L’examen du sédiment urinaire en pratique courante · d’ examen La mesure de la densité urinaire au moyen du réfractomètre portatif et l’examen d’une bandelette (biochimie

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L’examen du sédiment urinaire en pratique courante

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Info 8/2014

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L’évaluation microscopique du sédiment urinaire est un examen simple réalisable au chevet du patient, à côté des examens hémato-biochimiques de routine.

Choix et conservation du prélèvementL’examen du sédiment doit être réalisé im-médiatement après la récolte de l’urine (dans les 30 min), ou à défaut dans les 6 à 8 heures (au maximum 24 h). En cas d’analyse diffé-rée, l’urine est à entreposer au réfrigérateur (ASVCP Guidelines) et remise à tempéra-ture ambiante avant analyse.

Préparation de l’échantillon- Méthoded’ examenLa mesure de la densité urinaire au moyen du réfractomètre portatif et l’examen d’une bandelette (biochimie urinaire) précède la réalisation d’un sédiment. Pour obtenir un résultat fiable, il convient d’utiliser une mé-thode la plus standardisée possible. Après centrifugation à faible vitesse (500 G, 5 min *) d’un échantillon d’urine de volume défini (3, 5 ou 10 ml), le surnageant est éliminé par aspiration à l’aide d’une pipette jusqu’à lais-ser env. 0,5 ml d’urine qui sera remise délica-tement en suspension (Photo 3). Enfin, une goutte de culot est transférée sur une lame et étalée de manière homogène à l’aide de la lamelle. L’examen au microscope au faib-le grossissement (X 100) permet de détecter les particules présentes et les éléments figu-rés plus rares (cylindres, cellules, cristaux, bactéries) avant de préciser leur quantité au plus fort grossissement (X 400, comptage sur 10 champs) de manière semi-quantita-tive (Tableaux 1 & 2, photos). L’emploi d’un microscope à contraste de phase,voire de lumière polarisée, améliore notablement l’observation des éléments figurés de l’urine.

Photo 1: Cristaux de struvite (PAM) et d’oxalate decalcium

Photo 2: a. globules rouges normaux et b.échinocytes (urine concentrée)

Tableau 2: Principaux cristaux fréquemment rencontrés dans l’urine

Oxalate de calcium -dihydrate et monohydrate

Phosphatesamorphes

Cristaux de bilirubineCarbonate decalcium

Cristaux desulfamides

Cystine Urate d’ammonium

Phosphates ammoniacomagnésiens(PAM), struvite

a. dihydrate (whedellite): incolore, forme octaédrique, en forme d’enveloppe carrée avec des diagonales proéminentes, bi-pyramidale

b. monohydrate (whewellite): incolore, ovale en forme d’haltères ou en forme de fuseauxbiconcaves

pH optimal de formation (pour les deux formes): acide, neutre, alcalinPrésence possible dans l’urine d’animaux sains, lors d’ hypercalciurie, intoxication à l’éthylèneglycol (monohydrate)

Informe agglomérat de petites sphères pH optimal de formation: alcalin, sauf la bruschite (aiguilles longues et fines souvent agrégées dans une urine plus acide)Les phosphates de cal-cium ressemblent aux phosphates amorphes

Aiguilles jaunâtres, brunâtres ou rougeâtres, en rosetteprésence possible en petite quantité + dans l’urine du chien, pas chez le chat

Cristaux fréquents et physiologiques chez les herbivores (lapin, équidés)Ph de formation: alcalin, neutre

Lors de traitements par les sulfamides

Lamelles hexagonales, incolores, à côtés égaux ou différentsSignification clinique, même chez animaux asym-ptomatiquespH optimal de formation: alcalinPrédisposition raciale: Teckel,Basset Hound, Bou-ledogue anglais, Yorkshire et Irish terriers, Chihua-hua, Mastiffs, Rottweiler,Terre-Neuve.

Grossièrement sphérique aux bords irréguliers en pomme de pin.pH optimal de formation : alcalin ou neutreUrates amorphes non dissous par l’acide acétique à 10 %Prédisposition raciale :Dalmatien (métabolisme de l’acide urique défectueux), Bouledogue anglais, an-omalies de la circulation portale

Incolore, rectangulaire, en forme de couvercle de cercueil de taille variable, formeorthorhombiquepeuvent s’agréger sur la lame pour former une structure ressemblant une fougèrepH optimal de formation: alcalin et neutre

Photo 3: Urine centrifugée avant et après décantation

Quelques exemples (voir Tableau 2) :Hématies et leucocytes (par champ, 400 X) : nombre exact jusqu’à 10, puis +, ++ ou ++++ Bactéries: (+), +, ++ ou +++ (env. < 10, 11-50, 51-100, > 100).Cristaux : préciser nombre et taille.

*: force centrifuge relative (RCF) = 1,118 x 10-5 x rayon de rotation (cm) x vitesse de rotation (tours/min).


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Une coloration après séchage à l’air affine la caractérisation des cellules et bactéries (Photo 10).Interférences: elles sont nombreuses (délai d’analyse, température, pH,..). En voici quel-ques exemples :- „augmentation du nombre et de la taille des cristaux d‘oxalate de calcium et de struvite (PAM) lors de réfrigération- Augmentation du pH suite à la multipli- cation bactérienne (ITU avec urine basique)- augmentation du pH lors d’ alcalose (ex.: lors d’ hyperventilation de stress pendant le trajet jusqu’à la clinique !)- Influence de la DU sur les hématies: possible lyse lors de DU basse, échinocytes (hématies crénelées) dans l’urine concentrée.

Analyse microscopique du sédimenturinaire

L’ examen du sédiment urinaire, particuli-èrement important pour mettre en évidence la présence de cristaux et d’éléments cellu-laires (hématies, leucocytes,cellules épithé-liales, cylindres, bactéries, levures,..) dev-rait être réalisé sur chaque analyse d’urine, même si aucune anomalie n’est détectée à la bandelette urinaire. En effet, un certain nombre de prélèvements d’urine sans ano-malie à la bandelette peuvent avoir un culot anormal (pyurie, bactériurie, etc).

Photo 4: Cylindres granuleux (formation dans les tu-bules rénaux)

Photo 5 : a. cristaux d’amidon b.fibres végétalesc.Pollen d. Acarien

Photo 6 : Cellules épithéliales entourées de leucocytes et bactéries

Photo 7: Amas de cellules épithéliales

Photo 8: filaments mycéliens ( contaminant fréquent) Photo 9: Amas de cellules tumorales (carcinome)

Photo 10: Sédiments après coloration a. chaînettes de bactéries b. leucocytes et cristaux de struvite

Références bibliographiques:1. www.asvcp.org/pubs/pdf/ASVCP QA Guideline GERMAN.11-7-11.pdf2. Sturgess CP, et al. An investigation into the effects of storage on the diagnosis of crystalluria in cats. J Feline Med Surg 2001;3:81-853. Albasan H., et al. Effects of storage time and temperature on pH, specific gravity, and crystal formation in urine samples from dogs and cats. JAVMA 2003, Vol 222, 2:176-1794. Osborne, Carl A. Urinalysis: A Clinical Guide to Compassionate Patient Care. ISBN 1-884254-42-X5. Villiers E and Blackwood L. BSAVA Manual of Canine and Feline Clinical Pathology. 2010, Chapter 10, ISBN 0905214 79 X

Cellules Normepar champ au fort grossisse-ment X 400

Remarques

Hématies < 5 artefacts: cystocentèse, urine spontanée de chienne non stérilisée hématurie +: lésions de l’appareil urinaire: infection/ inflammation, traumatisme, tumeur; troubles de la coagulation

Leucocytes < 5 artefact: résultat positif avec toutes les méthodes de prélèvement sauf cystocentèse pyurie +: inflammations infectieuses et non infectieu-ses ( lithiases, tumeurs)

Cellulesépithéliales

0-2 Cellules squameuses, grandes: affections de la vessie et du tractus urinaire basCellules rondes, petites (tubulaires): affections rénales et du tractus urinaire haut+ cellules à morphologie variable (transitionnelles), par amas : inflammation chronique, tumeur

Tableau 1 : Analyse semi-quantitative des éléments cellulaires du sédiment


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Une coloration après séchage à l’air affine la caractérisation des cellules et bactéries (Photo 10).Interférences: elles sont nombreuses (délai d’analyse, température, pH,..). En voici quel-ques exemples :- „augmentation du nombre et de la taille des cristaux d‘oxalate de calcium et de struvite (PAM) lors de réfrigération- Augmentation du pH suite à la multipli- cation bactérienne (ITU avec urine basique)- augmentation du pH lors d’ alcalose (ex.: lors d’ hyperventilation de stress pendant le trajet jusqu’à la clinique !)- Influence de la DU sur les hématies: possible lyse lors de DU basse, échinocytes (hématies crénelées) dans l’urine concentrée.

Analyse microscopique du sédimenturinaire

L’ examen du sédiment urinaire, particuli-èrement important pour mettre en évidence la présence de cristaux et d’éléments cellu-laires (hématies, leucocytes,cellules épithé-liales, cylindres, bactéries, levures,..) dev-rait être réalisé sur chaque analyse d’urine, même si aucune anomalie n’est détectée à la bandelette urinaire. En effet, un certain nombre de prélèvements d’urine sans ano-malie à la bandelette peuvent avoir un culot anormal (pyurie, bactériurie, etc).

Photo 4: Cylindres granuleux (formation dans les tu-bules rénaux)

Photo 5 : a. cristaux d’amidon b.fibres végétalesc.Pollen d. Acarien

Photo 6 : Cellules épithéliales entourées de leucocytes et bactéries

Photo 7: Amas de cellules épithéliales

Photo 8: filaments mycéliens ( contaminant fréquent) Photo 9: Amas de cellules tumorales (carcinome)

Photo 10: Sédiments après coloration a. chaînettes de bactéries b. leucocytes et cristaux de struvite

Références bibliographiques:1. www.asvcp.org/pubs/pdf/ASVCP QA Guideline GERMAN.11-7-11.pdf2. Sturgess CP, et al. An investigation into the effects of storage on the diagnosis of crystalluria in cats. J Feline Med Surg 2001;3:81-853. Albasan H., et al. Effects of storage time and temperature on pH, specific gravity, and crystal formation in urine samples from dogs and cats. JAVMA 2003, Vol 222, 2:176-1794. Osborne, Carl A. Urinalysis: A Clinical Guide to Compassionate Patient Care. ISBN 1-884254-42-X5. Villiers E and Blackwood L. BSAVA Manual of Canine and Feline Clinical Pathology. 2010, Chapter 10, ISBN 0905214 79 X

Cellules Normepar champ au fort grossisse-ment X 400

Remarques

Hématies < 5 artefacts: cystocentèse, urine spontanée de chienne non stérilisée hématurie +: lésions de l’appareil urinaire: infection/ inflammation, traumatisme, tumeur; troubles de la coagulation

Leucocytes < 5 artefact: résultat positif avec toutes les méthodes de prélèvement sauf cystocentèse pyurie +: inflammations infectieuses et non infectieu-ses ( lithiases, tumeurs)

Cellulesépithéliales

0-2 Cellules squameuses, grandes: affections de la vessie et du tractus urinaire basCellules rondes, petites (tubulaires): affections rénales et du tractus urinaire haut+ cellules à morphologie variable (transitionnelles), par amas : inflammation chronique, tumeur

Tableau 1 : Analyse semi-quantitative des éléments cellulaires du sédiment

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Choix et conservation du prélèvementL’examen du sédiment doit être réalisé im-médiatement après la récolte de l’urine (dans les 30 min), ou à défaut dans les 6 à 8 heures (au maximum 24 h). En cas d’analyse diffé-rée, l’urine est à entreposer au réfrigérateur (ASVCP Guidelines) et remise à tempéra-ture ambiante avant analyse.

Préparation de l’échantillon- Méthoded’ examenLa mesure de la densité urinaire au moyen du réfractomètre portatif et l’examen d’une bandelette (biochimie urinaire) précède la réalisation d’un sédiment. Pour obtenir un résultat fiable, il convient d’utiliser une mé-thode la plus standardisée possible. Après centrifugation à faible vitesse (500 G, 5 min *) d’un échantillon d’urine de volume défini (3, 5 ou 10 ml), le surnageant est éliminé par aspiration à l’aide d’une pipette jusqu’à lais-ser env. 0,5 ml d’urine qui sera remise délica-tement en suspension (Photo 3). Enfin, une goutte de culot est transférée sur une lame et étalée de manière homogène à l’aide de la lamelle. L’examen au microscope au faib-le grossissement (X 100) permet de détecter les particules présentes et les éléments figu-rés plus rares (cylindres, cellules, cristaux, bactéries) avant de préciser leur quantité au plus fort grossissement (X 400, comptage sur 10 champs) de manière semi-quantita-tive (Tableaux 1 & 2, photos). L’emploi d’un microscope à contraste de phase,voire de lumière polarisée, améliore notablement l’observation des éléments figurés de l’urine.

Photo 1: Cristaux de struvite (PAM) et d’oxalate decalcium

Photo 2: a. globules rouges normaux et b.échinocytes (urine concentrée)

Tableau 2: Principaux cristaux fréquemment rencontrés dans l’urine

Oxalate de calcium -dihydrate et monohydrate

Phosphatesamorphes

Cristaux de bilirubineCarbonate decalcium

Cristaux desulfamides

Cystine Urate d’ammonium

Phosphates ammoniacomagnésiens(PAM), struvite

a. dihydrate (whedellite): incolore, forme octaédrique, en forme d’enveloppe carrée avec des diagonales proéminentes, bi-pyramidale

b. monohydrate (whewellite): incolore, ovale en forme d’haltères ou en forme de fuseauxbiconcaves

pH optimal de formation (pour les deux formes): acide, neutre, alcalinPrésence possible dans l’urine d’animaux sains, lors d’ hypercalciurie, intoxication à l’éthylèneglycol (monohydrate)

Informe agglomérat de petites sphères pH optimal de formation: alcalin, sauf la bruschite (aiguilles longues et fines souvent agrégées dans une urine plus acide)Les phosphates de cal-cium ressemblent aux phosphates amorphes

Aiguilles jaunâtres, brunâtres ou rougeâtres, en rosetteprésence possible en petite quantité + dans l’urine du chien, pas chez le chat

Cristaux fréquents et physiologiques chez les herbivores (lapin, équidés)Ph de formation: alcalin, neutre

Lors de traitements par les sulfamides

Lamelles hexagonales, incolores, à côtés égaux ou différentsSignification clinique, même chez animaux asym-ptomatiquespH optimal de formation: alcalinPrédisposition raciale: Teckel,Basset Hound, Bou-ledogue anglais, Yorkshire et Irish terriers, Chihua-hua, Mastiffs, Rottweiler,Terre-Neuve.

Grossièrement sphérique aux bords irréguliers en pomme de pin.pH optimal de formation : alcalin ou neutreUrates amorphes non dissous par l’acide acétique à 10 %Prédisposition raciale :Dalmatien (métabolisme de l’acide urique défectueux), Bouledogue anglais, an-omalies de la circulation portale

Incolore, rectangulaire, en forme de couvercle de cercueil de taille variable, formeorthorhombiquepeuvent s’agréger sur la lame pour former une structure ressemblant une fougèrepH optimal de formation: alcalin et neutre

Photo 3: Urine centrifugée avant et après décantation

Quelques exemples (voir Tableau 2) :Hématies et leucocytes (par champ, 400 X) : nombre exact jusqu’à 10, puis +, ++ ou ++++ Bactéries: (+), +, ++ ou +++ (env. < 10, 11-50, 51-100, > 100).Cristaux : préciser nombre et taille.

*: force centrifuge relative (RCF) = 1,118 x 10-5 x rayon de rotation (cm) x vitesse de rotation (tours/min).

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