UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
(Universidad del Per, DECANA DE AMRICA)FACULTAD DE FARMACIA Y
BIOQUMICA
EAP FARMACIA Y BIOQUMICA
ASIGNATURA: TOXICOLOGA
TEMA: DETERMINACINDE ETANOL POR MICRODIFUSIN POR
ESPECTROFOTOMETRASEGN FELDSTEIN Y KLENDSHOJINTEGRANTES:
Huertas Salas, Martin Alonso
10040127
Vargas Salcedo, Angel Emilio
10040126
Torres Pilco, Erik Gonzalo
09040131
Mallma Bazn, Walter Andrs
10040151
Nez Obregn, Carlos Jess
09040068
PROFESOR RESPONSABLE:
Mg. Jos Alfonso Apestegua Infantes
INTRODUCCIN
Elcompuesto qumicoetanol, conocido comoalcohol etlico, es un
alcoholque se presenta en condiciones normales depresinytemperatura
como un lquido incoloro e inflamable con un punto de ebullicin de
78,4C.
Mezclable conaguaen cualquier proporcin; a la concentracin de
95% en peso se forma unamezcla azeotrpica. Su frmula qumica esC
HYPERLINK "http://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3geno" \o
"Hidrgeno" H3-C
HYPERLINK "http://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3geno" \o
"Hidrgeno" H2-OH(C2H6O), principal producto de las bebidas
alcohlicascomo elvino(alrededor de un 13%), lacerveza(5%),
loslicores(hasta un 50%) o losaguardientes(hasta un 70%).
El etanol atemperaturaypresinambientes es un lquido incoloro y
voltil que est presente en diversas bebidas fermentadas. Desde la
antigedad se obtena el etanol porfermentacinanaerbicade una
disolucin con contenido enazcaresconlevaduray posteriordestilacin.
Dependiendo del gnero debebida alcohlicaque lo contenga, el etanol
aparece acompaado de distintassustancias qumicasque la dotan de
color, sabor, y olor, entre otras caractersticas.
Para obtener etanol libre de agua se aplica la destilacin
azeotrpica en una mezcla conbencenoociclohexano. De estas mezclas
se destila a temperaturas ms bajas el azetropo, formado por el
disolvente auxiliar con el agua, mientras que el etanol se queda
retenido. Otro mtodo de purificacin muy utilizado actualmente es
laabsorcin fsicamediante tamices moleculares. A escala de
laboratorio tambin se pueden utilizar desecantes como elmagnesio,
que reacciona con el agua formando hidrgenoyxido de magnesio.Adems
de usarse con fines culinarios (bebida alcohlica), el etanol se
utiliza ampliamente en muchos sectores industriales y en el sector
farmacutico, comoexcipientede algunosmedicamentosy cosmticos (es el
caso del alcohol antisptico 70 GL y en la elaboracin de
ambientadores y perfumes).
Es un buendisolvente, y puede utilizarse comoanticongelante.
Tambin es undesinfectante. Su mayor potencial bactericida se
obtiene a una concentracin de aproximadamente el 70%.
En cuanto a sus propiedades toxicolgicas el etanol acta sobre
los receptoresGABAde tipo A (GABAa) comomodulador alostrico
positivoaumentando el flujo de iones trasmembrana lo que induce a
un estado deinhibicin neuroqumica(efecto ralentizador). Produce
efectos similares a lasbenzodiacepinasy losbarbitricos, que actan
sobre el mismo receptor aunque en sitios distintos. Esta semejanza
incluye el potencial adictivo, que tambin es similar.
El etanol puede afectar alsistema nervioso central, provocando
estados de euforia, desinhibicin, mareos, somnolencia, confusin,
ilusiones (como ver doble o que todo se mueve de forma espontnea).
Al mismo tiempo, baja los reflejos. Con concentraciones ms altas
ralentiza los movimientos, impide la coordinacin correcta de los
miembros, prdida temporal de la visin, descargasemticas, etc. En
ciertos casos se produce un incremento en la irritabilidad del
sujeto intoxicado como tambin en la agresividad; en otra cierta
cantidad de individuos se ve afectada la zona que controla los
impulsos, volvindose impulsivamente descontrolados y frenticos.
Finalmente, conduce al coma y puede provocar muerte.
La resistencia al alcohol no parece aumentar en las personas
adultas, de mayor peso y de menor altura, mientras que los nios son
especialmente vulnerables. Se han comunicado casos de bebs que
murieron por intoxicacin debida a la inhalacin de vapores de etanol
tras haberles aplicado trapos impregnados de alcohol. La ingesta en
nios puede conducir a un retardo mental agravado o a un
subdesarrollo fsico y mental. Tambin se han realizado estudios que
demuestran que si las madres ingeran alcohol durante el embarazo,
sus hijos podan ser ms propensos a tener elsndrome de alcohlico
fetal.
Un mtodo de determinacin de la concentracin aproximada de etanol
en la sangre aprovecha el hecho de que en los pulmones se forma un
equilibrio que relaciona esta concentracin con la concentracin de
vapor de etanol en el aire espirado. Este aire se hace pasar por un
tubo donde se halla gel de silicio impregnado con una mezcla
dedicromatoy de cido sulfrico. El dicromato, de color rojo
anaranjado, oxida el etanol aacetaldehdoy es reducido, a su vez,
acromo(III), de color verde. La longitud de la zona que ha cambiado
de color indica la cantidad de etanol presente en el aire si se
hace pasar un determinado volumen por el tubo.
PARTE EXPERIMENTAL
1.1. OBJETIVOS:
Determinar la concentracin de alcohol etlico en la muestra
biolgica (sangre) mediante la tcnica espectrofotomtrica: micro
difusin del Feldstein y Klendshoj. Comprender el fundamento de la
difusin del alcohol de la muestra biolgica (sangre) hacia la mezcla
sulfocrmica, utilizando la cmara de Conway.
1.2. MATERIALES Pipetas
Buretas
Tubos de ensayo
Cmara de Conway
Muestra de sangre
1.3. EQUIPO Estufa
Campana extractora de gas
Espectrofotmetro UV visible
1.4. REACTIVOS K3CO3 10% Solucin sulfocrmica
k2Cr2O7 0,1% H2SO4 50%
Agua destilada
1.5. REACCIN DE CUANTIFICACIN Cuantificacin por microdifusin de
Feldstein y Klendshoy
Fundamento: Se produce la captacin y oxidacin del etanol hacia
acido actico, forzndose la remocin completa del primer compuesto al
cabo de un tiempo y temperatura previamente determinados, donde el
dicromato de color rojo naranja, oxida el etanol a acetaldehdo y es
redujo a su vez a cromo (III), de color verde, para luego poder ser
medida la absorbancia en un espectrofotmetro UV.
Tcnica operatoria
1. En la parte del compartimento externo de la cmara de Conway
se coloca 1 ml de sangre.
2. En el compartimento interno se aade 2ml de solucin
sulfocrmica.
3. Agregar una base oleosa de vaselina por el borde de la
cmara.
4. Agregar 1 ml de carbonato de potasio a la parte externa de la
cmara y tapar la cmara.
5. Llevar a la estufa a 50 por 30 minutos.
6. Retirar de la parte central 2ml y completar con agua
destilada hasta 2 ml si es necesario.
7. Tomar de esta nueva solucin una alcuota de 0,1 ml y llevarlo
a una fiola de 10ml y completar hasta el enrase con agua
destilada.
8. Leer en el espectrofotmetro a 450 nm.
Mecanismo de reaccin
Luego:
Acetaldehdo estableReaccin qumica balanceada
RESULTADO1. Clculo terico: Mtodo de Widman
2. Determinacin espectrofotomtrica
Se obtuvo una absorbancia de:
MP = 0.042
Por regresin lineal
Y = BX + A
Donde B = 0.015 y A = 0
[ OH ] = [ 0.050 - 0.042 ]
[ OH ] = 0.008
0.008 = 0.015X
X = 0.533 mg
0.533 mg ---------- 0.1 mL de SSC
X ---------- 1 mL de SSC
X = 5.33 mg OH
5.33 mg OH --------------------------------- 1 mL de sangre
X
--------------------------------- 1 L X = 5.33 g de OH/L de
sangreDISCUSINLa tasa de alcoholemia permitida en sangre es por
debajo de 0,5g/L. si tomamos este valor como referencia, esto
quiere decir que la muestra de nuestro paciente se encuentra con
los niveles ligeramente elevados de alcohol etlico. Durante aos los
estudios efectuados han demostrado que existe una relacin directa
entre la concentracin de alcohol en la sangre y algunos factores
que pueden alterar o dar falsos positivos, por ejemplo Petkovi
(2005 ) nos dice , que para poder diagnosticar a una persona con
intoxicacin leve, la concentracin de alcohol en sangre debe estar
entre 0,5-1 ,5g/L, es importante saber que estos valores van a
depender de la edad del sujeto, su historial de consumo de alcohol
y grado de desarrollo de tolerancia para el consumo de alcohol
,tambin otros factores como las bajas temperaturas pueden favorecer
la toxicidad del alcohol. As mismo, Campos (2005) manifiesta que la
concentracin de alcohol vara dependiendo del metabolismo de cada
persona y la cantidad de fluido que se encuentre en su organismo
,es as que una persona que se encuentre ligeramente deshidratada la
concentracin de alcohol en su sangre ser mucho ms elevada ,es as
que podra generar falsos positivos. Creemos que todos estos
factores pueden ser los agentes causales de que en los resultados
obtenidos con la muestra de la sangre resultaran positivos, adems
debemos tomar en cuenta que la muestra no fue tomada en el momento
exacto de consumo de alcohol.CONCLUSIONES A pesar de ser una droga
legal, el etanol contribuye a ms muertes en los jvenes que el
conjunto de todas las drogas ilegales.
El consumo excesivo de etanol es el responsable o contribuyente
de muchos accidentes de trfico, accidentes laborales, conductas
violentas, suicidios, accidentes por fuego y ahogamientos
La concentracin de alcohol en sangre se puede cuantificar por el
mtodo de espectrofotometra.
La concentracin de alcohol en sangre es 5.33 g/LBIBLIOGRAFA
1. Rafael Uribe Acevedo (Universidad de Antioquia). Alcoholes
[Internet]. Consultado: [12 de abril de 2014]. Disponible en: .2.
Etanol [Internet]. Consultado: [12 de abril de 2014]. Disponible
en:
http://www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/etanol.html.3.
Mtodos analticos comnmente utilizados en la investigacin del
etanol. [Internet]. Consultado: [12 de abril de 2014]. Disponible
en: < nalisisusc.blogspot.com>.4. Aragn, C.; Miquel, M.;
Correa, M.; Sanchis-Segura, C. Alcohol y metabolismo humano. Med.
Clin (Barc) 2002; 1 (14): 23-37.5. Fiorenza G. Gonzlez D. Prez A
Ridolfi A. Strobl A. Manual de procedimientos analticos
toxicolgicos para laboratorios de baja complejidad. Disponible en:
http://www.msal.gov.ar/images/stories/ministerio/intoxicaciones/laboratorios/manual-procedimientos-analiticos.pdf
ccc
