-
1
U N I V E R S I D A D N A C I O N A L D E T R U J I L L O
L a P r i m e r a U n i v e r s i d a d R e p u b l i c a n a d
e l P e r y A m r i c a
O F I C I N A G E N E R A L D E P R O M O C I N Y D E S A R R O
L L O D E L A I N V E S T I G A C I N
( O G P R O D E I N )
P R O Y E C T O D E I N V E S T I G A C I N 2 0 1 0
L e c t i n a s d e P h a s e o lu s v u lg a r is L . v a r u a
u a y s u e s p e c i f i c i d a d
h e m o a g l u t i n a n t e f r e n t e a g r u p o s s a n g
u n e o s A B O y l e v a d u r a s .
J e f e d e l P r o y e c t o : P r o f . J u l io C s a r A r e
l la n o B a r r a g n
C o a u t o r e s : P r o f . S t e b a n A le ja n d r o I l ic
h Z e r p a
P r o f . M a r c o L e o n c io S a la z a r C a s t i l lo
P r o f . I c e la M a r is s a R o d r g u e z H a r o
P r o f . E d i t a A s u n c i n A r a u jo C a s t i l lo
D e p a r t a m e n t o s : Q u m ic a B io l g ic a y F is io
lo g a A n im a l
M ic r o b io lo g a y P a r a s i t o lo g a
C ie n c ia s B io l g ic a s
F a c u l t a d : C ie n c ia s B io l g ic a s
T R U J I L L O - P E R
2 0 1 0
-
2
P R O Y E C T O D E I N V E S T I G A C I N 2 0 1 0
P a l a b r a s c l a v e : L e c t i n a s , P u r i f i c a c
i n , P h a s e o l u s v u l g a r i s L
I . - G E N E R A L I D A D E S :
1 . - T t u l o : L e c t i n a s d e P h a s e o l u s v u l g
a r i s L . v a r u a u a y s u e s p e c i f i c i d a d
h e m o a g l u t i n a n t e f r e n t e a g r u p o s s a n g
u n e o s A B O y l e v a d u r a s .
2 . - T i p o d e I n v e s t i g a c i n :
I n v e s t i g a c i n B s i c a
3 . - P E R S O N A L I N V E S T I G A D O R
I n v e s t i g a d o r 1 : A r e l l a n o B a r r a g n J u l
i o C s a r
C a r g o e n e l P r o y e c t o : J E F E D E L P R O Y E C T
O
F a c u l t a d y D p t o . A c a d m i c o : C i e n c i a s B
i o l g i c a s y Q u m i c a B i o l g i c a y F . A .
T e l f o n o : 2 9 3 4 7 7 / 9 4 - 9 3 7 3 7 2 3 e - m a i l :
j a c b 4 4 2 @ h o t m a i l . c o m
I n v e s t i g a d o r 2 : I l i c h Z e r p a S t e b a n A l
e j a n d r o
C a r g o e n e l P r o y e c t o : C O A U T O R
F a c u l t a d y D p t o . A c a d m i c o : C i e n c i a s B
i o l g i c a s y Q u m i c a B i o l g i c a y F . A .
T e l f o n o : 2 8 8 9 4 7 / 9 4 - 9 6 0 2 8 3 3 e - m a i l :
s a i l i c h @ y a h o o . c o m
I n v e s t i g a d o r 3 : S a l a z a r C a s t i l l o M a r
c o L e o n c i o
C a r g o e n e l P r o y e c t o : C O A U T O R
F a c u l t a d y D p t o . A c a d m i c o : C i e n c i a s B
i o l g i c a s y Q u m i c a B i o l g i c a y F . A .
T e l f o n o : 2 2 0 2 8 0 / 9 4 - 9 3 3 9 3 7 1 e - m a i l :
u n t m a r k o @ h o t m a i l . c o m
I n v e s t i g a d o r 4 : R o d r g u e z H a r o I c e l a M
a r i s s a ( + )
C a r g o e n e l P r o y e c t o : C O A U T O R
F a c u l t a d y D p t o . A c a d m i c o : C i e n c i a s B
i o l g i c a s y M i c r o b i o l o g a y P a r a s i t o l o g
a
T e l f o n o : 2 2 0 2 8 0 / 9 4 - 9 3 3 9 3 7 1 e - m a i l :
u n t i c e l a @ h o t m a i l . c o m
( + ) ( F o r m a c i n e s p e c i a l i z a d a e n e l c a m
p o d e l a M i c r o b i o l o g a )
I n v e s t i g a d o r 5 : A r a u j o C a s t i l l o E d i t
a A s u n c i n ( + )
C a r g o e n e l P r o y e c t o : C O A U T O R
F a c u l t a d y D p t o . A c a d m i c o : C i e n c i a s B
i o l g i c a s .
T e l f o n o : 2 0 2 7 1 0 / 9 4 - 9 1 3 3 7 0 4 e - m a i l :
e d i t a a r a u j o @ h o t m a i l . c o m
( + ) ( F o r m a c i n e s p e c i a l i z a d a e n e l c a m
p o d e l a B o t n i c a )
-
3
4 . - A r e a d e I n v e s t i g a c i n / d i s c i p l i n a
c i e n t f i c a
C i e n c i a s N a t u r a l e s
5 . - L n e a y S u b - l n e a d e I n v e s t i g a c i n
:
L n e a : B i o q u m i c a
S u b - l n e a : T e c n o l o g a d e P r o t e n a s : L e c
t i n a s
6 . - D e c l a r a r s i e l P r o y e c t o i n v o l u c r a
:
I n v o l u c r a n e s t u d i o s d e p r o s p e c t i v
a
O r i e n t a d a a l a s e g u r i d a d h u m a n a
O r i e n t a d a l a d i f u s i n y p r o m o c i n d e l a c
i e n c i a y t e c n o l o g a .
7 . - L u g a r d e e j e c u c i n d e l P r o y e c t o
P a b e l l n J e s s G a r c a A l v a r a d o - 2 P i s o - U
n i v e r s i d a d N a c i o n a l d e T r u j i l l o -
T r u j i l l o , P e r .
D i r e c c i n : C i u d a d U n i v e r s i t a r i a - A v .
J u a n P a b l o I I s / n T r u j i l l o - P e r .
8 . - P r e s u p u e s t o : S / . 3 , 0 0 0 n u e v o s s o l
e s .
9 . - T a r e a s d e l e q u i p o i n v e s t i g a d o r
:
P r o f . J u l i o C s a r A r e l l a n o B a r r a g n
a ) A i s l a m i e n t o d e l e c t i n a s y p r e p a r a c
i n d e e x t r a c t o s c r u d o s .
b ) R e d a c c i n d e l I n f o r m e S e m e s t r a l y F i
n a l .
P r o f . S t e b a n A l e j a n d r o I l i c h Z e r p a
a ) D e t e r m i n a c i n d e p r o t e n a s .
b ) R e d a c c i n I n f o r m e S e m e s t r a l y f i n a l
.
P r o f . M a r c o L e o n c i o S a l a z a r C a s t i l l
o
a ) P r e p a r a c i n d e r e a c t i v o s y P u r i f i c a
c i n d e L e c t i n a s .
b ) E l e c t r o f o r e s i s .
P r o f . I c e l a M a r i s s a R o d r g u e z H a r o
a ) H e m o a g l u t i n a c i n .
b ) C u l t i v o d e l e v a d u r a s y a g l u t i n a c i
n
P r o f . E d i t a A s u n c i n A r a u j o C a s t i l l
o
a ) C u l t i v o y e v a l u a c i n d e c o s e c h a
b ) I d e n t i f i c a c i n d e P h a s e o l u s v u l g a r
i s L . v a r u a u a
1 0 . - D u r a c i n d e l P r o y e c t o :
D E L : 4 d e e n e r o d e l 2 0 1 0
A L : 3 1 d e d i c i e m b r e d e l 2 0 1 0
-
4
1 1 . - C r o n o g r a m a d e E j e c u c i n d e l p r o y e
c t o
E t a p a s I n i c i o T r m i n o D e d i c a c i n
s e m a n a l
a . - R e c o l e c c i n d e d a t o s E n e r o A g o s t o 6
h o r a s
b . - A n l i s i s d e r e s u l t a d o s S e t i e m b r e O
c t u b r e 6 h o r a s
c . - R e d a c c i n d e l i n f o r m e N o v i e m b r e D i
c i e m b r e 6 h o r a s
1 2 . - R e c u r s o s D i s p o n i b l e s :
a . - P e r s o n a l :
P e r s o n a l T c n i c o d e l L a b o r a t o r i o Q u m i
c a B i o l g i c a :
M s . E m e t r i o O l i v a r e s d e l a C r u z
T c . I n d . A l i m . Y r i s A g u i l a r H o l q u n
b . - M a t e r i a l e s y E q u i p o s :
B a g u e t a d e v i d r i o 0 2 u n i d .
B a l o n e s P i r e x x 5 0 0 m L 0 3 u n i d .
B o l s a s d e c o l o d i n p a r a d i l i s i s , S i g m a
3 0 u n i d
D i s p e n s a r e s 5 , 1 0 , 2 0 , 5 0 y 1 0 0 L 1 0 u n i d
.
G r a d i l l a m e t l i c a p a r a 4 8 t u b o s 0 2 u n i d
.
M a t r a z P i r e x x 5 0 0 m L 0 3 u n i d .
M e c h e r o d e v i d r i o 0 2 u n i d .
M o r t e r o d e p o r c e l a n a 0 3 u n i d .
P a p e l W h a t m a n N o . 1 , 3 1 0 p l i e g o s / u
P i p e t a s g r a d u a d a s x 5 m L 0 3 u n i d .
P i p e t a s g r a d u a d a s x 1 0 m L 0 3 u n i d .
P u n t a s d e s c a r t a b l e s p a r a 5 , 1 0 , 2 0 , 5 0
y 1 0 0 L 5 0 0 u n i d .
P r o b e t a s , F o r t u n a x 1 0 0 m L 0 5 u n i d .
T u b o s d e e n s a y o P i r e x 1 3 x 1 0 0 m m 1 0 0 u n i
d .
V a s o s d e p r e c i p i t a c i n P i r e x , 5 0 m L 1 0 u
n i d
C m a r a d e e l e c t r o f o r s i s 0 1 u n i d .
A c e t a t o d e s o d i o , p a . M e r c k 1 0 0 g
A c i d o a c t i c o g l a c i a l c c , p a . M e r c k 1 0 0
m L
A c i d o b r i c o , p a . S i g m a 1 0 0 g
A c i d o f o s f r i c o c c , p a . M e r c k 1 0 0 m L
A c i d o s u l f r i c o c c , p a . M e r c k 1 0 0 m L
A c i d o C l o r h d r i c o c c , p a . M e r c k 1 0 0 m
L
A l b m i n a b o v i n a a l 2 5 % , D i f c o 1 0 0 m L
-
5
A n t r o n a , p a . M e r c k 1 0 g
A z u l b r i l l a n t e C o o m a s s i e G - 2 5 0 , S i g m
a 2 , 0 g
A z u l d e b r o m o f e n o l , p a . M e r c k 2 , 0 g
A c r i l a m i d a , p a . S i g m a 1 0 0 g
B i s a c r i l a m i d a , p a . S i g m a 5 0 g
- m e r c a p t o e t a n o l , p a . S i g m a 5 0 m L
B o r a t o d e s o d i o , p a . S i g m a 1 0 0 g
C i t r a t o s d i c o , p a . M e r c k 5 0 g
C l o r u r o d e s o d i o , p a . S i g m a 1 0 0 g
C l o r u r o d e c a l c i o , p a . S i g m a 5 0 g
C l o r u r o d e m a n g a n e s o , p a . S i g m a 5 0 g
D E A E - c e l u l o s a , S i g m a 2 5 0 g
D o d e c i l s u l f a t o d e s o d i o , p a . M e r c k 5 0
g
E D T A d i s d i c o , p a . S i g m a 5 0 g
F o s f a t o m o n o p o t s i c o d e s o d i o , p a . M e r
c k 5 0 g
F o s f a t o d i p o t s i c o , p a . M e r c k 5 0 g
G a l a c t o s a , p a . S i g m a 1 0 0 g
G l i c i n a , p a . S i g m a 1 0 0 g
H i d r x i d o d e s o d i o , p a . M e r c k 1 0 0 g
M e t a n o l , M e r c k 1 L
R e a c t i v o B r a d f o r d , S i g m a K i t x 5 0 0 p r u
e b a s
S u l f a t o d e a m o n i o , p a . S i g m a 2 k g
T E M E D , P A . S i g m a 1 0 0 g
T r i s , S i g m a . 1 0 0 g
- E q u i p o s :
B a l a n z a a n a l t i c a ( 0 , 0 0 1 s e n s i b i l i d a
d ) 0 1 u n i d .
B a l a n z a d e d o s p l a t i l l o s O h a u s ( 0 . 1 g .
s e n s i b i l i d a d ) 0 1 u n i d .
B a o M a r a 0 1 u n i d .
B o m b a d e v a c o , C o l e - P a r m e r 0 1 u n i d .
C e n t r f u g a 5 0 0 0 r p m C l a y A d m s , I n c 0 1 u n
i d .
C o c i n a e l c t r i c a 0 1 u n i d .
C o l e c t o r d e f r a c c i o n e s 0 1 u n i d .
C r o n m e t r o , C a s i o 0 1 u n i d .
C o m p r e s o r a d e a i r e 0 1 u n i d .
E s t u f a , M e m m e r t 0 1 u n i d .
H o r n o , M e m m e r t 0 1 u n i d .
-
6
R e f r i g e r a d o r a , M o r a v e c o 0 1 u n i d .
E s p e c t r o f o t m e t r o S p e k o l 2 1 0 0 1 u n i d
.
L i o f i l i z a d o r 0 1 u n i d .
E x t r a c t o r d e j u g o s , O s t e r 0 1 u n i d .
P o t e n c i m e t r o , B e c k m a n I I 0 1 u n i d .
c . - L o c a l :
L a b o r a t o r i o d e T e c n o l o g a E n z i m t i c a ,
E n t o m o p a t g e n o s y
P r o d u c t o s N a t u r a l e s P a b e l l n J e s s G a r
c a A l v a r a d o 2 d o P i s o .
C i u d a d U n i v e r s i t a r i a A v . J u a n P a b l o I
I s / n .
1 3 . - P r e s u p u e s t o :
5 . 3 . 1 1 . 2 0 . G a s t o c o r r i e n t e / B i e n e s y
S e r v i c i o s / A p l i c a c i o n e s d i r e c t a s /
V i t i c o s y A s i g n a c i o n e s .
M o v i l i d a d L o c a l 1 5 0 . 0 0
S u b t o t a l S / . 1 5 0 . 0 0
5 . 3 . 1 1 . 3 0 G a s t o c o r r i e n t e / B i e n e s y S
e r v i c i o s / A p l i c a c i o n e s d i r e c t a s /
M a t e r i a l e s d e c o n s u m o .
M a t e r i a l d e e s c r i t o r i o
C a n t i d a d C o s t o ( S / . )
T i n t a p a r a i m p r e s o r a E p s o n 0 2 u n i d . 1 5
0 . 0 0
C o r r e c t o r l q u i d o F a b e r C a s t e l l 0 2 u n i
d . 1 5 . 0 0
D i s k e t t e 3 M d e 3 . 5 0 3 u n i d . 5 . 0 0
L a p i c e r o s F a b e r C a s t e l l ( a z u l , r o j o y
n e g r o ) 0 3 u n i d c / u 5 . 0 0
P a p e l B o n d A - 4 A t l a s 5 0 0 u n i d . 1 5 . 0 0
P a p e l m i l i m e t r a d o 3 0 u n i d . 1 2 . 0 0
P a p e l B u l k i A t l a s 2 5 0 u n i d . 7 . 0 0
P l u m n d e t i n t a i n d e l e b l e A r t l i n e 0 4 u n
i d 1 0 0 . 0 0
R o l l o d e p e l c u l a U l t r a K o d a k d e 3 6 f o t o
s 0 2 u n i d . 3 0 . 0 0
S u b t o t a l S / . 3 3 9 . 0 0
M a t e r i a l d e l a b o r a t o r i o y r e a c t i v o
s
C a n t i d a d C o s t o ( S / . )
A c i d o a c t i c o g l a c i a l , p a . M e r c k 1 0 0 m L
5 0 , 0 0
A c r i l a m i d a , p a S i g m a 5 0 g 1 0 0 , 0 0
C l o r u r o d e s o d i o , p a . M e r c k 1 0 0 g 7 5 , 0
0
G l u t a r a l d e h i d o , p a . 2 5 % , S i g m a 5 0 m L 3
4 4 , 6 0
-
7
B o l s a s d e c o l o d i n 1 p a q . 2 5 , 0 0
u a 3 0 k g 1 0 0 , 0 0
A r a b i n o s a 2 5 g 1 3 6 . 9 6
D - g a l a c t o s a 2 5 g 8 6 . 4 0
M e l i b i o s a 1 0 g 2 1 7 . 6 0
D - T r e h a l o s a 1 0 g 1 0 5 . 6 0
L - S o r b o s a 1 0 0 g 1 3 4 . 0 8
D - L a c t o s a 1 0 0 g 1 9 1 . 3 6
C e l o b i o s a 2 5 g 1 7 4 . 4 0
S u b t o t a l S / . 1 , 7 4 1 . 0 0
5 . 3 . 1 1 . 3 7 G a s t o c o r r i e n t e / B i e n e s y S
e r v i c i o s / A p l i c a c i o n e s d i r e c t a s / O t r o
s
s e r v i c i o s d e t e r c e r o s P e r s o n a s n a t u r
a l e s
F o t o c o p i a s 1 5 0 . 0 0
E s p i r a l a d o s 8 0 . 0 0
E l a b o r a c i n g r f i c a c o m p u t a r i z a d a 8 0 .
0 0
P r o c e s a d o r e s t a d s t i c o c o m p u t a r i z a d
o 1 5 0 . 0 0
I m p r e s i o n e s f o t o g r f i c a s ( r e v e l a d o )
8 0 . 0 0
I m p r e s i o n e s t i p o g r f i c a s 1 0 0 . 0 0
S e r v i c i o I n t e r n e t 1 5 0 . 0 0
S u b t o t a l S / . 7 7 0 . 0 0
R e s u m e n d e l P r e s u p u e s t o
5 . 3 . 1 1 . 2 0 1 5 0 . 0 0
5 . 3 . 1 1 . 3 0 2 , 0 8 0 . 0 0
5 . 3 . 1 1 . 3 7 7 7 0 . 0 0
T O T A L S / . 3 , 0 0 0 . 0 0
1 4 . - F i n a n c i a m i e n t o
a . - C o n r e c u r s o s u n i v e r s i t a r i o s : L o s
r e c u r s o s d i s p o n i b l e s p o r F E D U
b . - C o n r e c u r s o s e x t e r n o s : N o
c . - A u t o f i n a n c i a c i n :
L o s r e c u r s o s d i s p o n i b l e s p r o p o r c i o n
a d o s p o r l a s e c c i n d e Q u m i c a B i o l g i c a ,
D e p a r t a m e n t o d e Q u m i c a B i o l g i c a y F i s
i o l o g a A n i m a l . - M o n t o a p r o x i m a d o
- ( S / . 1 , 7 0 0 . 0 0 )
-
8
L o s r e c u r s o s n o d i s p o n i b l e s s e r n o b t e
n i d o s c o n r e c u r s o s d e l a O f i c i n a G e n e r a
l
d e P r o m o c i n y D e s a r r o l l o d e l a I n v e s t i
g a c i n ( O G P R O D E I N ) - M o n t o a p r o x i m a d o
-
( S / 1 , 3 0 0 . 0 0 )
1 5 . - R e s u m e n d e l p r o y e c t o .
L a s l e c t i n a s s o n p r o t e n a s o g l i c o p r o t
e n a s , e s t n p r e s e n t e s e n v e g e t a l e s , a n i m
a l e s y
e n m i c r o o r g a n i s m o s , j u e g a n m u c h o s r o
l e s i m p o r t a n t e s e n l o s p r o c e s o s d e c r e c i
m i e n t o
y d e s a r r o l l o . L a s l e c t i n a s s o n p r o t e n
a s q u e s e u n e n e s p e c f i c a m e n t e a c a r b o h i d
r a t o s
d e l a s u p e r f i c i e c e l u l a r , o d e g l i c o p r
o t e n a s , t i e n e v a r i a d a s a p l i c a c i o n e s e n
e l c a m p o d e
l a i n v e s t i g a c i n b i o q u m i c a y b i o m d i c a
. H a n s i d o i m p l i c a d a s e n g r a n v a r i e d a d d
e
f u n c i o n e s c e l u l a r e s t a l e s c o m o i n t e r
a c c i o n e s c l u l a - c l u l a , r e c o n o c i m i e n t o
d e
s u p e r f i c i e c e l u l a r , s i s t e m a i n m u n e n
a t u r a l , e t c .
E l o b j e t i v o g e n e r a l e s e s t u d i a r e l e f e
c t o h e m a a g l u t i n a n t e d e l e c t i n a e x t r a d a
d e
P h a s e o l u s v u l g a r i s L . v a r u a u a f r e n t e
a g r u p o s s a n g u n e o A B O y a g l u t i n a c i n
d e l e v a d u r a s . E n u n i n f o r m e a n t e r i o r s
e r e p o r t l a a g l u t i n a c i n d e e r i t r o c i t o s h
u m a n o s
d e l g r u p o A , s i n e s t u d i a r s e l o s o t r o s g
r u p o s s a n g u n e o s n i e l e f e c t o a g l u t i n a n t
e e n
l e v a d u r a s .
L o s r e s u l t a d o s s e r n a l i m e n t a d o s e n u n
a f u e n t e d e d a t o s p a r a e x p r e s a r l o s e n e n u
n c i a d o
r e s u m e n , t a b l a s , f i g u r a s y l o s a n l i s i
s e s t a d s t ic o s c o r re s p o n d i e n t e s d e s e r e l
c a s o .
S i e n d o u n t r a b a j o o r i g i n a l e n r e l a c i n
a l a f u e n t e v e g e t a l e s t u d i a d a , c o n t r i b u
i r
p o s i t i v a m e n t e a l c o n o c i m i e n t o c i e n t
f i c o e n e l c a m p o d e l a s g l i c o p r o t e n a s .
-
9
I I . - P L A N D E I N V E S T I G A C I O N
1 . - A N T E C E D E N T E S Y F U N D A M E N T A C I O N C I
E N T F I C A , T E C N I C A O
H U M A N I S T I C A
L a p r i m e r a l e c t i n a d e p l a n t a f u e d e s c u
b i e r t a e n 1 8 8 8 e n e x t r a c t o s d e s e m i l l a s d
e
R i c i n u s c o m m u n i s p o r S t i l l m a r k y s e l e
l l a m R i c i n a ( R C A ) . M s t a r d e , H e l l i n
d e s c u b r i l a a b r i n a ( A P A ) e n s e m i l l a s d
e A b r u s p r e c a t o r i u s p o r s u c a r a c t e r s t i c
a d e
h e m o a g l u t i n a n t e . 1
. S i n e m b a r g o , n o e s s i n o h a s t a 1 9 6 3 q u e
d e s c r i b e n q u e l a s
l e c t i n a s d e p l a n t a s p u e d e n d i s t i n g u i
r e n t r e c l u l a s n o r m a l e s y c l u l a s m a l i g n a
s y
q u e l a d i f e r e n c i a e s t e n l a s u p e r f i c i e
, e n o t r a s p a l a b r a s , q u e l a a l t e r a c i n d e l
a
s u p e r f i c i e c e l u l a r e s p r o p i e d a d d e c l
u l a s c a n c e r g e n a s . 2
L a s l e c t i n a s s o n u n g r u p o d e p r o t e n a s d
e o r i g e n n o - i n m u n e q u e c o m p a r t e n l a
p r o p i e d a d d e e n l a z a r s e d e f o r m a e s p e c
f i c a y r e v e r s i b l e a l o s c a r b o h i d r a t o s , y
a
s e a n l i b r e s o q u e f o r m e n p a r t e d e e s t r u
c t u r a s m s c o m p l e j a s .
E s t a s p r o t e n a s u s u a l m e n t e t i e n e n a l m
e n o s d o s s i t i o s d e u n i n p o r m o l c u l a : u n
a z c a r e s p e c f i c o y u n a m o l c u l a g l i c o s i
l a d a . C o m o c a r a c t e r s t i c a p a r t i c u l a r t i
e n d e n
a a g l u t i n a r a l a s c l u l a s a l a s c u a l e s s e
u n e n . 3
E s t e t i p o d e m o l c u l a s s e e n c u e n t r a d i s
t r i b u i d a e n l a n a t u r a l e z a , e n d i f e r e n t e
s
o r g a n i s m o s c o m o m i c r o o r g a n i s m o s , h o
n g o s , a n i m a l e s y p l a n t a s . E n l a s p l a n t a s
, l a
m a y o r a d e e s t a s m o l c u l a s e s t n p r e s e n t
e s e n l o s c o t i l e d o n e s y e n d o s p e r m o s d e
l a s s e m i l l a s y c o n s t i t u y e n d e 2 a 1 0 % d e
l t o t a l d e p r o t e n a d e s t a s . 4
E n e l r e i n o a n i m a l s e h a n e n c o n t r a d o e n
i n v e r t e b r a d o s , t a l e s c o m o c a n g r e j o s
,
c a m a r o n e s , c a r a c o l e s , l o m b r i c e s y m o
l u s c o s . E s t n p r e s e n t e s f u n d a m e n t a l m e n
t e
e n l a h e m o l i n f a y r g a n o s s e x u a l e s . 5
S e s u g i e r e q u e d e n t r o d e l a p l a n t a , e s t
a s p r o t e n a s p u e d e n t e n e r d i f e r e n t e s
f u n c i o n e s c o m o s o n : r e g u l a c i n f i s i o l
g i c a , d e f e n s a m e c n i c a c o n t r a e l a t a q u e d
e
m i c r o o r g a n i s m o s , a l m a c e n a m i e n t o d e
p r o t e n a s , t r a n s p o r t e d e c a r b o h i d r a t o s
,
-
1 0
e s t i m u l a c i n m i t o g n i c a , r e c o n o c i m i e
n t o d e l a s b a c t e r i a s f i j a d o r a s d e n i t r g e
n o d e l
g n e r o R h i z o h i u m , y a l g u n a s m s .6
A c t u a l m e n t e s e h a n e s t u d i a d o e n d e t a l
l e 9 l e c t i n a s c o n e f e c t o m i t o g n i c o s o b r e
l o s
l i n f o c i t o s , e n t r e l a s q u e s e d e s t a c a n
l a s p r o v e n i e n t e s d e P h a s e o l u s v u l g a r i
s
( P H A ) , C a n a v a l i a e n s i f o r m i s ( C o n A ) ,
P i s u m s a i v u m ( P S A ) y F i t o l a c a
a m e r i c a n a ( P W M ) . E s t o s m i t g e n o s p u e d
e n a c t i v a r d e f o r m a d i f e r e n t e l o s
l i n f o c i t o s T y B , p o r e j e m p l o l a P H A y C o
n A i n d u c e n m i t o g e n i c i d a d e n c l u l a s T ,
m i e n t r a s q u e e l m i t g e n o d e c a r m n ( P W M )
e s t i m u l a a m b o s t i p o s d e c l u l a s . N o s e
c o n o c e l e c t i n a a l g u n a q u e e s t i m u l e s l
o a l o s l i n f o c i t o s B h u m a n o s . 7 , 8 . 9
L a s l e c t i n a s f o r m a n p a r t e d e c o n j u g a d
o s c o m o l e c t i n a - l e c t i n a , l e c t i n a - e n z i
m a s y
l e c t i n a - a n t i c u e r p o s , l o q u e h a p e r m i
t i d o e l d e s a r r o l l o d e t c n i c a s c r o m a t o g r
f i c a s ,
c o m o l a c r o m a t o g r a f a d e a f i n i d a d p a r a
l a p u r i f i c a c i n d e g l i c o p r o t e n a s . E j e m p
l o
d e e l l a s e s l a p u r i f i c a c i n d e I g G u t i l i
z a n d o a n t i - I g G a c o p l a d a a l a C o n A -
S e p h a r o s e y l a p u r i f i c a c i n d e I g M u s a n
d o C o n A - S e p h a r o s e , 1 0
a s c o m o t a m b i n
l a p u r i f i c a c i n d e e n z i m a s y d e l a s p r o p
i a s l e c t i n a s .
L a s i n t e r a c c i o n e s d e e s t a s p r o t e n a s c
o n c l u l a s p u e d e n s e r i n h i b i d a s e n m u c h o
s
c a s o s p o r a z c a r e s , p o r l o q u e s e h a l l e g
a d o a l a c o n c l u s i n d e q u e e l l a s s e
e n l a z a n a s a c r i d o s d e l a s u p e r f i c i e c e
l u l a r , l o q u e h a p r o v i s t o a l o s c i e n t f i c o
s d e
t i l e s m a r c a d o r e s p a r a e m p l e a r l o s e n t
c n i c a s h i s t o q u m i c a s y e n l a m i c r o s c o p
a
e l e c t r n i c a p a r a e s t u d i a r l a e s t r u c t u
r a y f u n c i n d e l a m e m b r a n a p l a s m t i c a . 5
G e n e r a l m e n t e s e u t i l i z a n l e c t i n a s c o
n j u g a d a s c o n m a r c a d o r e s f l u o r e s c e n t e s
c o m o
l a b i o t i n a y l a s m s u s a d a s p a r a e s t o s f i
n e s s o n l a P H A - L , P H A - E y l a s
p r o v e n i e n t e s d e P i s u m s a t v u m ( P S A ) , T
r i c u m v u l g a r e ( W G A ) , S o l a n u m
t u b e r i s u m ( S T L ) , A r a c h i s h y p o g a e ( P N
A ) , D a t u r a s t r m o n i u m ( D S L ) , L e n s
c u l i n a r i s ( L C A ) y d e G r i f f o n i a s i m p l i
c i f o l i a ( G S L ) . 5
L a g r a n i m p o r t a n c i a d e l a s l e c t i n a s s e
d e b e f u n d a m e n t a l m e n t e a s u s p r o p i e d a d e
s
b i o l g i c a s c o m o l a i n t e r a c c i n c o n g r u p
o s s a n g u n e o s e s p e c f i c o s , a g l u t i n a c i n d
e
l i n f o c i t o s , e r i t r o c i t o s , e s p e r m a t o
z o i d e s , p l a q u e t a s , b a c t e r i a s y c l u l a s t
u m o r a l e s ,
i n d u c c i n d e l a m i t o s i s e n e l l i n f o c i t o
, y e f e c t o s c i t o t x i c o s s o b r e l o s l i n f o c i
t o s . 1 2
-
1 1
L a s l e c t i n a s s e e m p l e a n i g u a l m e n t e e n
l a c a r a c t e r i z a c i n d e g r u p o s s a n g u n e o
s
h u m a n o s , a s c o m o e n l a i d e n t i f i c a c i n d
e n u e v o s g r u p o s s a n g u n e o s .
A l g u n a s d e l a s l e c t i n a s s o n e s p e c f i c a
s e n s u s r e a c c i o n e s c o n l o s g r u p o s
s a n g u n e o s A B O , M N , A1 y A
2 d e h u m a n o s ,
5
p o r e s t o h a n s i d o u t i l i z a d a s e n l a
d e t e r m i n a c i n d e l t i p o d e s a n g r e d e l o s
i n d i v i d u o s . L a m a y o r a d e l a s l e c t i n a s
a g l u t i n a n l o s e r i t r o c i t o s d e t o d o s l o
s g r u p o s s a n g u n e o s e n h u m a n o s y a c t a n a
s i m i l a r e s c o n c e n t r a c i o n e s , s t a s s o n
l e c t i n a s n o e s p e c f i c a s ( n o s i g n i f i c a q u
e n o
s e a e s p e c f i c a a l o s a z c a r e s ) ; e l r e s t o
s o n l e c t i n a s e s p e c f i c a s .
A l g u n a s d e s u s a p l i c a c i o n e s s o n : a n l i
s i s d e f u n c i o n e s l i n f o p r o l i f e r a t i v a s
y
c i t o t x i c a s e n c l u l a s m o n o n u c l e a r e s c
a u s a d a s p o r a l g u n a s d r o g a s , d e t e c c i n d
e
a n o r m a l i d a d e s c r o m o s m i c a s , c o m o m a r
c a d o r e s f l u o r e s c e n t e s p a r a e s t u d i a r
c a m b i o s e s t r u c t u r a l e s e n l o s g l i c o c o
n j u g a d o s p r e s e n t e s e n l a s s u p e r f i c i e
s
c e l u l a r e s , y l a d e t e c c i n d e t r a n s f o r m
a c i o n e s m a l i g n a s e n l a s c l u l a s , e n t r e o t
r a s . 4
D e b i d o a s u s p r o p i e d a d e s e s p e c f i c a s ,
l a s l e c t i n a s s e h a n u t i l i z a d o c o m o
h e r r a m i e n t a s e n l a b i o q u m i c a , b i o l o g
a c e l u l a r , i n m u n o l o g a , g e n t i c a y
b i o m e d i c i n a c o n p r o p s i t o s a n a l t i c o s
y p r e p a r a t i v o s , a s c o m o p a r a e l d i a g n s t i
c o
y t e r a p i a e n e l c n c e r .1 1 , 1 2 , 4
s t a s p u e d e n s e r e x t r a d a s c o n a g u a 1 3
c o n s o l u c i o n e s t a m p o n a d a s 1 4 , 1 5
o c o n
s o l u c i o n e s a c i d a s 1 6
y p u e d e n s e r p u r i f i c a d a s p o r f r a c c i o n
a m i e n t o s a l i n o c o n s u l f a t o
d e a m o n i o y c r o m a t o g r a f a d e i n t e r c a m b
i o i n i c o , c r o m a t o g r a f a d e a f i n i d a d o d
e
e x c l u s i n m o l e c u l a r . 1 5 , 1 6
L o s g l i c o c o n j u g a d o s d e l a s s u p e r f i c i
e s c e l u l a r e s s o n c o n o c i d o s p o r s u d e s e m p
e o
i m p o r t a n t e e n l a s i n t e r a c c i o n e s c l u l
a - c l u l a , t a l e s c o m o e l r e c o n o c i m i e n t o ,
l a
c o m u n i c a c i n y a d h e s i n .1 7
T a l e s i n t e r a c c i o n e s s o n t a m b i n i m p o r
t a n t e s e n l a
t u m o r o g n e s i s , p r o g r e s i n d e l t u m o r y m
e t s t a s i s . 1 8 , 1 9
D u r a n t e l a d i f e r e n c i a c i n
c e l u l a r . y l a t r a n s f o r m a c i n m a l i g n a ,
l a b i o s n t e s i s d e l a s c a d e n a s d e o l i g o s a c
r i d o s
d e g l i c o p r o t e n a s e s f r e c u e n t e m e n t e a
l t e r a d a y e s t a a l t e r a c i n p u e d e s e r d e t e c
t a d a
p o r l a s l e c t i n a s . 2 0 , 2 1
-
1 2
D e n t r o d e l o s e s t u d i o s d e m e m b r a n a s e h
a r e p o r t a d o e l u s o d e l e c t i n a s p a r a
i n v e s t i g a r c a m b i o s e s t r u c t u r a l e s e n
l a s s u p e r f i c i e s c e l u l a r e s . 2 2 , 1 2
L a m a y o r a d e l a s l e c t i n a s a g l u t i n a n e r
i t r o c i t o s d e t o d o s l o s g r u p o s s a n g u n e o s
,
a c t u a n d o a l a m i s m a d i l u c i n y p o r l o t a n
t o n o s o n e s p e c f i c a s d e g r u p o . L a s
e s p e c i f i c a s a g l u t i n a n e r i t r o c i t o s h
u m a n o s p r e f e r e n t e m e n t e d e u n d e t e r m i n a
n d o
g r u p o s a n g u n e o . E s t a e s p e c i f i c i d a d p
e r m i t e u s a r a l a s l e c t i n a s c o m o r e a c t i v o
d e
t i p i f i c a c i n d e g r u p o s a n g u n e o y e n l a i
d e n t i f i c a c i n d e i n d i v i d u o s s e c r e t o r e s
2 3
.
L a s l e c t i n a s h a n s i d o a i s l a d a s d e s e m i
l l a s d e m u c h a s l e g u m i n o s a s , e n u n t r a b a j
o
a n t e r i o r s e r e p o r t e l e f e c t o h e m a g l u t
i n a n t e d e l e c t i n a d e P h a s e o l u s v u l g a r i s
L . v a r
u a u a s o b r e e r i t r o c i t o s h u m a n o s d e l g r
u p o s a n g u n e o A . N o h a y r e p o r t e s
s o b r e u n a a c t i v i d a d d i f e r e n c i a d a o e s
p e c f i c a s o b r e l o s g r u p o s s a n g u n e o s d e
l
s i s t e m a A B O .
E l o b j e t i v o g e n e r a l e s e s t u d i a r e l e f e
c t o h e m a a g l u t i n a n t e d e l e c t i n a e x t r a d a
d e
P h a s e o l u s v u l g a r i s L . v a r u a u a f r e n t e
a g r u p o s s a n g u n e o s A B O y
a g l u t i n a c i n d e l e v a d u r a s .
-
1 3
2 . - J U S T I F I C A C I O N
E s u n t r a b a j o d e a c t u a l i d a d a n i v e l i n t
e r n a c i o n a l .
E s l a c o n t i n u a c i n d e u n t r a b a j o a n t e r i
o r q u e n o t o m e n c u e n t a l o s d i f e r e n t e s
g r u p o s s a n g u n e o s d e l s i s t e m a A B O y n i l
e v a d u r a s e n l a b s q u e d a d e n u e v a s
f u e n t e s v e g e t a l e s p o s e e d o r a s d e l e c t
i n a s .
L a s l e c t i n a s t i e n e n i m p o r t a n c i a d e s d
e e l p u n t o d e v i s t a m d i c o , b i o l g i c o e
i n d u s t r i a l .
3 . - P R O B L E M A
P r e s e n t a n a c t i v i d a d h e m o a g l u t i n a n t
e s o b r e e l t o d o s l o s g r u p o s s a n g u n e o s h u m
a n o s
d e l s i t e m a A B O y l e v a d u r a s d e l o s g n e r o
s S a c c h a r o m y c e s y C a n d i d a ?
4 . - H I P T E S I S
L a s l e c t i n a s a i s l a d a s d e P h a s e o l u s v u
l g a r i s L . v a r u a u a p r e s e n t a n a c t i v i d a
d
h e m o a g l u t i n a n t e e n t o d o s l o s g r u p o s s
a n g u n e o s h u m a n o s d e l s i s t e m a A B O y
a c t i v i d a d a g l u t i n a n t e e n l a s l e v a d u r
a s d e l o s g n e r o s S a c c h a r o m y c e s y C a n d i d a
.
5 . - O B J E T I V O S
5 . 1 . G e n e r a l :
E s t u d i a r l a e s p e c i f i c i d a d d e l a h e m a g
l u t i n a c i n e n e l s i s t e m a d e l g r u p o A B O y e
n
l e v a d u r a s d e l o s g n e r o s S a c c h a r o m y c e
s y C a n d i d a .
5 . 2 . - E s p e c f i c o s :
- P u r i f i c a r y c a r a c t e r i z a r p a r c i a l m e
n t e l a l e c t i n a e x t r a d a d e P h a s e o l u s v u l g
a r i s L . v a r
u a u a .
- E v a l u a r e l e f e c t o a g l u t i n a n t e e n g l b
u l o s r o j o s h u m a n o s y l e v a d u r a s d e l o s g n e
r o s
S a c c h a r o m y c e s y C a n d i d a .
6 . - M E T O D O L O G A D E T R A B A J O
6 . 1 M a t e r i a l
6 . 1 . 1 M a t e r i a l B i o l g i c o
S e u t i l i z a r n s e m i l l a s d e P h a s e o l u s v u
l g a r i s L . v a r u a u a d e l m e r c a d o l o c a l
d e T r u j i l l o - D p t o . - L a L i b e r t a d , l a s m
i s m a s q u e s e r n i d e n t i f i c a d a s e n e l H e r b a
r i o d e l a
U N T y a d e m s v e r i f i c a d a s m e d i a n t e s u c i
c l o b i o l g i c o : S i e m b r a , c u l t i v o , c o s e c h
a ,
r e c o l e c c i n e i d e n t i f i c a c i n .
-
1 4
6 . 1 . 2 E x t r a c c i n y p u r i f i c a c i n d e l e c t
i n a s 2 4
L a s s e m i l la s d e P h a s e o l u s v u l g a r i s L . v
a r u a u a s e r n m o l i d a s h a s t a s e r
c o n v e r t i d a s e n h a r i n a y 1 0 0 g d e m u e s t r
a s e r n m e z c l a d a s c o n u n li t r o d e c a d a u n
o
d e l o s s i g u i e n t e s s o l u c i o n e s : g l i c i n
a - H C l p H 2 , 6 - 0 , 1 M ; a c e t a t o d e s o d i o 0 . 1 M
p H
4 , 0 ; a c e t a t o d e s o d i o 0 , 1 M p H 6 , 0 ; T r i s
- H C l 0 , 1 M p H 7 , 6 y b o r a t o d e s o d i o 0 , 1 M
p H 1 0 , 0 . A t o d a s e s t a s s o l u c i o n e s s e l e
s a g r e g a r c l o r u r o d e s o d i o 0 , 1 5 M . L a s
s u s p e n s i o n e s s e r n a g i t a d a s d u r a n t e 3
h o r a s a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y l u e g o
c e n t r i f u g a d a s a 1 2 0 0 0 g d u r a n t e 2 0 m i n
u t o s a 7 C . L o s s o b r e n a d a n t e s s e r n u s a d o
s
p a r a d e t e r m i n a r e l c o n t e n i d o d e p r o t e
n a s ( 2 5 )
y s u a c t i v i d a d h e m a g l u t i n a n t e( 2 4 )
y
t a m b i n s e r n s o m e t i d o s a l a n l i s i s e l e c
t r o fo r t i c o .
6 . 1 . 3 F r a c c i o n a m i e n t o c o n a lc o h o l e t l
i c o c o m e r c i a l 2 4
D e l o s s o b r e n a d a n t e s d e l a s s e m i ll a s o b
t e n i d o s e n 6 . 1 . s e e l e g i r n l o s q u e p r e s e n
ta n
m a y o r c a p a c i d a d d e e x t r a c c i n d e l e c t i
n a s y s e r n p r e c i p i t a d o s c o n a l c o h o l e t l
ic o
c o m e r c i a l a 3 0 C , d e j a d o s t o d a l a n o c h e
a - 4 C y l u e g o c e n t r i f u g a d o . A l p r e c i p i t a
d o
s e l e h a r u n a p r u e b a d e h e m o a g l u t i n a c i
n y s i s a l e n e g a t i v o s e le d e s c a r t a r . A l
s o b r e n a d a n t e d e l p a s o a n t e r i o r s e l e a
g r e g a r a lc o h o l e t l i c o h a s t a l l e v a r l o a u
n a
c o n c e n t r a c i n d e l 7 0 % . S e l e d e j a r t o d a
l a n o c h e y s e c e n t r i f u g a r . A l p r e c i p i t a d
o
s e l e h a r l a p r u e b a d e a g l u t i n a c i n .
6 . 1 . 4 A n l i s i s e l e c t r o f o r t i c o d e l e c t
i n a s e n g e l d e p o l i a c r i la m i d a d e d o d e c
il
s u l f a t o d e s o d i o - P A G E - S D S 2 6
L a e l e c t r o f o r e s i s e n g e l d e p o l i a c r i la
m i d a r e r e a l i z a r e n l m i n a s v e r t ic a l e s d e
g e l d e
2 m m d e e s p e s o r , s e g n e l m t o d o d e L e a m m l
i, u t il i z a n d o g e l e s d e c o n c e n tr a c i n y
d e r e s o l u c i n e n c o n c e n t r a c i o n e s d e 3 ,
9 5 % y 1 2 , 5 % r e s p e c t i v a m e n t e .
L a s m u e s t r a s s e d i s o l v e r n e n b u f f e r T r
i s - H C l p H 6 , 8 0 , 0 6 2 5 M , c o n t e n i e n d o 2 % d
e
S D S y 1 % d e - m e r c a p t o e t a n o l ; l u e g o s e i
n c u b a r n a 1 0 0 C p o r 1 0 m i n u t o s . L a s
m u e s t r a s a s i t r a t a d a s s e r n m e z c l a d a s
c o n u n v o l u m e n i g u a l d e s a c a r o s a y l u e g
o
c o l o c a d a s e n e l g e l . L a e l e c t r o f o re s i s
s e l l e v a r a c a b o a u n a c o r r ie n t e c o n s t a n te
d e
2 0 m A p o r 3 h o r a s . L a s b a n d a s d e p r o t e n a
s s e v i s u a l i z a r n c o l o r e a n d o e l g e l c o n u n
a
s o l u c i n d e a z u l b r i l l a n t e d e C o o m a s s i
e R 2 5 0 . L a s e s t i m a c i o n e s d e l p e s o
m o l e c u l a r d e l a s l e c t i n a s s e r n r e a l i z
a d a s e n b a s e a c o m p a r a c i o n e s c o n p a t r o n e
s d e
l e c t i n a d e p e s o m o l e c u l a r c o n o c i d o
.
-
1 5
6 . 1 . 5 P r u e b a s d e h e m a g l u t i n a c i n
6 . 1 . 5 . 1 O b t e n c i n d e e r i t r o c i t o s
L o s e r i t r o c i t o s h u m a n o s d e l S i s t e m a A
B O s e c o l e c t a r n d e d o n a d o r e s s a l u d a b l e
s
e n e l L a b o r a to r i o d e Q u m i c a B i o l g i c a d e
l D e p a r t a m e n t o d e Q u m i c a B i o l g i c a y
F i s i o l o g a A n i m a l - F a c u l t a d d e C i e n c i
a s B i o l g i c a s , U n i v . N a c i o n a l d e T r u j il l
o . L a s
l e v a d u r a s d e l o s g n e ro s S a c c c h a ro m y c e
s y C a n d i d a s e r n p r o p o r c i o n a d a s p o r
e l L a b o r a t o r i o d e B a c t e r i o lo g a d e l D p t
o . d e M i c r o b i o l o g a y P a r a s i t o l o g a d e l
a
F a c u l t a d d e C i e n c i a s B i o l g i c a s .
6 . 1 . 5 . 2 A c t i v id a d a g l u t i n a n t e 2 4
L a a g l u t i n a c i n d e l a s c lu l a s r o j a s d e l a
s a n g r e p o r f r a g m e n t o s o b t e n i d o s
d u r a n t e l a p u r i f i c a c i n s e e s t i m a r s e g
n M o r e ir a y P e r r o n e , 1 9 7 72 4
. L a s
d i l u c i o n e s s e r i a d a s a l m e d i o d e l e c t in
a , s e l l e v a r n a c a b o e n t u b o s p e q u e o s o
p l a c a s e x c a v a d a s , u s a n d o 0 . 1 5 M d e c l o
r u r o d e s o d i o q u e c o n t e n d r n 5 m M d e
c l o r u r o d e c a l c i o y 5 m M d e c l o r u r o d e m a
n g a n e s o ( 0 , 2 5 ) , y s e a g r e g a r 0 , 2 5 m L
d e s u s p e n s i n d e e r i t r o c i t o s . E l g r a d o
d e a g l u ti n a c i n s e o b s e r v a r v i s u a l m e n t
e
d e s p u s d e l a i n c u b a c i n a 3 7 C p o r 3 0 m i n u
t o s y 3 0 m i n u to s m s a l a
t e m p e r a t u r a a m b i e n t e .
U n a u n i d a d d e H e m a g l u t i n a c i n ( U H ) s e d
e f i n i r c o m o e l r e c p ro c o d e la d i l u c i n
m s a l t a q u e t o d a v a c a u s a u n a a g l u ti n a c i
n v is i b l e .
L a a c t i v i d a d e s p e c f i c a s e e x p r e s a r c o
m o l a s u n i d a d e s d e H e m a g l u t i n a c i n
( U H ) m g- 1
y l a d o s i s m n i m a c o m o l a c a n t i d a d m n i m a
d e p r o t e n a u n a g l u t i n a c i n
v i s i b l e .
L a a c t i v i d a d a g l u t i n a n t e s o b r e l e v a d
u r a s d e l g n e r o S a c c h a r o m y c e s y C a n d i d a s
e
r e a l i z a r s o b r e u n c u l t i v o d e 4 8 a 7 2 h o r
a s , l a s m i s m a s q u e s e r n t r a n s f e r i d a s
c o n u n h i s o p o a t u b o s c o n t e n i e n d o 2 m L S
S F E y a j u s t a d a s e n u n
e s p e c t r o f o t m e t ro S p e c t r o n i c 2 0 a 5 3 5 n
m c o n e l e q u i v a l e n t e a l e s t n d a r 3 4 d e
M c F a r l a n d . U n a p o rc i n 1 0 0 L d e l a s u s p e n
s i n d e l e v a d u r a s s e r a g r e g a d a a
l o s h o y o s o t u b o s c o n t e n i e n d o d i f e r e n
t e s c o n c e n t r a c i o n e s d e l e c t i n a s .
L a l e c t u r a v i s u a l o m i c r o s c p i c a d e a g l
u t i n a c i n s e r e a l i z a r d e s p u s d e l o s 3 0
m i n u t o s h a s t a la s 2 h o r a s .
-
1 6
6 . 1 . 6 . D e t e r m i n a c i n d e p r o t e n a s 2 5
L a c o n c e n t r a c i n d e p r o t e n a s s e h a r u t il
i z a n d o e l M t o d o d e B i u r e t . u s a n d o e l
s u e r o d e a l b m i n a b o v i n o ( B S A ) c o m o p a tr
n .
7 . - R E F E R E N C I A S B I B L I O G R A F I C A S
1 . - O h b a , H . ; S . M o r i w a k i ; R . B a k a l o v a
; S . Y a s u d a ; N . Y a m a s a k i . 2 0 0 4 . P l a n t - d e
r i v e d
a b r i n - a i n d u c e s a p o p t o s i s i n c u l t u r e
s l e u k e m i c c e l l l i n e s b y d i f f e r e n t
m e c h a n i s m . T o x i c o l . A p p l . P h a r m a c o l
. 1 9 5 ( 2 ) : 1 8 2 - 9 3 .
2 . - A u b , J C . ; C . T i e s i a u ; A . L a n k e s t e r
. 1 9 6 3 . R e a c t i o n s o f n o r m a l a n d t u m o r c e l
l
s u r f a c e s t o e n z y m e s . I . W h e a t g e r m l i p
a s e a n d a s s o c i a t e d
m u c o p o l y s a c c h a r i d e s . P r o c N a t i A c a d
S c i . U S A . 5 0 : 6 1 3 - 9 .
3 . - G o l d s t i e n , U . ; R S . H u g h e s ; M . M o n s
i g n y ; T . O s a w a ; N . S h a r o n . 1 9 8 0 . W h a t s h o
u i d
b e c a l l e d a l e c t i n ? . N a t u r e . 2 8 5 : 6 6 5 -
6 .
4 . - H e r n n d e z , D P . ; G O . M a r t n ; P V . R o d r
g u e z ; B F . G a n e m . 1 9 9 9 . A p l i c a c i o n e s d e l
a s
l e c t i n a s . R e v C u b a n a H e m a t o l I n m u n o l
H e m o t e r . 1 5 : 9 1 - 5 .
5 . - S h a r o n , N . y H . L i s . 1 9 7 2 . L e c t i n s c
e l l a g l u t i n a t i n g a n d s u g a r - s p e c i f i c p r
o t e i n s .
S c i e n c e . 1 7 7 : 9 4 9 - 5 8 .
6 . - P u s z t a i , A J . 1 9 9 1 . P l a n t l e c t i n s .
C a m b r i d g e : C a m b r i d g e U n i v e r s i t y P r e s s
.
7 . - B a v e j a , K . ; S . B a s a c k ; T K . T h u s o o .
1 9 9 5 . A s t u d y o f i m m u n e p r o f i l e i n h u m a
n
h y d a t i d d i s e a s e s . J . C o m m u n . D i s c . 2 7
( 2 ) : 6 1 - 6 .
8 . - B o y d , W C . y E . S l a p e i g h . 1 9 5 4 . A n t i
g e n i c r e l a t i o n s o f b l o o d g r o u p a n t i g e n a
s
s u g g e s t e d b y t e s t w i t h l e c t i n s . I m m u n
o l o g y . 7 3 : 2 2 6 .
9 . - P e m t h a n e r , A ; M . S t a n k i e w i c z ; S A .
B i s s e t ; W E . J o a s ; W . C a b a j ; H D . P i u l f o r d
.
1 9 9 5 . T h e i m m u n e r e s p o n s i v e n e s s o f R o
m e y s h e e p s e l e c t e d f o r r e s i s t e n c e o r
s u s c e p t i b i l i t y t o g a s t r o i n t e s t i n a l
n e m a t o d e s . L y m p h o c y t e b l a s t o g e n i c a c t
i v i t y ,
e o s i n o p h i l i a a n d t o t a l w h i t e b l o o d c e
l l c o u n t s . I n t . J . P a r a s i t o l . 2 5 ( 4 ) : 5 2 3
- 9 .
1 0 . - P e e l , S . y J C . B u l m e r . 1 9 9 6 . L e c t i
n s h y s t o c h e m i s t r y o f p r e g n a t r a t u t e r i n
e t i s s u e s . J
A n a t . : 1 8 8 ( P t I ) : 1 9 7 - 2 0 5 .
-
1 7
1 1 . - G u i l l o t , J . ; M . G u e r r y ; G . K o n s k a
; F . C a l d e e - C h e z e t ; M . D e L a t o u r ; F . P e n a
u l t -
L l o r c a . 2 0 0 4 . M o d i f i c a t i o n o f g l y c o c
o n j u g a t e s d u r i n g t h e c a r c i n o g e n e s i s : t
h e c a s e
o f m a m m a r y c a r c i n o m a s . B u l l C n c e r . 9 1
( 2 ) : 1 4 1 - 5 8 .
1 2 . - S h a r o n , N . y H . L i s . 2 0 0 4 . H i s t o r y
o f l e c t i n s : F r o m h e m a g g l u t i n i n s t o b i o l
o g i c a l
r e c o g n i t i o n m o l e c u l e s . G l y c o h i o l o g
y . 1 4 ( 1 1 ) : 5 3 R - 6 2 R .
1 3 . - G i r b s , T . y B . N i g r i n a . 2 0 0 4 . U n a p
r o t e n a i n a c t i v a d o r a d e r i b o s o m a s n o t x i
c a d e l
s a c o . U t i l i d a d f a r m a c u t i c a e n l a c o n s
t r u c c i n d e i n m u n o t o x i n a s . y c o n j u g a d o
s
p a r a l a t e r a p i a d e l c n c e r . A n . R . A c a d .
N a c . F a r m . 7 0 : 7 3 - 9 4 .
1 4 . - K a u r , M . ; K . S i n g ; P . J a i ; S . S i n g ;
A . K u m a r ; S h a r m a M e t a l . ; A . T u b e e r . 2 0 0 6
.
L e c t i n f r o m A r i s a e m a j a c q u e m o n t i i B l
u m e w i t h A n t i - i n c e s t a n d A n t i p r o l i f e r a
t i v e
P r o p e r t i e s . J o u m a l o f B i o c h e m i s t r y a
n d M o l e c u l a r B i o l o g y . 3 9 ( 4 ) : 4 3 2 - 4 4 0
.
1 5 . - S u n , P . y K . L i m . 2 0 0 6 . L y c o p r o t e i
n ( 9 0 k D a ) I s o l a t e d f r o m O p u n t i a f i c u s - i
n d i c a
v a r . s a b o t e n M A K I N O L o w e r s P l a s m a L i p
i d l e v e l t h r o u g h S c a v e n g i n g o f
I n t r a c e l l u l a r R a d i c a l s i n T r i t o n W R -
1 3 3 9 - I n d u c e d M i c e . B i o l . P h a r m . B u l l
.
2 9 ( 7 ) 1 3 9 1 - 1 3 9 6 .
1 6 . - A d e n i k e , K . ; O . B a b a b o l a . 2 0 0 3 . P
u r i f i c a t i o n a n d P a r t i a l C h a r a c t e r i z a t
i o n o f a
L e c t i n f r o m t h e F r e s h L e a v e s o f K a l a n c
h o e c r e n a t a ( A n d r . ) H a w . J o u m a l o f
B i o c h e m i s t r y a n d M o l e c u l a r B i o l o g y .
3 7 ( 2 ) : 2 2 9 - 2 3 3 .
1 7 . - K o b a t a A . A . 1 9 9 8 . R e t r o s p e c t i v e
a n d p r o s p e c t i v e v i e w o f g l y c o p a t h o l o g y
.
G l y c o c o n j u g a t e s J . 1 5 : 3 2 3 - 3 1 .
1 8 . - K a n n a g i , R ; M . I z a w a ; T . K o i k e ; K .
M i y a z a k i ; N . K i m u r a . 2 0 0 4 . C a r b o h y d r a t
e -
m e d i a t e d c e l l a d h e s i o n i n c n c e r m e t a s
t a s i s a n d a n g i o g e n e s i s . C a n c e r S c i .
9 5 ( 5 ) ; 3 3 7 , 8 4 .
1 9 . - G a b i u s , H J . y S . G a b i u s . 1 9 9 7 . G l y
c o s c i e n c e s : s t a t u s a n d p e r s p e c t i v e s . L
o n d o n :
C h a p m a n a n d H a l l .
2 0 . - F a n , X . ; Y M . S h e ; R D . B a g s h a w ; J W .
C a l l a h a m ; H . S c h a c h t e r ; D J . M a h u r a n . 2 0
0 4 .
A m e t h o d f o r p r o t e o m i c i d e n t i f i c a t i o
n o f m e m b r a n e - b o u n d p r o t e i n s c o n t a i n i n
g
A s n - l i n k e d o l i g o s a c c h a r i d e s . A n a l B
i o c h e m . 3 3 2 ( 1 ) : 1 7 8 - 8 6 .
-
1 8
2 1 . - D a b e l s t e e n , E . 1 9 9 6 . C e l l s u r f a c
e c a r b o h y d r a t e s a s p r o g n o s t i c m a r k e r s i
n h u m a n
c a r c i n o m a s . J . P a t h o l . 1 7 9 : 3 5 8 - 6 9
.
2 2 . - K i t a m u r a , N . ; S . G u o ; T . S a t o ; S . H
i r a i z u m i ; J . T a k a ; M . I k e k i t a ; S . S a w a d a
; H .
F u j i s a w a ; K . F u r u k a w a . 2 0 0 3 . P r o n o s t
i c s i g n i f i c a n c e o f r e d u c e d e x p r e s s i o n o
f
b e t a - N - a c e t i l g a l a c t o s a m i n y l a t e d N
- l i n k e d o l i g o s a c c h a r i d e s i n h u m a n b r e a
s t
c c n c e r . I n t J . C a n c e r . 1 0 5 ( 4 ) : 5 3 3 - 4 1
.
2 3 . - L e b r e c , H ; R . R o b e r ; C . B l o t ; G R . B
u r l e s u n ; B u h u o n ; M . P a l l a r d y . 1 9 9 5 .
I m m u n o t o x i c o l o g i c a l i n v e s t i g a t i o n
u s i n g p h a r m a c e u t i c a l d r u g s . I n v i t r o
e v a l u a t i o n o f i m m u n e e f f e c t s u s i n g r o
d e n t o r h u m a n i m m u n e c e l l s . T o x i c o l o g y
.
9 6 ( 2 ) : 1 4 7 - 5 6 .
2 4 . - M o r e i r a , R A . y J C . P e r r o n e . 1 9 7 7 .
P u r i f c a t i o n a n d P a r t i a l c h a r a c t e r i z a t
i o n o f a
L e c t i n f r o m P h a s e o l u s v u l g a r i s . P l a n
t P h y s i o l o g y . 5 9 : 7 8 3 - 7 8 7 .
2 5 . - B r a d f o r d , M . 1 9 7 6 . A r a p i d s e n s i t
i v e m e t h o d f o r q u a n t i t a t i o n o f m i c r o g r a
m
q u a n t i t i e s o f p r o t e i n u t i l i z i n g t h e p
r i n c i p i e o f p r o t e i n - d y e - b i n d i n g . A n a l
y t i c a l
B i o c h e m i s t r y . 7 2 : 2 4 8 - 2 5 4 .
2 6 . - L e a m m l i U K . C l e a v a g e o f s t r u c t u r
a l p r o t e i n s d u r i n g t h e a s s e m b l y o f
b a c t e r i o p h a g e T 4 . N a t u r e . 1 9 7 0 ; 2 2 7 :
6 8 0 - 6 8 5 .
-
1 9
M s . J u l i o C s a r A r e l l a n o B a r r a g n D r . S t
e b a n A l e j a n d r o I l i c h Z e r p a
D r . M a r c o L e o n c i o S a l a z a r C a s t i l l o M s
. I c e l a M a r i s s a R o d r g u e z H a r o
D r a . E d i t a A s u n c i n A r a u j o C a s t i l l o
-
2 0
C A R T A C O M P R O M I S O
T r u j i l l o , 1 5 d e d i c i e m b r e d e l 2 0 0 9
E l E q u i p o I n v e s t i g a d o r d e l P r o y e c t o :
L e c t i n a s d e P h a s e o l u s v u l g a r i s L . v a r u
a
u a y s u e s p e c i f i c i d a d h e m o a g l u t i n a n t
e f r e n t e a g r u p o s s a n g u n e o s A B O y
l e v a d u r a s . I n t e g r a d o p o r :
N A p e l l i d o s y N o m b r e s F a c u l t a d D p t o A c
a d m i c o C o n d i c i n C d i g o
1 . - A r e l l a n o B a r r a g n J u l i o C s a r C C . B B
. Q u m . B i o l. y F i s i o lo g a A . N o m b r a d o 9 4 1
2 . - I l i c h Z e r p a S t e b a n A le j a n d r o C C . B B
. Q u m . B io l . y F i s io l o g a A . N o m b r a d o 2 5 8
1
3 . - S a la z a r C a s t i l l o M a r c o L e o n c io C C .
B B . Q u m . B io l . y F i s io l o g a A . N o m b r a d o 3 1 4
2
4 . - R o d r g u e z H a r o I c e l a M a r i s s a C C . B B
. M i c r o b io l o g a y P a r a s i to l o g a N o m b r a d o 4
0 0 8
5 . - A r a u jo C a s t i l l o E d it a A s u n c i n C C . B
B . C i e n c i a s B io l g i c a s N o m b r a d o 0 1 9 8
S e C O M P R O M E T E N y p o r t a n t o A U T O R I Z A N e
l d e s c u e n t o d e s u R e m u n e r a c i n
M e n s u a l , p o r e l m o n t o p e r c i b i d o p o r i n
v e s t i g a c i n c o r r e s p o n d i e n t e a l a o 2 0 1 0 s
e g n
B o l e t a d e R e m u n e r a c i n , e n c a s o d e N o P r
e s e n t a r e n l a s f e c h a s o f i c i a l e s e l I n f o r
m e
F i n a l d e s u P r o y e c t o d e I n v e s t i g a c i n d
e l m i s m o a o , r e g i s t r a d o e n l a O f i c i n a G e n
e r a l
d e P r o m o c i n y D e s a r r o l l o d e l a I n v e s t i
g a c i n d e l a U n i v e r s i d a d N a c i o n a l d e T r u j
i l l o .
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F i r m a D N I
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F i r m a D N I
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F i r m a D N I
