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8/16/2019 Métodos Analíticos Para La Determinacigón de
Carbohidratos
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Métodos analíticos para la determinación de Biomolec
Bioquímica
Francisco Javier Mares Carbajal
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Introducción Son métodos instrumentales que se usan equímica
analítica, los cuales se basan en l
interacción de la radiación electromagnétic
en otras partículas, con un analito paraidenti car o determinar
su concentraciónSe pueden emplear para la elucidación de
estructuras!
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"écnicasInstrumental
es
#$ %visible
I&cercano
'olarimet
ria
(')CM*)+I "-F
&M.
Masas
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/spectrometría #v visibleImplica la espectroscopia de 0otones en
la región de radi
ultravioleta visible! #tili1a la lu1 en los rangos visible
2ad2acentes 3el ultravioleta 3#$4 cercano 2 el in0rarrojo
3cercano!/n esta región del espectro electromagnético, las
moléculse someten a transiciones electrónicas!
/s complementaria de la espectrometría de 5uorescencia,que trata
con transiciones desde el estado e6citado al estabasal!
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/spectro0otómetro #v $isib
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/spectroscopia in0rarrojaSe estudia la parte del in0rarrojo del
espectro
electromagnético!Cubre un conjunto técnicas, siendo la mas com8n
u0orma de espectroscopia de absorción!Se dividen seg8n el tipo de
radiación9
• In0rarrojo cercano• In0rarrojo medio• In0rarrojo lejano
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Instrumentación
Fuente de radiació3l7mpara4Selector de longituonda 3
ltros,Monocromadores4:rea de muestra 3c+etector!'rocesador de
se;al
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'olarimetría /s una técnica que se basa en la medic
de la rotación óptica producida sobre ude lu1 polari1ada al
pasar por una sustópticamente activa! )a actividad ópti
rotatoria de una sustancia, tiene su ori
en la asimetría estructural de las moléc
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'olarímetro
Instrumentación9Fuente de radiaciónmonocromatica!'risma!
"ubo para muestra!'risma anali1ador!+etector!
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&esonancia magnética nucl/s un 0enómeno 0ísico basado en las
propiedad
mec7nico cu7nticas de los n8cleos atómico)os n8cleos m7s
com8nmente empleados en &Mel protio 3=(, >(4, el =>C 2 el
=?., aunque los isóton8cleos de muc.a, Si, >=', >?Cl,
==>Cd, = ?'t4 son también utili
)os tipos de &M. mas empleados son9 de solidolíquidos
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*plicaciones)a &M. se utili1a también en elcampo de la
investigación de
ordenadores cu7nticos!Sus aplicaciones m7s
0recuentes est7n ligadas alcampo de la medicina, labioquímica 2
la química
org7nica, química inorg7nica 2química analítica!
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/quipos de &M
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/spectrometría de masas/s una técnica que permite anali1ar c
gran precisión la composición dedi0erentes elementos químicos
eisótopos atómicos, separando los
n8cleos atómicos en 0unción de srelación carga masa 31Dm4!
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*plicaciones+etectar e identi car el uso de 07rmacos de abusos
en aMonitorear los gases de la respiración en pacientes
duracirugía!+eterminar la composición de materiales provenientes
de6terior!+eterminar adulteración en la mie de abeja!)ocali1ar
depósitos petroleros!Monitorear 0ermentaciones en línea!+etectar
contaminante org7nicos en aire, agua, suelo 2alimentos!
+eterminar algunos tipos de envenenamiento!
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Componentes Sistema de bombeo
Sistema de entradaFuente de ionesEptica iónica*nali1ador
m7sico+etector)ínea de trans0erencia 3C %/M4
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*plicacionesF7rmacos9 *ntibióticos, sedantes esteroides,
analgésicosBioquímica9 *mino7cidos, proteínas, carbo
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Condiciones de operaciónde (')C
$elocidad de 0ase móvil9 @!? am)Dmin en elución isocr7tica
'resión =>@@ psi "emperatura de @ a ? KC
$olumen de in2ección de muestra L)
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&esultados Fructosa
Maltosamaltotr
a
lucosa
M*)+I % " F
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M*)+I % "-F+esorciónDioni1ación l7ser asistpor matri1
/s una técnica de ioni1ación suave utili1ada enespectrometría de
masas!
permite el an7lisis de biomoléculas 3biopolímecomo las
proteínas, los péptidos, los a18cares 2 lípidos4 2 moléculas
org7nicas grandes 3comopolímeros, los dendrímeros 2 otras
macromolécu
que tienden a
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Bibliogra0ía!u
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Gracias por su atención
