��� �"��� "!� #����#�!����"2 � "#� G �� =�5� =4�H=4�

�:2 �)���#� G&; E�0��� �� �; M� � ��; M��" G.; M� ���" G;.��"# /G; .!��" �1; 1�F( .; ,���!" 1�; ��!� ��*�<<�- � �"#� �"��� "!� �"'� �!" !' #���� #�!����" � �!����� )��� '!�� �"'� �!" �" �� �����"� !' ���� /�$)� �0� ("��!�2 � "#� G �� =�4� �D==H�D=<

�<2 �� ���� �; /�)�0�� � +; � ��)��� /; E���� �; ��)��� E;�� ������ �; I! ������ � *�<<<- ���� ����!�(� #�!)��'���!� � � �" +"!��$���!"��" �������2 ������ �"� 4��4�4H4�D

=�2 �� ��"! E; +� �� +; �� ��"! �; ������ �; �0���� � *�<<5-+���!�(� #�!)�� '���!� � � ����!�!���� �#����!�2 M�!!�:5� =�<=H=���

=�2 ��)� I; �!���(� / *�<:4- "��"�� "���!������ '�"���!" �" ���!����"!� �(��� "!� ("��!�; )��� ����� �'�$"� �! �� �! ��� �!� !' �"��� � !A(#" �"�������#"����!" �" �� ����!#" � !' �!�!"��( ���!��!������� 2 G������ ��4� 5DHD�

=�2 ��"! E; �#��� �� +; �"!� /; �0�3�)� /; G!�$! /; +��� E*����- ���� � ����� "�!������ #�!)�� '���!�� � ") ��$

���

Page 7: Serum hepatocyte growth factor combined with vascular endothelial growth factor as a predictive indicator for the occurrence of coronary artery lesions in Kawasaki disease

����� �"�����!� '!� �� !�����"� !' �!�!"��( ����( � �!" �" /�)� �0� �� � 2 �� G ������ �5<� 4�4H4�<

==2 ����" G�; .��" ��; M!����! 1�; M��# &+; E�(�!� &�;.�� �.; +�� ��6�� 1&; &!"# G; ��0� E; ,�"�� �&;���!" !" �� *�<<�- � ��!��$ ������ ����" ��"# 6��!$��� �$��� � ���!#" � � ����"� !' ����!�(� #�!)�� '���!�2��!� ���� ���� ��� 8 � � ::� 4�5H4�<

=42 ��0��� /; /��� �; ���"� �� G; �"!���� W; ��� I; ��� �� I*�<<5- F�� !' /�)� �0� �� � !" ��#����!" !' ����"��������� �" "�!������ ��� 2 ������ � =:� 5��H5�5

=52 E� ���! /; +�#�(� �; �� ��3�)� E; �0� E; ����!"� �� �;�����3� �; ��0����� E *�<<�- 1���� ������( ������� !'��� ����!�(� #�!)�� '���!� �"� A�� �!" !' �� ���� �"��� �� � 2 ��!� ���� ���� ��� 8 � � :�� =���H=��4

=D2 8"! I; E�0�"! �; /�"#�" +; I!0!� E; I���� �;��(�)�0� E; E�"�#���� � *�<:<- E� ���� ��� "���� !'�"����0�" D� ���� �" /�)� �0� �� � �"� !��� '�������" 2 .��" A� ����"!� �D� ==�H=4�

=�2 %�" M�� ; &��3"������ M; .�" 1; ��� � �; .��"# �;���)��� �; � "� G� *�<<:- �!�"����� �"#�!#"�� F�� !'

����� '���!������!�(� #�!)�� '���!� �� �"�����!" !' � $����� "�!������ #�!)�� '���!�� �� �� '!� �������" �����$6����!" !' �"#�!#" � 2 .��������!" <�� =:�H=<�

=:2 &!>�� G; /��" .; M�� G�; /! ��"��0 I; M�0��"" �;+���( ; ����"� �; &"�"#� &; ��0����� E;E ������� ; M�"�� M� *�<<<- +���!�(� #�!)�� '���!��"��� A�� �!" !' � ����� "�!������ #�!)��'���!� �"� ��� ��"!#" ���� ��!� �"�����!�$� �" ����" 0�$���"!�(� �"� �� � ����� "�!������ #�!)�� '���!�����!� @0$� �" ����" "�!������ ��� 2 ��� �" � �<�4��H4=:

=<2 I�"�#��� /; ��#��0 �; � ���� �� +; ���! I; ��� ��!�!/; ��0����� E *�<<�- ��"# ��( �� �" "�!���" '�"�$��!" ��!����"# ����!�(� #�!)�� '���!� �" � �!" �!�">��( !' �� ��� !�#�" 2 M�!��� M�!��( � .!���" �:��:��H:�<

4�2 W��"#�� �; ��#� �; ����>� �; ������!�!��! � *�<<�-E� � �� �������!" !' ����!�!���"$�� � �����"$��"��"#�!�(����� #�!)�� '���!� '!� ����!�(� 2 ��!� ���� ���� ���8 � � :�� ��5�H��5D

���