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Acta Scientiae Veterinariae, 2012. 40(4): 1085. CASE REPORT Pub. 1085 ISSN 1679-9216 (Online) 1 Received: May 2012 www.ufrgs.br/actavet Accepted: July 2012 1 Setor de Patologia Veterinária (SPV) Departamento de Patologia Clínica Veterinária, Faculdade de Veterinária (FaVet), Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), Porto Alegre, RS, Brazil. 2 Setor de Medicina Veterinária Preventiva, FaVet-UFRGS, Porto Alegre, RS, Brazil. CORRESPONDENCE: D. Driemeier [[email protected] - Tel.: +55 (51) 3308-6107]. Faculdade de Veterinária - UFRGS, Av. Bento Gonçalves n. 9090, Bairro Agronomia. CEP 91540-000 Porto Alegre, RS, Brazil. Linfadenite caseosa como causa de paralisia de membros pélvicos em ovinos no Estado do Rio Grande do Sul Caseous Lymphadenitis as a Cause of Hind Limb Paralysis in Sheep in Rio Grande do Sul State Suyene Oltramari de Souza 1 , Luiza Aita de Lemos 1 , Angelica Terezinha Barth Wouters 1 , Flademir Wouters 1 , Fabiana Marques Boabaid 1 , Renata Assis Casagrande 1 , Tatiane Terumi Negrão Watanabe 1 , Priscila Guerra 2 & David Driemeier 1 ABSTRACT Background: Caseous lymphadenitis (CL), an infectious disease of sheep and goats caused by Corynebacterium pseudotuberculosis, is characterized by pyogranulomas, white to greenish-yellow contents with aspect of rennet-coagulated cheese, and concentric laminations. Transmission occurs through direct contact with animals showing superficial lesions, via iatrogenic, or by respiratory route from aerosols. This paper reports the association of pyogranulomatous spondylitis with caseous lymphadenitis in two sheep, in Rio Grande do Sul State, southern Brazil. Cases: Two male sheep, 7- and 6-months-old, Texel (lamb 1) and mixed Texel (lamb 2), respectively, were submitted to necropsy. Affected sheep were reared under semi-intensive system in the same group, and had not been tail-docked. Both lambs showed weakness, diarrhea and paralysis of hind limbs. At necropsy, sheep had good body conditions, pale mucous membranes and large numbers of Haemonchus sp. worms within the abomasum. Lamb 1 showed serous fat atrophy and two abscesse-like lesions, one measuring 3.0 cm in diameter in the left apical lung lobe and other affecting the last lumbar vertebrae body. In lamb 2 there were three lesions like abscesses, a thoracic lesion involving the 13th vertebrae and the 1st lumbar vertebrae, a 3.0 cm in diameter lesion in the left axillary region, and a 1.5 cm lung lesion in the left apical lobe, apart of a calcified nodule with 0.5 cm in diameter in the diaphragmatic lobe. Histologically, these lesions were charac- terized by areas of caseous necrosis with foci of mineralization associated with peripheral inflammatory infiltrate rich in neutrophils surrounded by macrophages, epithelioid cells and occasional multinucleated giant cells and plasma cells and peripheral abundant fibrous connective tissue proliferation. In the vertebral bodies these lesions were partly surrounded by fibrous connective tissue, and in lamb 1 reached the dura mater, while in lamb 2, it extends to the spinal cord with pyogranulomatous myelitis, characterized by foci containing large amounts of neutrophils, surrounded by macrophages and epithelioid cells. There was thickening of blood vessel walls, with macrophages within or around them. Spinal cord injury affects both gray and white matter, with peripheral axonal spheroids. Corynebacterium pseudotuberculosis grew in pure culture upon microbiological tests from samples of lung and vertebral lesions from both cases. Discussion: This paper describes, originally, caseous lymphadenitis as a cause of hind limb paralysis in sheep in Rio Grande do Sul State, Brazil. The association of the macroscopic and histological findings with the isolation of C. pseudotuberculosis allowed us to relate pyogranulomatous spondylitis with caseous lymphadenitis. The spondylitis and spinal cord compres- sion and/or myelitis may explain the hind limb paralysis. The spread of the pathogen was probably hematogenous to the lungs and the other parts of the body. The hematogenous osteomyelitis caused by bacterial infection affects often young animals in the area of vascularization of the growth plate and epiphyseal articular complex. The blood vessels of these sites allow the bacterial installation due to slow flow and the blood turbulence in the larger descending vascular branches, but also due to lowed phagocytic capacity and discontinuity between endothelial cells. These factors, in addition to the anti- phagocytic action of Corynebacterium pseudotuberculosis in endothelial cells may explain the location at spinal lesions of caseous lymphadenitis in these sheep. Keywords: infectious disease, caseous lymphadenitis, spondylitis, Corynebacterium pseudotuberculosis, paralysis, sheep. Descritores: doença infectocontagiosa, linfadenite caseosa, espondilite, Corynebacterium pseudotuberculosis, paralisia, ovinos.

Linfadenite caseosa como causa de paralisia de membros ... 1085.pdf · por observação macroscópica das colônias, morfologia microscópica e testes bioquímicos. Os ovinos, os

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Acta Scientiae Veterinariae, 2012. 40(4): 1085.

CASE REPORT Pub. 1085

ISSN 1679-9216 (Online)

1

Received: May 2012 www.ufrgs.br/actavet Accepted: July 2012

1Setor de Patologia Veterinária (SPV) Departamento de Patologia Clínica Veterinária, Faculdade de Veterinária (FaVet), Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS), Porto Alegre, RS, Brazil. 2Setor de Medicina Veterinária Preventiva, FaVet-UFRGS, Porto Alegre, RS, Brazil. CORRESPONDENCE: D. Driemeier [[email protected] - Tel.: +55 (51) 3308-6107]. Faculdade de Veterinária - UFRGS, Av. Bento Gonçalves n. 9090, Bairro Agronomia. CEP 91540-000 Porto Alegre, RS, Brazil.

Linfadenite caseosa como causa de paralisia de membros pélvicos em ovinos

no Estado do Rio Grande do Sul

Caseous Lymphadenitis as a Cause of Hind Limb Paralysis in Sheep in Rio Grande do Sul State

Suyene Oltramari de Souza1, Luiza Aita de Lemos1, Angelica Terezinha Barth Wouters1, Flademir Wouters1,

Fabiana Marques Boabaid1, Renata Assis Casagrande1, Tatiane Terumi Negrão Watanabe1,

Priscila Guerra2 & David Driemeier1

ABSTRACT

Background: Caseous lymphadenitis (CL), an infectious disease of sheep and goats caused by Corynebacterium pseudotuberculosis, is characterized by pyogranulomas, white to greenish-yellow contents with aspect of rennet-coagulated cheese, and concentric laminations. Transmission occurs through direct contact with animals showing superfi cial lesions, via iatrogenic, or by respiratory route from aerosols. This paper reports the association of pyogranulomatous spondylitis with caseous lymphadenitis in two sheep, in Rio Grande do Sul State, southern Brazil.Cases: Two male sheep, 7- and 6-months-old, Texel (lamb 1) and mixed Texel (lamb 2), respectively, were submitted to necropsy. Affected sheep were reared under semi-intensive system in the same group, and had not been tail-docked. Both lambs showed weakness, diarrhea and paralysis of hind limbs. At necropsy, sheep had good body conditions, pale mucous membranes and large numbers of Haemonchus sp. worms within the abomasum. Lamb 1 showed serous fat atrophy and two abscesse-like lesions, one measuring 3.0 cm in diameter in the left apical lung lobe and other affecting the last lumbar vertebrae body. In lamb 2 there were three lesions like abscesses, a thoracic lesion involving the 13th vertebrae and the 1st lumbar vertebrae, a 3.0 cm in diameter lesion in the left axillary region, and a 1.5 cm lung lesion in the left apical lobe, apart of a calcifi ed nodule with 0.5 cm in diameter in the diaphragmatic lobe. Histologically, these lesions were charac-terized by areas of caseous necrosis with foci of mineralization associated with peripheral infl ammatory infi ltrate rich in neutrophils surrounded by macrophages, epithelioid cells and occasional multinucleated giant cells and plasma cells and peripheral abundant fi brous connective tissue proliferation. In the vertebral bodies these lesions were partly surrounded by fi brous connective tissue, and in lamb 1 reached the dura mater, while in lamb 2, it extends to the spinal cord with pyogranulomatous myelitis, characterized by foci containing large amounts of neutrophils, surrounded by macrophages and epithelioid cells. There was thickening of blood vessel walls, with macrophages within or around them. Spinal cord injury affects both gray and white matter, with peripheral axonal spheroids. Corynebacterium pseudotuberculosis grew in pure culture upon microbiological tests from samples of lung and vertebral lesions from both cases.Discussion: This paper describes, originally, caseous lymphadenitis as a cause of hind limb paralysis in sheep in Rio Grande do Sul State, Brazil. The association of the macroscopic and histological fi ndings with the isolation of C. pseudotuberculosis allowed us to relate pyogranulomatous spondylitis with caseous lymphadenitis. The spondylitis and spinal cord compres-sion and/or myelitis may explain the hind limb paralysis. The spread of the pathogen was probably hematogenous to the lungs and the other parts of the body. The hematogenous osteomyelitis caused by bacterial infection affects often young animals in the area of vascularization of the growth plate and epiphyseal articular complex. The blood vessels of these sites allow the bacterial installation due to slow fl ow and the blood turbulence in the larger descending vascular branches, but also due to lowed phagocytic capacity and discontinuity between endothelial cells. These factors, in addition to the anti-phagocytic action of Corynebacterium pseudotuberculosis in endothelial cells may explain the location at spinal lesions of caseous lymphadenitis in these sheep.

Keywords: infectious disease, caseous lymphadenitis, spondylitis, Corynebacterium pseudotuberculosis, paralysis, sheep.Descritores: doença infectocontagiosa, linfadenite caseosa, espondilite, Corynebacterium pseudotuberculosis, paralisia, ovinos.

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S.O. Souza, L.A. Lemos, A.T. Wouters, et al. 2012. Linfadenite caseosa como causa de paralisia de membros pélvicos em ovinos

no Estado do Rio Grande do Sul. Acta Scientiae Veterinariae. 40(4): 1085.

INTRODUÇÃO

A linfadenite caseosa (LC) é uma doença infectocontagiosa de ovinos e caprinos causada por Corynebacterium pseudotuberculosis e caracterizada pela formação de piogranuloma(s) com conteúdo brancacento a amareloesverdeado, de consistência tipo queijo coalho e que pode exibir laminações con-cêntricas. A LC pode ter duas apresentações: uma que envolve linfonodos superfi ciais e tecido subcutâneo e outra que atinge linfonodos internos e outros órgãos [2]. Em ovinos, a localização interna é frequentemente observada em pulmões e linfonodos mediastínicos. As lesões também podem ser encontradas em fígado, rins, úbere e, raramente, em coração, testículos, útero, articulações, encéfalo e medula espinhal [5].

A transmissão do agente no rebanho ocorre pelo contato direto com animais que apresentem lesões superfi ciais ou, indiretamente, de forma iatrogênica e também pela via respiratória, a partir de aerossóis [3]. Uma vez no rebanho, a erradicação da LC é compli-cada, provavelmente, pela presença de animais com doença subclínica, pela habilidade do agente sobreviver no ambiente por períodos prolongados e por terapia antimicrobiana refratária [1,7].

Esse trabalho relata a ocorrência de espondilite abscedativa associada com linfadenite caseosa em ovinos no Rio Grande do Sul.

RELATO DOS CASOS

Em março de 2011, foram necropsiados dois ovinos machos, um Texel com 7 meses (ovino 1) e outro, cruza Texel com 6 meses (ovino 2), no Setor de Patolo-gia Veterinária (SPV) da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Dados referentes ao histórico e a sinais clínicos foram obtidos em visita à propriedade, situada em Eldorado do Sul, RS. Realizou-se a eutanásia dos animais in extremis. Na necropsia, foram colhidas amostras de tecidos e órgãos, fi xadas em formol a 10% e processadas para exame histológico. Conteúdos de abscessos pulmonares e vertebrais (ovinos 1 e 2) e axilar (ovino 2) foram colhidos e encaminhados ao Setor de Medicina Veterinária Preventiva da UFRGS para cultivo microbiológico. Realizou-se a identifi cação bacteriana por observação macroscópica das colônias, morfologia microscópica e testes bioquímicos.

Os ovinos, os quais eram manejados no mesmo lote em sistema semi-intensivo e não haviam sido submetidos à amputação de cauda, apresenta-ram debilidade, diarreia e paralisia dos membros pélvicos (Figura 1). O ovino 2 foi encaminhado ao SPV-UFRGS, 20 dias após a necropsia do ovino 1. Na necropsia foram observados estado corporal regular, mucosas pálidas e abomaso com quantidade signifi cativa de Haemonchus sp. No ovino 1 havia atrofi a serosa da gordura, duas lesões arredondadas caracterizadas por exsudato brancoamarelado friável lembrando abscesso, uma com aproximadamente 3,0 cm de diâmetro no lobo pulmonar apical esquerdo e outra afetando o corpo da última vértebra lombar (Figura 2). No ovino 2, foram observadas lesões se-melhantes a abscesso, uma abrangendo a 13ª vértebra torácica e a 1ª vértebra lombar, outra (com aspecto caseoso ao corte) de cerca de 3,0 cm de diâmetro na região axilar esquerda e um nódulo pulmonar com 1,5 cm de diâmetro no lobo apical esquerdo, além de um nódulo calcifi cado com 0,5 cm de diâmetro em lobo diafragmático.

Ao exame histológico essas lesões eram caracterizadas por áreas de necrose caseosa com focos de mineralização associadas a infiltrado infla-matório periférico rico em neutrófilos, cercados por macrófagos, células epitelióides e ocasionais célu-las gigantes multinucleadas e plasmócitos, circun-dados por abundante tecido conjuntivo fibroso. Nos corpos vertebrais essas lesões eram parcialmente envoltas por tecido conjuntivo fibroso (Figura 3) e, no ovino 1, atingiam a dura-máter, enquanto que, no ovino 2, se estendiam à medula espinhal, com mielite piogranulomatosa, caracterizada por focos contendo grande quantidade de neutrófilos, macrófagos e células epitelióides periféricas, es-pessamento de paredes de vasos sanguíneos, alguns deles com macrófagos na luz e/ou em torno deles. A lesão medular atingia tanto a substância cinzenta quanto a branca, com esferoides axonais nas áreas periféricas (Figura 4).

Nos exames microbiológicos foi isolado Corynebacterium pseudotuberculosis em cultura pura das amostras das lesões pulmonares e vertebrais de ambos os casos.

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no Estado do Rio Grande do Sul. Acta Scientiae Veterinariae. 40(4): 1085.

Figura 1. Ovino 2 em posição anômala por paralisia dos membros pélvicos em decorrência de espondilite piogranulomatosa associada à linfadenite caseosa.

Figura 3. Necrose caseosa (asterisco) com mineralização (cabeças de setas) circundadas por tecido conjuntivo fi broso (seta) em corpo vertebral do ovino 2 com linfadenite caseosa (H.E., Obj. 20).

Figura 4. Foco de exsudato purulento circundado por macrófagos, linfócitos e plasmócitos. Há esferoides axonais (cabeça de seta) e espessamento de parede vascular por macrófagos (seta) em medula espinhal do ovino 2 com linfadenite caseosa (H.E., Obj. 40).

Figura 2. Lesão abscedativa envolvendo o corpo da última vértebra lombar, associada à linfadenite caseosa (ovino 1).

DISCUSSÃO

Esse trabalho descreve linfadenite caseosa como causa de paralisia de membros pélvicos em ovi-nos no Rio Grande do Sul. As alterações macroscópicas e microscópicas registradas, aliadas ao isolamento de C. pseudotuberculosis das lesões, permitiram relacio-nar o diagnóstico de espondilite piogranulomatosa à linfadenite caseosa. A espondilite associada à com-pressão de medula espinhal e/ou mielite explicam a manifestação clínica de paralisia de membros pélvicos.

Corynebacterium pseudotuberculosis, bactéria intracelular facultativa de macrófagos, possui um lipí-dio de superfície leucotóxico que a protege da fagoci-tose [5]. Os achados histológicos são semelhantes às lesões abscedativas que, se acredita, sejam originadas pela degradação tardia da parede bacteriana. A bactéria produz fosfolipase D, uma exotoxina dermonecrótica

e hemolítica que induz supuração e age em células endoteliais, com aumento da permeabilidade vascular, facilitando a invasão bacteriana [6]. A disseminação do patógeno ocorreu, provavelmente, via hematógena aos pulmões e destes para as outras partes do corpo [1].

Há semelhanças importantes entre os agentes etiológicos da linfadenite caseosa e da tuberculose. A tuberculose osteoarticular representa 10% das formas extrapulmonares da doença, na qual a coluna vertebral é o local mais comum de infecção óssea [4]. A osteomie-lite por infecção bacteriana hematógena atinge, com frequência, animais jovens, na zona de vascularização da placa de crescimento e no complexo articular epifi -sário. Os vasos sanguíneos desses locais possibilitam a instalação bacteriana, pela lentidão do fl uxo e pela turbulência do sangue nos ramos descendentes maio-res, como também por menor capacidade fagocitária e

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S.O. Souza, L.A. Lemos, A.T. Wouters, et al. 2012. Linfadenite caseosa como causa de paralisia de membros pélvicos em ovinos

no Estado do Rio Grande do Sul. Acta Scientiae Veterinariae. 40(4): 1085.

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descontinuidade entre as células endoteliais [6]. Esses fatores, somados à ação antifagocitária e à ação de Corynebacterium pseudotuberculosis nas células en-doteliais podem explicar a localização vertebral das lesões da linfadenite caseosa nos ovinos dos casos apresentados. A linfadenite caseosa deve ser conside-

REFERÊNCIAS

1 Alves F.S.F., Pinheiro R.R. & Pires P.C. 1997. Linfadenite Caseosa: patogenia, diagnóstico, controle. EMBRAPA-CNPC. 27:1-16. [Fonte: http://www.cnpc.embrapa.br/admin/pdf/044001201.doc27.pdf.].

2 Alves F.S.F. & Pinheiro R.R. 2000. Linfadenite caseosa em caprinos e ovinos: recomendações e medidas profi láticas. Agropecuária Catarinense. 13(1): 12-14.

3 Baird G.J. & Fontaine M.C. 2007. Corynebacterium pseudotuberculosis and its role in ovine caseous lymphadenitis. Journal of Comparative Pathology. 137(4): 179-210.

4 Cabral M.M.L., Azevedo B.C.C.A., Montenegro L.M.L, Montenegro R.A., Lima A.S. & Schindler H.C. 2005. Espondilite tuberculosa em adolescente. Jornal Brasileiro de Pneumologia. 31(3): 261-264.

5 Fontaine M.C. & Baird G.J. 2008. Caseous lymphadenitis. Small Ruminant Research. 76(1): 42-48.6 Fry M.M. & McGavin M.D. 2012. Pathologic basis of disease. 5th edn. St. Louis: Elsevier Mosby, 1322p.7 Williamson L.H. 2001. Caseous lymphadenitis in small ruminants. Veterinary Clinics of North America: Food Animal

Practice. 17(2): 359-371.

rada no diagnóstico diferencial de doenças que cursam com paralisia de membros pélvicos em ovinos.

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