28
Gel Permeation Technical Notes 3 July 2000 A User’s Guide to Chromatography

Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

  • Upload
    others

  • View
    1

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

GelPermeation

������������ ���������

A User’s Guide to

C h r o m a t o g r a p h y

Page 2: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

������������� ��� �����������������������������

U.S.A. PUERTO RICO UNITED KINGDOM CANADA AUSTRALIA NEW ZEALAND GERMANY ������ ���� ���� ����������� � ������ ����������� ������� � ������� � ������

����� ����� ������ ����� ������ � ������ ����� ������ ������� � ������� � ������

������ � ���� ���� �� �� !"##$��%#"&$' ()""&*��+"&)"' � ���� ���� �� ����,%-� �� ����,%-���� ."//"0!&*�#���

1%##$&2"'��� )!�"�3� �)#4*5!"04��&4���*��' 1%##$&2"'��� �"&&$&���!00* �!05%#4 ������*2�$55"&6)#7

������ $&�8)$&' �$220"*5!"04' ������� � ���� �)290$&4 :")�*2�0$&4

;� ��� ��)"#�%�<!2%�� � ��"*�!#"� =� ,�' ;� ��� �)*�#$0!$ �">�."$0$&4

;� ��� �&70$&4

Page 3: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

��������������

�� ����������� ��

��� ���������������� ��

���� ��������������� ��������������������������� �����!��"�����#�� ��

�� $�������

�� �������%����

�� $��������

�� �"�"��&

��� �������"���������������� ������� �'

�� "������������

�� ������(�����)�*�����"��

�� �������+&��

�� ���������������� ,��

�� �����"��(��������&

�� �"�*�"��� ���

��� ��������"����������"���� ��-

$��������� ��.

+"*��� ��/

���� �����(���0����"���� ��1

����� �����(���%�����(�������"��� �-2

GelPermeation

A User’s Guide to

Chromatography

Page 4: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i
Page 5: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

I. Introduction

������������ �������������� �� �� ��������� � ������������������������������������������������ ������������ !���������������������"�#� ���� ������������ ��������������� �������������������������� �������$$!������������"�%����������������������������������������������������������� ������ ��� ��� �������� ���������� ������������� ��������� � ������������������ ������������ ���������������������� �������"

&���������������������������������������������������� ���������� ����������������������� � �����������"�� ����������������������������������������������������������������������'��������������� ������������������������� ������"

II. SEC, GPC or GFC?

�������� ��������������������������� �� ��� ��������

������������ ���������������()*+�������� ���� ���������������������������� ������ ������� �������������� ���� ���������������������� ����������� ��������� ������� �����������'������� ���"�)*��������������������� ����������������������'����"

�������������� ���������������(,�+�����������������������������'������ ����� ���������������� ����������������� ��������� ��������� ��������",� ������������ �������������������������������� �������������������������-���������������"

�������������� ���������������(,#+��������������������� ������� �������'��������������������������� �����������������'����������� ������� ����������������������"&��� ��,#���������������������� �����������������-��������������������� � ���� � �����������������������������������"�,#����������������� � ��������./-����,�0"

#� ������'������������������������������ ��.)*0�������������������������������������"

III. Principles Behind SEC: How does it differ fromreversed-phase HPLC?

A. RETENTION

/������������������������������)*���������� ����������������������"

1��2� ��������� ������ �����(2�+�� ������������ ��������������� ��������������� ���������������������������������������������������������������� ��� ������ �������� ��� �"

1��)*�� ����������� ��� ������ �������������������.����������0���� �����������������'������ ��(#���3+"�4 ���������������������������������������������� ������� �"�&������ ������������ ��������� ���� ������"�/����������������������� �������� �������������������������� � �� ���� ������"

Page 6: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

1�������������������� ����� ��������� ������������ ���������������������������������� �������������"

&����5������5�������(���������� ������ �� ������������������������ +��������� �������������������������������� ������"��#� ��������������������� ���������������������� �������� ����� ���������� � ����������������� ��������� ��"������-���������� ���������������� � ���������������(����������� � ������+������������ �������������������� ������"

B. ELUTION ORDER

�������������� �������������������� ��������������������������������������������������������� ���!���������������������������������������������"#������������$��������������������������������������������������������%��

�����������&������������������������������������ ���������������� �������������"

������

Page 7: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

�������� ����� ������������������� ��������������������������

6 &���� �����'��������� � ����������� �������������� ����������������� ��������'������ �"�&����������������������������������(+�������� �������������4�"

4��������'�������������� �� ��������������������������������������������������������������������������'������ �"�(2��7+

6 &���������'��(������������� �������+����������������������("�"����'�#���������8����#��"�9+"�&����� ����'��(�:�#+�� ����������� ���������������������������������������������������� �������������������� ���(����'������������ ������������2���+"

��������������������������� ������������� ���)*�������"�2� ������ ���2�"�9������ �������"

C. RESOLUTION

2�������������� �������� ������������������������������� ������������������������� �����������(2�"�;+"

�� ����������� ������������� ������

������������������������������������� ����������� ������� �������������������������� �"�&���� ������������������ ��(�� �������"�������+� ��������

��

���

���

��

Page 8: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

�� ����� ������������������� ��������� ���������(#���7+"

&�� �������������� ���������������������� ����(�����'��������� ����������� ���+������ ������������� ���������������������'������������������������"

)*�������������������������������� ������������������� �������� �������<��������������������������� ����������� ����������������3=!���������� �����"

��'���� ����������������������������������� ������������������ ������ ���������������"�)��������������������� ��� ���������������� ���� ������ ��������������������(#���>+"

����� ������ ����������� ������!�� ������� �������������"� �����#����������$���%� "�������������� ��������������$�&���������������!�� ����������"������#��!� ��������� ����

�������'������� �������������� ������������������������� ����������� �����������������������������(������������������� ������� ��+"

�������(� )�������������������������������� ���� ������ ���"��'���� ����������������������������������� ������"

Page 9: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

�� ��� ����������������������

1����������������������� ����� ������������� ��������������������'������� ������������������������������� �����������"�&������ ���������������������� � �����'��������������� ��� ����������������'�"

������������� ���$�������� ���&�������������!�������������������)��������"���������������������������������������� ����������� ������!�� �������#��������*�

D. CAPACITY

8�������������������������� ���������������)*���������������������������������� ��������������"��&����������� ���������������������)*��������(��� ������������ ���+����������������������������������������4���(4���������+"

&����'������������������)*�������������� �� ��������������������������'��(��"������������ ��������'����� � �������+"��8������������������������������������������������������������������������� �������� ����������� ��������'�"

IV. Considerations for Column Selection

A. SAMPLE EFFECTS

+��"� �� ��� ��������,-./&� �����!������������$�����0�/���� �!������ ��� �����#�� !����!�������������� ����������#�������

�� �����������������

#� ������)*���������������������������?����������������������3>���������������� ��� ��������� �������������� �������������� �����(2�"�$+"�@� ���������������������������������������� ���������������� ��"

������� �������� ��� ����������� ����� ��������������

�� ��������������

)�����4������������������������������ ����� ������)*"�)������������������ ������������������������������������������������ �A�(�""�����������������+"

%��������������� ���������� ���������� � ������������������������������������������ �������)*��������������������������������� ������������������ ������������������������������������-�������� ����"

/� ����� �������������������������������������������������� ����������������������������������������(2�"�9+"

� � � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � � � � � � �

��� ������������ �����

�������� �������� �����

Page 10: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

����0������#������ ������������"� ������ ������ ����&����0�/���� ���� � ��������� ���� ����#� ��� ������ �����"������������� �����������������

B. CHOOSING THE MOBILE PHASE

1��0�/&� ���� ������� ����!����������������#���������� ���� �������� ���������#�� �������������� ����� ��������"�� ������������2�� �� ������ ���� �����"� � ��������

&� �� ��� ���� �� ���������������� �����������������)*�����������B

�� ���������������������� ��

�" 1����������������������������������������C

��'������������������������� �������� ������� ��������������������������� ���������� ����������"�)���������������("�"��D�#+������������������ ������������������ ������"�#� ����������������������� ���������� ������������������ ��������� �����������������������"

�������3"�)�� ���������������� ������D�#�(1+�����&�#�(11+"�)�����B�(�+�9 ===�%<�(�+7===�%<�(�+�E==�%"�������B�F���$>=����3==G��� ����������� ���3��H���"�2� ����� ���2�"�>������� �������"

Page 11: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

)��������� ������������������������������ ������� �������#��� ��E����� "�1����������������������������������� �������� �������������������������D�#�����������������&�#"�&��� ������������������������������������'����� ����&�#�� D�#������������������ �������� ������������������������������"

#��� �E����������� ������ ������������� �������� ����������������-������������������������"�1�������� ������������������������������������� �������������� �������������������������������&�#��������������������������� �� ���� �����"A������������������D�#����������������� �������E=I�(��"�$9I��� �&�#+����� � ��� �����������������������"�/���� ��������������������� �������� �������D�#���������#��� � "

�" &��������������������������� ��������������������� �� ��������� ��������������������������'���"

����0����� ����!�������������� ���� ����&��������� ��� �������"������1�� ���� ���� ������������!��&�������������������#�� ��� �� ����!�����������1�� ���� ���� ���������������&���������� �

-������!������������� ������������� � �����"��� ������ ��������������������� ��2�� ��������������� � ���������������� ����������� ������������ ����!���������

�� ��� ����������������

1������������������������������������������������������ � ����� ���� ������������������"

�����������������#�� ��������� ������ �������������������� ���&����"������������ ���� ����!� "���� ������������� ������������4�����0����� ����!������������������� ���&���� ����������� ����!�����������!�������� �� ����!���������

1��������������#��� ����� ���������������������������&�#�����D�#���������������������������������&�#��������� ���� �������������� ���(��#��"�E+"

�������5"�� ������ ������������������ �������� �������D�#"�����������������������3"�2� ������ ���2�"�>������� �������"

Page 12: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

�� ������!����������

1�������������������������� ������ ����������������C��������������)*���������������� ���������������� ��� ������ ������������������������������������������ ����������������������"

�����6���"��4����� ����#� ��� ������ ����&� ��!����������� ���� ����!���������!���������������!��(*723*7/��!�#�� �������������� ���� ������ �������� ���� ���� ������ ��������� ��������#�� ���������������'������������ �������������������� �������&"������� ������� � ������������4����!���

1��������� �"��4�� ����#� ��� ������ ����&�������2!������2���� ����#�� ����������!��&������� �������!��$��������2�������!��$����

C. COLUMN TYPE

&������������� ������� ������ ��� ����������������������������� ���������������)*��������B

�� "������#������� ���

�� ���� ������ ����

6 ������������������������������������ �������� ����6 8����� ��� ������ ���������� ��� ������ ����� ��������� ���������(�""�J�3===�� �K

3==�===�D�+6 2���������� ��������� ������������������������������ �������

�������������� �6 ����������1����������������������������������� ��������������������� ������

�������� �������������������������'���6 ���������������� �������������������� �� �������������<���� ����������

����� �����������������������6 ��!������������ ���� ��� ������������� ���� ���

"� #������ ������ ����

6 ������������� �H�������������������� "6 &��������������������� ��������������(����������� ����������������� �����+"6 ����������)������������������������ ����������� �������������������� ������"6 ���������������������� �������������������(J�>!+�������� <�������������

�������������� ��'�������������������'����������������������������"6 ��!������������������������ �������������<����� ���� ��� � ���

(����������37=I�$3=I+"

�� �����#������� ���

6 ������������� �������������������� ����������������� ���������������"6 �������������� ������������$">���� <���� ���� ��� ������������"6 ��!��������������������� ������� ����������� ����������������@���/A����"6 ���� �������������������� �������������"6 )��������� ��������� ���������� ����������� ��������������������������������

���� � ����������� "

Page 13: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

D. SELECTION OF PORE SIZE OR PORE SIZES

6 &������������ ����� ������� ��������� ����������� ���� ������������������������ ������������ ����(#��"�;+"

6 #� ������������������� �������������� ����������� ��������� �������������������� � ������������� �����"�&�������� -������������������������������������ ��"

�����6�����������������������������&���4������� ���������$����#������ ����������� ������ �#������ ���� ����������� ������������"��� ����������� �����������������8�

�������8"����� ������������ ������������� ������ �)*��������������� ������ ����"��� �����������)*��������&�#�����������������$">��H���������������� �������� ��"2� ������ ���2�"�7������� �������"

�������9"�*������������ ����������� �������)*�������������������������������������� ���#��� �F"2� ������ ���2�"�7������� �������"

����� "�� !� ������ ���� ����

6 ����������������(������������ �����+���������� �������� ������� ������������������ ����"

6 ����������������������������� ������ ������������� ���������������������� �����"��@� ���������� ������������� ���������������������� �� �����������(#��"3=+�(2�"�3+"

6 1������������ ������� ������������������'���������������������� ����"��&�������� ������� ��������� �� <��������������� ���������� ������������������ "

Page 14: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

E. INCREASING EFFICIENCY

/�� ���������������� �� ������������������������������������������������������������� ����� �������������������� ����������� ������ ��������������� �����������(2�"�F+"

�� "����������

,� ������������������������ ��� ����������(����������7�>L����,�+��������� ���������"

����������������� ��� ������������������������� ���������� ����'� ��� �"�)��������)*���������������� ����'� ��� ������������������ �������� ������������������������������� ���������� �"

����6� ����������� �!���������������!��4��������&����������������� ��!������������ �����"��� �����:�������������� ��������� ������ ���� �������������!�������������������#������ ��

�� �� ����!��� �����������

/�������������� �������������������������������������� ������������������ ����������"��&��������� ������������ �������� ������������ �������� � ��������������� ���������������� ���������������� ��������������"

��

�������

Page 15: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

@�������� �������������������� ������������ �������� ����� ��������������������� �������������� ������������������������������������?��������������� �������� ���"

&��������� �������������� ���������������������� "��������������� ������������ �������������� ������������������������� ��"�&��� ������ ��������������'����������� ������'������������ �������"�#� ������ ��������� �������� ���������� ������������������������������ ��"

%������������������������ ���������������������������������������������������������������� � ������� �������� �����(2�"� +"����� ������������������� ����������� �����������������?������������������� ����������� ������������� ����� � ��� ���� ������"

�����0�������������� ��! ���������� �������������#����������&������ �������� ���������������������������#����!���� ����������������!�� ����

;�4������� ������� ��������"����������������#�������������� �������������� �������������������� ���� �

�� $�������!�%����� ���������

@�������������������������������� ������ ������������������ ��������� ������������������������ ������������"���'��� ����������� ������������ ���� ����������������� ��"�/����������������������'���������������������� ������������� ������?���������������������������������� ������ ��������������� �������"

V. CALIBRATION

&���� ���������������������������� ��������������� ������������������� ���������� ���������������� �"�)��������������������������������������������� ��������������������������� �������������������������� �������������������������������������� �������������� ���������������'�����(2�"�F+"

D��� �������� �������������� ���������������� �������������������������� ������(� ��������� ����+����� �������������(� � ����������+����������� ������ ����������������������(2�"�3=+"

&������������������ ������ ���������������������������� ������������B

$����� �������� %����������

&��������������� �����������<�������������� ��������� ������������ ������������������������������"�&�� ���������������������'���������������������� ��������-��������������������������� ������"

������� ���������������������������������������� ������������������� ����������������������� ��"

���������� �� "���� �������� %����������

1���������������� ��������� ������������ ��������������� ��� �8 ����)����� ����� ������������������"��/������������������������� ���������� ����������� ������ ������������ �������� ������ ����������������������������"

��

Page 16: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

&��!���� %����������

&��������������������� ���������������������� ����������������������� ��������������������������������������� ����������"�&����5�� ������5���������� ����������������������������-�����������'������������ ������������������� ���������������������������� ��������������������������������"�&��������������������������������������� ���������� ������������� �������������������� ����������� ������ �� ���������������������(2�"�3=+"

'������1������������������������������ ����������������������� ������������� ��������� ���������������������� ��"

1������������������� �������������������� ��(������������������� �������������� ������� �+�� ������������������ ������� ���������������� ��������������������� ��� ���������� ��"

VI. COLUMN CARE CONSIDERATIONS

)*������������'������������ �������� �������� ������������������������� ��������������������"��&��������������������������������������� ��������������)*���������� "

<� ����������"�������������������������� ������-������������ � ����������������2 ��������� ������������������������� �����

�������

#� ���� ��� ����� ���("�"���� �����+������������������� ������������������"%������� �� ����� ������������������������������� �� �������������������� ��������������� ������������������<���������������������������������"�8��� ��������������������������������������������������� ������������������ ��'������� ������������ ����������������'������"

"��(�����

8��������������� ��������������)*����'������ � ���������������� ���������'���������������������� ��� ��� �������'����������������������'������������������"���'���������������������� ���� ��������� ��� ��������(�������3===�$===����+<������������������������������� ��� ������������������ >�F=!������ �������������"�#� ������� � ����������M������'������������������������������������ ��"�#� ����������� ����������� ������=">���H������� ����������������� ������ ������ ����"

���!��� �)�������

����������������������������� �����������������������������������������������������"�D��� ���������������� ��� ��������� ����������� ��� �������(&���3+"�1�� �� �������������������� ��������������"�#� ������ �������� ������������������������������������������������"

1������������������������������*/)*���������������������������� "�&������������ ��� ����������������� ������������������B

3" 2��������� ������="$��H���"

��

Page 17: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

��

$" 8��'� ��� ������A*4*2�����E>=����"

9" /���������'���������������������������' �� �����������������������������������������3>����� �� ������������/AN��������������"

7" ���� ������������ ��� �����������������3�(����������+�����������$�(���������+����������������������������B

6 1���������3������������$��������������������������� ��(&����3+�����'��������������������������� ������������������"

6 1���������3������������$����������������������������� ��������������������� �������&����3�����'��������������������� ������������������"

6 1���������3������������$�D@�A@&�����������������@2������������������� �������������������� �������������#12)&��������������������� ������&����3"

*+,+*+'%+�

(3+ 2"*"���?� ������.����/���� �����,-./�;���&����"�9�(3;F>+��� 7

($+ O"O"�P� '����������"*"�/�����=��/���� �����0���&����"�3>�(3; +���39

(9+ �"2"�)��� �����O"O"�P� '������1�� ��������������� ����-����� ������ ������$��

*�"���%����1�� �������A��N� '��3; ;

(7+ %"%"�N����O"O"�P� '������D"D"�8���������"O"�)��'������=��/���� ����&�����37;(3; F+��"�7E>

(>+ &"��������'���N"�1�����&"�@'���������)"��� ���=��.������/���� ����&����"�9(3;F=+��"�9>9

(E+ %"�������>��+�����/���&����"�$ �(3; >+��"�9$7

( + %"%"N����O"O"�P� ����������D"D"�8����;������0�$��� ��������.������/���� ������&�%�����3; ;

(F+ Q"D"�A���,-./�/���������������������&�����-��� ���&�%����4���3;;

(;+ �"2""�)��� ��O"O"�P� '������O"�"�,��?��"��� ������������������D���������$��

*�"�%����1�� �������A��N� '�3;;

(3=+����)���%��(�+"���������'����)���*���������� ������ �������� ���D'' �1��"��3;;>

Page 18: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

��

D – 30% SWELL

AcetonitrileCyclohexanen-HexaneFreon 113HFIP

C – 50% SWELL

Acetonem-Cresolo-ChlorophenolDimethyl Formaldehyde

A – 70-80% SWELL

Toluene TCBTHF p-XyleneChloroform CyclopentaneBenzene Pyridineo-Dichlorobenzene

Dimethyl AcetamideN-Methyl Pyrrolidone

DMSODioxane

�TABLE 1

B – 60% SWELL

Ethyl EtherMethylene ChlorideMethyl Ethyl KetoneCycloheptaneEthyl Acetate

Iso-Propanoln-Butyl AlcoholMethanol

Page 19: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

��

�����

����

��

�����

� ����

���������

��

�������

����

� ���

����

�� �

�����

����

� �

���� ���� �

������

���������� �

� ���

������

��

������!���

����"

���

�� ��

� ������ �

����"

�����

��

��

���

���

���� ���

� �

� �

��

����#

� ���

��

����

��� ��

�����

��� ��

�����

����

$ ���

� � � ���

� ����%

��%��

� � ���

��

�����"

��# �

��� �

��� ��

� !���

���

����"

���

"���������� ��� �

� ���

��� ���

�����

�&� �

&� �

SOLV

ENT

MIS

CIBI

LITY

TAB

LE���

����

��

��

���

�����

����

���

����

���

� �

���

����

��

���

��

��

���

����

���

��

����� �������� �y

��

���

��

� �

��

��

� ��

� ���

����

���

����

����

��� �

� ���

!� �

� "��

��#�

����

���

������

"��

���

����

�#�

�#$�%

�#$�%

� �� �

����

�� �

� ���

�#��

&�!

'�

���!

�#� (

����

)�*

+&��

)�,

���

� -�.

/.!

����

����

���

��

���

��

���

���

����

��

��

���

���

���

���

���

����

������

��

���

���

��

��

���

����

���

���

��

���

���

���

����

����

��

��

���

��

��

� �

���

����

�����

����

��

���

��

���

��

����

����

� ���

����

�����

��

��

���

��

� �

����

����

��!

��

���

��

���

��

���

���

����

�"��

��

��

��

���

���

���#

�$�

����

����

����

��

��

���

���

��

��$�

����

��!

����

���

��

��

��

���

���

��

$�!

����

� ��!

�!��

��

��

���

��

���

��

���

$�!

����

��%�

� �"�

� ��

��

��

���

�#

����

�$�

�"��

��

��

��

���

���

���

&���

���

���

��

� �

��

���

&���

����

����

��

��

��

���

��

�&��

��� &

����

���

���

��

���

'�(�

���

��

���

���

���

���

��'�

"���

��

��

��

���

���

���

�)

����

���

��

��

��

���

���

���

)��

����

����

����

&���

��

��

���

��

���

�)

����

��&�

����

*���

���

��

��

���

���

�+�

����

��

��

���

��

���

��

���

��+�

�(��

���

��

���

��

��

��%

��+�

�(��

���

��

��

��

��

���

����

%��+

��(�

� �&�

���

���

���

��

,����

����

� ��

���

��

��

��

���

����

�,�

����

��

���

��

���

���

���

�,�

����

����

����

���

��

��

��

��

���

-��

���

��

���

��

���

���

���

.���

��

��

���

��

���

���

���

���

��

����

��

�� ��

����

����

��

��

�� ��

����

����

���

��

�� ��

����

�����

���

�� �

�����

���

����

����

����

���

� ����

����

��

� ����

���

��

����������

�������

���

���

����

���

��

���

��

����

�� ��

�� �

���

���

����

����

���

.�����-����,����������������,������,��������� ��������%��+��(���&�����%��+��(�����

��+��(����+������)������&�����*������

)��������������&�����

)�������'�"���'�(�������&�����&����&������������&������$��"���$�!������/�� �"����

$�!����� ��!�!���

$�������!�������

�#�$��������������

�������"��������� ��!�������������������������������������������������������������������������������

TABL

E 2

Page 20: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

��

������������ � � ����������������������������SOLVENT COMPATIBILITY CHART FOR PHENOGEL GPC COLUMNS

�TABLE 3

����� ������������ ����������� ������ ���������� ���������������������

PHENOGEL PORE SIZE SUGGESTEDLINEAR & OPERATING

MOBILE PHASE SOLVENT ��� ���� ���� ���� ���� ���� ���� MIXED TEMPERATUREACETONE Y Y Y Y Y Y Y YBENZENE Y Y Y Y Y Y Y YCARBON TETRACHLORIDE Y Y Y Y Y Y Y YCHLOROFORM Y Y Y Y Y Y Y Y30% HFIP/CHLOROFORM Y Y Y Y Y Y Y YDIETHYL ETHER Y Y Y Y Y Y Y YDIMETHYLACETAMIDE (DMAC) Y* Y Y Y Y Y Y Y 60° CDIMETHYLFORMAMIDE (DMF) Y* Y Y Y Y Y Y Y 60° CDIOXANE Y Y Y Y Y Y Y YDMSO Y* Y Y Y Y Y Y Y 60° CETHYL ACETATE Y Y Y Y Y Y Y YHEXAFLUOROISOPROPANOL(HFIP) Y Y Y Y Y Y Y YHEXANE Y Y Y Y Y Y Y YM-CRESOL Y* Y Y Y Y Y Y Y 100° CMETHYL ETHYL KETONE Y Y Y Y Y Y Y YMETHYL CHLORIDE Y Y Y Y Y Y Y Y0-CHLOROPHENOL Y* Y Y Y Y Y Y Y 100° C0-DICHLOROBENZENE Y* Y Y Y Y Y Y Y 135° CQUINOLIN Y* Y Y Y Y Y Y Y 60° CTETRAHYDROFURAN Y Y Y Y Y Y Y YTOLUENE Y Y Y Y Y Y Y YTRICHLOROBENZENE Y* Y Y Y Y Y Y Y 135° CWATER N N N N N N N NXYLENE Y Y Y Y Y Y Y Y

Page 21: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

��

VII. PHENOGEL™ APPLICATIONS

Page 22: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

PHENOGEL™ APPLICATIONS

��

Page 23: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

PHENOGEL™ APPLICATIONS

��

Page 24: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

�� �� �� ����

�������� � ���� � ������� ����

5µ Phenogel-NB (Narrow Bore)

���������� ���������� ������� ��������

��� ��� � �� ������� ������� ������� ��� ��������� ��� � �� ���� �� ���� �� ���� �� ��� ��������� �� � ��� ������� ������� ������� ��� ��������� �� � ��� ������ ������ ������ ��� �������� �� � ���� ������� ������� ������� ��� ��������� ��� � ������ ������� ������� ������� ��� ��������� ��� � ������� ������� ������� ������� ��� �����

��������� ��������� ������� ��������

������ ������������� ������� ������� ������� ��� ������������� � ������������� ���� ���� ���� ���� ���� ���� ��� ������� ������� �� ���� � �� ���� � �� ���� � �� ��� ������ ������������ ����� ��� ����� ��� ����� ��� ��� ������� ������������ ���� ���� ���� ���� ���� ���� ��� �������� ���������� ��������� ��������� ��������� ��� �������� ��������� ��������� ��������� ��������� ��� �������� ������������� ��������� ��������� ��������� ��� �����

������ �! ����� �!

��� ��� � �� ������� ��� ��������� ��� � �� ���� �� ��� ��������� �� � ��� ������� ��� ��������� �� � ��� ������ ��� �������� �� � ���� ������� ��� ��������� ��� � ������ ������� ��� ��������� ��� � ������� ������� ��� �����

������ �! ����� �!

������ ��� � ������� ������� ��� ������������� � ��� � ������� ���� ���� ��� �������� ��� � ���� ��������� ��� �������� �� � ���� ��������� ��� �������� ��� � ������� ��������� ��� �����

5µ GPC Columns

�� �� �� ����

60 DAY RISK-FREE TRIAL OFFER ON PHENOGEL™ GPC COLUMNS

%�������������,����������� ��������,������������������ '����������� ������R�*���������*A@,*��,���������������� ������� �E=�����"�1������� ��������������������*A@,*��������������������,����������������� �� �����������(�+���������� ������������ ���������� ����"�&���S����������"

��

����� ���

������ ������������ ����

����� ���

VIII. PHENOGEL™ ORDERING INFORMATION

Page 25: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

��

Phenogel-UT, UltraTemp Columns (100-205°C)

���������������������������������������� !��"��"�����

��������� ��������� ��������

����� ��� � �� ����� �� ������ �� ��� ���������� �� � ��� �������� ��������� ��� �����

�� ���� �� ����

20µ GPC Columns

�� ��"������ �� #���$�%

���� ����� �������� ������������� ��������� �������� ������������� ���������� ����� �� ������ ��

���������� ��������

������&�' �!�����&�' �������()�( !�����()�( �*����&�'

��� ��� � �� �������� �������� �������� �������� �� ���������� ��� � � �������� �������� �������� �������� �� ���������� �� � ��� �������� �������� �������� �������� �� ���������� �� � ��� �������� �������� �������� �������� �� ���������� �� � ���� �������� �������� �������� �������� �� ���������� ��� � ������ ������� ������� ������� ������� �� ��������� �� � ������� �������� �������� �������� �������� �� ������

������&�' �!�����&�' ������()�( !�����()�( *����&�'

������ ��� � ������� �������� �������� �������� �������� �� ���������������� ��� � ������� �������� �������� �������� �������� �� ��������� ��� � ���� ��������� ��������� ��������� ��������� �� ��������� �� � ���� ��������� ��������� ��������� ��������� �� ��������� ��� � ������� ��������� ��������� ��������� ��������� �� ������

����� ���

������ ������������ ����

10µ GPC Columns

�� �� �� ����

�������� ���� ������ ����

�������� ���� ������ ����

Page 26: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

PRACTICAL HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

-�� ��� .�����(� *� ����� /0001 --2���

&������������� '������������� ������� �����������������������������������������?� ���� ���������������� �������� � ���������� ������ ��������������������������� ���������-����������������������� ������ ����"&����� ���������������� �������������������������"�/������������������������������������������� �� ����"/��������������� �� ������� ������ �����������-���� � �������������������������������������������������������������� ���������������������� �����?��� ���������� �"�&���� �������������������������������� � �����������������������"�/���� ����������� ������������������������ ��������� ��������� ����"

#���� '��� ��3�/4/3

HANDBOOK OF SIZE EXCLUSION CHROMATOGRAPHY

%�������������� ������� ����� .��� 50� %������ 6 /0071 87-���

&������������������������� �� � �������������� ���������������������������� ������ �����()*+������� ��� ���������������� ����������� ��������������� ��������� ������ ���������� ������� ������������ ����)*���������������������������������������� ���������������������������������������������������� ��������� ������������ ��"��)*������������������������ ������� ��������������������� ���������� ��������������������������������'������� ����������� ����������"�% ���������� �����$>���� ����������� ����������� ����������� � ����������������,���!��4����0�$��� ��������/���� ���������������������� ��� ���� ������ ��� ������ ��� �"

#���� '��� ��3�--85

Page 27: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i

'#9+�

6���� �!��� ������� �� ���� ���� �� ������ ������� �� ��� ����������� ��������� ��

��� ����1 ���������� ��� �������������� ��� �� �� 6� )������ ���

�������� �� ���������� ��� ������������� �������� ��������

Page 28: Gel Permeation user guide · methyl ethyl ketone y y yyyyy y methyl chloride y y yyyyy y 0-chlorophenol y* y y c yyyy° 0 y 0 1 e n e * y z cy y yyyyn ° e 5 y b 3 o 1 r o l h c i