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8/18/2019 MacLeod y Mccarty Completa
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8/18/2019 MacLeod y Mccarty Completa
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La $#a%&'o#ma!i(% e% Pneumococcusde lo& e)emplo& ma& a&om*#o&o&
al$e#a!io%e& +e#eda*le& e% la e&$#"!
!el"la# ,"e p"ede &e# #ep#od"!ido e i%e-pe#ime%$alme%$e
./012 3#i4$+5 T#a%&'o#
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•
A%ali8a# de$alladame%$e el 'e%(mla $#a%&'o#ma!i(% de $ipo& e&pe!9P%e"mo!o!!"&:
• T#a%&'o#ma# "%a 7a#ia%$e %o e%!aR $ipo II e% "%a 7a#ia%$e $ipo III ;S<
• Aislar el principio activo a paextractos de bacterias e idensu naturaleza química.
O*)e$i7o&
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La $#a%&'o#ma!i(% de lo& $ipo& de %e"mo!o!o i%27i$#o #!ie#$a& !o%di!io%e& de !"l$i7o ,"e &ea% !"mplida& a%$e&mo&$#a# la #ea!!i(% i%!l"&o e% la p#e&e%!ia de "% po$e%$e
Caldo nutritivo. Caldo i%'"&i(% !e#e*#o *o*i%o !o.= de %eo pep$o%a &i% !o%$e%e# de-$#o&a > a)"&$adi%i!ial de @:2@:1
En anti R neumococo de !o%e)o '"e "&ado deo*&e#7a!i(% de la #e7e#&i(% de "% %e"mo!o!o R del +p"ede &e# i%d"!ido po# el !#e!imie%$o ,"e !o%$ie%e a%
Extracto R (R3A! la &epa %o e%!ap&"lada R "$ili8p#e&e%$e e&$"dio &e de#i7a de "% !"l$i7o S del %e"mo!
E-pe#ime%$o
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"todo de titulaci$n de la activida
trans%ormaci$nE&$e#ili8a!i(% del e-$#a!$o !el"la
P%e"mo!o!!"& $ipo IIIP#e!ipi$ado &e #edi&"el7e e% &ol"!i(% &ali%
Ag#egado de &"e#o p#e7iame%$e !ale%$adCE-$#a!$o e&$e#ili8ado e& dil"ido &e#iadam
&e lo ag#ega al !aldoI%!"*a!i(% a @ C d"#a%$e .1 0 +o#a&
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P#opiedade& a%$i2R p#e&e%$e& e% el &"e#o
,"e la& R agl"$i%e% > 'o#me% g#"m&edime%$a% e% el 'o%do del $"*o de)&o*#e%ada%$e $#a&l"!ido:
C"a%do o!"##e la $#a%&'o#ma!i(%G la& S !ap%o &o% a'e!$ada& po# lo& a%$i!"e#po& a%$i2,"e %o agl"$i%a% > !#e!e% di'"&ame%$e e%medio:
La i%&pe!!i(% 7i&"al pe#mi$e e%$o%!e& de$&i o!"##i( o %o $#a%&'o#ma!i(%
Ig"alme%$e &e #eali8a% !"l$i7o& e% pla!a !
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"&')* +RE+ARA',-* (!
. "aterial• Cepa ori/inal:+neumococcos 'ipo ,,,(A!
• C"l$i7o& e% lo$e& de H2@Hli$#o&
• Ce%$#i'"ga!i(% e% '#o ;e7i$a#a"$oli&i&<• Cl"la& #e&"&pe%dida& >
!ale%$ada& a H C i%a!$i7a!i(% de e%8imai%$#a!el"la# ,"e de&$#">e alJp#i%!ipio $#a%&po#$ado#K:
0.Extracci$n de las c
muertas
• E-$#a!!i(% !o% &o&ali%a de&o-i!o&(di!o :H=
• P#e!ipi$a!i(% !o% e$li!o a*&ol"$o:
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+RE+ARA',-* (0!3.)esproteinizaci$n 1
remoci$n delpolisac2rido capsular
• De&p#o$ei%i8a!i(%!o% !lo#o'o#mo:
• Dige&$i(% !o%e%8ima
.4raccionamientodel material conEtanol
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A567,*,* )E7 "A'ER,A7+8R,4,CA) (!Características generales:• Sol"!io%e& &ali%a& de :H a .: mgmL &o%
i%!olo#a&: So% 7i&!o&a& > $"#*ia& ;a l"8 $#a%&mi$ida
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A567,*,* )E7 "A'ER,A7+8R,4,CA) (0!Pruebas químicas:
+rueba 9rupo %uncionala detectar
RE*87'A)*
Bi"#e$ > Millio% P#o$e%a& Nega$i7o&
Rea!!i(% de ladi'e%ilami%a deDi&!+e
P#e&e%!ia de !idode&o-i##i*o%"!lei!o
Po&i$i7a
Bial !ido #i*o%"!lei!o Po&i$i7o d*il
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Análisis Químico Elemental
- Ni$#(ge%o ;N
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Análisis Enzimático
+8R,4,CA) (! T#ip&i%a
Q"imo$#ip&i%a
Ri*o%"!lea&a
Fo&'a$a&a&Ge&$e#ea&a&
De&o-i#i*o%"!lea&a
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3#ee%&$ei% > e%#e$$e demo&$#a#o% ,"e lo&
de $e)ido i%!l">e%do la le!+e > el &"e#o e&pe!ie& de mam'e#o& !o%$ie%e% "% &i&e%8ima& ,"e &o% la& !a"&a%$e& de&polime#i8a!i(% del A!ido De&o!i##i*o%"
Apli!a%do el m$odo de 3#ee%&$ei% pa#a !de la a!$i7idad de la &"&$a%!ia de $#a%&'!o% "%a $empe#a$"#a de i%!"*a!i(% de&"e#o '#e&!o de pe##o > !o%e)o
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' ; <Ct 3=
min
+atr$n
' = <Ct 3=
min
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TABLA III: Inactivación diferencial por calor de las
enzimas en el suero de perro y de conejo que
destruyen la substancia de transformación
A partir de los datos
presentados en la Tabla III, es
evidente que el suero que seutilizó como patrón de perro y
de conejo son capaces de
destruir completamente la
actividad de transformación.
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A%li&i&
Se#ol(gi!o:
E% el !"#&o de la p"#i9!a!i(% del p#i%!ipio a!&e e%!o%$#( ,"e &" a!$i7idad &e#ol(gi!a
a%$i&"e#o $ipo III '"e di&mi%">e%doG &i%!o##e&po%die%$e pe#dida de la a!$i7$#a%&'o#ma%$e
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E&$"dio& Fi&i!o,"mi!o&
A%li&i& po# "l$#a!e%$#i'"ga!i(%5 +omog%ea
Ele!$#o'o#e&i&5 !ompo%e%$e %i!o de g#a%
!ompa#a*le !o% el de "% a!ido %"!lei!o C"#7a& de a*&o#!i(% UV5 m-imo& !e#!a%%mG !a#a!$e#&$i!o& de lo& !ido& %"!lei!o&
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C"a%$i9!a!i(% de la a!$i7idad*iol(gi!a
Ti$"la!i(% a pa#$i# de "%a p#epa#a!i(% ,&ido p"#i9!ada a *a)a& $empe#a$"#a& M%ima !a%$idad %e!e&a#ia de ma$e#ial a!
i%d"!i# la $#a%&'o#ma!i(% :g
DISCUSIÓN
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DISCUSIÓN• El Fa!$o# de T#a%&'o#ma!i(% e& "%a &"&$a%!ia de
%a$"#ale8a ,"mi!a ,"e &e de&!o%o!ia pe#o &i &e
,"e e#a $#a%&'e#ida de&de lo& %e"mo!o!o& S m"elo& %e"mo!o!o& R 7i7o&: E&$e 'a!$o# de $#a%&'o#m!o%7i&$io a lo& %e"mo!o!o& R e% %e"mo!o!o& S !!ap&"la de poli&a!#ido& ,"e le& +a!e le$ale&:
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• E& &o#p#e%de%$e el +e!+o de ,"e la& &"&$a%!ia& ,
p#o7o!a la #ea!!i(% > la &"&$a%!ia !ap&"la# p#od"#e&p"e&$a a la mi&maG &ea% ,"mi!ame%$e di&$i%$> Poli&a!#ido:
• Lo& e7e%$o& *io,"mi!o& &"*>a!e%$e& al 'e%(me%
&"gie#e% ,"e el p#i%!ipio $#a%&'o#ma# i%$e#a!$a !!l"la RG da%do l"ga# a "%a &e#ie de #ea!!io%e&e%8im$i!a& ,"e !"lmi%a% e% la &%$e&i& de la !ap$ipo III: E&$a& %"e7a& !a#a!$e#&$i!a& &o% $#a%&mi$de&!e%de%!ia:
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CONCLUSIONES DEL 3RUPO
• La e7ide%!ia p#e&e%$ada &opo#$a la !#ee%!ia a!ido %"!lei!o del $ipo de&o-i##i*o&a e& l'"%dame%$al del p#i%!ipio de $#a%&'o#map%eomo!o!!"& $ipo III
• A7e#>G Ma!Leod > M!Ca#$> demo&$#a#o% la %,"mi!a del ADNG > ,"e e#a el #e&po%&a*le de ll
la i%'o#ma!i(% ge%$i!a ,"e p#e!i&a% lo& &e#e& 7• Q"e lo& #e&"l$ado& del e-pe#ime%$o demo&$#a#i%'o#ma!i(% ge%$i!a e& !apa8 de p%eomo!o!!"& $ipo R e% $ipo SG *a)o !o!o%$#olada&: