Expo Bioqui

8/19/2019 Expo Bioqui

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Mitochondrial Myopathy wi

Succinate Dehydrogenase aAconitase Defciency

Abnormalities of Several Iron-Sulfur Proteins

PRESENTADO

MAURICIO LU

!IOMARA MO

ESTE#AN$ %A

C


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Presenta'i(n )el 'aso


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*losario

Immunoblot o ele'trotransferen'ia : es una t+'ni'a )e laboratorio ,ari)enti'ar ,rote.nas es,e'i'as sobre una muestra )etermina)a

Centros Fe-S: Son /ru,os sulfuro uni)os a 'entros )e entre 0 a 12ierros3 )esem,e4an un ,a,el im,ortante en el trans,orte )e ele'troneen mito'on)ria &a'en ,arte )e las ,rote.nas #e-S

Miopatías mitocondriales: Son )efe'tos aso'ia)os en ma5or me)i)aa los 'om,le6os I-I7 )e la 'a)ena res,iratoria3 ,ue)en ser a nivel/en+ti'o nu'lear o mito'on)rial ,or )ele''i(nes o muta'iones Pue)en'ausar ,roblemas en la im,orta'i(n3 re'ono'imiento3 ma)ura'i(n3'o)i'a'i(n o ensamble )e otras estru'turas

Homogenado y sobrenadante: son esta)os en la 'entrifu/a'i(n)iferen'ial3 el ,rimero es to)o la me8'la antes 'entrifu/arse3 el se/un)oes lo 9ue no se 2a ,re'i,ita)o3 es usa)o ,ara se,arar elementos


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Cl.ni'a:

Pa'iente )e sue'o )e 01 a4os3 'on enferme)a)autos(mi'a re'esiva3 )es'ubierto ini'ialmente enfamilias )el norte )e Sue'ia

Presenta el si/uiente 'ua)ro

Intolerancia severa al e6er'i'io

E,iso)ios )e inamaci!n mus'ular

Fatiga mus'ular3 debilidad3 )isnea 5 ,al,ita'iones'ar)ia'as


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E;men 2isto9u.mi'o reali8a)o a los 00a4os

De'ien'ia en las bras mus'ulares )e lasu'inato )es2i)ro/enasa

Presen'ia abun)ante )e li,i)os 5 /lu'o/eno

Presen'ia )e in'lusiones3 man'2as os'uras3 la

'uales 'orres,on)en a ves.'ulas )e 2ierro


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E;men bio9uimi'o

E,iso)ios )e mio/lobinuria 5 ,i/menturia

Baja absorción de oxigeno

Deterioro en la oi)a'i(n )e su'inato

Bajo consumo de oxigeno con sucinato como sustrato en rela'i(n al /lutama

De'ien'ia en la a'tivi)a) )e la su'inato )es2i)ro/enasa 5 su'inato: 'oi)ore)u'tasa< Com,le6os II = III>

?a6a a'tivi)a) )e la a'onitasa mito'on)rial

Me)iana )e'ien'ia )e NAD& )es2i)ro/enasa


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M+to)o

El 'ontrol )e bio,sia )e ,a'ientes se reali8o toman)o un numero )emuestras )e la si/uiente manera

1 ,a'ientes 9ue fueron someti)os a 'iru/.a

@ ,ersonas falle'i)as

,a'iente 'on mio/lobinuria

,a'iente 'on mio,at.a sin )ia/nosti'ar

Nin/uno )e los ,a'ientes ,resentaba evi)en'ia )e )isfun'ionesmito'on)riales


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Las ,re,ara'iones se reali8aronse/Bn los si/uientes 'riterios Las ,re,ara'iones 2omo/enate 5 su,ernatant se reai8ar(n ba6o los mis

Su'inato )es2i)ro/enasa


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Immunoblot ,ara el 'om,le6o III

• En el complejo III las

proteinas core y el

peptido VI fueron bajas

y citocromo fue normal


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Immunoblot ,ara el 'om,le6o III

En el complejo

usaron anticuer

la proteína R

presentando aus

su forma madmitocondria y ab

de precursor ta

citosol


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An;lisis )e los resulta)os

En el 'om,le6o II3 lo ,oli,+,ti)os:

G KD ,osee uniones 'ovalentes ,ara#AD

@ KD3 ,roteina #e-S 9ue 'om,romete lasu'inato )es2i)ro/enasa

JJ 5 @J enla8an la 'oen8ima " 5an'lan el 'om,le6o en la membrana


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Com,le6o III3 ,roteina RiesKe

- La ,resen'ia )el ,re'ursoren el 'itosol3 ,lanteo una

rela'i(n 'on la )e'ien'ia )ela su'inato )es2i)ro/rnasa

- Se )es'artan ,roblemas 'onla im,orta'i(n )e ,rote.nas

)ebi)o la ,resen'ia )emu'2as otras en el interior )e

la mito'on)ria


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"uien es elRes,onsable


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Las ,rote.nas #e-S 5 el &ierro son res,onsables

7es.'ulas en mito'on)ria

La a'onitasa mito'on)rial 5 la su'inato)es2i)ro/enasa3 Bni'as en8imas afe'ta)as )el'i'lo )e %rebs 5 Bni'as 'on 'entros #e-S

Los 'om,le6os I3 II 5 III 9ue ,oseen 'entros #e-S

fueron afe'ta)os El 'om,le6o I7 no ,osee 'entro #e-S3 su a'tivi)a)

fue normal

La )e'ien'ia )el ,oli,e,ti)o @J KD)el 'om,le6oII3 ,ue)e ser se/un)ario a ,rote.nas #e-S


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Com,le6o I

Posee @ subuni)a)es Las subuni)a)es GJ3 J30130@ KD

est;n aso'ia)as a 'entros #e-S

Solo la J 5 01 KD est;n afe'ta)as

Las subuni)a)es H 5 KD no son

#e-S ,ero ,resentas )e'ien'ias

Esto su/iere 9ue nos to)as las,roteinas #e-S se en'uentranafe'ta)as )e i/ual manera


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Pruebas 'on )iferentesor/anismos

En bovinos: la )e'ien'ia )e la subuni)a) !I )el 'om,le6o III es'onse'uen'ia )e la )e'ien'ia en la ,roteina RiesKe

En leva)uras: El ensamble )e la ,rote.na RiesKe 'on )e'ien'iaen el 'entro #e-S o'urre en el 'om,le6o III3 la subuni)a) I! ,ue)e'onvertirse en ,re'ursor )e la ,rote.na RiesKe en un solo ,aso

En ratas3 )ebi)o a la falta )e 2ierro se 2a en'ontra)o )isminu'i(

)el 'onteni)o 'riti'o )e los 'om,le6o I3 II 5 III en lu/ar )een8imas )e'ientes

Tambi+n en ratas3 'on )osis toi'as )e sulfato ferroso3 el ,rimerelemento afe'ta)o fue la mito'on)ria


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"ue me /enera el 2ierro

A'i)osis l;'ti'a3 el ,a'iente ,resenta )e'ien'ia )e 2ierrofun'ional3 ,ero ,osee ves.'ulas en el interior )e la mito'on)ria

El e'eso )e 2ierro ale6a los ele'trones en la 'a)ena res,iratoria,or me)io )e la re)u'tasa f+rri'a3 ,resente en la s.ntesis )el/ru,o &em

La reoi)a'i(n )e 2ierro a ion f+rri'o3 )isminu5e la a'tivi)a) )e l

'a)ena res,iratoria

Se e,li'ar.a 'on estos )atos:

Las 'risis metab(li'as

Rab)omiolisis3 libera'i(n en san/re )e elementos intra'elulares


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$ la a'onitasa

Tambi+n ,osee 'entro #e-S3 @#e-1S en su forma ina'tiva 5 1#e-1S en sforma a'tiva

Se 2a ,ro,uesto 9ue al fallar su 'entro a'tivo3 la a'onitasa se )e/ra)e

A)em;s )e 9ue re/ula la 'anti)a) )e 2ierro3 'omo se 2a )emostra)o'on la a'onitasa 'itosoli'a

La ro)ansa Se ,lantea la ,osiblemente ausen'ia )e una ,rote.na o fa'tor

ne'esario en la forma'i(n )e 'entros #e-S

Se 2a )emostra)o 9ue 6ue/a un ,a,el im,ortante en la forma'i(n )elos 'om,le6os I 5 II3 ,ero no es su'iente


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Con'lusiones

La )e'ien'ia )e 2ierro es el res,onsable )el mal metabolismo Esta afe'ta a los 'om,le6os I3 III 5 en ma5or me)i)a el II

No to)as las en8imas afe'ta)as ,oseen 'entros #e-S 5 no to)as las en8imas #e-Sse en'uentran afe'ta)as

Posiblemente una ,rote.na es la en'ar/a)a )e se'uestrar el 2ierro3 ,resente en lamito'on)ria3 la frataina

Se )es'arta la evalua'i(n em,are6a)a )e los 'om,le6os ,ara ,e9ue4as

anormali)a)es El aumento )e ,iruvato 5 la'tato se )a )ebi)o a la re/ula'i(n en 'i'lo )e %rebs

)ebi)o a la a'umula'i(n )e NAD&

El alto 'onsumo )e O0 'on /lutamato 'omo sustrato3 'onse'uente 'on lare/ula'i(n

La su'inato )es2i)ro/enasa se en'uentra afe'ta)a )ebi)o a 9ue ,osee 'entro #e-


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Bio!uímica" libro de texto con aplicaciones clínicas

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