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U N I V E R S I D A D AUTONDMA Y ’ T R 3 P u L I T A N A -177F\f’F\ l-n?F) ’ C B S / /&- BroCoGZA

I N F O R M E D E S E R V I C I O S O C I 4 L

JMODIFICACION DE LA ACTIVIDAD INTRACELULAR DEL CALCIO

I N D U C I D A POR HORMONAS E S T E R O I D E S

E N EL M U S C U L O U T E R I N O D E L A R A T A

I

--. “ C n R L O S HOYO V S D I L L O

Matricula: 78215635

I

I NT R 331J C C I ON

Los esteroides gonadales juegan un papel importante

en la regulación de la fisiología uterina. Entre otras

acciones, modifican el tono y la actividad contráctil

del miometrio. A~tualmente se conoce poco de l o s

mecanismos de acción de estas hormonas sobre la

actividad miometrial.

Control Hormonal: -

El movimiento del Útero desarrolla varias funciones,

tanto durante el ciclo estral con el transporte de l o s

Óvulos, como en el parto; sin embargo, su actividad

debe reducirse durante l a gestación (Reynolds,l939).

Las hormonas ováricas se clasifican en estrógenos,

andrógenos y progestinas. Los estrógenos aumentan la

contractilidad uterina (Frank y cols.,1929), mientras

que la Progesterona l a disminuye (Allen y .Corner,

1929), a s í como las progestinas y los andrógenos

(Kubli-Garfias y cols., 1979; 1980).

Contracción muscular:

Szent-Cyorgyi (1951) demostró que e? mecanismo

fundamental de la contracción es l a interac'ción entre

actina y miosina, en presencia de adenosfn trifosfato.

-1-

Se s a b e , que l o mismo o c u r r e en e l m ú s c u l o l i s 0

( C s a p o , 1 9 7 1 ; D i n i e l y Lodge , 1 9 7 3 ; C a r s t e n , 1971 ;

Hurwitz y S u r i a , 1971; Somiyo y Somlyo,1968).

E l m e c a n i s m o por e l c u a l e l p o t e n c i a l de a c c i ó n

desencadena una respuesta m e c á n i c a , r e c i b e e l nombre

de a c o p l a m i e n t o e lectromecánico. Aunque todavía no se

comprende bien como el e l p o t e n c i a l de a c c i ó n d i s p a r a

l a l i b e r a c i ó n de l o s iones de c a l c i o desde e l r e t í c u l o

sarcoplásmico, ( F i n n y P o r t e r , 1975) .

- ~i i ó n c a l c i o e s e s e n c i a l p a r a i a c o n t r a c c i ó n , ya

que h a c e p o s i b l e l a i n t e r a c c i ó n e n t r e a c t i n a y

miosina. La tropomiosina es una p r o t e í n a que cubre l o s

s i t i o s de i n t e r a c c i ó n d e l a a c t i n a con l a m i o s i n a . En

p r e s e n c i a de c a l c i o l a tropomiosina es s u s t i t u i d a por

t roponina , l a cua l hace p o s i b l e l a i n t e r a c c i ó n e n t r e

a c t i n a y m i o s i n a , además de aumentar l a a c t i v i d a d

ATPásica de l a miosina (F inn y P o r t e r , 1975) .

P o r o t r a p a r t e , l a r e l a j a c i ó n d e l mÚsculo

e s q u e l é t i c o s e debe a que e l r e t í c u l o s a r c o p l á s m i c o

r e t i r a a l c a l c i o d e l c i t o s o l . En ausencia de c a l c i o ,

l a tropomiosina obstruye de nuevo l o s s i t i o s de u n i ó n

e n t r e a c t i n a y miosina impidiendo l a contracc ión ( F i n n

y P o r t e r , 1975) . -

En e l músculo l i s o e l a c o p l a n i e n t o e l e c t r o m e c á n i c o

no e s t a b i e n d i l u c i d a d o . S i n embargo, se sabe que e l

I

!

- 2 -

m i o m e t r i o , d e p e n 3 e d e l c a l c i o e x t e r n o p a r a s u

c o n t r a c c i ó n ( F i l o y c o l s . , 1 9 5 0 ) . Además, l a s

c a r a c t e r í s t i c a s i n t r í n s e c a s d e l m i o m e t r i o , g r a n

espac io i n t e r c e i u l a r , tamaño c e l u l a r pequeño, r e t í c u l o

s a r c o p l á s m i c o r e d u c i d o y p r e s e n c i a de n u m e r o s a s

v e s i c u l a s p i n o c í t i c a s en l a membrana p l a m g t i c a

favorecen e l f á c i l i n t e r c a m b i o c e l u l a r con e l medio

externo.

Por l o a n t e r i o r , se podrá c o n s i d e r a r a l a membrana

p i a s m á t i c a como u n s i t i o i m p o - r t a n t e p a r a una

i n t e r a c c i ó n e s t e r o i d e - c a l c i o .

ANTECEDENTES.

En 1 9 7 1 , Anderson, F i d e l y S n y d e r m o s t r a r o n l a

e x i s t e n c i a d e una c o r r i e n t e de c a l c i o acompañada por

una de sodio para generar e l p o t e n c i a l de a c c i ó n en e l

m i o m e t r i o . E s t e t r a b a j o fue completado p o r Mironneau

( 1 9 7 6 1 , quien r e l a c i o n ó e s t a s c o r r i e n t e s de s o d i o y

c a l c i o con l a contracc ión de l a s f i b r a s miometr ia les .

E l c a l c i o puede e n t r a r a l a c é l u l a m i o m e t r i a l ,

fundamentalmente por dos t i p o s de c a n a l e s , los c a n a l e s

s e n s i b l e s a l v o l t a j e y los c a n a l e s operados por un

r e c e p t o r , ( B o l t o n , 1979) .

-

!

-3-

Los canales sensibles a 1 v o l t a j e permiten e l paso de

c a l c i o cusndo se abate e l potenc ia l de membrana (es

dec i r e l po tenc ia l d e reposo) , como ocurre en l a s

s o l u c i o n r s que t ienen elevada l a concsntración de

po t i s i o . Estas v í a s , pueden ser bloqueadas por l o s

antagonistas de ca lc io , (Bolton, 1979) .

Los canales operados por un receptor , responden a

l o s estímulantes, como 13 a d r r n a l i n a , son especí f icos

para cada trasmisor y por l o tanto producen diferentes

caabios en 13 permeabilidad a l ca lc io . Estos canales

pueden activarse aunque e l potenc ia l de membrana sea

b a j o y d i f í c i l m e n t e pueden ser bloqueados por l o s

antagonistas de ca lc io , (Bolton, 1979) .

La r e l a j a c i ón d e l músculo l i s o es producida por l a

disminución de l ca l c io intrace lu lar l i b r e ; t a n t o por

f i j ac ión intracelular del ca lc io (Janis y cols. 1977) ,

como por su expulsión de l a c é l u l a , (Hurwi tz y cols.,

1973) .

?fa y Bose ( 1 9 7 7 ) trabajando con l a taenia c o l i de

cobayo y e l útero de r a t a , han mostrado que l a s a l i d a

de c a l c i o (acoplada a una entrada de sodio ) es más

impor tan te p a r a p roduc i r l a r e l a j a c i ó n , que l a

f i j a c i ó n d e l c a l c i o en s i t i o s in t race lu la r es . Estos

autores, comprobaron (en l a taenia c o l i de cobayo y en

e l miometrio de r a t a ) , que l a ausencia de sodio es

-

I

I

i

-4-

capaz de producir una c~ntraición adicional a la q-20

produce la despolarización con potasio alto (mM).

Con respecto a las hormonas esteroides, se ha visto

que los metabolitos de la Progesterona pueden ser más

importantes en s u s acciones sobre la actividad

mecánica del Útero que ella misaa. Los metabolitos más

activos han sido sus derivados reducidos en la

posición 5, es decir los estereoisómeros 56, (ver

figura l), (Kubli-Garfias y cols., 1979).

S e s a b e que tanto la Progesterona como l a

Pregnandiona, la Epipresnanolona y la Pregnanolona son

antagonistas del calcio (Kubli-Yarfias y cols.,

enviado a publicación).

En base a lo anterior, se decidió utilizar dos

modelos, para estudiar la acción de estos esteroides.

En un modelo, se activan los canales sensibles al

voltaje y se observa el efecto relajante que tienen

estas hormonas; en e l otro modelo además de activar

los canales sensibles al voltaje, se activa el influjo

de calcio por el intercambiador sodio-calcio. Con

estos modelos, se esperaba discriminar la acción de

las hormonas estudiadas en ambos sistemas. Si las

relajaciones que se obtuvieran fueran parecidas, se

esperaría que la acción de las hormonas tambion sería

parecida.

.

c

-5-

~ L O P R E G N A N O L O H A CH3 I HO H c=o

5ix-PREGNkNDIONA

O

3 a - H I D R O X I n PREGNAN-20

r - O I

crv' - 5 h - -0NA

y 3 c- o

CH3 I O

PROGESTERON A

O

~

EPIPREGNANOLON . Y

Figura 1 . Metabalitos 5 e y 5 B reducidos de 12 Progesterona. (De Kubli-Garfias y cols, 1979).

OSJETIVO:

1) Demostrar que e l e f e c t o Ú t e r o r e l a j a n t e d o l a s

p r o g e s t i n a s 5 e y 5 5 r e d u c i d a s s o b r e e l ú t e r o

contra ído por s o l u c i o n e s d e s p o l a r i z a n t e ( p o t a s i o a l t o ) - y sodio c e r o e s d i f e r e n t e .

MATERIAL Y METODOS:

Los e x p e r i m e n t o s se r e a l i z a r o n en r a t a s hembras

v í r g e n e s d e l a c e p a Sprague Dowley ( 1 5 0 - 2 0 0 g ) , en

fase de d i e s t r o , determinado por un exaaen h i s t o l ó g i c o

d e un f r o t i s v a g i n a l . Los animales se s a c r i f i c a r o n por

d e c a p i t a c i ó n , e x t i r p á n d o s e l e s rápidamente e l ú t e r o ,

p a r a d i s e c a r l o en medio de una s o l u c i j n Hepos normal

( v e r t a b l a 11, a t e m p s r a t u r a a a b i e n t e . Cada c u e r n o

u t e r i n o s e d i v i d i ó en dos p a r t e s i g u a l e s , l a s c u a l e s

s e co locaron en u n s i s t e m a c o n v e n c i o n a l de r e g i s t r o

i s o m é t r i c o , para t e j i d o s a i s l a d o s , en un baa0 de 5 m l ,

a una temperatura de 37OC y con un burbujeo c o n s t a n t e

de c a r b ó g e n o ( 9 8 % d e o x í g e n o y 2 % d e d i ó x i d o de

carbono). La a c t i v i d a d c o n t r á c t i l d e l músculo u t e r i n o

.

!

I

-5-

TABLA 1

COMPOSICION DE LAS SOLUCIONES (my):

HEPES NORYAL DESPOLARIZANTE

Hepes 10 10

Glucosa 1 1 1 1

Sacarosa - - NaCl 135 9 9 . 6

KC1 4 . 6 40

MgC12 1.2 1 . 2

CaC12 2 . 2 2 . 2

O s m o l a r i d a d 3 2 0 . 4 m O s

320.4mOs

Fuerza iónica - 1 5 9 8 . I 5 9 8

HIPOSODICA

10

1 1

1 9 9 . 2

0 .0

4 0

1 .2

2 . 2

3 2 0 . 4 m O s

.O648

TABLA 2

DOSIS DE LAS HORMONAS UTILIZADAS: lis efectivas 8 4 :

HORgONA w / m l mM Relación

PROGESTERONA 32

EPIPREGNANOLONA 15

PREGNANDIONA 13

PRECNANOLONA a

molar a la

Progesterona

101 .7 1 .o0

4 7 . 1 . 4 6

4 1 . 1 . 4 0

2 5 . 1 . 2 5 .

c

(Datos de Kubli-Garfias y cols. 1979)

se registró, aodiantr? -I u s 3 2 9 u7 t r i q s s u i t o r á e

tensión FT03 en un polígrafo Grass rn3delo 7B en serie

con una microcomputadora Sol de Processor Technology,

que convierte la sena1 anaiógica en numeros para

grabarlos en un disco magnético.

La tensión a la que se somstió el tejido fué de un

gramo.

Las preparaciones, que generalmente desarrollaron

una actividad espontsnea regular casi inmediatamente a

que se ajustaba la tensión, se dejaron estabilizar por

lo menos 30 minutos antes de hacer ningún cambio. Una

vez estabilizada la actividad contráctil del músculo,

se hizo el cambio de solución. En cada experimento se

probó solo una solución y una hormona. La solución

contracturante, despolarizante o sodio cero (ver tabla

l), se dejó estabilizar cinco minutos, de modo que la

contracción alcanzara un valor constante, antes de

añadir la hormona.

En la solución despolarizante (potasio alto), se

mantuvo l a osmolaridad fisiológica bajando la

concentración de sodio l o necesario, mientras que en

la solución sodio cero se empleó sacarosa para

sustitiur al sodio y conservar la osmolaridad

fisiológica. ,

-

A posar de que la fuerza iónica es baja en la

-7-

solución sodio cero ( v e r tabla l ) , , s e 9 3 visto que

esto no produce una aumento e n la contracción (Ma y

Bose, 1977).

Las hormonas utiliz,adas fueron las siguientes:

Progesterona (4-pregnan-3,20-diona), Epipregnanolona

( 3 a - h i d r o x i - 5 ~ p r e g n a n - 2 0 - o n a ) , Pregnandiona

( 5 a - p r e g n a n - 3 B t 2 0 8 - d i o l ) , y P r e g n a n o i o n a

(3 E-hidroxi-5 B-pregnan-20-ona).

Las hormonas se inyectaron a l interior del ballo en

un volumen de 0.05 ml de Propilen glicol. Para las

dosis, ver la tabla 2 (Yubli-Sarfias y cols. 1979).

La relajación s e midió comparando las áreas bajo

las curvas, en porcentajes con respecto a un área

control; la cual se calculaba como una extrapolación

del valor ya estabilizado de la contracción inducida

con ia solución respectiva. L a s áreas s e calcularon

por medio de la microcomputsdora con un programa en

BASIC. Este programa tuvo que ser adaptado a nuestras

condiciones de registro, y utilizó los valores

digitalizados de l a actividad contráctil del músculo

que la microcomputadora ya había capturado. - La relajación también se midió utilizando otros

parámetros. Por medio de otro programa en BASIC, la

microcornputadora buscó l o s tiempos (en minutos) en que

-8-

!

Figura 2. Sistema de registro y procesamiento de los datos.

A. Ball0 con el tejido uterino. B.Poligrafo. C. 0sciloscopio.D.

Microcomputsdora. E. Impresor. --.

I

s e a l c a n z a b a u n 5 3 % d i 1 v a l o r de l a c o n t r a c c i ó n a i

poner l a hormona (t iempos medios de r e l a j a c i j n ) .

U n t e r c e r parametro l o const i tuyeron los v a l o r e s de

una s e r i e de muestreos cada minuto (hechos también por

l a microcomputadora), d e l v a l o r de l a contracc ión .

Todos e s t o s p a r a m e t r o s s e compararon, para una

misna hormona, e n l o s dos t i p o s de s o l u c i o n e s , por

medio de pruebas de t de Student.

RESULTADOS.

La r e l a j a c i ó n u t e r i n a p r o d u c i d a p o r l a s d o s i s

e f e c t i v a s 8 4 d e l o s e s t e r o i d e s p r o b a d o s , f u e

s i g n i f i c a t i v a m e n t e ( p < . 0 5 ) d i f e r e n t e , c u a n d o s e

c o m p a r a r o n los p o r c e n t a j e s de i n h i b i c i ó n en l a s

s o l u c i o n e s c o n t r a c t u r a n t e s por p o t a s i o a l t o y p o r

s o d i o c e r o . Lo mismo o c u r r i ó a l comparar los tiempos

msdios de r e l a j a c i ó n , e x c e p t o para l a pregnandiona ,

donde l a p fue de .O71 ( n 3 s i g n i f i c a t i v a ) .

Cuando s e conparó e l v a l o r de l a contracc ión en cada

m i n u t o , s e o b s e r v a r o n d i f e r e n c i a s s i g n i f i c a t i v a s ,

e x c e p t o en dos c a s o s , e s t a s d i f e r e n c i a s s e f u e r o n

n a y o r e s a l a v a n z a r e l tiempo. Con l a Epipregnanolona

l a d i f e r e n c i a no fue s i g n i f i c a t i v a a l pr imer m i n u t o ,

pero s í a p a r t i r d e l segundo. Para l a Pregnanolona la

-_

-9-

significancia se presentó cies3e el sexto ninuto, por

lo tanto los tiempos medios de relajación para las dos

soluciones no fueron significavamente diferentes.

En las Tablas 3, 4 , 5, 6 , 7 y 8, se indican l o s

valores d e los tres parámetros así como s u s

desviaciones estándar (d.e.), los errores estándar , y el número de experimentos (n). En las figuras 3 a 6 ,

se muestran las gráficas de los valores de contracción

con respecto al tienpo.

Se obs2rvÓ que la relajación es mayor en l a

contractura por potasio alto que la relajación en la

solución con sodio cero.

!

1

I

DISCüSION.

Soluciones empleadas. La solución despolarizante es

una solución isotónica con un alto contenido de

potasio; lo cual, según la ecuación de Coldman, abate

el potencial de reposo. Las fuerzas iónicas de esta

solución y de la solución normal son iguales.

El efecto contracturante de la solución sodio cero,

fue observado por Katase y Tomita (19721, en la taenia

coli de cobayo. Ma y Bose (1977) l o corroboraron (en

taenia coli de cobayo) y mostraron que se debía

.

-10-

-0

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i L A S T A B L A S 5 A 9 Y L A S F I G E R A S 3 A 6 CORFlZSPONDEN R

MUESTREOS DEL VALOR DE L A CONTRACCION CADA M INUTO .

E n p o r c e n t a j e s c o n r e s p e c t o a 1 v a l o r d e l a c o n t r a c c i ó n e n e l m i n u t o c e r o ; p e s l a s i g n i f i c a n c i a s e g ú n l a p r u e b a d e t , s e s s i s n i f i c a t i v o y ns no s i g n i f i c a t i v o .

T A B L A 5

PRCIGESTERCINA

C o n t r a c c i ó n p r o d u c i d a p o r :

S O L U C I O N S O D I O M i n . P o r c e n t a j e 1 81.1 2 - 64.8 ~

3 54.0 4 46.8 5 41.8 6 37.5 7 34.7 8 31.9

CERCI E r r o r 1.4 2.0 2.8 3.2 3.6 3.7 3.9 4.2 4.1 4.2

S O L U C I O N D E S P O L A R I Z A N T E P o r c e n t a j e Error P

73.5 2.9 .o33 s 55.1 2.8 .o15 s 43.5 2-3 .o14 s 36.4 2.2 .o19 s 30.7 1.9 .O18 s 25.8 1.8 .o15 9 22.9 1.7 .O16 s 19.7 1.6 .O18 s 17.3 1.5 .o15 s 15.7 1.3 .O18 s

T A B L A 6

E P I P R E G N A N O L O N A .

S O L U C I O N S O D I O M i n . P o r c e n t a j e

1 87.2 2 74.6 3 65.7 4 59.4 5 55.6 6 51 .O 7 47.6 8 45.0 9 42.8 10 40.5

n1=5, n 2 = 8 - - - - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _

CERO Error 1.7 2.4 2.5 2.2 1.9 1.5 2.1 1.9 2.0 2.5

S O L U C I O N D E S P O L A R I Z l N T E P o r c e n t a j e Error P

83.4 1.2 .lo5 ns

57.0 1.4 .O06 s 50.2 1.5 <.o01 s 43.8 1.7 39.0 35.4 1 . 5

68.0 1 ..5 .O18 s

S S S

11

-1.4 II

I,

S

S

S

1.4 ll

n 31 -9 28.8 1 :2 27.1 1.1 11

I

1

TABLA 7

PREGNANDIONA


SOLUC ION SODIO CERO SOLUCION D E S P O L I R I Z A N T E

M i n . P o r c e n t a j e Error P o r c e n t a j e E i ' r o r P 1 8 8 . 3 2.1 7 9 . 3 3 . 0 . o 2 9 2 7 3 . 9 2 . 5 6 0 . 2 3.0 . o 0 5 3 6 3 . 6 3 . 2 4 6 . 5 2 . 6 . o 0 2

2 . 3 < . o 0 1 4 5 5 . 4 2 . 9 3 6 . 3 5 5 0 . 3 3 . 1 2 9 . 8 2 . 0 6 4 5 . 5 3 . 1 2 4 . 0 1 . 7

4 3 . 1 2 . 6 1 9 . 4 1 . 6 7 8 4 0 . 6 2 . 7 1 6 . 1 1 .5 9 3 8 . 2 2 . 1 1 4 . 3 1 . 3

1 0 3 5 . 6 2 . 2 1 7 . 9 1 . 2

n l = 7 , n 2 = 7

11

n

n

n

N

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_ _ _ _ _ _ _ _ - - - - - -

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S

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-

T A B L A 8

PREGNANOLONA


SOLUC ION S O D I O C E R O SOLUC ION D E S P O L A R I Z A N T E

M i . n . P o r c e n t a j e E r r o r P o r c e n t a j e Error 1 9 0 . 5 1 . 9 9 0 . 9 1 . o 2 7 1 . O 2 . 9 7 4 . 7 1 . 3 3 5 7 . 5 3 . 3 5 4 . 4 1 . 7 ' 4 6 0 . 1 3 . 6 5 3 . 6 2 . 1 - 5 5 5 . 3 3 . 5 4 5 . 3 2 . 4 6 5 1 . 5 3 . 5 4 0 . 8 2 . 5 7 4 8 . 0 3 . 2 3 6 . 1 2 . 7 9 4 5 . 8 j . 4 i 2 . 3 2 . 8 9 4 3 . 5

1 0 4 2 . 5 3.4 3 . 4

28.9 -2.9 2 6 . 0 2 . 8

P . 8 3 9 . 5 1 8 . 2 0 8 . 1 5 7 .o60 .O30 . o 1 3 . O07 .o04 . o 0 2

n s ns ns n s ns s S s S S

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!

p r e c i s a m e n t e a l a a u s e n c i a de s o d i o y no a l a b a j a

f u e r z a i ó n i c a , a u n a reducción en e l “estado a c t i v o ”

d e l músculo ( “ c a t c h s t a t e “ ) , a un i n c r e n e n t o en l a

p e r m e a b i l i d a d a l c a l c i o , n i a u n decremento en e l

r e t i r o d e l c a l c i o d e l c i t o s o l , p o r s e c u e s t r a c i ó n

i n t r a c e i u i a r , o por su e x t r u s i ó n t r a n s c e i u i a r .

(1) S e g ú n Ma y B o s e , l a b a j a f u e r z a i ó n i c a no e s

r e s p o n s a b l e de l a c o n t r a c t u r a por sodio c e r o ; ya que

a l s u s t i t u i r a l NaC1 por o t r a s s a l e s , q u r s u b e n l a

f u e r z a i ó n i c a i g u a l o mss que e l NaC1, no se observa

u n a r e l a j a c i ó n s i g n i f i c a t i v a comparada c o n l a que

produce l a s mismas m i l i m o l a s d e NaC1. E s t o s a u t o r e s

conc luyeron Que l a c o n t r a c t u r a que produce l a b a j a

f u e r z a i ó n i c a e s p o c o s i g n i f i c a t i v a , (Ma y B o s e ,

1977) .

( 2 ) En e l músculo l i s o de los moluscos, s e p r e s e n t a

un fenómeno d e contracc ión s o s t e n i d a producida por una

reducción d e l es tado a c t i v o d e l músculo a l c u a l s e l e

l l a m a “ c a t c h s t a t e ” , ( J e i e l l , 1 9 5 9 ) . Ma y B o s e

mostraron que e s t o no s e presentaba en l a c o n t r a c c i ó n

por sodio c e r o , (1977) .

(3) Ma y Bose el iminaron l a p o s i b i l i d a d de un cambio

e n l a p e r m e a b i l i d a d a l c a l c i o , u t i l i z a n d o u n -

a n t a g o n i s t a de c a l c i o ( e l D600), observando que e s

i n c a p a z de r e v e r t i r l a c o n t r a c t u r a d e p o t a s i o a l t o

- 1 1 -

(70mM). cuando el sodio esta ausente del medio. Esto

significa que aunque el no pueda entrar a la

célula por los canales al voltaje, hay otro

mecanismo que la concentración del

calcio intracelular. En la mismas coldiciones, el

agente quelante EGTA produc una relajación mucho mrás

rápida en presencia de sodio quo en su ausencia.

(4) Por medio de estudio con calcio radiactivo y

lantano, Ma y Bose concluyeron que la fracción de

calcio intracelular eleva a durante la ausencia de I I

sodio, es la misma que se imina al restituir el

sodio al medio.(Ma y Bose, - -

Finalmente, el hecho de q ontractura por sodio

cero dependa poco de la t ura, indica que este

es un proceso ffsico indep e de ATP; lo cual,

junto con los hechos ante llevó a Ma y Bose a

proponer la existenci intercambiador

sodio-calcio en el mÚs semejante al que

existe en el axón del c a l y cols., 1969; Ma

y Bose, 1977). Grover y 1981 han dado más

evidencias para la exist pel relajante de

este intercambiador en e e le rata; aunque

su existencia no ha sido

Acción de las pro

progestinas, para con

! I .

I

-1 k -

puede realizarse en varios sitios. Desd? luego qu9 una

acción a nivel de síntesis de proteínas esta

descartada, ya que estos efectos s o n inmadiatos.

Ahora, debe discriminarse una acción intracelular de

una extracelular.

Debido al tamaño pequeno de las células miometriaies

y a otras característica ya mencionadas, el

intercambio con el medio externo esta favorecido.

Esto junto con el trabajo de Ma y Bose, nos hacen

suponer que las progestinas, en su efecto relajante,

actuan sobre la superficie de la célula miometrial,.es

decir sn la entrada o en la salida del calcio

intracelular.

En cuanto a la entrada de calcio, las progestinas

podrían afectar a los canales operados por un

receptor. En tal caso no se observaría una relajación

tan srande en las soluciones despolarizantes, puesto

que estos canales permanecen cerrados; además,se ha

visto que es difícil que los antagonistas al calcio

los afecten, (Bolton, 1979).

P a r a l a s a l i d a d e c a l c i o l a f u n c i ó n d e l

intercambiador sodio-calcio podría ser drsminuida por

las progestinas.

Nuestros resultados indican que la acción de las

progestinas probadas es más notoria en las soluciones

-13-

d e s p o l a r i z a n t e s que en las so luz iones sodio c 2 r o . Así,

l a s p r o g e s t i n a s modi f i car ían pr incipalmente l a entrada

de c a l c i o por los c a n a l e s s e n s i b l e s a i v o l t a j e .

En e l c a s o de l a pregnanolona, donde 1s d i f e r e n c i a

e n t r e ambas so luc iones e s s i g n i f i c a t i v a s o l o a p a r t i r

d e l minuto s e i s , podemos suponer que e s t o s e debe a un

e f e c t o mayor, posiblemente , a f e c t a n d o ambos t i p o s d e

i n f l u j o s de c a l c i o ; s i n embargo, c o n s i d e r a n d o e l

i n t e r v a l o de d i e z m i n u t o s , l a d i f e r e n c i a y a e s

s i g n i f i c a t i v a .

CONCLUSIONES.

1 ) En e s t e t r a b a j o , s e ha demostrado q u e l a a c c i ó n

Ú t e r o r e l a j a n t e de l a s p r o g e s t i n a s p r o b a d a s e s

d i f e r e n t e en l a s s o l u c i o n e s d e s p o l a r i z a n t e ( p o r

p o t a s i o a l t o ) y s o d i o c e r o . Lo s u a l i n d i c a ' q u e lis

p r o s e s t i n a s r e l a j a n a l m i o n e t r i o , p r i n c i p a l m e n t e

g r a c i a s a un b l o q u e o de los c a n a l e s s e n s i b l e s a l

v o l t a j e .

2 ) L o s s i s t e m a s de r e s i s t r o y de p r o c e s a a i e n t o

a u t o m a t i z a d o , empleados en e s t o s e x p e r i m e n t o s , han

mostrado su gran u t i l i d a d en e s t u d i o s f i s i o l ó g i c o s

como e s t e .

--.

3 ) En o t r o orden de i d e a s . La r e a l i z a c i ó n de e s t e

s e r v i c i o s o c i a l mo ha dado una gran e x p e r i e n c i a , pues

me permit ió darme cuenta de una i n f i n i d a d de d e t a l l e s

y peque5os obs táculos que es necesar io tomar en cuenta

para l l e v a r a f e l i z t é r m i n o u n e x p e r i m e n t o o u n

p r o y e c t o c u a l q u i e r a que e s t e sea . La pianeación y l a

v i s ó n constante de l o a o b j e t i v o s me p a r e c e n l a gran

1zcciÓn de e s t e s e r v i c i o s o c i a l .

F i n a l m e n t e q u i e r o a g r a d e c e r a m i t u t o r , e l Dr.

K u b l i y a l QFB H é c t o r P o n c e , su g r a n i n t e r é s en e l

d e s a r r o l l o de e s t e p r o y e c t o que me h a p e r m i t i d o

c u m p l i r con e s t e cómpromiso f r e n t e a l a sociedad.

RESUMEN :

S e p r o b a r o n c u a t r o h o r m o n a s e s t e r o i d e s

( P r o g e s t e r o n a , E p i p r e g n a n o l o n a , P r e g n a n d i o n a y

P r e g n a n o l o n a ) , s o b r e el miometr io de l a r a t a , p a r a

d e m o s t r a r que e l e f e c t o Ú t e r o r e l a j a n t e de e s t a s

hormonas s e r e a l i z a pr incipalmente , por un b l o q u e o a l

i n f l u j o de c a l c i o en sus canales s e n s i b l e s a l v o l t a j e .

E s t o s e l o g r ó r e a l i z a n d o p r u e b a s d e t a t r e s

p a r á m e t r o s que miden l a r e l a j a c i ó n ( á r e a b a j o l a

c u r v a , t i empo medio de r e l a j a c i ó n y m u e s t r e o s d e l

-

-15-

va lo r de l a c o n t r a c c i ó n a i n t s r v a l o s r e g u l a r e s durante

10 m i n u t o s ) , en dos t i p o s de c a n t r a c c i o n e s induc idas ;

una producida en una so luc ión con p o t a s i o a l t o ( 4 O m M )

y o t r a p r o d u c i d a por l a ausenc ia de sodio además d e l

p o t a s i o a l t o . Se u t i l i z ó u n s i s t e m a de r e g i s t r o

i s o m é t r i c o , y una microcomputadora p a r a c a p t u r a r y

a n a l i z a r l a s sef la les .

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