Obtencion de Glicerol Dunnaniella

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  • 8/17/2019 Obtencion de Glicerol Dunnaniella

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    En el campo de la tecnología farmacéutica, el glicerol es un disolvente ampliamenteutilizado en virtud de sus propiedades físico-químicas en la formulación dediferentes formas farmacéuticas. Se investigaron las posibilidades de obtenciónde glicerol como un subproducto del proceso de extracción de ß-carotenos apartir de cultivos de Dunaliella salina , desarrollados bajo régimen autotróficoen el Centro de Investigaciones de Energía Solar. El flujo tecnológico propuestocomprende el tratamiento de la biomasa con hidróxido de calcio, la filtración delproducto resultante, la extracción del ß-carotenos con un solvente insoluble enagua y, por último, la separación del glicerol neutralizando convenientementedel filtrado con ácido. El rendimiento de glicerol fue del 4-5 %, valor susceptiblede ser incrementado mediante la inducción metabólica de los cultivos.

    Descriptores DeCS: GLICEROL/aislamiento y purificación; ALGAS VERDES.

    El glicerol es un polihidroxialcoholampliamente utilizado en las industriasQuímica, Farmacéutica y Cosmética envirtud de sus propiedades humectante,antisépticas, hidroscópicas y espesantes.Se trata de un líquido incoloro, viscoso ycasi inodoro, que posee una temperaturade ebullición de 290 °C y una temperatura

    de fusión de 17,9 °C. La fuerza de tensiónsuperficial es menor que la del agua, peromayor que la de muchos disolventesorgánicos; resulta soluble en agua y alcohole insoluble en éter y cloroformo. 1

    En el campo de la tecnología farma-céutica, el glicerol es un disolvente deextraordinario valor, capaz de formar

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    disoluciones concentradas y permanentes,imposibles de obtener con otros vehículos.Algunas de estas disoluciones se empleancomo medicamentos en su forma original,en tanto otras se usan para preparardiluciones acuosas o alcohólicas de bajasolubilidad en estos disolventes. Entre lasformas farmacéuticas que contienen glicerolen su composición se pueden citar: geles,lociones, supositorios y diferentes mezclas. 2

    El glicerol puede ser obtenido de lípidoscomplejos, por síntesis orgánicas, mediantela fermentación de los carbohidratos o apartir de derivados sintéticos resultantesde la refinación del petróleo. Tomando enconsideración el aumento del precio de lasmaterias primas utilizadas tradicionalmentepara su obtención, se impone la búsquedade nuevas y variadas fuentes.

    En este sentido, el perfil lipídico delas microalgas se caracteriza por lapresencia de cantidades apreciables delípidos neutros, principalmente glicéridos,que representan una fuente potencial degricerol, además de haberse informado laexistencia de glicerol libre en las celulas deun número considerable de especies. La

    microalga marina Du na li el la sa li na(Chloropyta, Chloropyceae) contienecantidades significativas de glicerol, quepueden incrementarse en respuesta a unaumento de la presión osmótica externa. 3

    Esta especie ha sido estudiada intensamenteen las últimas décadas como fuente decarotenos y glicerol y es oportuno señalarque los cultivos empleados para laobtención de β-caroteno pueden a la vez,constituir una fuente de glicerol. 4

    En el presente trabajo, los cultivos de Dunalie lla salina desarrollados bajo

    régimen autotrófico en el Centro de Inves-tigaciones de Energía Solar con el objetivofundamental de producir β -caroteno(provitamina A), se investigan como unaposible fuente de glicerol en calidad de

    subproducto de la corriente tecnológicaprincipal.

    La biomasa resultante del cultivo de Dunalie lla salina , desarrollado a cieloabierto en una instalación experimental de12 m 2, fue tratada con hidróxido de calcio(0,3 g de Ca (OH) 2 /g de biomasa) enatmósfera de nitrógeno y una temperaturade 100 °C durante 2 h, en condiciones deagitación. Después de enfriar a 50 °C, lamezcla resultante fue filtrada por succióncon la adición de una pequeña cantidad deagua, de donde se obtuvo un productoclaro verde-amarillento. Se procedió a laextracción del β-caroteno con un disol-vente insoluble en agua y acto seguidose neutralizó el filtrado hasta un pH de6-7, con ácido sulfúrico al 50 %.

    La disolución obtenida después defiltrado el CaSO 4 precipitado se evaporó alvacío hasta lograr una sustancia viscosaamarillenta, que fue agitada durante variashoras con 3 mL de insopropanol. Se filtró la

    sal no disuelta, se evaporó el filtrado y serepitió este procedimiento con 2 mL deisopropanol.

    Esta técnica de extracción se empleópara 5 réplicas. Como un criterio preliminarde la pureza del producto obtenido sedeterminó el punto de fusión del tribenzoatode glicerilo, sintetizado por benzoilación delglicerol en presencia de piridina. 5

    El flujo tecnológico propuesto para laobtención de glicerol mediante el uso de lamicroalga Dunaliella salina como materiaprima, rindió como promedio 0,23 g deproducto bruto a partir de muestras de 5 g

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    de biomasa, el cual presentó un coloramarillo pálido. El rendimiento alcanzado,

    en todos los casos, resultó ser del 4 al 5 %(g/100 g de biomasa, base húmeda).

    El punto de fusión del tribenzoato deglicerilo, derivado sintetizado para ladeterminación de esta constante física comocriterio de pureza, fue de 68 ± 1 °C,ligeramente inferior al informado en laliteratura (72 °C).

    Desde hace mucho tiempo se conoce

    que ciertas especies de microalgasencontradas en los ecosistemas marinos,como Dun al ie ll a sa li na , acumulanintracelularmente cantidades significativasde ß-caroteno y glicerol. Sin embargo, laseparación de estos metabolitos puedeimplicar una serie de dificultades, por loque se impone desarrollar procedimien-tos que permitan extraer de forma sencilla

    β-caroteno y glicerol a partir de las algas,con rendimientos satisfactorios y la mayorpureza posible. 6

    El método propuesto en el presentetrabajo es relativamente sencillo, susceptiblede ser escalado, no precisa de reactivos niequipamientos especiales y garantizó unrendimiento del 4 al 5 %; valores que puedenser incluso incrementados con la inducciónmetabólica de los cultivos.

    El punto de fusión se encuentramoderadamente deprimido en relacióncon el referido en la literatura para elderivado sintetizado en cuestión, 5 lo cualindica que el gricerol obtenido presentaimpurezas propias de la biomasa algalcomo componentes minoritarios, no eli-minadas con la técnica diseñada.

    Estos resultados sugieren continuartrabajando en fusión de la purificación delglicerol, con el propósito de lograr que seaaplicado en la formulación de diferentesformas farmacéuticas.

    Due to its physical and chemical properties, Glycerol is widely used as adissolvent in the formulation of different pharmaceutical forms in the field of pharmaceutical technology. The possibilities of obtaining glycerol as a by-product of the process of extraction of β-carotenes from cultures of Dunaliellasalina , developed under autotrophic regime at the Solar Energy ResearchCenter, were investigated. The proposed technological flow comprises thetreatment of biomass with calcium hydroxide, the filtration of the final product,the extraction of β -carotenes with a solvent insoluble in water and, finally, theseparation of Glycerol, conveniently neutralizing the filtration with acid. Theyield of glycerol was of 4-5 %, a value that may be increased by the metabolicinduction of the cultures.

    Subject headings: GLYCEROL/isolation and purification; ALGAE, GREEN.

    1 . Morrison RT, Boyd RN. Química orgánica. 3 ed. La Habana: Editorial Científico-Técnica; 1987:1294.

    (Edición Revolucionaria).2 . Naira JG. Solutions, emulsions, suspensions and extractives. En: Remingtoń s pharmaceutical sciences.

    La Habana: Editorial Científico-Técnica; 1991:1492-1517. (Edición Revolucionaria).

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    3. Ahmed AM, Lidan MA. Glycerol production by Dunaliella bioculata. J Basic Microbiol 1987;27:419-23.

    4. Ben-Amotz A, Katz A, Avron M. Accumulation of beta-carotene in halotolerant algae: purificationand characterization of beta-carotene rich globules from Dunaliella bardawill (Chlorophyceae). JPhycol 1982;18:529-37.

    5 . McElvain SM. La caracterización de los compuestos orgánicos. La Habana: Instituto Cubano del Libro;1970:295.

    6 . Ben-Amotz A, Avron M. Glycerol and beta-carotene metabolism in the halotolerant alga Dunaliella;Biores. Technol. 1991;38:233-5.

    Recibido:15 de noviembre de 1999. Aprobado: 17 de diciembre de 1999.Lic. Lisetly Hernández Nazario. Edificio 3, Bloque 3, apto 8, Reparto Rajayoga, Santiago de Cuba, Cuba.