23
SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM FOR THE ISOLATION OF FUNGI 1- INTENDED USE Sabouraud Chloramphenicol Agar is recommended for the selective isolation of yeasts and filamentous fungi (Dermatophytes and other fungi) from biological specimens presenting mixed fungal and bacterial flora. 2- PRINCIPLE The peptones and glucose of Sabouraud medium promote the growth of fungi. Chloramphenicol, a heat-stable, broad-spectrum antibiotic, inhibits the growth of the associated bacterial flora and allows the selective growth of fungi. This medium is recommended for the culture of biological specimens presenting an abundant associated bacterial flora: sputum, stools, nails, hair. 3- HOW SUPPLIED Ready to use medium: (to be dispensed) - 6 x 100 ml bottles (SAB + C) code 56599 Dehydrated medium - bottle of 500 g code 64644 4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water) This agar is prepared according to the theoretical formula of medium C of the European Pharmacopoeia (1), with the addition of chloramphenicol. Peptones 10 Glucose 40 Agar 12 Preparation of the medium: Homogenize the powder contained in the bottle. Add 42.5 grams of dehydrated medium to 1 litre of sterile distilled water. Wait 5 minutes, then mix until a homogeneous suspension is obtained. Heat gently, shaking frequently, then heat to boiling until complete dissolution. If necessary, adjust the pH to 6.0. Sterilize in the autoclave at 121°C for 20 minutes and dispense into tubes or in Petri dishes. 5- STORAGE Ready to use medium (to be dispensed): at +2-8°C. Dehydrated medium: tightly sealed bottle in a dry place at +15-25°C. The expiry date and batch number are indicated on the packaging. 6- INSTRUCTIONS Material: Material provided: Sabouraud Chloramphenicol agar. Inoculation: All biological specimens can be inoculated onto Sabouraud Chloramphenicol agar. Refer to current recommendations for storage of biological specimens (2). Incubation: The incubation temperature and incubation time vary according to the characteristics and the type of fungus examined. These parameters are determined by the user. Temperature: As a rule, the optimal temperature for the detection of fungi in biological specimens is 30-35°C. The incubation of several culture media at different temperatures (25-27°C, 30-35°C) may be justified when testing for particular fungal species. Duration: The incubation time varies according to the nature of the specimen and the fungal species suspected. Recommendations are generally as follows: For all specimens examined for the presence of yeasts (except C. neoformans): incubation for 24 to 72 hours with daily examination of the culture. For deep specimens: incubation for 1 to 2 weeks with daily examination of the culture. Culture of integuments looking for Dermatophytes requires an incubation for 3 to 4 weeks with twice-weekly examination. When C. neoformans or a dimorphic fungus is suspected in CSF or any other specimen: incubation for 1 month with daily examination of the culture.

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

AGAR / SELECTIVE MEDIUM FOR THE ISOLATION OF FUNGI

1- INTENDED USESabouraud Chloramphenicol Agar is recommended for the selective isolation of yeasts and filamentous fungi (Dermatophytesand other fungi) from biological specimens presenting mixed fungal and bacterial flora.

2- PRINCIPLEThe peptones and glucose of Sabouraud medium promote the growth of fungi.Chloramphenicol, a heat-stable, broad-spectrum antibiotic, inhibits the growth of the associated bacterial flora and allows theselective growth of fungi.This medium is recommended for the culture of biological specimens presenting an abundant associated bacterial flora: sputum,stools, nails, hair.

3- HOW SUPPLIED• Ready to use medium: (to be dispensed)

- 6 x 100 ml bottles (SAB + C) code 56599• Dehydrated medium

- bottle of 500 g code 64644

4- THEORETICAL COMPOSITION (g/l of distilled water)This agar is prepared according to the theoretical formula of medium C of the European Pharmacopoeia (1), with the addition ofchloramphenicol.Peptones 10Glucose 40Agar 12

Preparation of the medium:Homogenize the powder contained in the bottle.Add 42.5 grams of dehydrated medium to 1 litre of sterile distilled water. Wait 5 minutes, then mix until a homogeneoussuspension is obtained. Heat gently, shaking frequently, then heat to boiling until complete dissolution.If necessary, adjust the pH to 6.0. Sterilize in the autoclave at 121°C for 20 minutes and dispense into tubes or in Petri dishes.

5- STORAGE• Ready to use medium (to be dispensed): at +2-8°C.• Dehydrated medium: tightly sealed bottle in a dry place at +15-25°C.The expiry date and batch number are indicated on the packaging.

6- INSTRUCTIONSMaterial:• Material provided: Sabouraud Chloramphenicol agar.

Inoculation:All biological specimens can be inoculated onto Sabouraud Chloramphenicol agar. Refer to current recommendations forstorage of biological specimens (2).

Incubation:The incubation temperature and incubation time vary according to the characteristics and the type of fungus examined.These parameters are determined by the user.Temperature:As a rule, the optimal temperature for the detection of fungi in biological specimens is 30-35°C.The incubation of several culture media at different temperatures (25-27°C, 30-35°C) may be justified when testing for particularfungal species.Duration:The incubation time varies according to the nature of the specimen and the fungal species suspected.Recommendations are generally as follows:• For all specimens examined for the presence of yeasts (except C. neoformans): incubation for 24 to 72 hours with daily

examination of the culture.• For deep specimens: incubation for 1 to 2 weeks with daily examination of the culture.• Culture of integuments looking for Dermatophytes requires an incubation for 3 to 4 weeks with twice-weekly examination.• When C. neoformans or a dimorphic fungus is suspected in CSF or any other specimen: incubation for 1 month with daily

examination of the culture.

Page 2: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

Reading - Interpretation:• After incubation, observe the growth of micro-organisms.• Perform identification of the fungus (or fungi) isolated from clearly defined colonies: macroscopic and microscopic

morphological examination, biochemical tests*, complementary tests.* The identification of yeast colonies (matt white appearance, 1 to 2 mm in diameter) can be performed with the Auxacolor® 2gallery (code 56513).

7- PERFORMANCE/QUALITY CONTROL OF THE TEST• Appearance of the ready to use medium: clear amber-coloured agar.• Appearance of the dehydrated medium: faintly coloured powder.• The growth performances of Sabouraud Chloramphenicol medium are verified with the following strains:

STRAINS INCUBATION CONDITIONS CULTURE RESULTCandida albicans ATCC 26790 24-48 hours at 30-35°C Good growthCandida tropicalis ATCC 750 24-48 hours at 30-35°C Good growthCandida glabrata 24-48 hours at 30-35°C Good growthTrichophyton rubrum 7 days at 30-35°C and 7 days at 20-

25°CDowny surface, red brown pigmented underside

Trichophyton violaceum 7 days at 30-35°C and 7 days at 20-25°C

Good growth, violet pigment

Epidermophyton floccosum 7 days at 30-35°C and 7 days at 20-25°C

Powdery appearance, red brown pigmentedunderside

Microsporum canis 7 days at 30-35°C and 7 days at 20-25°C

Good growth, chamois, orange yellow underside

Staphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 hours at 35-38°C No growthPseudomonas aeruginosa ATCC27853

24-48 hours at 35-38°C No growth

8- QUALITY CONTROL OF THE MANUFACTURERAll manufactured reagents are prepared according to our Quality System, starting from reception of raw material to the finalcommercialization of the product. Each lot is submitted to quality control assessments and is only released to the market, afterconforming to pre-defined acceptance criteria. The records relating to production and control of each single lot are kept withinBio-Rad.

9- LIMITS OF USE• Avoid overheating an acidic pH medium, to prevent softening of the agar.• Chloramphenicol, used to inhibit the growth of bacterial contaminants, can also inhibit the growth of certain pathogenic

moulds.

10- REFERENCES1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 3: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

1

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

GÉLOSE / MILIEU D'ISOLEMENT SÉLECTIF DES CHAMPIGNONS

1- APPLICATION

La gélose Sabouraud chloramphénicol (Sabouraud Chloramphenicol Agar) est recommandée pour l’isolement sélectif des levures etdes champignons filamenteux (Dermatophytes et moisissures) à partir de prélèvements biologiques présentant une florepolymicrobienne fongique et bactérienne.

2- PRINCIPE

Les peptones et le glucose du milieu de Sabouraud favorisent la croissance des micro-organismes fongiques .Le chloramphénicol, antibiotique thermostable, à large spectre antibactérien, inhibe le développement de la flore bactérienneassociée et permet la croissance sélective des champignons.Ce milieu est recommandé pour la mise en culture des prélèvements biologiques présentant une abondante flore bactérienneassociée : expectorations, selles, ongles, poils …

3- PRÉSENTATION

• Milieu prêt à l’emploi (à répartir)- 6 flacons de 100 ml (SAB+C) code 56599

• Milieu déshydraté- flacon de 500 g code 64644

4- COMPOSITION THÉORIQUE (en g/l d’eau distillée)

Cette gélose est préparée selon la formule théorique du milieu C de la Pharmacopée Européenne (1), additionnée dechloramphénicol.

Peptones 10Glucose 40Agar 12

Préparation du milieu :Homogénéiser la poudre contenue dans le flacon.Mettre 42,5 grammes de milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée stérile. Attendre 5 minutes puis mélanger jusqu’à obtentiond’une suspension homogène. Chauffer lentement en agitant fréquemment, puis porter à ébullition jusqu’à dissolution complète.Ajuster si nécessaire le pH à 6,0. Stériliser à l’autoclave à 121°C pendant 20 minutes, répartir en tubes ou en boîtes de Petri .

5- CONSERVATION

• Milieu prêt à l'emploi (à répartir) : à + 2 - 8°C.• Milieu déshydraté : flacon soigneusement fermé dans un endroit sec à +15-25°C.La date de péremption et le numéro de lot sont indiqués sur le conditionnement.

IVD

Page 4: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

2

6- UTILISATION

Matériel :• Matériel fourni : gélose Sabouraud Chloramphénicol

Ensemencement :Tout prélèvement biologique peut être ensemencé sur gélose Sabouraud Chloramphénicol. Pour la conservation des échantillons

biologiques, se référer aux recommandations en vigueur (2).

Incubation :La température et la durée d’incubation varient selon la nature et le type de champignon recherché.Ces paramètres sont de la responsabilité de l’utilisateur.Température :En règle générale, la température optimale pour la détection des champignons dans les prélèvements biologiques est de 30-35°C.Lors de la recherche d’espèces fongiques particulières, l’incubation de plusieurs milieux de culture à des températures différentes(25-27°C, 30-35°C…) peut être justifié.Durée :La durée d’incubation varie en fonction de la nature du prélèvement et de l’espèce fongique suspectée. Les recommandations sont généralement les suivantes :• Pour tout prélèvement dans lequel des levures (excepté C.neoformans) sont recherchées : incubation 24 à 72 H avec observation

journalière des cultures.• Pour les prélèvements profonds : incubation 1 à 2 semaines avec examen quotidien des cultures.• La culture de phanères pour recherche de Dermatophytes nécessite une incubation pendant 3 à 4 semaines avec examen bi-

hebdomadaire .• En cas de suspicion de C.neoformans ou de champignon dimorphique dans un L.C.R. ou tout autre prélèvement : incubation

pendant 1 mois avec examen quotidien des cultures.

Lecture - Interprétation :• Après incubation, observer la croissance des micro-organismes• Réaliser l’identification du/des champignons isolés à partir de colonies bien individualisées : examen morphologique

macroscopique et microscopique, tests biochimiques*, tests complémentaires.*L’identification des colonies de levures (aspect blanc, mat, diamètre 1-2 mm) peut être réalisée à l’aide de la galerie Auxacolor® 2(code 56513).

7- PERFORMANCES / CONTRÔLE QUALITÉ DU TEST

• Aspect du milieu prêt à l’emploi : gélose limpide ambrée.• Aspect du milieu déshydraté : poudre légèrement colorée.• Les performances culturales du milieu Sabouraud chloramphénicol sont contrôlées à l’aide des souches suivantes :

8- CONTRÔLE QUALITÉ DU FABRICANT

Tous les produits fabriqués et commercialisés par la société Bio-Rad sont placés sous un système d'assurance qualité de la réceptiondes matières premières jusqu'à la commercialisation des produits finis. Chaque lot de produit fini fait l'objet d'un contrôle de qualitéet n'est commercialisé que s'il est conforme aux critères d'acceptation. La documentation relative à la production et au contrôle dechaque lot est conservée par le fabricant.

SOUCHES CONDITION D’INCUBATION RÉSULTAT DE LA CULTURE

Candida albicans ATCC 26790 24-48H à 30-35°C Bonne croissanceCandida tropicalis ATCC 750 24-48H à 30-35°C Bonne croissanceCandida glabrata 24-48H à 30-35°C Bonne croissanceTrichophyton rubrum 7 jours à 30-35°C et 7 jours à 20-25°C Dessus duveteux, revers pigmenté en rouge brunTrichophyton violaceum 7 jours à 30-35°C et 7 jours à 20-25°C Bonne croissance, pigment violetEpidermophyton floccosum 7 jours à 30-35°C et 7 jours à 20-25°C aspect poudreux, revers pigmenté en rouge brunMicrosporum canis 7 jours à 30-35°C et 7 jours à 20-25°C Bonne croissance, chamois, revers jaune orange

Staphylococcus aureus ATCC 25923 24-48H à 35-38°C InhibitionPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 24-48H à 35-38°C Inhibition

Page 5: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

9- LIMITES D'UTILISATION

• Il faut éviter toute surchauffe d'un milieu à pH acide car la gélose devient molle.• Le chloramphénicol, utilisé pour inhiber les contaminants bactériens, peut aussi inhiber le développement de certaines

moississures pathogènes.

10-RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES

1.Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.

2.Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

3

Bio-Rad3, boulevard Raymond Poincaré92430 Marnes-la-Coquette FranceTel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 07/2003Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 code: 18032 - A4

Page 6: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

AGAR / MEDIO SELECTIVO PARA EL AISLAMIENTO DE HONGOS

1- USO PREVISTOEl agar Sabouraud cloranfenicol se recomienda para el aislamiento selectivo de de levaduras y hongos filamentosos(Dermatophytes y otros hongos) de muestras biológicas que presentan flora mixta fúngica y bacteriana.

2- PRINCIPIOLas peptonas y la glucosa del medio Sabouraud promueven el crecimiento de hongos.El cloranfenicol, un antibiótico estable al calor, de amplio espectro, inhibe el crecimiento de la flora bacteriana asociada ypermite el crecimiento selectivo de hongos.Se recomienda este medio para el cultivo de muestras biológicas que presentan una flora bacteriana asociada abundante.esputo, heces, uñas, pelo.

3- CÓMO SE SUMINISTRA• Medio listo para usar: (para dispensar)

- 6 frascos de 100 ml (SAP + C) código 56599• Medio deshidratado

- frasco de 500 g código 64644

4- COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada)Este agar se elabora de acuerdo con la fórmula teórica del medio C de la Farmacopea Europea (1), con la adición decloranfenicol.Peptonas 10Glucosa 40Agar 12

Preparación del medio:Homogeneice el polvo contenido en el frasco.Añada 42,5 gramos de medio deshidratado a un litro de agua destilada estéril. Espere 5 minutos, luego mezcle hasta que seobtenga una suspensión homogénea. Caliente suavemente, agitando con frecuencia y luego caliente hasta hervir y que seconsiga la disolución completa.Si es necesario, ajuste el pH a 6,0. Esterilice en el autoclave a 121° durante 20 minutos y dispense en tubos o en placas dePetri .

5- CONSERVACIÓN• Medio listo para usar (para dispensar): a +2-8°C• Medio deshidratado: frasco cerrado herméticamente en un lugar seco a +15-25°C.La fecha de caducidad y el número de lote están indicados en el envasado.

6- INSTRUCCIONESMaterial:• Material suministrado: Agar Sabouraud cloranfenicol.

Inoculación:Todas las muestras biológicas pueden inocularse en agar Sabouraud cloranfenicol. Consúltense las recomendaciones actualespara la conservación de muestras biológicas (2).

Incubación:La temperatura y el tiempo de incubación varían de acuerdo con las características y el tipo de hongos examinados.Estos parámetros son determinados por el usuario.Temperatura:Como norma, la temperatura óptima para la detección de hongos en muestras biológicas es de 30-35°C.Puede estar justificada la incubación de varios medios de cultivo a diferentes temperaturas (25-27°C, 30-35°C) cuando seestudian especies concretas de hongos.Duración:El tiempo de incubación varía de acuerdo con la naturaleza de la muestra y la especie de hongo sospechada.Generalmente, las recomendaciones son las siguientes:• Para todas las muestras examinadas para la presencia de levaduras (excepto C. neoformans): incubación durante 24 a 72

horas con examen diario del cultivo.• Para las muestras profundas: incubación durante 1 a 2 semanas con examen diario del cultivo.• El cultivo de integumentos en busca de Dermatophytes exige una incubación durante 3 a 4 semanas con examen dos

veces por semana.

Page 7: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

• Cuando se sospechan C. neoformans o un hongo dimórfico en el LCR o cualquier otra muestra: incubación durante 1 mescon examen diario del cultivo.

Lectura – Interpretación:• Después de la incubación, observe el crecimiento de microrganismos.• Realice la identificación del hongo (u hongos) aislados de colonias claramente definidas: examen morfológico macroscópico

y microscópico, pruebas bioquímicas*, pruebas complementarias.* La identificación de colonias de levaduras (aspecto blanco mate, de 1 a 2 mm de diámetro) puede realizarse con la galeríaAuxacolor® 2 (código 56513).

7- RENDIMIENTO / CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA• Aspecto del medio listo para usar: agar transparente de color ámbar.• Aspecto del medio deshidratado: polvo de color tenue• Los rendimientos de crecimiento del agar Sabouraud cloranfenicol se verifican con las siguientes cepas:

CEPAS CONDICIONES DE INCUBACIÓN RESULTADO DEL CULTIVOCandida albicans ATCC 26790 24-48 horas a 30-35°C Buen crecimientoCandida tropicalis ATCC 750 24-48 horas a 30-35°C Buen crecimientoCandida glabrata 24-48 horas a 30-35°C Buen crecimientoTrichophyton rubrum 7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C Superficie vellosa, superficie inferior pigmentada

roja-marrónTrichophyton violaceum 7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C Buen crecimiento, pigmento violetaEpidermophyton floccosum 7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C Aspecto polvoriento, superficie inferior

pigmentada roja marrónMicrosporum canis 7 días a 30-35°C y 7 días a 20-25°C Buen crecimiento, superficie inferior con aspecto

de gamuza, naranja amarilloStaphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 horas a 35-38°C Sin crecimientoPseudomonas aeruginosa ATCC27853

24-48 horas a 35-38°C Sin crecimiento

8- CONTROL DE CALIDAD DEL FABRICANTETodos los reactivos fabricados se elaboran según nuestro sistema de calidad, que va desde la recepción de las materiasprimas hasta la comercialización final del producto. Cada lote se somete a valoraciones de control de calidad y sale al mercadosólo cuando está de acuerdo con los criterios de aceptación predefinidos. Los registros relativos a la producción y al control decada lote se conservan en Bio-Rad.

9- LÍMITES DE USO• Evite sobrecalentar un medio de pH ácido, para impedir el reblandecimiento del agar.• El cloranfenicol, empleado para inhibir el crecimiento de los contaminantes bacterianos, puede inhibir también el

crecimiento de determinados mohos patógenos.

10- BIBLIOGRAFÍA1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 8: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

AGAR / SELEKTIVES MEDIUM FÜR DIE ISOLIERUNG VON PILZEN

1- VERWENDUNGSZWECKSabouraud-Chloramphenicol-Agar wird für die selektive Isolierung von Hefen und filamentösen Pilzen (Dermatophyten undanderen Pilzen) aus biologischen Proben mit gemischter Pilz- und Bakterienflora empfohlen.

2- PRINZIPDie Peptone und die Glukose des Sabouraud-Mediums fördern das Wachstum von Pilzen.Chloramphenicol, ein hitzestabiles Breitbandantibiotikum, hemmt das Wachstum assoziierter Bakterienflora und ermöglicht dasselektive Wachstum von Pilzen.Dieses Medium wird für die Kultur biologischer Proben mit reichlicher assoziierter Bakterienflora empfohlen: Sputum, Stuhl,Nagel- und Haarproben.

3- DARREICHUNGSFORM• Gebrauchsfertiges Medium: (pipettierfertig)

- 6 x 100 ml-Fläschchen (SAB + C) Art.-Nr. 56599• Dehydriertes Medium

- Fläschchen für 500 g Art.-Nr. 64644

4- THEORETISCHE ZUSAMMENSETZUNG (g/l destilliertes Wasser)Dieser Agar wird gemäß der theoretischen Formel des Mediums C der Europöischen Pharmakopoe (1) mit Zugabe vonChloramphenicol hergestellt.Peptone 10Glukose 40Agar 12

Vorbereitung des Mediums:Das in der Flasche enthaltene Pulver homogenisieren.42,5 g des dehydrierten Mediums in 1 l steriles destilliertes Wasser geben. 5 Minuten warten, anschließend mischen, bis einehomogene Suspension hergestellt ist. Vorsichtig unter häufigem Schwenken erhitzen, anschließend bis zur vollständigenAuflösung zum Kochen bringen.Falls nötig, den pH-Wert auf 6,0 einstellen. In einem Autoklaven 20 Minuten bei 121°C sterilisieren und in die Röhrchen bzw.Petrischalen pipettieren.

5- LAGERUNG• Gebrauchsfertiges Medium (pipettierfertig): bei +2 - 8°C.• Dehydriertes Medium: in fest verschlossenen Gefäßen an einem trockenen Ort bei +15 - 25°C.Das Verfallsdatum und die Chargennummer sind auf der Verpackung angegeben.

6- GEBRAUCHSANWEISUNGMaterial:• Geliefertes Material: Sabouraud-Chloramphenicol-Agar.

Beimpfung:Sabouraud-Chloramphenicol-Agar kann mit allen biologischen Proben beimpft werden. Die Lagerbedingungen für biologischeProben entnehmen Sie bitte den aktuellen Empfehlungen (2).

Inkubation:Die Inkubationstemperatur und –zeit variiert gemäß den Merkmalen und der Art des zu testenden Pilzes.Diese Parameter werden vom Benutzer festgelegt.Temperatur:In der Regel liegt die optimale Temperatur für den Nachweis von Pilzen zwischen 30 und 35°C.Für unterschiedliche Pilzgattungen kann jedoch eine Inkubation mehrerer Kulturmedien bei unterschiedlichen Temperaturen(25-27°C, 30-35°C) erforderlich sein.Dauer:Die Inkubationszeit variiert nach Probentyp und vermuteter Pilzgattung.Folgendes wird empfohlen:

• Für alle auf das Vorliegen von Hefen getesteten Proben (außer C. neoformans): Inkubation über 24 bis 72 Stunden mittäglicher Untersuchung der Kultur.

• Für tiefe Proben: Inkubation über 1 bis 2 Wochen mit täglicher Untersuchung der Kultur.• Hautkultur, die auf Dermatophyten getestet wird, erfordert eine Inkubation von 3 bis 4 Wochen mit einer Untersuchung

zweimal pro Woche.

Page 9: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

• Bei Verdacht auf C. neoformans oder einen dimorphen Pilz im Liquor oder einer anderen Probe: Inkubation über 1 Monatmit täglicher Untersuchung der Kultur.

Ablesen - Interpretation der Ergebnisse:• Nach der Inkubation auf Wachstum von Mikroorganismen untersuchen.• Den auf eindeutig definierten Kolonien isolierten Pilz (bzw. die Pilze) identifizieren: mittels makroskopischer und

mikroskopischer morphologischer Untersuchung, biochemischer Tests* und zusätzlicher Tests.* Die Identifizierung von Hefekolonien (matte weiße Erscheinung von einem Durchmesser von 1 bis 2 mm) kann mit Auxacolor®

2 Gallery (Kat.-Nr. 56513) durchgeführt werden.

7- LEISTUNG/QUALITÄTSKONTROLLE DES TESTS• Erscheinung des gebrauchsfertigen Mediums: heller bernsteinfarbener Agar.• Erscheinung des dehydrierten Mediums: leicht gefärbtes Pulver.• Die Leistungsmerkmale des Wachstums auf Sabouraud-Chloramphenicol-Mediums werden mit folgenden Stämmen

überprüft:

STÄMME INKUBATIONSBEDINGUNGEN KULTURERGEBNISCandida albicans ATCC 26790 24-48 Stunden bei 30-35°C Gutes WachstumCandida tropicalis ATCC 750 24-48 Stunden bei 30-35°C Gutes WachstumCandida glabrata 24-48 Stunden bei 30-35°C Gutes WachstumTrichophyton rubrum 7 Tage bei 30-35°C und

7 Tage bei 20-25°CFlaumige Oberfläche, rot-braun pigmentierte

UnterseiteTrichophyton violaceum 7 Tage bei 30-35°C und

7 Tage bei 20-25°CGutes Wachstum, violett pigmentiert

Epidermophyton floccosum 7 Tage bei 30-35°C und7 Tage bei 20-25°C

Pulverige Erscheinung, rot-braun pigmentierteUnterseite

Microsporum canis 7 Tage bei 30-35°C und7 Tage bei 20-25°C

Gutes Wachstum, Chamois, orange-gelbeUnterseite

Staphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 Stunden bei 35-38°C Kein WachstumPseudomonas aeruginosa ATCC27853

24-48 Stunden bei 35-38°C Kein Wachstum

8- QUALITÄTSKONTROLLE DES HERSTELLERSAlle von der Firma Bio-Rad hergestellten Reagenzien unterliegen einem Qualitätssicherungssystem vom Rohstoffeingang biszur Vermarktung der Fertigprodukte. Jede Fertigproduktcharge wird einer Qualitätskontrolle unterzogen und nur dann verkauft,wenn sie den Freigabekriterien entspricht. Die Unterlagen bezüglich Herstellung und Kontrolle der einzelnen Chargen werdenbei Bio-Rad aufbewahrt.

9- GRENZEN DES TESTS• Überhitzen des sauren Mediums vermeiden, um den Agar nicht zu aufzuweichen.• Chloramphenicol, das zur Hemmung des Wachstums kontaminierender Bakterien verwendet wird, kann auch das

Wachstum mancher pathogener Schimmelpilze hemmen.

10- LITERATUR1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 10: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

AGAR / MEZZO SELETTIVO PER L'ISOLAMENTO DI FUNGHI

1- USO PREVISTOL'agar Sabouraud Cloramfenicolo è indicato per l'isolamento di tutte le specie di lieviti e di funghi filamentosi (Dermatophytes ealtri funghi) da campioni biologici che presentano flora fungina e batterica mista.

2- PRINCIPIOI peptoni e il glucosio del mezzo Sabouraud promuovono la crescita di funghi.Il Cloramfenicolo, un antibiotico termicamente stabile, ad ampio spettro, inibisce la crescita della flora batterica associata epermette la crescita selettiva di funghi.Questo mezzo è indicato per la coltura di campioni biologici che presentano una notevole quantità di flora batterica associata:espettorato, feci, unghie, peli.

3- PRESENTAZIONE• Mezzo pronto all’uso: (pronto per l'erogazione)

- 6 x 100 ml flaconi (SAB + C) codice 56599• Mezzo disidratato

- flacone da 500 g codice 64644

4- COMPOSIZIONE TEORICA (g/l di acqua distillata)Questo agar è preparato secondo la formula teorica del mezzo C della Farmacopea europea (1), con l'aggiunta dicloramfenicolo.Peptoni 10Glucosio 40Agar 12

Preparazione del mezzo:Omogeneizzare la polvere contenuta nel flacone.Aggiungere 42,5 grammi di mezzo disidratato per un litro di acqua distillata sterile. Attendere per 5 minuti poi miscelare fino adottenere una sospensione omogenea. Riscaldare leggermente, agitando spesso e portare ad ebollizione fino al completoscioglimento.Se necessario, regolare il pH a 6,0. Sterilizzare in autoclave a 121°C per 20 minuti e erogare in tubi o piastre Petri.

5- CONSERVAZIONE• Mezzo pronto all'uso (pronto per l'erogazione): a +2-8°C.• Mezzo disidratato: flacone sigillato ermeticamente in un luogo asciutto a +15-25°C.La data di scadenza e il numero di lotto sono indicati sulla confezione.

6- ISTRUZIONIMateriale:• Materiale fornito: agar Sabouraud Cloramfenicolo.

Inoculazione:Tutti i tipi di campione biologico possono essere inoculati sull'agar Sabouraud Cloramfenicolo. Per la conservazione di campionibiologici, fare riferimento alle raccomandazioni vigenti (2).

Incubazione:La temperatura e il tempo di incubazione possono variare a seconda delle caratteristiche e del tipo di fungo esaminato.Questi parametri sono determinati dall'utente.Temperatura:Come regola generale, la temperatura ottimale per l'individuazione di funghi all'interno di campioni biologici è di 30-35°C.L'incubazione di svariati mezzi di coltura a temperature diverse (25-27°C, 30-35°C) potrebbe essere giustificata nel caso in cuisi stiano testando particolari specie di funghi.Durata:Il tempo di incubazione può variare a seconda della natura del campione e della specie di fungo presunta.Le raccomandazioni consistono generalmente in quanto segue:• Per tutti i campioni esaminati per la presenza di lieviti (eccetto C. neoformans): incubazione da 24 a 72 ore con esame

giornaliero della coltura.• Per i campioni prelevati in profondità: incubazione da 1 a 2 settimane con esame giornaliero della coltura.• La coltura di tegumenti per l'individuazione di Dermatophytes richiede un'incubazione della durata di 3 - 4 settimane con

esame due volte alla settimana.

Page 11: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

• In caso di sospetto C. neoformans o fungo dimorfico all'interno di un CSF o qualsiasi altro campione: incubazione per1 mese con esame giornaliero della coltura.

Lettura – interpretazione:• In seguito all'incubazione, osservare la crescita di micro-organismi.• Effettuare l'identificazione del fungo (o funghi) isolati rispetto a colture chiaramente definite mediante: esame morfologico

macroscopico e microscopico, test biochimici*, test complementari.* L'identificazione delle colonie di lieviti (aspetto bianco opaco, diametro da 1 a 2 mm ) può essere effettuata mediante la

galleria Auxacolor® 2 (codice 56513).

7- CONTROLLO DI QUALITÀ / PRESTAZIONE DEL TEST• Aspetto del mezzo pronto all’uso: agar trasparente color ambra.• Aspetto del mezzo disidratato: polvere con una colorazione debole.• Le prestazioni di crescita del mezzo Sabouraud Cloramfenicolo sono verificate usando i seguenti ceppi :

CEPPI CONDIZIONI DI INCUBAZIONE RISULTATO DELLA COLTURACandida albicans ATCC 26790 24 - 48 ore a 30-35°C Crescita idoneaCandida tropicalis ATCC 750 24 - 48 ore a 30-35°C Crescita idoneaCandida glabrata 24 - 48 ore a 30-35°C Crescita idoneaTrichophyton rubrum 7 giorni a 30-35°C e 7 giorni a 20-25°C Superficie lanuginosa, parte inferiore con

pigmentazione rosso marroneTrichophyton violaceum 7 giorni a 30-35°C e 7 giorni a 20-25°C Crescita idonea, pigmentazione violaEpidermophyton floccosum 7 giorni a 30-35°C e 7 giorni a 20-25°C Aspetto polverulento, parte inferiore con

pigmentazione rosso marroneMicrosporum canis 7 giorni a 30-35°C e 7 giorni a 20-25°C Crescita idonea, parte inferiore color

camoscio, arancio-gialloStaphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 ore a 35-38°C Nessuna crescitaPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 24-48 ore a 35-38°C Nessuna crescita

8- CONTROLLO DI QUALITÀ DEL PRODUTTORETutti i reagenti realizzati sono preparati in base al nostro Sistema di Assicurazione di Qualità dal ricevimento delle materieprime, alla commercializzazione finale del prodotto. Ciascun lotto di prodotto finito è sottoposto a un controllo di qualità e vienemesso in commercio soltanto se risulta conforme ai criteri di approvazione predefiniti. La documentazione relativa allaproduzione e al controllo di ciascun singolo lotto è conservata presso Bio-Rad.

9- LIMITI DI UTILIZZO• Evitare il surriscaldamento di un mezzo con pH acido, in modo da prevenire l'ammorbidimento dell'agar.• Il cloramfenicolo, utilizzato per inibire la crescita di contaminanti batterici, potrebbe inibire anche la crescita di alcuni tipi di

muffe patogene.

10- BIBLIOGRAFIA1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 12: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

GELOSE / MEIO SELECTIVO PARA ISOLAMENTO DE FUNGOS

1- UTILIZAÇÃO PRETENDIDAA Gelose Sabouraud com Cloranfenicol está recomendada para o isolamento selectivo de leveduras e fungos filamentosos(Dermatófitos e outros fungos) a partir de amostras biológicas que apresentam uma flora fúngica e bacteriana mista.

2- PRINCÍPIOAs peptonas e a glucose do meio de Sabouraud promovem o crescimento dos fungos.O cloranfenicol, um antibiótico de largo espectro e estável ao calor, inibe o crescimento da flora bacteriana associada e permiteo desenvolvimento selectivo dos fungos.Este meio está recomendado para a cultura de amostras biológicas que apresentam uma abundante flora bacterianaassociada: expectoração, fezes, unhas, cabelo.

3- APRESENTAÇÃO• Meio pronto a usar: (a ser dispensado)

- 6 frascos x 100 ml (SAB + C) código 56599• Meio desidratado

- frasco de 500 g código 64644

4- COMPOSIÇÃO TEÓRICA (g/l de água destilada)Esta gelose é preparada em conformidade com a fórmula teórica do meio C da Farmacopeia Europeia (1), com a adição decloranfenicol.Peptonas 10Glucose 40Gelose 12

Preparação do meio:Homogenize o pó contido no frasco.Adicione 42,5 gramas de meio desidratado a 1 litro de água estéril destilada. Espere 5 minutos, em seguida misture até obteruma suspensão homogénea. Aqueça suavemente, agitando com frequência e deixe ferver até completa dissolução.Se necessário, ajuste o pH a 6,0. Esterilize na autoclave a 121°C durante 20 minutos y coloque em tubos ou em caixas dePetri.

5- CONSERVAÇÃO• Meio pronto a usar (a ser dispensado): a +2-8°C.• Meio desidratado: frasco bem fechado em local fresco a +15-25°C.O prazo de validade e o número do lote estão indicados na embalagem.

6- INSTRUÇÕESMaterial:• Material fornecido: Gelose Sabouraud com Cloranfenicol.

Inoculação:Todas as amostras biológicas podem ser inoculadas na gelose Sabouraud com Cloranfenicol. Consulte as actuaisrecomendações para a conservação de amostras biológicas (2).

Incubação:A temperatura e o tempo de incubação variam em função das características e do tipo de fungo analisado.Estes parâmetros são determinados pelo utilizador.Temperatura:Como regra geral, a temperatura óptima para a detecção de fungos em amostras biológicas é de 30-35°C.Poderá justificar-se a incubação de vários meios de cultura a temperaturas diferentes (25-27°C, 30-35°C) quando se pesquisaalguma espécie de fungo em particular.Duração:O tempo de incubação varia consoante a natureza da amostra e a espécie de fungo da qual se suspeita.De um modo geral, são as seguintes as recomendações:• Para todas as espécies analisadas para pesquisa de leveduras (excepto C. neoformans): incubação durante 24 a 72 horas

com observações diárias da cultura.• Para amostras profundas: incubação durante 1 a 2 semanas com observações diárias da cultura.• A cultura de tegumentos para pesquisa de Dermatófitos requer uma incubação durante 3 a 4 semanas com observações

duas vezes por semana.

Page 13: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

• Quando se suspeita da presença de C. neoformans ou de um fungo dimórfico no CSF ou em qualquer outra amostra:incubação durante 1 mês com observações diárias da cultura.

Leitura - Interpretação:• Após a incubação, observe o crescimento de microrganismos.• Proceda à identificação do fungo (ou fungos) isolados a partir de colónias claramente definidas: observação morfológica

macroscópica e microscópica, testes bioquímicos*, ensaios complementares.* A identificação das colónias das leveduras (aspecto branco mate, 1 a 2 mm de diâmetro) pode ser efectuada com a galeriaAuxacolor® 2 (código 56513).

7- DESEMPENHO/CONTROLO DE QUALIDADE DO ENSAIO• Aspecto do meio pronto a usar: gelose transparente com uma coloração âmbar.• Aspecto do meio desidratado: pó com uma muito ligeira coloração.• As taxas de crescimento do meio Gelose Sabouraud com Cloranfenicol são verificadas com as seguintes estirpes:

ESTIRPES CONDIÇÕES DE INCUBAÇÃO RESULTADO DA CULTURACandida albicans ATCC 26790 24-48 horas a 30-35°C Bom crescimentoCandida tropicalis ATCC 750 24-48 horas a 30-35°C Bom crescimentoCandida glabrata 24-48 horas a 30-35°C Bom crescimentoTrichophyton rubrum 7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C Superfície penugenta, reverso pigmentado

de vermelho acastanhadoTrichophyton violaceum 7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C Bom crescimento, pigmento violetaEpidermophyton floccosum 7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C Aspecto pulverulento, reverso pigmentado

de vermelho acastanhadoMicrosporum canis 7 dias a 30-35°C e 7 dias a 20-25°C Bom crescimento, colónias lanosas, reverso

laranja amareladoStaphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 horas a 35-38°C Inexistência de crescimentoPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 24-48 horas a 35-38°C Inexistência de crescimento

8- CONTROLO DE QUALIDADE DO FABRICANTETodos os reagentes fabricados são preparados de acordo com o nosso Sistema de Qualidade, desde a recepção das matériasprimas até à comercialização final do produto. Cada lote é submetido a avaliações de controlo de qualidade, sendo apenascolocado no mercado se estiver em conformidade com os critérios de aceitação pré-definidos. Os registos relativos à produçãoe controlo de cada lote são conservados pela Bio-Rad.

9- LIMITES PARA A SUA UTILIZAÇÃO• Evite o sobreaquecimento do meio a pH ácido, de forma a evitar a perda de consistência da gelose.• O cloranfenicol, usado para inibir o crescimento de contaminantes bacterianos, pode também inibir o crescimento de

certos bolores patogénicos.

10- REFERÊNCIAS1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 14: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

AGAR / SELEKTIVT MEDIUM FÖR ISOLERING AV SVAMP

1- ANVÄNDNINGSOMRÅDESabouraud kloramfenikol-agar rekommenderas för selektiv isolering av jästsvampar och filamentösa svampar (Dermatophytaeller andra svampar) från biologiska prover som uppvisar en blandad svamp- och bakterieflora.

2- PRINCIPPeptoner och glukos i Sabouraud-mediet främjar tillväxt av svamp.Kloramfenikol, ett värmestabilt bredspektrumantibiotikum, hämmar tillväxt av den associerade bakteriefloran och tillåter selektivtillväxt av svamp.Mediet rekommenderas för odling av biologiska prover som uppvisar en talrik associerad bakterieflora: sputum, avföring, naglar,hår.

3- INNEHÅLL• Medium färdigt att använda: (att fördelas)

- 6 x 100 ml flaskor (SAB + C) kod 56599• Dehydrerat medium

- flaska à 500 g kod 64644

4- TEORETISK SAMMANSÄTTNING (i g/l destillerat vatten)Denna agar bereds i enlighet med den teoretiska formeln för medium C från Europeiska farmakopén (1) med tillsats avkloramfenikol.Peptoner 10Glukos 40Agar 12

Beredning av mediet:Homogenisera pulvret som finns i flaskan.Tillsätt 42,5 gram dehydrerat medium till 1 liter sterilt destillerat vatten. Vänta 5 minuter och blanda sedan tills en homogensuspension erhålls. Värm försiktigt och skaka ofta. Värm därefter till kokpunkten tills mediet är fullständigt upplöst.Justera pH-värdet till 6,0 om nödvändigt. Sterilisera i autoklav i 121°C i 20 minuter och fördela i rör eller i Petri-skålar.

5- FÖRVARING• Medium färdigt att använda (att fördelas): i +2–8 °C.• Dehydrerat medium: tätt försluten flaska på torr plats i +15–25 °C.Utgångsdatum och partinummer står på förpackningen.

6- INSTRUKTIONERMaterial:• Material som medföljer: Sabouraud kloramfenikol-agar.

Inokulering:Alla biologiska prover kan inokuleras på Sabouraud kloramfenikol-agar. Följ aktuella rekommendationer vid förvaring avbiologiska prover (2).

Inkubering:Inkuberingstemperatur och inkuberingstid varierar beroende på egenskaperna för och typen av svamp som undersöks.Dessa parametrar bestäms av användaren.Temperatur:Som regel är optimal temperatur för detektion av svamp i biologiska prover 30–35 °C.Inkubering av flera odlingsmedier vid olika temperaturer (25–27 °C, 30–35 °C) kan vara motiverat vid test för speciellasvamparter.Varaktighet:Inkuberingstiden varierar beroende på provets egenskaper och de svamparter som misstänks.Följande allmänna rekommendationer kan ges:

• För alla prover som undersöks med avseende på förekomst av jästsvampar (utom C. neoformans): inkubering i 24 till 72timmar med daglig undersökning av odlingen.

• För djupa prover: inkubering i 1 till 2 veckor med daglig undersökning av odlingen.• Odling av integument för sökning av Dermatophyta kräver inkubering i 3 till 4 veckor med undersökning två gånger i veckan.• När C. neoformans eller en dimorf svamp misstänks i CSF eller något annat prov: inkubering i 1 månad med daglig

undersökning av odlingen.

Page 15: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

Avläsning – utvärdering:• Efter inkubering iakttas tillväxten av mikroorganismer.• Utför identifiering av den svamp (eller de svampar) som isolerats från klart definierade kolonier. makroskopisk och

mikroskopisk morfologisk undersökning, biokemiska tester*, kompletterande tester.* Identifiering av jästkolonier (matt vitt utseende, 1 till 2 mm i diameter) kan utföras med Auxacolor® 2 galleri (kod 56513).

7- TESTRESULTAT/KVALITETSKONTROLL AV TESTET• Mediets utseende (färdigt att använda): klar bärnstensfärgad agar.• Det dehydrerade mediets utseende: svagt färgat pulver.• Tillväxtresultatet för Sabouraud kloramfenikol-medium verifieras med följande stammar:

STAMMAR INKUBERINGSFÖRHÅLLANDEN ODLINGSRESULTATCandida albicans ATCC 26790 24–48 timmar i 30–35 °C God tillväxtCandida tropicalis ATCC 750 24–48 timmar i 30–35 °C God tillväxtCandida glabrata 24–48 timmar i 30–35 °C God tillväxtCryptococcus neoformans 24–48 timmar i 30–35 °C God tillväxtTrichophyton rubrum 7 dagar i 30–35 °C och 7 dagar i 20–

25 °CLuddig yta, rödbrun pigmenterad undersida

Trichophyton violaceum 7 dagar i 30–35 °C och 7 dagar i 20–25 °C

God tillväxt, violett pigment

Epidermophyton floccosum 7 dagar i 30–35 °C och 7 dagar i 20–25 °C

Pudrigt utseende, rödbrun pigmenteradundersida

Microsporum canis 7 dagar i 30–35 °C och 7 dagar i 20–25 °C

God tillväxt, sämskskinnsliknande, orange-gulundersida

Staphylococcus aureus ATCC 25923 24–48 timmar i 35–38 °C Ingen tillväxtPseudomonas aeruginosa ATCC27853

24–48 timmar i 35–38 °C Ingen tillväxt

8- TILLVERKARENS KVALITETSKONTROLLAlla reagenser tillverkas och bereds i enlighet med vårt kvalitetssystem, från mottagandet av råmaterial till den slutligamarknadsföringen av produkten. Varje parti genomgår en kvalitetskontroll och släpps endast ut på marknaden om detöverensstämmer med fördefinierade acceptanskriterier. Handlingar som beskriver produktion och kontroll av varje enskilt partisparas hos Bio-Rad.

9- ANVÄNDNINGENS BEGRÄNSNINGAR• Undvik att överhetta ett medium med surt pH för att förhindra att agaren mjuknar.• Kloramfenikol, som används för att hämma tillväxt av bakteriella smittämnen, kan även hämma tillväxt av vissa patogena

mögelsvampar.

10- REFERENSER1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 16: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 5659964644

AGAR/SELEKTIVT MEDIUM TIL ISOLATION AF SVAMPE

1- FORMÅLSabouraud Chloramphenicol-agar anbefales til selektiv isolation af gærtyper og filamentøse svampe (dermatophyter og andresvampetyper) fra biologiske prøver med en blandet fungal og bakteriel flora.

2- PRINCIPPeptonerne og glykosen i Sabouraud-medium fremmer væksten af svampe.Chloramphenicol, et varmebestandigt, bredspektret antibiotikum, hæmmer væksten af den forbundne bakterielle flora og tilladerselektiv vækst af svampe.Dette medium anbefales til dyrkning af biologiske prøver med en rig forbunden bakteriel flora: spyt, afføring, negle, hår.

3- PRODUKTETS INDHOLD• Brugsklart medium: (til fordeling)

- 6 x 100 ml-flasker (SAB + C) kode 56599• Dehydreret medium

- flaske med 500 g kode 64644

4- TEORETISK SAMMENSÆTNING (g/l destilleret vand)Denne agar forberedes ifølge European Pharmacopoeias (1) teoretiske formel for medium C med tilsættelse afchloramphenicol.Peptoner 10Glykose 40Agar 12

Forberedelse af mediet:Homogeniser pulveret i flasken.Tilsæt 42,5 gram dehydreret medie til en liter sterilt, destilleret vand. Vent 5 minutter, og bland derefter, indtil opløsningen erensartet. Opvarm forsigtigt til kogepunktet under hyppig omrystning, indtil substansen er fuldstændig opløst.Juster pH til 6,0, hvis det er nødvendigt. steriliser i autoklaven ved 121°C i 20 minutter , og fordel i rør eller på Petri-plader.

5- OPBEVARING• Brugsklart medium (til fordeling): ved +2-8°C.• Dehydreret medium: fuldstændig forseglet flaske på et tørt sted ved +15-25°C.Udløbsdatoen og partinummeret er angivet på emballagen.

6- BRUGSVEJLEDNINGMaterialer:

• Materialer, der medfølger: Sabouraud Chloramphenicol-agar.

Inokulation:Alle biologiske prøver kan inokuleres på Sabouraud Chloramphenicol-agar. Se de gældende anbefalinger angående opbevaringaf biologiske prøver (2).

Inkubation:Inkubationstemperaturen og inkubationstiden varierer alt efter, hvilke svampeegenskaber og -typer, der undersøges.Disse parametre bestemmes af brugeren.Temperatur:Som hovedregel er den optimale temperatur for konstatering af svampe i biologiske prøver 30-35°C.Inkubation af flere dyrkningsmedier ved forskellige temperaturer (25-27°C, 30-35°C) kan evt. retfærdiggøres, når der testes forbestemte svampetyper.Varighed:Inkubationstiden varierer efter prøvens art og de formodede svampetyper.Følgende anbefales normalt:

• For alle prøver, der undersøges for forekomsten af gær (undtagen C. neoformans): Inkubation i 24-27 timer med dagligundersøgelse af kulturen.

• For dybe prøver: Inkubation i 1-2 uger med daglig undersøgelse af kulturen.• Dyrkning af hud, hvor der søges efter dermatophyter, kræver inkubation i 3-4 uger med 2 ugentlige undersøgelser.• Når C. neoformans eller en dimorfisk svamp formodes i CSF eller en hvilken som helst anden prøve: Inkubation i 1 måned

med daglig undersøgelse af kulturen.

Page 17: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

Aflæsning – Fortolkning:• Observer væksten af mikroorganismer efter inkubation.• Identificer den svamp (eller de svampe), der er isoleret fra klart definerede kolonier: Makroskopisk og mikroskopisk

morfologisk undersøgelse, biokemiske test*, supplerende test.* Identifikationen af gærkolonier (mathvid præsentation, 1-2 mm i diameter) kan udføres med Auxacolor® 2-galleriet(kode 56513).

7- YDEEVNE/KVALITETSKONTROL AF TESTEN• Brugsklart mediums præsentation: klar gulfarvet agar.• Dehydreret mediums præsentation: let farvet pulver.• Vækstresultaterne for Sabouraud Chloramphenicol-mediet bekræftes med følgende stammer:

STAMMER INKUBATIONSBETINGELSER KULTURRESULTATCandida albicans ATCC 26790 24-48 timer ved 30-35°C God vækstCandida tropicalis ATCC 750 24-48 timer ved 30-35°C God vækstCandida glabrata 24-48 timer ved 30-35°C God vækstTrichophyton rubrum 7 dage ved 30-35°C og 7 dage ved

20-25°CLodden overflade, rødbrunfarvet underside

Trichophyton violaceum 7 dage ved 30-35°C og 7 dage ved20-25°C

God vækst, violet pigment

Epidermophyton floccosum 7 dage ved 30-35°C og 7 dage ved20-25°C

Pulveragtig overflade, rødbrunfarvet underside

Microsporum canis 7 dage ved 30-35°C og 7 dage ved20-25°C

God vækst, chamois, orangegul underside

Staphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 timer ved 35-38°C Ingen vækstPseudomonas aeruginosa ATCC27853

24-48 timer ved 35-38°C Ingen vækst

8- PRODUCENTENS KVALITETSKONTROLAlle producerede reagenser fremstilles ifølge vores kvalitetssikringssystem, lige fra modtagelsen af råmaterialerne tilmarkedsføringen af slutproduktet. Hvert parti af slutproduktet gennemgår kvalitetskontrol og markedsføres kun, hvis det opfylderde foruddefinerede kvalitetskriterier. Dokumentation vedrørende produktion og kontrol af hvert parti opbevares inden forvirksomheden.

9- BEGRÆNSNINGER FOR BRUG• Undgå overophedning af et medium med en sur pH-værdi, da det blødgør agaren.• Chloramphenicol, der bruges til at hæmme væksten af bakterielle kontaminanter, kan også hæmme væksten af visse

sygdomsfremkaldende skimmelsvampe.

10- REFERENCER1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 18: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

ΑΓΑΡ SABOURAUD ΜΕ ΧΛΩΡΑΜΦΑΙΝΙΚΟΛΗ 5659964644

ΑΓΑΡ / ΜΕΣΟΝ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΠΙΛΕΚΤΙΚΗ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΜΥΚΗΤΩΝ

1- ΠΡΟΒΛΕΠΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗΤο άγαρ Sabouraud µε χλωραµφαινικόλη συνιστάται για την επιλεκτική αποµόνωση ζυµών και νηµατοειδών µυκήτων(δερµατόφυτων και άλλων µυκήτων) από βιολογικά δείγµατα που περιέχουν µεικτή χλωρίδα, ήτοι µυκητική και βακτηριακήχλωρίδα.

2- ΒΑΣΙΚΗ ΑΡΧΗΟι πεπτόνες και η γλυκόζη του µέσου Sabouraud ευνοούν την ανάπτυξη µυκήτων.Η χλωραµφαινικόλη, η οποία είναι ένα θερµοστατικό αντιβιοτικό ευρέως φάσµατος, αναστέλλει την ανάπτυξη της σχετικήςβακτηριακής χλωρίδας και επιτρέπει την επιλεκτική ανάπτυξη µυκήτων.Το µέσον συνιστάται για την καλλιέργεια βιολογικών δειγµάτων που περιέχουν πλούσια σχετική βακτηριακή χλωρίδα όπως:πτυέλων, κοπράνων, ονύχων, τριχών.

3- ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΟ ΥΛΙΚΟ• Υλικό έτοιµο προς χρήση: (προς κατανοµή)

- 6 φιάλες των 100 ml (SAB και C) κωδικός 56599• Αφυδατωµένο µέσον

- φιάλη των 500 g κωδικός 64644

4- ΘΕΩΡΗΤΙΚΗ ΣΥΝΘΕΣΗ (σε g/l απεσταγµένου νερού)Αυτό το άγαρ παρασκευάζεται σύµφωνα µε τη θεωρητική σύνθεση του µέσου C της Ευρωπαϊκής Φαρµακοποιίας (1) µεπροσθήκη χλωραµφαινικόλης.Πεπτόνες 10Γλυκόζη 40Άγαρ 12

Προετοιµασία του µέσου:Οµογενοποιήστε τη σκόνη που περιέχεται στη φιάλη.Προσθέστε 42,5 γραµµάρια αφυδατωµένου µέσου σε 1 λίτρο αποστειρωµένου και απεσταγµένου νερού. Μετά από 5 λεπτάαναµονής, αναµείξτε έως ότου δηµιουργηθεί οµοιογενές εναιώρηµα. Θερµάνετε ελαφρώς το µείγµα, αναδεύοντάς το συχνά καικατόπιν θερµάνετέ το µέχρι βρασµού ώστε το υλικό να διαλυθεί πλήρως.Ρυθµίστε το pH στην τιµή 6,0 εφόσον κριθεί αναγκαίο. Αποστειρώστε σε αυτόκαυστο στους 121°C επί 20 λεπτά και διανείµετεσε σωληνάρια ή σε τρυβλία Petri.

5- ΦΥΛΑΞΗ• Υλικό έτοιµο προς χρήση (προς κατανοµή): φυλάσσεται στους 2 έως 8°C.• Αφυδατωµένο µέσον: φυλάσσεται σε ερµητικά κλειστή φιάλη, σε ξηρό µέρος και σε θερµοκρασία από 15 έως 25°CΗ ηµεροµηνία λήξεως καθώς και ο αριθµός παρτίδας αναγράφονται στη συσκευασία.

6- Ο∆ΗΓΙΕΣΥλικό:• Παρεχόµενο υλικό: Άγαρ Sabouraud µε χλωραµφαινικόλη.

Ενοφθαλµισµός:Όλα τα βιολογικά δείγµατα µπορούν να ενοφθαλµίζονται σε άγαρ Sabouraud µε χλωραµφαινικόλη. Για τη φύλαξη βιολογικώνδειγµάτων ανατρέξτε στις συστάσεις σχετικά µε τη φύλαξη (2).

Επώαση:Η θερµοκρασία και ο χρόνος επώασης ποικίλλουν ανάλογα µε τα χαρακτηριστικά και το είδος του εξεταζόµενου µύκητα.Αυτές οι παράµετροι καθορίζονται από τον χρήστη.Θερµοκρασία:Η βέλτιστη θερµοκρασία για την ανίχνευση µυκήτων σε βιολογικά δείγµατα είναι κατά κανόνα 30-35°C.Η επώαση κάποιων µέσων καλλιέργειας σε διαφορετικές θερµοκρασίες (25-27°C, 30-35°C) ενδεχοµένως δικαιολογείται σεδοκιµές που αφορούν συγκεκριµένα είδη µυκήτων.∆ιάρκεια:Ο χρόνος επώασης ποικίλει ανάλογα µε τη φύση του δείγµατος και των πιθανολογούµενων ειδών µυκήτων.Οι συστάσεις που δίδονται είναι οι ακόλουθες:• Όσον αφορά όλα τα δείγµατα που εξετάζονται για τυχόν παρουσία ζυµών (εκτός του C. neoformans): επώαση για 24 έως 72

ώρες µε καθηµερινή εξέταση της καλλιέργειας.

Page 19: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

• Όσον αφορά τα δείγµατα που λαµβάνονται από µεγαλύτερο βάθος: επώαση για 1 έως 2 εβδοµάδες µε καθηµερινή εξέτασητης καλλιέργειας.

• Στην καλλιέργεια των καλυπτηρίων οργάνων για δερµατόφυτα απαιτείται επώαση για 3 έως 4 εβδοµάδες µε εξέταση τηςκαλλιέργειας δύο φορές ανά εβδοµάδα.

• Όταν πιθανολογείται η παρουσία C. neoformans ή διµορφικού µύκητα στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό (ΕΝΥ) ή σε οποιοδήποτεάλλο δείγµα: επώαση για 1 µήνα µε καθηµερινή εξέταση της καλλιέργειας.

Ανάγνωση – Ερµηνεία• Μετά από την επώαση, παρατηρήστε την ανάπτυξη των µικροοργανισµών.• Προβείτε σε ταυτοποίηση του µύκητα (ή των µυκήτων) που αποµονώθηκε από τις σαφώς σχηµατισµένες αποικίες: µε

µακροσκοπική και µικροσκοπική µορφολογική εξέταση, µε βιοχηµικές δοκιµές* και µε συµπληρωµατικές δοκιµές.* Η ταυτοποίηση των αποικιών ζυµοµυκήτων (µε µατ όψη λευκού χρώµατος και µε διάµετρο 1 έως 2 mm) µπορεί ναπραγµατοποιηθεί µε το Auxacolor® 2 (κωδικός 56513).

7- ΕΠΙ∆ΟΣΕΙΣ/ ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΤΗΣ ∆ΟΚΙΜΗΣ• Όψη του έτοιµου προς χρήση υλικού: διαυγές, φαιοκίτρινο άγαρ.• Όψη του αφυδατωµένου υλικού: ελαφρώς χρωµατισµένη σκόνη.• Οι επιδόσεις του µέσου Sabouraud µε χλωραµφαινικόλη ως προς την ανάπτυξη ελέγχονται µε βάση τα ακόλουθα στελέχη:

ΣΤΕΛΕΧΗ ΣΥΝΘΗΚΕΣ ΕΠΩΑΣΗΣ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣCandida albicans ATCC 26790 24-48 ώρες στους 30-35°C Καλή ανάπτυξηCandida tropicalis ATCC 750 24-48 ώρες στους 30-35°C Καλή ανάπτυξηCandida glabrata 24-48 ώρες στους 30-35°C Καλή ανάπτυξηTrichophyton rubrum 7 ηµέρες στους 30-35°C και 7

ηµέρες στους 20-25°CΠτιλώδης επιφάνεια, υποκείµενο στρώµα καφέ-

κόκκινου χρώµατοςTrichophyton violaceum 7 ηµέρες στους 30-35°C και 7

ηµέρες στους 20-25°CΚαλή ανάπτυξη, ιώδης χρώση

Epidermophyton floccosum 7 ηµέρες στους 30-35°C και 7ηµέρες στους 20-25°C

Κονιώδης όψη, υποκείµενο στρώµα καφέ-κόκκινου χρώµατος

Microsporum canis 7 ηµέρες στους 30-35°C και 7ηµέρες στους 20-25°C

Καλή ανάπτυξη, σαµουά, υποκείµενο στρώµακίτρινου-πορτοκαλί χρώµατος

Staphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 ώρες στους 35-38°C Απουσία ανάπτυξηςPseudomonas aeruginosa ATCC27853

24-48 ώρες στους 35-38°C Απουσία ανάπτυξης

8- ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΕΚ ΜΕΡΟΥΣ ΤΟΥ ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗΌλα τα προϊόντα που κατασκευάζονται και διατίθενται στο εµπόριο από την εταιρία µας υποβάλλονται σε όλες τις διεργασίες τουσυστήµατος διασφάλισης ποιότητας, από την παραλαβή των πρώτων υλών έως την εµπορευµατοποίηση των τελικώνπροϊόντων. Κάθε παρτίδα τελικού προϊόντος υποβάλλεται σε έλεγχο ποιότητας και διατίθεται στο εµπόριο µόνον ότανσυµµορφώνεται προς τα κριτήρια αποδοχής. Η τεκµηρίωση σχετικά µε την παραγωγή και τον έλεγχο κάθε παρτίδας τηρείταιεντός της εταιρίας Bio-Rad.

9- ΟΡΙΑ ΧΡΗΣΗΣ• Συνιστάται η αποφυγή της υπερθέρµανσης του µέσου µε όξινο pH ούτως ώστε να µην µαλακώσει το άγαρ.• Η χλωραµφαινικόλη, η οποία χρησιµοποιείται για την αναστολή της ανάπτυξης των βακτηριακών µολυσµατικών

παραγόντων, µπορεί να προκαλέσει και την αναστολή της ανάπτυξης ορισµένων παθογόνων ευρωτοµυκήτων.

10- ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002.2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 20: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD-CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SZELEKTÍV TÁPTALAJ GOMBÁK IZOLÁLÁSÁHOZ

1- FELHASZNÁLÁS A chloramphenicolos Sabouraud agart a kevert, baktérium- és gombaflórát tartalmazó biológiai mintákban található élesztők és fonalas gombák (dermatophytonok és egyéb gombák) szelektív izolálásához ajánljuk.

2- ALAPELV A gombák növekedését elősegítik a Sabouraud táptalajban található peptonok és a glükóz. A chloramphenicol, ez a hőstabil és széles spektrumú antibiotikum gátolja a társult baktériumflóra növekedését és lehetővé teszi a szelektív gombatenyésztést. A táptalajt olyan biológiai minták kitenyésztéséhez ajánljuk, amelyekben nagy mennyiségben található társult baktériumflóra, például köpethez, széklethez, köröm- és hajmintához.

3- KISZERELÉS • Felhasználásra kész (kiönthető) közeg:

- 6 db 100 ml-es üveg (SAB + C) kódszám 56599 • Portáptalaj:

- 500 g-os doboz kódszám 64644

4- ELVI ÖSSZETÉTEL (g/l desztillált víz) A táptalajt az Európai Gyógyszerkönyv (1) C közegének elvi receptje szerint készítjük, chloramphenicol hozzáadásával. Peptonok 10 Glükóz 40 Agar 12 Végső pH-érték: 6,0 ± 0,2 A táptalaj elkészítése: Keverjük fel a dobozban található port. Adjunk 42,5 grammnyit a portáptalajból 1 liter steril desztillált vízhez. Várjunk 5 percet, majd addig keverjük, amíg homogén szuszpenziót nem kapunk. Óvatosan melegítsük, gyakori kevergetés mellett, majd addig forraljuk, amíg teljesen fel nem oldódik. Ha szükséges, állítsuk be 6,0-ra a pH-ját. Öntsük ki csövekbe vagy Petri-csészékbe és sterilezzük autoklávban 115°C-on, 20 percig.

5- TÁROLÁS • A felhasználásra kész (kiönthető) közeget +2-8°C között tároljuk. • A portáptalajt szorosan lezárt dobozban, száraz helyen, +15-25°C között tároljuk. A szavatossági idő és a gyártási sorozat száma a csomagoláson olvasható.

6- HASZNÁLATI ÚTMUTATÓ Anyag: • A forgalmazó által szállított Sabouraud-chloramphenicol agar. Leoltás: A Sabouraud-chloramphenicol agarra bármilyen biológiai minta leoltható. Ld. biológiai minták tárolására vonatkozó aktuális ajánlások (2). Inkubálás: Az inkubálási hőmérséklet és idő változó lehet a vizsgált gomba típusától és jellegzetességeitől függően. A paramétereket a felhasználónak kell meghatároznia. Hőmérséklet: Alapszabályként elmondható, hogy biológiai mintákban előforduló gombák kimutatásához az optimális hőmérséklet 30-35°C. Ha kifejezetten csak egyes gombafajokra vizsgálunk, akkor indokolt lehet több táptalajt különböző hőmérsékleteken inkubálni (25-27°C, 30-35°C). Időtartam: Az inkubálási idő a minta jellegétől és a gyanítható gombafajtól függ. Általában az alábbiakat ajánljuk: • Az élesztőkre (kivéve a C. neoformans-t) vizsgált minden mintát 24 – 72 órán át inkubáljunk, és naponta vizsgáljuk meg a

tenyészetet. • Mélyről származó mintákat 1 – 2 hétig inkubáljunk, és naponta vizsgáljuk meg a tenyészetet. • Ha kültakarót vizsgálunk dermatophytákra, akkor 3 – 4 hétig inkubáljunk, és hetente kétszer vizsgáljuk meg a tenyészetet.

Page 21: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

• Ha C. neoformans vagy dimorf gomba jelenlétére gyanakszunk gerincűri folyadékban, vagy bármely más mintában, akkor 1 hónapig inkubáljunk, és naponta vizsgáljuk meg a tenyészetet.

Leolvasás - Kiértékelés: • Inkubálás után figyeljük meg a mikroorganizmusok növekedését. • Az egyértelműen elkülönülő telepekből izolált gombát (vagy gombákat) identifikáljuk makro- és mikroszkópos morfológiai

vizsgálattal, biokémiai tesztekkel* és kiegészítő vizsgálatokkal. * Az élesztőtelepek (matt fehér kinézetűek, 1 – 2 mm átmérőjűek) az Auxacolor® 2-vel identifikálhatók (kódszám 56513).

7- MINŐSÉG/A TÁPTALAJ MINŐSÉGÉNEK ELLENŐRZÉSE • A felhasználásra kész közeg megjelenése: víztiszta, borostyánszínű agar. • A portáptalaj megjelenése: halvány színű por. • A Sabouraud-chloramphenicol táptalaj szaporítóképességét az alábbi törzsekkel ellenőrizzük:

TÖRZSEK INKUBÁLÁSI KÖRÜLMÉNYEK TENYÉSZTÉS EREDMÉNYE Candida albicans ATCC 26790 24-48 óra 30-35°C-on Jó növekedés Candida tropicalis ATCC 750 24-48 óra 30-35°C-on Jó növekedés Candida glabrata 24-48 óra 30-35°C-on Jó növekedés Cryptococcus neoformans 24-48 óra 30-35°C-on Jó növekedés Trichophyton rubrum 7 nap 30-35°C-on és 7 nap 20-25°C-

on Pelyhes/dombos felület, alulról nézve

vörösesbarna pigmentáció Trichophyton violaceum 7 nap 30-35°C-on és 7 nap 20-25°C-

on Jó növekedés, ibolyaszínű pigment

Epidermophyton floccosum 7 nap 30-35°C-on és 7 nap 20-25°C-on

Porszerű megjelenés, alulról nézve vörösesbarna pigmentáció

Microsporum canis 7 nap 30-35°C-on és 7 nap 20-25°C-on

Jó növekedés, szarvasbőrszerű, alulról nézve narancssárga-sárga

Staphylococcus aureus ATCC 25923 24-48 óra 35-38°C-on Nincs növekedés Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

24-48 óra 35-38°C-on Nincs növekedés

8- A GYÁRTÓNÁL FOLYÓ MINŐSÉGELLENŐRZÉS Az összes termékünk a saját minőségellenőrző rendszerünk szerint készült, a nyersanyag átvételétől kezdve a termék forgalmazásáig. Minden egyes gyártási sorozat minőségét ellenőrizzük, és csak akkor hozzuk forgalomba, ha az megfelel az előre felállított kritériumoknak. Minden sorozat gyártási és minőségellenőrzési jegyzőkönyve megtalálható a Bio-Radnál.

9- AZ ALKALMAZÁS KORLÁTAI • Vigyázzunk, hogy ne hevítsük túl a savas pH-jú táptalajt, nehogy meglágyuljon az agar. • A szennyező baktériumok növekedésének meggátolására használt chloramphenicol egyes patogén penészek növekedését

is képes gátolni.

10- HIVATKOZÁSOK 1. Pharmacopée Européenne. Addendum 4.2 de la 4e édition. 2002. 2. Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva. 1991. 1st edition.

Page 22: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 WYBIÓRCZE PODŁOŻE AGAROWE DO IZOLACJI GRZYBÓW

1- ZASTOSOWANIE Podłoże Sabouraud z chloramfenikolem jest przeznaczone do izolacji i hodowli drożdżaków i grzybów nitkowatych (także dermatofitów) z materiałów klinicznych, zawierających florę mieszaną, grzybiczą i bakteryjną. 2- ZASADA METODY Składniki podłoża Sabouraud (peptony i glukoza) zapewniają wzrost grzybów. Chloramfenikol, termostabilny antybiotyk o szerokim spektrum, hamuje wzrost bakterii występujących w badanej próbce, pozwalając na wzrost grzybów. Podłoże jest zalecane do posiewów materiałów zawierających bogata florę towarzyszącą, jak plwocina, kał, materiały pobrane ze skóry i jej wytworów. 3- POSTAĆ PODŁOŻA • Podłoże gotowe do użycia: (do rozlania)

- butelki 6 x 100 ml (SAB+C) nr kat. 56599 • Podłoże w proszku:

- opakowanie 500 g nr kat. 64644

4- PODSTAWOWE SKŁADNIKI (g/l wody destylowanej) Podłoże agarowe przygotowane zgodnie ze składem podłoża C opisanym w Farmakopei Europejskiej (1) i uzupełnione chloramfenikolem. Peptony 10 Glukoza 40 Agar 15 Przygotowanie podłoża: Przed użyciem wstrząsnąć suche podłoże w pojemniku. Rozpuścić 42,5 g proszku w 1 litrze jałowej wody destylowanej. Po 5 minutach dobrze wymieszać do uzyskania jednorodnej zawiesiny. Ogrzewać, często mieszając, do zagotowania. Jeśli trzeba, doprowadzić pH do 6.0. Wysterylizować w autoklawie w temp. 121°C przez 20 minut i rozlać do probówek lub na płytki. 5- PRZECHOWYWANIE • Podłoże gotowe użycia (do rozlania): w temperaturze +2 do 8°C • Podłoże w proszku: w szczelnie zamkniętym pojemniku, w suchym miejscu, w temperaturze +15 do 25°C.

Data ważności i numer serii znajduje się na opakowaniu. 6- PROCEDURA Dostarczony materiał: • Podłoże Sabouraud Chloramphenicol Agar.

Inokulacja: Na podłoże można wysiać każdy materiał kliniczny. Należy zapoznać się z zaleceniami dotyczącymi przechowywania materiałów biologicznych. (2). Inkubacja: Czas i temperatura inkubacji zależy od charakterystyki i typu badanych gatunków grzybów. Warunki inkubacji określa użytkownik. Temperatura: Optymalną temperaturą do wykrywania grzybów w materiałach klinicznych jest 30-35°C. Inkubacja kilku podłoży w różnych temperaturach (25-27°C, 30-35°C) jest uzasadniona w przypadku badania w kierunku określonych gatunków grzybów. Czas inkubacji: Zależy głównie od rodzaju wysianego materiału oraz spodziewanych gatunków grzybów. Najczęściej zaleca się: • W przypadku wszystkich materiałów klinicznych, badanych na obecność drożdżaków (z wyjątkiem

C.neoformans): inkubacja 24-72 godziny, codzienne oglądanie hodowli. • W przypadku głębokich materiałów klinicznych: inkubacja 1-2 tygodnie, codzienne oglądanie hodowli.

Page 23: SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644techmicrobio.eu/documentation_fabricants/Biorad diagnostics pasteur/pdf...SABOURAUD CHLORAMPHENICOL AGAR 56599 64644 AGAR / SELECTIVE MEDIUM

• Hodowle zaszczepione materiałem pobranym ze skóry lub jej wytworów, badanie w kierunku dermatofitów: inkubacja 3-4 tygodnie, oglądanie hodowli dwa razy w tygodniu.

• Przy podejrzeniu zakażenia C.neoformans lub grzybami dimorficznymi, po wysianiu płynu mózgowo-rdzeniowego lub innego materiału inkubacja 1 miesiąc, codzienne oglądanie hodowli.

Odczyt i interpretacja • Po inkubacji należy obserwować wzrost kolonii drobnoustrojów. • Reprezentatywne, pojedyncze kolonie grzybów należy pobrać do identyfikacji: określić cechy morfologiczne,

wykonać preparat mikroskopowy, testy biochemiczne* i uzupełniające. *Identyfikację kolonii drożdżaków (białe, matowe, o średnicy 1-2 mm) można wykonać za pomocą testu Auxacolor® 2 (nr kat. 56513). 7- KONTROLA JAKOŚCI • Podłoże gotowe do użytku jest przejrzyste, jasno-bursztynowe. • Podłoże w proszku ma jasno-beżową barwę. • Morfologia kolonii szczepów wzorcowych na podłożu Sabouraud Chloramphenicol Agar:

SZCZEP WARUNKI INKUBACJI RODZAJ WZROSTU

Candida albicans ATCC 26790 24-48 godzin w temp. 30-35°C Wzrost dobry Candida tropicalis ATCC 750 24-48 godzin w temp. 30-35°C Wzrost dobry Candida glabrata 24-48 godzin w temp. 30-35°C Wzrost dobry Trichophyton rubrum 7 dni w temp. 30-35°C

i 7 dni w temp. 20-25°C Kolonie meszkowate, rewers

pigmentowany czerwono-brązowy Trichophyton violaceum 7 dni w temp. 30-35°C

i 7 dni w temp. 20-25°C Wzrost dobry, pigment fioletowy

Epidermophyton floccosum 7 dni w temp. 30-35°C i 7 dni w temp. 20-25°C

Kolonie pudrowane, rewers pigmentowany czerwono-brązowy

Microsporum canis 7 dni w temp. 30-35°C i 7 dni w temp. 20-25°C

Wzrost dobry, kolonie skórzaste, rewers pigmentowany pomarańczowo-żółty

Staphylococcus aureus ATCC 25923

24-48 godz. w temp. 35-38°C

Brak wzrostu

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

24-48 godz. w temp. 35-38°C

Brak wzrostu

8- KONTROLA JAKOŚCI PRODUCENTA Każdy produkt Bio-Rad został przygotowany zgodnie z systemem jakości, poczynając od materiałów wyjściowych, aż do ostatecznego produktu komercyjnego. Każda seria ostatecznego produktu podlega oznaczeniu kontrolnemu i jest dopuszczona do użytku, jeśli spełnia wymagane kryteria. Bio-Rad posiada protokoły produkcji i kontroli jakości każdej serii. 9- OGRANICZENIA METODY • Przegrzanie podłoża o kwaśnym pH powoduje utratę utwardzających właściwości agaru. • Chloramfenikol, zastosowany do zahamowania wzrostu bakterii, może również zahamować wzrost

niektórych szczepów chorobotwórczych grzybów. 10- BIBLIOGRAFIA 1. Pharmacopée Européenne, Addendum 4.2 de la IVe édition, 2002, p. 2841. 2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.

Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré

92430 Marnes-la-Coquette France Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 11/2003

2